專利名稱：一種制備牛膽結(jié)石的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于制藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種中藥原料藥的制造方法，尤其涉及一種制備牛膽結(jié)石的方法。
背景技術(shù)：
牛膽結(jié)石即牛黃，是珍貴的中藥材。它具有清心、豁痰、開竅、涼肝、息風(fēng)、解毒等功效。我國許多名貴中成藥，如安宮牛黃丸、六神丸等均以牛黃為主藥配制而成。但是牛體內(nèi)自然成石率僅為廣2%，因此，藥用資源非常稀缺，價格昂貴，依賴進口，不僅花費了大量的外匯，而且也制約了我國傳統(tǒng)醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展。1956年以來，我國的醫(yī)藥工作者積極從事人工牛黃的研究，1971年人工牛黃應(yīng)用于中成藥組方中，部分緩解了天然牛黃的供需矛盾。但這種人工牛黃主要是膽酸、豬去氧膽酸和極微量的膽紅素以及大量淀粉研末過篩而得的粉末，不是牛膽結(jié)石，其成份、結(jié)構(gòu)、含量及已知各種微量成份均與天然牛黃相差太遠，不具備天然牛黃的性狀、結(jié)構(gòu)、成份、含量特征，臨床療效遠不及天然牛黃。上世紀70年代以來，我國云南、廣東、內(nèi)蒙等地的醫(yī)藥工作者，在活牛膽囊內(nèi)培植牛黃的實驗研究獲得了成功。但需對牛體進行剖腹手術(shù)并且該手術(shù)比較復(fù)雜，而且2 3年才能剖腹取出尼龍絲網(wǎng)，刮下棕黃色附著物。成石率低，產(chǎn)量小，膽紅素含量低，質(zhì)量不穩(wěn)定。而且，此產(chǎn)品并不是牛膽結(jié)石，而是沉積在尼龍絲網(wǎng)上的棕黃色膽色素鈣顆粒及粘液刮下干燥后所形成的粉末。也不可能規(guī)模化生產(chǎn)。上世紀70年代初，武漢同濟醫(yī)科大學(xué)附屬同濟醫(yī)院肝膽外科蔡紅嬌醫(yī)師在對人類膽結(jié)石形成的原因和機理進行研究并獲得成功的基礎(chǔ)上，進一步用此原理進行牛膽囊膽汁內(nèi)培育牛膽結(jié)石的研究，取得了成功并于1989年申報了“一種人工體外制作牛膽結(jié)石的方法”的發(fā)明專利(申請?zhí)?9100505. 6)。利用該方法制作的牛膽結(jié)石，其外觀、結(jié)構(gòu)、成份、 含量與天然牛黃基本相同。但是限于當(dāng)時的條件，特別是1985版《中國藥典》對牛黃的膽酸、膽紅素含量未作規(guī)定，因此，其制成的牛膽結(jié)石的膽紅素、膽酸等含量較低。不僅如此， 上述方法除配方的牛膽汁之外，制備膽紅素鈣，多用豬膽汁代替，膽汁未經(jīng)細菌發(fā)酵即可以成石。因此，其制成的牛膽結(jié)石卻含有豬去氧膽酸。中國藥典1990年版一部明確規(guī)定牛黃是牛膽結(jié)石，含膽紅素35%以上，膽酸6%以上，并規(guī)定了相應(yīng)的鑒別和檢測方法。因此用上述方法制成的牛膽結(jié)石不能滿足新的《中國藥典》對牛膽結(jié)石規(guī)定的藥用要求。2000年，由武漢大鵬藥業(yè)有限公司組織科研人員在ZL89100505. 6發(fā)明專利的基礎(chǔ)上，根據(jù)1990年版《中國藥典》要求，研制了一種新的在牛體外制備牛膽結(jié)石(即體外培育牛黃)的方法。該方法既適應(yīng)規(guī)?；a(chǎn)要求，生產(chǎn)出的產(chǎn)品又能滿足新的《中國藥典》 要求。并于2001年申報了專利(申請?zhí)?1133550. 5)。該方法是在牛膽汁加入一定量的大腸桿菌、腸球菌、變形桿菌的單一菌液或其組合菌液，對牛膽汁進行細菌發(fā)酵處理。再利用發(fā)酵牛膽汁和澄清飽和鈣鹽溶液制取有效成份的沉淀物，然后根據(jù)藥用要求加入適量的膽紅素、膽酸、去氧膽酸和無機鹽后，制作復(fù)合膽紅素鈣。再利用復(fù)合膽紅素鈣和發(fā)酵牛膽汁在體外培育牛膽結(jié)石。由于現(xiàn)在生產(chǎn)規(guī)模不斷擴大，原方法中的有效成份容易分解，自然干燥方式周期太長，已不能適應(yīng)更大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)要求。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是在Z L01133550. 5發(fā)明專利的基礎(chǔ)上，根據(jù)更大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)要求和成本控制原則而研發(fā)的一種生產(chǎn)周期更短，效率更高的在牛體外制作牛膽結(jié)石(即體外培育牛黃)的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案如下 1、制備發(fā)酵牛膽汁
(1)調(diào)節(jié)天然牛膽汁中的牛磺酸含量至3 7%(g/ml)，使其達到藥用要求；
(2)牛膽汁入罐后利用蒸汽進行滅菌處理，然后按每10000ml牛膽汁接種10(T500ml菌液的比例，將大腸桿菌、變形桿菌或腸球菌的單一菌液或其組合菌液接種到牛膽汁中，進行發(fā)酵處理；
(3)發(fā)酵完成后利用蒸汽對發(fā)酵液進行滅活處理。2、利用發(fā)酵牛膽汁制備復(fù)合膽紅素鈣
(1)取100(T4000ml純化水加入2(T40g氧化鈣，攪拌，即得飽和氧化鈣溶液。(2)取出定量的發(fā)酵牛膽汁，每IOOOml加入100(T4000ml飽和氧化鈣溶液以及 5 15g焦亞硫酸鈉，對其進行攪拌、加熱至沸騰，濾取棕紅色沉淀物；
(3)在棕紅色沉淀物中，加入適量的水進行攪拌、洗滌，靜置后濾去上清液，以除去水溶性雜質(zhì)，再向沉淀中加入總重量35飛5%的膽紅素、5 15%的膽酸、2. 5 7. 5%的去氧膽酸、 0. 3 0. 6%的硫酸鋅、0. 3 0. 6%的硫酸鎂后，攪拌混勻；
(4)冷凍后低溫真空干燥；
3、在15°C _37°C條件下，利用發(fā)酵牛膽汁和復(fù)合膽紅素鈣在牛體外培育牛膽結(jié)石
(1)制備成石膽汁
在15 37°C下，每千克干燥的復(fù)合膽紅素鈣中添加50(Tl500ml發(fā)酵牛膽汁、0. 4g^l. 2g 焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉或硫代硫酸鈉的單一組份或其混合物作為抗氧劑，再按發(fā)酵牛膽汁純化水=(廣3) 1的體積比例加入適量的純化水，充分攪拌后，靜置，制成成石膽汁；
(2)培育牛膽結(jié)石
對成石膽汁用酸液進行PH調(diào)節(jié)，使其pH值在6. 8以下，然后對成石膽汁進行偏軸定向旋轉(zhuǎn)，待其類球形結(jié)石形成后，停止旋轉(zhuǎn)，靜置培育，取出結(jié)石。(3)牛膽結(jié)石的整形
取出結(jié)石，放入整形機中，在轉(zhuǎn)速30(Γ500轉(zhuǎn)/分鐘，溫度18 26°C的條件下整形15 30 分鐘。(4)牛膽結(jié)石的低溫真空干燥
將整形后的牛膽結(jié)石放入低溫真空干燥箱中，在溫度2(T40 °C，真空度 0. 015 0. 045MPa的條件下干燥18 30小時。本發(fā)明接種發(fā)酵前牛膽汁中含有雜菌，對后面發(fā)酵菌種的生長繁殖有一定抑制作用。對牛膽汁進行滅菌處理可以有效殺滅牛膽汁和發(fā)酵罐中的雜菌，發(fā)酵母液得到了純化， 使發(fā)酵菌種在其中有足夠的營養(yǎng)而旺盛生長，大大提高了生產(chǎn)效率。
本發(fā)明發(fā)酵完成后菌體會產(chǎn)出廢物，經(jīng)過滅活處理后能防止菌體代謝的后期廢物的產(chǎn)出，保證了產(chǎn)品質(zhì)量。本發(fā)明在加入澄清飽和鈣溶液的同時加入適量抗氧劑偏重亞硫酸鈉，當(dāng)升溫到沸騰的過程中抗氧劑首先被氧化，對膽紅素起到了有效的保護作用，防止了其被氧化本發(fā)明當(dāng)在低溫、低真空度的條件下干燥時，水在短時間內(nèi)由晶體狀態(tài)直接變?yōu)闅鈶B(tài)而揮發(fā)，在復(fù)合膽紅素鈣中留下空隙，使其變的疏松而易于處理。其次在低溫條件下， 有效的保護了蛋白一多糖復(fù)合物等生物活性物質(zhì)的藥理活性。本發(fā)明在制備成石牛膽汁過程中加入抗氧劑，其是一類能夠有效阻止或延緩自動氧化的物質(zhì)，主要用于防止藥物的氧化變質(zhì)。藥物的氧化反應(yīng)是引起藥物不穩(wěn)定的主要因素之一。膽紅素的氧化分解是含有自由基的自氧化過程，在這一過程中僅有很少的氧就能引起反應(yīng)。而空氣中的氧氣占21% (v/v)，在如此多氧的存在下，膽紅素不需要其他氧化劑的參與，室溫就能自發(fā)引起“自氧化反應(yīng)”。這種反應(yīng)的過程很復(fù)雜，屬于游離基誘發(fā)的“鏈反應(yīng)”，光和熱能加速這種反應(yīng)的進行，微量的金屬離子或過氧化物也會催化這種反應(yīng)。在自氧化過程中，抗氧劑的作用是提供電子或有效氫離子，供給自由基接受，使自氧化鏈反應(yīng)中斷。膽紅素氧化的結(jié)果，使有效成份的含量降低，影響了產(chǎn)品療效?？寡鮿┍旧硎且环N還原劑，與有效成份同時存在時，抗氧劑遇氧后首先被氧化，對易氧化的有效成份起到保護作用，從而保證有效成份的穩(wěn)定性。本發(fā)明使成形后的牛膽結(jié)石在整形機中不斷地、連續(xù)地、重復(fù)地做出復(fù)雜的多軌跡運動，從而使牛膽結(jié)石表面堅固、致密、平整、光滑，有效地改善了產(chǎn)品的均一性，提高了成品率，杜絕了表面物料的脫落，減少了有效成份的損耗，提高了產(chǎn)品質(zhì)量。本發(fā)明根據(jù)2010版《中國藥典》的規(guī)定，體外培育牛黃的水分應(yīng)控制在9%以下。 牛膽結(jié)石中的水分子在負壓的環(huán)境下，沸點降低，從而能夠在較低的溫度下迅速從產(chǎn)品的孔隙中變成氣態(tài)并被抽走，最終能夠在較短的周期內(nèi)達到干燥的目的，符合2010版《中國藥典》的要求。而且，始終保持低溫環(huán)境，也最大程度地避免了膽紅素等有效成份的降解。根據(jù)本發(fā)明制備的牛膽結(jié)石各項指標(biāo)均符合2010版《中國藥典》關(guān)于體外培育牛黃的要求，而且生產(chǎn)周期大大縮短，有效減少了能源耗用，成本明顯下降。具有較好的社會效益和經(jīng)濟效益。
具體實施例方式實施例1
(1)牛膽汁的獲取
取出新鮮牛膽汁，調(diào)節(jié)?；撬岷渴蛊溥_到3%，低溫保存?zhèn)溆谩?2)制備發(fā)酵牛膽汁
a.將牛膽汁置于發(fā)酵罐中，開啟蒸汽使發(fā)酵罐內(nèi)液溫升至105°C后滅菌15分鐘后關(guān)蒸汽。開啟冷卻水降低溫度，待溫度降到室溫時打開接種口蓋，進行無菌處理后，按每10000ml 牛膽汁接種IOOml菌體溶液的比例，將大腸桿菌和變形桿菌的組合菌液接種至牛膽汁中， 蓋緊接種口。開啟攪拌，調(diào)節(jié)蒸汽量，使料液溫度穩(wěn)定至42°C發(fā)酵。b.發(fā)酵72小時后，開攪拌，調(diào)節(jié)蒸汽量升溫至105°C，溫度維持105°C，對發(fā)酵液進行滅菌15分鐘，開啟冷卻水降低溫度，待溫度降到室溫后停止降溫。
(3)制備復(fù)合膽紅素鈣
a.取發(fā)酵牛膽汁10000ml加入IlOOOml澄清飽和氧化鈣溶液及5g焦亞硫酸鈉，攪拌、 煮沸，冷卻后取出棕紅色沉淀物。b.棕紅色沉淀物加純化水10000 ml，充分攪拌，靜置后傾去上清液，每569g沉淀 (干重)加入膽紅素350g，再加入膽酸50g、去氧膽酸25g、硫酸鋅3g、硫酸鎂3g，攪拌、混勻。c.放入低溫冷凍箱中，-10°C冷凍16小時，之后轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，抽真空到 0. 085Mpa，40°C干燥48小時，即得復(fù)合膽紅素鈣。(4)在37°C室溫條件下培育藥用牛膽結(jié)石
a.取500ml的發(fā)酵牛膽汁，在37°C下加入到IKg的復(fù)合膽紅素鈣中(復(fù)合膽紅素按干燥后的重量計算)，再加入0. 4g焦亞硫酸鈉，再加入500ml純化水，充分攪拌后，靜置，制成成石膽汁。成石膽汁用酸液進行PH調(diào)節(jié)，使其pH值在6.0以下。然后對成石膽汁進行偏軸定向旋轉(zhuǎn)，待其形成類球形結(jié)石后，停止旋轉(zhuǎn)，靜置培育，取出結(jié)石。b.取出結(jié)石，放入整形機中，調(diào)整轉(zhuǎn)速至300轉(zhuǎn)/分鐘，在溫度18°C、相對濕度60% 的條件下整形15分鐘，取出結(jié)石。c.將整形后的結(jié)石放入低溫真空干燥箱中，在溫度20°C，真空度0. 015MPa的條件下干燥30小時。即得牛膽結(jié)石成品。上述成品呈均一的球形，直徑0. 5-3cm，表面光滑，呈黃紅色至棕黃色。體輕，質(zhì)松脆，斷面有同心層紋。經(jīng)紫外分光光度計檢測膽紅素含量，薄層掃描儀檢測膽酸含量，符合 《中國藥典》2010版P162中體外培育牛黃的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。實施例2 (1)牛膽汁的獲取
取出新鮮牛膽汁，調(diào)節(jié)?；撬岷渴蛊溥_到5%，低溫保存?zhèn)溆谩?2)制備發(fā)酵牛膽汁
a.將牛膽汁置于發(fā)酵罐中，開啟蒸汽使發(fā)酵罐內(nèi)液溫升至108°C后滅菌15分鐘后關(guān)蒸汽。開啟冷卻水降低溫度，待溫度降到室溫時打開接種口蓋，進行無菌處理后，按每10000ml 牛膽汁接種300ml菌體溶液的比例，將大腸桿菌接種至牛膽汁中，蓋緊接種口。開啟攪拌， 調(diào)節(jié)蒸汽量，使料液溫度穩(wěn)定至40°C發(fā)酵。b.發(fā)酵60小時后，開攪拌，調(diào)節(jié)蒸汽量升溫至108 °C，溫度維持108 °C，對發(fā)酵液進行滅菌15分鐘，開啟冷卻水降低溫度，待溫度降到室溫后停止降溫。(3)制備復(fù)合膽紅素鈣
a.取發(fā)酵牛膽汁10000ml加入30000ml澄清飽和氧化鈣溶液及IOg焦亞硫酸鈉，攪拌、煮沸，冷卻后取出棕紅色沉淀物。b.棕紅色沉淀物加純化水10000 ml，充分攪拌，靜置后傾去上清液，每390g 沉淀(干重)加入膽紅素450g，再加入膽酸100g、去氧膽酸50g、硫酸鋅5g、硫酸鎂5g，攪拌、 混勻，備用。c.放入低溫冷凍箱中，-8°C冷凍20小時，之后轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，抽真空到 0. 085Mpa，50°C干燥36小時，即得復(fù)合膽紅素鈣。(4)在26°C室溫條件下培育藥用牛膽結(jié)石
a.取IOOOml的發(fā)酵牛膽汁，在26°C下加入到IKg的復(fù)合膽紅素鈣中(復(fù)合膽紅素按干燥后的重量計算)，再加入0. Sg亞硫酸氫鈉，再加入500ml純化水，充分攪拌后，靜置，制成成石膽汁。成石膽汁用酸液進行PH調(diào)節(jié)，使其PH值在6. 4以下。然后對成石膽汁進行偏軸定向旋轉(zhuǎn)，待其形成類球形結(jié)石后，停止旋轉(zhuǎn)，靜置培育，取出結(jié)石。b.取出結(jié)石，放入整形機中，調(diào)整轉(zhuǎn)速至400轉(zhuǎn)/分鐘，在溫度22°C、相對濕度65% 的條件下整形15分鐘，取出結(jié)石。c.將整形后的結(jié)石放入低溫真空干燥箱中，在溫度30°C，真空度0. 03MPa的條件下干燥24小時。即得牛膽結(jié)石成品。上述成品呈均一的球形，直徑0. 5-3cm，表面光滑，呈黃紅色至棕黃色。體輕，質(zhì)松脆，斷面有同心層紋。經(jīng)紫外分光光度計檢測膽紅素含量，薄層掃描儀檢測膽酸含量，符合 《中國藥典》2010版P162中體外培育牛黃的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。
實施例3 (1)牛膽汁的獲取
取出新鮮牛膽汁，調(diào)節(jié)牛磺酸含量使其達到7%，低溫保存?zhèn)溆谩?2)制備發(fā)酵牛膽汁
a.將牛膽汁置于發(fā)酵罐，開啟蒸汽使發(fā)酵罐內(nèi)液溫升至110°C后滅菌15分鐘后關(guān)蒸汽。開啟冷卻水降低溫度，待溫度降到室溫時打開接種口蓋，進行無菌處理后，按每10000ml 牛膽汁接種500ml菌體溶液的比例，將腸球菌接種至牛膽汁中，蓋緊接種口。開啟攪拌，調(diào)節(jié)蒸汽量，使料液溫度穩(wěn)定至37°C發(fā)酵。b.發(fā)酵48小時后，開攪拌，調(diào)節(jié)蒸汽量升溫至110°C，溫度維持110°C，對發(fā)酵液進行滅菌15分鐘，開啟冷卻水降低溫度，待溫度降到室溫后停止降溫。(3)制備復(fù)合膽紅素鈣
a.取發(fā)酵牛膽汁10000ml加入40000ml澄清飽和氧化鈣溶液及15g焦亞硫酸鈉，攪拌、 煮沸，冷卻后取出棕紅色沉淀物。b.棕紅色沉淀物加純化水10000 ml，充分攪拌，靜置后傾去上清液，每213g 沉淀(干重)加入膽紅素550g，再加入膽酸150g、去氧膽酸75g、硫酸鋅6g、硫酸鎂6g，攪拌、 混勻，備用。c.放入低溫冷凍箱中，-5°C冷凍24小時，之后轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，抽真空到 0. 085Mpa，60°C干燥24小時，即得復(fù)合膽紅素鈣。(4)在15°C室溫條件下培育藥用牛膽結(jié)石
a.取1500ml的發(fā)酵牛膽汁，在15°C下加入到IKg的復(fù)合膽紅素鈣中(復(fù)合膽紅素按干燥后的重量計算)，再加入1. 2g硫代硫酸鈉，再加入500ml純化水，充分攪拌后，靜置，制成成石膽汁。成石膽汁用酸液進行PH調(diào)節(jié)，使其pH值在6. 8以下。然后對成石膽汁進行偏軸定向旋轉(zhuǎn)，待其形成類球形結(jié)石后，停止旋轉(zhuǎn)，靜置培育，取出結(jié)石。b.取出結(jié)石，放入整形機中，調(diào)整轉(zhuǎn)速至500轉(zhuǎn)/分鐘，在溫度26°C、相對濕度70% 的條件下整形15分鐘，取出結(jié)石。c.將整形后的結(jié)石放入低溫真空干燥箱中，在溫度40°C，真空度0. 045MPa的條件下干燥18小時。即得牛膽結(jié)石成品。上述成品呈均一的球形，直徑0. 5-3cm，表面光滑，呈黃紅色至棕黃色。體輕，質(zhì)松脆，斷面有同心層紋。經(jīng)紫外分光光度計檢測膽紅素含量，薄層掃描儀檢測膽酸含量，符合《中國藥典 》2010版P162中體外培育牛黃的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。
權(quán)利要求
1.一種制備牛膽結(jié)石的方法，其特征在于，包括如下步驟一、制備發(fā)酵牛膽汁(1)調(diào)節(jié)天然牛膽汁中的?；撬岷恐? 7%(g/ml)；(2)牛膽汁入罐后利用蒸汽進行滅菌處理，然后按每IOOOOml牛膽汁接種10(T500ml菌液的比例，將大腸桿菌、變形桿菌或腸球菌的單一菌液或其組合菌液接種到牛膽汁中，進行發(fā)酵處理；(3)發(fā)酵完成后利用蒸汽對發(fā)酵液進行滅活處理；二、利用發(fā)酵牛膽汁制備復(fù)合膽紅素鈣(1)取100(T4000ml純化水加入2(T40g氧化鈣，攪拌，即得飽和氧化鈣溶液；(2)取出定量的發(fā)酵牛膽汁，每IOOOml加入100(T4000ml飽和氧化鈣溶液以及5 15g 焦亞硫酸鈉，對其進行攪拌、加熱至沸騰，濾取棕紅色沉淀物；(3)在棕紅色沉淀物中，加入適量的水進行攪拌、洗滌，靜置后濾去上清液，以除去水溶性雜質(zhì)，再向沉淀中加入總重量35飛5%的膽紅素、5 15%的膽酸、2. 5 7. 5%的去氧膽酸、 0. 3 0. 6%的硫酸鋅、0. 3 0. 6%的硫酸鎂后，攪拌混勻；(4)冷凍后低溫真空干燥；三、在15°C_37°C條件下，利用發(fā)酵牛膽汁和復(fù)合膽紅素鈣在牛體外培育牛膽結(jié)石(1)制備成石膽汁在15 37°C下，每千克干燥的復(fù)合膽紅素鈣中添加50(Tl500ml發(fā)酵牛膽汁、0. 4g^l. 2g 焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉或硫代硫酸鈉的單一組份或其混合物作為抗氧劑，再按發(fā)酵牛膽汁純化水=(廣3) 1的體積比例加入適量的純化水，充分攪拌后，靜置，制成成石膽汁；(2)培育牛膽結(jié)石對成石膽汁用酸液進行PH調(diào)節(jié)，使其pH值在6. 8以下，然后對成石膽汁進行偏軸定向旋轉(zhuǎn)，待其類球形結(jié)石形成后，停止旋轉(zhuǎn)，靜置培育，取出結(jié)石；(3)牛膽結(jié)石的整形(4)牛膽結(jié)石的低溫真空干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟二中，將配好的復(fù)合膽紅素鈣放入低溫冷凍箱中，一 5°C至一 10°C冷凍20分鐘，之后轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，抽真空到 0. 085Mpa，干燥24小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟三中，牛膽結(jié)石的整形具體為放入整形機中，在轉(zhuǎn)速300 500轉(zhuǎn)/分鐘，溫度18 26°C的條件下整形15 30分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟三中，牛膽結(jié)石的低溫真空干燥具體為將整形后的牛膽結(jié)石放入低溫真空干燥箱中，在溫度2(T40°C，真空度 0. 015 0. 045MPa的條件下干燥18 30小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備牛膽結(jié)石的方法。將菌液接種到牛膽汁中，進行發(fā)酵處理，然后利用蒸汽進行滅活處理；發(fā)酵牛膽汁中加入飽和氧化鈣溶液以及焦亞硫酸鈉，攪拌、加熱至沸騰，濾取棕紅色沉淀物；再向沉淀中加入膽紅素、膽酸、去氧膽酸、硫酸鋅、硫酸鎂后，攪拌混勻，冷凍后低溫真空干燥；在15~37℃下，復(fù)合膽紅素鈣中添加發(fā)酵牛膽汁、抗氧劑、純化水，充分攪拌后，靜置，制成成石膽汁；對成石膽汁用酸液進行pH調(diào)節(jié)在6.8以下，然后進行偏軸定向旋轉(zhuǎn)，待其類球形結(jié)石形成后，停止旋轉(zhuǎn)；對結(jié)石進行整形和冷凍干燥即得到成品。該方法生產(chǎn)周期更短，效率更高，適合更大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)要求。
文檔編號A61K35/413GK102429927SQ20111043098
公開日2012年5月2日 申請日期2011年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月21日
發(fā)明者石聿新, 蔡紅嬌, 駱小梅 申請人:武漢大鵬藥業(yè)有限公司