專利名稱：一種具有降血糖功效的真菌藥性菌質及其制備方法
技術領域：
本發明屬于生物發酵工程領域，具體涉及一種具有降血糖功效的真菌發酵藥性菌質。
背景技術：
糖尿病治療難度大，費用高，已成為各國政府關注的全球性問題。目前我國醫藥市場上專治糖尿病的藥品只有六七種，分為三大類生物藥胰島素，化學藥磺酰脲類雙胍類， 以及中成藥類。胰島素制劑價格昂貴，難以推廣并有8大副作用；化學藥雖降糖作用明顯， 但對肝、腎等毒副作用較大，還容易導致心血管并發癥加重等。中成藥雖有一定治療作用， 但目前臨床使用的多為粗提物制劑或醫生自擬的處方湯藥，缺乏藥效顯著、有效成分和作用機理清楚、質量可控、制劑先進的現代中藥。目前，中成藥的研究范圍多在下述范圍內，同樣存在上述問題一類是以不同的中草藥組方，或烘干粉碎或水煎按傳統方法制取的中成藥。如專利CN02157912. 1《螞蟻尿糖丸及其加工方法》，以人參，螞蟻，蟬退，黃連等中藥材為配料，經烘干粉碎、水煎煮濃縮后，混合藥粉與藥液制成顆粒。專利200910094733《一種治療糖尿病的中藥膠囊》其特征在于含有碧葉黃花、八面威風、五倍子、黃精、西洋參等23種中草藥。專利(AP)02133230《一種治療糖尿病的愈三消藥物及制備方法>》是將當歸、黃連、紅參、鹿茸分別粉碎與黃芪、地黃、熟地黃等13味中藥的水提取物混合。專利201010188883《一種治療糖尿病的藥物及其制備方法》由以下藥物為原料藥 柴胡、白芍、香附子、牡丹皮等，將中藥與粗糧混合物和營養物一起配伍使用。第二類是以中藥植物為主，傳統法加工配以化學藥成分的合成藥。如專利CN97103536. 9《一種治療糖尿病的藥物及其制備方法》屬于醫用配制品，發明特征由多味中藥豬芩、澤瀉、黃柏、糯稻芽尖等經烤干炒制配兌鹽酸二甲雙胍、糖適平。第三類是以中藥提取物配伍的復方藥。如專利CN02138362. 6《一種中藥降血糖藥及其制備方法》主要由鬼箭羽的乙酸乙酯提取物或萃取物組成。專利200610066305《一種治療糖尿病的藥物組合物及其制備方法》該藥物主要由苦蕎麥、桑葉組合經乙醇回流提取加吡啶甲酸鉻制成。迄今為止，將食藥用真菌生物制劑用于治療糖尿病及其并發癥方面的研究尚少， 更無用雙向發酵工程獲得的藥性菌質制品。如專利200810064886《治療糖尿病的藥用真菌生物制劑及其制備工藝》是由野生蕈類提取物、桑葉與山藥混合物的提取物配制而成。專利 ZL03111130. 0《食藥用真菌固體發酵菌粉》也僅限于用營養基質做固體發酵獲得的菌絲體經配伍而成。
發明內容
本發明采用的是迄今糖尿病領域尚未涉及到的微生物雙向發酵技術及“多菌”發酵技術。即用中草藥做藥性基質，在諸多食藥用真菌和中草藥之間進行雙向性多菌發酵，使二屆或三界生物間進行有機結合而獲得的全新降血糖藥性菌質。本發明的理論依據如下A 雙向發酵工程是指，發酵基質全部采用中草藥(或在其中添加適量農副產品) 而構成藥性基質，再用藥用真菌發酵，致使發酵具有雙向性，其發酵產物由單純的真菌菌絲體轉為藥性菌質。該藥性菌質比初發(原始)真菌或藥性基質本身或兩者簡單相加有更良好的藥效，能夠產生1+1 > 2的生理功能效用，可以顯著增強其活性成分，提高藥效與療效等作用。本發明采用的雙向發酵工藝，是將發酵菌種和藥性基質所構成發酵組合內，其藥性基質由以往僅用富含碳、氮等營養的農副產品作為營養基質，改變為采用具有一定降糖活性成分的中藥材作為藥性基質，它既能為具有降糖功效的真菌提供生長所需營養，又因真菌的酶而被改變組織成分，從而產生新的性味功能。又因本發明是在二界或三界生物間進行有機活性成分的轉化與結合，其功效成分更豐富，降糖效果更明顯。本發明的工藝流程如下稱取藥性基質原料一加水一滅菌一按比例分配藥性基質一分別接入真菌菌種一雙向發酵一收集所有藥性菌質一烘干粉碎一獲得藥性菌質制品。B:采用多種具有顯著降糖活性成分而又無毒無副作用的食藥用真菌做為發酵菌禾中樺褐孑L菌(Inonqqus obliquus),冬蟲夏草[Cordyceps sinensis (Berk. ) Sacc],桑黃 [(pHelIinus igniariusL.es Fr.) Quel.],灰樹花(Grifola frondosa)、云芝[Coriolus versicolor(L. :Fr.)]。上述菌種均來源于遼寧省大連珍蕈菌物研究開發中心。采用的各種真菌的降血糖功能如下樺褐孔菌樺褐孔菌在俄羅斯民間作為治療疾病的藥用真菌，長期動物試驗和臨床試驗表明無任何毒副作用，對肝炎、高血壓也有防治效果。曾小龍的，《樺褐孔菌的化學成分與藥理作用研究》表明，其人工培養菌絲體含有大量的降血糖、復活免疫作用的植物纖維類多糖體，對糖尿病的治愈率達93%。冬蟲夏草據杜梅等《食用菌多糖降血糖機理研究》報道，其主要藥用成分蟲草素對高血糖有抑制作用，兩種多糖蟲草菌絲雜多糖Cs0H(是含L-阿拉伯糖、L-木糖、D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖的雜多糖)和多糖粗制品CHWc (含D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖)可顯著提高胰島β細胞的生理活性，對高血糖有明顯的降低作用。并能保護腎臟提高肌體的免疫力，有效控制糖尿病的各種并發癥。桑黃桑黃多糖所激發的IL-I細胞素，有促進胰島素分泌，降低血糖之功效。同時含有豐富的氨基酸及鋅，具有活化胰臟機能的作用。并且可有效提高糖尿病患的免疫能力。桑黃菌還有增進細胞功能、降低膽固醇，抗血栓，緩和血管的收縮等功效，皆有助于糖尿病患者血壓正常化(見孫培龍等《珍稀藥用真菌桑黃的國內外研究進展》)。灰樹花杜梅等《食用菌多糖降血糖機理研究》中揭示，灰樹花的功效成分主要是多糖和糖蛋白，為一種真菌來源的β-(Id)-D-葡聚糖，具有降低血糖的功能。灰樹花中含量較高的有機鉻與有機硒同時具有協助胰島素維持正常的糖耐量的效果。此外還有激活細胞免疫功能、降低血壓、血脂和血清胰島素的功能。對肝硬化、糖尿病均有效果且無任何毒副作用。
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: 中(polysaccharide of Corlolus versicolor, PSK) WK^n 血糖升高作用，對正常血糖無影響。口服用藥無長期毒性反應。實驗表明PSK為一毒性很低的物質，也無致突變作用(見杜梅等《食用菌多糖降血糖機理研究》)。C 選取具有降血糖效用、適用人群廣、無毒副作用、對正常血糖值無影響(不降低)的中草藥或動物做為藥性基質山茱萸山茱萸所含總萜能提高正常小鼠糖耐量，明顯降低四氧嘧啶誘導的血糖值，提高血清胰島素水平；顯著降低鏈脲佐菌素糖尿病模型的血糖值，增加肝糖原含量。對正常血糖水平無明顯影響。被國家列為藥食兩用中藥材品種之一(見梁雷等《中藥降血糖活性成分研究近況》)。絞股蘭據徐世明，郭欲曉的《絞股藍的研究與應用》記載，絞股蘭多糖的降糖活性與一般降糖藥不同，它能延緩葡萄糖在腸道的吸收，抑制α-葡萄糖苷酶活性，可降低四氧嘧啶誘導的高血糖病患改善糖代謝。對正常血糖無影響，還有保護腎上腺、胸腺及內分泌器官的作用，降血壓血脂、控制并發癥。羅漢果戚向陽等《羅漢果對糖尿病小鼠的降血糖作用》研究表明，其含有豐富的糖甙，這種糖甙對四氧嘧啶誘導的T2DM-II型糖尿病具有顯著降血糖作用，而對正常小鼠血糖無影響。還有防治高血壓、降血脂及減肥作用，可控制并發癥。鬼箭羽尹貴宇、楊金平的《鬼箭羽藥理學研究淺談》中報道，其含有多種降低血糖的成分，能明顯降低四氧嘧啶誘導的血糖值，對正常鼠血糖無影響。其草酰乙酸鈉成分能刺激細胞增生，調整不正常的代謝過程，加強胰島素的分泌。無毒，長期服用或大劑量 (30g以下)水煎服也沒有明顯副作用。還能治療冠心病、高血壓、動脈硬化等癥，對糖尿病的并發癥有控制作用。苦瓜其苦瓜皂甙是降糖的主要有效成分，能明顯降低四氧嘧啶糖尿病患者的血糖，總有效率達82%且無毒副反應(見梁雷、邊寶林等《中藥降血糖活性成分研究近況》)。擬黑多刺蟻有研究表明，它是具有藥食兩用價值的新資源食品，是能夠維持機體生理平衡的雙向免疫調節劑，能雙向調整血糖和血壓。所含生物活性鉻能協助胰島素維持糖耐量。“草體蟻醛”和所含的特種昆蟲蛋白，能夠強有力地刺激機體產生保護性抗體，與甾醇和三萜類化合物一起可使糖尿病患者免受各種器官的損害(見舒任庚等《幾種動物中藥降血糖作用的研究》)。本發明具體通過以下方式實現本發明的一方面在于本發明涉及一種具有降血糖功效的真菌藥性菌質的原料， 包括藥性基質和真菌菌種，其中藥性基質由下述原料組成山茱萸、絞股蘭、羅漢果、鬼箭羽、苦瓜、擬黑多刺蟻、營養基質；其中，營養基質的來源是谷物、豆類、米糠、麥麩；真菌菌種由下述菌種組成樺褐孔菌、冬蟲夏草、桑黃菌、云芝、灰樹花；真菌菌種的接種重量為藥性基質的8 12wt%。上述真菌藥性菌質的原料中，當藥性基質和真菌菌種按下述比例配比時，效果較佳藥性基質由下述干燥的原料按質量百分比混合山茱萸1~90
絞股蘭1~80
羅漢果1~40
鬼箭羽1~80
苦瓜1~50
擬黑多刺蟻1~10
大米0~35各真菌菌種與所用藥性基質的對應關系，按質量百分比分別為
樺褐孔菌10~70%的藥性基質
冬蟲夏草20~60%的藥性基質
桑黃菌10~30%的藥性基質
灰樹花10~50%的藥性基質
云芝10~50%的藥性基質真菌菌種的接種重量為藥性基質的8 12wt%。上述真菌藥性菌質的原料中，當藥性基質和真菌菌種按下述比例配比吋，效果最 佳藥性基質由下述干燥的原料按質量百分比混合
山茱萸10~25
絞股蘭13~30
羅漢果6~20
鬼箭羽5~20
苦瓜10~30
擬黑多刺蟻レ7
大米0~34各真菌菌種與所用藥性基質的對應關系，按質量百分比分別為
樺褐孔菌10~50%的藥性基質
冬蟲夏草20~40%的藥性基質
桑黃菌10~20%的藥性基質
灰樹花10~20%的藥性基質
云芝10~20%的藥性基質
真菌菌種的接種重量為藥性基質的10wt%。本發明的另外一方面在于一種具有降血糖功效的真菌藥性菌質的制備方法，其具體工藝步驟如下(e)按質量百分比稱取干燥的藥性基質原料并混合；(f)向步驟a所得的混合物中，加入1 10倍混合物質量的pH7 8的自來水，于 100 127°C滅菌1 10h，獲得藥性基質；(g)按各真菌菌種與所用藥性基質的對應關系，分配步驟b所得的藥性基質，在無菌條件下分別接入真菌菌種，接種比例為藥性基質的8 12wt%，在23 27°C雙向發酵 4 45天，分別獲得藥性菌質；(h)收集步驟c獲得的所有藥性菌質，混合烘干粉碎后得到本產品。具體的上述真菌藥性菌質的制備方法中，采用的雙向發酵方式為固體發酵或液體深層發酵。具體的上述真菌藥性菌質的制備方法中，液體深層發酵條件為溫度25 27°C， 罐壓0. 7 0. 8kg/cm2，通氣量1 lv/v/分。具體的上述真菌藥性菌質的制備方法中，所述真菌菌種的接種比例為藥性基質的 IOwt %。本發明的另外一方面在于通過上述方法制備的真菌藥性菌質。本發明的另外一方面在于上述的真菌藥性菌質在制備沖劑、丸劑、片劑、膠囊劑中的應用。食用菌的液體深層發酵技術屬于現代生物技術之一。深層發酵技術直接生產食用菌菌體，同時獲得富含氨基酸及次生代謝物等營養成分的發酵液。食用菌液體深層發酵技術研究的關鍵是，不同食用菌要用不同的發酵基質進行培養，因此，選擇與配制發酵基質是食用菌液體深層發酵技術的關鍵。利用食(藥)用菌液體深層發酵可以在較短時間內獲得大量菌絲體及其發酵產物，由于這一過程周期短、產量高、成本低、工藝設備簡單，因此在食用菌生產中具有廣闊的應用前景。食(藥)用真菌在深層發酵過程中會產生多糖、生物堿、 萜類化合物、留醇、酶、核酸、維生素、具抗生素作用的多種化合物以及植物激素等多種生理活性物質，這些物質分別具有對心血管、肝臟、神經系統、腎、性等人體器官的防病治病作用以及抗癌、消炎、抗衰老、抗菌、提高免疫力等功效。本發明涉及到的產品采用有機化食用化，無污染無毒副作用的藥性基質和各種真菌，并且在整個生產工藝中不添加使用任何化學物質，以確保產品的安全性，避免在治療和保健中對人體形成二次傷害。本發明將三界生物間的主要降血糖因子蟲草素、多種真菌多糖和多種藥用植物多糖以及生物鉻的成分經過雙向性發酵和生理轉化有機的結合起來，形成具有新的活性分子團和次生代謝物的藥性菌質。有益效果本發明屬于生物醫藥領域。采用迄今糖尿病領域尚未涉及到的微生物雙向發酵技術及多菌發酵技術，使二屆或三界生物間進行有機結合而獲得全新降血糖菌質。本產品具有明顯的降低血糖又不增加胰島素濃度的作用，對于輔助治療和控制糖尿病的并發癥有明顯和積極的效果，而且不引發常見藥物所產生的急性低血糖癥。較之現有降糖中藥質量可控，劑型先進。該產品屬純生物制劑，無任何毒副作用；該制劑適合用于糖尿病患者的治療、糖尿病的預防，可作為降低血糖的口服藥劑或調節血糖的保健藥品。
具體實施例方式下述非限制性實施例中涉及到的原料來源如下山茱萸、絞股蘭、羅漢果、鬼箭羽、均購于中藥店；苦瓜購于上海義林食品有限公司；擬黑多刺蟻來源于廣西橫縣純正螞蟻粉廠；發酵菌種樣揭孑L 菌(Inonqqus obliquus),冬蟲夏草[Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc],桑黃[(pHellinus igniariusL. ex Fr.) Quel.],灰樹花(Grifola frondosa)、云芝[Coriolus versicolor (L. Fr.)]。上述菌種均來源于遼寧省大連珍蕈菌物研究開發中心；實驗動物昆明小鼠，小白鼠，體重18 22g，雌雄各半，購于沈陽嘉乾程生物科技有限公司。 下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。實施例1(一)藥性菌質的制備(a)將中草藥于50 60°C烘干后，按下述質量百分比稱取干燥的藥性基質原料并混合山茱萸2000g、絞股蘭3000g、羅漢果1500g、鬼箭羽1500g、苦瓜1500g，擬黑多刺蟻 500g。將上述原料粉碎至1 2mm。(b)將步驟a所得的混合物裝入容器，按1 1的重量比加入pH7. 5的自來水，于 127°C滅菌池，冷卻至30°C以下后，獲得藥性基質。(c)在無菌條件下，向2000g藥性基質中接入樺褐孔菌菌株；向4000g藥性基質中接入冬蟲夏草菌株；向2000g藥性基質中接入桑黃菌菌株；向IOOOg藥性基質中接入灰樹花菌株；向IOOOg藥性基質中接入云芝菌株；上述菌種的接種比例均為所接種的藥性基質重量的10%。(d)接菌后置25士 1°C發酵45天。(e)收集步驟d獲得的所有藥性菌質，經40 50°C烘干至含水量5%以下，混合后經納米細胞破壁粉碎機粉碎至IOOnm以下，獲得藥性菌質制品。(二)終產品檢測依據中華人民共和國藥典2005年版一部附錄VID，高效液相色譜法，測定蟲草素達3. 88mg/g ；按照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VA)測定總多糖為16.7% ；依據國家標準GB/T5009. 123-2003食品中鉻含量的測定方法，測定生物鉻含量為 0.86mg/kg。實施例2(一)藥性菌質的制備(a)將中草藥于50 60°C烘干后，按下述質量百分比稱取干燥的藥性基質原料并混合山茱萸1000g、絞股蘭2500g、羅漢果1000g、鬼箭羽2000g、苦瓜3000g、擬黑多刺蟻 500g。將上述原料粉碎至1 2mm。
(b)將步驟a所得的混合物裝入容器，按1 1的重量比加入pH7. 5的自來水，于 127°C滅菌2h，冷卻至30°C以下后，獲得藥性基質。(c)在無 菌條件下，向3000g藥性基質中接入樺褐孔菌菌株；向3000g藥性基質中接入冬蟲夏草菌株；向2000g藥性基質中接入桑黃菌菌株；向IOOOg藥性基質中接入灰樹花菌株；向IOOOg藥性基質中接入云芝菌株；上述菌種的接種比例均為所接種的藥性基質重量的10%。(d)接菌后置25士 1°C發酵45天。收集步驟d獲得的所有藥性菌質，經40 50°C烘干至含水量5 %以下，混合后經納米細胞破壁粉碎機粉碎至IOOnm以下，獲得藥性菌質制品。(二)終產品檢測依據中華人民共和國藥典2005年版一部附錄VID，高效液相色譜法，測定蟲草素達3. 3mg/g ；按照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VA)測定總多糖為 14.6% ；依據國家標準GB/T5009. 123-2003食品中鉻含量的測定方法，測定生物鉻含量為 0.89mg/kg。實施例3(一)藥性菌質的制備(a)將中草藥于50 60°C烘干后，按下述質量百分比稱取干燥的藥性基質原料并混合山茱萸2400g、絞股蘭2000g、羅漢果2000g、鬼箭羽500g、苦瓜1000g、擬黑多刺蟻 IOOgo將上述原料粉碎至1 2mm后、加入大米2000g。(b)將步驟a所得的混合物裝入容器，按1 1的重量比加入pH7. 5的自來水，于 127°C滅菌2h，冷卻至30°C以下后，獲得藥性基質。(c)在無菌條件下，向4000g藥性基質中接入樺褐孔菌菌株；向2000g藥性基質中接入冬蟲夏草菌株；向2000g藥性基質中接入桑黃菌菌株；向IOOOg藥性基質中接入灰樹花菌株；向IOOOg藥性基質中接入云芝菌株；上述菌種的接種比例均為所接種的藥性基質重量的10%。(d)接菌后置25士 1°C發酵45天。(e)收集步驟d獲得的所有藥性菌質，經40 50°C烘干至含水量5%以下，混合后經納米細胞破壁粉碎機粉碎至IOOnm以下，獲得藥性菌質制品。(二)終產品檢測依據中華人民共和國藥典2005年版一部附錄VID，高效液相色譜法，測定蟲草素達1.3mg/g;按照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VA)測定總多糖為11% ；依據國家標準GB/T5009. 123-2003食品中鉻含量的測定方法，測定生物鉻含量為 0.21mg/kg。實施例4(一)藥性菌質的制備(a)將中草藥于50 60°C烘干后，按下述質量百分比稱取干燥的藥性基質原料并混合山茱萸600g、絞股蘭600g、羅漢果500g、鬼箭羽600g、苦瓜500g、擬黑多刺蟻200g。 將上述原料粉碎至100目。(b)將步驟a所得的混合物裝入發酵罐，按1 10的重量比加入pH7. 5的自來水，于127°C滅菌40分鐘，冷卻至30°C以下后，獲得藥性基質。(c)在無菌條件下，按照所接種的藥性基質重量的10wt%接入樺褐孔菌菌株。(d)接菌后置25 士 1°C，罐壓0. 7 0.8kg/cm2，通氣量1 lv/v/分，發酵培養8 天。(e)收集步驟d獲得樺褐孔菌藥性菌質，用單效濃縮器真空濃縮至1. 2，經40 50°C烘干至含水量5%以下，獲得樺褐孔菌藥性菌質。(f)用上述樺褐孔菌的深層 發酵方法分別獲得冬蟲夏草菌、桑黃菌，灰樹花、云芝的相應藥性菌質。(g)取樺褐孔菌藥性菌質2000g，冬蟲夏草菌藥性菌質1500g，桑黃菌藥性菌質 500g，灰樹花藥性菌質500g、云芝藥性菌質500g，混合后經納米細胞破壁粉碎機粉碎至 IOOnm以下，獲得藥性菌質制品。(二)終產品檢測依據中華人民共和國藥典2005年版一部附錄VID，高效液相色譜法，測定蟲草素達2. 5mg/g ；按照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V A)測定總多糖為18.7% ；依據國家標準GB/T5009. 123-2003食品中鉻含量的測定方法，測定生物鉻含量為 0.43mg/kg。實施例5(一)藥性菌質的制備(a)將中草藥于50 60°C烘干后，按下述質量百分比稱取并混合山茱萸3000g、 絞股蘭2000g、羅漢果1000g、鬼箭羽1500g、苦瓜1500g、擬黑多刺蟻1000g。將上述混合物經三次浸提第一次加2倍混合物重量的pH7. 5的自來水煮開后20分鐘，收集濾液，第二次加2倍混合物重量的pH7. 5的自來水煮開后15分鐘，收集濾液，第三次加2倍混合物重量的PH7. 5的自來水煮開后10分鐘，收集濾液，然后將三次的濾液合并，濃縮至6000ml，將其加入到5000克大米中。(b)將步驟a所得的混合物裝入容器，于127°C滅菌2h，冷卻至30°C以下后，獲得
藥性基質。(c)在無菌條件下，向500g藥性基質中接入樺褐孔菌菌株；向2000g藥性基質中接入冬蟲夏草菌株；向500g藥性基質中接入桑黃菌菌株；向IOOOg藥性基質中接入灰樹花菌株；向IOOOg藥性基質中接入云芝菌株；上述菌種的接種比例均為所接種的藥性基質重量的10%。(d)接菌后置25 士 1°C發酵45天。(e)收集步驟d獲得的所有藥性菌質，經40 50°C烘干至含水量5%以下，混合后經納米細胞破壁粉碎機粉碎至IOOnm以下，獲得藥性菌質制品。(二)中間產品檢測按照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VA)測定藥性基質的多糖為6.7%，樺褐孔菌發酵后所得藥性菌質的多糖增加至9. ；依據國家標準GB/ T5009. 123-2003食品中鉻含量的測定方法，測定藥性基質的生物鉻含量0. 73mg/kg,經灰樹花發酵后的藥性菌質提高到1. 16mg/kg。依據中華人民共和國藥典2005年版一部附錄VID，高效液相色譜法，測定蟲草素含量由其藥性基質中的0mg/g提高到蟲草菌質中的9. 2mg/g0由此說明，經過雙向發酵的藥性菌質比初發(原始)真菌或藥性基質本身或兩者簡單相加有更良好的藥效，能夠產生1+1 > 2的生理功能效用，可以顯著增強其活性成分， 提高藥效與療效等作用。(三)終產品檢測依據中華人民共和國藥典2005年版一部附錄VID，高效液相色譜法，蟲草素達 4.3mg/g;按照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V A)測定總多糖為 20.6% ；依據國家標準GB/T500 9. 123-2003食品中鉻含量的測定方法，測定生物鉻含量為 3.8mg/kg。實施例6動物實驗分組將54只體重18 22g的供試昆明小鼠飼養5天后，隨機分為三組每組18 只雌雄各半。三組分別為空白對照組、高血糖模型組、真菌藥物組。除了空白對照組之外， 另外兩組小鼠連續3天以200mg/kg劑量注射四氧嘧啶，誘導高血糖達到14. 4mmol/L。施藥空白對照組和高血糖模型組小鼠以生理鹽水連續灌胃30天，真菌藥物組以 25mg/kg藥量連續灌胃30天。然后各組小鼠眼球采血并以血糖試紙(市售)測定小鼠血清葡萄糖。結果上述小白鼠動物實驗的結果如表1，真菌藥物組與模型組相比差異具有統計學意義(P < 0. 05)，真菌藥物組與正常組相比差異無統計學意義(P > 0. 05)。此結果證明，本發明所述產品能顯著降低小鼠體內，經四氧嘧啶(200mg/kg)誘導的高血糖。表1.小鼠血清中葡萄糖含量(mmol/L)檢測結果
權利要求
1.一種具有降血糖功效的真菌藥性菌質的原料，包括藥性基質和真菌菌種，其特征在于藥性基質由下述原料組成山茱萸、絞股蘭、羅漢果、鬼箭羽、苦瓜、擬黑多刺蟻、營養基質；其中，營養基質的來源是谷物、豆類、米糠、麥麩；真菌菌種由下述菌種組成樺褐孔菌、冬蟲夏草、桑黃菌、云芝、灰樹花； 其中，真菌菌種的接種重量為藥性基質的8 12wt%。
2.根據權利要求1所述的真菌藥性菌質的原料，其特征在于 藥性基質由下述干燥的原料按質量百分比混合山茱萸b-90絞股蘭b-80羅漢果b-40鬼箭羽b-80苦瓜1 50擬黑多刺蟻b-10大米0"-35各真菌菌種與所用藥性基質的對應關系，按質量百分比分別為樺褐孔菌10~70%的藥性基質冬蟲夏草20~60%的藥性基質桑黃菌10~30%的藥性基質灰樹花10~50%的藥性基質云芝10~50%的藥性基質真菌菌種的接種重量為藥性基質的8 12wt%。
3.根據權利要求2所述的真菌藥性菌質的原料，其特征在于藥性基質由下述干燥的原料按質量百分比混合山茱萸10-25絞股蘭13-30羅漢果6-20鬼箭羽5-20苦瓜10-30擬黑多刺蟻1-7大米0-34各真菌菌種與所用藥性基質的對應關系，按質量百分比分別為樺褐孔菌冬蟲夏草桑黃菌灰樹花云芝10~50%的藥性基質 20~40%的藥性基質 10~20%的藥性基質 10~20%的藥性基質 10~20%的藥性基質真菌菌種的接種重量為藥性基質的10wt%。
4.一種具有降血糖功效的真菌藥性菌質的制備方法，其特征在于具體工藝步驟如下(a)按質量百分比稱取干燥的藥性基質原料并混合；(b)向步驟a所得的混合物中，加入1 10倍混合物質量的pH7 8的自來水，于100 127°C滅菌1 10h，獲得藥性基質；(c)按各真菌菌種與所用藥性基質的對應關系，分配步驟b所得的藥性基質，在無菌條件下分別接入真菌菌種，接種比例為藥性基質的8 12wt %，在23 27°C雙向發酵4 45 天，分別獲得藥性菌質；(d)收集步驟c獲得的所有藥性菌質，混合烘干粉碎后得到本產品。
5.根據權利要求4所述的真菌藥性菌質的制備方法，其特征在于，采用的雙向發酵方式為固體發酵或液體深層發酵。
6.根據權利要求5所述的真菌藥性菌質的制備方法，其特征在于，液體深層發酵條件為溫度25 27°C，罐壓0. 7 0.8kg/cm2，通氣量1 1 ν/ν/分。
7.根據權利要求4或6所述的真菌藥性菌質的制備方法，其特征在于，所述真菌菌種的接種比例為藥性基質的IOwt%。
8.如權利要求7所述方法制備的真菌藥性菌質。
9.如權利要求8所述的真菌藥性菌質在制備沖劑、丸劑、片劑、膠囊劑中的應用。
全文摘要
本發明屬于生物發酵工程領域。選用具有降血糖功效的藥性基質和真菌菌種作為雙向發酵的原料，其中，藥性基質主要由下述原料組成山茱萸、絞股蘭、羅漢果、鬼箭羽、苦瓜、擬黑多刺蟻；真菌菌種由下述菌種組成樺褐孔菌、冬蟲夏草、桑黃菌、云芝、灰樹花；再通過雙向發酵工藝，在諸多食藥用真菌和中草藥之間進行雙向性多菌發酵，使二屆或三界生物間達到有機結合而獲得全新降血糖藥性菌質制品。本品對于免疫力低下能夠產生1+1＞2的生理功能效用，具有明顯的降低血糖又不增加胰島素濃度的作用；對于幫助治療和控制糖尿病的并發癥有明顯和積極的效果，可作為預防、治療糖尿病的口服藥劑或調節血糖的保健品。
文檔編號A61P3/10GK102428832SQ20111027192
公開日2012年5月2日 申請日期2011年9月14日 優先權日2011年9月14日
發明者孟震, 邢英 申請人:大連百祥聚生物科技有限公司