專利名稱：新型鉑配合物及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及含鉬抗癌藥及氯原酸的研究，特別是涉及新型抗癌藥鉬配合物及其制備方法和用途。
背景技術：
癌癥已成為人類健康的主要威脅之一，且呈明顯上升趨勢，我國癌癥死亡率在城市中已占各種死因的首位，因而我國已把抗癌藥物的研究列為新藥開發的最重要的戰略性課題之一，癌癥在美國也已成為最主要的死亡因素。因此，研究新型具有高效、低毒、高選擇特性的抗癌藥是我們長期的目標和任務。自60年代末，順鉬抗癌活性的發現及臨床應用以來，盡管其毒性大及鉬配合物較昂貴，但由于其良好的療效，人們對于新型含鉬抗癌藥的研究仍然情有獨鐘，通過逐步創新提高，已發展到第三代。有資料表明，手性藥物已經占到整個藥物的70%，第一個手性鉬抗癌藥物奧沙利鉬已經應用臨床，在直腸癌方面發揮了巨大作用。白血病是一類常見的嚴重威脅人類健康的造血系統惡性腫瘤.目前，化療和造血干細胞移植是治療白血病的主要手段，但是，通過化療只能取得短暫緩解，而異基因造血干細胞移植治療白血病5年無病生存率僅為35% -50% .此外，因造血干細胞供體限制，只有部分患者能進行這一治療，而且還存在移植相關死亡和復發危險性.因此，尋找新的更有效抗白血病藥物仍然十分迫切和需要。氯原酸是手性化合物，是一種提取自中草藥的物質，具有廣泛的生物學效應，氯原酸鈉是一種氯原酸和鈉鹽的半合成小分子化合物，近期有研究顯示氯原酸可以誘導包括Bcr-Abl陽性的慢性粒細胞白血病(CML)原代細胞在內的 Bcr-Abl陽性細胞的凋亡，I. _20°C光保存的氯原酸鈉可以選擇性抑制bcr_abl陽性的CML 細胞系K562細胞的增殖.2. 4°C保存的氯原酸鈉對bcr-abl陽性的CML細胞系K562的增殖抑制作用增強，并且對bcr-abl陰性的Jurkat細胞亦具有增殖抑制作用.。為此，將氯原酸作為載體合成新型鉬抗癌藥物，能否顯著提高藥物對癌細胞的選擇性，能否對白血病細胞有靶向選擇性？這是我們研究的目的及意義所在。研究氯原酸與鉬形成鉬配合物，對于白血病細胞的抗癌活性有著積極的現實意義通過我們幾年的工作，成功地合成并鑒定了含氯原酸的鉬配合物。
發明內容
本發明的第一個目的是提供一種新的具有藥用價值的鉬配合物。本發明另一目的是提供一種前述化合物的制備方法。本發明目的之三是提供目的一所述化合物在治療癌癥藥物方面的用途。本發明目的所述的化合物名稱為(1S，3R，4R，5R) _3_ [ [3_ (3，4_ 二羥基苯基)-1_氧代-2-丙烯基]氧]-1，4，5-三羥基環己烷甲酸(反式-(-)-1，2_環己二胺)合鉬(II)鉬，其英文名稱為(IS,3R, 4R, 5R)~3-[[3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-l-oxo-2-propenyl]oxy]-I,4，5-trihydroxycycl(IR,2R)-(-)-1, 2-diamino eyeIohexanePlatinum(II)分子式PtC22H3ciN2O9分子量FW = 661，其化學結構式發明化合物的制備方法依次包括下列工藝步驟a. 二碘環己二胺鉬(或二氯環己二胺)與硝酸銀(或碳酸銀)避光反應。b，過濾沉淀，得到母液，將母液在水浴上加熱后加入氯原酸納，過濾沉淀得到目標化合物。前述的化合物制備方法可以在較寬松的條件下進行，其反應較為優選的參數范圍如下步驟a中二碘環己二胺鉬與硝酸銀避光反應。二碘環己二胺鉬與硝酸銀的摩爾比為 O. Olmmol比O. 02mmol，反應溫度40_50°C (閉光反應)，反應時間3_4小時。步驟b水浴溫度為70°C加入O. Olmmol氯原酸鈉，得到目標化合物在水中重結晶提純。發明方法中步驟a及b的化學反應式為發明人發現該配合物具有抑癌作用，特別在白血病方面，而且毒性低可以應用其治療癌癥。本發明所用原料的純度只要達到化學純以上即可，來源均可從市場購得。本發明的配合物具有一定的脂溶性，易為人體吸收，在體外實驗中對癌細胞有強烈的抑制作用，其初步毒性實驗較降，已示出良好的應用前景。
具體實施例方式下面通過實施例來進一步說明本發明。應該正確理解的是本發明的實施例中的方法僅僅是用于說明本發明，而不是對本發明的限制。
綠原酸% pH6-7
實施例I發明所述配合物及其制備稱取5. 7克環鉬，即二碘環己二胺鉬(或二氯環己二胺(O. Olmmol)，用少量純化水攪勻，稱取3. 40克硝酸銀(O. 02mmol)，溶解后在避光攪拌條件下加入到環鉬懸濁液中，補充純化水至100ml，在40 50°C反應約3. 5h，過濾AgI，得到淺黃色環鉬水解溶液。稱取綠原酸3. 54克,用少量純化水攪成懸濁液,稱取O. 4克氫氧化鈉,溶解后滴加到綠原酸懸濁液中至完全溶解，將溶液滴加到淺黃色環鉬水解溶液中，在室溫下用氫氧化鈉溶液調節pH在 6 7之間，反應約3小時后將得到的黃色固體濾除，先后用水、無水乙醇各洗2次后在常溫下干燥，得到3. 2克黃色粉末狀固體，產率約48%。元素分析分子式PtC22H3tlN2O9中C、N、H、Pt的計算值分別為C 39. 94 %, N
4.24%,H 4. 54%,Pt 29. 50% ；測量值為C39. 35%,N 4. 51%,H 4. 50%,Pt 29. 61%。FAB+-MS (m/z) :662 ([M+l]+，100% )。IR :0-H(3376)，N-H(3200)，C-H(2936，2864)，C = 0 (1620st)，Pt-N(483)， P-O (435)實施例2發明所述配合物的抗癌活性細胞株白血病乳腺肝癌肺癌結腸癌癌編號WangQKl2實驗方法I.接種細胞用含10%胎牛血清的培養液(DMEM或者RMPI1640)配成單個細胞懸液，以每孔5000-10000個細胞接種到96孔板，每孔體積100 μ 1，貼壁細胞提前12小時接種培養。2.加入待測化合物溶液(固定濃度40 μ M初篩，在該濃度對腫瘤細胞生長抑制在 50%附近的化合物設5個濃度進入梯度復篩)，每孔終體積200 μ 1，每種處理均設3個復孔。3.顯色37攝氏度培養48小時后，每孔加MTT溶液20 μ I。繼續孵育4小時，終止培養，吸棄孔內培養上清液，每孔加200 μ I的SDS溶液(10% )，過夜孵育(溫度37°C )， 使結晶物充分融解。4.比色選擇595nm波長，酶聯免疫檢測儀(Bio-Rad 680)讀取各孔光吸收值，記錄結果，以濃度為橫坐標，細胞存活率為縱坐標繪制細胞生長曲線，應用兩點法(Reed and Muench法)計算化合物的IC50值。白血病肝癌肺癌乳腺癌結腸癌化合物編號化合物名稱HL-60SMMC-7 721A-549MCF-7SW480WangQK12-27. 8713. 689. 4114.4117. 79陽性對照 DDP順鉑3.974. 968. 1910. 7811.56 結論按照化合物IC5tl < 10 μ g/mL即可認為對腫瘤細胞的增殖有明抑制作用的標準[新藥(西藥)臨床前研究指導原則編1993P137-139]，在所測試的濃度范圍內，樣品 WangQK12可認為它們對白血病、肺癌腫瘤細胞株的增殖有明顯抑制作用。
權利要求
1.一種鉬配合物，其特征在于其分子式為Pt(A) (B)，即PtC22H3ciN2O9，其分子量661，結構式為式中A =反式-1,2-環己二胺(IS, 2S) -(+) -1,2-環己二胺，其分子量114. 19,式中B =(IS, 3R, 4R, 5R) -3-[ [3-(3,4- _■輕基苯基)_1_ 氧代 _2-丙稀基]氧]-1,4, 5-二輕基環己烷甲酸。
2.一種制取權利要求I所述的鉬配合物的制備方法，依次包括下列工藝步驟a、將一定量的二碘環己二胺鉬或二氯環己二胺鉬與AgNO3或AgCO3反應時間3_4小時， 查無Ag+，Γ，后過濾，濾液在沸水浴中加熱后70°C加入氯原酸鈉，即刻沉淀出所述鉬配合物；b、將a步驟所得鉬配合物用純水重結晶提純。
3.根據權利要求2所述的鉬配合物制備方法，其特征步驟在于步驟a中所述二碘環己二胺鉬或二氯環己二胺鉬與AgNO3的摩爾比為O. Olmmol O. 02mmol，反應溫度40_50°C， 反應時間3-4小時，閉光反應，過濾所得濾液在沸水浴中加熱，水浴溫度為70°C，加入 O. Olmmol氯原酸鈉。
4.權利要求I所述鉬配合物在制備抗癌藥物或治療白血病藥物中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種新的結構式如下的鉑配合物，其分子式PtC22H30N2O9，分子量FW＝661。本發明還涉及化合物的制備方法，其關鍵的工藝步驟是二碘1，2環己二胺鉑(或二氯1，2環己二胺鉑)與AgNO3反應所得濾液在沸水浴中加入氯原酸鈉，得到該配合物。此外還涉及該配合物在治療癌癥中的應用。發明的配合物具有的抑癌作用，特別在白血病方面的療效。
文檔編號A61P35/02GK102603804SQ20121003029
公開日2012年7月25日 申請日期2012年2月10日 優先權日2012年2月10日
發明者何鍵, 彭娟, 普紹平, 李永年, 王慶昆 申請人:昆明貴研藥業有限公司