專利名稱：一種中藥組合物中橙皮苷的含量測定方法
技術領域：
本發明涉及到一種中藥組合物中橙皮苷的含量測定方法，特別地，涉及一種中藥組合物中橙皮苷含量的高效液相色譜法外標法測定的方法。
背景技術：
由于中藥組合物成份復雜，因此，不同中藥組合物難以采用相同的方法測定，不同的中藥組合物需要根據其組合物特點建立其特有的檢測方法，且需要嚴格的方法學研究，才可以用于控制該中藥組合物的含量測定。
發明內容
本發明的目的是提供一種中藥組合物中橙皮苷的含量測定方法，該中藥組合物由 如下重量份的原料藥制成酸棗仁300-500、桑椹300-500、菊花100-160、茯苓50-80、山楂100-160、百合50-80、陳皮50-80、荷葉50-80、靈芝100-160，該方法采用高效液相色譜法外標法測定，測定條件如下
色譜條件色譜柱Waters Symmetryshield RP18色譜柱；檢測波長283nm ;流動相為乙腈-O. 1%磷酸溶液，室溫體積比為10-20:90-80，流速為l.Oml/min ；
供試品溶液的制備方法取所述中藥組合物制劑或制劑內容物I. 5g，精密稱定，精密加入25ml甲醇，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，濾過，精密吸取續濾液10ml，蒸干，殘渣加水IOml使溶解，上聚酰胺柱，先加水IOml洗脫，棄去，再用50ml 30%甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加50%的甲醇溶解并轉移至25ml的容量瓶中，加50%的甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，即得；
對照品溶液的制備方法精密稱取橙皮苷對照品適量，加50%甲醇制成每Iml含27 μ g的溶液，搖勻，即得；
分別精密吸取對照品溶液15 μ I與供試品溶液20 μ 1，注入高效液相色譜儀，測定，即得。本發明中藥組合物中橙皮苷的含量測定方法中所使用的色譜柱規格優選為4. 6 X 150mm、填料粒徑優選為5 μ m,流動相優選為乙腈-O. 1%磷酸溶液，室溫體積比優選為18:82，理論板數以橙皮苷峰計不低于2000 ;供試品溶液的制備方法中所述聚酰胺柱填料粒徑優選為100-200目，內徑優選為I. Ocm，填料重量優選為I. 5g，所述微孔濾膜規格優選為 O. 45 μ m。本發明提供的中藥組合物中的橙皮苷的含量測定方法，其目的是作為該中藥組合物的質量控制方法，為更好實現發明目的，本發明中的中藥組合物進一步優選為如下重量份的原料藥制成
酸棗仁375、桑椹375、菊花125、茯苓62. 5、山楂125、百合62. 5、陳皮62. 5、荷葉62. 5、靈芝125。該中藥組合物還優選為由如下重量份的原料藥制成酸棗仁300、桑椹500、菊花100、茯苓80、山楂100、百合80、陳皮50、荷葉80、靈芝100。該中藥組合物還優選為由如下重量份的原料藥制成
酸棗仁500、桑椹300、菊花160、茯苓50、山楂160、百合50、陳皮80、荷葉50、靈芝160。該中藥組合物還優選為由如下重量份的原料藥制成
酸棗仁375、桑椹500、菊花125、茯苓80、山楂125、百合80、陳皮62. 5、荷葉80、靈芝
125。該中藥組合物還優選為由如下重量份的原料藥制成酸棗仁300、桑椹375、菊花100、茯苓62. 5、山楂100、百合62. 5、陳皮50、荷葉62. 5、靈芝 100。該中藥組合物還優選為由如下重量份的原料藥制成
酸棗仁400、桑椹400、菊花130、茯苓65、山楂130、百合65、陳皮65、荷葉65、靈芝130。本發明的橙皮苷含量測定方法適用于上述中藥組合物制成的各種制劑劑型，進一步優選為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液、散劑或丸劑。本發明方法測定橙皮苷的含量從多個方面評價該方法的可行性，評價方法如下
I、儀器與試藥
儀器=Agilent 1100高效液相色譜儀；METTLER TOLEDO AT201分析天平；試藥本發明顆粒劑(石家莊以嶺藥業股份有限公司，批號030201，030202，030203 ;按照實施例2的制備方法制備);橙皮苷對照品(批號110721-200211);乙腈(Fisher，色譜純)；其他試劑均為分析純。2、檢測波長的選擇對橙皮苷對照品進行光譜檢測，光譜圖上可見，在283nm、328nm處均有最大吸收，但在283nm處吸收較大，所以選擇283nm為本樣品的檢測波長。3、專屬性實驗按處方比例取陳皮以外的其它原料藥材，依照制備工藝制得陰性樣品，按供試品溶液制備法操作，即得陰性對照液，吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性樣品溶液，進樣，測定，結果陰性樣品不干擾橙皮苷的測定。空白試驗見圖I。4、標準曲線精密吸取不同濃度的對照品溶液，注入高效液相色譜儀，以峰面積積分值為縱坐標(Y)，進樣量為橫坐標(X)，繪制標準曲線。得回歸方程Y=1. 69832177Χ-1. 7400625，r=l. 00000，表明橙皮苷進樣量在136. 32-2453. 76ng范圍內具有良好的線性關系。5、精密度試驗吸取對照品溶液，在上述色譜條件下連續進樣5次，測定峰面積，結果對照品峰面積的RSD為O. 14%，說明儀器性能良好。6、穩定性試驗吸取供試品溶液，于O，2，6，12，24h進樣，測定峰面積，結果供試品峰面積的RSD為O. 37%，說明24h內供試品溶液穩定。7、重復性試驗取同一批樣品，分別取高中低三個樣品量，每個樣品量3份，按供試品的制備方法制備，測定，結果樣品的含量(mg/g)平均值為O. 9224，RSD為O. 62%，說明方法精密度良好。8、回收率試驗采用加樣回收試驗，取同一批樣品9份，分三組，分別加入高、中、低3種量的橙皮苷對照品溶液，按供試品的制備方法處理后，依法測定，計算回收率，結果見表I。結果橙皮苷的平均回收率為96. 69%，RSD為I. 10% (n=9)，說明方法的準確度良好。表I回收率試驗結果
權利要求
1.一種中藥組合物中橙皮苷的含量測定方法，該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成酸棗仁300-500、桑椹300-500、菊花100-160、茯苓50-80、山楂100-160、百合50-80、陳皮50-80、荷葉50-80、靈芝100-160，其特征在于，該方法采用高效液相色譜法外標法測定，測定條件如下 色譜條件色譜柱Waters Symmetryshield RP18色譜柱；檢測波長283nm ;流動相為乙腈-0. 1%磷酸溶液，室溫體積比為10-20:90-80，流速為l.Oml/min ； 供試品溶液的制備方法取所述中藥組合物制劑或制劑內容物I. 5g，精密稱定，精密加入25ml甲醇，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，濾過，精密吸取續濾液10ml，蒸干，殘渣加水IOml使溶解，上聚酰胺柱，先加水IOml洗脫，棄去，再用50ml 30%甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加50%的甲醇溶解并轉移至25ml的容量瓶中，加50%的甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，即得； 對照品溶液的制備方法精密稱取橙皮苷對照品適量，加50%甲醇制成每Iml含27 ii g的溶液，搖勻，即得； 測定法分別精密吸取對照品溶液15 Ul與供試品溶液20 iil，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
2.如權利要求I所述的橙皮苷的含量測定方法，其特征在于，色譜條件為色譜柱為規格為4. 6 X 150mm、填料粒徑為5 u m,流動相為乙腈-0. 1%磷酸溶液，室溫體積比為18:82，理論板數以橙皮苷峰計不低于2000 ;供試品溶液的制備方法中所述聚酰胺柱填料粒徑為100-200目，填料重量I. 5g，內徑為I. Ocm，所述微孔濾膜規格為0. 45 u m。
3.如權利要求I或2所述的橙皮苷的含量測定方法，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁375、桑椹375、菊花125、茯苓62. 5、山楂125、百合62. 5、陳皮62. 5、荷葉62. 5、靈芝125。
4.如權利要求I或2所述的橙皮苷的含量測定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁300、桑椹500、菊花100、茯苓80、山楂100、百合80、陳皮50、荷葉80、靈芝100。
5.如權利要求I或2所述的橙皮苷的含量測定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁500、桑椹300、菊花160、茯苓50、山楂160、百合50、陳皮80、荷葉50、靈芝160。
6.如權利要求I或2所述的橙皮苷的含量測定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁375、桑椹500、菊花125、茯苓80、山楂125、百合80、陳皮62. 5、荷葉80、靈芝125。
7.如權利要求I或2所述的橙皮苷的含量測定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁300、桑椹375、菊花100、茯苓62. 5、山楂100、百合62. 5、陳皮50、荷葉62. 5、靈芝 100。
8.如權利要求I或2所述的橙皮苷的含量測定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成酸棗仁400、桑椹400、菊花130、茯苓65、山楂130、百合65、陳皮65、荷葉65、靈芝130。
9.如權利要求I或2所述的橙皮苷的含量測定方法，其特征在于所述中藥組合物制劑劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液、散劑或丸劑。
全文摘要
本發明提供了一種中藥組合物中橙皮苷含量測定的方法，本發明中藥組合物由酸棗仁、陳皮、茯苓、桑椹、菊花等9味中藥組成，本發明方法采用高效液相色譜法測定其中橙皮苷的含量，符合藥物制劑質量控制的要求，可有效控制該中藥組合物中橙皮苷的含量。
文檔編號A61K36/8967GK102670951SQ20111006222
公開日2012年9月19日 申請日期2011年3月16日 優先權日2011年3月16日
發明者張永峰, 李正杰, 楊麗榮, 楊雷, 柏艷柳, 許紅輝 申請人:河北以嶺醫藥研究院有限公司