專利名稱：一種色釘菇多糖的提取方法及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及從色釘菇[Chroogomphus rutilus]中提取的多糖及其在抗運動病中的應用，屬于食品保健和藥物開發技術領域。
背景技術：
運動病是暈車、暈船、暈機和宇航病的總稱，癥狀上表現為頭昏、眩暈、惡心、嘔吐、 面色蒼白、出冷汗等一系列植物神經性反應。其誘因主要是異常的運動和低頻噪音使前庭、 聽覺和視覺傳入與儲存于中樞神經系統內的經驗信息相異，產生植物神經功能紊亂和感覺不適的癥狀。盡管該病癥對于一般人群只是感覺和精神上的不適，恢復后對健康、精神狀態及以后的工作并無多大影響，但對于乘車、船作戰的戰士、飛行員和航天員則有嚴重的危害。因為上述人員在乘坐相應的運輸工具中必須保持清醒的頭腦和應急能力，否則將有性命之憂和招致巨大的損失。當前預防和治療運動病的藥物主要有抗膽堿藥、抗組胺藥、擬交感藥、鈣拮抗劑、胃動劑等，其中東莨菪堿是目前防治運動病效果最好的。這些藥物中多數具有難以消除的副作用，如抗膽堿藥、抗組胺藥有抑制中樞神經系統活動，出現口干、嗜睡、 視力模糊、記憶力受損等不良反應；擬交感藥有成癮副作用；生姜中藥合劑可使胃運動過速；鈣離子拮抗劑強烈抑制前庭功能等。所以這些藥物均不能滿足航天員、飛行員和戰士抗運動病的需要。真菌多糖是一類活性高分子化合物，具有增強機體免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、降血糖、降血脂等多種功效。近年來的研究發現，向小鼠胃內灌入松茸，能明顯促進小鼠胃的排空；臨床上也證實，口服蜜環菌片能有效治療眩暈、惡心、嘔吐等癥狀。推測這種抑制眩暈、惡心、嘔吐的作用可能與真菌多糖有關。色釘菇(Chroogomphus rutilus)，又稱血紅鉚釘菇，俗稱紅蘑、肉蘑、松樹傘、松蘑等，在真菌分類上屬于擔子菌亞門層菌綱、傘菌目、鉚釘菇科。是針葉樹木重要的外生菌根真菌。色釘菇是中國向日本出口最多的食用真菌，也是烹制蘑菇清湯的主要原料。研究發現，蘑菇清湯能有效地預防空間運動病的發生，但其作用成分和機制、蘑菇清湯中對抗運動病的有效物質未曾見諸報道。
發明內容
本發明的目的是提供一種色釘菇多糖的提取方法。本發明的目的還在于提供一種色釘菇多糖在抗運動病中的應用。本發明的目的是這樣實現的本申請認為蘑菇清湯中對抗運動病的主要物質可能是真菌多糖，因為蘑菇的水相提取物中最多的是多糖。所以本申請人以大鼠為實驗動物，對色釘菇多糖的抗運動病作用進行了較深入的研究，結果表明該多糖有顯著抗運動病作用。具體的，本發明的內容包括一、色釘菇多糖的提取二、色釘菇多糖抗運動病效果的檢測實驗及其應用。本發明所說的色釘菇多糖的提取方法包括以下步驟
⑴熱水浸提以蒸餾水清洗采集到的色釘菇真菌子實體，洗滌三次，放入烘箱中，45°C烘干，將子實體粉碎、稱重，以水子實體=IOml Ig的加水比例于80°C水浴鍋中進行水浴加熱， 并攪拌，浸提時間10h，離心，取上清浸提液，回收離心后得到的子實體沉淀，再重復上述步驟2次，將3次所得的浸提液合并，濃縮至所得浸提液總體積的1/3 ；(2)乙醇沉淀將濃縮后的浸提液加入浸提液3倍體積的質量濃度為95%的乙醇，于4°C沉淀IOh 以上，沉淀物用無水乙醇洗滌數次，再加入少許去離子水溶解，然后真空冷凍干燥，即得色釘菇多糖。經計算，用此種方法提取所得色釘菇多糖的得率為6. 73%。本發明所說的色釘菇多糖在抗運動病中的應用通過以下實驗完成。以下是色釘菇多糖抗運動病效果實驗以SD大鼠為實驗動物，用偏離垂直軸旋轉刺激復制大鼠運動病模型，旋轉刺激前通過灌胃方式給予大鼠不同濃度該色釘菇多糖溶液，通過行為學觀察、糖精水厭惡實驗、曠場實驗檢測，以及血清中5-HT和胃動素含量的檢測，評價該多糖是否有防治運動病的作用。復制成功的運動病模型大鼠，在行為上表現為活動少，活動范圍小，行動遲緩，有轉圈行走現象，還表現出顫抖、豎毛、大小便失禁、過多的修飾活動等。在給予糖精水后進行旋轉刺激，使大鼠產生內臟不適癥狀，以建立對糖精水的厭惡性條件反射，使其飲用的糖精水顯著減少。運動病模型大鼠血清中的多種生物活性物質的含量會發生顯著變化，其中常用的判斷指標是5-HT和胃動素，5-HT水平會顯著升高，胃動素的水平會顯著下降。在旋轉刺激前給予各組大鼠不同劑量的色釘菇多糖，通過上述指標的測定來檢測色釘菇多糖是否有抗運動病作用。糖精水厭惡實驗、曠場實驗的行為學檢測①動物分組雄性SD大鼠，體重200_250g，購于河北醫科大學實驗動物中心。動物購入后隨機分為5組，按照實驗步驟進行適應飼養和實驗。表1動物分組
權利要求
1.一種色釘菇多糖的提取方法，其特征在于包括以下步驟(1)熱水浸提以蒸餾水清洗采集到的色釘菇真菌子實體，洗滌三次，放入烘箱中，45°C烘干，將子實體粉碎、稱重，以水子實體=IOml Ig的加水比例于80°C水浴鍋中進行水浴加熱，并攪拌，浸提時間為10h，離心，取上清浸提液，回收離心后得到的子實體沉淀，再重復上述步驟 2次，將3次所得的浸提液合并，濃縮至所得浸提液總體積的1/3 ；(2)乙醇沉淀將濃縮后的浸提液加入3倍體積的質量濃度為95%的乙醇，于4°C沉淀IOh以上，沉淀物用無水乙醇洗滌數次，再加入少許去離子水溶解，然后，真空冷凍干燥即得色釘菇多糖。
2.一種色釘菇多糖的應用，其特征在于用于制備抗運動病藥物。
全文摘要
本發明公開了一種具有抗運動病效果的色釘菇多糖的提取方法及其應用。該多糖是以色釘菇為原料，經水提醇沉法制備的。應用于運動病的防治，經行為學實驗及激素水平檢測，結果均顯示，胃內給予200mg/kg色釘菇多糖有很好的抗運動病效果。不但能顯著減輕內臟不適、大小便失禁、豎毛、震顫等運動病癥狀，還可以降低血清中5-HT水平、提高胃動素水平，最重要的是大鼠精神狀態良好，無精神萎靡和其他的副作用癥狀。表明200mg/kg色釘菇多糖是該多糖抗運動病較為理想的劑量。本發明為進一步研制高效、無毒副作用的抗運動病新藥提供了新的物質和參考劑量。
文檔編號A61K31/715GK102532341SQ201210035838
公開日2012年7月4日 申請日期2012年2月17日 優先權日2012年2月17日
發明者劉亞寧, 王宇辰, 王微, 王立安, 王艷芹, 管振龍 申請人:河北師范大學