專利名稱：薏米紅曲的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種以薏米為原料制備的紅曲，以及該紅曲的制造方法。
背景技術：
紅曲也稱丹曲，傳統紅曲的做法是以大米為原料，接種紅曲菌經固體發酵而成，具有藥食兩用價值。紅曲菌在分類學上屬于真菌界，子囊菌門，真子囊菌綱，散子囊菌目，紅曲菌科，紅曲菌屬。紅曲菌雖在生物界猶如九牛一毛，但是它有一定的位置。紅曲菌所代謝的生理活性物質除了 monacolins-K外，尚含有麥角固醇、Y _氨基丁酸、多不飽和脂肪酸等。紅曲具有健脾健胃、活血化瘀、降血壓、降血糖等作用；目前，在食品或醫藥行業， 紅曲品種很多，大都以谷物為原料制備的，但以薏米為原料制備的固體薏米紅曲以及制備方法，卻未見到報道。薏米，又名薏苡仁、薏仁，屬禾本科植物薏苡仁之果，產于福建、江蘇、河北等地，它的主要成分是淀粉和葡萄糖，含有大量的蛋白質、氨基酸、維生素、脂肪酸等。薏苡仁與大米比較，淀粉含量較低，但粗蛋白和粗脂肪比大米高，分別是大米含量的1. 97和5. 81倍，尤其是單位重量所提供的氨基酸是大米的2. 2倍；薏苡仁油脂中所含人類營養中最重要的必須脂肪酸亞油酸高達45. 85%，具有中等程度的抗氧性，表現在對超氧自由基消除的SOD樣作用，加上對體內氮氧化合物生成的抑制，即對NO合成酶的抑制，這些都被認為是抗衰的標志性指標，經常在抗老化妝品中使用；其中還含有維生素B1，是大米的2. 54倍，礦物質含量也比大米高。薏苡仁有健脾利尿、去熱去濕、補血狀體至功能，薏苡仁中含有薏苡酯對癌細胞的生長有抑制作用。薏米紅曲，是以薏米為原料，接入紅曲曲種，經過制備紅曲的過程而得；國內有報道薏米紅曲液態發酵，主要是考察抗氧化成分，但紅曲產品中紅曲紅素以及Monacolins-K、 Y -氨基丁酸等未見報道(劉暢等，薏苡仁在曲霉發酵過程中成分及抗氧化性變化的研究， 食品科學，Vol. 30, No. 23，2009);美國專利 20070160694 公開了使用 Aspergillus, lactic acid bacteria and yeast.發酵薏米用于預防或治療腫瘤的方法，但是Aspergillus和 Monascus是兩類不同菌種(李忠慶，郭芳編著，紅曲菌的形態與分類學，2002)。
發明內容
本發明的目的是提供一種制備周期短，薏米紅曲中莫納可林K含量高，桔霉素含量低的薏米紅曲的制備方法。本發明是這樣實現的
本發明薏米紅曲的制備方法，包括如下步驟 (1)斜面菌種培養
將紅曲菌種經馬鈴薯葡萄糖瓊脂PDA斜面在下培養5—8天得斜面菌種；所述紅曲菌種選自紅曲紅曲菌、紫色紅曲菌、紅色紅曲菌中之一，紅曲菌種PDA斜面。(2)在第一培養基中接入斜面菌種，在30— 35°C下，培養48— 72小時，得一級種子，第一培養基包括米粉，
(3)在第二培養基中接入一級種子，在30—35°C，培養48—72小時，得二級種子，第二培養基的組分與第一培養基的差別之一是將米粉改為薏米粉，
(4)取薏米、浸泡、蒸煮熟、接入二級種子，在34— 36°C下培養3天，噴入生理鹽水，翻動拌勻后，在四一 31°C培養，薏米全部變紅即可。第一培養基的組成如下(g/L)
米粉4. 00—6. 00
黃豆粉1.5—2.5
磷酸ニ氫鉀0. 02—0. 04
硫酸鎂0. 025—0. 035
硫酸銨0. 15—0. 25
葡萄糖1.5—2.00
碳酸鈣0. 35—0. 40
503型蛋白胨0. 15—0. 20
氯化鈉0. 40—0. 50 其余為水，
用乳酸將消毒前PH調至5. 5—6. 0，121で滅菌20分鐘。第二培養基的組成如下(g/L)
薏米粉5. 00—8. 00
黃豆粉1.5—2.5
硫酸鎂0. 03—0. 035
503型蛋白胨0. 05—0. 10
葡萄糖2.00—3.00
磷酸二氫鉀0. 04—0. 06
碳酸鈣0. 4—0. 5
氯化鈉0. 4—0. 5 其余為水，
用乳酸將消毒前PH調至5. 5—6. 0，121で滅菌20分鐘。
一級種子接量5 — 30wt%，二級種子接種量為5 — 30^%。
步驟(3)中一級種子接入量為10— 15%wt%，步驟(4)中二級種子接種量為10
15%wt0本發明的紅曲菌經第一、二培養基培養，薏米紅曲菌體量多、紅色素色價高、 Monacolins高以及含有必須脂肪酸亞油酸等抗氧化成分，莫納可林K含量高，桔霉素含量低，制備周期更短，具有豐富的營養價值和突出的醫療保健作用。
具體實施例方式
下面結合實例，更具體的說明本發明內容。本發明的制備方法，并不局限于以下實例， 對本發明的制備方法有任何形式的變通和/或改變，都將落入本發明的保護范圍。實施例1
本發明以薏米為原料，接入制備的曲種，經過制備紅曲的過程而得。其制備方法包括以下步驟
1、液態曲種的制備a、斜面菌種培養
紅曲菌經PDA斜面在下培養6天，得斜面菌種。b、一級液體種子培養
培養基組成(g/L)米粉4. 00，黃豆粉1. 50，磷酸二氫鉀0. 02,硫酸鎂0. 025，硫酸銨 0.20，葡萄糖2. 00，碳酸鈣0.40，蛋白胨(503型)0. 18，氯化鈉0. 40，定容至1L，溶劑為水， 用乳酸將消毒前PH調至5. 7 ；用250ml三角瓶分裝，每瓶裝液量25ml ；121°C滅菌20分鐘； 待培養基溫度降至室溫后接入步驟a中的斜面菌種，30°C，搖床轉速220r. P. Μ,培養50h。得一級液體種子備用。C、二級液體種子培養
培養基組成(g/L)薏米粉5. 00，葡萄糖2. 50，黃豆粉1. 80，硫酸鎂0. 03，蛋白胨(503 型)0. 08，磷酸二氫鉀0. 04，碳酸鈣0. 45，氯化鈉0. 40 ；定容至1L，溶劑為水，用乳酸將消毒前PH調至5. 5 ；750ml三角瓶分裝，每瓶裝液量50ml ； 121°C滅菌20分鐘；待培養基溫度降至室溫后接入步驟b中的一級液體種子，接種量10wt%，30°C，搖床轉速220r. P. M，培養 50h得二級液體種子備用。2、原料的制備
取8公斤的薏米，用清水浸泡8小時，浙干水分，蒸煮薏米，熟后薏米松散，顆粒均勻。3、原料接種
待熟后的薏米溫度降至30°C，接入上述的二級液體種子，接種量10wt%，拌勻，放入已消毒的托盤，蓋上滅菌后的7層紗布。4、發酵培養
將接種后的薏米在35°C下培養3天，噴入400ml的生理鹽水，翻動拌勻，32 °C培養1天， 薏米全部變深紅，即可。5、制成成品
將發酵好的薏米取出，在105°C干燥，即得薏米紅曲。6、薏米紅曲中莫納可林K含量HPLC測定方法如下 流動相乙腈水=6 94
流速lML/min
色譜柱4. 6 X 150mm, 5 μ m，C18 柱； 檢測波長260nm 進樣量25 μ L
樣品處理方法準確稱量0. Ig薏米紅曲置容量瓶，加入純凈水至刻度，超聲溶解，微孔濾膜過濾，待測。結果薏米紅曲中莫納可林K含量以干重計11. 2mg/g 7、薏米紅曲中桔霉素HPLC控制方法
色譜柱 SHIMADZU Shim-pack VP-ODS, C18 柱溫:28°C ,
流動相乙腈甲醇水(磷酸調pH 2. 5) ^ 70:10:20 (ν/ν/ν) 流速為1 mL/min 進樣量20 μ L熒光檢測波長為λΘΧ=331 nm和λ em=500 nm。經檢測，薏米紅曲中桔霉素含量低于50ppm。實施例2
本發明以薏米為原料，接入制備的曲種，經過制備紅曲的過程而得。其制備方法包括以下步驟
1、液態曲種的制備 a、斜面菌種培養
將紫色紅曲菌經PDA斜面在34°C下培養8天，得斜面菌種。b、一級液體種子培養
培養基組成(g/L)米粉5. 00，黃豆粉1.80，磷酸二氫鉀0. 02,硫酸鎂0. 025, (NH4) 2S04 0. 15，葡萄糖1. 50，碳酸鈣0. 35，蛋白胨(503型)0. 15，氯化鈉0. 40，定容至1L，用乳酸將消毒前PH調至5.5 ；用250ml三角瓶分裝，每瓶裝液量25ml ；121°C滅菌20分鐘；待培養基溫度降至室溫后接入步驟a中的斜面菌種，接種量為？ 33°C，搖床轉速220r. P. Μ,培養50h，得一級液體種子備用。C、二級液體種子培養
培養基組成(g/L):薏米粉6. 00，葡萄糖2. 35，黃豆粉2. 40，硫酸鎂0.03，蛋白胨(503 型)0. 05，磷酸二氫鉀，0.04，碳酸鈣0.45，氯化鈉0.40 ；定容至3L，用乳酸將消毒前pH調至5.9 ;750ml三角瓶分裝，每瓶裝液量50ml ；121°C滅菌20分鐘；待培養基溫度降至室溫后接入步驟b中的一級液體種子，接種量10wt%，33°C，搖床轉速220r. P. Μ,培養50h得二級液體種子備用。2原料的制備
取M公斤的薏米，用清水浸泡12小時，浙干水分，蒸煮薏米，熟后薏米松散，顆粒均勻。3原料接種
待熟后的薏米溫度降至30°C，接入上述的二級液體種子，接種量12wt%，拌勻，放入已消毒的托盤，蓋上滅菌后的7層紗布。4發酵培養
將接種后的薏米在35°C下培養3天，噴入1200ml的生理鹽水，翻動拌勻，30°C培養2 天，薏米全部變深紅，即可。5制成成品
將發酵好的薏米取出，在80°C下真空干燥，即得薏米紅曲。6、莫納可林K含量及桔霉素含量控制方法同實施例1，莫納可林K含量12. lmg/g ； 桔霉素含量低于50ppm。實施例3
本發明以薏米為原料，接入制備的曲種，經過制備紅曲的過程而得。其制備方法包括以下步驟
1、液態曲種的制備 a、斜面菌種培養
將紅色紅曲菌種經PDA斜面在30°C下培養7天，得斜面菌種。
b、一級液體種子培養
培養基組成(g/L)米粉4. 50，黃豆粉1. 50，磷酸二氫鉀0. 02,硫酸鎂0. 025，硫酸銨 0.20，葡萄糖1.50，碳酸鈣0.35，蛋白胨(503型)0. 15，氯化鈉0. 45，定容至1L，用乳酸將消毒前PH調至5.8 ；用250ml三角瓶分裝，每瓶裝液量25ml ；121°C滅菌20分鐘；待培養基溫度降至室溫后接入步驟a中的斜面菌種，35 °C，搖床轉速220r. P. M，培養50h。備用。C、二級液體種子培養
培養基組成(g/L)薏米粉6. 00，葡萄糖2. 50，黃豆粉2. 15，硫酸鎂0.035，蛋白胨 (503型)0. 07，磷酸二氫鉀，0.06，碳酸鈣0.50，氯化鈉0. 50 ；定容至2L，用乳酸將消毒前 pH調至6.0 ;750ml三角瓶分裝，每瓶裝液量50ml ；121°C滅菌20分鐘；待培養基溫度降至室溫后接入步驟b中的一級種子，接種量10襯％，351，搖床轉速2201~^，培養5011。備用。2、原料的制備
取8公斤的薏米，粉碎80目細度，用清水浸泡1小時，浙干水分，蒸煮薏米，至熟透。3、原料接種
待熟后的薏米溫度降至30°C，接入上述的二級液體種子，接種量12wt%，放入已消毒的托盤，蓋上滅菌后的7層紗布。4、發酵培養
將接種后的薏米在36°C下培養1天，翻動拌勻，32 °C培養2天，噴入200ml的生理鹽水，30°C培養1天，薏米全部變深紅，即可。5、制成成品
將發酵好的薏米取出，在50°C下真空干燥，即得薏米紅曲。6、莫納可林K含量及桔霉素含量控制方法同實施例1，莫納可林K含量108mg/g ； 桔霉素含量低于50ppm。實施例4
本發明以薏米為原料，接入制備的曲種，經過制備紅曲的過程而得。其制備方法包括以下步驟
1、液態曲種的制備 a、斜面菌種培養
將紅色紅曲菌經PDA斜面在35°C下培養5-7天，得斜面菌種。b、一級液體種子培養培養基組成(g/L)米粉5.00.，黃豆粉2. 50，磷酸二氫鉀0.02，硫酸鎂0.025，硫酸銨0.25，葡萄糖2.0，碳酸鈣0.40，蛋白胨(503型)0. 20，氯化鈉0. 45，定容至1L，用乳酸將消毒前PH調至6.0 ；用250ml三角瓶分裝，每瓶裝液量25ml ；121°C滅菌20分鐘；待培養基溫度降至室溫后接入步驟a中的斜面菌種，35 °C，搖床轉速220r. P. M，培養50h。備用。C、二級液體種子培養
培養基組成(g/L)薏米粉8. 00，葡萄糖3.0，黃豆粉2. 5，硫酸鎂0.035，蛋白胨(503 型)0. 08，磷酸二氫鉀，0.04，碳酸鈣0.45，氯化鈉0.45 ；定容至4L，用乳酸將消毒前pH調至5. 5-6. 0 ；750ml三角瓶分裝，每瓶裝液量50ml ； 121 °C滅菌20分鐘；待培養基溫度降至室溫后接入步驟b中的一級液體種子，接種量10襯％，351，搖床轉速2201~^，培養5011。備用。2原料的制備取M公斤的薏米，粉碎成80目細度，用清水浸泡2小時，浙干水分，蒸煮薏米，至熟透。 3原料接種
待熟后的薏米溫度降至30°C，接入上述的二級液體種子，接種量12wt%，拌勻，放入已消毒的托盤，蓋上滅菌后的7層紗布。4發酵培養
將接種后的薏米在36°C下培養2天，翻動拌勻，32 °C培養1天，噴入600ml的生理鹽水，30°C培養1天，薏米全部變深紅，即可。5制成成品
將發酵好的薏米取出，自然曬干，即得薏米紅曲。6、莫納可林K含量及桔霉素含量控制方法同實施例1，莫納可林K含量13. 5mg/g ； 桔霉素含量低于50ppm。
權利要求
1.薏米紅曲的制備方法，其特征在于包括如下步驟(1)斜面菌種培養將紅曲菌種經馬鈴薯葡萄糖瓊脂PDA斜面在下培養5—8天得斜面菌種；所述紅曲菌種選自紅曲紅曲菌、紫色紅曲菌、紅色紅曲菌中之一，(2)在第一培養基中接入斜面菌種，在30—35°C下，培養48—72小時，得一級種子，第一培養基包括米粉，(3)在第二培養基中接入一級種子，在30—35°C，培養48—72小時，得二級種子，第二培養基的組分與第一培養基的差別之一是將米粉改為薏米粉，(4)取薏米、浸泡、蒸煮熟、接入二級種子，在34—36°C下培養3天，噴入生理鹽水，翻動拌勻后，在四一 31°C培養，薏米全部變紅即可。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于第一培養基的組成如下(g/L) 米粉4. 00—6. 00黃豆粉1.5 — 2. 5磷酸二氫鉀 0. 02—0. 04 硫酸鎂0. 025—0. 035硫酸銨0. 15—0. 25葡萄糖1.5 — 2. 00碳酸鈣0. 35—0. 40503型蛋白胨 0. 15—0. 20 氯化鈉0. 40—0. 50其余為水，用乳酸將消毒前PH調至5. 5—6. 0，121°C滅菌20分鐘。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于第二培養基的組成如下(g/L)薏米粉5.00--8. 00黃豆粉1.5—■2. 5硫酸鎂0.03--0. 035503型蛋白胨0 05-—0. 10葡萄糖2.00--3. 00磷酸二氫鉀0.04--0. 06碳酸鈣0.4—0. 5氯化鈉0.4—0. 5其余為水，用乳酸將消毒前PH調至5. 5—6. 0，121°C滅菌20分鐘。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于一級種子接種量5—30wt%，二級種子接種量為 5 — 30wt%。
5.按照權利要求書4所述，其特征在于步驟(3)中一級種子接入量為10—15wt%，步驟 (4)中二級種子接種量為10 — 15wt%。
全文摘要
本發明公開了一種薏米紅曲的制備方法，解決已有制備方法工藝復雜，周期長，產品中莫納可林K含量低，桔霉素含量高的問題。主要是以薏米為原料，接入紅曲曲種，經發酵過程而得。制備步驟主要有液態紅曲曲種制備，薏米原料制備，接種，發酵培養和成品制備。紅曲菌種經第一、二培養基培養該方法制備的薏米紅曲莫納可林K(Monacolin-K)、γ-氨基丁酸(GABA)、紅色素含量高，桔霉素含量低，脂肪酸亞油酸含量高，醫藥保健作用非常明顯；本發明工藝簡便，適合工業化生產。
文檔編號A61P9/12GK102429928SQ201110364139
公開日2012年5月2日 申請日期2011年11月17日 優先權日2011年11月17日
發明者張效實, 胡楊洋, 鄒昆, 陳書峰 申請人:成都格藍洋生物醫藥科技有限公司