專利名稱:一種抗疲勞中藥組合物及其制備方法
技術領域:
本發明屬于中藥領域,主要提供一種由人參、茯苓、石菖蒲、遠志組成的具有明顯的抗疲勞作用的中藥組合物,以及由人參、茯苓、石菖蒲、遠志經提取、濃縮、精制得到各藥物活性成分,即人參皂苷、茯苓多糖、石菖蒲揮發性成分/非揮發性成分、遠志皂苷或/和寡糖酯組成的組合物。具體涉及它們在治療各種原因引起的疲勞癥狀的應用及其制備抗疲勞產品的應用。該組合物通過抑制力竭運動所致的中樞5-HT升高來恢復中樞興奮性與抑制性的平衡,從而達到抗運動性疲勞效應,尤其是能更好的改善運動性疲勞下中樞保護性抑制的狀態.
背景技術:
隨著近年來社會競爭的激烈和生活節奏的加快,疲勞已成為21世紀人類健康最大的隱患,是人們的日常生活和工作受到嚴重影響。疲勞,是指由于身體與精神狀態的下降而導致的周身疲軟、困乏與神疲力竭之感,是機體復雜的生理生化變化的綜合反應,可導致機體神經、內分泌、免疫諸系統調節失常,在祖國醫學中屬于氣虛、虛損、勞倦的范疇。人參具有改善微循環、提高組織抗缺氧能力、抗疲勞、抗腫瘤、抗衰老、抗福射、等多種生物活性。遠志富含皂苷類、寡糖酯類等化合物,具有益智、鎮靜催眠、抗抑郁、抗氧化衰老、抑菌抗炎等多方面的生物活性。茯苓主要化學成分為多糖和三萜類成分,具有抑制腫瘤、抗炎、調節免疫等作用。石菖蒲性味辛苦溫,入心、胃經,具芳香之氣,行散之力較強,為宣氣通竅之佳品,功能豁痰開竅、化濕和胃、醒神益智,是芳香寧神,滌痰開竅之要藥。綜上,該組方能增強機體免疫功能,提高機體的適應能力,由此可推測其具有抗疲勞活性。
發明內容
本發明首次公開了人參、茯苓、石菖蒲、遠志的組合物及其活性成分組合用于治療西醫范疇的以疲勞癥狀為主的疾病和中醫范疇的懈怠性疾病。該抗疲勞藥物的制備方法為人參切片,用60%乙醇5-10倍量,加熱回流提取3次,每次O. 5-2h,合并提取液,濾過,濾液回收乙醇,備用;人參藥渣備用;石菖蒲加水6-10倍,提取揮發油6-10h,揮發油備用;石菖蒲藥渣及水液、人參藥渣、茯苓、遠志共煎,加水量8-10倍,提取2次,每次O. 5-2h,合并藥液,濃縮至相對密度為I. 10 I. 15(50°C測),加乙醇使藥液含醇量達50%,冷藏(5 10°C)過夜,濾過。回收乙醇,加入人參提取液,濃縮至相對密度為I. 32 I. 35(50°C測),減壓干燥得藥粉。使用時按比例將揮發油和藥粉配制成藥液。可以按照常規的制劑工藝,將人參、茯苓、石菖蒲、遠志藥材或提取物粉碎后加入常規的賦性劑、調味劑、崩解劑、防腐劑、潤滑劑、濕潤劑、粘合劑、溶劑、增稠劑、增溶劑等藥物輔料,制成任何一種適合于臨床上使用的口服劑型,如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液體制劑
坐寸ο可以將人參、茯苓、石菖蒲、遠志經提取、濃縮、精制得到各藥物活性成分,即人參皂苷、茯苓多糖、石菖蒲揮發性成分、非揮發性成分、遠志皂苷或/和多糖組成組合物后制成上述任一種劑型。
圖I中藥組方對運動性疲勞小鼠力竭運動電擊次數的影響,與安靜對照組比較/P
<O. 05與溶劑對照組比較,*P < O. 05,**P < O. 01.圖2中藥組方對運動性疲勞小鼠中樞5-HT含量的影響,與溶劑對照組比較,*P
<O. 05,**P < O. 01 ;與安靜對照組比較,flP < O. 05圖3中藥組方對大鼠跑臺力竭時間的影響,與模型組比較, < O. 05廣P < O. 01.
具體實施例方式下面將通過具體的實例對本發明作進一步說明實施例I中藥組方抗疲勞和耐缺氧作用研究一、摘要在一個抗疲勞模型和一個耐缺氧模型上,中藥組方顯示明確的抗疲勞和耐缺氧作用。在小鼠轉輪疲勞模型上,中藥組方連續4周灌胃給藥,其抗疲勞有效劑量均為500mg/kg和1000mg/kg。在小鼠耐缺氧模型,中藥組方連續一周灌胃,中藥組方500mg/kg、1000mg/kg劑量組可顯著延長小鼠耐缺氧存活時間,說明中藥組方具有抗疲勞和耐缺氧活性。二、試驗目的中藥組方是中藥復方,本試驗在行為學模型與生化指標檢測相結合的基礎上上評價其抗疲勞和耐缺氧活性。三、受試藥物名稱中藥組方干粉(解放軍301醫院提取);藏域紅景天膠囊(西藏央科生物科技有限公司);莫達非尼(由解放軍軍事科學院惠贈)。四、動物昆明種小鼠,SD大鼠,二級動物(解放軍總醫院實驗動物中心提供,許可證號SCXK-(軍)2007-004。五、數據統計處理試驗結果采用相應的統計學方法處理,兩組間均數比較用t檢驗。六、試驗方法I.小鼠耐缺氧試驗雄性KM小鼠50只,18 22g,隨機分為正常組、中藥組方大、中、小劑量組和紅景天組。中藥組方劑量分別按1000mg/kg、500mg/kg、250mg/kg灌胃給藥,陽性藥物組為紅景天膠囊,按180mg/kg灌胃給藥。正常組灌胃等量生理鹽水。連續灌胃6天。第7天灌胃2小時后,將各鼠分別置于裝有7. 5g鈉石灰的125ml廣口瓶中,并用凡士林涂抹瓶口隔絕空氣。記錄各鼠死亡時間。2.小鼠抗疲勞試驗
動物分組動物分組雄性KM小鼠84只,18 22g,隨機分為正常組、中藥組方大、中、小劑量組、紅景天組、莫達非尼組和安靜對照組。中藥組方劑量分別按1000mg/kg、500mg/kg、250mg/kg灌胃給藥,紅景天膠囊按180mg/kg、莫達非尼按13mg/kg灌胃給藥,正常組和安靜對照組灌胃等量蒸餾水。每天灌胃Ih后,除去安靜對照組,將各鼠在轉輪式疲勞儀上訓練,持續4周,每周5天,休息2天,每周的轉速分別為10m/min、12m/min、13m/min及15m/min,運動時間分別為30min、30min、60min及60min.。4周后進行17m/min時間為60min的力竭運動(安靜對照組除外),記錄各鼠力竭運動電擊次數,力竭運動后迅速將各鼠取血、全腦、肝臟、大腿內側肌肉待做試劑盒。小鼠處死后,立即將其浸入75%的酒精中持續I分鐘,之后立即在無菌條件下取出脾臟,在4°CHank’ s液的平皿中清洗一遍,后在200目不銹鋼絲網上用注射器針芯碾碎組織使單個細胞透過絲網進入Hank’ s液里,IOOOrpm離心5min,棄上清,再加5ml含5%NH4Cl的Tris · HCl中,靜置IOmin使紅細胞破裂,再次IOOOrpm離心IOmin,棄上清,加入含10 %胎牛血清的RPMI 1640培養液中,使細胞密度達2*106/L,分為正常組和ConA刺激組。取96孔培養板,正常的各組每孔加90 μ L皮細胞懸液,10 μ L空白培養基,每組8個復 孔。ConA刺激的各組每孔加90ul脾細胞懸液;ConA (使終濃度為10 μ g/mL) 10 μ L,每組8個復孔。置37°C,5% C02培養箱中培養72h。MTT法檢測脾細胞增殖取培養72h的脾細胞,每孔加入20 μ L MTT,繼續孵育4h,小心吸棄上清后加入DMSO 150 μ L,37°C振蕩30min,于570nm處測OD值。采用雙抗體夾心ELISA法測定細胞上清液中IL-2和IL-4含量,實驗結果在酶標儀450nm處讀OD值。3.大鼠抗疲勞試驗動物分組雄性SD大鼠42只,180 220g,隨機分為正常組、中藥組方大、中、小劑量組、紅景天組、莫達非尼組和安靜對照組,每組6只。中藥組方劑量分別按1000mg/kg、500mg/kg、250mg/kg灌胃給藥,紅景天膠囊按180mg/kg、莫達非尼按13mg/kg灌胃給藥,溶劑對照組和安靜對照組灌胃等量蒸餾水。每天灌胃Ih后,將各鼠在大鼠跑臺上訓練,持續5周,每周6天。除安靜對照組外,對各組大鼠于跑臺上每天訓練20min,每周6天,坡度為0,跑速每周遞增,依次為15,22,25,31,35m/min,共5周.隨后進行進行坡度為O,速度為35m/min的跑臺訓練,直至力竭。力竭判斷標準為動物跟不上預定跑速,臀部后坐于跑臺后壁,后肢隨轉動皮帶托達30s之久,聲光電以及毛刷刺激無效、呼吸急促、神情疲倦、俯臥垂頭,對刺激沒有反應。最力竭運動后對所有實驗大鼠眼眶取血、全腦,待做試劑盒。七、試驗結果I.小鼠耐缺氧試驗中藥組方連續灌胃7天后,中藥組方在500mg/kg和1000mg/kg劑量,存活時間明顯延長(P < 0. 01),見表I。其中1000mg/kg劑量組能升高缺氧小鼠腦組織SOD活力,降低MDA濃度。本試驗說明中藥組方在此模型上有明顯的耐缺氧活性。表I 中藥組方對小鼠常壓耐缺氧存活時間及腦組織SOD活力、MDA濃度的影響(x±s, η = 10)
權利要求
1.一種中藥組合物在制備抗疲勞的藥物中的應用,其中藥組合物是由人參、茯苓、石菖蒲、遠志配比為3-9 3-6 2-10 2-8制成。
2.根據權利要求I和權利要求2所述的中藥組合物,是指人參、茯苓、石菖蒲、遠志經提取、濃縮、精制得到各藥物活性成分,即人參皂苷、茯苓多糖、石菖蒲揮發性成分/非揮發性成分、遠志皂苷或/和寡糖酯組成的組合物。
3.一種具有抗疲勞藥物的制備方法,其特征在于人參切片,用60%乙醇5-10倍量,加熱回流提取3次,每次O. 5-2h,合并提取液,濾過,濾液回收乙醇,備用;人參藥渣備用;石菖蒲份加水6-10倍,提取揮發油6-10h,揮發油備用;石菖蒲藥渣及水液、人參藥渣、茯苓、遠志共煎,加水量8-10倍,提取2次,每次O. 5-2h,合并藥液,濃縮至相對密度為I. 10 I.15 (50°C測),加乙醇使藥液含醇量達50%,冷藏(5 10°C)過夜,濾過。回收乙醇,加入人參提取液,濃縮至相對密度為I. 32 I. 35(50°C測),減壓干燥得藥粉。使用時按比例將揮發油和藥粉配制成藥液。
4.根據權利要求I和權利要求2所述的中藥組合物,是指加入常規的賦性劑、調味劑、崩解劑、防腐劑、潤滑劑、濕潤劑、粘合劑、溶劑、增稠劑、增溶劑等藥物輔料,制成任何一種適合于臨床上使用的劑型,如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液體制劑、注射劑等。
5.根據權利要求I所述的應用,其中所指的疲勞癥狀是指由于各種原因引起的疲勞癥狀(包括外周疲勞、中樞疲勞和中醫范疇的懈怠性疾病)。
全文摘要
本發明涉及一種對疲勞癥狀有顯著治療作用的中藥組合物的新用途和制備方法。該藥物制劑是由人參、茯苓、遠志和石菖蒲仁按一定比例混合,或經提取活性部位(即人參皂苷、茯苓多糖、石菖蒲揮發性成分/非揮發性成分、遠志皂苷或/和寡糖酯)后的組合物,可制備成各種劑型。本品適用于各種原因導致的疲勞癥狀,其機理在于本品能通過對中樞神經遞質的調節以及對免疫系統的增強來恢復中樞興奮性與抑制性的平衡,從而達到抗運動性疲勞效應,以及改善中樞性疲勞狀態。
文檔編號A61K36/888GK102631503SQ20111003644
公開日2012年8月15日 申請日期2011年2月12日 優先權日2011年2月12日
發明者劉屏, 曹寅, 穆麗華, 胡園 申請人:中國人民解放軍總醫院