專利名稱：一種預防或/和治療糖尿病的藥物組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種預防或/和治療糖尿病的藥物組合物，屬藥物領域。
背景技術：
糖尿病是一種多病因引起的以慢性高血糖為主要特征的代謝紊亂綜合癥，久病可以引起人體多系統的損害；病情嚴重或應激時可以發生急性代謝紊亂而危及患者的生命。 目前，糖尿病的發病率日益增高，嚴重危害人類健康。但是對于治療糖尿病尚未有理想的治療方法。糖尿病包括I型糖尿病和II型糖尿病。I型糖尿病是具有一定遺傳基礎、在多種環境因子觸發下由T細胞介導的器官特異性的自身免疫性疾病，其發生與機體自身免疫調節失衡密切相關，本質是胰島β細胞的大量破壞(達80%以上)導致胰島素合成減少，胰島素絕對缺乏又使體內血糖不能維持在正常水平而導致高血糖。相關文獻都認為(尤其是在早期)胰島細胞損傷死亡的主要特征是細胞凋亡，機體T淋巴細胞產生的細胞因子是誘導凋亡的免疫效應分子，其作用途徑之一是通過Fas介導β細胞凋亡。傳統璜酰脲類和雙胍類降糖藥，長期應用會導致依賴性和毒副作用。近年來通過研究發現異黃酮是一類天然降血糖成分，其作用機制主要有保持β細胞活性，抑制胰島β細胞凋亡；干擾小腸對糖的吸收，使餐后血糖峰值后移與降低；胰島素樣作用，促進外周組織利用糖，調整糖代謝； 通過抗氧化、維護生物膜穩定，保護胰組織，調節與糖代謝有關的酶類的釋放及其活性等。 為尋求安全、有效的治療本病的藥物和方法一直是國內外醫學界關注的重點之一。近年來， 國內外學者開始從天然植物中篩選降糖成分，取得了一些進展。“黃豆”、“青豆”和“黑豆”統稱為大豆。據《中藥大辭典》記載“大豆甘，平。入脾腎經。具有活血、利水、祛風、解毒的功效。”大豆中含有蛋白質、碳水化合物、維生素、卵磷脂、大豆皂苷和大豆異黃酮等多種成分。其中大豆異黃酮具有調節血脂、類雌激素樣等很強的生理活性作用。據報道，以黑豆、黃精加水煎熬，再加以蜂蜜，具有治療糖尿病的作用。膽汁是常用的炮制輔料之一，其主要成分為膽汁酸、膽色素及無機鹽類等。牛膽汁是牛科動物黃牛Bostaurus domesticus Gmelin或水牛Bubalus L.的膽汁，味苦性寒，具有清肝明目，利膽通腸，解毒消腫之功效，廣泛用于治療肝熱目赤腫痛，小兒驚風，癰腫瘡毒及便秘、消渴等疾病。目前尚無將牛膽汁和黑豆為原料制備成制劑用于治療糖尿病的報道。
發明內容
本發明的技術方案是提供了一種預防或/和治療糖尿病的藥物組合物。本發明的另一技術方案是提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發明提供了一種預防或/和治療糖尿病的藥物組合物，它是由黑豆、牛膽汁制備而成的制劑。進一步優選地，它是由下述原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0. 4-1份。
3
更進一步優選地，它是由下述原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0.5份。其中，它是將黑豆與牛膽汁拌勻，煮開放冷后，密封放置于陰涼通風處，浸泡三天， 攤開晾干，60°C溫度下低溫烘干三天，即得牛膽汁炮制的黑豆。再以牛膽汁炮制的黑豆的原生粉末或有機溶劑提取物為活性成分，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。其中，所述的有機溶劑是50-90%乙醇。其中，所述的制劑是片劑、膠囊劑、丸劑、口服液。其中，所述的膠囊劑中每粒含大豆異黃酮不得少于0. 30mg。本發明還提供了該藥物組合物的制備方法，它包括如下步驟a、取原料藥1份黑豆、0. 4-1份牛膽汁；b、將黑豆與牛膽汁拌勻，煮開放冷后，密封放置于陰涼通風處，浸泡三天，攤開晾干，于60°C溫度下低溫烘干三天，即得牛膽汁炮制的黑豆；c、取1/3經牛膽汁炮制烘干好的黑豆打成細粉，其余2/3打成粗粉，過篩，粗粉加入50-90%乙醇于80°C提取，濾過，濾液減壓回收乙醇；藥渣加入稀鹽酸提取一次，1. 5小時每次；合并濾液濃縮至相對密度為1. 35 1. 40的稠膏，與細粉混合后烘干，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學上常用的制劑。進一步優選地，所述的乙醇濃度為 70%乙醇。本發明是以牛膽汁、黑豆為原料，黑豆經牛膽汁炮制后制備成膠囊，用于預防或/ 和治療糖尿病，藥效明確；以黑豆中大豆異黃酮的含量和牛膽汁中膽酸的含量為指標，優選炮制、制備工藝，并建立牛膽汁制黑豆膠囊的質量評價標準；以血糖、血脂等為主要指標，建立合理的動物模型，探討牛膽汁制黑豆的藥效學作用；本發明組合物質量穩定，可控性強， 為臨床提供了一種新的用藥選擇。
圖1 最大吸收波長的確定圖2 染料木素的標準曲線圖3:膽酸的標準曲線圖4 對照品全波長掃描5 對照品色譜圖(從左到右依次為染料木苷、大豆苷元、染料木素)圖6 樣品色譜7:陰性色譜8 染料木苷線性范圍考察圖9 大豆苷元線性范圍考察10 染料木素線性范圍考察圖11 空白對照組小鼠的腎組織切片圖12 模型組小鼠的腎組織切片圖13 給藥高劑量組小鼠的腎組織切片圖14 優降糖對照組小鼠的腎組織切片
具體實施例方式實施例1本發明藥物的制備清洗干凈的黑豆與牛膽汁按2 1的比例拌勻，煮開放冷后，密封放置于陰涼通風處，浸泡三天，攤開晾干，于60°C溫度下低溫烘干三天即得。取經牛膽汁炮制烘干好的黑豆，1/3打成細粉，過5號篩；2/3粉碎成粗粉，過2號篩，粗粉加入16倍量70%乙醇于80°C提取2次，每次池，濾過，濾液減壓回收乙醇；藥渣加入10倍量稀酸(0. 15ml稀鹽酸溶液加水定容至100ml)提取一次，1. 5小時每次。合并濾液濃縮至相對密度為1. 35 1. 40的稠膏，與細粉混合后烘干，研細，過六號篩，混勻后裝入膠
囊即得。實施例2本發明牛膽汁制黑豆炮制工藝1、儀器、試劑與試藥1. 1 儀器紫外可見分光光度計(VARIAN CAVY50 Scan)；美國安捷倫1100高效液相色譜儀(DAD檢測器)(美國安捷倫公司)BP211D AG 電子天平(德國 Sartorius)1. 2 試齊[J冰醋酸、濃硫酸、糠醛；甲醇為色譜純，水為重蒸水，其余試劑均為分析純。1. 3 試藥膽酸對照品(購于中國藥品生物制品檢定所，批號100078-200414)。染料木素對照品(購于中國藥品生物制品檢定所，批號111704-200501，含量大于 98% )。染料木苷對照品(購于中國藥品生物制品檢定所，批號111709-200501，含量大于 98% )。大豆苷元對照品(購于中國藥品生物制品檢定所，批號111502-200101，含量大于 98% )。黑豆(購于成都市溫江區集貿市場)經鑒定確認為豆科植物大豆的成熟種子。牛膽汁(購于成都市溫江區集貿市場)經鑒定確認為牛科動物黃牛或水牛的膽汁。2、評價指標及測定方法黑豆的主要藥效成分是大豆異黃酮，其苷元——染料木素和大豆苷元起主要作用；牛膽汁主要成分為膽汁酸類和膽色素等，《中國藥典》2005年版一部以膽酸含量為牛膽汁的含量測定指標。故分別選擇染料木素、膽酸作為指標評價牛膽汁制黑豆的炮制工藝。2. 1染料木素含量測定紫外分光光度法測定大豆異黃酮的含量。①最大吸收波長的選擇以95%乙醇為空白，標準品溶液在200-400nm進行掃描，結果表明最大吸收峰在 ^3nm，且最大吸收峰周圍干擾較小(結果見圖1)。②標準品溶液的配置
精密稱取染料木素標準品5. 2mg置于25ml容量瓶中，以95%乙醇溶解并定容到刻度，搖勻即得。③標準曲線的制備精密吸取0. 1,0. 2,0. 3,0. 4,0. 5,0. 6ml標準品溶液置于IOml容量瓶中，并各加 95%乙醇1. 0ml，加蒸餾水稀釋到刻度，搖勻，以1. 0ml95%乙醇加蒸餾水到IOml作空白對照。照紫外-可見分光光度法(《中國藥典》2005年版一部附錄VA)，在沈〗 波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線(結果見圖2)。④測定方法取豆粉(過3號篩)5g加16倍量70%乙醇80°C提取2次，每次池，合并濾液濃縮到90mL。吸取0. 5ml提取液，加95%乙醇lmL，加蒸餾水稀釋至10ml，搖勻。以lmL95%乙醇加水至IOmL作空白對照，在^^ 波長處測定吸光度。從標準曲線上讀出供試品溶液中大豆異黃酮的含量，計算，即得。2. 2膽酸含量測定參照《中國藥典》2005年版一部牛膽粉項下膽酸含量測定的方法。①對照品溶液的制備取膽酸對照品12. 5mg,置于25ml容量瓶中，加60%冰醋酸溶液使溶解，并稀釋到刻度，搖勻，即得(每Iml中含膽酸0. 5mg)。②標準曲線的制備精密量取對照品溶液0. 2ml,0. 4ml,0. 6ml,0. 8ml與1ml，分別置具塞試管中，各管加60%冰醋酸溶液稀釋成lml，加新制的糠醛溶液(1 — 100)各lml，在冰浴中放置5分鐘， 精密加入硫酸溶液(取硫酸50ml與水65ml混合)13ml，混勻，在70°C水浴中加熱10分鐘， 迅速移至冰浴中，放置2分鐘，以相應的試劑為空白。照紫外-可見分光光度法(附錄VA)， 在605nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線(結果見圖 3)。③測定法取樣品約60mg，精密稱定，加60%冰醋酸溶液數毫升，充分研磨，轉移至50ml容量瓶中，用60%冰醋酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液各Iml分別置甲、乙兩個具塞試管中，于甲管中加新制的糠醛溶液1ml，乙管中加水Iml作空白，按標準曲線的制備項下的方法，自“在冰浴中放置5分鐘”起，依法測定吸光度。從標準曲線上讀出供試品溶液中含膽酸的重量，計算，即得。3、炮制工藝研究3. 1大豆種類的選擇分別測定了三批黑豆和黃豆中的大豆異黃酮的含量(結果見表1)表1黑豆和黃豆中的大豆異黃酮的含量(％ )
值
權利要求
1.一種預防或/和治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0. 4-1份。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的是由下述重量配比的原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0. 5份。
3.根據權利要求1-2任意一項所述的藥物組合物，其特征在于它是將黑豆與牛膽汁拌勻，煮開放冷后，密封放置于陰涼通風處，浸泡三天，攤開晾干，60°C溫度下低溫烘干三天，即得牛膽汁炮制的黑豆。
4.根據權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于它是由牛膽汁炮制的黑豆的原生粉末或有機溶劑提取物為活性成分，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。
5.根據權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述的有機溶劑是50-90%乙醇。
6.根據權利要求4或5所述的藥物組合物，其特征在于所述的制劑是片劑、膠囊劑、 丸劑、口服液。
7.根據權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于所述的膠囊劑中每粒含大豆異黃酮不得少于0. 30mg。
8.一種制備權利要求1-7任意一項所述的藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、取原料藥黑豆1份、牛膽汁0.4-1份；b、將黑豆與牛膽汁拌勻，煮開放冷后，密封放置于陰涼通風處，浸泡三天，攤開晾干， 60°C溫度下低溫烘干三天，即得牛膽汁炮制的黑豆；c、取1/3經牛膽汁炮制烘干好的黑豆打成細粉，其余2/3打成粗粉，過篩，粗粉加入 50-90%乙醇于80°C提取，濾過，濾液減壓回收乙醇；藥渣加入稀鹽酸提取一次，1. 5小時每次；合并濾液濃縮至相對密度為1. 35 1. 40的稠膏，與細粉混合后烘干，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學上常用的制劑。
9.根據權利要求8所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于所述的乙醇濃度為 70%乙醇。
10.權利要求1-7任意一項所述的組合物在治療I型糖尿病中的應用。
全文摘要
本發明提供了一種預防或/和治療糖尿病的藥物組合物，它是由下述重量配比的原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0.4-1份。本發明還提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發明是以牛膽汁、黑豆為原料，黑豆經牛膽汁炮制后制備成膠囊，用于預防或/和治療糖尿病，藥效明確，質量穩定，可控性強，為臨床提供了一種新的用藥選擇。
文檔編號A61K36/48GK102258562SQ20111013743
公開日2011年11月30日 申請日期2011年5月25日 優先權日2010年5月26日
發明者李文兵, 胡昌江, 謝鋒, 黃勤挽 申請人:成都中醫藥大學