降低蛋白質含量的鴉膽子油及其藥物組合物以及它們的制備方法

專利名稱：降低蛋白質含量的鴉膽子油及其藥物組合物以及它們的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種蛋白質含量比較低的鴉膽子油、含該鴉膽子油的藥物組合物，以 及它們的制備方法，所述的鴉膽子油中蛋白質的含量控制在0. 1%以下。
背景技術：
鴉膽子為苦木科鴉膽子屬植物鴉膽子Brucea javanica (L. ) Merr的干燥成熟果 實。秋季果實成熟時采收，除去雜質，曬干。鴉膽子始載于清代趙學敏所著的《本草綱目拾 遺》。中華人民共和國藥典中收載的功效為清熱解毒，截瘧，止痢，腐蝕贅疣。用于痢疾，瘧 疾；外治贅疣，雞眼。鴉膽子主要含水溶性成份及植物油兩部分，其毒性成分存在于水溶性苦味成分 中；而油溶性成分，即鴉膽子油無毒性且治療效果較好，目前被廣泛的應用于臨床中，其中 主要含有三油酸甘油酯、油酸、亞油酸、亞麻酸等成分，此外硬脂酸、棕櫚酸、豆蔻酸、廿碳烯 酸、山崳酸、花生烯酸也是鴉膽子油中常見的成分。一般而言提取鴉膽子有效成分的方法是 本領域比較常規的提取中草藥有效成分的操作方法，目前比較普遍的鴉膽子油(或稱鴉膽 子總脂肪油)為石油醚提取物，也可以經過簡單的精制(例如脫色處理、水洗處理、白土除雜 質處理)，提取物用于制備藥物制劑，比較普遍使用的制劑是鴉膽子油乳劑(例如鴉膽子油 乳注射液、鴉膽子口服乳液)。

發明內容
雖然含鴉膽子油的藥物已被廣泛應用，但是乳劑穩定性略差，長期放置過程中出 現破乳分層、絮凝沉降等現象；此外注射用乳劑在臨床上還偶有發現會引起刺激血管、惡心 嘔吐、心律增快、發熱、呼吸困難、下肢疼痛、過敏、溶血等不良反應。因此，改善制劑的穩定 性和安全性，提供一種穩定性好、使用安全的鴉膽子油及其制劑是十分有意義的。本發明的目的正是提供一種改善現有技術中的鴉膽子油穩定性和安全性的方法， 相對于已有的鴉膽子油或制劑，提供一種減少毒性成分或不良成分，臨床用藥安全有效的 含鴉膽子油的藥物組合物。通過大量研究，令人驚奇的發現，在鴉膽子油中的成分之一蛋白質的存在使鴉膽 子油乳注射液具有誘發過敏的風險，還可能導致乳劑的穩定性下降。除去蛋白質將使鴉膽 子油乳注射液的安全性大為提高，乳劑的穩定性也有明顯提高。在研究中首次發現，從鴉膽子中提取的有效成分鴉膽子油中普遍含有一定量的蛋 白質，通常含量在0.5%左右，隨著藥材的不同來源其含量可能還會更高。經研究發現蛋白 質是造成鴉膽子油乳注射液不穩定、不安全的重要因素，其中被分離出的蛋白質具有植物 蛋白的一般特征，這些蛋白質具有蛋白質的常規特性，其分子量往往較大，一般分子量在 10000以上，可與福林酚試液作用顯出特征顏色反應。本發明的核心在于通過實驗研究，確定了鴉膽子油中的蛋白質對鴉膽子油的不利影響，為了改善藥物的性能，本領域技術人員可以根據實際需要降低鴉膽子油中的蛋白質 含量。如果低于一定的含量時，即使仍含有微量的蛋白質對鴉膽子油的穩定性和安全性也 沒有明顯影響，當然如果完全除去這些蛋白質是最理想的，但這對后續的處理工藝有很高 的要求，因此本領域技術人員可以根據實際工藝的需要控制蛋白質的含量。發現蛋白質對 鴉膽子油或含鴉膽子油的藥物的不利影響是本發明的一個核心問題。針對上述發現，本發明的第一個目的是提供一種鴉膽子油，所述鴉膽子油的蛋白 質含量低于0.1%。本發明的第二個目的是提供一種制備上述鴉膽子油的方法。如何在保證鴉膽子提 取物有效性的前提下，去除其中的蛋白質是本發明要解決的關鍵性問題。本發明的第三個目的是提供一種無毒性、臨床使用安全有效的鴉膽子油藥物組合 物，特別是鴉膽子油乳劑，以及組合物的制備方法。本發明是以如下技術方案實現的
本發明提供了一種鴉膽子油，其中蛋白質的含量控制在0. 1%以下，優選含量控制在 0. 05%以下，更優選0. 03%以下，更優選0. 025%以下，最優選0. 013%以下。本發明的主要產品為鴉膽子油(或也可稱為鴉膽子總脂肪油)，是指鴉膽子藥材經 提取得到提取物(提取物可以經精制、純化等步驟進行預處理)并降低其中蛋白質含量后制 成的以鴉膽子的脂肪油為主要成分的中藥有效部位提取物。鴉膽子油提取物中脂肪油類成 分占總成分的50%以上，通常在90%以上，比較純的產品達到96%以上。通常鴉膽子油主要 包括三油酸甘油酯、油酸、亞油酸、亞麻酸；一般也會含有硬脂酸、棕櫚酸、豆蔻酸、廿碳烯 酸、山崳酸、花生烯酸。當然根據藥材的不同還會含有其他一些成分。現有技術中制備鴉膽子油的方法很多，而本發明與現有技術中各種方法加工出的 鴉膽子油的本質區別在于本發明所述的鴉膽子油是在現有技術制備出的鴉膽子油的基礎 上進一步降低鴉膽子油中所含蛋白質的脂肪油類成分為主體的有效部位。為了得到本發明所述的鴉膽子油，可以通過本領域除蛋白質的一般方法對鴉膽子 油進行除蛋白質工藝獲得。也可以利用本發明的除蛋白質的方法來提高鴉膽子油或含鴉膽 子油的藥物組合物的穩定性或減少其過敏性。除蛋白質工藝優選采用分子蒸餾法或超濾法。分子蒸餾法
分子蒸餾法包括以下步驟將鴉膽子油原料置于分子蒸餾儀中進行蒸餾，收集蒸餾出 的輕組分即得。或者，可進一步將蒸餾后的重組分進行萃取或冷卻后過濾，將上述萃取后的 油層或過濾后的濾液與蒸餾后的輕組分混合即得。其中優選的制備方法包括以下步驟
1)將鴉膽子油原料置于分子蒸餾儀中進行預處理，預處理的條件如下壓力90 IlOPa,溫度80 90°C，預處理的時間為輕組分不再明顯增加時為止，將其中輕組分棄去， 得到進入一級分子蒸餾的重組分；
2)一級分子蒸餾在壓力15 25Pa、溫度120 130°C的條件下，將進入一級分子蒸 餾的重組分蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止，將此步得到的輕重組分分別留存，其中 的重組分進入下一步操作；
3)二級分子蒸餾在壓力3 5Pa、溫度130 150°C的條件下，將進入二級分子蒸餾 的重組分蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止，將此步得到的輕組分留存，得到重組分；
6任選在進行上述二級分子蒸餾工序后，將得到的重組分作為原料按照上述步驟3)的方 法進行兩次以上重復操作，將幾次二級分子蒸餾得到的輕組分合并，并得到重組分；
4)三級分子蒸餾在壓力0.13 0. 2Pa、溫度180 230°C的條件下，將上一步驟得到 的重組分蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止，將此步得到的輕組分留存；
任選在進行上述三級分子蒸餾工序后，將得到的重組分作為原料按照上述步驟4)的方 法進行兩次以上重復操作，將幾次三級分子蒸餾得到的輕組分合并；
5)將一級、二級、三級分子蒸餾所得到的輕組分混合均勻，并加熱到100°C左右，充分攪 拌，冷卻即得到除去蛋白質雜質后的鴉膽子油。對上述制備方法中兩個任選步驟進一步解釋說明的是上述步驟3)進行第一次 的二級分子蒸餾后，任選進行重復操作。若在第一次二級分子蒸餾后，認為輕重組分分離不 完全，可以將得到的重組分再進行一次二級分子蒸餾；如果需要還可以將得到重組分再進 行二級分子蒸餾。重復的次數可根據需要進行選擇。例如，在一級分子蒸餾后，將重組分 在壓力3 5Pa、溫度130 150°C的條件下，進行分子蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為 止；如果此時希望將輕重組分進一步分離完全，則可以將得到的重組分在壓力3 5Pa、溫 度130 150°C的條件下再進行一次分子蒸餾，并分別得到輕重組分；根據需要可以進一步 將得到的重組分在壓力3 5Pa、溫度130 150°C的條件下，重復進行分子蒸餾至輕組分 不再有明顯增加時為止。本領域技術人員可根據需要多次重復上述工序。然后幾次操作得 到的輕組分合并，得到的重組分進行下一步操作。同理，上述步驟4)之后包括了任選步驟， 其表示的含義與步驟3)之后的任選步驟類似若在第一次三級分子蒸餾后，認為輕重組分 分離不完全，可將得到的重組分再進行一次三級分子蒸餾；如果需要還可以將得到重組分 再進行三級分子蒸餾。重復的次數可根據需要進行選擇。上述制備方法中，分子蒸餾后得到的重組分可進一步進行萃取或冷卻過濾。萃取 時，可采用乙醇或其它適宜溶劑進行萃取，優選95 %乙醇進行萃取。在上述制備方法中還可包括以下步驟將第三級分子蒸餾后得到的重組分產物進 行萃取或冷卻后過濾，將上述萃取后的油層或過濾后的濾液與一級、二級、三級分子蒸餾所 得到的輕組分混合均勻，并加熱到100°c左右，充分攪拌，冷卻即得到除去蛋白質雜質后的 鴉膽子油。
超濾法
將鴉膽子油原料通過超濾裝置，優選使用無機陶瓷膜，截留相對分子量為1萬以上 的物質，得到的超濾透過液即為去除蛋白質的鴉膽子油。優選在40 50°C、超濾壓力為 0. 15 0. 3MPa下超濾濃縮。
上述制備方法中，其中鴉膽子油原料可以為任何途徑獲得的鴉膽子油，例如直接購買 的鴉膽子油原料，或鴉膽子油原料為將鴉膽子采用石油醚提取得到的鴉膽子粗油，或鴉膽 子油原料是通過將鴉膽子采用石油醚提取得到的鴉膽子粗油經活性炭脫色制得，或直接使 用鴉膽子藥材根據常規提取方法進行提取得到鴉膽子油原料。
如從藥材的提取開始制備本發明的鴉膽子油，可按以下步驟進行1)將鴉膽子藥材破碎，用石油醚提取，提取液回收石油醚得鴉膽子粗油；
2)任選所述粗油經活性炭脫色步驟；
3)之后，除蛋白質得到本發明的鴉膽子油。優選按以下步驟進行
1)破碎將鴉膽子藥材用粉碎機粉碎，備用；
2)石油醚提取將已破碎的藥材用石油醚在提取罐中浸泡、浸泡液放入蒸餾罐，蒸餾石 油醚，石油醚冷凝，回到提取罐，浸泡藥材，反復提取；
3)回收將蒸餾罐中的石油醚提取液先加熱回收，再減壓蒸餾回收，至無餾出液時，石 油醚回收完畢，蒸餾罐中余下的油狀液體，即為鴉膽子粗油；
4)任選進行脫色處理將鴉膽子粗油加熱后，加入活性炭，吸附脫色，過濾即得；
5)除蛋白質取步驟3)或步驟4)所得的鴉膽子油經分子蒸餾或經超濾，蛋白質存在 于餾出后的殘留物中或超濾截留物中，餾出物或超濾濾液即為除去蛋白質的鴉膽子油有效 部位。本發明還提供了含有上述鴉膽子油的藥物組合物，優選鴉膽子油乳劑。所述鴉膽子油乳劑包括本發明提供的鴉膽子油、乳化劑、等張調節劑，以及任選的 穩定劑和PH調節劑。優選在IOOml鴉膽子油乳劑中各組分用量為鴉膽子油5 50ml、乳 化劑0. 1 50g、等張調節劑0. 01 20g、穩定劑0 50g、pH調節劑0 IOgo其中乳化劑 可選自大豆磷脂、大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、泊洛沙姆、乙酸單甘油酯、聚山梨酯、聚氧乙烯 蓖麻油，或兩種以上物質的任意組合；等張調節劑可選自甘油、丙二醇、乙二醇、聚乙二醇、 山梨醇、甘露醇、木糖醇，或兩種以上物質的任意組合；穩定劑可選自維生素E、抗壞血酸、 油酸、油酸鈉、膽酸、脫氧膽酸、脫氧膽酸鈉，或兩種以上物質的任意組合；PH調節劑可選自 鹽酸、氫氧化鈉、磷酸及其鹽類、碳酸及其鹽類、乳酸、檸檬酸、醋酸，或兩種以上物質的任意 組合。上述鴉膽子油乳劑的制備方法是將乳化劑加熱分散后，再加入預熱的本發明 的鴉膽子油乳化，得到鴉膽子油與乳化劑的混合物。具體的可采用另取等張劑與注射用水 混合，加熱，加入至鴉膽子油與乳化劑的混合物中，繼續乳化成初乳，用勻質機乳化，過濾。 任選在制備過程加入穩定劑和/或PH調節劑。具體步驟如下
(1)將乳化劑放入高剪切乳化罐中，加入約3 20倍量的注射用水(40°C 90°C)剪 切分散10 120分鐘。(2)將鴉膽子油加熱至50°C 100°C。(3)用注射用水或將等張劑與注射用水按1 :0. 5 5的比例混合，攪拌均勻，加熱 至 50°C 100°C。(4)將預熱至50°C 100°C后的鴉膽子油緩慢加入到乳化劑溶液中剪切乳化10 120分鐘。然后加入步驟(3)的溶液繼續乳化10 120分鐘制成初乳。(5)向初乳中加入穩定劑、pH調節劑，調整pH值至4.0 6.0。逐漸加入70°C以 上注射用水至全量，剪切乳化10 120分鐘。(6)將全量藥液用勻質機乳化2 6次，壓力控制在20. 0 90. OMPa，得到均勻乳 化液，經5μπι孔徑濾芯過濾。
( 7 )檢測合格后，灌封、滅菌即得。所述步驟(1)中加入注射用水的量為5 20倍，優選8 10倍；注射用水的溫度 為40 90°C，優選50°C ；剪切乳化時間為10 120分鐘，優選20分鐘。所述步驟(2)中鴉膽子油加熱至50 100°C，優選80°C。所述步驟(3)中等張劑與注射用水按1 :0. 5 5的比例混合，優選1 :1的比例混 合；加熱至50 100°C，優選80°C。所述步驟(4)中剪切乳化的時間為10 120分鐘，優選20分鐘；加入步驟(3)的 溶液繼續乳化時間為10 120分鐘，優選30分鐘。所述步驟(5)中剪切乳化時間為10 120分鐘，優選30分鐘。所述步驟(6)中用勻質機乳化2 6次，優選3次；壓力控制在20. 0 90. OMPa, 優選 40. OMPa0
本發明的有益效果是
1、本發明中的鴉膽子油含有的水溶性成分、蛋白質等雜質的量較低。通過本發明的分 子蒸餾法或超濾法降低了鴉膽子油中蛋白質含量，避免了這類物質的存在帶來的藥物安全 隱患，并且產品所包含單體成分均可以定性鑒別和定量測定，物質基礎非常明確，符合中藥 現代化的國際要求，保證了臨床用藥的安全有效性。2、采用本發明鴉膽子油制備的鴉膽子油乳注射液的過敏試驗結果表明未去除蛋 白質的鴉膽子油乳注射液有輕度致敏性，去除蛋白質的鴉膽子油乳注射液均無致敏性。3、本發明制備的鴉膽子油乳劑穩定性良好，鴉膽子油乳注射液和鴉膽子油口服乳 液的三批樣品加速試驗、長期室溫留樣試驗的結果顯示均未出現破乳、分層現象，PH值、 總酸量等檢查均符合質量標準的規定，證明本發明制備的鴉膽子油乳劑在有效期內質量穩 定，可以保證臨床的用藥安全。4、經研究發現鴉膽子油中的蛋白質的存在會導致鴉膽子制劑穩定性下降、產品質 量下降、容易變質，更嚴重的是給患者帶來安全性隱患，去除了蛋白質，減少了有害的成分， 避免了乳滴靜注人體后，帶來的患者機體的過敏反應，變態反應，和減少了導致患者死亡的 因素。
具體實施例方式
對比例1 制備未去除蛋白質的鴉膽子油(樣品1) 按如下步驟制備
(1)揀選將檢查合格的鴉膽子藥材150. 9kg，揀選鴉膽子中的雜物后，經粉碎機破碎， 再次稱重為150. 2kgo(2)石油醚提取將破碎后的鴉膽子，裝入袋內，扎緊袋口，放入提取罐中，關上罐 蓋，用真空抽入260kg石油醚，對鴉膽子進行浸泡48小時。將浸泡液放入蒸餾罐中，加熱至 65°C，蒸餾出的石油醚經冷凝進入提取罐中，若提取罐中的鴉膽子已暴露于石油醚溶劑之 上，則補加一定量的石油醚，再浸泡30分鐘。如此循環提取七次，補加石油醚的量為60kg， 收集提取液量為^^kg，將提取液放入蒸餾罐中。(3)回收將蒸餾罐中的石油醚提取液先常壓加熱回收，溫度65°C。當餾出液量明
9顯減少時，再減壓蒸餾。減壓蒸餾初、中階段溫度不能超過60°C，當無餾出液時，再逐漸升溫 到90°C減壓蒸餾，至無餾出液時，石油醚回收完畢。蒸餾罐中余下的油狀液體，為鴉膽子粗 油，收集鴉膽子粗油，稱重為31. 2kgo(4)脫色取鴉膽子粗油加入0. 45kg活性炭，加熱至110°C，脫色吸附30分鐘。將 其降溫至80°C，保溫過濾，得鴉膽子油30. Ikgo實施例1 制備去除蛋白質的鴉膽子油(樣品2)
(1)預處理取一部分對比例1所制備的鴉膽子油置于分子蒸餾儀中進行預處理， 預處理的條件如下壓力90 llOPa，溫度80 90°C，預處理的時間一般視輕組分不
再明顯增加時為止，蒸出的輕組分棄去，重組分進入一級分子蒸餾；
(2)一級分子蒸餾預處理后，將重組分進行一級分子蒸餾，其條件如下壓力15 25 ，溫度120 130°C，蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止。將此步得到的輕組分留存， 重組分進入下階段進行二級分子蒸餾。(3) 二級分子蒸餾將一級分子蒸餾后的重組分進行二級分子蒸餾，其條件為壓 力3 5Pa，溫度130 150°C，蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止。將此步得到的輕組 分留存，重組分進入下階段進行三級分子蒸餾。(4)三級分子蒸餾將二級分子蒸餾后的重組分進行三級分子蒸餾，其條件為壓 力0. 13 0. 2Pa，溫度180 230°C，蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止。將此步得到的 輕組分留存，即三級分子蒸餾所得到的輕組分。(5)將一級、二級、三級分子蒸餾所得到的輕組分混合均勻并加熱到100°C左右，充 分攪拌，冷卻即得。實施例2 制備去除蛋白質的鴉膽子油(樣品3)
取一部分對比例1所制備的鴉膽子油進行以下步驟步驟(1) (4)同實施例1的步 驟⑴ (4)。(5)對三級分子蒸餾后得到的重組分產物進行萃取，采用與重組分產物等體積的 95%乙醇進行萃取，棄去乙醇層，萃取5 6次，將萃取后的油層，與一級、二級、三級分子蒸 餾所得到的輕組分混合均勻，加熱到100 V左右，充分攪拌，冷卻即得。實施例3 制備去除蛋白質的鴉膽子油(樣品4)
取一部分對比例1所制備的鴉膽子油進行以下步驟步驟(1) (4)同實施例1的步 驟⑴ (4)。(5)將三級分子蒸餾后得到的重組分產物置于冷凍設備中，將其逐步冷卻至0 2°C后，靜置12小時，保持在此溫度下過濾，過濾即可除去蛋白質。將濾液與一級、二級、三 級分子蒸餾所得到的輕組分混合均勻并加熱到100°C左右，充分攪拌，冷卻即得。實施例4 制備去除蛋白質的鴉膽子油(樣品5)
取一部分對比實施例1制備的鴉膽子油Ikg倒入陶瓷膜超濾裝置中，用截留相對分子 量為1萬的無機陶瓷膜，在40 50°C、超濾壓力為0. 15 0. 3MPa下超濾濃縮，超濾后得 到880g超濾透過液和IlOg超濾截留液。所得到的超濾透過液即為去除蛋白質的鴉膽子油。實施例5 凱氏定氮法測定樣品1-5中蛋白質含量
量取鴉膽子油約0. 1ml，精密稱定重量，置干燥的30ml凱氏燒瓶中，按照氮測定法(中 國藥典2010年版二部附錄ΥΠ D第二法)測定。餾出液用硫酸滴定液(0.5mmol/l)滴定至溶液由藍綠色變為灰紫色，并將滴定結果用空白試驗校正。每Iml硫酸滴定液(0. 5mmol/l) 相當于0. 01401mg的氮。按下列公式計算蛋白質的含量(％)=含氮量/16%，結果見表1。表1不同樣品的蛋白質含量
批號樣品1樣品2樣品3樣品4樣品5蛋白質含量0. 44%<0. 013%0. 025%0. 031%<0.013%
實施例6-8 鴉膽子油乳劑的制備
取樣品3制備鴉膽子油乳劑樣品，按如下步驟制備
(1)將甘油加入至水相罐中，配成50%甘油水溶液攪拌均勻，加熱至80°C，備用。(2)將精制豆磷脂放入高剪切乳化罐中，加入8 10倍的注射用水(50°C)剪切乳 化20分鐘，將預熱80°C后的鴉膽子油緩慢加入，剪切乳化20分鐘。然后加入步驟(1)的溶 液繼續乳化30分鐘制成初乳。(3)向初乳中逐漸加入70°C以上注射用水至全量，剪切乳化30分鐘。(4)用高壓勻質機乳化數次，嚴格控制壓力，得到均勻乳化液，過濾。(5)檢測合格后，灌封、滅菌，即得。注鴉膽子油乳劑指鴉膽子油乳注射液和鴉膽子油口服乳液，2者的處方工藝完 全相同，區別在于生產環境要求不同。試驗數據如表2所示 表2鴉膽子油乳劑配方
權利要求
1.一種鴉膽子油，其特征在于，蛋白質的含量在0. 1%以下，優選含量在0. 05%以下，更 優選0. 03%以下，更優選0. 025%以下，最優選在0. 013%以下。
2.根據權利要求1所述的鴉膽子油，其特征在于所述鴉膽子油含有三油酸甘油酯，油 酸，亞油酸，亞麻酸，優選所述鴉膽子油還含有三油酸甘油酯，油酸，亞油酸，亞麻酸，硬脂 酸，棕櫚酸，豆蔻酸，廿碳烯酸，山崳酸，花生烯酸。
3.一種制備權利要求1-2所述鴉膽子油的方法，其特征在于所述方法包括將鴉膽子油 原料進行除蛋白質步驟，優選所述除蛋白質步驟采用分子蒸餾法或超濾法。
4.一種提高鴉膽子油或含鴉膽子油藥物組合物的穩定性或減少其過敏性的方法，其特 征在于所述方法包括將鴉膽子油原料進行除蛋白質步驟，優選所述除蛋白質步驟采用分子 蒸餾法或超濾法。
5.根據權利要求3或4所述方法，其中所述分子蒸餾法包括以下步驟將鴉膽子油原 料置于分子蒸餾儀中進行蒸餾，收集蒸餾出的輕組分即得。
6.根據權利要求5所述鴉膽子油的制備方法，收集輕組分后，將蒸餾后的重組分進行 萃取或冷卻后過濾，將上述萃取后的油層或過濾后的濾液與蒸餾后的輕組分混合即得。
7.根據權利要求5或6所述的鴉膽子油的制備方法，其中鴉膽子油原料進行分子蒸餾 的步驟包括以下步驟步驟1)將鴉膽子油原料置于分子蒸餾儀中進行預處理，預處理的條件如下壓力90 IlOPa,溫度80 90°C，預處理的時間為輕組分不再明顯增加時為止，將其中輕組分棄去， 得到進入一級分子蒸餾的重組分；步驟2) —級分子蒸餾在壓力15 25Pa、溫度120 130°C的條件下，將進入一級分 子蒸餾的重組分蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止，將此步得到的輕組分留存，得到進 行二級分子蒸餾的重組分；步驟3) 二級分子蒸餾在壓力3 5Pa、溫度130 150°C的條件下，將進入二級分子 蒸餾的重組分蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止，將此步得到的輕組分留存，得到重組 分；任選在進行上述二級分子蒸餾工序后，將得到的重組分作為原料按照上述步驟3)的方 法進行兩次以上重復操作，將幾次二級分子蒸餾得到的輕組分合并，并得到重組分；步驟4)三級分子蒸餾在壓力0. 13 0. 2Pa、溫度180 230°C的條件下，將上一步驟 得到的重組分蒸餾至輕組分不再有明顯增加時為止，將此步得到的輕組分留存，并得到重 組分；任選在進行上述三級分子蒸餾工序后，將得到的重組分作為原料按照上述步驟4)的方 法進行兩次以上重復操作，將幾次三級分子蒸餾得到的輕組分合并；步驟5)將一級、二級、三級分子蒸餾所得到的輕組分混合均勻，并加熱到10(TC左右， 充分攪拌，冷卻即得到除去蛋白質雜質后的鴉膽子油。
8.根據權利要求7所述的鴉膽子油的制備方法，其特征在于，所述方法還包括以下步 驟將第三級分子蒸餾后得到的重組分產物進行萃取或冷卻后過濾，將上述萃取后的油層 或過濾后的濾液與一級、二級、三級分子蒸餾所得到的輕組分混合均勻，并加熱到100°C左 右，充分攪拌，冷卻即得；優選萃取時采用乙醇，特別優選95%乙醇進行萃取。
9.根據權利要求3或4所述的鴉膽子油的制備方法，其特征在于，其中所述超濾法包括以下步驟使用無機陶瓷膜，截留相對分子量為1萬以上的物質，得到的超濾透過液即為去 除蛋白質的鴉膽子油，優選在40 50°C、超濾壓力為0. 15 0. 3MPa下超濾濃縮。
10.根據權利要求3、5-9任意一項權利要求所述制備方法制備得到的鴉膽子油。
11.一種藥物組合物，其特征在于包含權利要求1-2，10中任一項權利要求所述的鴉膽 子油，優選所述藥物組合物為鴉膽子油乳注射液或鴉膽子油口服乳液。
12.根據權利要求11所述的藥物組合物，其中所述鴉膽子油乳注射液或鴉膽子油口服 乳液包括鴉膽子油、乳化劑，任選含有等張調節劑、穩定劑和PH調節劑。
13.根據權利要求12所述藥物組合物，其中在IOOml鴉膽子油乳注射液或鴉膽子油 口服乳液中含以下用量配比的組分鴉膽子油5 50ml、乳化劑0. 1 50g、等張調節劑 0. 01 20g、穩定劑0 50g、pH調節劑0 IOgo
14.根據權利要求12或13所述藥物組合物，其中乳化劑可選自大豆磷脂、大豆卵磷脂、 蛋黃卵磷脂、泊洛沙姆、乙酸單甘油酯、聚山梨酯、聚氧乙烯蓖麻油，或兩種以上物質的任意 組合；和/或所述等張調節劑可選自甘油、丙二醇、乙二醇、聚乙二醇、山梨醇、甘露醇、木糖 醇，或兩種以上物質的任意組合。
15.一種制備權利要求11-14所述藥物組合物的制備方法，其特征在于所述制備方法 包括以下步驟將乳化劑加熱分散后，再加入預熱的鴉膽子油乳化，得到鴉膽子油與乳化劑 的混合物。
16.根據權利要求15所述的制備方法還包括以下步驟取水或含等張劑的水溶液加 熱，加入至鴉膽子油與乳化劑的混合物中，乳化成初乳，用勻質機乳化，過濾，任選在制備過 程加入穩定劑和/或PH調節劑。
17.根據權利要求16所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，具體步驟如下(1)將乳化劑放入高剪切乳化罐中，加入約3 20倍量的水(40°C 90°C)剪切分散 10 120分鐘；(2)將鴉膽子油加熱至50°C 100°C；(3)取注射用水或按1:0. 5 5的比例混合攪拌均勻的等張劑與注射用水，加熱至 50 °C 100°C ；(4)將預熱至50°C 100°C后的鴉膽子油緩慢加入到乳化劑溶液中剪切乳化10 120 分鐘，然后加入步驟(3)的溶液繼續乳化10 120分鐘制成初乳；(5)向初乳中加入穩定劑、pH調節劑，調整pH值至4.0 6. 0，逐漸加入70°C以上注射 用水至全量，剪切乳化10 120分鐘；(6)將全量藥液用勻質機乳化2 6次，壓力控制在20.0 90. OMPa,得到均勻乳化液， 經5 μ m孔徑濾芯過濾。
18.根據權利要求17所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，具體步驟如下步驟(1)加入注射用水的量為8 10倍，注射用水的溫度為50°C，剪切乳化時間為20分鐘；步驟(2)中鴉膽子油加熱至80°C ；步驟(3)中等張劑與注射用水按1 :1的比例混合，加熱至80°C ；步驟(4)中剪切乳化的時間為10 120分鐘，優選20分鐘；加入步驟(3)的溶液繼續 乳化時間為30分鐘；步驟(5)中剪切乳化時間為30分鐘步驟(6)中用勻質機乳化3次；壓力控制在40MPa。
全文摘要
本發明涉及一種鴉膽子油及其藥物組合物，以及它們的制備方法，其中本發明的鴉膽子油是通過除蛋白質工藝從鴉膽子脂肪油中降低蛋白質的含量獲得的，獲得的鴉膽子油穩定性好，無過敏反應等副作用，其臨床用藥安全有效。本發明還涉及以上述鴉膽子油為主要成分、安全有效的脂肪油乳劑及其制備方法。
文檔編號A61P31/04GK102133245SQ20111006261
公開日2011年7月27日 申請日期2011年3月16日 優先權日2011年3月16日
發明者張海茹, 徐勇猛, 李薇, 潘旭, 薛秀生 申請人:沈陽藥大藥業有限責任公司