專利名稱：用于治療用途的ccn3肽以及其類似物的制作方法
用于治療用途的CCN3肽以及其類似物相關申請的交叉引用本申請要求于2010年4月2日提交的美國臨時專利申請序列號61/341，694的優先權，通過引用將其全文結合在此并成為文中的一部分。聯邦資助的研究或進展不適用。
背景技術：
技術領域
本發明披露了 CCN3在與CCN2的過度表達相關聯的疾病中的作用，這類疾病包括但不限于纖維化、傷口愈合以及癌癥。更具體地，本發明披露了被設計用來發揮全長CCN3蛋白功能的CCN3肽以及類似物，用于獲得增強的抗纖維化活性由此阻止纖維化和/或瘢痕發展，并且用于治療癌癥以及其他疾病過程(其中CCN3和CCN2是重要的)。這些分離的和純化的、或合成的CCN3肽以及特定的類似物在通過調節CCN2、CCN3以及其他CCN相關蛋白、連同膠原和其他細胞外基質蛋白的表達和/或活性來預防和/或治療疾病中是潛在有用的。CCN基因和蛋白質家族目前CCN基因家族由六個獨特成員組成，這些成員編碼參與基本生物過程的蛋白質，這些基本生物過程例如細胞增殖、附著、遷移、胚胎發育、分化、傷口愈合、血管發生、以及一些包括纖維化和腫瘤發生的病狀。由CCN基因家族的成員編碼的蛋白質主要是30-40kDa的蛋白質并且極其富含半胱氨酸(按質量計10% ) (Perbal B, NOV以及CCN基因家族結構與功能問題。《分子病理學》54 :57-79，2001。(Perbal B.，NOV and the CCNfamily of genes structuraland functional issues. Molecular Pathology 54:57—79，2001))。最近，已經報道了某些形式的CCN蛋白(包括CCN3)是在35_55kDa范圍之內。它們被命名為富含半胱氨酸的61(CYR-61)蛋白、結締組織生長因子(CTGF)蛋白、腎母細胞瘤過度表達(NOV)蛋白、Wnt誘導分泌蛋白-I (WISP-I)、Wnt誘導分泌蛋白-2 (WISP-2)、以及fct誘導分泌蛋白-3(WISP-3)。最近，已經提出了對此家族的基因和蛋白質的新的命名法(見表I)。表I :提出的名稱以及目如和以如用于CCN家族的基因和蛋白質的名稱
權利要求
1.一種用于治療對其有需要的受試者的CCN3肽，該CCN3肽具有被鑒定為CCNp37、CCNp38 (人類)、CCNp38 (小鼠)、半胱氨酸取代的CCNp37、半胱氨酸取代的CCNp38 (人類)或半胱氨酸取代的CCNp38(小鼠)的氨基酸序列。
2.如權利要求I所述的CCN3肽，其中該半胱氨酸取代的CCNp37包括在其中半胱氨酸氨基酸被選自下組的一種氨基酸取代的CCNp37序列，該組由以下各項組成絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、S-甲基化半胱氨酸或它們的組合。
3.如權利要求I所述的CCN3肽，其中該半胱氨酸取代的CCNp37包含在其中半胱氨酸氨基酸被絲氨酸取代的CCNp37序列。
4.如權利要求I所述的CCN3肽，其中該半胱氨酸取代的CCNp38(人)包括在其中半胱氨酸氨基酸被選自下組的一種氨基酸取代的CCNp38(人)序列，該組由以下各項組成絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、S-甲基化半胱氨酸或它們的組合。
5.如權利要求I所述的CCN3肽，其中該半胱氨酸取代的CCNp38(人)包括在其中半胱氨酸氨基酸被絲氨酸取代的CCNp38 (人)序列。
6.如權利要求I所述的CCN3肽，其中該半胱氨酸取代的CCNp38(小鼠)包括在其中半胱氨酸氨基酸被選自下組的一種氨基酸取代的CCNp38(小鼠)序列，該組由以下各項組成絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、S-甲基化半胱氨酸或它們的組合。
7.如權利要求I所述的CCN3肽，其中該半胱氨酸取代的CCNp38(小鼠)包括在其中半胱氨酸氨基酸被絲氨酸取代的CCNp38(小鼠)序列。
8.如權利要求I所述的CCN3肽，進一步包括一種干細胞制劑，該干細胞制劑包含該CCN3 肽。
9.一種用于治療或預防在人類受試者中的病狀(pathology)的方法，該病狀與受試者體內細胞外基質分子的過度積累、周轉失調、或組成改變相關聯，該方法包括 將一個有效量的CCN3肽施用于受試者，該CCN3肽具有被鑒定為CCNp37、CCNp38 (人)、CCNp38 (小鼠)、半胱氨酸取代的CCNp37、半胱氨酸取代的CCNp38 (人)或半胱氨酸取代的CCNp38 (小鼠)的氨基酸序列。
10.如權利要求9所述的方法，其中該病狀是選自下組，該組由以下各項組成瘢痕形成、纖維化、硬化、動脈粥樣硬化、骨病、腎性骨營養不良、骨軟骨發育不良、纖維性骨炎、破骨細胞生成疾病(osteoclastogenesis disease)、血管阻力、血管|丐化、腫瘤發生、癌細胞生長、以及細胞外基質失調。
11.如權利要求9所述的方法，其中該病狀是繼發于以下各項TGF-β的產生/分泌或活性的增加、傷口愈合、慢性腎臟疾病、腎小球內高壓、癌細胞生長、糖尿病、高血糖癥、高血壓、腎臟增生性疾病(renal proliferataive disease)、細胞外基質失調病或結締組織病。
12.如權利要求9所述的方法，其中該纖維化與能變得纖維化的任何器官相關，該任何器官包括腎、心、肝、肺、脈管系統、宮頸、眼、牙齦、皮膚、腦以及腹膜。
13.如權利要求9所述的方法，其中該施用步驟包括通過一種選自下組的給藥途徑將CCN3肽遞送至人類受試者，該組由以下各項組成靜脈內、肌內、鼻、局部、陰道、肛門、經皮、吸入、口服、頰、腹膜內、骨內以及它們的組合。
14.如權利要求13所述的方法，其中該經皮給藥途徑包括透皮貼劑或經皮電泳。
15.如權利要求9所述的方法，其中該CCN3肽是用載體分子修飾的。
16.如權利要求15所述的方法，其中該載體分子選自下組，該組由以下各項組成聚乙二醇(PEG)、乙二醇組(glycol groups)、蛋白質、血清蛋白。
17.如權利要求9所述的方法進一步包括修飾CCN3肽的步驟以提高它的穩定性、保質期、體內半衰期、靶向性，或促進它附著于一種感興趣的細胞、或進入該感興趣的細胞。
18.如權利要求9所述的方法，其中該半胱氨酸取代的CCNp37包括在其中半胱氨酸氨基酸被選自下組的一種氨基酸取代的CCNp37序列，該組由以下各項組成絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、S-甲基化半胱氨酸或它們的組合。
19.如權利要求9所述的方法，其中該半胱氨酸取代的CCNp37包括在其中半胱氨酸氨基酸被絲氨酸取代的CCNp37序列。
20.如權利要求9所述的方法，其中該半胱氨酸取代的CCNp38(人)包括在其中半胱氨酸氨基酸被選自下組的一種氨基酸取代的CCNp38(人)序列，該組由以下各項組成絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、S-甲基化半胱氨酸或它們的組合。
21.如權利要求9所述的方法，其中該半胱氨酸取代的CCNp38(人)包括在其中半胱氨酸氨基酸被絲氨酸取代的CCNp38 (人)序列。
22.如權利要求9所述的方法，其中該半胱氨酸取代的CCNp38(小鼠)包括在其中半胱氨酸氨基酸被選自下組的一種氨基酸取代的CCNp38(小鼠)序列，該組由以下各項組成絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、S-甲基化半胱氨酸或它們的組合。
23.如權利要求9所述的CCN3肽，其中該半胱氨酸取代的CCNp38(小鼠)包括在其中半胱氨酸氨基酸被絲氨酸取代的CCNp38(小鼠)序列。
24.如權利要求9所述的方法，進一步包括將該CCN3肽添加到一種含有干細胞的制劑中。
25.一種用于形成用于治療在人類受試者中與受試者體內的細胞外基質分子的過度積累、周轉失調、或組成改變相關聯的疾病的溶液的藥劑盒，該藥劑盒包括 一個小瓶，其容納一種CCN3肽，該CCN3肽具有被鑒定為CCNp37、CCNp38 (人)、CCNp38 (小鼠)、半胱氨酸取代的CCNp37、半胱氨酸取代的CCNp38 (人)或半胱氨酸取代的CCNp38 (小鼠)的氨基酸序列；以及 一個標簽，其描述該CCN3肽的用途。
26.如權利要求25所述的藥劑盒，其中該CCN3肽是凍干的并且該藥劑盒進一步包括一個含有用于復原該凍干CCN3肽的稀釋劑的小瓶。
27.如權利要求25所述的藥劑盒，其中該CCN3肽是在一種液體制劑中。
28.如權利要求25所述的藥劑盒，進一步包括一種用于將該CCN3肽遞送至對其有需要的人類受試者的裝置。
全文摘要
本發明提供了一種用于治療對其有需要的受試者的CCN3模擬肽，該CCN3肽具有被鑒定為CCNp37、CCNp38(人類)、CCNp38(小鼠)、半胱氨酸取代的CCNp37、半胱氨酸取代的CCNp38(人類)或半胱氨酸取代的CCNp38(小鼠)的氨基酸序列。
文檔編號A61P35/00GK102947326SQ201180026057
公開日2013年2月27日 申請日期2011年4月4日 優先權日2010年4月2日
發明者布魯斯·里澤 申請人:羅莎琳德富蘭克林大學醫學與科學院