專(zhuān)利名稱(chēng):鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種延緩、抑制近視的藥物的制備方法,特別是利用鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑降低CGMP (鳥(niǎo)苷-3’,5’ -環(huán)化一磷酸,環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷)水平在抑制近視藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
95%的人類(lèi)近視都是以眼軸過(guò)度延長(zhǎng)以及后極部鞏膜顯著變薄為主要特征。人類(lèi)和哺乳動(dòng)物的鞏膜組織主要由細(xì)胞成分(以成纖維細(xì)胞為主)和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成,細(xì)胞外基質(zhì)由鞏膜細(xì)胞所分泌。在近視發(fā)展過(guò)程中,鞏膜中的細(xì)胞成分接受上游(視網(wǎng)膜或者中樞) 信號(hào)的輸入,調(diào)整細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成,包括合成減少和降解加速,最終導(dǎo)致鞏膜變薄,生物力學(xué)性質(zhì)改變,最終引起眼軸過(guò)度延長(zhǎng),近視形成。鞏膜的病理改變特別是后極部鞏膜的變薄可能是近視形成的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
細(xì)胞外基質(zhì)主要成分為膠原纖維,占鞏膜干重的90%,其中以I型膠原含量最高。 在正常哺乳動(dòng)物以及人眼鞏膜中,膠原纖維束呈無(wú)序的交織狀態(tài),從而保持了鞏膜的不透光性。此外,膠原纖維直徑由內(nèi)向外呈現(xiàn)由細(xì)到粗的梯度變化,表現(xiàn)為鞏膜外層以粗徑的膠原纖維為主,而內(nèi)層則以細(xì)徑的膠原纖維為主。文獻(xiàn)報(bào)道這種鞏膜全層膠原纖維直徑梯度的形成與眼內(nèi)容物對(duì)眼球壁的壓力作用有關(guān)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果發(fā)現(xiàn),當(dāng)高度近視發(fā)生后,鞏膜膠原含量減少(主要是I,III,V型),鞏膜變?。荒z原纖維的排列也發(fā)生了顯著變化。膠原纖維由無(wú)序的交織狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橛行蚺帕械陌鍖咏Y(jié)構(gòu),并且鞏膜全層膠原直徑梯度分布消失。
除了結(jié)構(gòu)上的變化之外,鞏膜中還發(fā)生了一系列的生物化學(xué)改變。蛋白聚糖是鞏膜中廣泛存在的一種糖蛋白,由核心蛋白和糖胺聚糖副鏈組成,它被認(rèn)為是膠原纖維組裝和排列的調(diào)節(jié)因子。在實(shí)驗(yàn)性近視中,蛋白聚糖合成減少降解增加,并且后極部鞏膜蛋白聚糖的合成率與近視形成過(guò)程中玻璃體腔的延長(zhǎng)程度呈負(fù)相關(guān)。此外,細(xì)胞外基質(zhì)中的基質(zhì)金屬蛋白酶家族(MMPs)以及金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMPs)共同調(diào)控鞏膜重塑的過(guò)程。 MMPs促進(jìn)膠原以及其他細(xì)胞外基質(zhì)成分的降解,而TIMPs則能夠抑制MMPs的這種作用,兩種力量的平衡對(duì)于維持鞏膜的正常狀態(tài)十分重要。在多種實(shí)驗(yàn)性近視研究中都發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)眼MMP-2的mRNA水平較對(duì)側(cè)眼明顯升高,而在近視恢復(fù)期其水平又逐漸恢復(fù)正常。相反的,TIMP-3水平在近視時(shí)降低而在恢復(fù)期又有所升高。
以上研究都表明鞏膜可能是近視發(fā)生發(fā)展過(guò)程中最重要的靶組織,特別是鞏膜細(xì)胞所分泌的細(xì)胞外基質(zhì)成份的變化與近視的發(fā)生發(fā)展息息相關(guān)。cGMP (鳥(niǎo)苷-3’,5’ -環(huán)化一磷酸,環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷)是細(xì)胞內(nèi)廣泛存在的第二信使,通過(guò)與受體偶聯(lián)的G蛋白激活鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶(Guanylate cyclase, GC),催化GTP生成cGMP,cGMP進(jìn)一步激活蛋白激酶G(protein kinase G,PKG)或環(huán)核苷酸離子通道等,發(fā)揮相應(yīng)的生理功能。研究發(fā)現(xiàn),cGMP對(duì)多種類(lèi)型的成纖維細(xì)胞均有抑制其生長(zhǎng)分化以及細(xì)胞外基質(zhì)分泌的作用。Peng Li等(2008)研究發(fā)現(xiàn)在心肌細(xì)胞,ANP/cGMP/PKG信號(hào)途徑的激活能干擾TGF-β 1誘導(dǎo)的pSmad3核轉(zhuǎn)位,從而抑制TGF-β 1所誘導(dǎo)的肌成纖維細(xì)胞增殖分化及細(xì)胞外基質(zhì)分子的表達(dá)。此外,Yi-ChiangHsu等(2007)發(fā)現(xiàn)NO/cGMP通路的激活能夠抑制瘢痕組織成纖維細(xì)胞TGF-β 1的分泌及膠原合成,從而抑制瘢痕的過(guò)度增生。而cGMP水平與近視發(fā)生的相關(guān)報(bào)道很少,除了 Jie Wu 等(2007)人發(fā)現(xiàn)在形覺(jué)剝奪性近視的豚鼠中,其后極部鞏膜中NOS和cGMP濃度升高,推測(cè) cGMP水平的變化可能與近視的存在某種聯(lián)系。但到目前為止尚無(wú)發(fā)現(xiàn)升高或者降低cGMP 對(duì)近視的作用。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備抑制近視藥物的方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案是降低cGMP水平的鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用。
作為優(yōu)選方案,所述鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑采用NS-2028。
本發(fā)明的有益效果是通過(guò)降低眼內(nèi)cGMP的作用,可以有效地延緩、抑制近視。
附圖1是實(shí)驗(yàn)眼和對(duì)側(cè)眼屈光度差值圖。
附圖2是實(shí)驗(yàn)眼和對(duì)側(cè)眼玻璃體腔深度差值圖。
附圖3是實(shí)驗(yàn)眼和對(duì)側(cè)眼眼軸長(zhǎng)度差值圖。
附圖中,“差值”指實(shí)驗(yàn)眼與對(duì)側(cè)眼屈光度或眼軸參數(shù)的差值;“*”表示P< 0. 05 ; “* *” 表示 Ρ<0· 01。
具體實(shí)施方式
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為3周齡英國(guó)種三色短毛豚鼠。采用面罩法進(jìn)行單眼形覺(jué)剝奪(FDM) 2 周,同時(shí)每天給予形覺(jué)剝奪眼不同濃度鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑(GCI) NS-2028 Iml球周注射。 動(dòng)物隨機(jī)分為4組形覺(jué)剝奪對(duì)照組(FDM + non-injection),形覺(jué)剝奪+溶劑對(duì)照組(FDM + vehicle),形覺(jué)剝奪 + 藥物組(FDM + 0. 1 μ M NS_2(^8 組和 FDM+ ΙμΜ NS_2(^8 組)。藥物注射于每天上午9點(diǎn)進(jìn)行,連續(xù)注射2周,對(duì)側(cè)眼則不予任何處理。于鼠齡3 (實(shí)驗(yàn)前)、 4、5周,使用紅外偏心攝影驗(yàn)光儀測(cè)量屈光度、角膜曲率計(jì)測(cè)量角膜曲率、A超測(cè)量眼軸參數(shù)。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)給藥組的形覺(jué)剝奪眼,其玻璃體腔及眼軸延長(zhǎng)程度和屈光近視程度均小于單純形覺(jué)剝奪組和溶劑對(duì)照組,與溶劑對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此,球周注射鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑(ACI) NS-2028可以抑制豚鼠形覺(jué)剝奪性近視的形成。
由圖1可看出,鼠齡5周時(shí),單純形覺(jué)剝奪組和形覺(jué)剝奪注射溶劑組形成近視量無(wú)差異,說(shuō)明注射以及溶劑對(duì)形覺(jué)剝奪無(wú)影響。給藥兩組形成近視量均小于溶劑組,說(shuō)明鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑NS-2(^8能抑制形覺(jué)剝奪性近視的形成。
由圖2可看出,鼠齡5周時(shí),單純形覺(jué)剝奪組和形覺(jué)剝奪注射溶劑組玻璃體腔延長(zhǎng)無(wú)差異,說(shuō)明注射以及溶劑對(duì)形覺(jué)剝奪無(wú)影響。給藥兩組玻璃體腔延長(zhǎng)均小于溶劑組,說(shuō)明鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑NS-2(^8能抑制形覺(jué)剝奪玻璃體腔的延長(zhǎng)。
由圖3可以看出,鼠齡5周時(shí),單純形覺(jué)剝奪組和形覺(jué)剝奪注射溶劑組眼軸延長(zhǎng)無(wú)差異,說(shuō)明注射以及溶劑對(duì)形覺(jué)剝奪無(wú)影響。給藥兩組眼軸延長(zhǎng)均小于溶劑組,說(shuō)明鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑NS-2028能抑制形覺(jué)剝奪后眼軸的延長(zhǎng)。
權(quán)利要求
1.降低cGMP水平的鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用,其特征是所述鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑的型號(hào)為NS-2028。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種延緩、抑制近視的藥物的制備方法,特別是鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用,由利用鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑降低cGMP(鳥(niǎo)苷-3',5'-環(huán)化一磷酸,環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷)水平作為近視藥物,可抑制動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性近視的形成。
文檔編號(hào)A61K45/00GK102512677SQ20111039926
公開(kāi)日2012年6月27日 申請(qǐng)日期2011年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月6日
發(fā)明者周翔天, 方芳, 潘妙珍, 瞿佳 申請(qǐng)人:溫州醫(yī)學(xué)院眼視光研究院