專利名稱：含有牛黃，麝香的藥物組合及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及藥物組合物，是根據現代藥學理論研制的含有牛黃，麝香以及天然植物提取物或者単體的藥用組合物及其在預防和治療腦血管疾病方面的應用。
背景技術：
牛黃、麝香是兩個傳統中藥動物來源藥物品種，在現代的醫藥學應用中已經廣泛的應用于臨床治療心腦血管疾病。牛黃中醫認為可用于解熱、解毒、定驚。內服治高熱神志昏迷，癲狂，小兒驚風，抽 搐等癥。外用治咽喉腫痛、ロ瘡癰腫、療毒癥。現代醫學的研究發現其在中樞神經保護，治療腦缺血，腦出血，腦卒中方面有著廣泛的作用。(劉曉燕等，體外培育牛黃治療急性腦梗死臨床療效觀察.中國中醫藥信息雜志，2010，(5);韓鐵軍，.牛黃安腦丸的制備及療效觀察中國醫藥指南，2010，(8);邢筱華等，牛黃益智湯治療痰火挾瘀型腦動脈硬化癥50例.陜西中醫，2009，(10);王朝霞等，牛黃熄風顆粒對急性腦卒中血清NSE的影響研究.中西醫結合心腦血管病雜志，2008，(2);趙艷紅等，牛黃及其代用品的藥理作用及臨床應用.軍事醫學科學院院刊，2007，(2);劉成德等，牛黃的藥理作用及臨床應用概況.中醫藥信息，2006，
(6))麝香，屬于芳香開竅類的中藥，具有活血化瘀的功效。現代研究表明麝香具有中樞神經雙向的興奮和抑制作用，另外在抗炎，耐缺氧等方面也表現出很強的作用。目前在心腦血管方面麝香的應用也及為廣泛。(羅海龍，復方麝香注射液配合腦保護劑治療急性腦梗死59例中國實驗方劑學雜志，2011，(7).班炳坤，麝香與冰片及其不同配比對腦冷凍傷大鼠血清ET、N0的影響.中藥藥理與臨床，2011，(I).宋淑玲，依達拉奉聯合復方麝香注射液治療腦干出血臨床觀察.中國中醫急癥，2011，(2).錢毅，復方麝香注射液輔助治療重癥高血壓腦出血的療效觀察.實用心腦肺血管病雜志，2011，(I).林順利，復方麝香注射液治療小兒病毒性腦炎.廣東醫學，2010，(13).)臨床上關于牛黃與麝香的合用藥物的組合也很多，比如安宮牛黃丸中就有牛黃和麝香的成分，還有麝香牛黃丸等制劑，都是兩個藥物的相互配伍，在治療腦血管病中有著積極的作用。(張蕻，麝香牛黃丸藥理作用實驗研究.山西中醫，2003，(3).劉遠新，安宮牛黃丸對自發性高血壓大鼠急性腦出血后腦水腫及神經功能缺損的影響.中華中醫藥雜志，2011，(3).韓壽英，安宮牛黃丸在急性腦梗死搶救治療中的應用，中國醫藥指南，2010，
(19).初冬梅，安宮牛黃丸治療出血性腦卒中歷史和現狀.湖南中醫藥大學學報，2009，
(8).羅清運，.安宮牛黃丸治療急性中風32例療效觀察.中國民族民間醫藥，2009，(10).)這些品種應用于腦血管病的治療，取得了一定的成果。但是這些復方遠遠不能滿足臨床的需要。臨床上已有的復方，大都是按照中醫的辯證來組成的，ー些大的復方非常復雜，往往包含了數十種的藥物，很難進行現代化研究，更不用說對其成分進行仔細的研究或者進行大規模的生產了。而現有的單純的兩種藥物的組合往往不能滿足不同類別，多種并發癥的疾病。在此基礎上，我們研究了在“牛黃+麝香”兩種動物來源的藥物中加入了對腦血管病有著積極作用的天然植物藥物，以其能夠在這些藥物組合中尋找對于眾多疾病有著更加積極作用的藥物新組合。我們的組合物，并不是簡單意義上的中藥藥物有效成分的組合，而是這些藥物的活性成分的組合，這些組合在復方制劑過程中可能可能是物理性質的改變，也可能是化學結構上的改變。比如說改變藥物的溶解狀態，分散體系，或者改變了藥物的結構，形成了新的化合物。在原有藥物的活性體系中加入了新的藥物活性成分，雖然是同樣的成分，但是不在藥物的組合中一起作用，可能就起不到積極的作用。本發明從“牛黃+麝香”的基礎上加入對腦血管疾病具有積極作用的藥物如丹參，三七，銀杏等，來研究各種藥物組合。通過對它們的組合研究，尋求更加安全有效的藥物組
發明內容
本發明的目的為提供具有協同增效作用的“牛黃+麝香+組分c”的組合，主要用于治療和或預防腦血管疾病，包括缺血性、出血性腦損傷、中風以及其后遺癥。在本發明中的藥物，可以選擇藥物直接粉碎打粉入藥，也可以選擇相當于藥物相同生藥材量的提取物或者其它形式如要。因此本發明的藥物組合藥物包括藥材原粉，脂溶性或者水溶性提取物，有效成分或者単體，或者采取現有的技術中其它制品形式。例如所述的活性成分包括a.麝香是指天然或者人工麝香，或者含有麝香酮、雄留酮的麝香提取物，或者麝香酮單體；b.牛黃天然牛黃，或者含有膽酸、去氧膽酸及鵝去氧膽酸、膽紅素、牛磺酸的人エ牛黃，或者為含有膽酸，去氧膽酸，牛磺酸等的牛黃提取物，或者牛磺酸單體。本發明的牛黃物質并非是僅僅是牛黃來源，其中的膽酸類，鵝去氧膽酸，膽紅素類，牛磺酸等均屬于有益的成分。本領域技術人員可以理解，別的來源的牛黃成分化合物也可以實現本發明。所述活性成分c來自以下cl_c6中的ー種Cl.三七，指含有人參皂苷，三七皂苷，三七總黃酮，三七黃酮A、三七黃酮B、揮發油、生物堿等活性成分的三七提取物，或三七黃酮單體極其衍生物或這些單體的混合物；c2.川芎，指含有川芎嗪、川芎酚、阿魏酸、揮發油等活性成分的川芎提取物，或川芎嗪單體及其衍生物，和或阿魏酸單體及其衍生物，或這些單體的混合物；c3.芍藥，指含有芍藥(赤芍、白芍)根粉提取物，含有芍藥總苷的化合物，或者芍藥苷的単體，或者這類單體的混合物；c4.紅花，含有紅花總黃色素的紅花提取物，紅花黃色素A、B單體極其衍生物，或這類單體的混合物；c5.丹參，主要含有丹參丹酚酸和或丹參酮的丹參提取物；或丹參水提物，或丹參丹酚酸單體以及其藥用鹽，或丹酚酸單體混合物；或丹參酮單體及其藥用鹽(如磺酸鈉)，或丹參酮單體混合物(如，丹參酮1，丹參酮2-A，丹參酮2-B等)，或丹參酮單體混合物；c6.銀杏，主要指含有銀杏內酯和或銀杏黃酮的銀杏提取物。銀杏水提物，或銀杏內酯單體、銀杏內酯衍生物、化學修飾物、結構類似物(銀杏內酯-A，銀杏內酯-B，ニ帖內酷，倍半內酯等)以及其藥用鹽，或銀杏內酯和或其衍生物的単體混合物；或銀杏黃酮(銀杏黃酮及其苷、銀杏總黃酮及其苷、雙黃酮、兒茶素等)単體、銀杏黃酮衍生物、化學修飾物、結構類似物及其藥用鹽，和或銀杏黃酮和其衍生物的単體混合物；或銀杏內酯單體和或銀杏黃酮單體的混合物。上述的cl-c2的成分，都非常普遍的應用于臨床的腦血管疾病，其活性成分的藥理作用在臨床上也都是得到認可，同樣的對于這些単體或者混合物的提取和制備也都是常用的技木，已經很普遍的應用。但是對于我們所提出的“牛黃+麝香+c組分”的觀點去考察的時候，并沒有發現有任何的關于這個藥物組合的研究，臨床上有方子或者藥物組合中包括這三種成分，甚至是所有的C類的成分，但是并沒有研究単獨的去考證“牛黃+麝香+C類活性成分”的研究。我們從“牛黃+麝香+C類活性成分”選出cl_c6共六個組分，作為六個不同的藥物組合來考察這類組合的優勢，看是否能夠起到有益的作用。在本發明的藥物組合中，各組分的藥物含量為 組分a，5-40、優選10-40、更優選20-40重量份；組分b，1-20、優選2-15、更優選5-10重量份；組分C，5-100、優選10-80、更優選20-80重量份。鑒于上述的有效成分的制備，純化和去除雜質等技術已經非常的成熟，且已有單體可以進行完全的化學合成(如銀杏內酯B，丹參酮2-A磺酸鈉等)所以關于制備技術這些就不做詳細的介紹了。可以針對上述的活性成分的理化性質活性關系、體內吸收特點等來進行有效的制齊U，可以加入輔料制備成多種劑型的腸道內或者非腸道內給藥劑型(如片劑、ロ崩片、分散片、緩控制劑、注射劑、粉針、納米制劑等)，關于制劑技術也已經相當的成熟。有益效果按照本發明的藥物組合，由10_90wt. %的活性成分和90_10wt. %的藥學上可接受的輔料組成，在牛黃+麝香的藥物組合上加入了多種的植物藥物組合，在治療腦血管疾病(包括腦血栓、腦缺血、腦梗死、外傷性腦損傷等)中,有著比原有藥物更加顯著的療效。
具體實施例實施例I.對大鼠腦缺血再灌注損傷的治療作用a、材料本發明藥物組合物A (牛黃+麝香+丹參酮IIA磺酸鈉3 2 5，5、10、20mg/kg注射液)本發明藥物組合物B (牛黃+麝香+銀杏內酯3 I 6，5、10、20mg/kg注射液)空白對照組生理鹽水陽性對照組牛黃注射液、麝香酮注射液、銀杏內酯注射液5mg/kg、丹參酮IIA磺酸鈉注射液5mg/kgb、方法清潔級雄性SD大鼠96只，體重250_300g，采用頸內動脈線栓法制備大鼠大腦中動脈閉塞(MCAO)模型分離大鼠頸內動脈，用絲線在頸外動脈根部打一松扣，夾閉頸總動脈和頸內動脈。將漁線(長40mm，直徑0. 26mm)經頸外動脈主干切ロ，緩慢向頸內動脈入顱方向推迸，達到大腦前動脈內，阻斷了 MCA的所有血供來源造成MCAO導致局灶性腦缺血-再灌注模型。假手術組大鼠麻酔后，僅暴露頸內外動脈分叉，不閉塞MCA。動物分為12組，分別為假手術組、缺血模型對照組、陽性對照組、受試藥高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低劑量組(5mg/kg)，每組8只。各組分別于復灌后3h注射給藥，每24h給藥一次，連續給藥3次，末次給藥后24h檢測各項指標。分別于末次給藥后24h對動物的神經功能缺陷進行分級評分，標準如下0分未觀察到神經癥狀；I分提尾懸空時，動物的手術對側前肢表現為腕肘屈曲，肩內旋，肘外展，緊貼胸壁；
2分將動物置于光滑平面上，推手術側肩向對側移動時，阻力降低；3分動物自由行走時向手術對側環轉或轉圈；4分；軟癱，肢體無自發活動；上述指標測定后，斷頭處死大鼠，取出全腦稱重，制備大腦切片，后用眼科鑷分離蒼白區(梗塞區)和非蒼白區(正常區)，計算梗塞百分比如下梗塞百分比(％ )=蒼白區重量バ蒼白區重量+非蒼白區重量)X 100%C、結果實驗結果見表I :表I藥物組合物對MCAO再灌所致局灶性腦缺血大鼠神經行為、腦梗塞率的影響
(フ土ヌn = 8)
組別劑量神經行為評分腦梗塞率
(mg/kg(%)
)
假手術組 ——————
模型對照 _ ——2.6±0.723.7±4.4
丹參酮 IIA 磺酸鈉 51.8±0.8*18.4±4.9*
201.5±0.7**18.0±5*藥物組合 A 101.7±0.9*19.7±6.0
52.1±0.820.2±5.1
銀杏內酯 51.9±0.820.2±4.8
20I. 5±0.8**16. 6±5.0林
藥物組合 B 101.7±0.6*18.1±6.2*
52.4±0.923.5±5.0 牛黃 102.1±0.821.1±0.8 _麝香_10 _2.3±0.7 _23.1±0.9 _*p < 0. 05, **p < 0. 01 vs.模型對照組于MCAO缺血2h再灌注3h后開始灌胃給藥，每24h給藥一次，連續給藥3次，與模型對照組相比，藥物組合A 20mg/kg、10mg/kg劑量組可明顯改善動物神經學評分，降低腦梗塞率，差異顯著(P < 0.01,p < 0.05)，并且高劑量組的效果要明顯超過丹參酮IIA磺酸鈉，牛黃，磨香單獨使用；藥物組合B 20mg/kg、10mg/kg劑量組可明顯改善動物神經學評分，降低腦梗塞率，差異顯著(p < 0. 01，p < 0. 05)，并且高劑量組的效果要明顯超過銀杏內酷，牛黃，麝香単獨使用。實施例2.對小鼠耐腦缺血性缺氧的作用a、材料本發明藥物組合物A (牛黃+麝香+三七皂苷3 2 5，10、20、40mg/kg灌胃)本發明藥物組合物B (牛黃+麝香+川芎嗪2 I 7，10、20、40mg/kg灌胃)空白對照組生理鹽水
陽性對照組牛黃、磨香、三七阜苷20mg/kg、川彎嗪20mg/kgb、方法急性腦缺血性缺氧實驗將110只小鼠隨機分為11組，分別為缺血模型對照組、陽性對照組、受試藥高(40mg/kg)、中(20mg/kg)、低劑量組(10mg/kg),姆組10只。各組小鼠連續灌胃10d，于末次灌胃后lh，各組小鼠腹腔注射NaN02溶液(質量濃度25% )250mg/kg。記錄從注射亞硝酸鈉開始至死亡時間，記錄小鼠存活時間。C、結果試驗結果見表2:表2藥物組合物對小鼠腦缺血性缺氧的影響(フ±5； n = 10)
組別劑量存活時間
ung/kg(min)
_)_
模型對照—— 15.7±2.4
三七皂苷2021.4±2.9*
4032.0 ±3**
r n藥物組合 A2024.7 ±2.0***p < 0. 05, **p < 0. 01 vs.模型對照組由上表可見，在灌胃給藥IOd以后，觀察注射亞硝酸鈉后小鼠的存活時間，發現與模型對照組比較藥物組合A和藥物組合物B高中劑量組均能顯著的延長小鼠的存活時間，統計學上有顯著的差異(p< 0.01，p <0.05)。而且效果明顯要勝過三七，川芎嗪，牛黃，麝香単獨使用。可見藥物組合在抗小鼠腦缺氧方面有著積極的作用，藥物組合A和B能夠起到協同增效的作用。實施例3.抗電凝法誘導血栓形成作用a.材料本發明藥物組合物A (牛黃+麝香+紅花黃色素3 I 6，5、10、20mg/kg注射液)本發明藥物組合物B (牛黃+麝香+銀杏內酯5 2 3，5、10、20mg/kg注射液)
空白對照生理鹽水陽性對照牛黃，磨香，紅花黃色素10mg/kg,銀杏內酯10mg/kgb.方法大鼠尾靜脈注射藥物組合A、B連續3d每天一次，最后一次注射Ih后，大鼠腹腔注射12%水合氯醛350mg/kg麻酔，仰臥位固定。頸部正中線切ロ，游離左側頸總動脈，近心端放置BT87-3型實驗性體內血栓形成測定儀的刺激電極，遠心端放置溫度探頭。當刺激電極接通電流后，由于電流熱效應引起血管損傷而形成血栓，刺激的電流強度為2mA，連續刺激5min;當血栓形成時遠心端溫度驟降，溫度探頭能測定其溫度驟變，此時即為血管栓閉時間，從開始刺激至溫度驟降所需的時間作為動脈血栓形成時間(S)測量指標血栓形成時間的測定記錄從開始刺激至動脈遠端溫度突降的時間間隔作為動脈血栓形成時間。c.結果由表3可見，注射藥物組合A、B都可以延長大鼠的血栓形成時間(*p < 0. 05，林p
<0. 01)，可見藥物組合能夠起到抗血栓形成的作用；其中藥物組合B的效果明顯要高過銀杏內酯單獨作為陽性藥物的效果。而藥物組合A的效果和単獨使用紅花黃色素相當。表明在抗血栓形成方面藥物組合B有著超過單味藥物的作用，說明在這個組合中牛黃+麝香+銀杏內酯能夠起到協同增效的作用。實施例4.藥物組合體外對缺氧復氧誘導的神經細胞損傷的保護作用a.材料本發明藥物組合物A (牛黃+麝香+紅花黃色素2 3 5)表3藥物組合物對電凝法誘導大鼠頸動脈血栓形成的影響(フ±s, n = 10)組別劑量血栓形成時間
(mg/kg)
模型對照——15. 6土 I. 7
紅花黃色素1019.8±1.8*
2020. 5 ±1.7**
藥物組合A1019.7±1.9*519.1 ±1.8* 銀杏內酯1020.9±1.8**
2025. 5 ±1.8**
藥物組合 B1022.7±1.6**
519.4±1.9*
牛黃1015.1±1.8 麝香1017.3±1.7 .*p < 0. 05, **p < 0. 01 vs.模型對照組本發明藥物組合物B(牛黃+麝香+銀杏內酯2 2 6)本發明藥物組合物C(牛黃+麝香+川芎嗪2 2 6)本發明藥物組合物D (牛黃+麝香+三七皂苷2 2 6)空白對照生理鹽水陽性對照牛黃+麝香，銀杏內酯b.方法原代培養大鼠大腦皮層神經細胞，將培養IOd的大鼠大腦皮層神經細胞隨機分為4組(每組6孔)。正常組不加處理；模型組換以無糖Earles培養液，置于37°C、5% C02氮氣缺氧罐中缺糖/缺氧培養4h，再放回37°C、5% C02培養箱中復氧14h ;藥物組合換以含藥物組合物A、B、C、D終濃度為lg/L的無糖Earles培養液，置于37°C、5% C02氮氣缺氧罐中缺糖/缺氧培養4h，然后放回37°C、5% C02培養箱中復氧14h ;對照組換以含牛黃+麝香、銀杏內酷、川芎嗪、三七皂苷終濃度為0. 5g/L的無糖Earles培養液，置于37°C、5%C02氮氣缺氧罐中缺糖/缺氧培養4h，然后放回37°C、5% C02培養箱中復氧14h。c.結果表4藥物組合物對缺氧復氧誘導原代神經細胞凋亡的影響(l±s，n = 6)
權利要求
1.ー種藥物組合，包括10-90wt. %的活性成分和90-10wt. %的藥學上可接受的輔料組成，所述的活性成分為 a.牛黃，天然牛黃或者含有膽酸、去氧膽酸及鵝去氧膽酸、膽紅素、牛磺酸的人工牛黃，10-50重量份； b.麝香，麝香酮單體，或者含有麝香酮、雄留酮的麝香提取物，5-20重量份； c.從以下的cl-c6品種中選取，10-80重量份 Cl.三七，指含有人參皂苷，三七皂苷，三七總黃酮，三七黃酮A、三七黃酮B、揮發油、生物堿等活性成分的三七提取物，或三七黃酮單體極其衍生物或這些單體的混合物； c2.川芎，指含有川芎嗪、川芎酚、阿魏酸、揮發油等活性成分的川芎提取物，或川芎嗪單體及其衍生物，和或阿魏酸單體及其衍生物，或這些單體的混合物； c3.芍藥，指含有芍藥總苷、芍藥苷、芍藥內酯苷的芍藥提取物，或者芍藥苷単體的；c4.紅花，含有紅花總黃色素的紅花提取物，紅花黃色素A、B単體極其衍生物，或這類單體的混合物； c5.丹參，主要含有丹參丹酚酸和或丹參酮的丹參提取物；或丹參水提物，或丹參丹酚酸單體以及其藥用鹽，或丹酚酸單體混合物；或丹參酮單體及其藥用鹽，或丹參酮單體混合物，或丹參酮和丹參丹酚酸單體混合物； c6.銀杏，主要指含有銀杏內酯和或銀杏黃酮的銀杏提取物。銀杏水提物，或銀杏內酯単體、銀杏內酯衍生物、化學修飾物、結構類似物以及其藥用鹽，或銀杏內酯和或其衍生物的単體混合物；或銀杏黃酮單體、銀杏黃酮衍生物、化學修飾物、結構類似物及其藥用鹽，和或銀杏黃酮和其衍生物的單體混合物；或銀杏內酯單體和或銀杏黃酮單體的混合物。
2.如權利要求I的藥物組合物，所述活性組分為 牛黃，含有膽酸、去氧膽酸及鵝去氧膽酸、膽紅素、牛磺酸的牛黃提 a.取物，10-50重量份； b.麝香，有麝香酮、雄留酮的麝香提取物，5-20重量份； c.10-80重量份,選自以下cl-c6的活性成分 Cl.含有三七皂苷、人參皂苷和或三七黃酮的三七提取物； c2.含有川芎嗪、阿魏酸的川芎提取物； c3.含有芍藥苷和或芍藥內酯的芍藥提取物； c4.含有紅花黃色素的紅花提取物； c5.含有丹參丹酚酸和或丹參酮的丹參提取物； c6.銀杏內酯和或銀杏黃酮的銀杏提取物。
3.如權利要求1-3之一的藥物組合物，其中所述活性成分為 a.牛黃酸，10-50重量份； b.磨香酮，5-20重量份； c.選自以下cl-c6，10-80重量份 Cl.含有三七皂苷的三七水提物； c2.川芎嗪單體及其衍生物； c3.含有芍藥苷的芍藥水提物； c4.紅花黃色素A、B単體，以及兩者的混合物；c5.丹參丹酚酸和或丹參酮單體，和或其衍生物，或這些單體的混合物；c6.銀杏內酯單體。
4.治療和或預防腦血管疾病，包括缺血性、出血性腦損傷、中風以及其后遺癥。
全文摘要
本發明涉及藥物組合物，是根據現代藥學理論研制的含有牛黃，麝香以及天然植物提取物或者單體的藥用組合物，該組合物在預防和治療腦血管疾病方面具有良好的用途，在牛黃+麝香的藥物組合上加入了多種的植物藥物組合，在治療腦血管疾病(包括腦血栓、腦缺血、腦梗死、外傷性腦損傷等)中，有著比原有藥物更加顯著的療效。
文檔編號A61P9/00GK102764280SQ20111011595
公開日2012年11月7日 申請日期2011年5月6日 優先權日2011年5月6日
發明者秦引林 申請人:秦引林