專利名稱：一組由阿司匹林與雌激素組成的防治骨質疏松癥的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及用阿司匹林與雌激素組成的藥物組合物，該藥物組合物制備的復方制劑，對婦女絕經期后骨質疏松具有較好的預防及治療作用。
背景技術：
絕經期后骨質疏松屬原發性骨質疏松癥的其中一種。原發性骨質疏松癥是一種以低骨量和骨組織微結構破壞為特征，導致骨骼脆性增加和易發生骨折的全身性疾病，可分為絕經后骨質疏松和老年性骨質疏松兩型。絕經期后骨質疏松是60歲以上婦女的常見病，多發病，主要是由于雌激素缺乏所致，常發生于絕經后數年內的女性，其中多數患者的骨轉換率增高，舊骨大量迅速丟失，新骨形成加快，骨的新舊轉換速率加速，但由于骨丟失超過了骨形成，骨量以丟失為主，形成了骨質疏松，故該型的骨質疏松也稱為高轉換型骨質疏松。婦女在妊娠和哺乳期，對鈣磷的需要量較正常婦女增加一倍，如得不到合理的補充，就容易骨量減少或骨質疏松，一般婦女到35歲時骨骼的質量通常達到頂點，從這時起， 骨的重建過程仍繼續進行，但質量開始減少。到圍絕經期頭3 5年間最迅速，以后丟失速度逐漸減慢，但持續進行，流行病學研究表明，50 69歲女性的骨質疏松癥的發病率高于 50%，這段期間剛好是絕經后的5 10年，婦女的雌激素水平明顯降低，這與骨質疏松的發生率密切相關；80歲以上的老年婦女骨密度更低，有隨時發生骨折的危險。老齡是骨折的重要危險因子，85歲組發生前臂、肱骨、椎體和髖部骨折的可能性為45歲組婦女的8倍，在男性為5倍。絕經期后老年婦女骨代謝的機制主要是由于骨髓基質細胞向成骨細胞方向分化受抑，成骨細胞分裂增殖緩慢及骨形成因子合成代謝受阻，由破骨細胞介導的成骨過程受到抑制、成骨細胞活性衰退致骨形成期延長，骨形成率降低；同時破骨細胞分化、成熟和骨吸收活性卻仍相對處活躍狀態，骨吸收能力超過了骨形成，骨轉換率增加但骨丟失也增加，所以導致骨質疏松的發生。此外，隨著年齡的增加活性氧簇水平增加，抗氧化能力減低， 谷胱甘肽還原酶的水平下降，使成骨細胞及骨細胞的凋亡增加，加速了骨丟失，因此氧化應激可能是老年性骨質疏松發生的重要原因。自然絕經或卵巢切除后絕經均可導致骨量丟失，后者發展更快，小梁骨丟失更為明顯，說明了雌激素與骨質疏松癥有密切的關系，絕經期由于卵巢功能衰退，雌激素分泌減少。雌激素具有抗骨吸收作用，是維持骨礦含量的關鍵激素，其機制主要與雌激素對骨生成的直接作用及對抗甲狀旁腺的骨吸收作用有關；目前認為，雌激素抗骨吸收可能與其抑制成骨細胞凋亡和促進破骨細胞凋亡的作用有關。雌激素減少一直被認為是絕經期后骨質疏松癥發生的重要原因，雌激素能增強成骨型細胞的表達并減少誘導骨吸收的環磷酸腺苷形成，還能與特異的DNA結合，促進特異mRNA合成。通過對絕經后骨質疏松癥婦女應用大劑量雌二醇治療進行的臨床觀察，證明了較大劑量的雌激素可有效的增加骨密度，促進骨的再礦化，有利于骨質疏松癥的治療。雌激素影響骨代謝的作用機制主要是通過鈣調節激素(甲狀旁腺激素、1，25雙羥維生素D3、降鈣素)而實現的。采用放射配基分析等方法在人和大鼠的成骨細胞、人初級成骨細胞、兒童骨膜分離的破骨細胞上發現雌激素受體，提示雌激素可能直接作用于骨細胞上的雌激素直接作用于成骨細胞和破骨細胞，通過各種細胞因子(白細胞介素-6等)抑制破骨細胞骨吸收作用。絕經后婦女血胰島素、IGF-I和瘦素水平與骨密度均無直接關系。雌激素替代療法是指給絕經后婦女補充適量雌激素，以緩解雌激素缺乏造成的絕經后癥狀的一種療法。雌激素與孕激素合用稱為激素替代療法，加用孕激素的目的是為防止子宮內膜增生。雌激素替代療法和激素替代療法是目前已知療效最為確切的抗骨吸收療法。雌激素及雌激素類似物刺激成骨細胞的增殖和膠原合成，抑制成骨細胞分泌骨吸收刺激因子，從而降低骨轉換，抑制骨吸收。并可促進活性維生素D3生成；降低破骨細胞對甲狀旁腺素的敏感性，減少骨吸收；促進降鈣素的合成。研究結果表明雌激素可防止80% 90 %的絕經后婦女的骨丟失，保持骨量，預防骨質疏松。然而隨著應用病例的增多，雌激素替代療法的副作用逐漸暴露，長期單獨服用雌激素可使乳腺癌、子宮內膜癌發生率增加5 至7倍，使腦卒中和心臟病的發病率提高了 40%和四％，并使下肢和肺部發生血管栓塞的概率增加了 1倍。阿司匹林是常用的解熱鎮痛藥，具有抗血小板和抗炎的雙重效應，其通過抗血小板能顯著降低冠心病患者心血管事件發生率己得到大量大規模臨床試驗的證實，本項目組近年的研究已證實該藥還有預防骨質疏松的作用，并據此設計了小劑量阿司匹林和小劑量己烯雌酚組成復方制劑(簡稱A-D合劑)，希望通過添加阿司匹林以減少雌激素的用量，在增加抗骨質疏松的同時，也能減少雌激素的血栓形成等心血管意外。發明內容本發明提出用具有抗血小板和抗炎的雙重效應的阿司匹林與雌激素聯合應用防治“骨質疏松癥”研究的理論和思路，我們發現阿司匹林與雌激素組成的方制劑，可以減少雌激素的臨床用量，在抗骨質疏松療效方面有協同作用，己烯雌酚與阿司匹林組方時，阿司匹林片用臨床預防心血管意外的劑量IOOmg即可，己烯雌酚可用臨床劑量的三分之一到十分之一的劑量即可，由于阿司匹林IOOmg劑量在臨床通過抗血小板能顯著降低冠心病患者心血管事件發生率己得到大量大規模臨床試驗的證實，其減少雌激素替代療法導致的腦卒中，心臟病的發病率，下肢和肺部發生血管栓塞的概率必有明顯的作用，該復方與單用雌激素相比，還具有不抑制骨形成的優點，是理想的抗骨質疏松藥物。本發明提出用雌激素是指己烯雌酚，雌酮，戊酸雌二醇，尼爾雌醇，替勃龍，普瑞馬林等，這些藥物與阿司匹林組成復方制劑可用其臨床常用劑量的二分之一到十分之一，其最佳的劑量是三分之一到五分之一，阿司匹林組成該復方的劑量為50mg到200mg，其最佳配方是lOOmg。本發明提出阿司匹林與雌激素組成的防治骨質疏松癥的藥物組合物，主要是指阿司匹林片和己烯雌酚組成的組合物，阿司匹林與己烯雌酚的組成比例為1000 1 2，即阿司匹林在該復合物中按重量計算為100毫克時，己烯雌酚在該復合物中按重量計算為 0. 1 0. 2毫克。這種藥物組合物可按藥劑學的工藝添加片劑生產的必要的輔料，壓制成片劑，供臨床應用，也可按現代工藝制備成丸劑、顆粒劑、膠囊劑、注射劑和任何一種臨床可接受的藥物制劑，供臨床應。本發明提出用阿司匹林與己烯雌酚組成的組合物，制備成片劑時，每片含阿司匹林100毫克，己烯雌酚0. 1 0. 2毫克。臨床應用時每天1 2片。
具體實施例方式實施例一為證實小劑量阿司匹林和小劑量己烯雌酚組成復方制劑(簡稱A-D合劑)，具有抗骨質疏松作用，本實驗以大鼠去卵巢建立骨質疏松模型，通過血液生化、骨形態計量學、骨密度等研究方法，觀察該復方制劑是否可對去卵巢大鼠骨質疏松有增效作用并減少不良反應，現報告如下1材料和方法1.1 材料1. 1. 1實驗動物及分組選用4月齡SPF級雌性SD大鼠42只(廣東醫學院實驗動物中心提供)，體重OM±20)g。適應性喂養10d。于實驗開始前隨機挑選出6只作為基礎組(BAS)，于實驗前進行取材。其余36只大鼠隨機分為假手術組(SHAM)，去卵巢組(OVX)、 己烯雌酚組(0VX+D)、阿司匹林己烯雌酚復方組(0VX+A-D)，每組9只。所有動物自由攝水及攝食(標準飼料，含鈣1.33%，磷0. 95% )，在室溫25 ^°C，濕度75 80%清潔級環境中喂養。1. 1. 2藥物己烯雌酚片，合肥久聯制藥有限公司，每片0. 5mg ；阿司匹林己烯雌酚復方制劑(A-D合劑)每片含阿司匹林lOOmg，己烯雌酚0. Img0 (由廣東醫學院醫藥科技開發中心配制)；鹽酸四環素，美國Sigma Chemical Co ;Calcein，美國Sigma Chemical Co。1.1. 3儀器美國Buehler LTD慢速鋸；德國Leica2155硬組織切片機；德國 Leica碳化鎢鋼刀；日本Nikon自動化圖像數字分析儀；美國OsteoMetrics骨組織形態計量學軟件；美國 Norland 公司 p-DEXA Sabre scanner。1· 2 方法1. 2. 1動物處理在動物全身麻醉條件下，參照文獻方法[5]對各實驗組大鼠作雙側去卵巢手術，假手術組做同樣手術，但不去除卵巢。術后三天開始隨機分組，每組9只。正式實驗假手術組以生理鹽水5ml · kg—1 · Cf1灌胃，己烯雌酚組以己烯雌酚30 μ g · kg—1 · Cf1 灌胃，A-D合劑按阿司匹林IOmg · kg-1 · Cf1和己烯雌酚IOyg. kg-1 · 1灌胃，各組大鼠均連續灌胃給藥90d。動物每周稱重一次，按照體重變化調整給藥劑量。所有動物在處死前14、 13天和4、3天分別皮下注射四環素30mg · kg—1 ·和鈣黃綠素IOmg · kg—1 ·進行體內熒光標記。實驗結束時，大鼠麻醉后心臟抽血處死，取血液做生化指標測定，并取左脛骨做骨組織形態計量學研究，取左股骨做骨密度掃描。。1.2.3血液生化檢測血液生化指標如總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和堿性磷酸酶(ALP)均通過試劑盒進行檢測，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。上述所有操作均按照試劑盒說明書要求進行。1. 2. 2骨組織形態計量取左側脛骨，以慢速鋸暴露骨髓腔，取其上段以10%福爾馬林緩沖液固定Mh、隨后進行梯度酒精脫水，二甲苯透明以甲基丙烯酸甲酯進行不脫鈣骨包埋。包埋劑硬化后以石膏打磨機打磨成合適的形狀，隨后用Leica 2155型硬組織切片機切成9 μ m厚片和5 μ m薄片。9 μ m厚片直接封片測量動態參數；5 μ m薄片行硝酸銀染色，封片后測量靜態參數，運用公式te’7]計算有關參數。為避開初級海綿體，脛骨上段測量范圍為生長板遠端Imm 4mm之間的松質骨區域。靜態測量參數包括骨組織總面積(T. Ar)、骨小梁面積(Tb. Ar)、骨小梁周長(Tb. Pm)、破骨細胞個數(N. Oc)、破骨細胞貼壁長度(Oc.S)。動態測量參數包括單熒光周長(sL.Pm)、 雙熒光周長(dL. Pm)、雙標記間隙(Ir. L. Wi)。參照相關公式，可以計算出計算參數骨小梁面積百分數(％Tb.Ar)降低、骨小梁厚度(Tb. Th)、骨小梁數目(Tb. N)、骨小梁分離度(Tb. Sp)、每毫米破骨細胞數目(0c. N)、破骨細胞周長百分數(％ Oc. Pm)、標記周長百分數(％ L. Pm)、骨礦化形成率(MAR)、骨形成率(BFR/BV)、骨形成率(BFR/BS)、骨形成率(BFR/TV)。1. 2. 4骨密度檢測采用美國Norland公司p_DEXA Sabre掃描儀對左股骨整體進行骨密度掃描，掃描參數包括骨組織面積(Bone Area)、骨礦含量(BMC)，骨密度BMD按照以下公式計算BMD = BMC/Bone Area。1. 3統計計量資料用均數士標準差(S ± S )表示，采用SPSS16. 0軟件行ANOVA 方差分析并以LSD-t檢驗進行組間比較，P < 0. 05可認為具有統計學意義。2 結果2. 1己烯雌酚與A-D合劑對去卵巢大鼠體重和子宮重量變化的影響己烯雌酚與A-D合劑對去卵巢大鼠體重和子宮重量變化的影響見表1 表1 己烯雌酚與A-D合劑對去卵巢大鼠體重和子宮重量變化的影響(^±>0
權利要求
1.一組防治骨質疏松癥的藥物組合物，其特征是阿司匹林與雌激素兩種藥物配伍，加上藥劑學方面的輔料，可制成供臨床應用片劑，膠囊劑，顆粒劑，沖劑，口服液，外用制劑，注射劑。
2.如權利要求1所述的防治骨質疏松癥的藥物組合物，其特征是雌激素是指己烯雌酚，雌酮，戊酸雌二醇，尼爾雌醇，替勃龍，普瑞馬林。
3.如權力要求2所述的防治骨質疏松癥的藥物組合物，其特征是這些雌激素是以其臨床應用劑量的二分之一到十分之一與阿司匹林組合。
4.如權利要求1所述的防治骨質疏松癥的藥物組合物，其特征是該藥物組合物是由阿司匹林與己烯雌酚組成。
5.如權利要求1和4所述的防治骨質疏松癥的藥物組合物，其特征是阿司匹林與己烯雌酚的組成比例為1000 2000 1，即阿司匹林在該復合物中按重量計算為100 200毫克時，己烯雌酚在該復合物中按重量計算為0. 1 0. 2毫克。
6.如權利要求1和4所述的防治骨質疏松癥的藥物組合物，其特征是阿司匹林與己烯雌酚的組成比例為1000 1 2，即阿司匹林在該復合物中按重量計算為100毫克時，己烯雌酚在該復合物中按重量計算為0. 1 0. 2毫克。
全文摘要
本發明公開了一種由阿司匹林與雌激素組成的用于預防及治療骨質疏松的藥物組合物及其配方，設計了用具有抗血小板和抗炎的雙重效應的阿司匹林與臨床劑量的三分之一到十分之一的劑量雌激素的藥物組合物，并證明了該組合物有明顯的抗骨質疏松作用。由于阿司匹林100mg劑量在臨床通過抗血小板能顯著降低冠心病患者心血管事件發生率己得到臨床證實，其減少在骨質疏松患者中應用雌激素替代療法導致的腦卒中，心臟病的發病率，下肢和肺部發生血管栓塞的概率將有明顯的作用，該復方與單用雌激素相比，還具有不抑制骨形成的優點，是理想的抗骨質疏松的新藥物。
文檔編號A61P19/10GK102397550SQ20111026982
公開日2012年4月4日 申請日期2011年8月30日 優先權日2011年8月30日
發明者吳玲芝, 吳鐵, 崔燎, 林思恩, 黃健萍 申請人:廣東醫學院, 湛江廣醫醫藥科技開發有限公司