專利名稱：胚胎運輸方法及運輸裝置的制作方法
胚胎運輸方法及運輸裝置本發明涉及胚胎移植技術領域，尤其涉及一種應用于胚胎移植過程中的胚胎運輸方法及運輸裝置。胚胎移植又可以稱之為受精卵移植技術，主要是指將通過各種技術得到的胚胎 (自然胚胎或者體外受精胚胎或者克隆胚胎)，經過手術，將其移植到同種的受體雌性動物體內，后期發育并能得到后代的新技術。世界上第一例胚胎移植是由英國人W·希普于1890 年完成的，胚胎移植技術由此創始。自從胚胎移植技術應用于畜牧業以來，給其帶來了豐厚客觀的效益，例如，在短時間內擴大了優良種畜群，方便引進國外優良品種資源等。1997年Dolly的誕生證實了體細胞核移植的可能性，同時也為轉基因動物的生產提供一種高效的路徑，即是通過轉基因與核移植技術相結合來生產動物，大大的提高了轉基因動物的陽性率，通過該技術順利的得到轉基因山羊、綿羊、豬、牛、小鼠等動物。無論是得到體外受精胚胎還是體細胞克隆胚胎，無論是在轉基因課題，還是克隆技術中，胚胎移植是其一整套流程中不可或缺的一步，胚胎移植的成否對課題的進行有著直接的影響。胚胎的生產主要在實驗室內進行，而一般的胚胎移植操作主要在養殖場內。由于運輸和疾病預防的需要，養殖場一般選址都是在遠離市區，郊區，個別的甚至在山區里， 從實驗室到養殖場有很長的一段路程。因此當胚胎生產后到移植前，需要一段時間的臨時輸送和保存。因此選擇合適理想的胚胎輸送方法及其裝置，對于胚胎移植后，胚胎在受體動物體內的發育以及妊娠率有著至關重要的作用，進而影響著整個課題項目的順利開展。實驗室常規使用的是一種日本公司生產的細胞培養輸送器，該設備能夠調節恒溫，且設置了防震設施，可以防止運輸過程中劇烈的震蕩對胚胎造成的傷害。但是，該細胞培養輸送器的結構復雜，價格也不菲。本發明要解決的技術問題是提供一種在胚胎移植過程中模擬胚胎所在母體環境的胚胎運輸方法。本發明要解決的另外一個技術問題是提供一種可模擬胚胎所在母體環境且取材容易、操作簡便的胚胎運輸裝置。對于胚胎運輸方法來說，本發明采用的技術方案是其包括以下步驟1)胚胎的裝管首先將麥管提前紫外照射滅菌，裝胚胎前用已經熱平衡的胚胎培養液(PZiO)潤洗麥管兩遍，其次吸取胚胎培養液，做兩個氣段，每段液體0. 5cm左右， 第三段液體吸取裝有胚胎的胚胎培養液，該段液體要多一些，并與前后的氣段留有足夠長的具體，保證胚胎在運輸中有足夠的營養和氣體供給，然后再做第四，五兩個氣段，每段約 0. 5cm，最后用鑷子在酒精燈上加熱后將麥管端口封口 ；
2)先將保溫容器干燥，并用紫外照射消毒，將熱水與冷的自來水勾兌后倒入保溫容器內，用電子溫度計測量保溫容器內的水溫為38. 5°C 士0. 2V ；3)放置胚胎將裝有胚胎的麥管插于浮漂中，一并置于保溫容器的溫水中，使得浮漂上的麥管保持直立狀態，立即合上保溫容器蓋子，交至運輸人員；4)胚胎運輸將保溫容器置于車內或者由坐在車上的運輸人員持于手中，運輸時車內要避免劇烈的震蕩，護送至胚胎移植地點；5)胚胎釋放和移植到達移植目的地，待受體動物準備妥當并已經找到輸卵管位置，將保溫容器的蓋子打開，將裝載胚胎的麥管取出，拭去麥管周身的水；準備一無菌的培養皿，在體式顯微鏡下剪開麥管封口段，將胚胎釋放至培養皿內；最后用胚胎移植管收集胚胎，交至胚胎移植人員完成胚胎移植工作。對于胚胎運輸裝置來說，本發明采用的技術方案是一種胚胎運輸裝置，應用于胚胎移植過程，包括保溫容器、麥管和浮漂，保溫容器具有抽真空夾層結構，容器內存有適量的溫水，浮漂以漂浮狀態置于在溫水中，將裝載胚胎的麥管豎向插在浮漂中，通過水中的浮漂保持麥管為直立狀態。作為優選，所述的保溫容器為真空保溫杯。作為優選，所述的浮漂直徑小于保溫杯的口徑。作為優選，所述的浮漂用聚苯乙烯泡沫板塊或其他比重較輕且不吸水的輕質材料制做。本發明的有益效果是，使用保溫容器為運載工具，利用溫水承載浮漂，使得容器內所裝載的胚胎處在一種溫度均勻適當，并有輕微震蕩的模仿母體的環境中，能夠在運輸途中能夠保持胚胎的活力，有利于胚胎的發育，不失為胚胎移植過程中的胚胎運輸的一種取材容易、操作方便的運輸方法和裝置。下面結合附圖和具體實施方式
對本發明作進一步詳細的說明。
圖1是本發明胚胎運輸裝置實施例的示意圖。圖1中，1-杯蓋，2-杯體，3-浮漂，4-麥管，5-溫水。一、所用設備的組成1)電子溫度計型號為Tp3001，鄭州海洋儀器儀表有限公司制造，工作電壓0. 5ν, 溫度的解析度為0. rc / °F，測量的準確度為0. 0°C +80°C。2)保溫杯高真空光口壺，容量為1500ml，杯口直徑為75mm，如圖1所示，該保溫杯的杯體與杯蓋均為不銹鋼抽真空夾層保溫結構，其保溫性能說明為(100°c水注入)6小時80°C，12小時72°C，24小時。本實施方式直接使用國產真空保溫杯作為運載工具， 經實際測量，經過4h左右，杯中水溫從38. 5°C僅下降了 1.6°C左右，說明其保溫效果較為理想，能夠滿足胚胎運輸的要求。3)浮漂用聚苯乙烯泡沫板制成圓盤形，上有麥管插入孔，直徑小于保溫杯的口徑。
二、步驟如下1)胚胎的裝管首先將麥管提前紫外照射使其無菌，裝胚胎前用已經熱平衡的胚胎培養液(PZiO)潤洗麥管兩遍，其次吸取胚胎培養液(PZiO)，做兩個氣段，每段液體0. 5cm 左右，第三段液體吸取裝有胚胎的胚胎培養液(PZiO)，該段液體要多一些，并與前后的氣段留有足夠長的具體，保證胚胎在運輸中有足夠的營養和氣體供給，然后再做第四，五兩個氣段，每段約0. 5cm,最后用鑷子在酒精燈上加熱后將麥管的端口封口。2)先將保溫杯的杯體2與杯蓋1干燥，并用紫外照射消毒，將飲水機或熱水瓶中的熱水與冷的自來水勾兌后倒入保溫杯的杯體2中，用電子溫度計測量杯內水溫并控制在 38. 50C 士0. 2°C范圍內。3)放置胚胎(圖1)放置胚胎將裝有胚胎的麥管4輕輕的插于浮漂3中，一并置于保溫杯的溫水5中，使得浮漂上的麥管4保持直立狀態，立即合上保溫杯的杯蓋1，交至運輸人員；所使用的浮漂3為圓盤形，其直徑略小于保溫杯的口徑，以便放置杯中，并使其漂浮在水中。4)胚胎運輸將保溫杯置于車內或者由坐在車上的運輸人員持于手中，運輸時車內打開空調，車內盡量保持恒溫，最好在25°C左右，要避免劇烈的震蕩，護送至胚胎移植地點；5)胚胎釋放和移植到達移植目的地，待受體動物準備妥當并已經找到輸卵管位置，將保溫杯打開，輕輕將麥管取出，用干凈的吸水紙將麥管周身的水拭去；準備一無菌的培養皿，體式顯微鏡下，使用一無菌剪刀或者手術剪剪開麥管封口段，將胚胎釋放至培養皿內；最后用胚胎移植管收集胚胎，交至胚胎移植人員，完成胚胎移植工作。本實施方式通過水浴作為載體，為胚胎提供一個包括適宜的溫度在內的最佳的模仿母體的環境，同時在運輸過程中，胚胎在水浴中有輕微的機械震蕩，能夠顯著提高胚胎的發育能力。為此，首先要控制好保溫杯內水浴的溫度，胚胎對溫度很敏感，較高或較低的溫度都不利于其后期的發育，最好是完全模擬母體的溫度。其次是保溫杯最好采用光口式，浮漂應為圓盤形，直徑小于瓶口，這樣利于取放胚胎，同時能夠給胚胎一個輕微的震蕩環境。最后，保溫杯內的水位不宜過高或過低，水位過高，保溫杯合蓋時會擠壓麥管，水位過低，會影響水浴溫度，使其保溫效果下降。以上雖然結合附圖描述了本發明的實施方式，但是本領域的技術人員可以在所附權利要求范圍內做出各種變形或修改。
權利要求
1.一種胚胎運輸方法，應用于胚胎移植過程，其包括以下步驟1)胚胎的裝管首先將麥管提前紫外照射使其無菌，裝胚胎前用已經熱平衡的胚胎培養液潤洗麥管兩遍，其次吸取胚胎培養液，做兩個氣段，每段液體0. 5cm左右，第三段液體吸取裝有胚胎的胚胎培養液，該段液體要多一些，并與前后的氣段留有足夠長的具體，保證胚胎在運輸中有足夠的營養和氣體供給，然后再做第四，五兩個氣段，每段約0. 5cm，最后用鑷子在酒精燈上加熱后將麥管端口封口；2)先將保溫容器干燥，并用紫外照射消毒，將熱水與冷的自來水勾兌后倒入保溫容器內，用電子溫度計測量保溫容器內的水溫為38. 5°C 士0. 2V ；3)放置胚胎將裝有胚胎的麥管插于浮漂中，一并置于保溫容器的溫水中，使得浮漂上的麥管保持直立狀態，立即合上保溫容器蓋子，交至運輸人員；4)胚胎運輸將保溫容器置于車內或者由坐在車上的運輸人員持于手中，運輸時車內要避免劇烈的震蕩，護送至胚胎移植地點；5)胚胎釋放和移植到達移植目的地，待受體動物準備妥當并已經找到輸卵管位置， 將保溫容器打開，將裝載胚胎的麥管取出，拭去麥管周身的水；準備一無菌的培養皿，在體式顯微鏡下剪開麥管封口段，將胚胎釋放至培養皿內；最后用胚胎移植管收集胚胎，交至胚胎移植人員完成胚胎移植工作。
2.一種胚胎運輸裝置，應用于胚胎移植過程，其特征在于，包括保溫容器、麥管和浮漂， 所述的保溫容器具有抽真空夾層保溫結構，容器內存有適量的溫水，浮漂以漂浮狀態置于在溫水中，將裝載胚胎的麥管豎向插在浮漂中，通過水中的浮漂保持麥管為直立狀態。
3.根據權利要求2所述的胚胎運輸裝置，其特征在于，所述的保溫容器為真空保溫杯。
4.根據權利要求3所述的胚胎運輸裝置，其特征在于，所述的浮漂直徑小于保溫杯的口徑。
5.根據權利要求2-4任何一項所述的胚胎運輸裝置，其特征在于，所述的浮漂用聚苯乙烯泡沫板塊或其他比重較輕且不吸水的輕質材料制做。
全文摘要
本發明公開了一種應用于胚胎移植過程的胚胎運輸方法及運輸裝置，使用保溫容器為運載工具，容器內存有溫水，在溫水中放置輕質浮漂，利用溫水承載浮漂，使得容器內所裝載的胚胎處在一種溫度均勻適當，并有輕微震蕩的模仿母體的環境中，能夠在運輸途中能夠保持胚胎的活力，有利于胚胎的發育，不失為胚胎移植過程中用于胚胎運輸的一種取材容易、操作方便的運輸方法和裝置。
文檔編號A61B17/435GK102172331SQ201110029889
公開日2011年9月7日 申請日期2011年1月27日 優先權日2011年1月27日
發明者丁建平, 劉亞, 劉曉蕊, 周娜汝, 季索菲, 張子軍, 張宇, 張運海, 張遠亮, 曹鴻國, 李運生, 楊盼, 桂濤, 殷宗俊, 焦明慧, 王維, 秦曉煒, 章孝榮, 章美玲, 賈晴, 陶勇, 隨劉才 申請人:安徽農業大學