專利名稱：一種茯苓總三萜提取物的制備方法
技術領域：
本發明涉及中藥有效部位的提取純化技術領域，具體涉及一種茯苓總三萜提取物的制備方法。
背景技術：
茯苓Poria cocosGctiw.) Wolf為常用中藥，自古以來藥食兩用。史載于《神農本草經》，被列為上品。為多孔菌科真菌Poria cocosGctw.)Wolf的干燥菌核。性味甘淡，平， 歸人心脾肺經。具有祛濕利水、健脾和胃、寧心安神的作用。臨床用于治療小便不利，水腫脹滿，痰飲咳逆，嘔穢，泄瀉，遺精，淋濁，驚悸，健忘等。茯苓的主要成份為茯苓聚糖、三萜類化合物、蛋白質、脂肪及無機鹽等。其中茯苓多糖和三萜為其主要活性成分，國內外對茯苓多糖、三萜等成份及其藥理作用、生物活性方面作了較多的研究，并且有了較大的進展。20世紀70年代以來，中外學者從茯苓中分離了多種三萜化合物，并對其藥理作用、生物活性等方面進行了研究。茯苓三萜成分具有抗腫瘤活性、抗炎作用、免疫調節作用、 胰島素作用增強活性和利尿作用等。因此，開發研究茯苓總三萜提取物具有重要的意義。我國茯苓資源豐富，但臨床應用中多采用水煎煮提取的方法，該方法容易造成三萜類成分的損失。結合現代化學與藥理研究成果，對茯苓三萜類成分加以開發利用，發掘新藥，將對傳統中藥茯苓的開發與應用有現實意義。然而，關于茯苓總三萜的提取工藝尚未見有文獻報道。
發明內容
針對現有技術中存在的不足，本發明的一個目的是提供了一種茯苓總三萜提取物的制備方法，該方法通過乙醇回流提取、閃蒸濃縮、干燥等步驟而獲得茯苓總三萜的有效部位提取物。本發明的另一個目的是提供了一種上述方法制備的茯苓總三萜提取物在制備具有免疫調節作用的藥物中的應用。為了實現上述目的，本發明采用的技術措施如下一種茯苓總三萜提取物的制備方法，步驟如下(1)稱取茯苓片，按照其重量的4 8倍加入濃度為60 80V/V%的乙醇浸泡3-12 小時；(2)浸泡后回流提取1-3次，每次時間為1-2小時，合并提取液，即得到乙醇回流提取液；在步驟(1)的浸泡完成后直接加熱進行第一次回流提取，提取完后分離出提取液，后續每次提取前加入8倍原料茯苓片重量的70v/v%的乙醇作為提取劑；(3)將乙醇回流提取液抽濾，得到濾液；(4)將濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1.01 1. 10 (水的密度=1)，并回收乙醇；(5)將所得濃縮液經噴霧干燥，即得茯苓總三萜提取物產品，收集干燥的提取物，密封，稱重，置于干燥處保存。在步驟(1)中，乙醇的最佳濃度是70V/V%。在步驟(1)中，乙醇的最佳用量為茯苓片重量的8倍。在步驟O)中，所述的回流提取最佳次數為2次，第一次2小時，第一次1小時。在步驟(5)中，所述的噴霧干燥操作條件如下進風口溫度為175°C，出風口溫度為90°C，霧化盤轉速為29040轉/分鐘。利用上述制備方法得到的茯苓總三萜提取物中總三萜含量以茯苓酸計為 31-58wt%。上述方法制備得到的茯苓總三萜提取物可用于制備具有抗腫瘤和免疫調節作用的藥物。與現有技術相比，本發明的優點和效果在于本發明采用乙醇作為提取溶媒，所得有效部位提取物的制備工藝國內外未見相關資料報道。其提取工藝流程簡單，溶媒可重復回收利用，降低了生產成本，節約了能源，無環境污染，減少了生產中的安全隱患，符合中藥產業現代化的要求。本發明所得的茯苓總三萜提取物具有很好調節免疫功能的作用。不僅可單獨使用又可以于其他藥物配伍聯合使用。本發明所得的茯苓總三萜提取物適用于多種藥用的劑型，如片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、混懸劑、粉劑、溶液劑和噴霧劑等。
具體實施例方式下面結合具體的實施例進一步闡述本發明方法及其應用。茯苓是一種常用中藥材，一般以飲片的形式使用，該藥材可從各茯苓產地直接購得，本發明方法中使用到的茯苓片購自有“茯苓之鄉”之稱的湖北省羅田縣九資河鎮。實施例1 一種茯苓總三萜提取物的制備方法，步驟如下1、稱取茯苓片，加入該茯苓片重量的4倍的，濃度為60V/V%的乙醇浸泡12h ；2、浸泡后，回流提取2小時，即得到乙醇回流提取液；3、將乙醇回流提取液抽濾，得到濾液；4、將濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1. 01 1. 10，并回收乙醇；5、將所得濃縮液經噴霧干燥，即得茯苓總三萜提取物產品。收集干燥的提取物，密封，稱重，置干燥處保存。經測試，制得的茯苓總三萜提取物中，總三萜的含量為31.(以茯苓酸計)， 干膏得率為1.18% (重量)。實施例2 一種茯苓總三萜提取物的制備方法，步驟如下1、稱取茯苓片，加入該茯苓片重量的6倍的，濃度為70V/V%的乙醇浸泡IOh ；2、浸泡后，回流提取2小時，即得到乙醇回流提取液；3、將乙醇回流提取液抽濾，得到濾液；
4、將濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1. 01 1. 10，并回收乙醇；5、將所得濃縮液經噴霧干燥，即得茯苓總三萜提取物產品。收集干燥的提取物，密封，稱重，置干燥處保存。經測試，制得的茯苓總三萜提取物中，總三萜的含量為38. 2wt% (以茯苓酸計)， 干膏得率為1.7% (重量)。實施例3 一種茯苓總三萜提取物的制備方法，步驟如下1、稱取茯苓片，加入該茯苓片重量的8倍的，濃度為70V/V%的乙醇浸泡他；2、浸泡后，連續回流提取2次，第一次為2小時，第二次為1小時，合并兩次提取液，即得到乙醇回流提取液；3、將乙醇回流提取液抽濾，得到濾液；4、將濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1. 01 1. 10，并回收乙醇；5、將所得濃縮液經噴霧干燥，即得茯苓總三萜提取物產品。收集干燥的提取物，密封，稱重，置干燥處保存。經測試，制得的茯苓總三萜提取物中，總三萜的含量為40wt% (以茯苓酸計)。干膏得率為2. 2% (重量)。實施例4:一種茯苓總三萜提取物的制備方法，步驟如下1、稱取茯苓片，加入該茯苓片重量的4倍的，濃度為80V/V%的乙醇浸泡他；2、浸泡后，連續回流提取2次，第一次為2小時，第二次為1小時，合并兩次提取液，即得到乙醇回流提取液；3、將乙醇回流提取液抽濾，得到濾液；4、將濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1. 01 1. 10，并回收乙醇；5、將所得濃縮液經噴霧干燥，即得茯苓總三萜提取物產品。收集干燥的提取物，密封，稱重，置干燥處保存。經測試，制得的茯苓總三萜提取物中，總三萜的含量為56wt% (以茯苓酸計)，干膏得率為1.3% (重量)。實施例5 一種茯苓總三萜提取物的制備方法，步驟如下1、稱取茯苓片，加入該茯苓片重量的6倍的，濃度為80V/V%的乙醇浸泡池；2、浸泡后，連續回流提取3次，第一次為2小時，第二次為1小時，第三次1小時， 合并三次提取液，即得到乙醇回流提取液；3、將乙醇回流提取液抽濾，得到濾液；4、將濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1. 01 1. 10，并回收乙醇；5、將所得濃縮液經噴霧干燥，即得茯苓總三萜提取物產品。收集干燥的提取物，密封，稱重，置干燥處保存。經測試，制得的茯苓總三萜提取物中，總三萜的含量為58wt% (以茯苓酸計)。干膏得率為1.3% (重量)。實施例6 中試放大實驗
一種茯苓總三萜提取物的制備方法，步驟如下稱取茯苓片20kg，加入其8倍重量的70V/V%乙醇浸泡12小時后，回流提取兩次， 第一次池，第二次加入8倍原料茯苓片重量的70v/v%乙醇回流提取lh，合并兩次的提取液，將提取液抽濾，得到的濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1.01 1. 10，并回收乙醇，將所得濃縮液經噴霧干燥，收集干燥的提取物，即得茯苓總三萜提取物中試產品，密封，稱重，置于干燥處保存。三批中試放大實驗結果見表1。表1中試放大試驗結果表
權利要求
1.一種茯苓總三萜提取物的制備方法，步驟如下(1)稱取茯苓片，按照其重量的4 8倍加入濃度為60 80V/V%的乙醇浸泡3-12小時；(2)浸泡后回流提取1-3次，每次時間為1-2小時，合并提取液，即得到乙醇回流提取液；在步驟(1)的浸泡完成后直接加熱進行第一次回流提取，提取完后分離出提取液，后續每次提取前加入8倍原料茯苓片重量的70v/v%的乙醇作為提取劑；(3)將乙醇回流提取液抽濾，得到濾液；(4)將濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1.01 1.10，并回收乙醇；(5)將所得濃縮液經噴霧干燥，即得茯苓總三萜提取物產品。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的噴霧干燥操作條件如下進風口溫度為175°C，出風口溫度為90°C，霧化盤轉速為29040轉/分鐘。
3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于步驟(1)中所述的乙醇濃度是 70 v/v%o
4.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于步驟(1)中所述的乙醇用量為茯苓片重量的8倍。
5.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述的回流提取次數為2次，第一次時間為2小時，第一次時間為1小時。
6.根據權利要求1或2所述的制備方法制得的茯苓總三萜提取物在制備具有抗腫瘤和免疫調節作用的藥物中的應用。
全文摘要
本發明屬于中藥有效部位提取純化技術領域，具體公開了一種茯苓中總三萜提取物的制備方法，其步驟(1)稱取茯苓飲片，加4～8倍藥材量的60%～80v/v％的乙醇浸泡3-12小時，回流提取1-3次，每次1-2小時，合并乙醇回流提取液；(2)將乙醇回流提取液抽濾，得到濾液；(3)將濾液經閃蒸濃縮至相對密度為1.01～1.10，并回收乙醇；(4)將所得濃縮液經噴霧干燥，即得茯苓總三萜提取物產品。收集干燥的提取物，密封，稱重，置干燥處保存。該方法簡單，所用溶媒可重復回收利用，降低了生產成本，節約了能源。用此方法所得提取物中總三萜的含量以茯苓酸計為31-58wt%。該提取物具有很明顯的抗腫瘤及調節免疫功能。
文檔編號A61K36/076GK102204936SQ20111013727
公開日2011年10月5日 申請日期2011年5月25日 優先權日2011年5月25日
發明者劉國慶, 劉焱文, 葉曉川, 張衛元, 張永丹, 王光忠, 鄧媛媛, 邵貝貝 申請人:武漢回盛生物科技有限公司