專利名稱：一種原花青素柔性納米脂質體及其制備方法
技術領域：
本發明屬于醫藥技術領域，涉及一種抗氧化藥物原花青素柔性納米脂質體及其制備方法。
背景技術：
原花青素(簡稱PC)又稱為縮合單寧，是自然界中廣泛存在的聚多酚類化合物，廣泛分布于植物界，也存在某些飲料(茶葉、啤酒)、蔬菜、水果和糧食中。原花青素是一大類多酚類化合物，易于聚合，按聚合度的大小，通常將二-四聚體稱為低聚物，將五聚體以上的稱為高聚物。近年來研究表明，原花青素具有清除自由基、抗紫外線損傷、抗病驅蟲的作用，同 時還具有保護細胞、抗突變、抗炎、抗過敏、保護心血管、抗衰老和抗腫瘤等一系列優良的生物活性和藥理作用，是迄今為止人類從自然界中所發現的最強有力的天然抗氧化劑之一，廣泛應用于食品、保健藥品及化妝品等領域。柔性納米脂質體(Flexible nanoliposomes),又稱傳遞體、變形體,是藥物工作者在研究局部止痛藥和局部麻醉藥脂質體時發現的一種類脂聚集體，是將表面活性劑(如膽酸鈉、去氧膽酸鈉等)加入到制備脂質體的類脂材料中制成的具有高度自身形變、可高效地穿過比其自身小數倍的皮膚孔道的類脂質體，具有高效滲透性、高度柔韌性和親水性。柔性納米脂質體的結構類似生物膜，是一種多功能的定向藥物載體，能使更多的藥物保留在皮膚中，減少藥物進入血循環的量，在表皮和真皮內形成藥物貯庫，形成一個緩釋模型，使藥物持久地對病變局部起治療作用。原花青素水溶性較好，但穩定性較差，易氧化，對光、溫度、pH值敏感，使其在皮膚給藥及化妝品領域的應用受到限制，且原花青素分子量大，結構復雜，粒徑大，不利于人體組織吸收。已有研究將原花青素包封于脂質體內以減小其粒徑，促進人體皮膚的吸收。但普通脂質體存在著穩定性差、透皮不完全、藥物易滲漏等缺點。如何有效保護原花青素并促進其透皮吸收一直是個未能得到很好解決的技術問題。
發明內容
本發明的目的是提供一種穩定性好、包封率高、透皮吸收效果好的原花青素柔性納米脂質體及其制備方法，以增強原花青素穩定性差，促進皮膚對其的吸收，提高其生物利用度。本發明根據柔性納米脂質體的特性，選用一定比例的磷脂、表面活性劑的混合物制備包封一定比例的原花青素的柔性納米脂質體。膜材磷脂可使用已上市的商品磷脂，包括天然磷脂、合成磷脂，表面活性劑可使用膽酸鹽類等。所述的制備柔性納米脂質體的磷脂為大豆卵磷脂，表面活性劑為膽酸鈉，大豆卵磷脂與藥物的質量比為5 1-50 1，磷脂與表面活性劑的質量比為2 1-10 I。所述的制備方法采用薄膜分散法，將制備得到的柔性納米脂質體混懸液進行探頭式超聲，超聲時間為l_20min。原花青素柔性納米脂質體的制備方法按以下步驟實現一、將大豆卵磷脂與膽酸鈉按質量比5 1-50 I混合，用5-100ml氯仿與甲醇的混合溶劑溶解，將溶有成膜材料的溶液置于30-50°C水浴中，在0. 04-0. 09mPa、20-70rpm條件下旋轉蒸發成膜；二、按大豆卵磷脂與藥物5 1-50 I比例稱取原花青素，溶解于5-100ml蒸餾水中使其完全溶解；三、將步驟二所得的藥物溶液加入步驟一制得的膜中，在30-50°C、0. 04-0. 09mPa,50-100rpm條件下旋轉蒸發水合0. 5-5h，得到原花青素柔性納米脂質體混懸液；四、將步驟三所得的混懸液于冰水浴中探頭式超聲l_20min，所得的混懸液過0. 22 U m微孔濾膜，放置于0_5°C條件下避光保存。本發明采用薄膜分散法制備原花青素柔性納米脂質體，把原花青素包封與脂質體內水相中，降低了其對外界環境的敏感度，增強其穩定性；原花青素柔性納米脂質體的包封率為 67. 13%，粒徑為(168. 3±1. 4)nm。 本發明制得的柔性納米脂質體于透射電鏡下觀察，均為圓球狀，大小均勻。本發明對制得的柔性納米脂質體進行體外釋藥評析，并與普通脂質體體外釋藥比較，佐證了柔性納米脂質體在沒有壓力的情況下，體外釋藥與普通脂質體相似。
圖I原花青素柔性納米脂質體zate電位分布圖2原花青素柔性納米脂質體的粒徑分布圖3原花青素柔性納米脂質體釋藥前電鏡4原花青素柔性納米脂質體釋藥后電鏡圖
圖5原花青素柔性納米脂質體體外釋藥pH-time-Q三維圖譜圖6原花青素普通脂質體體體外釋藥pH-time-Q三維圖譜
具體實施例方式本發明技術方案不局限于以下所列舉的具體實施方式
，還包括各具體實施方式
間的任意組合。
具體實施方式
一本實施方式原花青素柔性納米脂質體的制備方法按以下步驟實現一、將0. 1000-10. OOOOg的大豆卵磷脂和0. 0100-1. OOOOg的膽酸鈉置于圓底燒瓶中，然后加入氯仿與甲醇的5-100ml的混合溶劑，超聲溶解，置30-50°C水浴中，在0. 04-0. 09mPa、20-70rpm條件下旋轉蒸發成膜；二、將0. 0020-2. OOOOg的原花青素溶于5_100ml的蒸餾水中使其完全溶解；三、將藥物溶液加入制得的膜中，在30-50°C、0. 04-0. 09mPa、50-100rpm條件下旋轉蒸發水合0. 5-5h，得到原花青素柔性納米脂質體混懸液；四、將得到的混懸液于冰水浴中探頭式超聲l_20min，功率為50w，超聲時間和間隔時間均為4s，所得的混懸液過0. 22 m微孔濾膜，放置于0-5°C條件下避光保存。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中氯仿與甲醇的體積比為I : I。其他步驟及參數與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
二不同的是步驟一中將0. 9020g大豆卵磷脂和0. 1126g膽酸鈉置于圓底燒瓶中，然后加入氯仿與甲醇的60ml的混合溶劑，超聲溶解，置30-50°C水浴中，在0. 04-0. 09mPa、20-70rpm條件下旋轉蒸發成膜；步驟二中將0. 0706g的原花青素溶于60ml的蒸餾水中使其完全溶解。其他步驟及參數與具體實施方式
二相同。本實施方式所得的原花青素柔性納米脂質體的包封率為66. 9%。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
二不同的是步驟一中將0. 03044g大豆卵磷脂和0. 0378g膽酸鈉置于圓底燒瓶中，然后加入氯仿與甲醇的20ml的混合溶劑，超聲溶解，置30-50°C水浴中，在0. 04-0. 09mPa、20-70rpm條件下旋轉蒸發成膜；步驟二中將0. 0235g的原花青素溶于20ml的蒸餾水中使其完全溶解。其他步驟及參數與具體實施方式
二相同。本實施方式所得的原花青素柔性納米脂質體的包封率為67. 2%。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
四不同的是步驟一中將0. 03044g大豆卵磷脂置于圓底燒瓶中，加入氯仿與甲醇的20ml的混合溶劑，超聲溶解，置37°C水浴中，在0. 06mPa、50rpm條件下旋轉蒸發成膜；步驟二中將0. 0235g的原花青素溶于20ml的蒸餾水中使其完全溶解；步驟三中將藥物溶液加入制得的膜中，在37°C、0. 06mPa、90rpm條件下旋轉蒸發水合2h，得到原花青素柔性納米脂質體混懸液；步驟四中將得到的混懸液于冰水浴中探頭式超聲5min，功率為50w，超聲時間和間隔時間均為4s，所得的混懸液過0.22 um微孔濾膜，放置于4°C條件下避光保存。本實施方式所得的原花青素柔性納米脂質體的包封率為67. 3%。
具體實施方式
六原花青素柔性納米脂質體和普通脂質體體外釋藥比較分別取2ml柔性納米脂質體和普通脂質體置于已處理的透析袋中，再將透析袋置于棕色具塞三角瓶中，分別加入IOmlpH值為5. 0-8. 0的釋放介質，置空氣浴振蕩器內，溫度為30_40°C，振蕩頻率為100-200次/min，分別在0-24h內取8個時間點取樣，更換相應的新鮮介質，計算累計釋藥百分率，與釋放時間分別按零級、單指數模型、Weibull分布、對數正態分布及Higuchi分布模型擬合。
具體實施方式
七本實施方式與具體實施方式
六不同的是選擇pH = 6. 5的釋放介質。其他步驟及參數與具體實施方式
六相同。結果見表I。pH = 6. 5體外釋藥的方程擬合(Q代表累計藥物釋放量)
擬合模型_柔性納米脂質體_普通脂質體_
零級模型Q=3. 1539t+22.2418 _Q=2.4981t+26.6055 _
權利要求
1.一種原花青素柔性納米脂質體，其特征在于原花青素柔性納米脂質體由原花青素、磷脂、表面活性剤、氯仿與甲醇的混合溶劑、分散介質制成。
2.根據權利要求I所述的ー種原花青素柔性納米脂質體，其特征在于磷脂為大豆卵磷月旨，表面活性劑為膽酸鈉，卵磷脂與藥物的質量比為5 1-50 1，磷脂與表面活性劑的質量比為2 1-10 1，氯仿與甲醇的體積比為I : 1，混合溶劑體積為5-100ml，分散介質為水，體積為5-100ml。
3.根據權利要求I和2所述的ー種原花青素柔性納米脂質體的制備方法，其特征在于采用薄膜分散法制備。
4.根據權利要求1、2和3所述的ー種原花青素柔性納米脂質體的制備方法，其特征在于原花青素柔性納米脂質體按以下步驟制備 1)將卵磷脂和膽酸鈉溶于5-100ml氯仿和甲醇的混合溶劑中，在30-50°C、0.04-0. 09mPa>20-70rpm條件下旋轉蒸發成膜； 2)將原花青素溶于5-100ml蒸餾水中，超聲使其完全溶解； 3)將步驟2)所得的溶液加入步驟I)制得的膜中，在30-50で、0.04-0. 09mPa、50-100rpm條件下旋轉蒸發水合0. 5_5h,得到原花青素柔性納米脂質體混懸液； 4)將步驟3)所得的混懸液于冰水浴中探頭式超聲l_20min。
5.根據權利要求1-4所述的ー種原花青素柔性納米脂質體的制備方法，其特征在于放置0-5°C條件下避光保存。
全文摘要
本發明屬于醫藥技術領域，公開了一種原花青素柔性納米脂質體及其制備方法。它解決了原花青素體內穩定性差的問題，優化了其柔性納米脂質體的處方和制備工藝。本發明由原花青素與磷脂、表面活性劑等輔料制備而成的。膜材磷脂可使用已上市的商品磷脂，包括天然磷脂、合成磷脂，表面活性劑可使用膽酸鹽類等。磷脂與藥物的質量比為5∶1-50∶1，磷脂與表面活性劑的質量比為2∶1-10∶1，探頭超聲時間為1-20min。制備方法采用薄膜分散法。本發明制備的原花青素柔性納米脂質體粒徑較小，穩定性好，制備工藝簡單、穩定可行，具有良好的透皮作用。
文檔編號A61P9/00GK102793665SQ201110137448
公開日2012年11月28日 申請日期2011年5月26日 優先權日2011年5月26日
發明者熊維政, 張軍斌, 武惠斌, 黃璐琦, 陳燕軍, 熊欣, 袁軍林, 頊佳音 申請人:河南羚銳制藥股份有限公司北京藥物研究院