傷口修復劑組合物的制備工藝、管子及裝置的制作方法

專利名稱：傷口修復劑組合物的制備工藝、管子及裝置的制作方法
技術領域：
本發明涉及組織再生領域。特別是涉及凝血酶、血小板濃縮液和傷口修復劑制劑、組合物的新工藝、管子和裝置及其使用。
背景技術：
在各種文獻中已經廣泛論述過傷口愈合過程中生物自體材料的重要性。最重要的是，研究發現在血凝塊形成過程中直接牽涉到兩種生物自體材料，其提供一道止血屏障，確保止血效果及封閉傷口:(1)纖維蛋白，其通過血漿纖維蛋白原在凝血酶作用下分離成兩部分而產生，以及(2)活化血小板膜。通常傷口愈合過程先后表現為凝血階段、發炎過程和再生過程。凝血階段(血液凝結或血凝塊的形成)是一個非常復雜的過程，在這一過程中，受損的血管壁被纖維蛋白凝塊覆蓋，以阻止出血，并且由血小板α顆粒大量釋放細胞活素和生長因子而發起受損血管的修復。血凝塊的形成(在生理條件下由纖維蛋白、血小板和紅細胞以及其他血成分而形成)是組織創傷及其在傷口愈合過程中以及骨折愈合中的作用所導致的一種自然現象，這已經眾所周知。血液凝固是許多蛋白凝血因子一連串復雜相互作用的結果。一般而言，血管內皮損傷會導致內皮下結構裸露，由此吸引血小板，誘導血小板可逆聚集。在凝血通路活化過程中形成的蛋白凝血酶產生不可 溶的交叉連接的纖維蛋白原纖維，并引起血小板不可逆聚集。由此產生的血小板纖維蛋白凝塊是防止血管系統失血的有效屏障，同時也是后續血管內壁修復的支架。緊隨血凝塊形成過程的發炎過程是由白細胞和血小板釋放的大量血管活性介質和趨化因子(以蛋白質形式出現的特殊信號)刺激而產生的一個過程。這些信號吸引巨噬細胞，這些巨噬細胞在新細胞遷移之前，“清除”傷口的細菌、外來粒子以及紅細胞。組織再生階段涉及由血凝塊形成的支架(或生長基質)中未分化細胞的趨化和有絲分裂。在血小板生長因子刺激下繁殖的新細胞將取代被巨噬細胞損傷或摧毀的細胞。生長因子和大量的血漿蛋白質，也稱為信號分子，能促進血凝塊中的細胞遷移和分裂，在傷口愈合過程中發揮著關鍵作用。生物粘合劑和纖維蛋白膠代表較新的技術進步，其作用是復制最后凝血階段的生物過程。一些臨床試驗報告記錄了纖維蛋白膠在各種外科領域的效用，如心血管、胸、移植、頭頸部、口腔、胃腸、矯正外科、神經外科及整形手術。在外科手術時，含有纖維蛋白膠的兩種主要成分纖維蛋白原和凝血酶混合在一起形成血液凝塊。血液凝塊可在數秒鐘內粘附在必要的組織、骨頭、或神經上，但是在之后大約十天左右通過纖維蛋白溶解作用被身體重新緩慢吸收。纖維蛋白膠的重要特征在于它能夠:(I)在血管吻合處，特別是在很難進行傷口縫合的部位或者縫合固定意味著額外風險的部位，實現止血；(2)控制僅通過縫合無法控制的針眼或動脈裂縫流血；(3)實現肝素化患者或凝血病患者的止血。參閱Borst, H.G.等人在《胸心血管外科雜志》上發表的論文，84:548-553 (1982) ；ffalterbusch, G.J等人在《胸心血管外科雜志》上發表的論文，30:234-235 (1982)；以及Wolner，F.J等人在《胸心血管外科雜志》上發表的論文，30:236-237 (1982)。理論上可以通過丟棄紅細胞和提高生長因子的濃度來增強這些早期階段在傷口愈合過程中的效果。血凝放大作用可以定義為“富化血凝塊”(EC)的形成。富化血凝塊通過使用血小板濃縮液獲得，在《血小板和巨核細胞》2004年第1、2卷中被描述為“結構與信號”，新澤西州胡馬納出版社Ed.Gibbins和Mahaut-Smith。富血小板血漿(PRP)可定義為少量血漿中的自體血小板濃縮液；它已經被開發成一種自體生物材料，而且已經被證明在組織愈合和再生方面非常有用(Marx等人，2004年，《國際口腔頜面外科雜志》，62，489-496)。PRP不僅含有血小板濃縮液，同時還含有生長因子(如由血小板衍生的生長因子TOGF、血管內皮生長因子VEGF、轉化生長因子TGF和表皮生長因子EGF等)，這些生長因子由血小板積極分泌，并且已知在傷口愈合初始階段發揮著極其重要的作用。例如，我們知道TOGF會發起結締組織愈合，包括骨頭再生和修復。I3DGF還能夠促進有絲分裂(愈合細胞)、血管生成(內皮有絲分裂成機能毛細血管)以及巨噬細胞活化。同樣已知的是粒細胞釋放的VEGF對內皮細胞具有有效的血管生成、促有絲分裂和血管通透性增強作用。TGF-β促進結締組織和骨頭的細胞有絲分裂和分化，作用于間質干細胞、前成骨細胞和成纖維細胞，并且抑制破骨細胞的形成。已知EGF能夠誘導上皮發育并促進血管生成。血小板濃縮液通常用于牙種植和骨外科，特別是在美國。人們已經開發出各種通過離心法制備PRP的技術。然而，由于血小板細胞的敏感性和從紅細胞中分離血小板的方法之效率的變化性，在各種血小板濃縮液制備方法之間存在巨大的差別。Biomet PCCS&GPS(上述Marx等人于2004年發表)的自動化設置在大血樣流程中面臨流程復雜、成本高昂這一缺點。在那些系統中，還出現了患者寶貴的生物組織的重大損失。因此，亟需開發一種可靠、高產量、易于使用并且經濟合算的漿細胞采集流程。另外，獲得血小板濃縮液還需要使用相對復雜的成套工具和成本高昂的專用機械設備以及需要成本同樣高昂的專業技術人員的參與。這一缺點使現有的PRP制備方法無法適應就地醫療使用的需要。再者，鑒于移植、術后再生或出于美容目的之細胞或組織再生，細胞的制備面臨細胞與組織長期保存這一難題。雖然通常采用組織或細胞冷凍保存方法來長期養護組織或細胞，特別是血小板，但是這項技術具有嚴重的缺點和問題，如結晶、滲透問題、聚集、蛋白合成能力受抑制以及因熱應激反應而出現的應激蛋白表達。因此，已知組織或細胞低溫保存會改變細胞活力和穩定性(Agence lrnn^nlsc de securitesanitaire, 2003 ；Arnaud 等人，1999年，《低溫生物學》，38，192-199，Tablin等人，2001年，《低溫生物學》，43 (2)，114-23)。低溫保存的某些副作用可能可以通過采用防凍劑進行限制，例如，二甲基亞砜(DMSO)、甘油或其他冷凍保護劑(US 5,5891,617, Oh等人，Cornea，26，840-846)，但是這些化學劑的濃度必須進行改良以限制其毒性和副作用。因此，需要一種全新的或備選的細胞和組織制備方法，使細胞和組織可以就地使用，同時保存其完整性，特別是生長因子分泌能力和活力。發明概沭

本發明涉及組織再生領域。特別是涉及凝血酶、血小板濃縮液和傷口修復劑制劑、組合物的新工藝、管子和裝置及其使用。本發明還涉及新型細胞制劑、新型富血小板(PRP)制劑、新型細胞制劑或PRP制劑的制備方法、此類細胞或PRP制劑的使用、以及可選地混入細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。一方面，本發明提供一種完全自體的就地傷口修復劑或組織修復劑組合物的制備方法。該自體傷口修復劑或組織修復劑組合物的所有血成分均來自于即將應用該自體傷口修復劑或組織修復劑的單個患者(同一個患者)。一方面，本發明提供一種凝血酶血清的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)用一支含有觸變膠體的管子采集全血；b)離心處理該管子直到凝血酶血清釋放；以及c)采集凝血酶血清。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)優選地，用一支含有透明質酸、觸變膠體和/或優選含有抗凝血劑的檸檬酸鈉的管子采集全血；b)優選地，離心處理該管子，直到紅細胞遷移到觸變膠體之下以及優選地，直到透明質酸遷移到富血小板血漿之上；

c)可選地，將透明質酸和富血小板血漿混合，優選地采用倒置管子的方法進行混合；d)采集含有透明質酸和富血小板血漿的上清液。另一方面，本發明提供一種采集和分離流體樣本的管子，包括:i)尺寸與直徑不同的兩個不同部分；ii)將這兩部分隔離的濾網；以及iii)可選的觸變膠體和抗凝血劑。在本發明的一個較佳實施例中，該管子由如圖1 14所示的特征組成。另一方面，本發明涉及一種血袋系統或采血管裝置，包含用于血成分采集、儲存、使用和運送的多個袋子或管子。在一個優選方面，本發明提供一種圖15所示的血袋系統或采血管裝置。另一方面，本發明提供一種血袋系統或采血管裝置，包含一支與多導管接頭連接的單入口導管，接頭導管與至少兩個袋子或管子連接，其中多導管接頭的每個接頭導管都與單個袋子或管子連接。優選地，采血管要抽真空、密封并充滿透明質酸和抗凝血劑。


附圖并入本文中，構成本專利說明書的一個組成部分，顯示本發明的較佳實施例，并與說明書一起描述本發明的原則。圖1A和圖1B為本發明管子的示意圖。圖2和圖3為本發明管子內部的示意圖。圖4為本發明管子濾網內部的示意圖。該濾網由配有漏斗的內層和配有梯形結構的外層組成。圖5a為本發明管子內部的示意圖。圖5b為蓋子和管子連接處示意圖。圖6為蓋子示意圖。圖7A和圖7B為本發明管子濾網的兩個不同視圖。圖8為本發明管子濾網的仰視圖。同時圖8也是本發明外層或底層四個各有3個開孔部域的對稱系列的示意圖。圖9為本發明管子濾網的俯視圖。圖9也是本發明外層或底層四個各有2個開孔部域的對稱系列的示意圖。圖10和圖11為本發明管子濾網的詳細視圖。圖12是本發明管子濾網內部中心部分的詳細視圖。圖13是本發明管子濾網內部的詳細示意圖。濾網由配有漏斗的內層和配有梯形結構的外層組成。每個漏斗和梯形以交替的方式與濾網集成為一體(第一個梯形后面為第一個漏斗，然后為第二個梯形，后面跟著第二個漏斗，最后為第三個梯形)。圖14是本發明管子中含有漏斗和梯形的濾網的詳細示意圖。圖15為本發明血袋系統或采血管裝置的視圖。圖16為含有PRP和透 明質酸的傷口或組織愈合組合物制備方法的示意圖。

發明內容
下列段落提供本發明相關術語的定義，并在整個專利說明書和權利要求書中統一使用，除非有其他明確的定義給出更為廣泛的定義。“觸變”表示一種在攪動或壓力作用下會變成更具流體性質的膠體，例如，在攪動或壓力作用下其粘性會降低的膠體。粘性這一術語是指決定膠凝程度的指定材料的那些特性，如材料的牢固性或硬度、材料抵制像流體一樣流動的程度。本發明所用觸變膠體含有不溶于水并對可用于本發明的血液組分具有化學惰性的聚酯膠體或混合物。血細胞分離所用的典型觸變膠體用于診斷和蛋白質組學。觸變膠體在本文中也稱為“細胞選擇膠體”。在本發明中也可使用其他膠體。“就地醫療”是指在床邊為患者提供的所有服務。“放血附件”或“靜脈穿刺附件”是指用針穿刺靜脈進行抽血的附件。“傷口修復劑”、“傷口密封劑”、“組織修復劑”、“組織密封劑”、“傷口愈合組合物”或“組織愈合組合物”的另外表達用語為“生物粘合劑”或“纖維蛋白膠”。“傷口修復劑”、“傷口密封劑”、“組織修復劑”、“組織密封劑”、“傷口愈合組合物”、“組織愈合組合物”、“生物粘合劑”或“纖維蛋白膠”是指一種能夠促進和/或提高傷口愈合速度和/或質量的藥劑或組合物。傷口修復劑或密封劑能夠促進組織再生。“傷口”是指任何受損的組織，例如，下列創傷或手術。例如，哺乳動物的傷口包括褥瘡性潰瘍、撕裂傷、燒傷、移植部位(移植供體和受體部位)、瘺管、牙周組織損傷、糖尿病引起的無法愈合傷口、以及創傷或任何外科手術導致的傷口。一般來說，該術語還包括皮膚損傷，皮膚表面有某些凹陷，不一定為表面上有切口，如年齡相關的組織損傷(如，皺紋)和疤痕如痤瘡(特別是皮膚磨削術治療后出現的這種疤痕)或風疹疤痕。“PRP”是指富血小板血漿，優選地，是指哺乳動物或人的富血小板血漿；更加優選地，是指本發明過程中為了將紅細胞制成丸狀并剔除及提純白細胞、凝血細胞和吸附蛋白中的血漿而制備的自體富血小板血漿，與原本的全血相對而言。“自體”、“自生”或“自身”用語是指一種活體內方法，其中使用單個供體的血液、組織和/或細胞，并且從該供體抽提的血液、組織和/或細胞準備供該供體本身使用。與此相反，“異體”方法是指從一個或多個第三方抽提血液、組織和/或細胞，供一個供體(“同源”或“異源”)使用。自體產品可避免與使用第三方生物材料相關的一些常見問題，例如，進行篩查以確保供體在生物學上或免疫方面與患者兼容以及避免感染肝炎、HIV、朊病毒、庫賈氏病及類似疾病。“凝血活化劑”是指能夠觸發或激活血漿凝血和血小板聚集的一種藥劑，例如，酶。凝血活化劑由凝血酶活化劑和/或纖維蛋白原活化劑和/或凝血酶和/或自體凝血酶和/或自體凝血酶血清和/或氯化鈣和/或葡萄糖酸鈣組成。為了改變組合物的硬度，可以將凝血合并。“凝血酶活化劑” 是指一種能夠活化凝血酶并觸發凝血的藥劑。典型的凝血酶活化劑是一些輔助因子，如鈉或鈣。在本發明實踐中，凝血酶活化優選地出現在鈣離子中。通常把鈣離子當作鹽水添加到血小板濃縮液中，以提供最終濃度一般為或約為0.lmg/mL的血小板濃縮液。合適的鈣鹽包括但不限于碳酸鈣(CaC03)、硫酸鈣(CaS04)或氮化鈣(CaC12)。在本發明中使用的優選鈣鹽是葡萄糖酸鈣(CaGL)。葡萄糖酸鈣為鈣凝膠劑注射液形式，USP10% (瑞士 Regen實驗室)。“纖維蛋白原活化劑”是指一種能夠激活纖維蛋白原向纖維蛋白轉化并觸發凝塊形成的藥劑。典型的纖維蛋白原活化劑是凝血酶或類凝血酶。“凝血酶”這一術語可包括鈣化凝血酶，特別每lmL10%葡萄糖酸鈣水溶液含大約100至10單位的凝血酶。它可能包括鈣化牛凝血酶、異源凝血酶或重組人凝血酶，優選地包括異源凝血酶。纖維蛋白原活化劑可以為一種富化的凝血酶組合物，如美國專利6，472，162中所述的凝血酶組合物或本發明中的自體凝血酶血清。“治療有效劑量”是指促進傷口愈合的必要組成元素或其組合的量，如縮小傷口體積或表面積，提高促進膠原蛋白生成、血管生長、成纖維細胞增殖或全面愈合的肉芽組織或其他生物材料的量；本文中所述的所有版本的發明都假設具有組成物質或組合的治療有效劑量。“藥學上可接受的載體”是預期的藥學上可接受的額外組分，如穩定劑、抗微生物劑、緩沖劑、輔助劑、麻醉劑、皮質類固醇及類似組分。“美容上可接受的載體”是預期的美容上可接受的額外組分，如穩定劑、緩沖劑、著色劑、調味劑、輔助劑及類似組分。“環烯烴共聚物”(COC)或“環烯烴聚合物”(COP)是指非晶態聚合物(amorphouspolymer)、乙烯共聚物(Ethylene Copolymer) ；C0C ；C0P ;環烯烴共聚物(CycloOlefinecopolymer);環烯烴聚合物(Cyclic Olefin Polymer);乙烯/降冰片烯共聚物(Ethylene-norbornene Copolymer)。COP使用單一類型的單體，而COC則使用不同類型的單體。本發明包括基于不同類型的環狀單體和聚合方法的環烯烴共聚物。本發明的環烯烴共聚物或多聚物可通過環狀單體(如降冰片烯、1，2，3，4，4A, 5，8，8A-八氫-1，4: 5，8- 二甲橋萘(帶乙烯)、Ticona公司的戊菌唑、三井化學的APEL)鏈共聚合反應生產或通過各種環狀單體開環易位聚合與氫化生產(如日本合成橡膠公司的ART0N、瑞翁化學公司的Zeonex和ZeonorX“透明質酸”(也稱為“透明質烷”或“透明質酸鹽”)是指一種在結締組織、上皮組織和神經組織中分布十分廣泛的陰離子非硫酸化葡糖胺聚糖。在葡糖胺聚糖中它非常獨特，因為它并不硫酸化，形成血漿膜而不是高爾基體，并且可以非常大，其分子重量通常達到百萬級。透明質烷是細胞外基質的一種主要組分，對細胞增殖和遷移有重要的貢獻。“殼聚糖”是指一種由隨機分布的β -1，4-糖苷鍵連接的D-葡糖胺(脫乙酰化單元)和N-乙酰-D-葡糖胺(乙酰化單元)組成的線性多聚糖。殼聚糖由對幾丁質做脫乙酰處理進行商業化生產，它是甲殼綱動物(如蟹、蝦等)外骨骼和蘑菇細胞壁的結構元素。脫乙酰的程度(%DD)取決于核磁共振波譜法。商業殼聚糖的％DD范圍為60% 100%。平均而言，商業生產的殼聚糖的分子重量大約為3800至20000道爾頓。常用的殼聚糖合成方法是利用過量的氫氧化鈉作為試劑并用水作為溶劑對幾丁質進行脫乙酰處理。這一反應途徑如果允許其完成(完全脫乙酰)，產量可高達98%。殼聚糖的氨基的pKa值約為6.5，這會導致在酸性至中性溶液中產生質子化作用，其電荷密度取決于pH值和％DA值。這會使殼聚糖溶于水并且產生一種容易與帶負電荷表面如粘膜粘合在一起的生物粘附物質。殼聚糖能增強極性藥在上皮表面的輸送，并且不會引起排斥，而且是生物可降解的。一方面，本發明提供了一種凝血酶血清的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)優選地用一支優選含有觸變膠體的管子采集全血； b)離心處理管子直到凝血酶血清釋放；以及c)采集凝血酶血清。抽血會引起凝血反應，而且除非采取某種措施停止這一過程，否則會自然形成血減塊。優選地，觸變膠體位于`管子底部附近。在離心處理過程中，紅細胞將遷移到膠體之下。同時發生纖維蛋白原聚合反應，在膠體之上形成一個血凝塊。在足夠的離心力作用下和/或有充足的離心時間時，血凝塊會進一步沉淀，形成纖維蛋白網，該纖維蛋白網將釋放出一種稱為血清的上清液，其含有富化的活化凝血酶。凝血酶是一種刺激血液凝結的酶。優選地，只需要簡單的幾個步驟即可獲得本發明的凝血酶血清，即，在充足的離心處理時間內對含有全血和觸變膠體的管子進行離心處理。優選地,本發明制備凝血酶血清的方法提供一種可立即使用的凝血酶血清。在本文中凝血酶血清也被稱為凝血酶富化制劑、凝血酶富化血清、富化活化凝血酶血清、富化活化凝血酶制劑、富凝血酶活化血清和富凝血酶活化制劑。另一方面，本發明提供一種凝血酶血清的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)優選地用一支優選含有觸變膠體的管子采集全血；b)離心處理管子，直到紅細胞遷移到觸變膠體之下，并且優選地，直到觸變膠體上形成纖維蛋白網；以及c)采集上清液或凝血酶血清。在本發明一個較佳實施例中，離心處理步驟采用大約1500克的力處理大約30分鐘。在另一個實施例中，離心處理步驟采用大約1000克至大約2000克的力處理大約20分鐘至大于40分鐘之間的一個時間，優選采用1500克的力處理大約25分鐘至大約35分鐘之間的一個時間，優選采用1500克的力處理大約30分鐘。優選地，離心處理步驟進行足夠長的時間，直到凝血酶血清釋放。優選地，本發明所采用的方法能夠保護液體血清，凝血酶仍然可溶。標準的方法主要是粉碎凝塊，直到凝血酶血清釋放。優選地，在按照本發明制備凝血酶血清時并不需要該步驟。在本發明中，這一備選凝血酶血清還可用作為一種凝血酶富化制劑。有優勢的是，不使用任何凝結劑，而是自發性發生凝結作用。這有兩個優勢，即降低成本和簡化流程。因為管子中沒有檸檬酸鹽，有優勢的是不需要使用凝結劑(也稱為再生齊U)來引發凝結。有優勢的是，不需要采用乙醇溶液和/或氯化鈣。有優勢的是，本文中介紹的凝血酶血清制備工藝或方法簡單易行，從而縮減了人在現場工作的時間，因為不需要人工研碎凝塊，與傳統的制備方法相比，該方法具有經濟優勢。在本發明中作為凝血酶富化制劑使用的備選自體凝血酶血清采用舊工藝制備，該工藝包括向采集在一支管子中的患者全血樣本(如，IOmL)中添加95%v/v乙醇溶液(如，ImL)和10%氯化鈣(如，ImD0然后讓混合物在室溫下沉淀大約30分鐘。30分鐘后，大約80%的抗凝血酶(在纖維蛋白原等其他蛋白質中)沉淀，然后對管子采用大約1500克的力進行大約8至大約10分鐘的離心處理，處理后的自體凝血酶血清便可與富血小板濃縮液混優選地，本發明提供一種自體凝血酶血清的制備工藝或方法。優選地，本發明的所有方面和/或實施例都供自體使用。相應地，本發明還提供一種完全自體凝血酶血清的制備方法，其中供體和受體是同一個人或動物。在本發明的一個實施例中，制備凝血酶血清用的管子由玻璃制成，優選地該玻璃管是一種含有聚酯型觸變膠體的玻璃分離管。在一個最佳實施例中，凝血酶血清制備方法采用本發明的管子，其中沒有添加任何檸檬酸鹽。另一方面，本發明提供一種傷口或組織愈合組合物的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)優選地用一支優選含有觸變膠體的管子采集全血；b)離心處理管子，優選地直到凝血酶血清釋放；c)采集上清液或凝血酶血清；以及d)將凝血酶血清與PRP組合物或分離的血小板濃縮組合物混合。另一方面，本發明提供一種傷口或組織愈合組合物、細胞組合物和/或細胞制劑的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)優選地用一支優選含有觸變膠體的管子采集全血。；b)離心處理管子，優選地直到凝血酶血清釋放；c)采集凝血酶血清；d)將凝血酶血清與PRP組合物或分離的血小板濃縮液組合物混合；以及e)將步驟d)中獲得的組合物與細胞抽提物、細胞組合物、TCP、殼聚糖、透明質酸、乳膏、乳膏膜、脂肪細胞、脂肪組織、骨髓濃縮物、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠、肉毒桿菌毒素和/或干細胞混合。在一個實施例中，全血采集到至少一支管子中。在本文中可將管子稱為分離管。優選地，本發明所有方法和/或工藝可使用一支或多支本發明管子。在一個實施例中，本發明的所有方法和/或工藝可使用本發明的血袋系統或采血管裝置或含有此種血袋系統或采血管裝置的裝置或成套工具采集的全血。本文中，“空”管子是指沒有在其中插入和/或添加任何物質、組合物或其他東西的管子。本發明中的任何工藝或方法均可使用至少一支本發明管子。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)將全血采集至一支管子；b)離心處理該管子；c)采集凝塊。優選地，沒有使用任何凝結劑來制備傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物。優選地，傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物是可立即使用的成分。這種組合物可直接涂敷于糖尿病性潰瘍。優選地，傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備工藝或方法用于牙科和/或整形外科。另一方面，本發明提供一種含有凝塊的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物，用于牙科、整形外科、關節炎、假關節炎或其他疾病。在一個實施例中，含有凝塊的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物被應用于牙腔、糖尿病性潰瘍、穿孔性潰瘍、糖尿病穿孔性潰瘍或其他疾病。本發明也包括含有凝塊的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的治療方法和使用。在一個實施例中，優選地在凝塊形成之前，傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物可與磷酸三鈣(TCP)或其他任何骨替代產品結合。含有TCP的傷口 修復劑組合物可優選在小瓶中制備。在一個實施例中，優選地在凝塊形成之前，傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物可與透明質酸結合。另一方面，本發明提供一種血小板濃縮液組合物或富血小板血漿組合物的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)對本發明優選地含有檸檬酸鈉和/或觸變膠體的管子中的全血進行離心處理；以及b)采集富血小板血漿。離心處理步驟將清除血漿中的紅細胞(RBC)。頂相是富血小板血漿(PRP)，底相是抗凝血全血減去富血小板血漿。優選地，離心處理步驟采用1500克或大約1500克至大約2000克的力進行。優選地，離心處理步驟進行足夠長的時間，以便在含血小板、淋巴細胞、單核細胞的血漿與含紅細胞的膠體之間形成一道屏障。優選地，分離步驟b)通過從所述屏障頂部采集上清液而進行。在一個實施例中，通過除去含貧血小板血漿的那一半上清液，使富化富血小板血漿從全血漿中分離出來。優選地，與原來的全血相比，富化血漿含有富化的白細胞、凝血細胞和黏著蛋白(例如，纖維連接蛋白(一種可溶蛋白)或玻璃體結合蛋白(一種由血小板分泌的蛋白)。在一個實施例中，制備富血小板血漿使用的管子選自:
i)含有聚酯型觸變膠體和檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)的玻璃分離管；ii)含有由聚合物混合物形成的高度觸變膠體和無水朽1檬酸鈉(3.5mg/mL)的聚
對苯二甲酸乙二醇酯分離管；iii)含有基于聚合物的觸變膠體和檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)的環烯烴共聚物(COC)或環烯烴聚合物(COP)分離管；或iv)含有檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)或無水檸檬酸鈉(3.5mg/mL)的環烯烴共聚物(COC)或環烯烴聚合物(COP)分離管。在一個最佳實施例中，血小板濃縮液制備方法采用本發明中的管子，管中添加了檸檬酸鹽(例如，檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)或無水檸檬酸鈉(3.5mg/mL)。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑或組織修復劑組合物的制備方法或工藝，包括下列步驟:a)對本發明優選地含有檸檬酸鈉和/或觸變膠體的管子中的全血進行離心處理；b)采集富血小板血漿；以及c)將富血小板血漿與細胞抽提物、細胞組合物、TCP、殼聚糖、透明質酸、乳膏、乳膏膜、脂肪細胞、脂肪組織、骨髓濃縮物、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠、肉毒桿菌毒素和/或干細胞混合。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑或組織修復劑組合物，含有:a)本發明的富血小板 血漿或血漿濃縮液；以及b)TCP、殼聚糖、透明質酸、乳膏、乳膏膜、脂肪細胞、脂肪組織、骨髓濃縮物、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠、肉毒桿菌毒素和/或干細胞。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑或組織修復劑組合物，含有:a)本發明的凝血酶血清；b)優選地，本發明的富血小板血漿或血漿濃縮液；以及c)TCP、殼聚糖、透明質酸、乳膏、乳膏膜、脂肪細胞、脂肪組織、骨髓濃縮物、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠、肉毒桿菌毒素和/或干細胞。凝塊的形成是是一個多步驟過程或一連串過程，其中幾個步驟需要使用鈣離子。通過除去全血中的鈣離子，如同在檸檬酸鹽中采集血液的效果一樣，可以防止血液結成凝塊。鈣螯合劑是一種與血液中的鈣起反應的化學品，從而使鈣在凝血過程中不起作用。最常用的螯合劑是檸檬酸鹽，因為它對凝血系統組分的副作用最小。通過將血液采集至含有鈣螯合劑的介質中，如檸檬酸鹽，即可在最多幾個小時內進行采樣及對含檸檬酸鹽的樣品進行進一步制備。優選的鈣螯合劑是檸檬酸鈉。當經常使用3.5mg/mL檸檬酸鹽采集介質采集和保存血液時，本領域的技術人員將認識到檸檬酸鹽和全血的比率可以有不同的范圍。另一方面，本發明提供一種分離的血小板濃縮液組合物，該組合物含有:a)血漿；b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板；c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞；d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原；以及濃度低于0.6X1012個細胞/升的紅細胞。
在本文中，富血小板血漿也被稱為血小板濃縮液組合物。在一個實施例中，本發明的血小板濃縮液組合物或富血小板血漿組合物可與在牙科(TCP，1(T30微米)和整形外科(TCP，50微米)中用作容積矯正劑的磷酸三鈣(TCP)和/或其他任何替代產品結合。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備方法或工藝，包括下列步驟:a)對含有透明質酸的管子中的全血進行離心處理；b)可選地，將富化富血小板血漿和透明質酸從全血漿中分離出來；以及c)可選地，將富化富血小板血漿和透明質酸混合。優選地，管子含有透明質酸，優選位于管子底部，其上方為觸變膠體，再上為抗凝血劑，優選為朽1檬酸鹽(參見圖16)。優選地，分離步驟b)通過從所述屏障頂部采集含有富化富血小板血漿和透明質酸的上清液實施。在一個實施例中，通過除去含貧血小板血漿的那一半上清液，使富化富血小板血漿和透明質酸從全血漿中分離出來。優選地，與原來的全血相比，富化血漿含有富化的白細胞、凝血細胞和黏著蛋白(例如，纖維連接蛋白(一種可溶蛋白)或玻璃體結合蛋白(一種由血小板分泌的蛋白)。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)優選地，用一支含有透明質酸、觸變膠體和/或抗凝血劑優選為檸檬酸鈉的管子采集全血；`b)對管子進行離心處理，優選地直到紅細胞遷移到觸變膠體下方以及優選地，直到透明質酸遷移到富血小板血漿上面；c)可選地，將透明質酸和富血小板血漿混合，優選地采用倒置管子的方法進行混合；d)采集含有透明質酸和富化血漿的上清液；以及e)可選地，將所述透明質酸與所述富化血漿進一步混合。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)優選地，用一支含有透明質酸、觸變膠體和/或抗凝血劑優選為檸檬酸鈉的管子采集全血；b)對管子進行離心處理，優選地直到在管子頂部形成一層透明質酸作為第一層，隨之為由富化血漿或PRP組成的第二層；c)可選地，將透明質酸和富血小板血漿混合，優選采用倒置管子的方法進行混合；d)采集含有透明質酸和富化血漿的上清液；以及e)可選地，將所述透明質酸與所述富化血漿進一步混合。離心處理步驟將清除血漿中的紅細胞(RBC)。離心處理后，頂相是透明質酸，其下為富血小板血漿(PRP)，再下面是觸變膠體，底相是含有紅細胞的抗凝血全血減去富血小板血漿(圖16)。在離心處理過程中，透明質酸遷移到血漿上方(參見圖16)。
優選地，管子中含有約ImL至2mL的透明質酸、約2克的細胞選擇組合物或觸變膠體，以及約ImL的檸檬酸鹽(0.109M)。圖16所示為含有透明質酸和富血小板血漿(PRP)的傷口修復劑組合物制備方法示意圖。優選地，通過簡單地倒置管子的方法將富化富血小板血漿和透明質酸混合。有優勢的是，將富化富血小板血漿和透明質酸混合時，透明質酸因血漿和細胞膨脹而本身擴大。有優勢的是，由此獲得的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物是可立即使用的組合物。有優勢的是，獲得的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物是一種適合注射的粘膠或生物膠，例如，可將其用作為機械支撐或填充材料。有優勢的是，該傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或粘膠的制備方法或工藝經濟、簡便、快速。優選地，離心處理步驟要進行足夠長的時間，直到紅細胞遷移到觸變膠體下方，并且優選地，直到透明質酸遷移到富化血漿上方。在本發明一個較佳實施例中，離心處理步驟采用的力為或大約為1500克，處理時間大約為5分鐘。在另一個實施例中，離心處理步驟采用大約1000克至大約2000克之間的一個力處理大約3分鐘至大約7分鐘之間的一個時間，優選地,采用1500克的力處理大約3分鐘至大約7分鐘之間的一個時間。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸和抗凝血劑的管子。在本發明的另一方面，本發明提供一種含有透明質酸、抗凝血劑和全血的管子。優選地，抗凝血劑為檸檬酸鹽。另一方面，本發明 提供一種含有透明質酸和細胞選擇膠體的管子。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸、細胞選擇膠體和全血的管子。優選地，細胞選擇膠體為觸變膠體。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸、抗凝血劑和細胞選擇膠體的管子。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸、抗凝血劑、細胞選擇膠體和全血的管子。優選地，抗凝血劑為檸檬酸鹽。優選地，細胞選擇膠體為觸變膠體。優選地，該透明質酸位于管子底部，上方為觸變膠體，再上為抗凝血劑，優選為檸檬酸鹽(圖16)。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸和PRP的管子。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸、PRP和細胞選擇膠體的管子。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸、PRP和抗凝血劑的管子。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸、PRP、抗凝血劑和細胞選擇膠體的管子。優選地，抗凝血劑為檸檬酸鹽。優選地，細胞選擇膠體為觸變膠體。優選地，本發明的管子用于本發明的方法或工藝中。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸和PRP的組合物。另一方面，本發明提供一種含有透明質酸和PRP的組合物。其中所述組合物通過本發明傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物制備方法獲得。另一方面，本發明提供一種含有本發明管子的成套工具或醫療裝置。在進一步實施例中，本發明提供一種可用于制備傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的管子，其選自:i)含有聚酯型觸變膠體、檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)和透明質酸的玻璃分離管；
ii)含有由聚合物混合物形成的高度觸變膠體、無水朽1檬酸鈉(3.5mg/mL)和透明質酸的聚對苯二甲酸乙二醇酯分離管；iii)含有基于聚合物的觸變膠體、檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)和透明質酸的環烯烴共聚物(COC)或環烯烴聚合物(COP)分離管；或iv)含有透明質酸、檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)或無水檸檬酸鈉(3.5mg/mL)的環烯烴共聚物(COC)或環烯烴聚合物(COP)過濾分離管。在進一步實施例中，本發明提供一種根據本發明的管子，管子可用于制備傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物，可進一步含有檸檬酸鹽和透明質酸，例如，透明質酸和檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)或無水檸檬酸鈉(3.5mg/mL)。優選地，在人類使用時沒有使用鄰苯二甲酸鹽。作為一種選擇，水蛭素、苯甲酰基-DL-精氨酸-對硝基酰苯胺鹽酸鹽(BAPA)、肝素、檸檬酸鹽、枸櫞酸葡萄糖(ACD)、枸櫞酸-茶堿-腺苷-潘生丁(CTAD)、乙二胺四乙酸(EDTA)可用作為抗凝血劑。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物，含有:a)血漿；b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板；

c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞；d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原；e)約ImL至2mL的透明質酸；以及濃度低于0.6X1012個細胞/升的紅細胞。在一個實施例中，本發明的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物可與在牙科(TCP, 1(Γ30微米)和整形外科(TCP，50微米)中用作容積矯正劑的磷酸三鈣(TCP)和/或其他任何替代產品結合。在一個實施例中，本發明的傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、止血劑、血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物可在血液采集管子中與透明質酸結合。另一方面，本發明提供一種止血劑、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備工藝或方法，包括將凝血酶血清或本發明的凝血酶血清與本發明的富血小板血漿組合物、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物混合。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)提供一種本發明血小板濃縮液或血小板濃縮液；b)將血小板濃縮液與本發明的凝血活化劑、凝血酶血清或凝血酶血清混合；以及c)可選地，混入細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、血液組細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。優選地，使用自體血小板濃縮液、自體凝血酶和/或自體細胞抽提物。更加優選地，使用自體血小板濃縮液、自體凝血酶和自體細胞抽提物。優選地，使用本發明的管子。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)將血小板濃縮液與本發明任何方面的自體凝血酶血清混合；以及b)可選地，混入至少一種細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)將自體血小板濃縮液與凝血酶血清混合，其中自體血小板濃縮液和/或凝血酶血清采用本發明的管子進行制備；以及b)可選地，混入至少一種細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。另一方面，本發明提供一種傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)提供一種血小板濃縮液，優選為本發明的自體血小板濃縮液；b)將血小板濃縮液與凝血酶血清，優選為本發明的自體凝血酶血清,進行混合；以及c)可選地，混入至少一種細胞抽提物；優選地混入一種自體細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。優選地，本發明提供一種自體傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑制備方法或工藝。本文中的自體傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑是指其中血小板濃縮液或凝血酶血清為自體血小板濃縮液或凝血酶血清的組合物。在一個最佳實施例中，本發明提供一種完全自體傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑制備方法或工藝。本文中的完全自體傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑是指其中血小板濃縮液和凝血酶血清均為自體血小板濃縮液或凝血酶血清的組合物。在本發明的這個較佳實施例中，傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑的所有血液組分均來自于即將應用該傷口修復劑、組織修復劑或止血劑的同一個患者或動物。另一方面，本發明提供與至少一種自體細胞抽提物混合的完全自體傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑的制備方法或工藝。在這一方面，血小板濃縮液、凝血酶血清和細胞抽提物均來 自于自體，因此都來自于同一個患者或動物。另一方面，本發明提供一種自體傷口修復劑組合物、自體組織修復劑組合物或自體止血劑的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)將自體血小板濃縮液，優選為本發明的自體血小板濃縮液，與自體凝血酶，優選為本發明的自體凝血酶，進行混合；以及
b)可選地，混入至少一種細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。其中自體血小板濃縮液和自體凝血酶均來自于同一個患者或同一個動物。另一方面，本發明提供一種自體傷口修復劑組合物、自體組織修復劑組合物或自體止血劑的制備工藝或方法，包括下列步驟:a)將自體血小板濃縮液，優選為本發明的自體血小板濃縮液，與自體凝血酶，優選為本發明的自體凝血酶，進行混合；以及b)可選地，混入至少一種自體細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。其中自體血小板濃縮液、自體凝血酶和自體細胞抽提物均來自于同一個患者或同一個動物。本發明的富血小板血漿、自體富血小板血漿、凝血酶血清、自體凝血酶血清、傷口修復劑組合物或組織修復劑 組合物或止血劑可與一種或多種細胞抽提物合并。在一個實施例中，細胞抽提物選自角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞。本發明的傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑將刺激細胞再生，起生物膠的作用，以促進組織粘連。在一個實施例中，可不用凝血酶血清，而使用備選凝血活化劑，例如，氯化鈣，優選地，使用葡萄糖酸鈣。在一個實施例中，多種凝血活化劑可合并使用，優選地凝血酶血清與葡萄糖酸鈣合并使用。優選地，凝血酶活化劑或凝血酶血清與血小板濃縮液混合，體積比例大約為10:1至10:3 (血小板濃縮液:凝血酶活化劑)。在本發明的一個較佳實施例中，按液體血清與富血小板血漿成1:1、3:1或10:1的比例采集液體血清。所采用的特定比例將改變止血劑的硬度。在比例為3:1時，可獲得強止血劑。在比例為10:1時，可獲得較柔和的止血劑。在一個實施例中，PRP或血漿濃縮液單獨或者合并細胞提取物以及本發明制劑或組合物可與浸泡脫細胞基質合并或融合，以直接敷用于傷口，或可在敷用前在實驗室中培養。可使用膠原蛋白或合成基質，例如，人工真皮(Integra)基質。另一個實施例是將人重組凝血酶原激酶直接與富血小板血漿混合，以形成傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑。另外，利用人重組凝血酶原激酶在少量血漿中生成凝血酶，然后將得到的凝血酶與富血小板血漿合并，以形成傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑。在一個實施例中，所使用的管子可具有可濕表面(如二氧化硅、硅藻土、高嶺土等)或具有非可濕表面(如塑料、硅化玻璃等)。因為表面在凝血活化過程中起一定的作用，所選分離管表面取決于凝塊形成的速度。還可使用化學活化劑如高嶺土來加速凝血時間，然而后續也有必要將其剔除。有優勢的是，本發明富血小板血漿、血小板濃縮液、凝血酶血清和傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑的制備并不需要使用乙醇和/或鈣。通過利用本發明的自體凝血酶，本發明不需要回復血凝塊形成過程。這樣，不需要采用諸如氯化鈣或葡萄糖酸鈣等藥劑(修復劑)來逆轉(在修復含檸檬酸鹽的血液的凝血活動中的)抗凝血劑的作用。雖然眾所周知氯化鈣是一種用作為修復劑的鈣鹽，但是任何一種以氯化鈣方式起作用的鈣鹽均可以考慮作為修復劑。同樣地，盡管目前人們相信很多凝血反應需要鈣離子作為輔因子，但是可以考慮將已知或之后發現功能上與促進這些凝血反應的鈣等效的任何物質作為修復劑，可單獨或者與鈣合并作為修復劑。如果所使用的抗凝血劑為肝素，則要使用肝素酶作為修復劑，以逆轉抗凝血酶劑的作用。有優勢的是，本發明提供富血小板血漿、血小板濃縮液、凝血酶血清、和傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑，其中消除與使用牛和重組人凝血酶相關的風險。有優勢的是，采用本發明的方法可獲得濃度較高的富血小板血漿、生長因子、粒細胞、纖維蛋白原和/或其他蛋白。有優勢的是，與正常血液學水平相比，采用本發明方法可獲得兩倍濃度的富血小板血漿、生長因子、粒細胞、纖維蛋白原和/或其他蛋白。有優勢的是，本發明方法為細胞擴張帶來一種最佳的的細胞生產力。有優勢的是，本發明方法允許在整個過程中，從血液采集、操控直到在患者身上敷用或注射，在完全閉路的條件下操控血液。因此，所有設備和成套工具都適用于全閉路操控，以避免血液與空氣直接接觸。有優勢的是，本發明方法`可降低氧化應激并縮短離體操控時間。有優勢的是，本發明方法可形成一種由聚集血小板和活化聚合纖維蛋白原組成的固體自體飽和膜。本發明制劑(例如骨髓細胞制劑)可單獨使用或者混入本發明血小板濃縮液或者用葡萄糖酸鈣再次進行離心處理，以形成可縫合膜，可用敷藥器將其涂敷或注射至患者受傷部位。本發明骨髓細胞制劑可用于治療骨質缺損或軟骨缺損。骨細胞制劑可單獨使用或者也可與本發明血漿濃縮液合并使用。軟骨膜也可以與葡萄糖酸鈣一起使用。在本發明一個較佳實施例中，離心處理步驟(例如，可縫合膜離心處理步驟)采用大約3000克的力處理約15至約25分鐘的時間。在一個實施例中，離心處理步驟采用約2500克至約3500克之間的一個力處理約10至約30分鐘之間的一個時間。在本發明一個實施例中，從人或動物身上采集全血。在本發明的一個較佳實施例中，從人身上采集全血。另一方面，本發明提供依照本發明制備的傷口或組織修復劑組合物或止血劑，含有:a)血漿；b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板；c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞；
d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原；e)凝血活化劑、自體凝血酶血清或本發明自體凝血酶血清；f)可選的自體細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成骨細胞、軟骨細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物。其中，紅細胞濃度低于0.6X1012個細胞/升。另一方面，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物或止血劑，含有:a)血漿；b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板；c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞；d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原；e)本發明的自體凝血酶血清；f)可選的自體細胞抽提物，如角質形成細胞、骨髓細胞、成骨細胞、軟骨細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物。其中，紅細胞濃度低于0.6X1012個細胞/升。優選地，凝血活化劑或自體凝血酶血清的體積比(血小板血漿:凝血活化劑)大約為 10:1 至 10:3。

有優勢的是，與已知培養基相比，本發明的血漿代表理想的培養基。有優勢的是，本發明的血漿代表理想的細胞運輸介質。相應地，本發明的血漿包含實現最佳細胞生長和生存需要的所有細胞和生長因子。相應地，本發明的血漿表示非常適合將細胞移植至患者的介質，例如，用于外科手術傷口的特應性敷用，抗衰老注射、關節注射、肌肉注射、或胰腺再生(胰島)。另一方面，本發明提供一種血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口或組織修復劑組合物或本發明的自體凝血酶血清的制備設備。另一方面，本發明提供一種包括至少一支本發明管子的裝置。優先地，該裝置具有一個引入所述全血的入口，抽真空以便抽吸全血樣本，無菌，具有大約8mL至IOmL的可用真空,并且適用于離心處理。另一方面，本發明提供一種使用本發明血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口或組織修復劑組合物或凝血酶血清來制造一種傷口愈合或者促進骨頭或牙周膜和/或骨頭和/或組織再生的藥物。另一方面，本發明提供一種使用本發明血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口或組織修復劑組合物或凝血酶血清來制造一種美容制劑的用途，制劑用作抗衰老劑或皮膚修復劑，如疤痕修復劑、皺紋填充和/或修復劑。另一方面，本發明提供一種根據本發明的血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口或組織修復劑組合物或凝血酶血清，用作為美容制劑、美塑制劑、抗衰老制劑、容積矯正劑、皺紋填充劑、祛褐斑制劑和/或頭發生長劑。在一個實施例中，根據本發明的血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或凝血酶血清被涂敷于眼睛、嘴唇、眼瞼、臉、頸、胸、頭皮、頭發、手及身體所有其他部位上面或周圍和/或男人和女人生殖器上面或周圍。另一方面，本發明提供一種根據本發明的血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或凝血酶血清，用于韌帶和/或軟骨重建。有優勢的是，與已知方法相比，使用本發明組合物的韌帶和/或軟骨重建時間要除以一個系數2或3。在一個實施例中，該美容制劑和/或美塑制劑與一種美容藥劑、美容乳霜或美容面膜合并使用。另一方面，本發明提供一種藥物組合物，包含根據本發明的血小板濃縮液組合物、富血小板血衆組合物、止血劑、傷口或組織修復劑組合物或凝血酶血清的藥物組合物和藥學上可接受的載體。另一方面，本發明提供一種美容組合物，包含根據本發明的血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口或組織修復劑組合物或凝血酶血清和美容上可接受的載體。另一方面，本發明提供一種可用于組織再生療法的可植入裝置，包括:a)含有根據本發明的血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑或傷口修復劑組合物的可滲透核心，可選地與透明質酸結合；以及b)可選地，一個圍繞所述核心的外套，所述外套含有生物兼容材料，優選為生物吸收性材料，優選為透明質酸。另一方面，本發明提供包括 至少一支本發明管子的成套工具。另一方面，本發明提供一種包括一支用于制備本發明血小板濃縮液的管子和/或一支用于制備本發明凝血酶血清的管子的成套工具。另一方面，本發明提供了一種成套工具，包括至少一支用于制備根據本發明的血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口或組織修復劑組合物或凝血酶血清的管子。在一個實施例中，該成套工具進一步包括一支或多支用于制備根據本發明的血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口或組織修復劑組合物或凝血酶血清的管子。在一個實施例中，該成套工具進一步包括傷口或組織修復劑制備附件和一個敷藥裝置(例如，雙筒注射器)，以便將本發明血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血齊IJ、傷口或組織修復劑組合物或凝血酶血清同時涂敷到傷口上。在一個實施例中，該成套工具適用于組織再生。另一方面，本發明提供一種促進傷口愈合或組織愈合和/或封口和/或人或動物傷口或組織的組織和/或骨頭再生的方法，包括:a)提供本發明的傷口修復劑或組織修復劑組合物或止血劑；以及b)在傷口、受損組織或受損骨頭上敷用治療有效量的傷口或組織修復劑或止血劑。另一方面，本發明提供一種治療方法，包括:a)提供本發明的傷口修復劑或組織修復劑組合物或止血劑；以及b)在傷口、受損組織或受損骨頭上敷用治療有效量的傷口或組織修復劑或止血劑。另一方面，本發明提供一種在患有牙周病或因其他疾患需要牙周再生的哺乳動物的傷口或牙周缺損部位誘導牙周再生的方法，包括:a)提供本發明的傷口修復劑或組織修復劑組合物或止血劑； b)在傷口、組織或牙周缺損或腔體敷用治療有效量的傷口或組織修復劑組合物或止血劑；c)可選地，插入牙周屏障；以及d)封閉傷口或組織。優選地，所述屏障位于牙齦組織和按步驟a)和b)治療的傷口或組織之間。在一個實施例中，所述屏障選自薄膜、生物可降解聚合物和/或生物兼容性多孔材料。可按30:70或50:50的比例把PRP和葡萄糖酸鈣(10%)混合獲得該薄膜。離心處理時間大約30分鐘。另一方面，本發明提供一種促進人或動物疤痕或皺紋皮膚再生的方法，包括:a)提供本發明的傷口或組織修復劑組合物或止血劑；以及b)用所述傷口或組織修復劑組合物或止血劑填充皮膚疤痕或皺紋線。另一方面，本發明提供一種細胞組合物的制備工藝，包括下列步驟:a)離心處理本發明管 子中的全血；b)可選地，將富化富血小板血漿從全血漿中分離出來；以及c)重新懸浮富化血漿；d)提供細胞抽提物，如真皮細胞的抽提物，如角質形成細胞、成纖維細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、骨髓細胞、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、骨膜過濾細胞(periosteal filter cell)、角膜細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物；以及e)將步驟c)中獲得的血小板濃縮液與步驟d)中獲得的細胞抽提物混合。優選地,離心處理步驟采用的力為或大約為1500克至約2000克。優選地,離心處理步驟的處理時間應該足夠長，以便在含血小板、淋巴細胞、單核細胞的血漿和含紅細胞的丸子之間形成一道屏障。優選地，分離步驟b)通過從所述屏障頂部采集上清液而進行。在一個實施例中，通過除去含貧血小板血漿的那一半上清液，使富化富血小板血漿從全血漿中分離出來。優選地，與原來的全血相比，富化血漿含有富化的白細胞、凝血細胞和黏著蛋白或黏著蛋白(例如，纖維連接蛋白)。另一方面，本發明提供了一種傷口或組織愈合組合物的制備工藝，包括下列步驟:a)離心處理本發明管子或分離管中的全血；b)可選地，將富化富血小板血漿從全血漿中分離出來；c)重新懸浮富化血漿；d)將步驟c)獲得的血小板濃縮液與凝血活化劑、凝血酶血清、自體凝血酶血清或本發明自體凝血酶血清混合。e)提供細胞抽提物，如真皮細胞的抽提物，如角質形成細胞、成纖維細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、骨髓細胞、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、骨膜過濾細胞、角膜細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物；f)將步驟d)中獲得的血小板濃縮液混合物與步驟e)中獲得的細胞抽提物混合。優選地,離心處理步驟采用的力為或大約為1500克至約2000克。優選地,離心處理步驟的處理時間應該足夠長，以便在含血小板、淋巴細胞、單核細胞的血漿和含紅細胞的丸子之間形成一道屏障。優選地，分離步驟b)通過從所述屏障頂部采集上清液而進行。在一個實施例中，通過除去含貧血小板血漿的那一半上清液，使富化富血小板血漿從全血漿中分離出來。優選地，與原來的全血相比，富化血漿含有富化的白細胞、凝血細胞和黏著蛋白或黏著蛋白(例如，纖維連接蛋白)。優選地，凝血活化劑或自體凝血酶血清的體積比(血小板血漿:凝血活化劑)大約為 10:1 至 10:3。另一方面，本發明提供一種根據本發明制備的分離細胞組合物，含有:a)血漿；b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板；c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞；d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原；e)細胞抽提物，如角質形成細胞、成纖維細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、骨髓細胞、肌肉細胞如成肌細胞和 衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、骨膜過濾細胞、角膜細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物；優選地，該細胞濃度約為每毫升血漿或富化血漿IO5至IO6個細胞。紅細胞濃度低于0.6X1012個細胞/升。另一方面，本發明提供一種根據本發明制備的分離細胞組合物，含有:a)血漿；b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板；c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞；d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原；e)凝血活化劑、凝血酶血清、自體凝血酶血清或本發明自體凝血酶血清；f)細胞抽提物，如角質形成細胞、成纖維細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、骨髓細胞、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、骨膜過濾細胞、角膜細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物；優選地，凝血活化劑或自體凝血酶血清的體積比(血小板血漿:凝血活化劑)大約為 10:1 至 10:3。優選地，所述細胞濃度約為每毫升血漿或富化血漿IO5至IO6個細胞。紅細胞濃度低于0.6X1012個細胞/升。另一方面，本發明提供含有本發明分離細胞組合物的傷口或組織修復劑組合物或止血劑。另一方面，本發明提供一種促進傷口愈合或組織愈合和/或封口和/或人或動物組織和/或軟骨和/或骨頭和/或神經再生的方法，包括:a)提供本發明傷口或組織修復劑組合物、止血劑或細胞組合物；以及b)在傷口、受損組織、受損軟骨或受損骨頭上敷用治療有效量的傷口或組織修復齊U、止血劑或細胞組合物。另一方面，本發明為需要真皮脂肪移植或因其他疾患需要脂肪組織再生的哺乳動物提供一種增加脂肪組織體積的方法，包括:a)提供本發明脂肪細胞組合物；b)將治療或美容有效量的脂肪細胞組合物與本發明PRP或血漿濃縮液合并，敷用至真皮脂肪移植或需要脂肪組織再生的脂肪組織上；以及c)可選地，插入一個外科瓣或植入物，其中該外科瓣或植入物位于需要再生或容積擴大的部位，所述外科瓣或植入物含有本發明脂肪細胞制劑和PRP、血漿濃縮液或富化血漿材料的混合物。另一方面，本發明提供一種在患有心肌缺失或因其他疾患需要心肌再生組織再生的哺乳動物身上誘導心肌再生的方法，包括:a)提供本發明肌肉細胞或骨髓細胞組合物；以及b)將治療有效量的 肌肉細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用在需要再生的心肌組織上。另一方面，本發明提供一種在患有眼角膜缺失或因其他疾患需要眼角膜再生的哺乳動物身上誘導眼角膜再生的方法，包括:a)提供本發明角膜細胞組合物；以及b)將治療有效量的角膜細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用在需要再生的眼角膜組織上。另一方面，本發明提供一種在患有關節或軟骨缺失或因其他疾患需要關節或軟骨組織再生的哺乳動物身上誘導關節或軟骨再生的方法，包括:a)提供本發明軟骨細胞或骨髓細胞組合物；b)將治療有效量的軟骨細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用在需要再生的關節或軟骨組織上。c)可選地，插入一個外科瓣或植入物，其中該外科瓣或植入物位于關節缺損部位或位于骨膜片下，該外科瓣或植入物含有本發明軟骨細胞或骨髓細胞制劑和PRP、血漿濃縮液或富化血漿材料的混合物。另一方面，本發明提供一種促進人或低等動物疤痕、皺紋或脂肪缺失部位皮膚再生的方法，包括:a)提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑或細胞組合物，與本發明PRP或血漿濃縮液合并使用；以及b)將傷口或組織修復劑組合物、止血劑或細胞組合物合并本發明PRP或血楽:濃縮液，填充皮膚疤痕、皺紋線或脂肪缺失部位。另一方面，本發明提供一種在患有末梢神經損傷、神經縫術或脊髓損傷或因其他疾患需要末梢神經再生的哺乳動物身上誘導末梢神經再生的方法，包括:a)提供一種雪旺氏細胞組合物，合并使用本發明PRP或血漿濃縮液；以及b)將治療有效量的雪旺氏細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用至需要再生的末梢神經上。另一方面，本發明提供一種在患有骨損傷、骨缺失或因其他疾患需要骨頭再生的哺乳動物身上誘導骨頭再生的方法，包括:a)提供一種骨髓細胞或成骨細胞組合物，與本發明PRP或血漿濃縮液合并使用；以及b)將治療有效量的骨髓細胞或成骨細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用在需要再生的骨頭上。另一方面，本發明提供一種治療哺乳動物I型糖尿病、胰島素依賴性糖尿病或高血糖癥的治療方法，包括:a)提供一種胰島細胞組合物，與本發明PRP或血漿濃縮液合并使用；以及b)將治療有效量的胰島細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用在患者身上，例如，采用注射方法。另一方面，本發明提供一種哺乳動物尿失禁或其他需要膀胱再生的疾患的治療方法，包括:a)提供一種成肌 細胞組合物，與本發明PRP或血漿濃縮液合并使用；以及b)將治療有效量的成肌細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用在需要再生的膀胱頸部。另一方面，本發明提供一種哺乳動物肛門失禁或其他需要肛門肌肉再生的疾患的治療方法，包括:a)提供一種成肌細胞組合物，與本發明PRP或血漿濃縮液合并使用；以及b)將治療有效量的成肌細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用在需要再生的肛門周圍。另一方面，本發明提供一種哺乳動物回流性食管炎、胃食道逆流疾病或其他需要食管括約肌再生的疾患的治療方法，包括:a)提供一種成肌細胞組合物，與本發明PRP或血漿濃縮液合并使用；b)將治療有效量的成肌細胞組合物合并本發明PRP或血漿濃縮液，敷用在需要再生的食管括約肌上。另一方面，本發明提供一種使用本發明傷口或組織修復組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑來制造一種藥物的用途，藥物用于愈合傷口或組織、化療、肌肉或促進骨頭或牙周膜生長和/或骨頭和/或組織再生，如皮膚、軟骨膜、肌肉、跟腱、脂肪組織、眼角膜、末梢神經、脊椎或骨頭再生。另一方面，本發明提供一種使用本發明傷口或組織修復組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑來制造一種美容制劑的用途，制劑用作抗衰老劑或皮膚修復劑，如疤痕修復齊 、脂肪萎縮修復劑、皺紋填充和/或修復劑。另一方面，本發明提供一種藥物組合物，包含本發明傷口或組織修復組合物、止血齊U、細胞組合物或細胞制劑以及藥學上可接受的載體。
另一方面，本發明提供一種美容組合物，包含本發明傷口或組織修復組合物、止血齊U、細胞組合物或細胞制劑以及美容上可接受的載體。另一方面，本發明提供一種可用于組織再生療法的可植入裝置，包括:a) 一個可滲透核心，含有本發明傷口或組織修復組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑，可選與透明質酸合并使用；以及b) 一個圍繞所述核心的外套，所述外套含有生物兼容材料，優選為生物吸收性材料，優選為透明質酸。在一個實施例中，本發明的組合物、傷口或組織修復劑組合物、細胞抽提物、細胞組合物、血漿濃縮液和凝血酶制劑使用異體物質、組合物、血液或細胞。本發明的用途、方法和組合物有用于組織、骨頭和/或軟骨膜再生和/或復新。本發明的用途、方法和組合物在治療下列疾病或治療方面特別有用:糖尿病神經性潰瘍或褥瘡潰瘍；骨頭和軟骨損傷，如深層關節軟骨或軟骨損傷，如手術修復撕裂的跟腱；因外傷或年齡引起的關節炎；肩腱袖病；久治不愈的傷口，如馬的下肢上因脈管炎引起的傷口 ；牙周疾病；植入外科手術；心血管、胸、一直、頭頸、口腔、胃腸、整形外科、神經外科及整形手術；化療和/或化療注射；心肌損傷，如慢性心力衰竭、心力衰竭、缺血性及非缺血性病癥及心肌病；胃食管反流；肛門或尿失禁；面部手術，如面部手術引起的禿頭癥(鬢腳部位因頭發毛囊損失引起的禿頭癥)、掉發、脫發、整容手術(皺紋切除術)、鼻整形術、真皮脂肪移植(面部充填和面部先天性偏側萎縮治療如HIV/AIDS感染患者的先天性軟骨鼻子萎縮和脂肪萎縮、生殖功能障礙、糜爛及關節鏡檢查)；傷口愈合并發癥，如眼瞼成形術之后的傷口愈合并發癥；角膜疾病，如化學燒傷引起的角膜混濁、史提芬約翰遜綜合征損傷和角膜潰瘍；干眼癥；血液疾病，如地中海貧血；末梢神經損傷、神經縫合、及脊髓受損；骨質缺損或疾病如骨移植或骨裂、皮 膚損傷或疾病如痤瘡(特別是皮膚磨削術治療之后)、燒傷、風疹或小痘疤痕、白癲風、脂肪萎縮、卡波濟氏肉瘤、皮膚瘢痕或掌跖纖維瘤病。本發明的用途、方法和組合物在組織愈合中有用，包括骨頭再生與修復、有絲分裂、血管再生和/或巨噬細胞活化。本發明的另外優點和新穎特征不但將在以下說明中闡明，而且本領域技術人員通過查閱下列說明書可以顯而易見或者可以通過實施本發明而掌握。本發明的目標和優點可通過相應手段、組合、組合物、以及隨附的權利要求書中特別指出的方法而實現并獲得。本發明的組合物、用途和方法在止血、組織再生、恢復、水合和/或刺激方面特別有用，可作為生物膠、生物粘合劑或生物填充材料。有優勢的是，本發明的強力生物膠與其他已知產品相比具有更高的機械強度，特別適用于所有有創手術干預。本發明的此等生物膠通過含有相應的細胞、血小板、白細胞、生長因子及可減少/防止最終感染的其他因子而提高治療受損組織的能力。本發明的組合物、用途和方法特別有用于傷口治療、手術、整形外科用注射以及美塑、美容或容積矯正用注射。另一方面，本發明的組合物、用途和方法在皮膚組織再生和/或復新方面很有用，特別是在下列方面:促進和/或激發皮膚再生，如減少皺紋、深層皺紋、痤瘡(特別是皮膚磨削術治療后出現的這種疤痕)、燒傷、風疹或小痘疤痕、白癲風和脂肪萎縮(例如，抗衰老組合物和皮膚再生組合物)、鼻唇線改良與皮膚損傷或疾病治療如皮膚燒傷、卡波濟氏肉瘤、皮膚瘢痕或掌跖纖維瘤病、減少與皮膚或組織相關的疼痛、以及痔座墊、勃起功能障礙、空洞、海綿體纖維化、派羅尼病(陰莖硬結癥)、陰道和/或陰唇疾病。另一方面，本發明的組合物、用途和方法在下列方面特別有用:膝蓋、肘、(撕裂的)肌肉、脊椎、椎間盤、跟腱及韌帶的組織愈合、再生治療或運動醫學；創傷或手術傷口的治療，如安裝和/或承托和/或封閉自體移植或假肢移植(特別是皮膚、骨移植和或假牙或牙移植或類似的東西，還包括移植物供體部位)；關節炎、膝關節炎、跟腱炎、肩袖的治療；脈管炎、潰瘍如糖尿病神經性潰瘍或褥瘡潰瘍的治療；放射性皮炎(例如，皮膚表皮樣癌輻射治療后)及瘺管閉合(如為自行車騎手所做)的治療。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療心臟疾患、心臟再生方面特別有用，例如,治療心力衰竭、慢性心力衰竭、缺血性及非缺血性心力衰竭及心肌病。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療尿失禁和/或肛門失禁方面特別有用。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療回流性食管炎和/或胃食管反流病方面特別有用。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療皮膚損傷和/或皮膚復新治療方面特別有用，例如，輻射損傷(放射性皮炎或陽光灼傷皮膚)、老化皮膚或燒傷皮膚和/或面部皺紋、褶皺、痤瘡(特別是皮膚磨削術治療之后)、燒傷、風疹或小痘疤痕、白癜風、脂肪萎縮或脂肪代謝障礙、卡波濟氏肉瘤、皮膚瘢痕或掌跖纖維瘤病。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療脂肪萎縮方面特別有用，如HIV/AIDS患者脂肪萎縮及其他患者的面部先天性偏側萎縮(如先天性鼻副軟骨萎縮)。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療骨頭、軟骨和關節疾病方面特別有用，如，軟骨損傷、關節炎、軟骨和/或骨頭損傷(如深層 軟骨損傷和/或侵蝕和/或關節鏡檢查)、跟腱撕裂、及肩袖。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療血液病如地中海貧血特別有用。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療眼角膜基本方面特別有用，如，干眼癥；眼角膜混濁，如化學燒傷引起的角膜混濁以及史蒂文斯-約翰遜綜合征(又稱口腔-粘膜-皮膚-眼綜合征或多形性滲出性紅斑癥)；眼角膜傷疤及眼角膜潰瘍。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療末梢神經損傷、神經縫合及脊髓方面特別有用。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療I型糖尿病、胰島素依賴性糖尿病和/或聞血糖癥方面特別有用。另外，本發明的組合物、用途和方法在治療骨質缺損或疾病方面特別有效，如，骨移植或骨裂。本發明所得的組合物的用途可在應用之前以及根據治療目標做進一步修改。本發明組合物可以與骨填充材料一起使用，特別是可吸收的填充材料，如羥磷灰石(磷酸鈣陶瓷，用作為生物材料)或不含礦物質的骨頭，或者與骨頭抽提物混合在骨頭再生過程中使用，例如，在顱面和整形外科程序中使用。根據用途或疾病，本發明組合物可與10%透明質酸、20%透明質酸、30%透明質酸、40%透明質酸和/或50%透明質酸一起使用。本發明組合物可在整形手術包括燒傷移植和其他自由皮膚移植應用中用作為傷口封閉劑，例如，腫瘤治療中皮膚再生，包括加速新血管形成。本發明組合物在皮膚移植供體部位的傷口愈合治療中特別有用。在健康皮膚上取下皮膚植片會在供體部位留下新的傷口，通常要12至14天才能自行愈合。然而，這種愈合對身體要求特別高，特別是當供體部位范圍大或者當事人抵抗力弱(例如，燒傷受害者、有多種創傷的患者、用腎上腺皮質激素治療的患者，少兒或老齡患者)以及新傷口流通損失引起的礦物質、微量元素及蛋白質損失甚至提高了能量損失時。另外，移植供體部位在前8天通常會出現疼痛。通常采取鎮痛治療，例如，使用止疼劑(例如嗎啡)和/或囊水腫傷口敷料；然而，疼痛依然會持續，特別是在植片取下48小時至一周之內更換敷料時。另外，囊水腫傷口敷料的缺點是不僅非常昂貴，還會使傷口保持濕度，防止干燥、增加了傷口深度、有利于細菌感染，從而會導致難看的疤痕。因此,迫切需要刺激皮膚移植供體部位的愈合。本發明組合物特別適用于缺少足夠血液循環的慢性傷口，可以加快傷口愈合一系列過程。本發明組合物和方法還可用于治療牙周組織損失和/或損傷等牙周疾病，例如，其療法包括將本發明組合物敷用在需要牙周組織再生的人或低等動物的牙周部位或腔體。本發明組合物能夠有效消除或大大減少術后流血和在這些應用中漿液或其他流體外滲或損失，降低大多是細菌引起的感染風險和/或與自然愈合(即，沒有使用外源性藥齊IJ)或通過使用已知方法制備的其他血小板濃縮液愈合相比能夠增強結締組織的形成。本發明組合物特別有用于制備促進和/或激發傷口愈合和/或組織再生的藥物或制備促進皮膚再生，如消除皮膚皺紋，潰瘍(特別是皮膚磨削術治療后)、風疹或小痘疤痕、白癲風及脂肪萎縮的美容組合物(例如，抗衰老組合物和皮膚再生組合物)。本發明組合物可局部給藥或注射在傷口或移植器官或移植器官附近或皮下注射。局部給藥的方式多種多樣，可以在損傷或缺損部位注射，在相應部位插入或附加固體載體，與乳膏或乳液混合，夾帶在棉紙、紙或水凝膠載體中，直接局部涂敷本發明組合物，例如，以滴眼劑的形式。優選地，組 合物為可注射的組合物。個體的給藥方式和單劑或多劑的給藥劑量隨各種因素變化，包括藥物動力學特性、患者病情和特點(性別、年齡、體重、將康狀況、身高)、癥狀程度、并行治療、治療頻率及期望效果。本發明組合物可以合并使用一種治療組織再生有效的助劑如修復劑、一種皺紋填充劑、一種抗衰老劑如抗衰老復合維生素、一種抗菌劑、抗微生物劑、皮質留類劑、鎮痛劑及止疼劑、或麻醉劑如腎上腺素，等等。本發明包含與一種治療組織再生有效的助劑合并的組合物，可在組織再生療法如傷口愈合、骨頭和牙周膜生長修復中同時、獨立或順序地使用。本發明組合物及本發明自體血小板濃縮液或細胞組合物的制備裝置與程序在治療中特別有用，特別是在止血系統中作為自體生物膠時，例如，在牙齒種植、皮膚和骨外科手術、軟骨和跟腱手術、眼角膜和末梢神經再生以及心臟外科手術中，它能夠加速組織再生的生物過程。本發明組合物及本發明自體血小板濃縮液或細胞組合物的制備裝置與程序特別有用于美容用途，特別是作為自體復新材料用，例如，單獨或與至少一種抗衰老劑混合作為皺紋、疤痕或脂肪缺損填充材料。本發明血小板濃縮液可與自體細胞抽提物制劑合并使用，例如，角質形成細胞、骨髓細胞、成骨細胞、軟骨細胞、成纖維細胞、骨外膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、骨膜過濾細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、角膜細胞、臍帶細胞、跟腱細胞或胰島細胞。角質形成細胞可通過Reinwald和Green介紹的方法獲得(1975，Cell, 6 (3): 331-43)。上述提及的其他細胞可通過 “Culturede cellules animales”("m6thologies_applications"，2003，Ed.Barlovatz-Meimomand Adolphe, INSERM editions, Paris)中介紹的方法獲得。另外，細胞抽提物也可通過細胞庫或細胞培養得到或通過下列例子中介紹的方法獲得。實踐已經證明本發明血小板濃縮液和細胞組合物在加速和/或促進傷口、甚至慢性久治不愈型傷口的愈合過程方面確實很有效，對于采用其他常規治療數周都無效的傷口，能夠成功實現傷口封口，降低感染風險，提高患者康復和舒適度，降低醫療成本，從美容上而言最終能夠獲得較好的治療效果。當然，本發明組合物也可用幾個可辨識的供體獲得的血漿制備。本發明并不局限于自體生物材料，如從傷者自己的生物材料中采集濃縮血小板。本發明包含使用從一個或多個第三方獲得的生物材料，所述一個或多個第三方并不一定非要是其傷口正在采用本文所述傷口修復劑組合物進行治療的同一物種的患者，除非使用此等第三方生物材料會導致生物兼容性問題。在一個實施例中，本發明提供一種本文所述血小板濃縮液組合物或細胞組合物的制備工藝。在一個實施例中，本發明提供一種從全血中制備本文所述血小板濃縮液的裝置。在另一個實施例中，本發明提供一種凝血酶血清和/或血小板濃縮液組合物的制備工藝，其中離心處理步驟以大約1500克至大約1700克離心處理大約3分鐘至大約15分鐘之間的一個時間，優選地，以1500克處理大約8分鐘。在另一個實施例中，本發明提供一種血小板濃縮液組合物的制備工藝，其中，該管子具有一個引入所述全血的入口，其抽真空以便抽吸全血樣本，無菌，具有大約8mL至IOmL的可用真空，并且適用于離 心處理。在另一個實施例中，本發明提供一種血小板濃縮液組合物制備工藝，其中，該管子為含有由聚合物混合物形成的高度觸變膠體和無水朽1檬酸鈉(3.5mg/mL)的聚對苯二甲酸
乙二醇酯管子。在另一個實施例中，本發明提供一種可從本發明工藝中獲得的分離血小板濃縮液組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種可從本發明工藝中獲得的分離血小板濃縮液組合物，含有:a)血漿；b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板，優選地，濃度至少為350X109個細胞/升，更優選地，濃度至少為400X109個細胞/升；c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞，優選地，濃度至少為8xl09個細胞/升；d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原；優選地，紅細胞濃度低于0.4X1012個細胞/升或0.5X1012個細胞/升；另一方面，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物，含有:a)血漿；b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板，優選地，濃度至少為350X109個細胞/升，更優選地，濃度至少為400X109個細胞/升；c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞，優選地，濃度至少為8xl09個細胞/升；
d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原；e)本發明的凝血酶血清；以及f)可選地，自體細胞抽提物，例如，角質形成細胞、骨髓細胞、成骨細胞、軟骨細胞、成纖維細胞、骨外膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、骨膜過濾細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、前內皮細胞、角膜細胞、臍帶細胞、跟腱細胞或胰島細胞抽提物。優選地，凝血活化劑或凝血酶血清的體積比(血小板血漿:凝血活化劑)大約為10:1 至 10:3。優選地，所述細胞濃度約為每毫升血漿或富化血漿IO5至IO6個細胞。紅細胞濃度低于0.4X1012個細胞/升或0.5X1012個細胞/升。在一個實施例中，本發明提供一種本文所述傷口或組織修復劑組合物的制備工藝。在一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物制備工藝，其中所混合的凝血活化劑是葡萄糖酸I丐或10%的氯化隹丐。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物制備工藝，其中，與血小板濃縮液(PRP)混合的凝血活化劑是凝血酶富化制劑，可以進一步與葡萄糖酸鈣或氯化鈣混合。美國專利6，472，162中介紹了一種用于生物膠的凝血酶制備方法，其中將8%至20%的乙醇添加至一定量的血漿中，該制劑可用作為本發明的凝血酶富化制劑。另外，自體凝血酶血清可用作為本發明的一種凝血酶富化制劑。本發明的備選自體凝血酶血清用包含下列步驟的工藝獲得:(i )在用本發明分離管采集的患者的全血樣(例如，8mL)中添加占最終體積10%的10%氯化鈣和占最終體積10%的95%乙醇溶液制劑(例如，ImL)以及(ii)在室溫下沉淀約30分鐘。30分鐘后，用大約1500克的力進行離心處理大約8至10分鐘。在另一個較佳實施例中，凝血酶富化制劑和優選地本發明自體凝血酶血清與傷口的血小板濃縮液(PRP)直接混合。在另一個實施例中，本發明提供一種本發明傷口或組織修復劑組合物制備工藝，進一步包括一個步驟b’)，其中，在步驟b)中獲得的活化富血小板制劑組合物(將血小板濃縮液與凝血活化劑或自體凝血酶血清混合獲得)可通過與被一軟疏水層覆蓋的傷口敷料接觸進行部分脫水，以避免敷料中的微帶感染，從而獲得半固體膠體，該半固體膠體可采用相應的儀器操控，例如，可將其填入腔體或組織缺損部位，或者在等待自體細胞外基質重建時可用作為生長基質(“支架”)。獲得的傷口或組織修復劑在傷口、組織或牙周缺損或腔體誘導牙周再生的方法中特別有用。在另一個實施例中，本發明的血小板濃縮液、傷口或組織修復劑組合物、細胞組合物可合并水凝膠諸如100%白蛋白Albugel (EP1543846)制劑或從白蛋白網狀組織中獲得的任何其他水凝膠以及其他化學復合物如聚乙二醇或任何其他成分，采用高度親水的紙類載體與皮膚接觸，直到富血小板血漿被吸收。添加鈣離子會影響本發明的傷口或組織修復劑組合物的抗拉強度。因此，如果希望獲得較強的傷口或組織修復劑組合物，可在血清與血小板濃縮液混合的時候添加鈣離子。另外，可將鈣離子直接引入血小板濃縮液，這樣將分別形成傷口或組織修復劑組合物。如下面進一步詳述，形成本發明傷口或組織修復劑組合物所需要的時期取決于添加的血清量。血清與血小板濃縮液按1: 4，1:2和3:4的比例混合分別會在大約90秒、55秒和30秒左右形成傷口或組織修復劑組合物。另外，優選地，凝血酶在制備完成后的5個小時內使用；優選地，凝血酶在制備完成后2個小時內使用；理想地，凝血酶在制備完成后立即使用。因為常溫下10天后凝血酶還有小，凝血酶可在后期使用。另外，血清可無限期冷藏或冷凍，優選地，在存儲一個月之前使用。本發明傷口或組織修復劑組合物可用于封閉手術傷口，方法是將適量的血小板濃縮液在其一開始變為膠體時立即敷至傷口。另外，由于本發明傷口或組織修復劑組合物可單獨用即將敷用該傷口或組織修復劑組合物患者的血成分進行制備，因此造成患者患新型血液傳染疾病的可能性為零。本發明的方法可進一步修改，以便形成的傷口或組織修復劑組合物不僅可用作為止血劑，還可用作為傷口愈合的輔助藥物以及傳送具有其他生物活性的藥物和蛋白質的基質。例如，眾所周知，纖維蛋白膠具有很大的親合力，可將骨折片綁定在一起，它在骨頭重建方面非常有用，如在整形外科手術或主要骨折修復中。因此，為了保持本發明傷口或組織修復劑組合物的自體性質，來自患者的自體骨頭可以磨制成粉或類似的東西，然后與本發明的血小板濃縮液混合。然后將含有凝血酶的血清與適量的血小板濃縮液和骨折片混合，以便將獲得的膠體敷用在想要其凝結的部位上。在所希望的本發明傷口或組織修復劑組合物要進一步用作為具有其他生物活性的藥物和蛋白質輸送設備的例子中，本發明之方法可按如下所述進行修改。在將含有凝血酶血漿添加到血小板濃縮液中之前，也可將各種各樣的含有其他生物活性的藥物或蛋白質添加到血小板濃縮液中。在添加血清之前可添加到血小板濃縮液中的藥劑例子包括但不限于止痛復合物、抗菌復合物(包括殺菌復合物和細菌抑制復合物)、抗生素(例如，阿霉素、紅霉素、慶大霉素、青霉素、托普霉素)、抗真菌復合物、消炎藥、抗寄生復合物、抗病毒復合物、酶、酶抑制劑、醣蛋白、生長因子、重組藥物(例如，淋巴因子、細胞活素)、荷爾蒙、類固醇、糖皮質激素、免疫調制劑、免疫球蛋白、礦物質、神經松弛劑、蛋白質、肽、脂蛋白、殺腫瘤復合物、毒素及維生素(例如 ,維生素A、維生素E、維生素B、維生素C、維生素D或其衍生物)。還預想到所選擇的碎片、部分、衍生物或上述之部分或全部類似物均可使用。有許多用于測量及測定凝血及血液凝血相關的活動的不同醫療器械和測試方法。這些醫療器械和測試方法可用于輔助測定形成本發明傷口或組織修復劑組合物所需要的活化劑即凝血酶、血小板濃縮液和血漿的最佳配方。一些評估血液凝塊和凝結的較為成功的技術是美國專利4，599，219 (Cooper等人)、美國專利4，752，449 (Jackson等人)和美國專利5，174，961 (Smith)所闡述的柱塞技術，在此將其全部納入本文，以供參考。本發明的血漿濃縮液、PRP和組合物可與磷酸三鈣(TCP)、透明質酸(HA)、殼聚糖、乳膏、乳膏膜、細胞抽提物、脂肪細胞、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠、和/或肉毒桿菌毒素混合。在一個實施例中，本發明的血漿濃縮液或PRP組合物可與磷酸三鈣(TCP)、透明質酸(HA)、殼聚糖、乳膏、乳膏膜、細胞抽提物、脂肪細胞、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠、和/或肉毒桿菌毒素混合。在一個實施例中，優選地，本發明的血漿濃縮液或PRP組合物可與磷酸三鈣(TCP)、透明質酸(HA)、殼聚糖、乳膏、乳膏膜、細胞抽提物、脂肪細胞、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠、和/或肉毒桿菌毒素混合。在一個實施例中，優選地，本發明的血漿濃縮液或PRP組合物可與凝血酶優選為本發明凝血酶血清混合，并且可進一步與磷酸三鈣(TCP)、透明質酸(HA)、殼聚糖、乳膏、乳膏膜、細胞抽提物、脂肪細胞、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠、和/或肉毒桿菌毒素混合。在一個實施例中，優選地，本發明的血漿濃縮液或PRP組合物可與凝血酶優選為本發明凝血酶血清混合，并且可進一步與細胞抽提物、磷酸三鈣(TCP)、透明質酸(HA)、殼聚糖、乳膏、乳膏膜、其他細胞抽提物、脂肪細胞、潤滑素、碳二亞胺衍生的明膠和/或肉毒桿菌毒素混合。采用柱塞技術測量和檢查凝血或與凝血相關的活動的自動化裝置通常包含一個柱塞傳感器柱體或柱體和一個微處理器控制的、用于插裝柱體的裝置。該裝置作用于柱體和在此放置的血樣，以感應和檢測與凝血相關的事件。該柱體包括多個測試單元，每個測試單元由一個管狀的構件定義，該構件具有一個上反應室(柱體組件位于該反應室，并在該反應室進行分析測試)和一個包含試劑的試劑室。對于活化凝血時間(ACT)測試，例如，試劑包括激活血液凝結的活化試劑。一個塞子構件密封試劑室的底部。當測試開始時，試劑室的內容被迫進入反應室與流體樣本，通常為人血或其組分，進行混合。作為該裝置一部分的一個致動器提起并降下柱塞組件，因此使柱塞組件在反應室的流體池內往復運動。重力作用使該柱塞組件下降，并且由反應室中的流體的某個特性如其粘度對其進行抵抗。作為凝血相關的活動的開始或發生結果，當樣品特性以預定的方式改變時，柱塞組件的下降率在此發生改變。當柱塞組件的下降率充分變化時，該裝置就可以檢測和指示與凝血相關的活動。本文所述的傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物、分離的細胞組合物、細胞制劑或細胞抽提物 可與血小板濃縮液(PRP)混合。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為角質形成細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為角質形成細胞自體抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為骨骼肌細胞如肌肉祖細胞或衛星干細胞的抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為成纖維細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為脂肪細胞、前成脂肪細胞、前內皮細胞和間葉干細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為軟骨細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為干細胞如臍帶干細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為跟腱細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為骨膜過濾細胞或牙齦細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為角膜細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提了一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為骨髓細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為造骨細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為雪旺氏細胞抽提物。在另一個實施例中，本發明提供一種傷口或組織修復劑組合物、止血劑、細胞組合物或細胞制劑的制備工藝，其中細胞抽提物為胰島細胞抽提物。在另一個實施例中，分離血小板濃縮液組合物、傷口或組織修復劑組合物、凝血酶富化血清、細胞抽提物、傷口或組織修復組合物、止血劑、細胞組合物和/或本發明細胞制劑為自體材料。另一方面，本發明提供一種適用于本發明組織再生的成套工具，其中該成套工具進一步包括含有葡萄糖酸鈣、白蛋白、殼聚糖、乳膏、潤滑素、TCP、乙醇(ETOH)和/或氮化鈣(CaC12)的小瓶子、注 射器托架、夾緊器和/或具有雙出口的尖式敷藥器。本發明自體凝血酶血清的使用的優點為傷口修復劑或PRP制劑的制備并不需要ETOH和CaC12等添加劑。在另一個實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物制備工藝，其中步驟d)或e)中提供的細胞抽提物通過含有下列步驟的工藝獲得:(A)在本發明血小板濃縮液中提供所述細胞；(B)可選地，培養這些細胞；以及(C)將步驟(B)中獲得的培養細胞重新懸浮為本發明血小板濃縮液。在另一個實施例中，本發明提供本發明細胞組合物制備工藝，其中步驟(A)中的細胞擴增在本發明的血小板濃縮液中實施，例如，血小板最終濃度大約為培養基的5%至40%。在另一個實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物的制備工藝，其中細胞培養步驟(B)至少包含一個細胞接種步驟，例如在細胞培養基表面(如皮氏培養皿或培養瓶)接種細胞。在另一個實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物制備工藝，包括細胞培養步驟(B)之后至少有一個收獲細胞的步驟。在另一實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物制備工藝，其中細胞培養步驟⑶在37° C上進行。在另一個實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物制備工藝，其中細胞培養步驟(B)在含有氧氣或空氣和二氧化碳的氣流下進行，通常該氣流包含95%的氧氣或空氣和5%的二氧化碳。在另一實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物制備工藝，其中細胞培養步驟⑶的持續時間為3到4周。在另一實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物制備工藝，其中在細胞培養步驟(B)中細胞培養基在培育期間要定期更換，通常每3天更換一次。在另一實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物制備工藝，其中細胞培養步驟(B)包括至少一個將細胞暴露于可見光下的暴露步驟，通常波長大約為633nm，暴露時間大約為10分鐘。另一方面，可見光下的暴露步驟在細胞培育期間每周重復一次。在另一實施例中，本發明提供一種本發明細胞組合物制備工藝，其中細胞組合物為角質形成細胞或成纖維細胞，細胞培養步驟(B)包括至少一個將細胞暴露于可見光下的暴露步驟，通常波長大約為633nm，暴露時間大約為10分鐘。另一方面，可見光下的暴露步驟在細胞培育期間每周重復一次。在另一個實施例中，本發明提供本發明細胞組合物制備工藝，其中細胞培養步驟(B)包括至少一個添加本發明稀釋血小板濃縮液的步驟，如最終的血小板濃縮液大約為培養基體積的5%至40%。在另一個實施例中，本發明提供本發明細胞組合物制備工藝，其中細胞組合物是角質形成細胞或成纖維細胞組合物，細胞培養步驟(B)包括至少一個添加本發明稀釋血小板濃縮液的步驟，如最終的血小板濃縮液大約為培養基體積的5%至40%。 在另一個實施例中，本發明提供一種可從本發明工藝中獲得的分離細胞組合物。在另一個實施例中，本發 明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為脂肪細胞組合物，如脂肪細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為肌肉細胞組合物，如成肌細胞或衛星干細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為角膜細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為軟骨細胞組合物，如軟骨細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為皮膚細胞組合物，如成纖維細胞或角質形成細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為骨膜過濾細胞或牙齦細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為跟腱細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為干細胞組合物，如臍帶干細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為骨髓細胞組合物。 在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為雪旺氏細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為胰島細胞組合物。
在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中分離細胞組合物為成骨細胞組合物。在另一個實施例中，本發明提供一種分離細胞組合物，其中細胞濃度為每毫升血漿或富化血漿大約3xl05個細胞至3xl06個細胞。在另一個實施例中，本發明提供如本文所述可促進人或低等動物傷口的傷口或組織封口和/或組織和/或骨頭再生的組合物、方法和用途。在另一個實施例中，本發明提供了能促進哺乳動物優選為人的傷口或組織封口和/或組織和/或骨頭再生的組合物、方法和用途。另一方面，本發明提供如本文所述可在患有牙周病或因其他疾患的哺乳動物的傷口或牙周缺損部位誘導牙周再生的組合物、方法和用途。另一方面，本發明提供一種在患有牙周病或因其他疾患的哺乳動物的傷口或牙周缺損部位誘導牙周再生的方法，其中所述哺乳動物為人。在另一個實施例中，本發明提供依照本發明在傷口或牙周缺損部位或腔體誘導牙周再生的方法，其中以半固體或生長基質的形式將所述治療有效量的所述傷口或組織修復劑組合物敷用至所述傷口或所述牙周缺損部位或腔體，如Garg等人在《牙體植入學近訊》發表的論文中所述(請參閱 “2000，Dental Implantology Update, 11 (6)，41-44”)。在另一實施例中，本發明提供一種促進本文所述疤痕或皺紋處皮膚組織再生的方法。在另一實施例中，本發明提供一種依照本發明誘導心肌再生的方法，其中所述治療有效量的本發明所述肌肉細胞組合物與血小板濃縮液(PRP) —起被注射入心肌，通常是注射入左心室心肌。注射可以為直接注射或多導管注射。若本文所述，成肌細胞或衛星細胞可以被離體制成去上 皮和紫外線輻射的人體生物羊膜和生物復合材料復合體，作為本文所述的單層。然后將羊膜縫合到缺血性心外膜上，從而使干細胞在基本組織中重新培育，以便提高心室壁和肌細胞的收縮力。在另一實施例中，本發明提供一種依照本發明誘導心肌再生的方法，其中所述治療有效量的本發明所述肌肉細胞組合物與血小板濃縮液(PRP)的混合物以及治療有效量的本發明成纖維細胞組合物與血小板濃縮液(PRP)混合物一起被注射入心肌。在另一實施例中，本發明提供一種依照本發明誘導心肌再生的方法，其中所述治療有效量的本發明所述肌肉細胞組合物與血小板濃縮液(PRP) —起以羊膜補片優選地被培育成本發明成肌細胞和衛星干細胞組合物的形式而應用到心室表面。在另一實施例中，本發明提供了一種依照本發明誘導角膜再生的方法，其中所述治療有效量的本發明所述角膜細胞組合物與血小板濃縮液(PRP) —起以羊膜補片的形式，優選地散布在可溶解的接觸鏡片上，而應用到角膜組織。所述傷口、組織或疾病治療方法可包括使用本文所述任何組合物，也可包括使用采用本文所述任何方法制成的任何組合物。本發明方法、設備和成套工具的優點是能夠提供提供一種具有時效性且相對低成本地在單次操作中獲得血小板濃縮液的方法，其易于實現且適合即時使用。本發明方法的優點是獲得的富化制劑中的濃縮血小板產量很高，而且其中的紅細胞含量很低。本發明組合物的優點是血小板含量高，紅細胞含量低，在隨后的體內治療使用中能夠完全保持其特性。更特別的是，血小板保持了在幾天(或凝血細胞30天壽命)內釋放組織再生需要的主要生長因子(PDGF、TGF-beta、IGF、VEGF和EGF)的能力。另外，就由自體血液制成的本發明組合物而言，本文所述的發明降低了與使用由從一個或多個第三方生物材料制成的治療材料相關的疾病傳染和免疫反應的風險。因此，本發明提供一種改良的生物傷口修復和組織再生材料，優選為自體材料，它能夠促進組織再生，如皮膚、軟骨和骨頭再生，特別是能夠促進愈合和/或復新。本發明的優點包括一種適于即時服務的改良傷口修復和組織再生材料的快速簡便的制備方法，實踐已經證明了它能夠縮短愈合時間，減少疼痛，并降低醫療成本。另外，所述傷口修復和組織再生材料能夠降低移植排斥風險，提供移植成功率。另外，使用所述改良傷口修復和組織再生材料最后留下的傷疤能夠具有更佳的美容效果，并且能夠長期填充傷疤和皺紋。通常，細胞抽提物由組織切片獲得，其中最好在血小板濃縮液混合物制成的當天實施組織活檢。切片的大小適于所需的治療目的以及制備本發明細胞組合物使用的細胞類型。下列“例子”部分介紹了不同類型組織的切片例子。另一方面，本發明提供一種管子，包括至少一個將該管子分隔成兩部分的濾網。另一方面，本發明提供一個被至少一個優選為一個濾網分隔成兩部分的管子。在一個實施例中，管子用于采集和/或分離流體樣本。優選地，這兩部分的尺寸和/或直徑不同。另一方面，本發明提供一種采集和分離流體樣本的管子，包括:i)尺寸與直徑不同的兩個不同部分；ii)至少一 個將這兩部分隔離的濾網；以及iii)可選地，抗凝血劑。在本發明的一個較佳實施例中，管子由如圖1 14所示的特征組成。在一個較佳實施例中，管子由環烯烴聚合物(COP)或環烯烴共聚物(COC)制成。在一個實施例中，管子含有抗凝血劑，優選地為檸檬酸鈉緩沖液或無水檸檬酸鈉。在一個較佳實施例中，管子含有0.1OM檸檬酸鈉緩沖液或3.5mg/mL無水檸檬酸鈉。在一個較佳實施例中，濾網固定在管子上。優選地，濾網垂直延長，以便具有延長的與管子接觸的表面(沿管子的縱軸延長)。其優點是能夠提高濾網的穩定性，進一步防止濾網移動。在一個較佳實施例中，管子包括一個兩層濾網。優選地，濾網的兩層重疊(一層重疊在另一層上；圖4、圖10至圖14。)優選地，濾網外層垂直延長，以便具有延長的與管子接觸的表面(沿管子的縱軸延長，圖2、圖3和圖5A)。優選地，濾網內存也進行延長，以便與濾網外層對齊。在一個實施例中，濾網外層并未延長(僅限橫軸)。在一個實施例中，管子包括2個、3個、4個、5個或更多的濾網。在一個較佳實施例中，位于管子的上部或頂部的管子第一部分的容積比位于管子下部或底部的第二部分大。在另一個較佳實施例中，含有濾網的管子的第一部分的容積為大約9.5立方厘米，第二部分的容積大約為3.5立方厘米(圖5A)。在一個較佳實施例中，位于含有濾網的管子上部的管子第一部分占管子總容積的大約70%。在一個實施例中，位于含有濾網的管子上部的管子第一部分占管子總容積的大約 51%、55%、60%、65%、68%、70%、73%、75%、80%、90%、95% 或更多。在另一個較佳實施例中，位于管子下部的管子第二部分占管子總容積的大約30%。在一個實施例中，位于管子下部的管子第二部分占管子總容積的大約 49%、45%、40%、35%、32%、30%、27%、25%、20%、15%、10%,5% 或更少。在一個較佳實施例中，管子總容積大約為13立方厘米(圖5A)。在一個較佳實施例中，位于管子下部的管子第二部分的直徑比位于管子上部的管子第一部分小。其優點是濾網可以在離心力或任何其他機械應力作用下保持停留在原位。在一個較佳實施例中，位于管子上部的管子第一部分的外徑大約為15.5mm或
15.4_(圖3)。在一個較佳實施例中，位于管子上部的管子第一部分的內徑大約為13.32mm或 13.31mm (圖 3)。在一個較佳實施例中，位于管子下部的管子第二部分的外徑大約為13.7mm (圖5A)。在一個較佳實施例中，位于管子下部的管子第二部分的內徑大約為11.6mm。在一個較佳實施例中，一個兩層濾網將管子的兩部分隔。優選地，濾網的兩層重疊(一層重疊在另一層上，圖4、圖10至圖14)。圖4和圖7至圖14所示為較佳濾網，優選地，濾網包括內層和外層(圖10、圖11和圖 13)。在一個較佳實施例中，濾網固定在管子上。在一個較佳實施例中，濾網并未固定在管子上。在一個實施例中，濾網包括多個帶有開孔的對稱部域系列，開孔的布置如圖7A、圖7B、圖8和圖9所示。優選地，濾網由4個對稱部域系列組成，每系列2個部域，每個部域由一個開孔組成。對于朝 向管子中心的第一個開孔部域，一個開孔的內部與另一個開孔的內部之間的距離大約為5.13mm (圖4第4項)。對于朝向管子中心的第一個開孔部域，一個開孔的外部與另一個開孔的外部之間的距離大約為5.67_ (圖4第3點)。對于朝向管子中心的第二個開孔部域，一個開孔的內部與另一個開孔的內部之間的距離大約為7.73mm (圖4第2項)。對于朝向管子邊界的第二個開孔部域，一個開孔的外部與另一個開孔的外部之間的距離大約為8.27mm (圖4第I項)。在一個實施例中，每個開孔的距離大約為0.53mm或0.54mm (圖9和圖14第21項)。優選地，上層或內層由四個對稱部域系列組成，每系列2個部域(圖9、圖13和圖14)，每個部域由數量合適、排列規則的漏斗組成(圖13和圖14)。優選地，每個漏斗底部的間隙或開孔的長度大約為0.27_(圖14第26項)。優選地，從漏斗一個端點至另一個端點之間的距離大約為1mm，對應于上層的厚度(圖14第24項)。優選地，上層的厚度大約為Imm(圖12第34項和圖14第24項)。漏斗的數量取決于濾層的尺寸。優選地，漏斗在其底部包含一個封閉孔(圖14第26項)。優選地，下層或外層由四個對稱部域系列組成，每系列3個部域(圖8、圖13和圖14)，每個部域由數量合適、排列規則的梯形組成(圖13和圖14)。梯形的數量取決于濾層的尺寸。優選地，每個梯形相隔大約0.53mm (圖14)。每個梯形底部長度大約為0.77mm (圖14)。優選地,每個梯形的高度大約為0.5_ (圖14)。優選地,下層的厚度大約為Imm (圖12和圖14)。優選地，上層和下層的部域總是交替布置。優選地，下層的第一梯形部域隨后是上層的第一漏斗部域，上層的第一漏斗部域隨后是下層的第二梯形部域，下層的第二梯形部域隨后是上層的第二漏斗部域，上層的第二漏斗部域隨后是下層的第三梯形部域(圖4、圖13和圖14)。優選地，上層的每個漏斗的位置剛好使漏斗中心的延長線大約位于下層的兩個梯形之間(圖4、圖13和圖14)。更加優選地，上層的每個漏斗的位置剛好使漏斗中心的延長線剛好位于下層的兩個梯形之間(圖4、圖13和圖14)。優選地，梯形和漏斗連續交替。當本發明的管子進行離心處理時，在離心力的作用下，漏斗底部上的封閉孔(圖14第26項)打開，使紅細胞通過，紅細胞被引導到兩個梯形之間，最后到達管子的下部。一旦離心處理停止，漏斗的封閉孔將關閉，防止紅細胞回流到管子上部。位于每個漏斗下方的下層梯形便于紅細胞通過并抵達管子下部，并有助于防止紅細胞回流。優選地，上層的容積大約為0.26立方厘米。優選地，下層的容積大約為0.29立方厘米。優選地，上層由聚丙烯(PP)制成。優選地，下層由熱塑彈性體(TPE)制成。其他部件可根據本發明描述或業內人士所熟知的方法使用。優選地，濾網的中心為曲線型(圖4以及圖10至圖13)。其優點是能夠使全血呈運河狀朝漏斗運動。優選地，漏斗的彎曲程度恰好能夠使管子中心距離下層底座的長度大約為0.5mm (圖12第36項)。優選地，下層的高度大約為8mm (圖2和圖10第14項)。優選地，下層的外徑大約為12.74mm (圖10第17項)。優選地，上層的內徑大約為9.6mm (圖10第16項)。 優選地，從上層上部非彎曲面起算的層高大約為6mm(圖10第9項)。優選地，從上層上部彎曲面起算的層高大約為5.5mm (圖10第11項)。在本發明一個實施例中，管子只包括一個帶漏斗的濾網。在本發明另一個實施例中，漏斗和/或梯形的數目可變。在本發明另一個實施例中，漏斗和/或梯形部域的數目可變。在本發明另一個實施例中，漏斗和/或梯形部域的對稱系列的數目可變。在本發明另一個實施例中，管子包括兩個對稱系列的漏斗和/或梯形部域。本發明還包括一個管子，其中所有組件的長度與在此描述的組件的長度不同。本發明還包括一個管子，其中所有組件的長度與在此描述的組件的長度不同，長度大約為
0.lmm、0.2mm、0.3mm、0.5mm、1mm、1.5mm、2mm、5mm、8mm、10mm、15mm、20mm、50mm、75mm、lcm、2cm、5cm、IOcm 或更長 在一個實施例中，濾網采用激光進行成形或造型。本發明的管子具有將高效力紅細胞從血漿中分離出來的優點。與全血中紅細胞的百分比相比，使用本發明的管子，可將血漿中紅細胞的比例減少超過99%、98%、95%、93%、90%、85%、80%、75%、70%、65% 或 60%。除了能夠節約成本并且是一種堅硬的高強度醫用材料外，COC或COP還具有其自然狀態下的透明度類似于玻璃這一優點。典型的COC材料的模數比高密度聚乙烯(HDPE或PEHD，一種由石油制成的聚乙烯熱塑性塑料)和聚丙烯(PP，一種熱塑性聚合物)。COC還為透明的聚合物提供高水分屏障以及具有低吸水率。在醫學應用中，我們注意到COC是一種具有低可提取物的高純度產品。COC還是一種無鹵產品。COC材料具有極佳的光學清晰度和高效的水蒸氣屏障。它將優良特性與高保真度融為一體，能夠抵御所有常見的殺菌方法并抵制水解和范圍廣泛的化學品。COC材料還具有很好的抗熱性，機械特性、硬度、尺寸穩定性以及電絕緣特性。因為它具有極低的可提取物，并且具有極佳的體內及離體生物兼容性，它滿足USP VI級和ISO10993要求，而且已經能夠收到了美國食品與藥品管理局(FDA)藥物與設備管理檔案編號。另外，因其透明度、硬度、重量輕、耐熱和耐化學品、生物兼容性、對水分屏障的尺寸穩定性(低透濕性)、模壓性能以及無鹵，使用COC具有很多優點。與玻璃相比，它能夠減少設備和包裝破裂現象，延長藥物保質期，可在紫外線波長下獲取診斷讀數，并可支持制造更小、更快的診斷設備。另外，COC可耐受伽瑪輻射、蒸汽和氧化乙烯殺菌，因此可采用所有常見的殺菌方法殺菌。另一方面，本發明提供一種圖15所示的血袋系統或采血管裝置。本發明血袋系統或采血管裝置中采集和/或儲存的血液可用于本發明的任何工藝、組合物、產品和用途。血液采集管子或袋子可排空和/或密封。血液采集管子或袋子可充滿觸變膠體和/或抗凝血劑。本發明血袋系統或采血管裝置包含一個多通道采血器，可將血漿和細胞組分輸送至多個袋子或管子中。另一方面，本發明提供一種血袋系統或采血管裝置，含有一支與多導管接頭連接的單入口導管，接頭導管與至少兩個袋子或管子連接，其中多導管接頭的每個接頭導管都與單個袋子或管子連接。

另一方面，本發明提供一種血袋系統或采血管裝置，包括:a) 一個單入口導管；b) 一個具有多個接頭導管的多導管接頭；以及c)至少兩個袋子或管子。其中單入口導管與多導管接頭連接，其中多導管接頭的每個接頭導管都與單個袋子或管子連接。在一個實施例中，本發明提供用于存放血成分的本發明血袋系統或采血管裝置。優選地，血袋系統或采血管裝置包含一個入口導管(I)、一個多導管接頭(2)、接頭導管(3)和至少兩個袋子或管子(4)，如圖15所示。在一個實施例中，血袋系統或采血管裝置進一步包含一個或多個固定裝置(5)，如圖15所示。優選地，為每根接頭導管提供一個固定裝置。在一個實施例中，為每根接頭導管提供兩個或多個固定裝置。優選地，血袋系統的每個血袋或采血管裝置進一步包括一個蓋子。圖15顯示了一個血袋系統或采血管裝置，其中每個血袋(4)都包含一個蓋子(6)。優選地，蓋子可以松開或旋開，以便與無菌注射器連接。蓋子的優點是便于在無菌條件下吸入袋子的內容物。在一個實施例中，可使用一次性螺口注射器。另外，可使用針取代蓋子。優選地，入口導管和接頭導管是彈性的。優選地，入口導管和接頭導管是管狀的。
在一個實施例中，血袋系統或采血管裝置包括2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、12個、14個、16個、18個、20個或更多個袋子或管子。優選地，血袋系統或采血管裝置包含8個袋子或管子。
優選地，本發明提供一次性袋子或管子。在一個實施例中，每個袋子含有大約lmL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、7mL、8mL、9mL、IOmL, IImL, 12mL、14mL、16mL、18mL、20mL、25mL、30ml 或更多的血液。優選地，每個袋子含有大約IOmL血液。優選地，每個袋子的容積適于單次使用。優選地，每個袋子中采集的血液量足夠供單次使用。優選地，血袋系統或采血管裝置提供密封的流傳送。更加優選地，血袋系統或采血管裝置提供密封的無菌流傳送。優選地，每個袋子或管子一旦充滿都可分別密封。其優點是具有單獨的、隨時可用的單個一次性袋子或管子。優選地，每個袋子都經過一個抽真空步驟。優選地，血袋系統或采血管裝置經過一個抽真空步驟。在一個較佳實施例中，每個袋子都插入到另一個保護物或外封中。其優點是提供符合ISO包裝標準(IS011607-1和/或ISOl 1607-2)的雙重保護。優選地，每個袋子在抽真空后均插入到第二個外封中。優選地，第二個外封經過抽真空和密封。殺菌、抽真空步驟以及雙重保護使袋子或管子的使用非常安全。在一個實施例中，流體流可通過常規閥門裝置進行控制，如關斷塞、可拆卸塞或滑動夾。血袋或管子系統可以是由血液兼容的、彈性的、半透明的、可殺菌的塑料材料制成的常規結構。塑料可以為聚氯乙烯、聚酯、聚烯烴、聚亞安酯等，也可包括上述材料的混合物。入口導管和/或接頭導管 可由與血袋或管子塑料材料相同或不同的塑料材料制成。在一個實施例中，過濾裝置可與本發明血袋系統或采血管裝置集成為一體。過濾裝置可包括一個由剛性聚氯乙烯或類似材料制成的外殼和管配件。過濾裝置可以充滿過濾介質，如，原棉、醋酸纖維素或合成纖維(如聚酯、聚酰胺等)。過濾介質的量取決于要過濾的紅細胞的量。通常，每200mL至250mL的紅細胞濃縮液需要采用20克至50克的過濾介質。在一個實施例中，添加了添加液，以延長紅細胞的保質期。例如，這種添加液可以是常規的紅細胞儲存液，每200mL至250mL紅細胞濃縮液大約50mL至IOOmL,如在下列文獻中所描述:“Ginzburg et al.，Bibl.Haemotol.，1971，N0.3，Pt.2，217-220 ；ffoodet al.，Blood，Vol.42，N0.1，1973，17-25 ;Beutler，"The Red Cell in Vitro"，Grumand Stratton,New York,N.Y., 1974,p.201 ；Lovric et al., Medical Journal ofAustralia, Vol.2，183-186，1977 ;U.S.Pat.N0.4，267，269，，。在一個實施例中，本發明血袋系統或采血管裝置的袋子或管子可含有抗凝血劑，如，腺嘌呤-枸櫞酸-葡萄糖(ACD)、枸緣酸鹽-磷酸鹽-葡萄糖(CPD)、枸櫞酸-磷酸-葡萄糖-葡萄糖(CP2D)、CPD加腺嘌呤、或其他常規抗凝血劑，采集的血將與這些抗凝血劑混合。然后，可以對采集的血液直接處理，并通常在4° C至6° C條件下儲存。在處理過程中，可按照行業慣例對血袋系統進行離心處理，以便使血液中的紅細胞在袋子底部沉淀。血漿用新鮮血漿和血小板濃縮液制備的常規技術進行表達。袋子或管子中含有的血液可用于本發明的任何方面和/或實施例。血袋系統或采血管裝置易于制造和生產，在醫藥行業用途非常廣泛。通過利用本發明，血液采集更容易，更安全、更高效。優選地，本發明提供更簡便的可追溯性。優選地，本發明提供一種血袋系統或采血管裝置或包含該血袋系統或采血管裝置和/或成套工具和/或裝置，使任何血成分的采集、儲存和運送都很容易、快速和安全。另一個優點是，血成分的采集、儲存和運送在符合ISO標準的無菌條件下進行。另一個優點是，該血袋系統或采血管裝置和/或成套工具和/或裝置特別適合就地醫療使用。優選地，血成分的采集、儲存和運送在無菌條件下進行。在另一實施例中，提供一個閥門，該閥門可為一次性閥門，采用丙烯酸樹脂等材料制成。另一方面，本發明提供一種包括至少一個本發明血袋系統或采血管裝置的無菌的成套工具和/或裝置。存放血成分所要求的所有裝置均包含在無菌的成套工具中，使血成分的存放安全、經濟。本發明血袋系統或采血管裝置和/或成套工具和/或裝置提供的血液可用于制備凝血酶、富血小板血清、血小板濃縮液、細胞抽提物、細胞組合物、傷口修復劑和/或組織修復劑或止血劑或生物膠體，無論是否根據本文所述的任何方面和/或實施例。本發明血袋系統或采血管裝置和/或成套工具和/或設備提供的血液可用于本文所述的所有應用。例如，本發明血袋系統或采血管裝置和/或成套工具和/或設備提供的血液可用于手術、門診或慢性傷口。本發明血袋系統或采血管裝置和/或成套工具和/或設備提供的血液可用于同源或自體成分。當用作為同源成分時，本發明血袋系統或采血管裝置和/或成套工具和/或裝置提供的血液和/或血成分 是已知系統的優選、高效、簡便和低成本替代品。其在不可能采集自體血時采用。下面將通過參考附圖所示的實施例來更詳細地描述用來闡明本發明的例子。下列縮寫詞分別具有如下定義:ATS:自體凝血酶血清；BU =Baxothrobin單元；DMEM:必需基本培養基；DMS0:二甲亞砜；EC:富化血塊；FCS:胎牛血清；HT:愈合時間；IU:國際單位；PBS:磷酸鹽緩沖鹽水；PET:聚對苯二甲酸乙二醇；PRP:富血小板血清；PPP:貧血小板血清；USP:美國藥典；cm厘米；dL:1/10公升；g:克；Gy:戈瑞；J:焦耳；L:升；min:分鐘；mm:毫米；M:摩爾；mL:毫升；nm:納米；rpm:轉速；Vol:容積。常用程序和條件為了確定本發明組合物在促進傷口愈合和/或骨頭和/或組織再生方面的療效，我們做了下列試驗。用本發明的分離管采集人的全血樣。例如，可使用的管子可以是大約為IOmL至15mL的玻璃管(直徑為16mm,長度為120mm至130mm),含有2mL至3mL聚酯型觸變膠體以及ImL檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)，并含有)并具有0.8mL至IOmL可用真空。該管子構成制備本發明血小板濃縮液組合物的可立即使用的裝置。可使用的管子的另一個例子是大約為IOmL的聚對苯二甲酸乙二醇(PET)管子，含有2mL由聚合物混合物和檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)組成的的觸變膠體，并具有0.8mL至IOmL可用真空，該管子構成制備本發明血小板濃縮液的可立即使用的裝置。可使用的管子的另一個例子為本發明管子。這些管子充滿兩種成分、抽真空、用輻射方法殺菌(如ISO11137,UNI EN ISO 11737-2,UNI EN 552,UNI EN 556中所規定)，并采用傳統的蓋子密封，例如，用于玻璃管的溴丁基常規橡膠塞和具有保護操作員安全的聚乙烯蓋的氯化丁基塞。然后用離心機采用為或大約為1500克直至為或大約2000克的力對管子離心處理大約3至10分鐘，即轉速為或大約為2500轉/分鐘直至為或大約為3800轉/分鐘，該離心機具有一個擺動轉子，轉子半徑為14cm。如果使用的離心機具有一個固定角度大約為45度的轉子，則離心處理時間應為5到約15分鐘。另外，也可依照本發明對管子進行離心處理。離心處理后，采集血小板濃縮液，以用于本發明治療或美容應用或用于制備進一步的組合物，該組合物含有通過與諸如細胞抽提物優選為自體細胞抽提物(例如角質形成細胞、成纖維細胞、骨髓細胞、成骨細胞、軟骨細胞、成肌細胞、角膜細胞、雪旺氏細胞、脂肪細胞、臍帶干細胞、跟腱細胞、胰島細胞、韌帶及牙齦細胞、骨膜細胞)和/或骨頭替代品和/或凝血活化劑混合獲得的血小板濃縮液。本發明的血漿濃縮液、PRP和組合物可與磷酸三鈣(TCP)、透明質酸(HA)、殼聚糖、乳膏、乳膏膜、細胞抽提物、脂肪細胞、潤滑素、CD明膠、和/或肉毒桿菌毒素混合。為了制備本發明細胞組合物，細胞根據如下通用協議進行制備:a)活體切片相應組織的活體切片通過在無菌條件下采用適于將要采集的特定細胞的標準方法獲得。可通過洗滌、離心處理或沉淀凈化細胞。可通過離心處理和酶消化法(胰蛋白酶、膠原酶或重組胰蛋白酶)分離細胞。細胞可以立即使用或可選地在按如下所述離體培養和細胞增殖之后使用。b)離體培養和細胞增殖用于制備細胞 組合物的細胞，如角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞(如角膜緣干細胞)、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、肌肉細胞(如成肌細胞和衛星細胞)、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、雪旺氏細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、內皮前體細胞、跟腱細胞或胰腺細胞，采用傳統方法在涂有血小板濃縮液，優選為用纖維連接蛋白富化的自體血小板濃縮液的細胞培養板(如皮氏培養皿或培養瓶)上的細胞載體基質(如EMEM或Ham’s)中進行擴增。有優勢的是，使用濃度大約為5%至20%的本發明的血小板濃縮液或PRP時不需要使用細胞載體基質，如DMEM或Ham’S。另外，有優勢的是，這可使細胞制劑增效20%。細胞制劑最終可用纖維連接蛋白進行富化。如果是角質形成細胞，優選地可采用DMEM對培養基進行富化。對于成骨細胞、軟骨細胞和成肌細胞等細胞，例如，在細胞接種前在有膠原酶或胰蛋白酶情況下，需要相應組織的酶消化。溫度為37° C時在由95%的氧氣或空氣和5%的二氧化碳組成的氣流中在細胞培養板上進行細胞培育。通常，細胞培育時間從10分鐘到20分鐘不等。最后細胞擴增可通過光線療法(例如，在培育期間以2J/cm2的能量在波長為633nm的光線下暴露大約10分鐘，每周一次)增強(例如，培育成肌細胞、成纖維細胞和軟骨細胞時)。外植體可米用氣液界面培養(air-lifting)技術(“Molnaret al., 1996, Tissue&Cell, 28:547-556”)和氣界面培養法(“Meller et al, 2002，Br.J.0pht.，86，463-471”)在皮氏培養皿或培養瓶中培養，一般的外植體暴露于空氣中。在細胞培育期間，培養基要定期更換，例如，每3天更換一次。例如，可為成肌細胞、成纖維細胞和軟骨細胞在2D模式下獲得細胞擴增(如平面單層)。例如，通過在培養基中添加本發明稀釋自體血小板濃縮液組合物(血漿或富化血漿的體積大約為5%至40%)可為角膜細胞、成肌細胞、成纖維細胞、脂肪細胞和角質形成細胞獲得3D細胞生長模式。通常，在細胞培育期間，可以添加2到3次本發明的稀釋自體血小板濃縮液組合物。然后獲得的3D生物支架可增強對自體干細胞轉移有用的細胞外基質。細胞培育后，可使用溫和的胰蛋白酶消化將細胞從培養器皿中釋放出來，胰蛋白酶消化可轉移細胞，并使細胞可以丸粒化。另外，細胞可培養為熱感應細胞，可通過加熱釋放細胞(可使用由熱感應聚合物涂敷的皮氏培養皿)。c)細胞治療和安全檢查可通過顯微鏡細胞計數、流式細胞計數器計數和采用標準技術對組織標志進行免疫化學測試等方法檢測由此獲得的細胞制劑的細胞活力。還可以在由胰蛋白酶釋放細胞之后立即通過臺盼藍測試細胞活力。還可通過微生物學化驗檢查細胞制劑的安全性，以排除病毒或細菌污染，并避免人畜共患病感染的轉移。避免使用胎牛血清，以防止瘋牛病的傳播。d)細胞制劑的給藥方式最終采用上述方法獲得的細胞制劑被放在本發明自體血小板濃縮液組合物中，在交付患者之前作為細胞運送的載體。然后將采用上述方法獲得的細胞制劑注射或移植到患者身上。注射或移植方式必須適應本發明細胞制劑中含有的細胞類型和想要達到的治療或美容效果。在下列例子中對本發明細胞組合物的制備方法和使用予以詳述，更具體地根據細胞類型和想要達到的治療或美容效果而言。本發明角質形成細胞或或成纖維細胞制劑可在如上所述細胞采集或培養后輕而易舉地使用。然而，本發明 細胞制劑可在如上所述行細胞培養后進行制備。與在沒有使用本發明自體血小板濃縮液組合物的培養基中制備的細胞相比，本發明細胞制劑具有更好的活力和穩定性(包括細胞特性得以完整保留，如，合成蛋白和傳送生長因子的能力)。另外，如此所得的細胞增殖得到強化:與控制培養基和血清饑餓培養基相t匕，細胞生長速度加快(大約快2至5天)，密度更大。本發明細胞組合物制備工藝的優點在于相同的自體培養基被用作為細胞培養、細胞保存和細胞注射的載體和細胞生物刺激和組織再生的載體。例子1:本發明自體血■小板濃縮液與自體凝血■酶富化血.清混合后的治療應用依照本發明制備即將用作為凝血酶富化制劑的自體凝血酶血清。本工藝的一個獨創性在于可同時制備分別含有自體凝血酶血清制劑和血小板濃縮液制劑的分離管。用于制備自體凝血酶血清(ATS)的玻璃管的離心處理時間大約為8分鐘至10分鐘。用于制備血漿濃縮液和或PRP組合物的塑料管(C0C或C0P)或玻璃管的離心處理時間大約為8分鐘至10分鐘。因此，優選地，ATS和PRP組合物大約同時可供使用。為了只在傷口上敷用富血小板制劑的同時將纖維蛋白原聚合成纖維蛋白網(在凝血過程中發生)，同時在傷口上敷用血小板濃縮液組合物和自體凝血酶血清(凝血活化劑)，兩者的容積比例大約為10:1、10:3至10:10 (濃縮液與凝血活化劑之比)。比例不同，膠體效應的凝血速度不一樣。例如，通過使用含有兩個注射器的設備(如，用于注射血小板濃縮液組合物的IOmL注射器和用于注射凝血酶血清的ImL或3mL注射器)可實現兩種制劑的同時傳送，可同時釋放兩種制劑，因此在與傷口接觸時制劑將混合并聚合。例子2:本發明自體血小板濃縮液在美容上的使用本發明自體血小板濃縮液在美容上的用途包括:在將其敷用在傷口之前、手術之后或敷用在健康皮膚上，將本發明血小板濃縮液與乳膏，優選為乳狀液，進行混合。在吸收過程中，血小板制劑被乳膏或乳狀液載入皮膚，以放大水合效果并對皮膚再生或復新進行生物刺激。可以通過采用手工或無針裝置反復注射的中胚層療法技術，注射到外胚層中。還可以在皺紋處進行皮下注射，以進行容積矯正。為了實現填充效應和/或獲得一致的容積矯正效果，可在皺紋、前額、面頰、后牙區、臉頰、下巴脖子和/或胸部注射按10:1或10:3之比混合的血小板濃縮液與自體凝血酶血清混合物。在適當的時候，為了實現重要的面部容積矯正，可在皮下注射按10:10之比混合的血漿濃縮液與新鮮抽吸脂肪組織混合物。在適當的時候，為了實現重要的胸部或形體容積矯正，可按10:3或10:2之比將血漿濃縮液與新鮮抽吸脂肪組織混合進行皮下注射。使用諸如100%白蛋白Albugel (EP1543846)制劑水凝膠或從白蛋白及其他化學復合物如聚乙二醇或任何其他成分網狀組織獲得水凝膠，采用基于紙的高度親水載體與皮膚接觸,直到富血小板血漿被吸收。本發明包括下列化療注射方法:-乳突真皮層注射；-網狀真皮層皮下注射；或-骨膜上方的深層 注射。可單獨使用血漿、血漿加脂肪組織和/或血漿加磷酸三鈣進行三級注射(也被稱為“醫療整容”)。例子3:自體肌肉細胞組合制劑本發明自體細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，骨骼肌細胞(肌肉祖細胞或衛星干細胞)在步驟(d)或(e)中提供。a)成肌組干細胞骨骼肌活體切片從股外側肌獲得，尺寸為7X3cm。肌肉在活體切片前一天準備好，在擬定的活體切片部位(股外側肌上方大腿側面10X15cm皮膚區域，膝關節略微往上一點，任意一側)用地卡特隆和麻卡因(長效利多卡因)進行肌內注射。將肌肉切成小方塊，然后用膠原酶、鏈霉蛋白酶和胰蛋白酶(Worthington)的混合物進行酶消化。肌肉外植體接種在涂敷了自體血小板濃縮液組合物的皮氏培養皿上，并在37° C時在由95%的氧氣和5%的二氧化碳組成的氣流中培育3到4周。結蛋白或D-56表達被用作為成肌細胞標志，以便從成纖維細胞中識別出成肌細胞。圖3所示為3D模式下的成肌細胞祖細胞增殖。在細胞培養過程中，可以2J/平方厘米的能量在633nm波長中暴露于光中10分鐘，以增強細胞增殖。在移植的當天(例如，細胞培育3至4周之后)，可通過胰蛋白酶或本文所述任何方法釋放骨骼肌細胞，并將其放入本發明自體血小板濃縮液組合物。可采用直接注射的方式將其注射入心肌或者可用多導管注射的方式將其注射入左心室心肌。本發明成肌細胞制劑用于治療心臟疾患，如，心臟再生以及心力衰竭、慢性心力衰竭、缺血性與非缺血性心力衰竭及非缺血性心肌病的治療。對于骨骼肌成肌細胞的心臟受體,射血分數可提高9%。上述細胞制劑也可用于治療尿失禁(將按上述方法制備的成肌細胞抽提物注射入膀胱頸部)、回流性食管炎、胃食道逆流疾病(將按上述方法制備的成肌細胞抽提物注射入食管下端括約肌)和肛門失禁(將按上述方法制備的成肌細胞抽提物注射入肛門周圍)。另外，可制備成纖維細胞和成肌細胞混合物(成纖維細胞存在于肌肉活體切片中并與肌管和衛星干細胞一起從肌束膜上抽芽)。在治療心臟疾患時，將成纖維細胞制劑和成肌細胞制劑(按上述方法獲得)按成纖維細胞/成肌細胞大約成30:70之比混合的混合物插入心肌。對于膀胱頸部失禁，在按上述方法培養成肌細胞的同時也進行單獨的成纖維細胞培養，然后在超聲控制下，將成纖維細胞制劑注射入尿道旁邊，將成肌細胞注射入橫紋括約肌。b)衛星干細胞成肌細胞和衛星干細胞在本發明自體血小板濃縮液組合物中進行離體培養。在原代培養7天之后觀察細胞增殖的致敏情況。在細胞培育大約3至4周之后收獲細胞，然后將細胞放入含有人去上皮羊膜補片4x4cm和本發明自體血小板濃縮液組合物的培養基中(DMEM加5%至20%容積的本發明自體血小板濃縮液組合物)。另外，可使用活化的自體纖維蛋白聚合物補片。活化的自體纖維蛋白聚合物通過按血漿與葡萄糖酸鈣之比約10:3或約10:10對血漿進行離心處理而制得。然后將制得物放在紫外線中輻射10分鐘。在培育期間(通常約2至3周)，細胞在羊膜復合體上擴散，形成單層。細胞活力和單層進度通過每周兩次的補片邊緣活體切片和單層厚度的組織學評估進行評估。移植當天(例如，細胞培育大約3至4周之后)，心室表面散布有本發明自體血小板濃縮液組合物，然后將用上述方法獲得的補片放置在缺血性心室的創面，有細胞的一面朝下，以便補片上的干細 胞能夠在注射入心肌之后能夠充填缺血的節段。由羊膜保留細胞，羊膜為惰性，不會引發免疫反應。本發明衛星干細胞可作為心血管成形術的組織工程制劑，用于心臟再生和治療心力衰竭。例子4:自體成纖維細胞組合制劑本發明自體成纖維細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，真皮成纖維細胞在步驟⑷或(e)中提供。真皮成纖維細胞根據下列程序分離和擴增。在活體切片前一個月，用維生素A處理準備好的供體皮膚部位(在腋前襞耳狀部位后，例如，非太陽引起的老化部位)，以活化真皮成纖維細胞。進行全厚度皮膚活體切片，尺寸為10X6mm，然后在顯微鏡下解剖，以除去所有上皮細胞。然后將上皮形成的活體切片(真皮)切成3x3mm的塊，作為外植體。然后將乳突真皮放在上面，用氣液界面培養技術(前述Molnar等人，1996年)和氣界面培養法(前述Metier等人2002年)進行培養，將一半外植體暴露于空氣。將外植體放在DMEM中接種(例如，每孔6個外植體)，然后在37° C時將其放在皮氏培養皿或培養瓶中由95%的氧氣和5%的二氧化碳組成的氣流中進行培養。培養基每3天更換一次。在培育期間觀察2D模式下(平面單層、靜態生長)的成纖維細胞擴增。在細胞培育開始之后的7至9天，通過在培養基中添加稀釋的5%至20%本發明自體血小板濃縮液組合物將細胞增殖和顯型模式更改為3D:由自體血小板濃縮液組合物(0.2mL/孔)致敏的細胞剛好覆蓋底部。然后細胞生長成3D成纖維蛋白膠基質。然后細胞分化，在纖維蛋白膠中形成生物支架或網。通過媒體在網格中計數測量細胞數量，以評估細胞凋亡:采用倒置顯微鏡(Olympus )。在培育3至6周之后，可從纖維蛋白膠中收獲細胞。可采用經典的臺盼藍方法和細菌性評估(包括病毒污染)測試細胞活力。將用上述方法獲得的擴增成纖維細胞抽提物放在在含有本發明自體血小板濃縮液組合物的注射器中，然后將該制劑注射入面部皺紋，更具體地，將其注射入皺紋下。必須在整個臉部注射，以覆蓋前額、面頰、后牙區、臉頰、下巴和脖子。在細胞培養中，可通過將細胞暴露在波長為633nm的光下提高細胞擴增速度。本發明成纖維細胞制劑用于面部復新、改善面部皺紋和褶皺、治療輻射損傷(放射性皮炎或陽光灼傷皮膚)、老化皮膚或燒傷皮膚和/或面部皺紋、褶皺、痤瘡(特別是皮膚磨削術治療之后)、燒傷、風疹或小痘疤痕、白癜風、脂肪萎縮或脂肪代謝障礙(如與艾滋病相關的脂肪代謝障礙)、卡波濟氏肉瘤、皮膚瘢痕或掌跖纖維瘤病和/或皮膚復新治療。例子5:自體脂肪組織和脂肪細胞組合制劑脂肪組織優選在下腹部抽吸，然后用PBS洗滌法進行凈化，再進行離心處理，然后沉淀，以便將脂肪組織與甘油三酸酯和碎片分離。同時，采集血液，并進行離心處理，以制備本發明血漿濃縮液或PRP組合物。一旦甘油三酸酯減少，可通過使用抽吸PRP組合物的無菌轉移裝置在抽吸脂肪的注射器中將脂肪組織和PRP組合物混合。如果是供面部使用，血漿濃縮液與脂肪組織之比為10:10，如果是供胸部或造型使用，血漿濃縮液與脂肪組織之比為 10:3。優選地，在兩種濃縮細胞的最短制備時間內并在最短的細胞離體操控時間內立即注射。本發明自體細胞組合例子可采用本發明工藝制備，其中，例如，脂肪干細胞和間葉干細胞(MSC)在步驟(d)或(e)中提供。可用膠原酶(前成脂肪細胞、前內皮細胞)分離間葉干細胞(MSC)，將其 放入含PRP的懸浮液中，將該制劑注射，包括皮下注射、關節內注射，或用于矯形外科。該制劑可與浸泡脫細胞基質混合，直接敷用在傷口上，或者可在敷用前在實驗室中培養。成體脂肪干細胞用標準培養方法在本發明5%至20%容積自體血小板濃縮液組合物中進行分離。然后采用敷藥器將該制劑注射到患有組織缺損的患者身上，如外傷后缺損或四十歲左右患者與年齡相關的缺損。本發明脂肪細胞制劑用于治療脂肪萎縮(如HIV/AIDS患者)及其他面部先天性偏側萎縮。例子6:自體軟骨細胞組合制劑本發明軟骨細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，軟骨細胞在步驟(d)或(e)中提供。將軟骨與供體的膝蓋(活體切片尺寸10x5mm)分離，然后切塊。軟骨細胞在用本發明5%至20%稀釋自體血小板濃縮液組合物富化的培養基中培養4至6周。然后用酶消化(膠原酶和鏈霉蛋白酶)釋放軟骨細胞。然后采用外科手術的方式將細胞制劑注入患有深層軟骨缺損和損失的患者身上。本發明軟骨細胞制劑用于治療深層軟骨損失和破損或關節鏡檢查。本發明軟骨細胞制劑的另一個應用例子是用于鼻成形術，無需外科手術，而是采用單次注射程序:患有先天性鼻軟骨萎縮的患者。在注射前一天，取軟骨活體切片0.4x0.4cm,然后將其放在充滿DMEM和抗生素的無菌容器中。然后用包括胰蛋白酶和膠原酶在內的酶消化法處理活體切片。然后將釋放的軟骨細胞在本發明自體血小板濃縮液組合物中重新懸浮。患者首先進行局部麻醉和鼻子消毒。然后將上述軟骨細胞制劑注射到軟骨表面和/或需要體積增大或墊高的部位的骨膜。在第二階段，將本發明自體血小板濃縮液組合物注射到鼻子皮膚的淺部，以便生物刺激再生和皮膚復新。一小時后，注射完成，患者即可回家。我們觀察到或細胞的額外恢復:恢復和注射的軟骨細胞和血漿細胞的數量大約為IO9個細胞。因此，軟骨細胞制劑有助于治療鼻子軟骨缺陷，不需要進行外科手術，只需要注射即可。例子7:自體臍帶干細胞組合制劑本發明自體細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，臍帶干細胞在步驟(d)或(e)中提供。將臍帶干細胞分離出來，然后冷凍保存，用于治療血液疾患。本發明臍帶干細胞用于治療血液系統疾病(如地中海貧血)。注射過程是干細胞在血漿濃縮液中的再懸浮過程，然后是再次注射。例子8:自體跟腱細胞組合制劑本發明跟腱細胞組合例子可采用本發明工藝制備，其中，跟腱細胞在步驟(d)或(e)中提供。根據本標準操作程序，將在本發明5%至20%容積的自體血小板濃縮液組合物中的跟腱成纖維細胞分離出來。在用本發明自體血小板濃縮液組合物富化的培養基中將跟腱成纖維細胞培養大約1至3周。在注射之前，在新鮮加工的血漿濃縮液中將細胞再懸浮。然后將該細胞制劑注射如患者的受傷部位(例如，跟腱撕裂、關節炎部位)。為了便于定位受損部位和植入溶液更好的移植，可采用掃描方式進行注射。也可以在肩袖邊上注射跟腱成纖維細胞制劑:首先利用關節鏡修復肩袖撕裂處，然后沿長導管將跟腱成纖維細胞制劑注射如縫合部位。這樣有助于肩袖邊緣跟腱成纖維細胞的愈合，防止肩峰下有限空間中出現血腫，并可通過加速愈合以及增強修復和關鍵運動預防凍肩。本發明跟腱細胞制劑用于治療跟腱撕裂、創傷或上年齡引起的關節炎以及肩袖。例子9:自體靭帶及牙齦細胞組合制劑本發明韌帶及牙齦細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，骨膜及牙齦細胞在步驟⑷或(e)中提供。在全身麻醉和局部麻醉下，在無菌條件下從四條健康的母小獵犬下頜體頰側獲取骨膜(大約10x10mm)。然后將獲取的骨膜切成3x3mm的切片。然后將該組織直接放置在6孔細胞培養板上，然后在37° C時，將該其放在采用本發明5%至20%自體血小板濃縮液組合物富化的培養基上并在由5% 二氧化碳和95%空氣組成的濕空氣中進行培養(培養大約3至大約[β]周)。采用酶消化法分離骨膜和牙齦細胞，然后采用靜態技術進行培養。通常，6周的培養就足以獲得相應的可供移植的骨膜厚度。在再懸浮之后，將自體血小板濃縮液組合物和細胞制劑注射入患者受傷部位。例子10:自體角膜細胞組合制劑對于沒有使用酶解液的細胞采集，如膠原酶或胰蛋白酶，在配備熱敏涂層膜的皮氏培養皿中制備制劑。本發明自體細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，角膜細胞在步驟(d)或(e)中提供。
從角膜邊緣的內眥取活體切片，在覆有本發明自體血小板濃縮液組合物的皮氏培養皿或培養瓶中經過4周的培養，擴增角膜緣干細胞，以便在同一名患者身上做自體移植。在用本發明培養的活角膜角質形成細胞懸浮液種植該復合體之后，可采用離體方式將(緣源)角膜緣干細胞布放在單層去上皮人羊膜表面。大約有500，000個細胞用于種植，在進一步再培養大約3周之后，可將細胞覆蓋具有細胞的復合體表面。在大約原代細胞培養3周之后對細胞進行工程加工，可能需要重新種植。最后得到的由膠原蛋白、羊膜纖維和角膜角質形成細胞組成的生物細胞一細胞復合材料復合體包括膜和細胞單層。本發明角膜細胞制劑可以散布在可溶解的接觸鏡片上，該接觸鏡片將被應用到受損角膜。接觸鏡片消失后，細胞封閉角膜缺損。本發明角膜細胞制劑可以滴眼劑的形式局部為患有干眼癥的患者給藥。另外，上述羊膜可單獨用于受損角膜或者所述復合體和本發明細胞制劑可以粘附在生物或人工接觸鏡片內，然后又能夠用于角膜，并用眼墊覆蓋。另外，在應用之前，可將角膜細胞放在新鮮加工的血漿濃縮液中再懸浮。本發明角膜細胞制劑用于減輕干眼疼痛，治療因酸和堿腐蝕燒傷導致的史提芬約翰遜綜合征損傷和角膜色盲、角膜潰瘍(如拗性神經營養、皰疹和免疫引起的角膜潰瘍形成)。例子11:自體骨髓細胞組合制劑本發明自體細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，骨髓細胞在步驟(d)或(e)中提供。抽吸臀部骨髓，收獲骨髓，然后在現成的設備上進行離心處理，制備骨髓濃縮液，以便分離紅細胞。骨髓細胞制劑可單獨使用或者混入本發明血小板濃縮液或者用葡萄糖酸鈣再次離心處理，以形成可縫合膜，并用敷藥器進行涂敷或注射至患者受傷部位。本發明骨髓細胞制劑用于治療骨質缺損或 軟骨缺損。該骨髓細胞制劑可單獨使用或者與本發明血漿濃縮液合并使用。軟骨膜也可以與葡萄糖酸鈣結合使用。例子12:自體雪旺氏細胞組合制劑本發明自體細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，雪旺氏細胞在步驟(d)或(e)中提供。在局部麻醉下，對下肢隱神經或腓腸神經做活體切片。將神經活體切片切成小塊，在含有本發明自體血小板濃縮液組合物的皮氏培養皿中誘導原代培養。在3D模式下擴增單層，最后用酶消化法收獲細胞，然后將其在注射器中新鮮收獲的血小板濃縮液中再懸浮，以便局部滲濾手術暴露和損失的脊髓。培養的細胞包含髓磷脂。本發明雪旺氏細胞制劑用于治療末梢神經損失、神經縫合和脊髓損傷。例子13:自體人胰島細胞制齊U本發明自體細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，胰島細胞在步驟(d)或(e)中提供。通過切開式活體切片獲取胰島，然后用常規的酶消化發和聚蔗糖(Ficoll)和泛影葡胺(Hypaque)分離法(Page et al, 2007, Diba.Vas.Dis.Res., 7-12)進行分離，然后在用本發明自體血小板濃縮液組合物富化的培養基中再懸浮。然后通過門靜脈將胰島細胞制劑注射入肝臟。
本發明胰島細胞制劑用于治療I型糖尿病、胰島素依賴性糖尿病和逆轉糖尿病多血糖癥。例子14:自體人成骨細胞制劑本發明自體細胞組合的例子可采用本發明工藝制備，其中，成骨細胞在步驟(d)或(e)中提供。在局部麻醉下，從髂嵴或等效部位(上頜骨)打孔獲取皮層骨活體切片。在無菌條件下，由富有骨頭和成骨細胞離體培養經驗之人士將骨頭活體切片放在4° C的DMEM中或等效的輸送基質中。然后將骨頭活體切片切成小塊，并在37° C時在層流凈化罩中，將其放在10%1型膠原酶(Sigma或Boehringer)中消化和稀釋大約15分鐘。另外，也可使用胰蛋白酶消化法(Worthington)。4° C時，在10%DMEM中用本發明自體血小板濃縮液組合物清洗三次結束酶消化法。然后將該制劑進行離心處理，制丸并再懸浮。在本發明自體血小板濃縮液組合物中，用氣液界面培養技術將骨片接種在皮氏培養皿或培養瓶中，作為外植體。該制劑在37° C，在由95%的空氣和5%的二氧化碳組成的氣流下用抗生素、慶大霉素和兩性霉素B進行培養。培養基每周更換三次，每次在DMEM培養基中添加本發明10%至20%容積的自體血小板濃縮液組合物。細胞活力和形態學每周評估三次，以評估細胞蠕動、細胞凋亡和3D單層進展。用倒置顯微鏡K)lynipus_:H':)評估細胞微纖維的形成和分化。檢查是否有細菌和病毒污染。可在新鮮收獲的纖維蛋白多聚體膜(由含葡萄糖酸鈣的血小板濃縮液離心處理獲得，兩者比例大約10:3或10:10)中制造成骨細胞。纖維蛋白多聚體具有縫合作用。在采用上述方法獲得的100000個細胞進行膜種植后，可以將成骨細胞設計在人羊膜上，以創建細胞生物復合材料支架和細胞單層載體/復合體 ，讓單層膜擴增3至4周，使得可形成獨特的成骨細胞-羊膜-膜復合體，以使用和轉移細胞，覆蓋任何部位骨折不結合的骨質缺損或移植部位。另外，在注射/應用之前，也可將成骨細胞與信息的骨髓濃縮液和血小板濃縮液混合，然后在需要軟質凝膠時，可進一步將其與自體凝血酶血清混合。本發明成骨細胞制劑可用于治療骨質缺損、骨移植或骨疾病。
權利要求
1.一種凝血酶血清制備工藝，包括下列步驟: a)采集全血到一支管子中，管子包含細胞選擇膠體，優選為觸變膠體； b)離心處理所述管子直到凝血酶血清釋放；以及 c)采集所述凝血酶血清。
2.根據前述權利要求的凝血酶血清制備工藝，其中所述管子的離心處理優選采用大約1000克至大約2000克之間的一個力處理大約20至40分鐘之間一個的時間，較優選采用大約1500克的力處理大約25至35分鐘，優選采用1500克的力處理大約30分鐘。
3.根據前述任一項權利要求的凝血酶血清制備工藝，其中用于制備凝血酶血清的所述管子選自: i)空玻璃分離管；或 )優選地，含有基于聚合物的觸變膠體的玻璃分離管。
4.一種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物制備工藝，包括下列步驟: i)采集全血； )離心處理所述全血，直到形成一個凝塊； iii)采集所述凝塊。
5.根據前述權利要求的工藝獲得的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物。
6.一種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物制備方法，包括下列步驟: a)用含有觸變膠體、細胞選擇膠體和抗凝血酶的管子采集全血； b)離心處理所述管子； c)可選地，將所述透明質酸和富血小板血漿混合，優選采用倒置所述管子的方法進行混合； d)采集含有所述透明質酸和所述富化血漿的上清液； e)可選地，將所述透明質酸與所述富化血漿進一步混合。
7.根據前述權利要求的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備方法，其中所述離心處理步驟采用大約1000克至大約2000克之間的一個力處理大約3分鐘至大約7分鐘之間的一個時間；優選地，采用1500克的力處理大約3分鐘至大約7分鐘之間的一個時間；較優選地，采用大約1500克的力處理大約5分鐘。
8.傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物，含有透明質酸和根據前述任一項權利要求的方法獲得的富化血漿。
9.管子含有透明質酸、抗凝血劑和細胞選擇膠體，可選地進一步含有全血。
10.管子含有透明質酸和富化血漿，可選地，可進一步含有細胞選擇膠體和/或檸檬酸鈉。
11.根據前述任一項權利要求的方法、組合物或管子，其中所述細胞選擇膠體是觸變膠體和/或其中所述抗凝血劑為檸檬酸鈉。
12.—種富血小板血漿組合物的制備方法，包括下列步驟: a)離心處理一支管子中的全血，管子優選為本發明的管子，優選含有抗凝血劑，優選為檸檬酸鈉緩沖液(0.10M)或無水檸檬酸鈉(3.5mg/mL)。
b)可選地，將富化富血小板血漿從全血漿中分離出來；以及 c)可選地，將所述富化血漿與葡萄糖酸鈣混合，或者可選地，將所述富化血漿與根據前述任一項權利要求的凝血酶血清混合，并且可選地進一步與葡萄糖酸鈣混合。
13.根據前述任一項權利要求制備的富血小板血漿組合物，含有: a)血漿； b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板； c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞； d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原； 以及其中紅細胞濃度低于0.6X1012個細胞/升。
14.根據前述任一項權利要求制備的傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物含有: a)血漿； b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板； c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞； d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原； e)透明質酸； 以及其中，紅細胞的濃度低于0.6X1012個細胞/升。
15.止血劑、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物的制備工藝，包括: -將根據前述任一項權利要求的凝血酶血清與富血小板血漿組合物混合的步驟；或 -將凝血酶血清與根據前述任一項權利要求的富血小板血漿組合物混合的步驟；或 -將根據前述任一項權利要求的凝血酶血清與根據前述任一項權利要求的富血小板血漿組合物混合的步驟。
16.—種傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物或止血劑制備工藝,包括: a)提供一種根據前述任一項權利要求的富血小板血漿組合物、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物，優選為自體組合物； b)可選地，將所述組合物與凝血活化劑、凝血酶血清或根據前述任一項權利要求的凝血酶血清混合，優選為根據前述任一項權利要求的自體凝血酶血清；以及 c)可選地，混入至少一種細胞抽提物；優選地，混入一種自體細胞抽提物，其選自角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、內皮前體細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。
17.一種自體傷口修復劑組合物或自體組織修復劑組合物或自體止血劑制備工藝，包括: a)將自體富血小板血衆組合物、自體傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物，優選為根據前述任一項權利要求的自體組合物，與自體凝血酶血清，優選為根據前述任一項權利要求的自體凝血酶血清，進行混合；以及 b)可選地，混入至少一種自體細胞抽提物，選自角質形成細胞、骨髓細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、內皮前體細胞、雪旺氏細胞或跟腱細胞的抽提物。
其中所述自體血小板濃縮液、所述自體傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物、所述自體凝血酶血清和所述自體細胞抽提物均源自同一名患者或同一個動物。
18.根據前述任一項權利要求的自體傷口修復劑組合物或自體組織修復劑組合物或自體止血劑制備工藝或方法，其中所述富血小板與所述凝血酶血清以大約1: 1、3:1或10:1的比率混合。
19.根據前述任一項權利要求制備的傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑，含有: a)血漿； b)濃度至少為300X109個細胞/生的血小板； c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞； d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原； e)凝血活化劑、自體凝血酶血清或根據前述任一項權利要求的自體凝血酶血清； f)可選地，透明質酸； g)可選地，自體細胞抽提物，其選自角質形成細胞、骨髓細胞、成骨細胞、軟骨細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、內皮前體細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物。其中，紅細胞濃度低于0.6X1012個細胞/升。
20.根據前述任一項權利要求制備的傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物或止血劑含有: a)血漿； b)濃度至少為300X109 個細胞/升的血小板； c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞； d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原； e)根據前述任一項權利要求的自體凝血酶血清； f)可選地，透明質酸； g)可選地，自體細胞抽提物，其選自角質形成細胞、骨髓細胞、成骨細胞、軟骨細胞、成纖維細胞、骨外膜或角膜細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、脂肪組織、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、內皮前體細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物。其中，紅細胞濃度低于0.6X1012個細胞/L。
21.一種傷口或組織修復劑組合物制備工藝，包括下列步驟: a)離心處理一支管子中的全血，管子可選地含有透明質酸； b)可選地，將可選地含有透明質酸的富化富血小板血漿從全血漿中分離出來； c)再懸浮可選地含有透明質酸的富化血漿； d)可選地，將步驟c)獲得的、可選地含有透明質酸的血小板濃縮液與凝血活化劑、凝血酶血清、自體凝血酶血清或根據前述任一項權利要求的自體凝血酶血清混合； e)提供一種細胞抽提物，其選自角質形成細胞、成纖維細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、骨髓細胞、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、骨膜細胞、角膜細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、內皮前體細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物； f)將步驟d)中獲得的、可選地含有透明質酸的血小板濃縮液混合物與步驟e)中獲得的細胞抽提物混合。
22.根據前述任一項權利要求制備的分離細胞組合物含有: a)血漿； b)濃度至少為300X109個細胞/升的血小板； c)濃度至少為7X109個細胞/升的白細胞； d)濃度至少為3mg/L的纖維蛋白原； e)可選地，凝血活化劑、凝血酶血清、自體凝血酶血清或根據前述任一項權利要求的自體凝血酶血清； f)可選地，透明質酸； g)細胞抽提物，選自角質形成細胞、成纖維細胞、黑素細胞、朗漢斯巨細胞、脂肪細胞、骨髓細胞、肌肉細胞如成肌細胞和衛星細胞、成骨細胞、軟骨細胞、骨膜細胞、角膜細胞、臍帶細胞、間葉干細胞(MSC)、前成脂肪細胞、內皮前體細胞、雪旺氏細胞、跟腱細胞或胰島細胞的抽提物；
23.傷口或組織修復劑組合物或止血劑或可縫合膜或生物膠,含有根據前述任一項權利要求的分離細胞組合物。
24.根據前述任一項權利要求的傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、細胞組合物、富血小板血漿組合物或止血劑，其中所述傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、富血小板血漿組合物或止血劑與磷酸三鈣(TCP)和/或其他任何骨替代產品混合。
25.在骨膜層面上使用根據前述任一項權利要求的傷口修復劑組合物、細胞組合物、組織修復劑組合物、止血劑、或富血小板血漿組合物。
26.一種制備可縫合膜的工藝，包括將根據前述任一項權利要求的富血小板組合物、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物或細胞組合物或止血劑與葡萄糖酸韓混合。
27.一種制備可縫合膜的工藝，進一步包括對根據前述任一項權利要求的富血小板組合物、傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、細胞組合物或止血劑與葡萄糖酸鈣進行離心處理，優選地，離心處理采用大約2500克至大約3500克之間的一個力，處理大約10分鐘至大約30分鐘之間的一個時間，優選采用大約3000克的力處理15至25分鐘。
28.一種制備根據前述任一項權利要求的凝血酶血清、傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、細胞組合物、富血小板血漿組合物和/或止血劑的工藝，其中所述凝血酶血清、傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、細胞組合物、富血小板血衆組合物或止血劑為自體材料。
29.用于制備根據前述任一項權利要求的富血小板血漿組合物、傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、止血劑或細胞組合物或凝血酶血清的成套工具或裝置。
30.植入裝置包括: a)一個可滲透核心，含有根據前述任一項權利要求的血小板濃縮液組合物、富血小板血漿組合物、止血劑、傷口修復劑組合物或細胞組合物，可選地與透明質酸合并；以及 b) 一個圍繞所述核心的外套，所述外套含有生物兼容材料，優選為生物吸收性材料，優選為透明質酸。
31.根據前述任一項權利要求的傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、細胞組合物、富血小板血衆組合物或止血劑，其中所述傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、細胞組合物、富血小板血漿組合物或止血劑與磷酸三鈣(TCP)、透明質酸、殼聚糖、乳膏、乳膏膜、脂肪細胞、脂肪組織、細胞抽提物、骨髓濃縮液、潤滑素、CD明膠、和/或肉毒桿菌毒素混合。
32.根據前述任一項權利要求的傷口修復劑組合物、組織修復劑組合物、細胞組合物、富血小板血漿組合物或止血劑，用于牙科、整形外科、運動醫學、美容、美塑、外科手術、眼科和/或化療。
33.使用根據前述任一項權利要求的富血小板血漿組合物、凝血酶血清、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物或細胞組合物或止血劑，用于細胞再生，組織粘連，促進傷口愈合或組織愈合和/或人或動物傷口或組織的組織和/或軟骨/和/或骨頭和/或神經的封口和/或再生，或誘導患有牙周病或因其他疾患需要牙周再生的哺乳動物的傷口或牙周缺損部位牙周再生，或牙齦和/或軟骨重建，或促進傷疤或皺紋皮膚再生，或提高需要真皮脂肪移植或因其他疾患需要脂肪組織再生的哺乳動物的脂肪組織體積，或誘導患有心肌缺失或因其他疾患需要心肌再生組織再生的哺乳動物的心肌再生，或誘導患有眼角膜缺失或因其他疾患需要眼角膜再生的哺乳動物角膜再生，或誘導患有關節或軟骨缺失或因其他疾患需要關節或軟骨組織再生的哺乳動物關節或軟骨再生，或促進人或低等動物疤痕、皺紋或脂肪缺失部位皮膚再生，或誘導患有末梢神經損傷、神經縫術或脊髓損傷或因其他疾患需要末梢神經再生的哺乳動物末梢神經再生，或誘導患有骨損傷、骨缺失或因其他疾患需要骨頭再生的哺乳動物骨頭再生，或用于整形手術注射和美容注射，或用于皮膚組織再生和/或復新，特別促進和/或激發皮膚再生，如減少皺紋、深層皺紋、痤瘡、燒傷、風疹或小痘疤痕、白癲風和脂肪萎縮、鼻唇線改良與皮膚損傷或疾病治療如皮膚燒傷、卡波濟氏肉瘤、皮膚瘢痕或掌跖纖維瘤病、減少與皮膚或組織相關的疼痛，或用于傷口或組織愈合或再生治療，特別是創傷或手術傷口的治療，如安裝和/或承托和/或封閉自體移植或假肢移植、治療脈管炎、潰瘍如糖尿病神經性潰瘍或褥瘡潰瘍、糖尿病性潰瘍、穿孔性潰瘍、糖尿病性穿孔性潰瘍、關節炎、假關節炎、放射性皮炎或瘺管閉合，或用于心臟疾患和心臟再生，如治療心力衰竭、慢性心力衰竭、缺血性與非缺血性心力衰竭及心肌病，或用于骨頭、軟骨和關節疾病，如軟骨損傷、關節炎、軟骨 和/或骨頭損傷(如深層軟骨損傷和/或侵蝕和/或關節鏡檢查)、跟腱撕裂及肩袖，或用于角膜疾病，如化學燒傷引起的角膜混濁、史提芬約翰遜綜合征損傷、角膜疤痕及角膜潰瘍，或用于末梢神經損傷、神經縫合和脊髓損傷。
34.在傷口、受損組織、受損骨頭或牙周缺損或腔體上使用根據前述任一項權利要求的富血小板血衆組合物、凝血酶血清、細胞組合物、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物或止血劑。
35.使用根據前述任一項權利要求的富血小板血漿組合物、凝血酶血清、細胞組合物、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物或止血劑，以制造用于愈合傷口或組織或租金骨頭或牙周膜再生和/或骨頭和/或組織再生(如皮膚、軟骨、肌肉、跟腱、韌帶、脂肪組織、角膜、末梢神經、脊柱或骨頭再生)的藥物。
36.使用根據前述任一項權利要求的富血小板血漿組合物、凝血酶血清、細胞組合物、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物或止血劑，以制造用作為抗衰老劑或皮膚修復劑如傷疤修復劑、脂肪萎縮修復劑、皺紋填充和/或修復劑的美容制劑和制造用于美容制劑、抗衰老管理、容積矯正劑和/或頭發生長劑的美容制劑。
37.含有根據前述任一項權利要求的富血小板血漿組合物、凝血酶血清、細胞組合物、傷口修復劑組合物或組織修復劑組合物或止血劑和美容上可接受載體的一種美容組合物。
38.用于采集和分離流體樣本的管子包括: i)尺寸與直徑不同的兩個不同部分；以及 )至少一個將這兩部分隔離的濾網。
39.根據前述權利要求的管子，其中所述管子由環烯烴聚合物(COP)或環烯烴共聚物(COC)制成。
40.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述濾網固定在所述管子上和/或所述濾網沿所述管子縱軸延長，以便具有延長的與所述管子接觸的表面。
41.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述管子包含兩層。
42.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述兩層重疊，由一個外層和一個內層組成，其中，可選地所述外層垂直延長，以便具有延長的與所述管子接觸的表面。
43.根據前述任一項權利要求的管子，其中位于所述管子上部的所述管子的第一部分的容積大于位于所述管子下部的第二部分，優選地，含有濾網的所述管子的第一部分的容積大約為9.5立方厘米，所述管子的第二部分的容積大約為3.5立方厘米。
44.根據前述任一項權利要求的管子，其中位于所述管子下部的所述管子第二部分的直徑比位于所述管子上部的管子第一部分的小。
45.根據前述任一項權利要求的管子，其中位于所述管子上部的所述管子的第一部分的外徑大約為15.5mm,其中所述管子的第一部分的內徑大約為13.32mm。
46.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述管子的第二部分的外徑大約為13.7mm,其中所述管子的第二部分的內徑大約為11.6mm。
47.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述濾網包括多個帶有開孔的對稱部域系列。
48.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述內層由4個對稱部域系列組成，每系列2個部域，其中每個部域由排列規則的多個漏斗組成。
49.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述外內層由4個對稱部域系列組成，每系列3個部域，其中每個部域由排列規則的梯形組成。
50.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述內層的厚度大約為1mm，和/或其中所述外層的厚度大約為1mm。
51.根據前述任一項權利要求的管子，其中該內層的每個漏斗的位置剛好使所述漏斗中心的延長線大約位于地皮點擊外層下層的兩個梯形之間，優選地，梯形和漏斗連續交替排列。
52.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述內層濾網的體積大約為0.26立方厘米，其中所述外層濾網的體積大約為0.29立方厘米。
53.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述濾網的中心彎曲，優選地，所選濾網彎曲程度恰好使所述管子中心距離所述外層底座的長度大約為0.5mm。
54.根據前述任一項權利要求的管子，其中所述外層的高度大約為8mm，所述外層的外徑大約為12.74mm，所述內層的內徑大約為9.6mm,內層非彎曲表面起算的所述內層高度大約為6_，和/或從內層彎曲上表面中心起算的所述內層高度大約為5.5_。
55.根據前述任一項權利要求的管子在根據前述任一項權利要求的方法中的使用。
56.成套工具或裝置，包含至少一支根據前述任一項權利要求的管子。
57.根據前述任一項權利要求的成套工具或裝置，其中所述成套工具包括一支用于制備根據前述任一項權利要求的富血小板組合物的管子和/或一支用于制備根據前述任一項權利要求的凝血酶血清的管子。
58.一種血袋系統或采血管裝置，包含一個與一個多導管接頭連接的單入口導管，接頭導管與至少兩個血袋或管子連接，其中多導管接頭的每個接頭導管都與單個袋子或管子連接。
59.一種血袋系統或采血管裝置，包括: a)單入口導管； b)一個帶有多個接頭導管的多導管接頭；以及 c)至少兩個袋子或兩支管子。
其中所述單入口導管與所述多導管接頭連接，其中所述多導管接頭的每個所述接頭導管都與單個袋子或管子連接。
60.根據前述任一項權利要求的血袋系統或采血管裝置，其中所述血袋系統包括8個袋子或管子和/或其中每個所述袋子的容量大約為10mL。
61.根據前述任一項權利要求的血袋系統或采血管裝置，其中所述血袋系統提供密封的流動傳送和/或每個所述袋子一旦充滿即分別密封和/或每個所述袋子都插入另一個外封中。
全文摘要
本發明涉及組織再生領域。特別是涉及凝血酶、血小板濃縮液和傷口修復劑單獨或合并細胞抽提物、細胞組合物的新工藝、管子和裝置及其使用。
文檔編號A61K35/14GK103079577SQ201180021595
公開日2013年5月1日 申請日期2011年3月11日 優先權日2010年3月11日
發明者安托萬·圖瑞茲 申請人:安托萬·圖瑞茲