專利名稱：一種接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種抑菌避孕材料，具體涉及ー種接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料。
背景技術：
子宮頸炎anflammation of Cervix)是女性生殖系統最為常見的炎癥性疾病， 以細菌性陰道病原體感染為主要原因，其致病菌主要是淋病雙球菌、金黃葡萄球菌以及溶血性鏈球菌，其中淋球菌更是黏液膿性宮頸炎的主要病原體(Sarabeth B, Jennifer L, Devon j, et al. Cervicitis in Adolescents: Do We Know Correct Diagnosis ana Treatment Guidelines Journal of Pediatric and Adolescent Gynecology, 2010； 23(2) : 67)，此外與高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染也密切相關(Harald zur Hausen. HPV Today [Z/0L]. Newsletter on Human Papillomavirus. 2009)，已知 90% 以上宮頸癌患者伴有高危型 HPV 感染(LE J. Gynecology and Obstetrics. 7th ed. Beijing: People's Medical Publishing House, 2008)。該病在已婚或有性生活的婦女中發病率高達50%以上，是宮頸癌發病的高危因素之一(杜小麗.復方莪術油栓治療慢性宮頸炎.醫藥論壇雜志，2008; 29(15) 81-82)。目前，宮頸炎的治療主要有4種方法物理治療、藥物治療、免疫治療和手術治療， 其中藥物治療最為常用。重組人干擾素α加具有廣譜的抗病毒、抗腫瘤及免疫調節功能， 已批準適用于治療陰道病毒性感染引起的慢性宮頸炎(陳萍.奧平栓治療慢性宮頸炎42 例療效觀察.中國醫療前沿，2010; 5(4): 35; 47)、宮頸糜爛(丁書貴.奧平栓治療宮頸糜爛療效觀察.中原醫刊，2007; 34(18): 61-62)、陰道炎(胡東，王琛.奧平栓治療慢性宮頸炎陰道炎65例療效觀察.實用醫技雜志，2007; 14(30): 4161)，預防宮頸癌，有效率為90%以上(王燕嬌，莫秀瑛.慢性宮頸炎的治療研究進展.中國醫藥指南. 2011; 9(6): 50-51)。將抗病毒藥物以外用的方式應用于婦科，無耐藥性，使用方便，無明顯副反應，是近年藥物治療慢性宮頸炎比較滿意的藥物(羅賽群.微波聯合重組人干擾素 α-2a治療慢性宮頸炎臨床療效觀察.中國初級衛生保健.2010; 24(1): 91_92)。宮頸炎病患者通常不同程度地減少性生活，使用避孕套可以降低宮頸和外陰陰道 HPV 感染的風險(Winer R. L, Hughes J. P, Feng Q, et al. Condom use and the risk of genital human papillompirus infection in young women. New Engl, MED, 2006； 354(25):沈45.)。而一般安全套作用僅限于避孕，不能針對性地抑菌，所以一種有效的抑菌避孕套材料的研制尤為重要。關于避孕套材料方面的研究報道不多，目前報道的用于避孕套的材料有乳膠、聚氨酷、合成橡膠，能用于避孕套的材料很少，這與成熟的橡膠エ業和高速發展的高分子材料形成了鮮明的對比(陳國軍.避孕套材料的研究進展.中國計劃生育學雜志.2009; (3): 190-192)。自19世紀后期，第一種乳膠材料被開發出來，用其生產的安全套，比橡膠膜薄且軟，而到了上世紀三十年代，安全套的制造技術再次革新，液態乳膠取代了傳統的橡膠片，直到今天仍是安全套的基礎原料。乳膠(Latex)主要成分為聚異戊ニ烯，含量在90%以上， 它的結構式(CH2=C-CH=CH2)n,分子量在1(Γ180萬(陳國軍.避孕套材料的研究進展.中國計劃生育學雜志.2009; (3): 190-192)。上海名邦橡膠制品有限公司生產的乳膠安全套目前是全國銷量第一，性價比僅次于日本。該公司欲與本實驗室合作開發ー種新型的抗菌乳膠避孕材料，滿足國民需要，提高我國行業品牌、提高在國際市場的競爭力、利于擴大出口貿易、利于調整經濟結構。含藥物的避孕套在潤滑劑中加入藥物成分，用于避孕目的和防止性傳播疾病 (王昕，施燕平，朱雪濤，等.具藥天然膠乳橡膠避孕套的細胞毒性試驗.齊魯藥事，2005; (11): 677-678)。上世紀九十年代，ー種新型的聚氨酯材料由于具有強度高、 導熱性好、耐老化性好、舒適性好、不致敏性好等優點而受到廣泛的關注。2006年，我們實驗室發明了ー種納米級抗菌抗病毒聚氨酯避孕套(關燕清，彭長連，李岳川.一種納米級抗菌抗病毒避孕套.中國200610036660，
公開日2007年2月觀日)。該發明通過光化學固定技術將干擾素α接枝在材料上，這比將干擾素直接涂抹在材料上具有更好的殺菌效果，顯示出3倍的抑菌活性，從而賦予避孕套這一重要的節育工具更多的功能，甚至協助治療婦科炎癥。盡管聚氨酯材料的拉伸強度是橡膠膜的兩倍，但經過測試，OST實驗室報告及相關研究結果表明，其滑脫和破裂的比率，細菌透過率，避孕和性病屏蔽作用都與橡膠避孕套相似，且成本較高，主要用于女用避孕套(唐文豪，谷翊群，陳振文.男性節育方法研究回顧與展望.中國計劃生育學雜志.2002; 10(5): 312-314 ；Nicholas D. W, David Μ. H， Stefien B. Male condoms that break in use do so mostly oy a “blunt puncture，，mechanism. Contraception. 2008； 77(5): 360-365 ；Mags B，Jenni S， Zonke M， et al. Performance of the Reality polyurethane female condom and a synthetic latex prototype: a randomized crossover trial among South African women. Contraception. 2006; 73 (4) : 386-393)。由于上述這些原因，它在市場上的份額不大，所以目前國內仍普遍使用橡膠材料。早在上世紀90 年代初，由 Matsuda 等人(Sugawara Tj Matsuda T. 1994; Matsuda Tj Sugawara T. 1995 a ； Sugawara Tj Matsuda T. 1995 b ； Matsuda Tj Sugawara T. 1996)為代表的幾個研究小組首先提出光化學固定法，該法是所有的用于生物醫用高分子材料表面改性的方法中，生物相容性最理想、通用性最強、最簡單實用的ー種新方法。這種光化學固定方法及其固定的新的生物材料已經成為生物材料學家所關注和研究的焦點。
發明內容
本發明的目的在于根據現有技術中的上述不足，提供一種接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料。本發明通過以下技術方案實現上述目的
一種接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料，是由IFN-α接枝固定到乳膠避孕材料表面形成。上述接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的制備方法，是采用光化學固定法將IFN-α接枝固定到乳膠避孕材料表面上。CN 102532579 A光化學固定法是指利用紫外或可見光QOO-SOOnm)將具有特定功能的分子或組分偶聯到材料表面的方法，其原理是利用帶有雙官能團(一般來說，其ー為熱活性基團，另 ー為光活性基團)的光偶聯劑將生物活性化合物分子偶聯到材料表面來達到改性表面的目的。目前，光化學固定化技術已廣泛應用于各個領域。該技術可對有益的各種生物大分子表面進行固定化修飾，并接枝在生物相容性材料的表面，由于獨立的有機官能團的存在， 從而可以大大提高生物大分子的活性。光活性IFN-α通過疊氮基斷裂將IFN-α連接到(4_疊氮苯甲酸基)琥珀亞酰胺的熱活性基團上，芳香疊氮基團經過UV輻射激發，發生不可逆光分解，疊氮基分解為氮氣和活性能量極高的氮烯中間物，這種中間物將高分子中碳氫鍵打開，氮和碳發生親核反應，并奪去的氫與碳原子形成仲胺，結果使目的分子(IFN-α)以共價鍵接到高分子材料 (乳膠)表面上，如圖1。上述光化學固定法的具體步驟如下將IFN- α加入到含有琥珀亞酰胺的ニ甲基酰胺溶液中，在4°C攪拌反應48h，合成光活性IFN-α，將光活性IFN-α涂抹在乳膠避孕材料表面，避光冷凍干燥后，進行紫外照射。紫外照射時間優選20min，最好在距離15W紫外燈下2cm處進行照射。上述制備方法中，還包括合成光活性IFN-α進行離心純化的步驟，具體為采用超過濾膜(超濾離心管<Milipore Molecut II，10KNa>)，在4000 rpm轉速下間斷離心，以使合成的光活性IFN-α純度更高。本發明的接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料，具有較高的抑菌性能，除可以作為避孕套等避孕材料外，還可以制作成其他婦科用品如改良節育環、子宮帽等等。與現有技術相比，本發明具有以下有益效果
聚氨酯材料只能適合女性避孕工具的設計，在使用上受限，目前使用最廣泛的仍然是乳膠避孕套，市場上份額很大，因此對其性能改進具有重要意義。本發明針對更廣大的男性避孕工具使用群體，設計了接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料，IFN-α顆粒為納米級，均勻地排列在乳膠薄膜上，結果顯示其抑菌效果明顯優于直接涂抹IFN-α的乳膠材料，賦予避孕套這一重要的節育工具更多的功能，甚至協助治療婦科炎癥。而接枝IFN-a 的乳膠材料不僅可以作為避孕材料，還可以制作成為其他婦科用品，可以預見新型保健避孕材料可以配合傳統藥物共同預防甚至治療宮頸炎。本發明在乳膠生物材料的制備和表征過程中，分別進行了紫外、熒光光譜和紅外光譜的分析，數據十分系統和嚴謹，在材料表面的分析中，用原子力顯微鏡代替共聚焦顯微鏡(ニ維)進行材料表面的三維觀察，對材料的表面特征描述顧問為充分和詳實。在本發明的抗菌實驗設計中，沒有采用直接把生物材料(表面涂覆細菌)放在培養基里面培養的方式，而是采用改善后的間接培養方式，這樣便于更清楚地觀察細菌生長情況，從實施例可以看出，用生物材料攜帯細菌到一個新的培養基中后，在新的培養基里面15 小時表現不明顯，24小時后空白材料和游離藥物材料表面都重新長滿了細菌，而接枝干擾素的乳膠材料表面可以看到清晰干凈的表面，沒有細菌生長，因此本發明的避孕材料具有更強的抑菌效果，能夠得到更廣泛的應用。
圖1.光化學固定法制備接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料原理圖，其中A 為光活性IFN-α合成，B為接枝IFN-α的乳膠合成，C為實驗過程流程圖。圖2.光活性IFN-α的紅外光譜、紫外位移和熒光位移圖。圖3.場發射掃描電鏡下的無接枝的乳膠(A)以及接枝干擾素α的乳膠(B)表面形態的電鏡圖。圖4.掃描探針顯微鏡下的乳膠(A)和接枝干擾素α的乳膠(B)表面形態圖 (IOymXlOym)。圖5.接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料抑菌試驗流程圖。圖6.培養1 及24h后，無接枝乳膠、涂抹游離IFN-α的乳膠、接枝各種濃度的乳膠表面淋球菌粘附情況實驗結果。
具體實施例方式試劑及材料
奧平栓(干擾素_a2a)購自廣州寶芝林大藥房(武漢維奧制藥有限公司)；二甲基甲酰胺(DMF)，#-疊氮苯甲酸基)琥珀亞酰胺購自Sigma公司；異硫氰酸熒光素(FITC)購自威佳生物工程公司(AMRESC0公司產品)。M孔組織培養板(BI0FIL公司產品)。乳膠橡膠避孕套由上海名流公司提供。淋病雙球菌(標準株)由中山大學附屬第三醫院皮膚性病科實驗室提供；TM培養基購自江門凱林貿易有限公司。實驗儀器
78-1磁力攪拌器；HY-5調速多用振蕩器；超速冷凍離心機(Mikro22R)；德國Bruker EQUINOX 55傅里葉變換紅外光譜-紅外顯微鏡聯用儀；SHIMADZU CORPORATION紫外光譜儀 (島津UVM50)；德國 PerkinElmer 熒光光譜儀(LS55)；美國(Bioscope Catalyst, Veeco) 原子力顯微鏡；日本電子株式會社JSM-6330F場發射掃描電子顯微鏡；HV85高壓滅菌鍋； 無菌操作臺(AIRTECH BHC-1300)；美國THERMO公司微生物CO2培養箱。實施例1接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的制備 1.光活性IFN-α的制備與檢測
將 IFN- α (30 μ g, 0. 002 μ mol)加入 5ml 含有琥珀亞酰胺 04 μ g, 0. 14 μ mol)的ニ甲基酰胺DMF/PBS(pH=7.4，體積比為4:1)溶液中，在4°C的條件下(冰浴)攪拌反應48h。合成結束后，用超過濾膜(MiliporeMolecut II，IOk Na)，在4000rpm 的轉速下，間斷離心4h純化疊氮苯基衍生的IFN-α，加入PBS(-)溶液溶解，并調整至若干濃度，冷凍保存備用。由于疊氮基具有光吸收特征峰，所以我們對樣品作IR、UV和XPF分折。IR/UV/XPF 光譜圖由 Origin Pro 7· 5 進行繪圖分析，FESEM 圖片由 Image pro plus 6. 0 WifyMfi, AFM (Bioscope Catalyst, Veeco, USA) Nanoscope Analysis $a 件進行分析。IFN-α的紅外光譜圖(FT-IR)、紫外光譜圖(UV)和熒光光譜圖(XPF)見圖2。 IFN-α分子量約為1.9 X IO4左右，有不同亞型，由166/165個氨基酸組成，無糖基。IFN-α 分子的自由氨基可以和疊氮基對位芳香環上的活化羧酸基發生反應，脫去一分子水形成酰胺鍵。芳香疊氮化合物和賴氨酸的反應活性比其他氨基酸的反應活性高，所以可以估計酰胺鍵可能發生在賴氨酸的氨基上。圖2 (a, b, c)分別為光合成反應前和反應后的IFN-α的紅外光譜圖，查閱《分折化學手冊》(Dean J. Α.分析化學手冊.科學出版社，2003)及文獻(Abhi jit V. J， Chris G. G, Anna D. G. synthesis and properties of poly、aniiine-co_azidoaniline)· European Polymer Journal, 2007; 43(6): 2594ヮ603)，可見在2139CHT1 出現了疊氮基的紅外特征吸收峰，這表明IFN-α已經被疊氮基修飾。圖2(d，e, f)分別為光合成反應前和反應后的IFN-α以及疊氮苯甲酸的紫外光譜圖，可知疊氮苯甲酸在271nm左右出現了疊氮基的紫外特征吸收峰，IFN-α在 210nm處有吸收峰，而光活性IFN-α的吸收峰移動至221nm，有人認為這種紫外位移可能是由于酰胺鍵的形成改變了疊氮基中3個N的排列結構(Abhijit V. J, Chris G. G, Anna D. G. synthesis and properties of poly (aniline-co-azidoanilineハ European Polymer Journal, 2007; 43(6) : 2594-2603 ；Kang IK, Kim G. J, Kwon OH, et al. Co-culture of hepatocytes and fibroblasts by micropatterned immobilization of beta-galactose derivatives. Biomaterials 2004; 25(18) : 4225—4232)，這表明 IFN-α已經被疊氮基修飾。圖2(g，h, i)分別為光合成反應前和反應后的IFN-α以及疊氮苯甲酸的熒光光譜圖，利用熒光光譜儀分析得知，在341nm激發光下，疊氮苯甲酸的熒光吸收峰在400nm 處，IFN-α的熒光吸收峰出現在440nm左右，而光活性IFN-α的熒光吸收峰遷移至386nm 左右。對于這種熒光位移，有人認為這是由于微環境中的IFN-α使得疊氮基發生共軛改變 (Kang IK, Kim G. J, Kwon OH, et al. しo—culture οι hepatocytes and fibroblasts by micropatterned immobilization of beta-galactose derivatives. Biomaterials 2004; 25(18) : 4225-4232)。這再一次表明IFN-α已經被疊氮基修飾。FT-IR、UV、XPF檢測證明光活性IFN- α合成成功。2.光固定化乳膠材料的制備
將乳膠避孕套剪成直徑為IOmm的若干圓形片狀，放置于M孔組織培養板，之后作以下處理分別將光活性IFN- α以5種濃度(0. 01 μ g/mL, 0. 025 μ g/mL, 0. 05 μ g/mL, 0. 075yg/mL, 0. 1 μ g/mL)加入M孔組織培養板中，置于4°C冰箱中避光冷凍干燥后，在紫外燈(15W)下2cm處照射20min，利用疊氮基十分活潑的特性，將光活性IFN-α固定到乳膠材料上。光固定化后，用PBS(-)溶液(pH7.4)反復洗滌5次。3.光固定化乳膠材料上的IFN-a的形態表征(FESEM/AFM)
光固定化乳膠材料經過低溫干燥噴金后，轉移到場發射掃描電子顯微鏡(FESEM)下觀察IFN-a在乳膠材料表面形態和分布，并計算參數。用蒸餾水反復洗滌制備好的光固定化IFN- α乳膠材料5次后，置于4°C冰箱冷凍干燥后，轉移到原子力顯微鏡(AFM)下觀察 IFN-a在乳膠材料表面形態及蛋白質大小和高度。無接枝的乳膠㈧以及接枝干擾素α的乳膠表面形態見圖3，圖3的A，B分別為場發射掃描電鏡下觀察到的無接枝的乳膠和接枝IFN-a后的乳膠表面形態。可以看到，無接枝的乳膠表面光滑無物，而經過接枝固定后的可以看到IFN-a在乳膠表面形成ー層分布均勻有序的蛋白質層。使用Image pro plus 6. 0對電鏡圖片進行分析。計算機對圖中的60686個對象進行了掃描分析，符合IFN的典型顆粒有30515個，顆粒直徑介于223nm與998nm，平均直徑為572nm。一個視野內的單個分子顆粒數大約為51535個，顆粒團聚有9531處。而圖3A的無接枝乳膠表面非常光滑，表面原子數的增加導致了乳膠性質的急劇變化，這種表面原子數隨納米粒子尺寸減小而急劇增大后引起的性質稱為表面效應(Swarup K. M, Nillohit M, Anup M, et al. synthesis and cnaracterization of nanocrystal1 me zinc sulfide via zinc thiobenzoate—lutiaine single-source precursor. Inorganica Chimica Acta, 2011; 371(1): 20-26)。我們認為接枝IFN- α乳膠是納米級生物活性材料，將干擾素顆粒分散至納米級別，使表面原子數迅速増加，比表面積、表面積及表面結合能迅速増大。從化學角度來看，表面原子數的増加、原子配位的不足還有表面原子所處的鍵合狀態或鍵合環境與原來的干擾素分子和乳膠分子有很大的差異，常常處于不飽和狀態，導致納米材料具有極高的表面活性，很容易與其它原子結合，具備游離純干擾素所不具備的ー些其他特性，比如能夠在一定條件下光分解仲胺鍵逐步釋放干擾素。納米顆粒表現出來的高催化活性和高反應性，納米粒子易于團聚等均與此有關。圖4顯示了乳膠表面(A)和接枝IFN-α的乳膠表面(B)的原子力顯微圖像，掃描范圍為10 μ mX 10 μ m，粗糙度分別為53. 3 nm(A)和71. 3 nm(B)。接枝IFN-α的乳膠表面上IFN-α顆粒直徑介于200nm與lOOOnm，平均直徑約為600nm。與電鏡結果基本吻合， 證明IFN-α成功接枝在乳膠表面。實施例2接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的抑菌實驗
宮頸炎主要致病菌之一——淋病雙球菌可以在營養豐富的培養基以及適宜的環境下進行培養，生長成具有一定特征性的菌落。淋病雙球菌菌落典型形態為圓形、細小、凸起、 光滑、濕潤、半透明或灰白色菌落。菌落邊緣成花瓣狀、直徑為0. 5-lmm，易乳化，有黏性。本實施例通過將材料接枝面覆蓋在TM培養基上作用于淋病雙球菌，一段時間后觀察材料表面的淋病雙球菌菌落區別。本實驗流程圖見圖5。1.擴散法測試
參考日本抗菌劑的代表性評價法，借鑒食品和衛生防疫部門的細菌檢驗方法及《消毒技術規范》(消毒技術規范.中華人民共和國衛生部，2002)和國際標準IS0846 (EN ISO 846 Plastics - Evaluation of the action of micro organisms [R」(ISO, 1997)パ 以宮頸炎主要致病菌淋病雙球菌(N. gonorrhea)(標準株)作為試驗菌，拍照定性觀察接枝IFN-α的抑菌乳膠材料周圍及表面的細菌生長情況；采用TM (Thayer-Martin)選擇性培養基測定。2.淋病雙球菌的培養
將保存于脫脂牛奶中的淋病雙球菌接種于室溫平衡的TM培養基，置于36°C、5%C02、 >70%wet的微生物培養箱內，每24h傳代一次。3.測試抑菌能力
對所有實驗用品進行高溫高壓滅菌處理，用接種環挑取經TM培養基平板純化后的淋病雙球菌(約半環)置入無菌生理鹽水OmL)，用麥氏比濁管進行對比，稀釋為約IO5CFU/ mL左右的菌懸液，用棉拭子均勻涂布于培養基表面，進行培養。培養1 后，使用無菌鑷子將 5 個濃度(0.01 μ g/mL, 0. 025 μ g/mL, 0. 05 μ g/mL,0. 075yg/mL, 0. 1 μ g/mL)的材料接枝面朝下放置TM培養基表層，相當于模擬體內有菌環境，使材料上的IFN-α作用于淋病雙球菌。同時設置空白組(無接枝乳膠/細菌共培養) (圖6 a，c的上方材料)和游離組(涂抹0.25 μ g/mL游離AzPhIFN-α的乳膠/細菌共培養)(圖6 a，c的下方材料)，而實驗組(5組)接枝IFN- α (5種濃度)乳膠分別與細菌共培養(圖6 b，d上的材料)。作用1 后，將粘附有淋球菌的各組材料轉移至新的TM培養基，接枝面朝上，并在材料表面涂抹ー層培養基，給予淋球菌再生長環境，重新培養15h(如圖6 a, b)及Mh(如圖6 c，d)后，拍照觀察各組材料表面菌落情況。4.實驗結果
抑菌實驗結果見圖6，培養1 后，對照組和實驗組中各種材料表面及周圍菌落生長情況無明顯差異；培養24h后，對照組中無接枝乳膠以及直接涂抹游離IFN-α的乳膠表面覆滿淋球菌。而實驗組中接枝各種濃度的乳膠表面并沒有像無接枝乳膠ー樣被菌覆蓋，也不像直接涂抹游離IFN-α的乳膠ー樣周圍有明顯ー圏。5.討論
宮頸糜爛是女性生殖系統ー種慢性炎癥性疾病，發病機理與病毒密切相關，長期的宮頸炎可誘發宮頸癌。奧平栓具有抗病毒和調節機體免疫功能的作用，是經陰道給藥直接作用于病變部位及鄰近的正常組織細胞，作用機理主要有(1)抗病毒干擾素-α分子與細胞相互作用，使干擾素分子與靶細胞表面上的受體相結合，使細胞膜發生變化，進而激活細胞內抗病毒蛋白基因而指導合成抗病毒蛋白，由抗病毒蛋白發揮抗病毒作用，使靶細胞處于抗病毒狀態。(2)免疫調節調節特異性免疫功能，增加吞噬細胞的吞噬作用，提高NK細胞、K細胞的殺傷活性，誘導內源性干擾素的產生。( 抑制其他微生物(鄭玉鳳鄒紅梅. 奧平栓治療宮頸糜爛臨床分析.中華中西醫雜志，2004; 5(11):64-68). (4)抗腫瘤。 (5)激素樣作用干擾素_α還能降低婦女患者體內血清中的雌ニ醇和孕酮水平，使宮頸分泌物減少，此即其改善臨床癥狀較糜爛面愈合為快的原因。經臨床觀察(李艷榮，趙西俠，王國慶.宮頸癌隨診患者HPV陽性奧平栓置放后的療效觀察.Modern oncology, 2011; 19(2) 340-341 )，奧平栓治療宮頸糜爛的效果與其分類關系密切，糜爛面積越小，痊愈率越高；對單純型糜爛顯著優于顆粒型及乳頭型， 顆粒型優于乳頭型。總之，無論哪種類型宮頸糜爛，奧平栓均具有顯著改善癥狀及陰道清潔的作用。現行市場上有含其他抗生素的避孕套，用來抑制淋球菌等病原體，但使用表面直接涂有添加劑的避孕套時，部分添加劑(如滑石粉)可能在性交中通過女性陰道進入其腹腔，并可能造成慢性損害(范雅文，黃鴻新.天然膠乳橡膠避孕套質量檢驗和標準分析. 中國醫療器械信息，2010; 16(3): 51-54)0本發明將IFN-α固定化在乳膠避孕材料上， 結果顯示其抑菌效果明顯優于直接涂抹IFN-α的乳膠材料，賦予避孕套這一重要的節育工具更多的功能，甚至協助治療婦科炎癥。而接枝IFN-α的乳膠材料不僅可以作為避孕材料，也可以制作成為其他婦科用品，如改良節育環的設計，子宮帽等等，可以預見新型保健避孕材料可以配合傳統藥物共同預防甚至治療宮頸炎。6.結論
IFN-α顆粒為納米級，均勻地排列在乳膠薄膜上。接枝IFN-α的乳膠材料能長效并集
9中抑制導致宮頸炎的主要微生物——淋病雙球菌。
權利要求
1.一種接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料，其特征在于由IFN-α接枝固定到乳膠避孕材料表面形成。
2.權利要求1所述接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的制備方法，其特征在于采用光化學固定法，將IFN-α接枝固定到乳膠避孕材料表面上。
3.根據權利要求2所述接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的制備方法，其特征在于具體步驟如下將IFN-α加入到含有Λ/-琥珀亞酰胺的ニ甲基酰胺溶液中，在4°C攪拌反應48h，合成光活性IFN-α，將光活性IFN-α涂抹在乳膠避孕材料表面，避光冷凍干燥后， 紫外照射。
4.根據權利要求3所述接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的制備方法，其特征在于合成光活性IFN-α后，還包括對合成光活性IFN-α進行離心純化的步驟，具體為采用超過濾膜，在4000 rpm轉速下間斷離心。
5.根據權利要求3所述接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的制備方法，其特征在于所述紫外照射時間為20min。
6.根據權利要求5所述接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料的制備方法，其特征在于紫外照射為在距離15W紫外燈下2cm處進行照射。
全文摘要
本發明公開了一種接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料，該材料是由IFN-α接枝固定到乳膠避孕材料表面形成的。本發明還公開了該材料的制備方法，是采用光化學固定法，具體步驟為將IFN-α加入到含有N-琥珀亞酰胺的二甲基酰胺溶液中，在4℃攪拌反應48h，合成光活性IFN-α，將光活性IFN-α涂抹在乳膠避孕材料表面，避光冷凍干燥后，紫外照射。本發明的接枝納米級IFN-α的抑菌乳膠避孕材料，IFN-α顆粒為納米級，均勻地排列在乳膠薄膜上，抑菌效果明顯優于直接涂抹IFN-α的乳膠材料，接枝IFN-α的乳膠材料不僅可以作為避孕材料，還可以制作成為其他婦科用品，可以配合傳統藥物共同預防甚至治療宮頸炎。
文檔編號A61F6/04GK102532579SQ201210006709
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月11日 優先權日2012年1月11日
發明者關燕清, 劉俊明, 張琳 申請人:華南師范大學