專利名稱：手參在制備降脂保肝藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及植物藥物效能，尤其是手參藥物中應用技術領域。
背景技術：
祖國醫學并無高脂血癥的病名，根據其臨床常見頭暈、胸悶、心悸、肢體麻木、疲倦乏力等證候，可歸入眩暈、胸痹、中風、血疲、痰濕等病證范疇。然而祖國醫學對脂質的認識卻源遠流長，如《靈樞·衛氣失常第五十九》中說“人有肥有膏有肉……。”認為“膏者其肉淖，……脂者其肉堅……膏者多氣，多氣者熱，熱者耐寒。”，形象地描述了脂質在人體中的某些功能作用。若脂膏過多則有形體變化，稱為“膏人”、“脂人”，少則“體無膏澤”(《靈樞 經脈第十》)。明代醫家張景岳在《類經》中亦云“膏，脂膏也。津液和合為膏，以填補于骨空之中，則為腦為髓，為精為血……。，，由此可知，膏與津液同一源流，屬津液之一，膏是津液之稠濁者，膏可以化血。清代醫家張志聰對膏脂的生理功能進一步作了補充說明，他在 《靈樞集注》中說“中焦之氣蒸津液化其精微，發泄于腠理，淖澤注于骨，補益髓腦，潤澤皮膚，是津液行于三百六十五節，而滲灌于皮膚肌腠者也。溢于外則皮膚膏肥，馀于內則膏脂豐滿。”明確提出了人體的膏脂為中焦水谷所化生，隨津液的敷布而運行。高脂飲食與高脂血癥的發生有直接的因果關系，這與《素問·通評虛實論篇》中指出的“肥貴人”乃“高粱之疾”之病機一致。現代醫家繼承并發展了古人對脂質的認識，如有人認為，本病是嗜食肥甘、高粱厚味，脾胃運化失職，肝膽輸泄調暢失司，腎輸布失調，與肝脾腎三臟關系十分密切。也有人認為本病往往由于過食肥甘厚味和醇酒乳酪，使臟腑轉化不及，或臟腑功能失調，飲食不歸正化，膏脂輸化障礙或先天稟賦不足，無以“陽化氣，陰成形”，均可導致膏脂過多，滲入血中，發生高脂血癥。還有人認為本病主要脾胃消谷運化功能失調，轉化為痰濕，再由痰濕內滯，浸淫脈管，血行受阻而致血癖為病。部分人認為高脂血癥為脾失健運，中焦氣機失調，痰濕內生，流注經脈，滲入血中所致。一些人認為高脂血癥為本虛標實之證，與肝腎兩臟最為密切，其標為痰、為濕、為陽亢，其本為肝腎兩虛。通過對379 例高脂血癥病例分析認為“氣虛”是發病的主要病機，其它病機依次為痰濁、陰虛、血癖。在臨床觀察中發現，高脂血癥患者大多飲食偏嗜，過食肥甘，形體肥胖，且多為從事腦力勞動者ο目前，祖國醫學對高脂血癥的病因、病機認識基本上是一致的，其發生或由于外源性脂質攝入過多，或由于體內脂質代謝紊亂所致。多數醫家認為高脂血癥與肝脾腎三臟關系密切，以正虛為本，痰濁血瘀為標。高脂血癥是血脂異常的慣稱，血脂是血漿或血清中的脂類，包括膽固醇、甘油三酯、磷脂、游離脂肪酸等。而高脂血癥就是指血液中一種或多種脂質成分異常升高，超出正常范圍，如果符合以下一項或幾項，就說明患有高脂血癥總膽固醇、甘油三酯過高；低密度脂蛋白過高；高密度脂蛋白過低等。血漿中的膽固醇和甘油三酯都有兩個來源外源性者來自食物，經消化后由小腸吸收；內源性者由體內合成。甘油三酯在肝內合成，而膽固醇主要在肝和小腸粘膜合成。機體有復雜的反饋機制調節脂質的吸收、合成、分解及排泄，保持其血中濃度的動態平衡。如每人每天膽固醇攝入量增加100毫克，血清膽固醇只上升3毫克-5毫克/升。體內每天合成的膽固醇量約有1. 5克，這個量比外源性膽固醇高得多。肝臟既是膽固醇的合成場所，也是分解處理膽固醇的地方。當進食過多的動物脂肪(可成為肝、小腸合成膽固醇的原料) 或有腎病綜合癥、先天性脂代謝障礙，肝臟代謝出現障礙時，都可引起血清膽固醇水平的明顯波動。血脂和脂蛋白通常隨年齡增長而增高，這是因為老年人血脂和脂蛋白的代謝全面降低的結果。一般來說，男性到50歲，女性到65歲左右，膽固醇和甘油三酯達到峰值。高脂血癥按發病的原因通常分為兩類，即原發性高脂血癥和繼發性高脂血癥。原發性高脂血癥亦稱家族性高脂血癥，多為先天性遺傳性疾病，可有家族史，是由于脂質和脂蛋白代謝先天性缺陷以及某些環境因素(例如飲食、營養和藥物等)，通過未知的機制而引起的。繼發性高脂血癥系發病于某種病癥的病理基礎上，或某些藥物所引起的脂代謝異常，臨床表現為各原發病的特點或有用特殊藥物史，并伴有血脂增高。如未控制的糖尿病、 甲狀腺功能減退癥和粘液性水腫、腎病綜合征、肝內外膽管梗阻、胰腺炎、異常球蛋白血癥、 痛風、酒精中毒和服用女性避孕藥等。由于血漿中的膽固醇和甘油三酯是疏水分子，不能直接在血液中被轉運，必須與脂蛋白等結合才能使它們完全溶于血液中以便于在體內轉運。所以任何導致血漿中攜帶膽固醇和/或甘油三酯的脂蛋白水平升高的原因也可形成高脂血癥。高脂血癥治療藥物過去稱為降血脂藥物，是指降低血總膽固醇和/或血甘油三酯而言，但“降血脂藥物”現多被“調血脂藥物"概念取代，因為脂蛋白有多種，有些尚有利于動脈粥樣硬化的防治，而且血脂亦非越低越好。高脂血癥治療藥物以其結構及作用特點可分為九大類膽酸絡合劑為陰離子交換樹脂類，可降低血總膽固醇及低密度脂蛋白，但該類藥物不能降低甚至會升高血甘油三酯；臨床試驗研究發現考來烯胺可降低冠心病死亡率及心梗發生率。他汀一類(statins)如洛伐他汀、新伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀等主要降低血總膽固醇及低密度脂蛋白，對血甘油三酯亦有中度降低作用，大規模臨床研究證實可降低冠心病發生及死亡率。副作用主要有胃腸道癥狀、失眠、皮疹、肌痛，需觀察肝、腎功能，測血轉氨酶和肌酸激酶等，以防發生橫紋肌溶解。留體衍生物谷固醇一般劑量療效可疑，臨床少用。煙酸療效肯定，主要降低血甘油三酯，對膽固醇亦有降低作用，但藥物不良反應較多，新一代煙酸類制劑阿西莫司藥物不良反應減輕。苯酸類主要降低血甘油三酯，氯貝丁酯因有報道可增加消化道腫瘤發生率及膽石癥發生率，現已少用。后來出現的非諾貝特等對血甘油三酯、血總膽固醇均有降低作用且可升高高密度脂蛋白，臨床療效大規模臨床研究正在進行。多不飽和脂肪酸分ω-6及ω-3型，對ω-3研究較多，主要降低血甘油三酯。粘多糖及多糖類主要降低血甘油三酯，其對冠心病防治作用有待大規模臨床研究證實。雌激素替代治療可用于低密度脂蛋白水平升高的絕經期婦女，在已存在冠心病的婦女應用具有二級預防作用。其他調血脂藥物具有一定調血脂作用，但其作用有待進一步研究。綜上所述，這些藥物大多療效不確切，長期應用具有一定的副作用，如消化道癥狀、神經癥狀、內分泌癥狀、心腦血管癥狀等，而且停藥后體重、血脂回升快，難以達到長期治療和預防的目的。此外，目前外科治療、血漿凈化治療、基因治療高脂血癥等方法正在使用和完善。 如外科治療有回腸末端切除術、門腔靜脈分流吻合術和肝移植術；血漿凈化療法是先將患者血液抽出，從血漿中分離某些成分并將其棄去(去除高濃度脂蛋白)，再輸入新的血漿或代用品，故又稱為血漿置換；基因治療通過特定的重組DNA，在基因水平治療遺傳性疾病。手參(Gymnadenia conopsea(L. )R. Br.)又稱手掌參、佛手參、手兒參等，系蘭科手參屬多年生草本植物，該屬植物模式種手參為我國傳統中藥，載于藏醫最早醫藥書《四部醫典》，以后歷代的蒙、藏本草如《晶珠本草》、《本草圖鑒》等均有記載，塊根入藥，含黏液質、皂甙、揮發油等多種有效成分，在中、藏、蒙藥中均用，有益氣補血、生精止渴等功效，主治肺虛咳喘、虛勞消瘦、神經衰弱、久瀉、失血、帶下、乳少、慢性肝炎等癥，具有很高的藥用價值。國內外未發現手參降血脂和保肝作用研究。
發明內容
鑒于現有的技術的以上不足，本發明的目的是提供一種手參在制備降脂保肝藥物中的應用。本發明的目的是通過如下的手段實現的手參在制備降脂保肝藥物中的應用，以干燥手參為原料經醇取制得以手參醇取浸膏為活性成分的藥物，在5g-30g干燥手參/d的日服量下，用于降脂保肝的治療用途。本發明表明手參具有降低血清及肝臟甘油三酯的升高，從而改善脂質異常代謝的作用。同時，手參低劑量還可明顯降低血清ALT含量(p<0. 05)，高、中劑量對降低血清AST 含量也具有極顯著性差異(P < 0. OUp < 0. 05)，能夠保護脂質代謝紊亂所造成的肝損傷。
具體實施例方式在人每天5g_30g干燥手參的日服量中，取15g/人/日的劑量進行如下降脂保肝的動物實驗1實驗材料實驗動物SPF級SD大鼠，雌雄各半，體重170士 10g，由成都達碩生物科技有限公司提供。合格證號SCXK (川)2011-13。實驗藥物手參購于遵義藥材市場。洛伐他汀膠囊大連大洋制藥有限公司，規格20mg/粒，生產批號091201。其它實驗藥品，除特別聲明的外，均為化學純。2實驗方法2. 1高脂血癥動物模型的建立2. 1. 1高脂飼料的配制
高脂飼料配方78. 8%基礎飼料+10%豬油+10%蛋黃粉+1%膽固醇+0.2%膽鹽。 按配方先將基礎飼料、蛋黃粉、膽固醇及膽鹽混合均勻后貯存，備用；喂飼時，取一定量在按配方加入豬油，混勻，捏成團喂養大鼠。2. 1. 2高脂血癥動物模型的建立選擇160_180g SPF級SD大鼠，雌雄各半，適應實驗環境3天后，隨機分出雌雄各5 只大鼠為正常組，喂食普通飼料；其余大鼠喂食高脂飼料，進行高脂血癥動物模型制造，造模38天。2. 2藥物的制備2. 2. 1手參高、中、低劑量藥物的制備手參提取70%乙醇，10倍量，40KHz超聲提取lh，提取兩次，合并。配藥手參高劑量(5g/kg/d)稱取手參原藥材細粉200g，按正交考察的優選工藝(70% 乙醇、10倍量乙醇、40KHZ、提取90min)超聲提取兩次，過濾，合并兩次濾液，50°C旋蒸濃縮至流浸膏，以0. 5% CMC-Na(羧甲基纖維素鈉)溶液定容至660mL，即相當于每毫升相當于含生藥0. 3g。取360mL為高劑量，密封。手參中劑量(2. 5g/kg/d)將以上移取高劑量后剩余的藥液以0. 5% CMC-Na溶液稀釋至600mL，取400mL即為中劑量。手參低劑量(1. 25g/kg/d)將以上移取中劑量后剩余的藥液以0. 5% CMC-Na溶液稀釋至400mL，即為手參低劑量。2. 2. 2陽性對照藥物的配制取20mg/粒，成人用量為0. 5-1粒的洛伐他汀膠囊8粒，去囊殼用0. 5% CMC-Na溶液配成SOOmL溶液，即得陽性對照藥物，密封，4°C冰箱保存，備用。2. 3動物分組及給藥方法2. 3. 1實驗動物分組及飼養造模M天后，稱重各模型大鼠，按每組雌雄各半原則，隨機分為5組，每組10只， 分別為模型對照組、陽性對照組、手參高劑量組、手參中劑量組、手參低劑量組。加造模前分出的正常組共分為6組。正常組仍喂飼普通飼料，其他組仍喂飼高脂飼料。2. 3. 2給藥方法按5. OmL. 250^1標準給所有大鼠灌胃給藥(Ig)，每天灌胃一次，連續給藥14天。正常組每天灌胃0. 5 % CMC-Na溶液1次。模型對照組每天灌胃0. 5 % CMC-Na溶液1次。陽性對照組每天灌胃陽性藥物溶液1次。手參高劑量組每天灌胃手參高劑量藥物溶液1次。手參中劑量組每天灌胃手參中劑量藥物溶液1次。手參低劑量組每天灌胃手參低劑量藥物溶液1次。2. 4標本的采集、制備2. 4. 1血清樣本的制備各組大鼠灌胃14天后，于最后一次灌胃后禁食12h，不禁水。第15天，股動脈取全血，靜置0. 5-1小時，用高速冷凍離心機3000r/min離心lOmin，取上清液制得血清樣本，置于-20°C冰箱冷凍保存，用于血清生化測定。2. 4. 2肝組織勻漿樣本的制備各組大鼠取血后，迅速取出肝，冰生理鹽水沖洗、濾紙吸濕后，稱取濕重0.3g左右，按質量體積比1 9加入預冷的生理鹽水，冰水中用電動勻漿機制成10%肝勻漿，高速冷凍離心機4°C，6000r/min離心5min，取上清液制得肝組織勻漿樣本，置于_20°C冰箱冷凍保存，用于肝組織生化測定。2. 5生化指標的檢測2. 5. 1血清、肝組織脂質生化指標測定分別取各組血清及肝組織樣本，按各檢測試劑盒說明方法加樣，用全波長酶標儀，測定膽固醇(Tc)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，低密度脂蛋白膽固醇 (LDL-C)含量。2. 5. 2肝功能指標檢測分別各組血清樣本，分別按各檢測試劑盒說明方法加樣，用全波長酶標儀，測定谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)活性。2.6數據處理與分析方法運用SPSS13. 0統計軟件，對檢測的生化指標數據進行單因素方差分析后，采用t 3結果與分析檢驗。3.1對大鼠血液、肝組織脂質生化指標的考察 3. 1. 1對大鼠血清TC、肝組織TC的影響
權利要求
1.手參在制備降脂保肝藥物中的應用，以干燥手參為原料經提取制得以手參浸膏為活性成分的藥物，在5g-30g干燥手參/d的日服量下，用于降脂保肝的治療用途。
2.根據權利要求1所述之手參在制備降脂保肝藥物中的應用，其特征在于，所述手參浸膏用作活性成分與其它輔助成分配合為藥用組合物。
全文摘要
本發明公開了手參在制備降脂保肝藥物中的應用，以干燥手參為原料經醇取制得以手參醇取浸膏為活性成分的藥物，在5g-30g干燥手參/d的日服量下，用于降脂保肝的治療用途。本發明表明手參具有降低血清及肝臟甘油三酯的升高，從而改善脂質異常代謝的作用。同時，手參低劑量還可明顯降低血清ALT含量(p＜0.05)，高、中劑量對降低血清AST含量也具有極顯著性差異(p＜0.01、p＜0.05)，能夠保護脂質代謝紊亂所造成的肝損傷。
文檔編號A61K36/898GK102247538SQ201110237619
公開日2011年11月23日 申請日期2011年8月18日 優先權日2011年8月18日
發明者張天娥, 閆智勇 申請人:西南交通大學