專利名稱：鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種鹽酸丁卡因的緩釋制劑，特別是涉及一種鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉及其制備方法。
背景技術：
許多藥物需要達到并維持一定的血藥濃度才能獲得最佳療效，但靜脈、皮下、肌肉等途徑給藥的半衰期都比較短，通常在1小時到數小時之間。因此只能通過頻繁、多次給藥來維持藥物的治療濃度，但這樣的治療方法不僅成本高、患者依從性差，而且容易導致藥物不良反應。鹽酸丁卡因是常用的局部麻醉劑，其是一種易溶于水的小分子化合物，在水中顯弱堿性，？1^值為8.5。鹽酸丁卡因作用迅速，但是維持時間并不長久。臨床上為現用現配的溶液劑，常與腎上腺素合用，以延長藥效時間。脂質體是將藥物包封于類脂類雙分子層形成的薄膜中間所制成的超微型球狀藥物載體制劑。脂質體是一種生物相容性好的給藥系統，作為藥物的輸送載體，由于其結構類似生物膜，可包封水溶性和脂溶性藥物，起到藥物緩釋、降低藥物毒性的作用，因此受到人們的關注。多囊脂質體作為基于脂質體的緩釋藥物傳遞系統，被開發用于局部、區域和系統藥物傳遞。許多水溶性藥物可包封于多囊脂質體中，通過鞘內、皮下等給藥都顯示出了緩釋作用。但脂質體在放置過程中可能發生多種不同的變化，如磷脂質會氧化和水解，另外脂質體還可發生凝聚、融合等物理變化，從而導致包裹物質的滲漏。因此脂質體制劑若要發展成產品上市，必須在貯藏期間具有良好的穩定性。氫化大豆卵磷脂是中性磷脂的一種，中性磷脂及膽固醇均為多囊脂質體的成膜材料。膽固醇為膜穩定劑，可通過改變重型磷脂相轉變調節脂質體膜層的流動性，從而改善脂質體的穩定性和體內體外的釋放速率。三月桂酸甘油酯是中性脂質的一種，中性脂質是指本身沒有形成囊泡的能力，且缺少帶電荷的活親水基團的油或者脂肪，中性脂質是形成多囊脂質體拓撲結構的決定性因素之一，其在脂質體中主要起支架作用，分布于非同心水性腔室磷脂雙分子層節點處，支撐起多囊脂質體的拓撲結構。刺玫果(Rosa Davurice Pall.)屬薔薇屬植物山刺玫的成熟果實，又名野薔薇果。 近年來經過對刺玫果化學成分的研究發現，刺玫果含豐富的維生素，Vc含量極高，其他維生素包括\，VE, VB1和VB2，被稱為天然多種維生素濃縮物。刺玫果含17種氨基酸，包括7種人體必需氨基酸，從刺玫果種籽中提取的脂肪油主要由高級脂肪酸及呋喃類衍生物組成。 已鑒定的脂肪酸有硬脂酸、軟脂酸、棕櫚油酸、油酸等，呋喃衍生物有正己基呋喃、2-呋喃基戊醛等，此外刺玫果的果皮還富含豐富的色素，色素中含有胡蘿卜素和葉黃素。經國家食品質量衛生監督部門對刺玫果急性、蓄積性、亞慢性的毒性試驗確認為安全無毒的食品原料， 可作為保健品原料。有報道稱，刺玫果可以起到穩定細胞膜結構的作用
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種物理穩定性高、具有藥物緩釋作用的鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉及其制備方法。一種鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉，包括按重量份計的以下原料組分
鹽酸丁卡因8份
氫化大豆卵磷脂 6-6.5份膽固醇3份
三月桂酸甘油酯 0.1-0.2份刺玫果5份
滲透壓調節劑葡萄糖9-11份。一種制備上述鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的方法，包括以下步驟1、按重量份計將氫化大豆卵磷脂6-6. 5份、膽固醇3份、三月桂酸甘油酯0. 1-0. 2 份溶解于氯仿中，作為脂質相，使氫化大豆卵磷脂在脂質相中的濃度為25mg/ml ；2、制備刺玫果提取液在5重量份洗凈的刺玫果中加入其質量10倍的水，破碎刺玫果，離心取上清液，得到刺玫果提取液；3、將8重量份的鹽酸丁卡因溶解于水中，并加入刺玫果中提取提取液，作為內水相，使鹽酸丁卡因的終濃度為40mg/ml ；4、將9-11重量份葡萄糖溶解于水中，作為外水相，使葡萄糖的濃度為8-10mg/ml ；5、將內水相加入脂質相中，所述內水相和脂質相的體積比為1 (1.2-1. 4)，高速剪切形成油包水型乳液；6、將上述乳液加入到外水相中，所述乳液與外水相的體積比為1 0.3-2.6)，高速剪切形成水包油包水型復乳；7、將復乳加入到與步驟6所用外水相體積相等的外水相中，然后氮氣吹干除去其中的氯仿，即得鹽酸丁卡因多囊脂質體混懸液；8、多囊脂質體混懸液用5μπι濾膜過濾，得到鹽酸丁卡因多囊脂質體，每次用2倍于步驟F所用外水相體積的生理鹽水沖洗，共沖洗3次，凍干，即可得鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉。本發明制備上述鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的方法，其中所述破碎刺玫果的方法為超聲破碎lmin，超聲波頻率為20kHz。本發明制備上述鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的方法，其中所述高速剪切的條件為使用高速剪切勻漿機在IOOOOrpm的轉速下作用IOmin。本發明制備上述鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的方法，其中所述氮氣吹干的條件為將復乳與外水相加入到容器中，每分鐘通以容器體積20倍的氮氣，37°C水浴20min。本發明鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉及其制備方法與現有技術不同之處在于本發明將安全無毒的保健品原料刺玫果用于鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉及其制備方法，所得鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉物理穩定性高、將實驗組I和對照組I在25°c、無避光的條件下分別保存15天和30天，對照組I的Ke分別增加了 75. 67%和140. 54%,而實驗組I 的Ke僅分別增加了 28. 57%和42. 86% ；鹽酸丁卡因多囊脂質體在大鼠體內呈明顯的緩釋行為，1 后檢測到的血漿中鹽酸丁卡因的濃度仍在150ng/ml，而作為對照的鹽酸丁卡因溶液在皮下注射3小時后濃度便降到lOOng/ml。
圖1是本發明鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉與鹽酸丁卡因水溶液體外釋放的藥時曲線，其中，■為鹽酸丁卡因水溶液，▲為鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉。圖2是本發明鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉與鹽酸丁卡因生理鹽水溶液在大鼠體內釋放的藥時曲線，其中■為鹽酸丁卡因生理鹽水溶液，▲為鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉。
具體實施例方式實施例11、精密稱取氫化大豆卵磷脂60mg、膽固醇30mg、三月桂酸甘油酯Img溶解于氯仿 2. 4ml中，作為脂質相；2、制備刺玫果提取液在50mg洗凈的刺玫果中加入500mg的水，超聲破碎lmin， 超聲波頻率為20kHz，在IOOOOrpm的條件下，離心3min，取上清液，得到刺玫果提取液；3、精密稱取鹽酸丁卡因SOmg溶解于水中，加入步驟2所得刺玫果提取液，作為內水相，使鹽酸丁卡因的終濃度為40mg/ml ；4、精密稱取葡萄糖99mg溶解于Ilml水中，作為外水相，葡萄糖的濃度為9mg/ml ；5、將內水相2ml緩慢加入脂質相2.細1的上層，用高速剪切勻漿機將其在 IOOOOrpm的轉速下作用lOmin，制得油包水型乳液；6、將上述乳液加入到Ilml外水相中，用高速剪切勻漿機將其在IOOOOrpm的轉速下作用lOmin，制得水包油包水型復乳7、將復乳加入到盛有Ilml外水相的500ml錐形瓶中，通以流速lOL/min的氮氣， 37°C水浴20min，除去氯仿，即得鹽酸丁卡因多囊脂質體混懸液；8、多囊脂質體混懸液過5 μ m濾膜過濾，得到鹽酸丁卡因多囊脂質體，每次用22ml 的生理鹽水沖洗，共沖洗3次，凍干，即可得鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉，作為實驗組I。測得鹽酸丁卡因多囊脂質體粒徑為30-40 μ m，包封率為87%。實施例21、精密稱取氫化大豆卵磷脂60mg、膽固醇30mg、三月桂酸甘油酯Img溶解于氯仿 2. 4ml中，作為脂質相；2、精密稱取鹽酸丁卡因SOmg溶解于水中，作為內水相，使鹽酸丁卡因的終濃度為 40mg/ml ；3、精密稱取葡萄糖99mg溶解于Ilml水中，作為外水相，葡萄糖的濃度為9mg/ml ；4、將內水相2ml緩慢加入脂質相2.細1的上層，用高速剪切勻漿機將其在 IOOOOrpm的轉速下作用lOmin，制得油包水型乳液；5、將上述乳液加入到Ilml外水相中，用高速剪切勻漿機將其在IOOOOrpm的轉速下作用lOmin，制得水包油包水型復乳；6、將復乳加入到盛有Ilml外水相的500ml錐形瓶中，通以流速lOL/min的氮氣，37°C水浴20min，除去氯仿，即得鹽酸丁卡因多囊脂質體混懸液；7、多囊脂質體混懸液過5 μ m濾膜過濾，得到鹽酸丁卡因多囊脂質體，每次用22ml 生理鹽水沖洗，共沖洗3次，凍干，即可得鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉，作為對照組I。測得鹽酸丁卡因多囊脂質體粒徑為20-30 μ m，包封率為56%。實施例3將實驗組I的鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉溶于水中，使得當脂質體中的鹽酸丁卡因全部釋放時，溶液中鹽酸丁卡因的濃度為7. 2mg/ml的，取上述溶液5ml置于透析袋中， 配制鹽酸丁卡因水溶液相應濃度為7. 2mg/ml，將5ml的該溶液置于透析袋中，分別同時在裝有250ml蒸餾水的溶出杯中計時釋放，轉速100轉/分鐘，溫度為37°C。分別于20min、 40min、60min、90min、150min、240min、360min、480min、540min、720min、960min、1440min、 1800min取樣，用HPLC測定其濃度(中國醫藥工業雜質，2010，41 (6)，453-455)，繪制鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉與鹽酸丁卡因水溶液體外釋放的藥時曲線，見圖1。藥物釋放百分比(％ )=上清液中游離鹽酸丁卡因的量/多囊脂質體中包封的鹽酸丁卡因的原始量X 100%結果表明在第60min時，鹽酸丁卡因水溶液釋放達到了 90%以上，而鹽酸丁卡因水溶液在ISOOmin時才釋放了 83%，說明本發明鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉具有明顯的體外緩釋效果。實施例4A.動物健康SD大鼠(體重180g_220g)，按照《實驗動物管理規定》飼養、管理大鼠。B.給藥與血樣采集100只大鼠隨機分為兩組，每組50只，每組雌雄各半，分別背部皮下注射鹽酸丁卡因多囊脂質體溶液和鹽酸丁卡因溶液(對照)，其中鹽酸丁卡因的劑量均為lmg/kg。給藥后分別在預定的時間點通過尾靜脈取血0. 6ml，每次取完血樣后給大鼠注入等體積的生理鹽水，血樣在4°C，IOOOOrpm的條件離心lOmin，將所得血漿與_20°C冷凍保存。C.樣品處理和分析精密吸取血漿200 μ 1置于IOml離心管中，精密加入0. lmol/1的氫氧化鈉溶液， 渦旋震蕩2min，加入3. Oml乙酸乙酯，渦旋萃取lOmin，6000rpm離心lOmin，將上層有機層轉移到另一 IOml離心管中，于48-52°C水浴氮氣吹干，殘渣用0. lmol/ml的鹽酸溶液復溶， 離心，上清液20 μ 1進行HPLC分析，根據本領域常規方法計算血藥濃度。D、試驗結果本發明鹽酸丁卡因多囊脂質體在大鼠體內呈明顯的緩釋行為，見圖2。1 后檢測到的血漿中鹽酸丁卡因的濃度仍在150ng/ml，而作為對照的鹽酸丁卡因溶液在皮下注射3 小時后濃度便降到lOOng/ml，以此可證明鹽酸丁卡因經多囊脂質體包封后，有效實現了鹽酸丁卡因的體內緩速釋放。實施例5鹽酸丁卡因多囊脂質體的物理穩定性考察以穩定系數Ke作為脂質體的物理穩定性評價指標，采用分光光度法測定Ke值，Ke值越小，脂質體越穩定(實用醫技雜志， 2007(18) :24334434)。將實施組I和對照組I得到的鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉放置在25°C、無避光的條件下保存，分別于0天、15天、30天取樣，用生理鹽水將其均配制成IOmg/ ml的溶液。從上述溶液中取樣時取兩份，1份取0. 5ml，加蒸餾水稀釋至5ml，以蒸餾水為空白，于344nm處測定其吸收度；另1份取Iml于5000r/min離心lOmin，從上部吸取離心后的脂質體0. 5ml，加蒸餾水稀釋至5ml，以蒸餾水為空白，于344nm處測定其吸收度。按下式計算Ke值，Ke= (ACI-A)/Aci (Ac^PA分別為脂質體離心前后吸收度值)。結果見表1，實驗組 I得到的鹽酸丁卡因多囊脂質體Ke值較小。且將實驗組I和對照組I在25°C、無避光的條件下分別保存15天和30天，對照組I的Ke分別增加了 75. 67%和140. 54%,而實驗組I的 Ke僅分別增加了 28. 57%和42. 86%。
O天15天30天實驗組I0. 0140. 0180. 020對照組I0. 0370. 0650. 089表1不同時間下的Ke值以上所述的實施例僅僅是對本發明的優選實施方式進行描述，并非對本發明的范圍進行限定，在不脫離本發明設計精神的前提下，本領域普通技術人員對本發明的技術方案作出的各種變形和改進，均應落入本發明權利要求書確定的保護范圍內。
權利要求
1. 一種鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉，其特征在于包括按重量份計的以下原料組分
2.一種制備上述鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的方法，其特征在于包括以下步驟A、按重量份計將氫化大豆卵磷脂6-6.5份、膽固醇3份、三月桂酸甘油酯0. 1-0. 2份溶解于氯仿中，作為脂質相，使氫化大豆卵磷脂在脂質相中的濃度為25mg/ml ；B、制備刺玫果提取液在5重量份洗凈的刺玫果中加入其質量10倍的水，破碎刺玫果， 離心取上清液，得到刺玫果提取液；C、將8重量份的鹽酸丁卡因溶解于水中，并加入刺玫果中提取提取液，作為內水相，使鹽酸丁卡因的終濃度為40mg/ml ；D、將9-11重量份葡萄糖溶解于水中，作為外水相，使葡萄糖的濃度為8-10mg/ml；E、將內水相加入脂質相中，所述內水相和脂質相的體積比為1 (1.2-1. 4)，高速剪切形成油包水型乳液；F、將上述乳液加入到外水相中，所述乳液與外水相的體積比為1 0.3-2.6)，高速剪切形成水包油包水型復乳；G、將復乳加入到與步驟F所用外水相體積相等的外水相中，然后氮氣吹干除去其中的氯仿，即得鹽酸丁卡因多囊脂質體混懸液；H、多囊脂質體混懸液用5um濾膜過濾，得到鹽酸丁卡因多囊脂質體，每次用2倍于步驟 F所用外水相體積的生理鹽水沖洗，共沖洗3次，凍干，即可得鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉。
3.根據權利要求2所述的制備上述鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的方法，其特征在于所述破碎刺玫果的方法為超聲破碎lmin，超聲波頻率為20kHz。
4.根據權利要求3所述的制備上述鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的方法，其特征在于所述高速剪切的條件為使用高速剪切勻漿機在IOOOOrpm的轉速下作用lOmin。
5.根據權利要求4所述的制備上述鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的方法，其特征在于所述氮氣吹干的條件為將復乳與外水相加入到容器中，每分鐘通以容器體積20倍的氮氣，37°C水浴20min。鹽酸丁卡因氫化大豆卵磷脂膽固醇8份 6-6.5 份3份月桂酸甘油酯 0.1-0.2份刺玫果滲透壓調節劑葡萄糖9-11份。
全文摘要
本發明鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉及其制備方法涉及一種鹽酸丁卡因的緩釋制劑，其目的是為了提供一種物理穩定性高、具有藥物緩釋作用的鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉及其制備方法。本發明鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉包括按重量份計的以下原料組分鹽酸丁卡因8份、氫化大豆卵磷脂6-6.5份、膽固醇3份，三月桂酸甘油酯0.1-0.2份，刺玫果5份、滲透壓調節劑葡萄糖9-11份。本發明還記載了一種鹽酸丁卡因多囊脂質體凍干粉的制備方法。本發明可用于局部麻醉劑的制備。
文檔編號A61P23/02GK102188397SQ201110124320
公開日2011年9月21日 申請日期2011年5月13日 優先權日2011年5月13日
發明者徐為公 申請人:悅康藥業集團有限公司