專利名稱：無定形羅紅霉素組合物的制作方法
無定形羅紅霉素組合物發明簡介和背景本發明涉及大環內酯類組合物。更具體地說，本發明涉及一種增加3R，4S, 5S, 6R,7R, 9R, 11S, 12R, 13S, 14R_6_[(2S，3R, 4S, 6R)_4_ 二甲氨基 _3_ 羥基-6-甲基惡燒 _2_ 基]氧基-14-乙基-7，12，13-三羥基-4-[(2R，4R, 5S，6S)-5-羥基-4-甲氧基_4，6-二甲基》惡燒-2-基]氧基-10-(2-甲氧基乙氧基甲氧基亞氛基)_3，5, 7, 9, 11, 13-六甲基-1-氧雜環十四烷-2-酮或羅紅霉素的溶解度的方法。本發明還涉及羅紅霉素的新的多晶型(III型)。羅紅霉素是14元環的大環內酯類抗生素，其在組成、化學結構(半合成)和作用機理方面非常類似于紅霉素。羅紅霉素目前可以以兩種形式獲得，即無水和一水合形式。羅紅霉素表現出對抗某些性傳播疾病；上呼吸道和下呼吸道感染；哮喘；牙 齦感染，如齦炎；以及與胃和腸潰瘍有關的細菌感染的活性。由于其對抗隱孢子蟲屬(Cryptosporidium spp·)、鳥分枝桿菌(Mycobacterium avium)復合物、卡氏肺抱子蟲(Pneumocystiscarinii)和鼠弓形蟲(Toxoplasma gondii)的活性，羅紅霉素還被視為選擇用于治療發生在HIV/AIDS患者中的機會性感染的藥物。與羅紅霉素有關的缺點在于它是疏水性分子，因為它沒有游離的羥基，并且因此水溶性差以及在酸性環境中不穩定。與羅紅霉素有關的進一步的缺點在于它的不良水溶性和在酸性環境中的不穩定性導致其吸收和生物利用度降低。羅紅霉素的再一種缺點是所述降低的吸收和生物利用度需要給予相對大量的羅紅霉素以達到治療效果。與使用相對大量的羅紅霉素有關的缺點在于潛在地增加了與該活性成分有關的副作用。與使用相對大量的羅紅霉素有關的更進一步的缺點在于增加了羅紅霉素劑型的生產和制造成本,從而增加了治療成本。發明目的因此，本發明的目的是提供羅紅霉素的新的多晶型，III型。本發明的另一目的是提供用于增加羅紅霉素溶解度的制備方法。本發明的再一目的是提供依照所述方法制備的藥物，采用所述方法可以克服前述缺點或至少使前述缺點最小化。發明概述根據本發明的第一方面，提供了包含羅紅霉素無定形形式(III型)的組合物。相對于羅紅霉素原料的紅外光譜在3577. 15、3526. 03、3465. 27和3276. 24cm_1處顯示峰，羅紅霉素無定形形式(III型)的紅外光譜在3577. 15,3526. 03,3465. 27和3276. 24cm1處不顯示峰。羅紅霉素無定形形式(III型)可以顯示基本上如圖4中所示的紅外光譜。相對于無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素，羅紅霉素無定形形式(III型)在乙酸鹽緩沖液(pH 4.5)中可以具有至少50%，優選至少150%增加的溶解度。
相對于無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素，羅紅霉素無定形形式(III型)在磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)中可以具有至少50%，優選至少100%的增加的溶解度。相對于無水和一水合羅紅霉素，羅紅霉素無定形形式(III型)在水中可以具有至少50%，優選至少150%的增加的溶解度。根據本發明的第二方面，提供了一種增加羅紅霉素溶解度的方法，它包括如下步驟提供選自無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素的羅紅霉素；將所述羅紅霉素溶于有機溶劑中；使所述有機溶劑蒸發以致使所述羅紅霉素成為晶體形式；以及使所述晶體羅紅霉素去溶劑化，以致使所述羅紅霉素成為羅紅霉素無定形形式(III型)。所述有機溶劑可以選自1，4- 二惡燒、I- 丁醇、I-丙醇、2- 丁醇、2-丙醇、乙酸、丙酮、乙腈、苯、氯仿、二氯甲烷、乙醚、二甲基甲酰胺、乙醇、乙酸乙酯、庚醇、己烷、己醇、均三甲苯、甲醇、辛醇、戊醇、石油醚、丙酸、四氫呋喃和甲苯。所述有機溶劑優選是氯仿。將羅紅霉素溶于有機溶劑中的步驟包括制備羅紅霉素在所述有機溶劑中的過飽 和溶液的進一步的步驟。根據本發明的第三方面，提供了從無水羅紅霉素或一水合羅紅霉素依照本發明的第二方面的方法制備的羅紅霉素的無定形形式(III型)。根據本發明的第四方面，提供了根據本發明的第二方面制備的藥物與至少一種惰性的藥學上可接受的載體或稀釋劑一起在劑型中的用途，所述劑型選自片劑、膠囊、散劑、溶液、糖漿、混懸劑、推注注射劑、滴注注射劑、用于重構的散劑、軟膏劑、霜劑、凝膠劑、洗劑、噴霧劑、灌腸劑、沖洗劑、陰道栓劑、透皮貼劑、皮膚貼劑和錠劑。根據本發明的第五方面，提供了一種治療患有選自下組病況的任意一種或多種的患者的方法性傳播疾病、上呼吸道和下呼吸道感染、哮喘、牙齦感染、與胃和腸潰瘍有關的細菌感染以及與免疫缺陷病況有關的機會性感染，所述方法包括給予該患者藥學上有效量的依照本發明第二方面的方法制備的羅紅霉素無定形多晶型形式(III型)的步驟。根據本發明的第六方面，提供了藥學上有效量的依照本發明第二方面的方法制備的羅紅霉素無定形形式(III型)在治療患有選自下組病況的任意一種或多種的患者的方法中的用途性傳播疾病、上呼吸道和下呼吸道感染、哮喘、牙齦感染、與胃和腸潰瘍有關的細菌感染以及與免疫缺陷病況有關的機會性感染。根據本發明的第七方面，提供了藥學上有效量的依照本發明第二方面的方法制備的羅紅霉素無定形形式(III型)在制備用于治療患有選自下組病況的任意一種或多種的患者的藥物的方法中的用途性傳播疾病、上呼吸道和下呼吸道感染、哮喘、牙齦感染、與胃和腸潰瘍有關的細菌感染以及與免疫缺陷病況有關的機會性感染。附圖簡述現在通過僅為非限制性的實施例，參照附圖進一步描述本發明，其中圖I和2 :示出了對比羅紅霉素一水合原料(圖I)與采用根據本發明優選實施方案的方法制備的羅紅霉素的氯仿無定形形式(III型)(圖2)的溶解度的溶解度圖(縱軸濃度(μ g/ml);橫軸:介質(pH))；圖3和4 :示出了現有技術羅紅霉素一水合物(圖3)和羅紅霉素無定形形式(III型)(圖4)的紅外(IR)光譜(縱軸透光度(百分比)；橫軸波數(cnT1));(該紅外光譜是在 Shimadzu IRPrestige-21 (日本)上，米用 Pike Multi-Reflectance ATR 輔助設備，用ShimadzuIR I. 40版解析軟件獲得的。在400-4000(^-1的范圍記錄譜圖。將KBr用作背景。將樣品分散在粉末狀溴化鉀基質中，以及在反射室中通過漫反射紅外傅立葉轉換光譜法(DRIFTS)測量IR譜圖)；圖5 :示出了現有技術羅紅霉素(I)和根據本發明優選實施方案制備的羅紅霉素無定形形式(III型)⑵的XRPD (X射線粉末衍射譜圖)重疊譜圖(縱軸強度(CPS);橫軸2 Θ (度))(該譜圖是在 PANalyticalXpert-Pro 上獲得的，測角儀=PW3050/60 ( Θ / Θ )；最小步長 2 Θ :0.001 ;測量溫度[°C ] :25. 00，陽極材料Cu，Ka I [A] : I. 54060，K-a 2 [A]I. 54443，K-β [A] I- 39225，K-A2/K-A1 比例:0. 50000，發生器設定45mA,40kV,衍射儀型號0000000011018023，測角儀半徑[mm] :240.00,遠聚焦-發散狹縫(Dist.Focus-Diverg. Slit) [mm] :91. 00,入射光束單色儀無,旋轉有)；圖6 :示出了羅紅霉素的無定形形式(III型)的特征XRPD (縱軸強度(Lin (計數));橫軸2 Θ (度))；
圖7至9 :示出了 ％重量損失/增重的曲線圖(縱軸重量損失/增重(%);橫軸時間);(其是在Shimadzu DTG-60 (日本)上用TA60 2. 11版軟件獲得的。在開放的鋁坩堝中將樣品以10°C /min從25攝氏度加熱至200攝氏度。將氮氣用作惰性氣氛。)；
圖10 :示出了對于所述的III型獲得的DSC (差示掃描量熱法)熱譜圖(縱軸熱流量(W/g);橫軸時間(min)) (DSC軌跡是在ShimadzuDSC-60A(日本)上用TA60 2. 11版軟件獲得的。將大約2至4mg的各個樣品稱重并在開放的鋁坩堝加熱。將樣品以2°C/min在惰性氮氣氣氛中加熱)；以及圖11至13 :示出了對比根據現有技術的羅紅霉素原料(一水合物)(圖11)與溶劑化的無定形羅紅霉素(圖12)以及去溶劑化的無定形形式(III型)(圖13)的SEM (掃描電子顯微鏡)圖像。本發明優選實施方案的描述根據本發明的優選實施方案，提供了一種用于增加羅紅霉素的溶解度和用于制備羅紅霉素的新無定形多晶型形式(III型)的方法。所述方法包括以下步驟從無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素中選擇羅紅霉素；將該羅紅霉素溶于有機溶劑中；使所述有機溶劑蒸發以致使所述羅紅霉素成為晶體形式；以及隨后使所述晶體羅紅霉素去溶劑化，以致使所述羅紅霉素成為羅紅霉素的無定形形式(III 型)。根據本發明的所述方法中各步驟的進一步細節根據本發明的優選實施方案，所述方法的第一步是從已知的商業上可獲得的無水或一水合形式中選擇羅紅霉素原料。所述方法的接下來的步驟是將所述羅紅霉素溶于有機溶劑。可以預期的是，所述有機溶劑可以選自1，4- 二嗔烷、I- 丁醇、I-丙醇、2- 丁醇、2-丙醇、乙酸、丙酮、乙腈、苯、氯仿、二氯甲烷、乙醚、二甲基甲酰胺、乙醇、乙酸乙酯、庚醇、己烷、己醇、均三甲苯、甲醇、辛醇、戊醇、石油醚、丙酸、四氫呋喃和甲苯。申請人發現，氯仿形式的有機溶劑是特別合適的。因此，通過將羅紅霉素原料溶于氯仿中制備羅紅霉素的溶液。在過飽和溶液的制備中，將羅紅霉素和氯仿的溶液溫度升高至正好低于氯仿的沸點。攪拌所述溶液，直到羅紅霉素的原料溶解。在接下來的步驟中，使氯仿從所述過飽和溶液中緩慢蒸發，產生晶體狀羅紅霉素的氯仿溶劑化形式。其后，使羅紅霉素的溶劑化形式去溶劑化，產生羅紅霉素的無定形多晶型形式(III型)。進一步的分析和發現 已令人意外地發現，如下文更詳細地討論的那樣，與根據現有技術方法制備的常規的無水羅紅霉素或一水合羅紅霉素相比，III型明顯更易溶于水、磷酸鹽緩沖液(PH
6.8)和乙酸鹽緩沖液(pH 4. 5)。
在新的III型的進一步分析中，將五支復制試管的每一支用過量的羅紅霉素無定形形式(III型)和IOml溶解介質填充。該過程采用以下介質的每一種進行乙酸鹽緩沖液(pH 4. 5)、磷酸鹽緩沖液(pH6. 8)、蒸餾水和O. IM HCl。所述磷酸鹽緩沖液包含磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉和水。所述乙酸鹽緩沖液包含乙酸銨、冰醋酸和水。該方法還用于測試現有技術的無水羅紅霉素。省略了所述兩種形式的O. IHCl的結果，因為羅紅霉素在其中的快速降解。將試管固定至旋轉軸(54rpm)并在37攝氏度±2攝氏度的水浴中浸沒二十四小時。通過O. 45 μ m過濾器過濾試管中的內容物，并且隨后稀釋各自的濾液。通過HPLC (高效液相色譜法)測定法分別測定羅紅霉素無定形形式(III型)和羅紅霉素原料的四種濾液的濃度。利用30g/L pH 5. 3的磷酸二氫銨緩沖液的移動相進行HPLC分析。用氫氧化鈉溶液調節pH。移動相包含緩沖液(600)和乙腈(400)。以I. Oml/min的流速和205nm的波長使用Luna C18 150mmX4. 6mm柱。該方法的驗證提供了 0.9998的線性回歸R2。參見圖1，確定了羅紅霉素一水合物原料在乙酸鹽緩沖液(pH 4. 5)中的溶解度為370.0±8. Syg/ml，在磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)中的溶解度為74. 8±5. I μ g/ml，在蒸餾水中的溶解度為1.7±0.6μΜ。參見圖2，確定III型在乙酸鹽緩沖液(pH 4. 5)中的溶解度為1150. 4±6. 5μ g/ml，在磷酸鹽緩沖液(pH 6. 8)中的溶解度為208. 2±3. 7 μ g/ml，以及在蒸餾水中的溶解度為 8. 6± I. 8 μ g/ml。與羅紅霉素原料(圖I)相比，羅紅霉素的新無定形形式(III型)在溶解度方面顯示出明顯的改進，在乙酸鹽緩沖液(pH 4. 5)中顯示出3. I倍(211%)溶解度改進；在磷酸鹽緩沖液(pH 6. 8)中顯示出2. 78倍(178%)溶解度改進；以及在作為介質的蒸餾水中顯示出5倍(405%)溶解度改進。因此發現，羅紅霉素的無定形形式(III型)比無水羅紅霉素或一水合羅紅霉素至少50%，更具體地說至少150%更易溶于乙酸鹽緩沖液和水中。事實上，發現羅紅霉素的無定形形式(III型)比無水羅紅霉素或一水合羅紅霉素211%更易溶于乙酸鹽緩沖液中和405%更易溶于水中。進一步發現，羅紅霉素的無定形形式(III型)比無水羅紅霉素至少50%，更具體地說至少100%更易溶于磷酸鹽緩沖液介質中。更具體地說，發現羅紅霉素的無定形形式(III型)比無水羅紅霉素或一水合羅紅霉素178%更易溶于磷酸鹽緩沖液中。在進一步的穩定性分析期間，將羅紅霉素的原料和無定形形式(III型)二者的樣品在25攝氏度和75%的相對濕度(RH)下(圖7) ;30攝氏度和75%的相對濕度下(圖8);以及40攝氏度和75%的相對濕度下(圖9)保持4周的時間。通過熱重分析(TGA)分析樣
品，并測定百分比重量損失/增重。從圖7和8中顯見的是，在穩定性試驗的第4周之后，樣品吸收了大約2. 5%的量的水分。然而，對于在40°C /75% RH儲存的樣品獲得的TGA結果(圖9)沒有顯示如采用圖7和8的樣品所獲得的相同程度的水分吸收。穩定性研究顯示，所述無定形形式在4周的時間內是穩定的，并且不重結晶成晶體形式。觀察到所述無定形形式的非水分誘導的重結晶。此外，盡管確實發生了水分吸收，但是所述無定形形式(III型)沒有轉變為一水合物。因此，可以認為所述無定形形式(III型)對升高的溫度和濕度是穩定的。由羅紅霉素的原料(圖3)與無定形形式(III型)(圖4)的IR光譜對比，將會得出以下波數的以下差別
權利要求
1.組合物，其包含羅紅霉素的無定形形式(III型)。
2.根據權利要求I的組合物，其特征在于相對于現有技術的羅紅霉素原料的紅外光譜在3577. 15,3526. 03,3465. 27和3276. 24cm_1處顯示峰，羅紅霉素的無定形(III型)的紅外光譜在 3577. 15,3526. 03,3465. 27 和 3276. 24cm1 處沒有峰。
3.根據權利要求I或2的組合物，其中所述羅紅霉素的無定形形式(III型)顯示基本上如圖4中示出的紅外譜圖。
4.根據權利要求I至3任一項的組合物，其相對于無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素，在乙酸鹽緩沖液(pH 4.5)中具有至少50%增加的溶解度。
5.根據權利要求4的組合物，其相對于無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素，在乙酸鹽緩沖液(pH 4. 5)中具有至少150%增加的溶解度。
6.根據權利要求I至3任一項的組合物，其相對于無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素，在磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)中具有至少50%增加的溶解度。
7.根據權利要求6的組合物，其相對于無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素，在磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)中具有至少100%增加的溶解度。
8.根據權利要求I至3任一項的組合物，其相對于無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素，在水中具有至少50%增加的溶解度。
9.根據權利要求8的組合物，其相對于無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素，在水中具有至少150%增加的溶解度。
10.一種增加羅紅霉素溶解度的方法，其包括如下步驟提供選自無水羅紅霉素或一水合羅紅霉素的羅紅霉素；將該羅紅霉素溶于有機溶劑中；使所述有機溶劑蒸發以致使所述羅紅霉素成為晶體形式；以及使所述晶體羅紅霉素去溶劑化，以致使所述羅紅霉素成為羅紅霉素的無定形形式(III型)。
11.根據權利要求10的方法，其中所述有機溶劑選自1，4-二I 悉烷、I-丁醇、I-丙醇、2-丁醇、2-丙醇、乙酸、丙酮、乙腈、苯、氯仿、二氯甲烷、乙醚、二甲基甲酰胺、乙醇、乙酸乙酯、庚醇、己烷、己醇、均三甲苯、甲醇、辛醇、戊醇、石油醚、丙酸、四氫呋喃和甲苯。
12.根據權利要求11的方法，其中所述有機溶劑是氯仿。
13.根據權利要求10至12任一項的方法，其中將羅紅霉素溶于有機溶劑的步驟包括進一步制備所述羅紅霉素在有機溶劑中的過飽和溶液的步驟。
14.一種藥物，其依照權利要求10至13任一項的方法由無水羅紅霉素或一水合羅紅霉素制備。
15.一種藥物，其依照權利要求10至13任一項的方法由羅紅霉素的無定形形式(III型)與至少一種惰性藥學上可接受的載體或稀釋劑一起制備，為選自以下的劑型片劑、膠囊、散劑、溶液、糖衆、懸浮劑、推注注射劑、滴注注射劑、用于重構的散劑、軟膏劑、霜劑、凝膠劑、洗劑、噴霧劑、灌腸劑、沖洗劑、陰道栓劑、透皮貼劑、皮膚貼劑和錠劑。
16.藥學上有效量的根據權利要求I至9任一項和依照權利要求10和13任一項的方法制備的羅紅霉素無定形形式(III型)在治療患有細菌感染的患者的方法中的用途。
17.藥學上有效量的根據權利要求I至9任一項和及依照權利要求10至13任一項的方法制備的羅紅霉素無定形形式(III型)在制備用于治療患有細菌感染的患者的藥物的方法中的用途。
18.治療患有細菌感染的患者的方法,其包括給予該患者藥學上有效量的根據權利要求I至9任一項和依照權利要求10至13任一項的方法制備的羅紅霉素無定形形式(III型)的步驟。
19.一種組合物，其包含基本上如本申請中所描述和參考附圖所示例的羅紅霉素的無定形形式(III型)。
20.一種基本上如本申請中所描述和參考附圖所示例的增加羅紅霉素溶解度的方法。
全文摘要
本發明涉及大環內酯組合物，更具體地說，3R,4S,5S,6R,7R,9R,11S,12R,13S,14R-6-[(2S,3R,4S,6R)-4-二甲氨基-3-羥基-6-甲基烷-2-基]氧基-14-乙基-7,12,13-三羥基-4-[(2R,4R,5S,6S)-5-羥基-4-甲氧基-4,6-二甲基烷-2-基]氧基-10-(2-甲氧基乙氧基甲氧基亞氨基)-3,5,7,9,11,13-六甲基-1-氧雜環十四烷-2-酮或羅紅霉素的無定形形式(III型)，其特征在于相對于現有技術的羅紅霉素原料的紅外光譜在3577.15、3526.03、3465.27和3276.24cm-1處顯示峰，所述羅紅霉素無定形(III型)的紅外光譜中在3577.15、3526.03、3465.27和3276.24cm-1處沒有峰；以及進一步的特征在于，在乙酸鹽緩沖液(pH 4.5)、磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)和水中超過現有技術的無水羅紅霉素和一水合羅紅霉素至少50％的增加的溶解度。
文檔編號A61K31/7048GK102892419SQ201180024588
公開日2013年1月23日 申請日期2011年4月14日 優先權日2010年4月16日
發明者W·列本伯格, M·奧坎姆普 申請人:西北大學