藥物組合物、食品飲料以及與它們相關的方法

專利名稱：藥物組合物、食品飲料以及與它們相關的方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物、食品飲料以及關于它們的方法。
背景技術：
目前，人們正在進行各種抗肥胖藥物的研發。例如，有報道指出脂肪酸合成酶 (FAS)的抑制劑通過降低下丘腦的神經肽Y(NPY)的產生量，引起顯著的食欲減退，從而最終達到減少體重或脂肪量的效果(例如，參照非專利文獻1)。現有技術文獻非專利文獻非專利文獻1 =Loftus, Τ. M.等 Science 288 :2379-2381 (2000)

發明內容
技術問題然而，對于將作用于腦神經系統的低分子化合物作為有效成分的抗肥胖藥物而言，會引起不良的副作用(例如，厭食癥)。因此，人們迫切期望研制出不會伴隨這種副作用(例如，厭食癥)的新的抗肥胖藥物。本發明是鑒于上述技術問題而提出的，目的之一在于提供新型藥物組合物、食品飲料以及與它們相關的方法。技術方案為了解決上述問題的本發明的一種實施方式所涉及的藥物組合物，特征在于，作為有效成分而包含下述的(I)或(II)的蛋白質(I)巨噬細胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。根據本發明，可以提供新型藥物組合物。為了解決上述問題的本發明的一種實施方式所涉及的蛋白質，特征在于，是所述 (I)的蛋白質或者所述(II)的蛋白質，且作為藥物組合物的有效成分使用。根據本發明，可以提供用于新的藥物用途的蛋白質。為了解決上述問題的本發明的一種實施方式所涉及的方法，特征在于，制備所述藥物組合物。根據本發明，可以提供制備新型藥物組合物的方法。為了解決上述問題的本發明的一種實施方式所涉及的方法，特征在于，向生物機體給予所述藥物組合物。根據本發明，可以提供向生物機體給予新型藥物組合物的方法。為了解決上述問題的本發明的一種實施方式所涉及的食品飲料，特征在于，包含下述的(I)或(II)的蛋白質(I)巨噬細胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。根據本發明，可以提供新型食品飲料。為了解決上述問題的本發明的一種實施方式所涉及的方法，特征在于，制造所述食品飲料。根據本發明，可以提供制造新型食品飲料的方法。


圖1為將人類AIM氨基酸序列與cDNA堿基序列相對應起來而示出的說明圖。圖2為示出屬于SRCR-SF的分子的一種示例的說明圖。圖3為將人類AIM氨基酸序列、小鼠AIM氨基酸序列以及它們共有的共有序列相對應起來而示出的說明圖。圖4是示出巨噬細胞浸潤到脂肪組織而產生AIM的狀態的顯微鏡照的一種示例的說明圖。圖5A是示出對脂肪細胞的AIM處理方案的一種示例的說明圖。圖5B是示出對根據圖5A中示出的方案用AIM處理的細胞采用油紅0脂肪染色的結果的一種示例的說明圖。圖6A是示出對脂肪細胞的AIM處理方案的一種示例的說明圖。圖6B是示出對根據圖6A中示出的方案用AIM處理的細胞采用油紅0脂肪染色的結果的一種示例的說明圖。圖7A是示出根據圖6A中示出的方案用AIM處理時得到的具有脂滴的細胞的數的測定結果的一種示例的說明圖。圖7B是示出根據圖6A中示出的方案用AIM處理時得到的具有脂滴的細胞的數中的脂滴直徑的測定結果的一種示例的說明圖。圖8A是示出根據圖6A中示出的方案用AIM處理時釋放到培養上清液中的甘油的量的測定結果的一種示例的說明圖。圖8B是示出根據圖6A中示出的方案用AIM處理時釋放到培養上清液中的游離脂肪酸的量的測定結果的一種示例的說明圖。圖9是以模式化示出伴隨脂肪細胞分化的主要的基因的表達模式的說明圖。圖10是示出根據圖5A以及圖6A中示出的方案用AIM處理的細胞中的基因表達的分析結果的一種示例的說明圖。圖IlA是示出對于脂肪細胞的AIM處理方案的一種示例的說明圖。圖IlB是示出根據圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理的細胞中的FAS 酶活性的測定結果的一種示例的說明圖。圖IlC是示出根據圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理的細胞中的FAS 酶活性的測定結果的另一種示例的說明圖。圖12A是示出對根據圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理的細胞采用油紅0脂肪染色的結果的一種示例的說明圖。圖12B是示出對根據圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理的細胞中的基因表達的分析結果的一種示例的說明圖。圖13A是示出根據圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理時釋放到培養上清液中的甘油的量的測定結果的一種示例的說明圖。圖1 是示出根據圖IlA中示出的方案用AIM或FAS抑制劑處理時釋放到培養上清液中的游離脂肪酸的量的測定結果的一種示例的說明圖。圖14是示出證實添加有HA標簽的AIM和添加有FLAG標簽的FAS的結合的免疫沉淀的結果的一種示例的說明圖。圖15A是示出用AIM處理并用抗AIM抗體染色的細胞的共焦顯微鏡照的一種示例的說明圖。圖15B是示出用AIM處理并用抗AIM抗體染色的細胞的共焦顯微鏡照的另一種示例的說明圖。圖16A是示出用AIM處理的細胞的免疫電子顯微鏡照的一種示例的說明圖。圖16B是示出用AIM處理的細胞的免疫電子顯微鏡照的另一種示例的說明圖。圖17是以模式化示出AIM內吞進入細胞內的機制的說明圖。圖18A是示出將采用AIM以及⑶36雙重染色的脂肪細胞通過共焦顯微鏡以二維方式分析的結果的一種示例的說明圖。圖18B是示出將采用AIM以及⑶36雙重染色的脂肪細胞通過共焦顯微鏡以三維方式分析的結果的一種示例的說明圖。圖18C是示出將采用AIM以及⑶36雙重染色的脂肪細胞通過共焦顯微鏡以三維方式分析的結果的另一種示例的說明圖。圖18D是示出將采用AIM以及⑶36雙重染色的脂肪細胞通過共焦顯微鏡以三維方式分析的結果的又一個另一種示例的說明圖。圖19A是示出將不存在⑶36中和抗體的情況下用AIM處理的細胞用抗AIM抗體染色的結果的一種示例的說明圖。圖19B是示出將用⑶36中和抗體的同時用AIM處理的細胞用抗AIM抗體染色的結果的一種示例的說明圖。圖20A是示出拍攝AIM+ Adipo+小鼠的腹腔內脂肪組織的照片的一種示例的說明圖。圖20B是示出拍攝AIM+a Adipo+小鼠的腹腔內脂肪組織的照片的一種示例的說明圖。圖21A是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的體重的測定結果的一種示例的說明圖。圖21B是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的脂肪組織的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖22A是示出給予BSA的小鼠的脂肪組織的顯微鏡觀察結果的一種示例的說明圖。圖22B是示出給予AIM的小鼠的脂肪組織的顯微鏡觀察結果的一種示例的說明圖。圖23A是示出用HFD喂食之前的AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的體重的測定結果的一種示例的說明圖。圖2 是示出用HFD喂食之后的AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的體重的測定結果的一種示例的說明圖。圖23C是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的內臟脂肪的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖23D是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIM+/+ Adipo+小鼠的皮下脂肪的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖23E是示出AIM+ Adipo+小鼠以及AIMv+ Adipo+小鼠的肝臟的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖24A是示出用HFD喂食之前的AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的體重的測定結果的一種示例的說明圖。圖MB是示出用HFD喂食之后的AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的體重的測定結果的一種示例的說明圖。圖24C是示出AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的內臟脂肪組織的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖24D是示出AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的皮下脂肪組織的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖24E是示出AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的肝臟的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖25是示出AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠的飼料攝入量的測定結果的一種示例的說明圖。圖沈是示出AIM"+小鼠以及AIM+小鼠的脂肪細胞的大小的測定結果的一種示例的說明圖。圖27A是示出從AIM+/+小鼠采集的內臟脂肪組織切片用HE染色而在相差顯微鏡下觀察的結果的一種示例的說明圖。圖27B是示出從AIM+小鼠采集的內臟脂肪組織切片用HE染色而在相差顯微鏡下觀察的結果的一種示例的說明圖。圖28A是示出AIMv+小鼠以及AIM+小鼠的體重的測定結果的一種示例的說明圖
圖^B是示出AIM+/+小鼠以及AIM+小鼠的內臟脂肪組織的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖^C是示出AIMv+小鼠以及AIM+小鼠的皮下脂肪組織的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖^A是示出AIMv+小鼠以及AIM+小鼠的體溫的測定結果的一種示例的說明圖。圖29B是示出AIM+/+小鼠以及AIM+小鼠的耗氧速率的測定結果的一種示例的說明圖。圖29C是示出AIM+/+小鼠以及AIM+小鼠的飼料攝入量的測定結果的一種示例的說明圖。圖^D是示出AIM+/+小鼠以及AIM+小鼠的活動性的評價結果的一種示例的說明圖。圖30A是示出給予AIM或者BSA的AIM+小鼠的體重的測定結果的一種示例的說明圖。
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圖30B是示出給予AIM或者BSA的AIM+小鼠的內臟脂肪組織的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖30C是示出給予AIM或者BSA的AIM+小鼠的皮下脂肪組織的重量的測定結果的一種示例的說明圖。圖31是示出給予AIM或者BSA的AIM+小鼠的mRNA水平的評價結果的一種示例的說明圖。圖32是示出確認體內(in vivo)的AIM和FAS結合的結果的一種示例的說明圖。圖33A是示出確認體外(in vitro)的AIM和FAS結合的結果的一種示例的說明圖。圖3 是示出確認體外(in vitro)的AIM和FAS結合的結果的另一種示例的說明圖。圖34A是示出二聚化的FAS以及各區域的主要功能的說明圖。圖34B是示出將FAS各區域用Flag序列標記，并通過共沉淀試驗研究該各區域與用HA標記的AIM的結合的結果的一種示例的說明圖。圖35A是示出向野生型⑶36v+小鼠從靜脈注射rAIM，分析向脂肪組織的rAIM的內吞的結果的一種示例的說明圖。圖35B是示出向⑶36+小鼠從靜脈注射rAIM，分析向脂肪組織的rAIM的內吞的結果的一種示例的說明圖。圖36A是示出在相差顯微鏡下觀察分化刺激前的HMSC的結果的一種示例的說明圖。圖36B是示出在相差顯微鏡下觀察rhAIM不存在下被分化刺激后的HMSC的結果的一種示例的說明圖。圖36C是示出在相差顯微鏡下觀察rhAIM存在下被分化刺激后的HMSC的結果的一種示例的說明圖。圖37是示出HMSC中的Glut_4的mRNA水平的評價結果的一種示例的說明圖。圖38是示出采用抗小鼠AIM抗體對狗血清以及貓血清進行免疫印跡試驗的結果的一種示例的說明圖。
具體實施例方式以下，說明本發明的一種實施方式。需要說明的是，本發明不受本實施方式的任何限制。首先，對于作為與本發明相關的蛋白質的巨噬細胞凋亡抑制因子(Apoptosis Inhibitor of Macrophage，以下稱為 “AIM，，。)，進行說明。AIM在其氨基酸序列中存在保守的三個SRCR (Scavenger Receptor Cysteine-Rich)結構域(從N末端依次稱為SRCR1、SRCR2、SRCR3。)，是具有由該三個SRCR 結構域串聯的分子結構的分泌蛋白。本發明的發明人研究團隊通過克隆小鼠基因，構建基因敲除小鼠，并基于分析結果，首次發表了由巨噬細胞特異性產生的、作為具有抑制巨噬細胞的凋亡的功能的分泌蛋白的小鼠 AIM(文獻 1 :Miyazaki, Τ.等 Increased susceptibility of thymocytesto apoptosis in mice lacking AIM， a novel murine macrophage-derived soluble factor belonging to the scavenger receptor cysteine-rich domain superfamily. J Exp Med. 189 :413-422,1999. ；XM 2 :Haruta, I. ，Kato, Y. ，Hashimoto, Ε. ，Minjares, C.，Kennedy, S.，Uto, H.，Yamauchi, K.，Kobayashi, Μ.，Yusa, S.，Muller, U.，Hayashi, N. & Miyazaki, T.Association of AIM，a novel apoptosis inhibitory factor，with hepatitis via supporting macrophage survival and enhancing phagocytotic function of macrophages. J. Biol. Chem. 276 :22910-22914 (2001).)。另一方面，其他研究團隊發表過人類基因序列的“Sp ci ” (Secretion protein α) (文獻3 :Gebe，J. Α·等Molecular cloning，mapping to human chromosome 1 q21_q23，and cell binding characteristics of Spalpha,a new member of the scavenger receptor cysteine-rich (SRCR) family of proteins. J Biol Chem. 272 :6151_6158，1997.)。并且， 此后作為基因組測序工程的一環，將該基因命名為“Api6”。而且，由于具有三個SRCR結構域的結構與CD5的細胞外結構域相似，因此又將該基因命名為“CD5L”。并且，最近提出將這些名稱統一為“CD5L”。但是，從分子名稱應當反映其功能的觀點考慮，將這些蛋白質名稱均統一為“AIM”，應該更為恰當。小鼠AIM是由示出在序列表5中的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，人類AIM是由示出在序列表1中的氨基酸序列構成的蛋白質。在此，圖1是將人類AIM氨基酸序列(序列表1中示出的氨基酸序列)與cDNA堿基序列(序列表9中示出的堿基序列)相對應起來而示出的。接著，對AIM分子的特征進行說明。小鼠AIM原本是作為清道夫受體富含半胱氨酸殘基超家族 Gcavenger-Rec印tor Cysteine-Rich Super-Family，SRCR-SF)的新組成員而發現的，是具有MkDa分子量的分子。圖2中示出屬于該SRCR-SF的分子的一種示例。如圖2所示，AIM分子由在屬于 SRCR-SF的組成員分子之間保守的富含半胱氨酸殘基的三個SRCR結構域串聯而成。該AIM雖然包含相比于作為最為靠近N末端側的SRCR結構域的SRCRl，更靠近N 末端側的信號肽，但是不包含相當于跨膜結構域或胞內結構域的部分，在序列上是典型的分泌蛋白。需要說明的是，如圖2所示，CD5或CD6等具有三個相同的SRCR結構域的其他 SRCR-SF的組成員屬于跨膜蛋白。另外提一下，“SRCR-SF”的名稱是由于富含半胱氨酸殘基的結構域在清道夫受體中最初被記載而被命名的名稱，但并不是所有的包含該結構域的分子都具有清道夫功能。 實際上，小鼠AIM不具有清道夫功能。小鼠AIM與人類AIM的氨基酸序列具有68%的同源性。并且，雖然小鼠AIM中包含三個N-糖化位點，但人類AIM中沒有N-糖化位點。圖3是將人類AIM氨基酸序列(序列表1中示出的氨基酸序列的單字母標記)、小鼠AIM氨基酸序列(序列表5中示出的氨基酸序列的單字母標記)以及它們共有的共有序列相對應起來而示出的。在圖3的六段中，示出在最上段到第三段的用方框圈起來的部分是SRCRl結構域的氨基酸序列(涉及人類AIM的序列表2中示出的氨基酸序列以及涉及小鼠AIM的序列表6中示出的氨基酸序列)。并且，示出在第三段到第五段的用方框圈起來的部分是SRCR2結構域的氨基酸序列(涉及人類AIM的序列表3中示出的氨基酸序列以及涉及小鼠AIM的序列表7中示出的氨基酸序列)。并且，示出在第五段到第六段的用方框圈起來的部分是SRCR3結構域的氨基酸序列(涉及人類AIM的序列表4中示出的氨基酸序列以及涉及小鼠AIM的序列表8中示出的氨基酸序列)。進一步地，對于迄今為止了解到的AIM的功能進行說明。AIM的一部分功能在最初分析基因敲除小鼠時即已明確(上述文獻1)。S卩，已經了解到雖然AIM基因缺失(AIM+) 小鼠基本上沒有出現異常，但腹腔巨噬細胞中，對于通過各種刺激而誘導的凋亡的抵抗性低下。同樣地，如果用重組AIM分子處理AIM^巨噬細胞，則會提高凋亡抵抗性。S卩，已經明確AIM具有抑制巨噬細胞的凋亡的功能。對于AIM而言，能夠抑制的凋亡并不是通過限定的刺激而誘導的凋亡，其能夠作用于通過i^s/CD95、放射線、類固醇、感染(李斯特菌等)、氧化LDL等各種刺激而誘導的凋亡。AIM究竟通過什么樣的機制抑制凋亡，尚不明了。并且，本發明的發明人對于這種AIM反復進行了專心研究，其結果獨立發現AIM發揮以下意外的功能。即，抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化，并且在成熟的脂肪細胞中誘導脂滴分解(lipolysis，脂解作用)。由此出發，最終完成了本發明。而且，令人驚訝的是，雖然AIM已經被明確屬于分泌蛋白，但在細胞膜表面上表達的CD36介導下內吞進入細胞質內，由此發揮其功能。該事實表明，AIM僅特異性地作用于表達有⑶36的細胞。S卩，例如AIM對不表達 CD36的腦神經系統的細胞不起作用。并且，由于AIM是一種蛋白，因此不會通過血腦屏障。從而，AIM不會引起諸如由于現有的將低分子物質作為有效成分的抗肥胖藥物而引起的副作用(例如，厭食癥)。接著，對本實施方式所涉及的藥物組合物(以下，稱為“本藥物組合物”。)進行說明。本藥物組合物作為有效成分而含有包含上述AIM的特定蛋白質(以下，稱為“本蛋白質，，。)°S卩，本藥物組合物作為有效成分而包含下述的(I)或(II)的蛋白質，(I)巨噬細胞凋亡抑制因子(AIM) ； (II)由巨噬細胞凋亡抑制因子(AIM)的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。在此，所述(I)的蛋白質是天然AIM，而所述(II)的蛋白質是該天然AIM的變異蛋白。本蛋白質是所述(I)的蛋白質或所述(II)的蛋白質，是作為藥物組合物的有效成分而使用的蛋白質。并且，本蛋白質是例如在后述的任意疾病的診斷、治療或預防中所使用的蛋白質。本藥物組合物作為有效成分而包含例如人類或人類以外的動物(以下，僅稱為 “動物”。)的AIM。本蛋白質例如是由序列表1中示出的氨基酸序列構成的蛋白質。即，此時，本蛋白質是人類的AIM，是具有抑制巨噬細胞凋亡的功能(以下，稱為“凋亡抑制功能”)的分泌蛋白。并且，本蛋白質例如是動物的AIM。對于動物，只要是人以外的動物，沒有特別限制，例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛；馬；猴)。更加具體地，本蛋白質例如是小鼠、狗或貓的AIM。本蛋白質例如是由序列表5中示出的氨基酸序列構成的蛋白質。S卩，此時，本蛋白質是小鼠的AIM，是具有凋亡抑制功能的分泌蛋白。這些AIM例如可以利用基因重組技術而制備。即，首先，將序列表9中示出的人類 AIM的cDNA(需要說明的是，序列表9中示出的氨基酸序列中3'末端的“tag”是終止密碼子。)整合到適當的表達載體(pCAGGS等)。接著，將該表達載體導入到動物細胞株(CH0 細胞、293T細胞等)，使該動物細胞產生人類AIM。由于人類AIM屬于分泌蛋白，因此產生的重組人類AIM會被釋放到培養上清液中。 從而，例如，可以通過在該人類AIM上添加HA等標簽多肽(9 12個氨基酸)，利用固定有針對該標簽多肽的抗體的純化柱，從培養上清液純化該人類AIM。并且，例如，預先得到抗 AIM抗體時，還可以采用該抗AIM抗體，從培養上清液純化沒有添加標簽的人類AIM。在此，對于人以外的動物的AIM，也可以采用同樣的方法制備AIM。S卩，例如，對于小鼠，可以通過利用序列表10中示出的小鼠AIM的CDNA(需要說明的是，序列表10中示出的氨基酸序列中3'末端的“tga”是終止密碼子。)，按照與制備上述的人類AIM時相同的順序，得到重組小鼠AIM。并且，對于其他的動物種(例如，狗、貓)，例如，也可以基于包含保守的SRCR結構域、具有三個該SRCR結構域串聯的形態、是分泌蛋白，這三個特征，從該其他動物種的cDNA 文庫中獲得AIM的cDNA，按照與制備上述的人類AIM時相同的順序，得到重組AIM。并且，例如，還可以從公知的數據庫(例如，National Center for Biotechnology hformatior^NCBI，美國國家生物技術信息中心)提供的數據庫)得到AIM的氨基酸序列。 具體而言，例如，將狗AIM的氨基酸序列示出在序列表11中，將黑猩猩AIM的氨基酸序列示出在序列表12中，將大鼠AIM的氨基酸序列示出在序列表13中。進一步地，對于在這些天然AIM的部分氨基酸序列中發生如后述的變異的AIM類似蛋白質，例如，只要合成并使用對應的cDNA，就可以按照相同的順序，作為重組變異AIM 而獲得。并且，對于本蛋白質而言，在不損壞其抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能(以下，稱為“脂肪分化抑制功能”。)和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解 (lipolysis，脂解作用)的功能(以下，稱為“脂解功能”。)的范圍內，可以使用在上述的天然AIM的氨基酸序列中發生變異的蛋白質(AIM變異蛋白)。即，本藥物組合物作為有效成分而包含例如人類或動物的AIM變異蛋白。如上所述，AIM變異蛋白是由AIM氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。在此，對以下說明的AIM變異蛋白，沒有明確記載時，也可以具有如下所述的特征。即，AIM變異蛋白也可以是分泌蛋白。并且，AIM變異蛋白也可以具有凋亡抑制功能。 并且，AIM變異蛋白也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400個，優選為 320 380個，更優選為340 360個的蛋白質。并且，當AIM變異蛋白的氨基酸序列與天然AIM的氨基酸序列具有80%以上的同源性時，以及當AIM變異蛋白的結構域的氨基酸序列與天然AIM的結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性時，該同源性優選為85%以上，更優選為90%以上，尤其優選為95%。并且，AIM變異蛋白也可以是與AIM同樣地在⑶36介導下作用于細胞的蛋白質。 此時，AIM變異蛋白與AIM同樣地、特異性地作用于含有⑶36的細胞。并且，AIM變異蛋白也可以是與AIM同樣地，與細胞的脂肪酸合成酶(FAS)結合而降低該FAS的活性的蛋白質。本蛋白質例如是由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。本蛋白質也可以是分泌蛋白。此時，本蛋白質包含分泌蛋白的特征氨基酸序列。 具體而言，本蛋白質例如由具有以下分子結構的分泌蛋白形成在其氨基酸序列的N端 (最前部分)包含疏水性的短的序列(leader sequence，前導序列)，但不包含跨膜序列 (transmembrane region，跨膜區(同樣具有疏水性))、細胞內結構域。實際上，天然AIM是具有這種分子結構的分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。本蛋白質例如是由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。此時，本蛋白質是由與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質例如是由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成，并且由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表2中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表3中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表4中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，而且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。即，該本蛋白質具有三個結構域，即人類AIM的SRCRl結構域或者在該結構域中發生變異的結構域、SRCR2結構域或者在該結構域中發生變異的結構域、以及SRCR3結構域或者在該結構域中發生變異的結構域。并且，此時，本蛋白質也可以是由與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400個，優選為320 380個，更優選為340 360個的蛋白質。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域中的至少一個結構域也可以是由與該至少一個結構域對應的序列表中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與該對應的序列表中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的結構域。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域也可以從N末端側依次連接。而且，本蛋白質例如是由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。并且，本蛋白質例如是由序列表2中示出的氨基酸序列構成的第一結構域(人類 AIM的SRCRl結構域)、由序列表3中示出的氨基酸序列構成的第二結構域(人類AIM的 SRCR2結構域)、以及由序列表4中示出的氨基酸序列構成的第三結構域(人類AIM的SRCR3 結構域)串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。S卩，該本蛋白質作為SRCR結構域具有三個結構域，即人類AIM的SRCRl結構域、 SRCR2結構域以及SRCR3結構域。并且，此時，本蛋白質也可以是由與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400個，優選為320 380個，更優選為340 360個的蛋白質。并且，具有上述的第一結構域、第二結構域以及第三結構域的任意一種本蛋白質， 也可以是該第一結構域、第二結構域以及第三結構域直接串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。S卩，此時，本蛋白質是由第一結構域的氨基酸序列、第二結構域的氨基酸序列以及第三結構域的氨基酸序列直接串聯而成的氨基酸序列構成的蛋白質。因此，此時，本蛋白質例如不包含相當于人類AIM中構成SRCRl結構域與SRCR2結構域之間的連接部分的氨基酸序列、構成該SRCR2結構域與SRCR3結構域之間的連接部分的氨基酸序列的、結構域之間的連接部分。但是，包含上述的第一結構域、第二結構域以及第三結構域的本蛋白質，不限于此，也可以是包含結構域之間的連接部分的蛋白質。并且，本蛋白質例如是由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCRl結構域部分的共有序列)以外的部分經過缺失、 取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCR2結構域部分的共有序列)以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCR3結構域部分的共有序列)以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。S卩，該本蛋白質具有三個結構域，即人類AIM的SRCRl結構域或者在人類AIM的 SRCRl結構域的共有序列以外的部分發生變異的結構域、人類AIM的SRCR2結構域或者在 SRCR2結構域的共有序列以外的部分發生變異的結構域、以及人類AIM的SRCR3結構域或者在SRCR3結構域的共有序列以外的部分發生變異的結構域。并且，此時，本蛋白質是由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的蛋白質。S卩，本蛋白質也可以是由與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400 個，優選為320 380個，更優選為340 360個的蛋白質。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域中的至少一個結構域也可以是由該至少一個結構域對應的序列表中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的結構域。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域中的至少一個結構域也可以是由與該至少一個結構域對應的序列表中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的結構域。即，第一結構域、第二結構域以及第三結構域中的至少一個結構域也可以是由該至少一個結構域對應的序列表中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的結構域。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域也可以從N末端側依次連接。并且，具有上述的在共有序列以外的部分發生變異的第一結構域、第二結構域以及第三結構域的任意一種本蛋白質，也可以是該第一結構域、第二結構域以及第三結構域直接串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。S卩，此時，本蛋白質是由第一結構域的氨基酸序列、第二結構域的氨基酸序列以及第三結構域的氨基酸序列直接串聯而成的氨基酸序列構成的蛋白質。但是，包含上述的在共有序列以外的部分發生變異的第一結構域、第二結構域以及第三結構域的本蛋白質，不限于此，也可以是包含結構域之間的連接部分的蛋白質。并且，本蛋白質例如是下述的(xl)、(x2)或(x3)蛋白質，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。(xl)由序列表2中示出的氨基酸序列構成的第一結構域蛋白或者多個所述第一結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(x2)由序列表3中示出的氨基酸序列構成的第二結構域蛋白或者多個所述第二結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(x3)由序列表4中示出的氨基酸序列構成的第三結構域蛋白或者多個所述第三結構域蛋白串聯而成的蛋白質。S卩，此時，本蛋白質例如是由人類AIM的SRCRl結構域構成的蛋白質(第一結構域蛋白)，或者多個該SRCRl結構域串聯而成的蛋白質(所述(xl)的蛋白質)。并且，本蛋白質例如是由人類AIM的SRCR2結構域構成的蛋白質(第二結構域蛋白)，或者多個該SRCR2 結構域串聯而成的蛋白質(所述(x2)的蛋白質)。并且，本蛋白質例如是由人類AIM的 SRCR3結構域構成的蛋白質(第三結構域蛋白)，或者多個該SRCR3結構域串聯而成的蛋白質(所述(x3)的蛋白質)。并且，同樣地，本蛋白質例如也可以是下述的(yl)、(y2)或(y3)蛋白質，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。(yl)由序列表2中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表2中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第一結構域蛋白或者多個所述第一結構域蛋白串聯而成的蛋白質； (y2)由序列表3中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表 3中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第二結構域蛋白或者多個所述第二結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(y:3)由序列表4中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表4中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第三結構域蛋白或者多個所述第三結構域蛋白串聯而成的蛋白質。
并且，同樣地，本蛋白質例如也可以是下述的(zl)、(z2)或(z3)蛋白質，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。(zl)由在序列表2中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域蛋白或者多個所述第一結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(z2)由在序列表3中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域蛋白或者多個所述第二結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(z3)由在序列表4中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域蛋白或者多個所述第三結構域蛋白串聯而成的蛋白質。并且，具有上述的第一結構域蛋白、第二結構域蛋白或第三結構域蛋白的任意一種本蛋白質，也可以是多個該第一結構域蛋白、第二結構域蛋白或第三結構域蛋白直接串聯而成的蛋白質。但是，本蛋白質不限于此，也可以是包含結構域之間的連接部分的蛋白質。并且，本蛋白質例如是由動物的AIM的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與該動物的AIM的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。此時，動物只要是人以外的動物，沒有特別限制，例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質例如是由序列表5中示出的氨基酸序列(小鼠AIM的氨基酸序列) 經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。此時，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，同樣地，本蛋白質例如是由序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列)或者序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表11、序列表12或者序列表13中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。進一步地，本蛋白質例如是由動物的AIM的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。此時，動物只要是人以外的動物，沒有特別限制，例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質例如是由序列表5中示出的氨基酸序列(小鼠AIM的氨基酸序列) 經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/ 或脂解功能的蛋白質。此時，本蛋白質例如是由與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，同樣地，本蛋白質例如是由序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列)或者序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。并且，本蛋白質例如是由具有SRCRl結構域、SRCR2結構域以及SRCR3結構域的動物的AIM的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成，并且由該SRCRl結構域的氨基酸序列或者該SRCRl結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與該SRCRl結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第一結構域、由該SRCR2結構域的氨基酸序列或者該SRCR2結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與該SRCR2結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由該SRCR3結構域的氨基酸序列或者該 SRCR3結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與該SRCR3結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，而且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。此時，本蛋白質也可以是由與動物的AIM的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400 個，優選為320 380個，更優選為340 360個的蛋白質。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域中的至少一個結構域也可以是由與該至少一個結構域對應的SRCR結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與該對應的SRCR結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的結構域。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域也可以從N末端側依次連接。此時，動物只要是人以外的動物，沒有特別限制，例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，例如，動物的AIM的氨基酸序列是序列表5中示出的氨基酸序列(小鼠AIM的氨基酸序列)，SRCRl結構域的氨基酸序列是序列表6中示出的氨基酸序列，SRCR2結構域的氨基酸序列是序列表7中示出的氨基酸序列，SRCR3結構域的氨基酸序列是序列表8中示出的氨基酸序列。并且，同樣地，動物的AIM的氨基酸序列例如也可以是序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列) 或序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)。進一步地，本蛋白質例如是由所述SRCRl結構域的氨基酸序列或者該SRCRl結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由所述SRCR2結構域的氨基酸序列或者該SRCR2結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由所述SRCR3結構域的氨基酸序列或者該SRCR3結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。此時，同樣地，動物只要是人以外的動物，沒有特別限制，例如是哺乳動物(例如， 小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質例如是由序列表6中示出的氨基酸序列或者序列表6中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表7中示出的氨基酸序列或者序列表7中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表8中示出的氨基酸序列或者序列表8中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。S卩，該本蛋白質具有三個結構域，S卩小鼠AIM的SRCRl結構域或者在該結構域中發生變異的結構域、SRCR2結構域或者在該結構域中發生變異的結構域、以及SRCR3結構域或者在該結構域中發生變異的結構域。并且，此時，本蛋白質是由序列表5中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的蛋白質。即，本蛋白質也可以是由與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且， 本蛋白質也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400個，優選為320 380 個，更優選為340 360個的蛋白質。并且，本蛋白質例如是由所述SRCRl結構域的氨基酸序列構成的第一結構域、由所述SRCR2結構域的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由所述SRCR3結構域的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。此時，同樣地，動物只要是人以外的動物，沒有特別限制，例如是哺乳動物(例如， 小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質例如是由序列表5中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成，并且由序列表6中示出的氨基酸序列構成的第一結構域 (小鼠AIM的SRCRl結構域)、由序列表7中示出的氨基酸序列構成的第二結構域(小鼠 AIM的SRCR2結構域)、以及由序列表8中示出的氨基酸序列構成的第三結構域(小鼠AIM 的SRCR3結構域)串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。即，該本蛋白質作為SRCR結構域具有三個，即小鼠AIM的SRCRl結構域、SRCR2結構域以及SRCR3結構域。并且，此時，本蛋白質也可以是由與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。即，本蛋白質例如也可以是由序列表 5中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且， 本蛋白質也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400個，優選為320 380 個，更優選為340 360個的蛋白質。并且，具有上述的第一結構域、第二結構域以及第三結構域的任意一種本蛋白質， 也可以是該第一結構域、第二結構域以及第三結構域直接串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。S卩，此時，本蛋白質是由第一結構域的氨基酸序列、第二結構域的氨基酸序列以及第三結構域的氨基酸序列直接串聯而成的氨基酸序列構成的蛋白質。但是，包含上述的第一結構域、第二結構域以及第三結構域的本蛋白質，不限于此，也可以是包含結構域之間的連接部分的蛋白質。并且，本蛋白質例如是由具有SRCRl結構域、SRCR2結構域以及SRCR3結構域的動物的AIM的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成，并且由該SRCRl結構域的氨基酸序列或者在該SRCRl結構域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由該SRCR2結構域的氨基酸序列或者在該SRCR2結構域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由該 SRCR3結構域的氨基酸序列或者在該SRCR3結構域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，而且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。此時，本蛋白質也可以是由與動物的AIM的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400 個，優選為320 380個，更優選為340 360個的蛋白質。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域中的至少一個結構域也可以是由在該至少一個結構域對應的SRCR結構域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、 取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的結構域。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域中的至少一個結構域也可以是由與該至少一個結構域所對應的SRCR結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的結構域。即，第一結構域、第二結構域以及第三結構域中的至少一個結構域也可以是由在該至少一個結構域對應的SRCR 結構域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的結構域。并且，第一結構域、第二結構域以及第三結構域也可以從N末端側依次連接。動物只要是人以外的動物，沒有特別限制，例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，本蛋白質例如是由序列表6中示出的氨基酸序列或者序列表6中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCRl結構域部分的共有序列)以外的部分經過缺失、 取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表7中示出的氨基酸序列或者序列表7中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCR2結構域部分的共有序列)以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表8中示出的氨基酸序列或者序列表8中示出的氨基酸序列中共有序列(圖3中示出的SRCR3結構域部分的共有序列)以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。S卩，該本蛋白質作為SRCR結構域具有三個，即小鼠AIM的SRCRl結構域或者在小鼠AIM的SRCRl結構域的共有序列以外的部分發生變異的結構域、小鼠AIM的SRCR2結構域或者在SRCR2結構域的共有序列以外的部分發生變異的結構域、以及小鼠AIM的SRCR3 結構域或者在SRCR3結構域的共有序列以外的部分發生變異的結構域。并且，此時，本蛋白質可以是由與序列表5中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的蛋白質。并且，本蛋白質也可以是分泌蛋白。并且，本蛋白質也可以具有凋亡抑制功能。并且，本蛋白質也可以是其氨基酸序列所包含的氨基酸數目為300 400個，優選為320 380個，更優選為340 360個的蛋白質。
并且，同樣地，動物的AIM的氨基酸序列例如也可以是序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列) 或序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)。并且，包含上述的在共有序列以外的部分發生變異的第一結構域、第二結構域以及第三結構域的任意一種本蛋白質，也可以是該第一結構域、第二結構域以及第三結構域直接串聯而成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。S卩，此時，本蛋白質是由第一結構域的氨基酸序列、第二結構域的氨基酸序列以及第三結構域的氨基酸序列直接串聯而成的氨基酸序列構成的蛋白質。但是，包含上述的在共有序列以外的部分發生變異的第一結構域、第二結構域以及第三結構域的本蛋白質，不限于此，也可以是包含結構域之間的連接部分的蛋白質。并且，本蛋白質例如是下述的(pi)、(p2)或(p3)蛋白質，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。(Pl)由動物的AIM的SRCRl結構域的氨基酸序列構成的第一結構域蛋白或者多個所述第一結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(P2)由動物的AIM的SRCR2 結構域的氨基酸序列構成的第二結構域蛋白或者多個所述第二結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(P3)由動物的AIM的SRCR3結構域的氨基酸序列構成的第三結構域蛋白或者多個所述第三結構域蛋白串聯而成的蛋白質。S卩，此時，本蛋白質例如是由動物AIM的SRCRl結構域構成的蛋白質(第一結構域蛋白)，或者多個該SRCRl結構域串聯而成的蛋白質(所述(pi)的蛋白質)。并且，本蛋白質例如是由動物AIM的SRCR2結構域構成的蛋白質(第二結構域蛋白)，或者多個該SRCR2 結構域串聯而成的蛋白質(所述(P2)的蛋白質)。并且，本蛋白質例如是由動物AIM的 SRCR3結構域構成的蛋白質(第三結構域蛋白)，或者多個該SRCR3結構域串聯而成的蛋白質(所述(P3)的蛋白質)。并且，同樣地，本蛋白質例如是下述的(ql)、(q2)或(q3)蛋白質，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。(ql)由動物的AIM的SRCRl結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述SRCRl結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第一結構域蛋白或者多個所述第一結構域蛋白直接串聯而成的蛋白質；(q2)由動物的AIM的SRCR2結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述SRCR2結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第二結構域蛋白或者多個所述第二結構域蛋白直接串聯而成的蛋白質；(q3)由動物的AIM的SRCR3結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述SRCR3結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第三結構域蛋白或者多個所述第三結構域蛋白直接串聯而成的蛋白質。并且，同樣地，本蛋白質例如是下述的(rl)、(r2)或(r3)蛋白質，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的蛋白質。(rl)由動物的脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的 SRCRl結構域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域蛋白或者多個所述第一結構域蛋白直接串聯而成的蛋白質；(r2)由動物的脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的SRCR2結構域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域蛋白或者多個所述第二結構域蛋白直接串聯而成的蛋白質；(r3)由動物的脂肪分化抑制功能和/或脂解功能的SRCR3結構域的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域蛋白或者多個所述第三結構域蛋白直接串聯而成的蛋白質。并且，具有上述的第一結構域蛋白、第二結構域蛋白或第三結構域蛋白的任意一種本蛋白質，也可以是多個該第一結構域蛋白、第二結構域蛋白或第三結構域蛋白直接串聯而成的蛋白質。但是，本蛋白質不限于此，也可以是包含結構域之間的連接部分的蛋白質。此時，動物只要是人以外的動物，沒有特別限制，例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)。更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。S卩，例如，當動物的AIM是小鼠AIM時，所述SRCRl結構域的氨基酸序列是序列表 6中示出的氨基酸序列，所述SRCR2結構域的氨基酸序列是序列表7中示出的氨基酸序列， 所述SRCR3結構域的氨基酸序列是序列表8中示出的氨基酸序列。并且，同樣地，動物的AIM的氨基酸序列例如也可以是序列表11中示出的氨基酸序列(狗AIM的氨基酸序列)、序列表12中示出的氨基酸序列(黑猩猩AIM的氨基酸序列) 或序列表13中示出的氨基酸序列(大鼠AIM的氨基酸序列)。本藥物組合物作為有效成分而包含上述的本蛋白質中的一種或多種。并且，本藥物組合物可以進一步包含藥學上可接受的載體。對于藥學上可接受的載體，沒有特別限制， 例如可以優選使用能夠在抗體藥學等所謂的蛋白質制劑中使用的載體。具體而言，例如可以使用在賦形劑、溶劑、稀釋劑、分散劑、乳化劑、助溶劑、懸浮劑、穩定劑、等張劑、緩沖劑、 PH調節劑、安撫劑、防腐劑、抗氧化劑中的一種或兩種以上。對于本藥物組合物的劑型，沒有特別限制，例如可以制備成注射劑、片齊IJ、丸齊IJ、膠囊劑、散劑、顆粒劑、液劑、糖漿劑。即，本醫藥組合物例如可以制備成注射到生物機體組織內的局部注射劑；注射到血管內的靜脈注射劑、動脈注射劑或者滴劑；腹腔內給藥的注射劑。當本藥物組合物為局部注射劑時，本藥物組合物例如可以制備成直接注射到脂肪組織(內臟脂肪組織、皮下脂肪組織等)的脂肪組織注射劑、皮下注射劑、肌肉注射劑。并且，當本藥物組合物為注射劑時，本藥物組合物例如可以將含有本蛋白質和上述的藥學上可接受的載體的溶液經過冷凍干燥等方法進行干燥，制備成粉末狀，并于安瓶等容器中無菌保存。在此，本發明的發明人確認出AIM的功能不會因這種干燥以及再溶解而被破壞。并且，給予本藥物組合物時，將其粉末溶解于適當的溶劑(例如，生理鹽水、林格氏溶液、其他注射用溶液)中，由此配制出由將本蛋白質作為有效成分而包含的液狀注射劑形成的本藥物組合物。并且，當本藥物組合物為注射劑時，例如還可以將含有本蛋白質和上述的藥學上可接受的載體的溶液直接無菌保存于安瓶等容器中。本藥物組合物中的本蛋白質的含量，根據劑型、劑量等而適當地確定，例如本藥物組合物可以被制備成包含0. 1 10重量％的本蛋白質的液狀注射劑。本藥物組合物用于人或動物的疾病診斷、治療或預防中。動物只要是人以外的動物，沒有特別限制，但優選表達野生型AIM，其脂肪細胞表達CD36的動物。具體而言，動物例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛；馬；猴)，更加具體地，例如是小鼠、狗或者貓。即，本藥物組合物例如用于人或人以外的哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)的疾病診斷、治療或預防中，更加具體地，例如用于人、小鼠、狗或者貓的疾病診斷、治療或預防中。S卩，本藥物組合物例如是給予人的藥物組合物(人用藥物組合物)。并且，本藥物組合物例如是給予動物的藥物組合物(動物用藥物組合物)。動物只要是人以外的動物， 沒有特別限制，但優選表達野生型AIM，其脂肪細胞表達CD36的動物。具體而言，動物例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛；馬；猴)，更加具體地， 例如是小鼠、狗或者貓。即，本藥物組合物例如是給予人或人以外的哺乳動物(例如，小鼠、 大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛 ’馬；猴)的藥物組合物，更加具體地，例如是給予人、小鼠、狗或者貓的藥物組合物。在此，對于成為本藥物組合物適用對象的疾病，應當廣義地解釋，包括在生物機體的結構或功能上有任意不適感的所有的狀態。即，本藥物組合物例如是為了診斷、治療或預防代謝性疾病(metabolic disorder，代謝失調)、脂肪瘤(腫瘤)、(包括神經的)退化性疾病而向生物機體給予的藥物組合物。這些疾病領域中，例如還包括諸如糖尿病、肥胖癥、 高血壓、動脈硬化等心血管疾病；脂肪瘤。更加具體地，本藥物組合物例如為了診斷、治療或預防與脂肪組織有關的不適感而使用。作為與脂肪組織有關的不適感，例如可以舉出肥胖、脂肪肉瘤(liposarcoma)。即， 本藥物組合物將消除或預防伴隨肥胖而引起的不適感作為目的，為了適當調節內臟脂肪和 /或皮下脂肪的量而使用。并且，本藥物組合物為了縮小脂肪肉瘤或者抑制其增大而使用。 并且，本藥物組合物例如還可以將調節外形上能看到的期望的部位的脂肪組織的量作為目的，用于美容整形或整形外科上的治療中。即，本藥物組合物將減少脂肪組織、抑制其增加、 降低其增加程度作為目的，向生物機體給藥。并且，本實施方式所涉及的方法(以下，稱為“本方法”。)中的一個，例如是向生物機體給予有效量的本蛋白質的方法。即，本方法是向生物機體給予上述的本藥物組合物的方法。在此，生物機體例如是人。并且，生物機體例如是動物。動物只要是人以外的動物， 沒有特別限制，但優選表達野生型AIM，其脂肪細胞表達CD36的動物。具體而言，動物例如是哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、天竺鼠等嚙齒類；兔；狗；貓；豬；牛；馬；猴)，更加具體地， 例如是小鼠、狗或者貓。本方法例如是為了診斷、治療或者預防人或人以外的哺乳動物的疾病，向該人或人以外的哺乳動物給予對該診斷、治療或者預防有效的量的本蛋白質(即，本藥物組合物) 的方法。對于本蛋白質的給藥方法，沒有特別限制，例如可以舉出，通過局部注射等的局部給藥、通過靜脈注射、動脈注射、點滴注射等的血管內給藥、口服給藥。當將本蛋白質局部給藥時，例如，將本藥物組合物配制成注射劑，利用注射器等局部給藥器具，將該注射劑注射到生物機體的組織內。即，例如以消除或預防肥胖、美容整形等作為目的，將本藥物組合物直接注射到內臟脂肪組織或皮下脂肪組織等脂肪組織內。并且，例如，對于患有脂肪肉瘤的患者，將本藥物組合物局部注射到該脂肪肉瘤組織內。當將本蛋白質向血管內給藥時，將本藥物組合物配制成注射劑，并利用注射器、輸液器具等血管內給藥器具，將該注射劑注射到生物機體的血管內。當將本蛋白質口服給藥時，將本藥物組合物配制成諸如片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、液劑、糖漿劑等口服給藥齊U，并使患者服用該口服給藥劑。在此，AIM在PH值2 3左右的酸性條件下，其分子結構仍穩定，不會喪失功能。如此，可以通過將本蛋白質向生物機體內給藥，有效地減少該生物機體內的脂肪組織的量，抑制其增加或者降低其增加的程度。其中，當將本蛋白質通過注射給藥時，尤其是將本蛋白質向脂肪組織內局部給藥時，可以更加有效地減少該脂肪組織的量，抑制其增加或者降低其增加的程度。本蛋白質的劑量根據給藥對象的癥狀、年齡、體重等因素而適當地確定，例如一次劑量可以是每Ikg體重給予0. 1 5mg。當然，本蛋白質的劑量只要是在對減少作為給藥對象的生物機體的脂肪組織，抑制其增加或者降低其增加的程度有效的范圍內，則不限于上述劑量。即，例如局部給藥時，由于可以使本蛋白質有效且確實地到達該本蛋白質的作用部位，因此與血管內給藥等全身給藥時相比，可以減少劑量。并且，本蛋白質的給藥方案同樣也根據給藥對象的癥狀、年齡、體重等因素而適當地確定，例如可以以1周 幾周的間隔，實施幾周 幾月多次給藥。根據這種本蛋白質的給藥，該本蛋白質在到達的生物機體的脂肪組織內，可以誘導成熟脂肪細胞中的脂肪的分解，并且還可以抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化。即， 本藥物組合物例如還可以稱為前脂肪細胞的分化抑制劑或成熟脂肪細胞中的脂肪分解誘導劑。并且，給予本蛋白質的結果，得到減少生物機體的脂肪組織的量、抑制其增加、降低其增加的程度的效果，進而能夠得到降低體重的效果。并且，本方法只要是與本蛋白質的使用有關的，不限于上述示例。即，本方法例如是將本蛋白質作為藥物組合物的有效成分而使用的方法。并且，本方法例如是將本蛋白質作為有效成分含有的藥物組合物的制備方法。此時，本方法例如也可以是將本蛋白質與藥學上可接受的載體混合，制備含有該本蛋白質和該載體的藥物組合物的方法。并且，本蛋白質還可以適用于食品飲料。即，本實施方式所涉及的食品飲料(以下，稱為“本食品飲料”。)是含有本蛋白質(即，所述(I)AIM或(II)由AIM的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的、與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構成，且具有脂肪分化抑制功能和/或脂肪分解功能的蛋白質)的食品飲料。即，本食品飲料例如是含有本蛋白質的食品。并且，本食品飲料例如是含有本蛋白質的飲料。并且，本食品飲料例如是含有本蛋白質的經口攝入組合物。該經口攝入組合物例如是不制備成藥物，而是使需要者類似于維生素劑等機能增強劑輔助攝取的組合物，例如制備成片劑、膠囊劑、顆粒、凝膠等形態。并且，本食品飲料例如是含有本蛋白質的食品飲料用添加劑。該食品飲料用添加劑例如是在食品飲料制造工藝中作為部分原料而使用或者添加到原料中的組合物。并且，與本食品飲料相關的本方法例如是將本蛋白質作為食品飲料的部分原料而使用的方法。并且，本方法是制造含有本蛋白質的食品飲料的方法。此時，本方法例如也可以是將本蛋白質與其他原料混合，制造含有該本蛋白質和該其他原料的食品飲料的方法。在此，記載本發明的一方面。本發明的一種實施方式所涉及的藥物組合物是將作為有效成分而含有以下的(a)至(1)中一種或多種蛋白質作為特征的藥物組合物。(a)由序列表1中示出的氨基酸序列構成的蛋白質；(b)由序列表5中示出的氨基酸序列構成的蛋白質；(c)由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(d)由序列表5中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(e)由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與該序列表1示出的氨基酸序列具有 80%以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(f)由序列表5中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與該序列表5示出的氨基酸序列具有80% 以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/ 或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(g)由序列表2中示出的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列構成的第二結構域以及由序列表4中示出的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(h)由序列表6中示出的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表7中示出的氨基酸序列構成的第二結構域以及由序列表8中示出的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(i)由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(j)由序列表6中示出的氨基酸序列或者序列表6中示出的氨基酸序列經過缺失、 取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表7中示出的氨基酸序列或者序列表7中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域以及由序列表8中示出的氨基酸序列或者序列表8中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(k)由序列表2中示出的氨基酸序列或者在序列表2中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者在序列表3中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者在序列表4中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質；(1)由序列表6中示出的氨基酸序列或者在序列表6中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表 中示出的氨基酸序列或者在序列表 中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域以及由序列表8中示出的氨基酸序列或者在序列表8中示出的氨基酸序列中共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。本發明的一種實施方式所涉及的方法的特征在于，向生物機體給予所述藥物組合物。并且，本發明的一種實施方式所涉及的方法的特征在于，向生物機體給予所述(a)至 (1)中一種或多種蛋白質的有效量。并且，本發明的一種實施方式所涉及的方法的特征在于，將所述(a)至(1)中一種或多種蛋白質作為藥物組合物的有效成分使用。并且，本發明的一種實施方式所涉及的方法的特征在于，制備作為有效成分而含有所述(a)至(1)中一種或多種蛋白質的藥物組合物。并且，本發明的一種實施方式所涉及的食品飲料的特征在于，含有所述(a)至(1)中一種或多種蛋白質。并且，本發明的一種實施方式所涉及的方法的特征在于，制備含有所述(a)至(1)中一種或多種蛋白質的食品飲料。接著，對本實施方式所涉及的具體實施例進行說明。實施例1[脂肪組織中的巨噬細胞的AIM表達]對C57BL/6小鼠采用高脂飲食(High Fat Diet :HFD，60 %脂肪熱量飼料)喂養 20周。并且，同樣也對肥胖程度更顯著的脂聯素(adiponectin)基因敲除小鼠(Adipo+小鼠)，采用HFD喂養。然后，從這些小鼠腹腔內部采集內臟脂肪組織。使用該脂肪組織制作的石蠟切片用抗巨噬細胞單克隆抗體(F4/80)以及抗小鼠AIM多克隆抗體(SA-I)進行雙
重染色。圖4示出將染色的切片通過相差顯微鏡以及熒光顯微鏡觀察的結果的一種示例。 圖4中，對于野生型的C57BL/6小鼠(Wild-type)以及Adipo+小鼠(AdiponectirT勺，分別示出相差顯微鏡照(Phase)、染色了巨噬細胞的熒光顯微鏡照(F4/80 macrophage)、染色了 AIM的熒光顯微鏡照(AIM)以及將這些熒光顯微鏡照合并的照片(merge)。如圖4所示，可以確認，在野生型小鼠以及Adipo+小鼠中，均出現巨噬細胞染色部分與AIM染色部分相重疊，且浸潤到脂肪組織的巨噬細胞強烈表達AIM。實施例2[AIM的對脂肪細胞分化的抑制]為了研究浸潤到脂肪組織的巨噬細胞所產生的AIM對周圍的脂肪細胞起什么樣的作用，進行了在3T3L1前脂肪細胞(preadipocyte)向成熟脂肪細胞分化的培養過程中用 AIM處理的實驗。S卩，如圖5A所示，根據以下的互不相同的4種方案a至d，進行了 3T3L1細胞的培養。(a)沒有用AIM處理；(b)從分化誘導刺激開始時起用AIM處理10天(day2 dayl2)； (c)僅在分化誘導前的增殖(clonal expansion，克隆增殖)期間(day (_2) day2)用AIM 處理；(d)僅在分化誘導刺激的初期(day2 day4)用AIM處理。作為AIM，使用小鼠重組AIM蛋白質或者人類重組AIM蛋白質。這些重組AIM蛋白質，通過培養由小鼠或人類的AIM的表達載體轉染的來源于人類的HEK293T細胞，從該培養上清分離純化而配制。其中，在以下示出的其他實施例中，作為AIM使用同樣的重組AIM蛋白質。AIM處理，通過在培養液中以5 μ g/ml濃度添加AIM而進行。并且，如圖5A所示，3T3L1細胞的分化誘導通過以下步驟進行首先，培養3T3L 1 細胞4天(day (-2) day2)，使其增殖(cell proliferation)，然后在含有胰島素、地塞米松(DEX)、3_異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)的培養液中培養2天(day2 day4)，由此開始分化誘導刺激，進一步地，在含有胰島素的培養液中培養2天(day4 day6)。分化誘導刺激期間(day2 day6)過后，在不含有這些分化誘導刺激因子的培養液中繼續培養。并且，用油紅0(Oil-red-O)對從分化誘導刺激開始起第十天(dayl2)的細胞進行染色，觀察從3T3L1細胞向成熟脂肪細胞的分化狀況。圖5B中示出，分別對于四種方案a d，用小鼠AIMQjH^rAIM)或者人類AIM(人類rAIM)處理的實驗(但是，方案a是沒有用AIM處理)中得到的染色后的細胞的顯微鏡照。其中，對使用人類AIM的方案c，沒有拍攝顯微鏡照(N.D.)。如圖5B所示，根據方案d僅在分化誘導刺激的初期(day2-day4)用AIM處理時， 幾乎沒有觀察到包含脂滴的細胞，3T3L1細胞的分化幾乎完全被抑制住。S卩，AIM在存在有上述的分化誘導因子的情況下，抑制3T3L1細胞的分化。在此需要說明的是，配制包含有分化誘導因子和AIM的培養液之后，利用純化柱從該培養液去除AIM時，該分化誘導因子仍然沒有喪失分化3T3L1細胞的能力(沒有示出數據)。因此，認為分化誘導因子與AIM之間實質上不存在化學相互作用。并且，根據方案b從分化誘導刺激開始時起用AIM處理10天(day2-dayl2)時，也幾乎沒有觀察到包含脂滴的細胞，3T3L1細胞的分化幾乎完全被抑制住。并且，還確認出這種AIM的分化抑制效果跟AIM濃度有關(沒有示出數據)。S卩，如果對3T3L 1細胞進行處理的AIM的濃度減少到1 μ g/ml、0. 1 μ g/ml，則AIM的分化抑制效果也會下降。并且，沒有發現AIM的處理會增加死細胞數。因此，認為AIM不會誘導細胞死亡， 而通過減少向成熟脂肪細胞分化的3T3L1細胞的數量來發揮分化抑制作用。另一方面，根據方案c僅在分化誘導前(day(-2)-day2)用AIM處理時，確認出與根據方案a沒有用AIM處理時同樣地，幾乎所有的細胞包含有脂滴，幾乎所有的3T3L1細胞分化成成熟脂肪細胞。即，僅在分化誘導前使用AIM處理時，3T3L1細胞的向成熟脂肪細胞的分化沒有被抑制住。但是，從分化誘導前開始經過分化誘導期間且其后(day (-2) -dayl2) 也繼續用AIM處理時，3T3L1細胞的向脂肪細胞的分化完全被抑制住(沒有示出數據)。在此，小鼠AIM和人類AIM的氨基酸序列之間的同源性高達68%左右。并且，如圖3所示，在小鼠AIM和人類AIM中，SRCR結構域中的共有序列(⑶5、⑶6等包含SRCR結構域的其他分子中也保守的氨基酸序列)完全一致。并且，如上所述，人類AIM與小鼠AIM 同樣地，抑制作為來源于小鼠的細胞的3T3L1細胞的分化。即，人與小鼠之間，關于AIM功能具有互換性。實施例3[AIM的脂滴分解(lipolysis，脂解作用)的誘導]研究了對于成熟脂肪細胞的AIM的效果。如圖6A所示，與上述的實施例2同樣地， 作為方案e進行了以下培養實驗。即，從3T3L1細胞分化而在細胞質內形成脂滴開始用小鼠 AIM 處理 6 天(day6-dayl2)。
并且，用油紅0(oil-red-O)對從分化誘導刺激開始起第十天(day 12)的細胞進行染色。并且，計算具有脂滴的細胞數。進一步地，對于具有脂滴的細胞，測定脂滴的直徑。其中，為了進行比較，對于通過上述的方案a培養的細胞以及通過方案d培養的細胞，也進行了細胞計數以及脂滴直徑的測定。并且，回收根據方案e用AIM處理而培養后的培養液的上清液，通過ELISA法測定包含在該上清液中的甘油以及游離脂肪酸(free fatty acids, FFAs)的量。并且，為了進行比較，對于上述的方案a，同樣也測定包含在培養上清液中的甘油以及游離脂肪酸的量。在此，為了防止包含在培養液中的白蛋白吸附游離脂肪酸，從分化誘導開始起的第十天(day 12)時，將10% FBS(胎牛血清)添加培養液換成無血清培養液，將細胞進一步在該無血清培養液中培養6小時，然后測定包含在該無血清培養液的上清液中的甘油以及游離脂肪酸。圖6B中示出脂肪被油紅0染色的細胞的顯微鏡照。圖7A以及圖7B中分別示出對于方案a、d以及e (Exp. a, d，e)，評價具有脂滴的細胞(Droplet (+) cells)的數(個 /IO4Um2)以及脂滴的相對大小(脂滴相對直徑)(％)的結果。其中，圖7B中示出的脂滴的相對大小是將在沒有用AIM處理的方案a中得到的細胞所具有的脂滴的大小視為100% 而計算出的。圖8A以及圖8B中分別示出對于方案a以及e(Exp.a，e)，測定培養液中的甘油濃度(甘油釋放量)(mM)以及游離脂肪酸濃度(FFA釋放量)(XlOmM)的結果。如圖6B以及圖7A所示，通過方案e用AIM處理分化后的脂肪細胞而繼續培養時得到的具有脂滴的細胞的數與通過方案a沒有用AIM處理分化后的脂肪細胞而培養時相比， 顯著減少。并且，如圖7B所示，在方案e中得到的包含在脂肪細胞中的脂滴的直徑與在方案 a中得到的細胞中的相比，縮小至約25%。并且，如圖8A以及圖8B所示，根據方案e用AIM處理時，與根據方案a沒有用AIM 處理時相比，培養上清液中的甘油濃度以及游離脂肪酸濃度均顯著增加。進一步地，根據方案e用AIM處理時，觀察到用AIM處理后，培養液的粘度急劇增力口。該觀察結果支持培養液中的甘油以及游離脂肪酸的量顯著增加的事實。如此，確認出AIM誘導成熟脂肪細胞的脂解(lipolysis)。從以上結果可以確認，AIM不僅抑制前脂肪細胞的分化以及成熟，而且還作用于成熟的脂肪細胞而誘導脂解 (lipolysis)，發揮使成熟脂肪細胞“變瘦的功能”。實施例4[AIM的對伴隨脂肪細胞分化的基因群的表達的抑制]對于在上述的實施例2以及實施例3中通過上述的五種方案a e培養的細胞， 在從分化誘導刺激開始起的第十天(dayU)時，進行回收，通過定量RT-PCR(QPCR)分析伴隨脂肪化而表達的基因的表達量。在此，圖9中以模式化示出伴隨脂肪細胞分化的主要的基因的表達模式。如圖9的左側的虛線方框內示出的那樣，在分化誘導期，基于分化誘導刺激，暫時誘導C/ΕΒΡβ，據此
的表達被上調。進一步地，因PPAR γ而誘導諸如脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase，FAS)、CD36、葡萄糖轉運蛋白 4 (Glucose transporter 4，Glut4)等對于分化的脂肪細胞必須的功能性基因的表達。
此后，如果C/EBP α以下的基因表達一定程度被上調，則如圖9的右側的虛線方框內示出的那樣，根據FAS而產生的脂肪酸(fatty acids,FAs)活化PPAR γ蛋白質，其使C/ EBPa基因的表達維持在一定水平。C/EBPa進一步誘導PPAR γ基因的表達。根據這種交互刺激，即使C/ΕΒΡβ的表達水平已下調，也形成維持PPARy以及C/EBP α的表達的機制 (參照圖9的右側的虛線方框)。圖10中示出通過五種方案a e培養的細胞中的基因表達的分析結果。如圖10 所示，根據方案d僅在分化誘導刺激的初期(day2-day4)用AIM(小鼠AIM，本實施例4中以下相同)處理時以及根據方案b從分化誘導刺激開始用AIM處理10天(day2-dayU)時， C/ΕΒΡα、PPARy、⑶36、Glut4各基因的表達幾乎完全被抑制。其中，非常有趣的是，在這些情況下，只有FAS基因表達反而稍微上調。另一方面，根據方案c僅在分化誘導前(day (D-daO用AIM處理時以及根據方案e僅在細胞分化誘導后(day6-dayl2)用AIM處理時，與根據方案a沒有用AIM處理時比較，基因表達模式沒有出現變化。如此，對于FAS基因表達以外的基因，基于AIM處理的表達調控的實驗結果與上述實施例2中的細胞形態學上的變化結果相匹配。實施例5 [AIM的對FAS酶活性的抑制]研究AIM是否對FAS的酶活性產生影響。S卩，如圖IlA所示，根據上述的方案d僅在3T3L1細胞的分化誘導初期(day2-day4)用AIM(小鼠AIM，本實施例5中以下相同)處理，然后從分化誘導開始經過2天后(day4)，回收細胞，配制細胞裂解液(cell lysate)，測定FAS的酶活性。并且，作為與上述的方案e相似的方案f，在3T3L1細胞分化之后用AIM處理4天 (day8-dayl2)，然后從分化誘導開始起十天后(dayl2)，回收細胞，配制細胞裂解液(cell lysate) JIUSFAS的酶活性。其中，FAS的酶活性基于丙二酸單酰輔酶AOiialonyl-CoA)消耗量進行測定。并且，代替AIM而使用FAS抑制劑(C75)，根據方案d以及f用25 μ M濃度的該FAS 抑制劑處理，與上述AIM的情形同樣地，從分化誘導開始經過2天后(day4，方案d)以及10 天后(dayl2，方案f)，回收細胞，測定FAS的酶活性。進一步地，為了進行比較，對于根據上述方案a沒有用AIM處理而培養的細胞，也分別在分化誘導開始經過2天后(day4)以及10天后(dayl2)的時間，同樣測定FAS的酶活性。圖IlB以及圖IlC中示出FAS的酶活性(Fatty acid synthase activity，脂肪酸合成酶活性)(nmol NADPH/min/mg蛋白質)的測定結果。圖IlB中分別示出對于根據方案 a沒有用AIM處理時(None)、根據方案d用AIM處理時(ΑΙΜ(5 μ g/ml))、根據方案d用FAS 抑制劑處理時(C75 (25 μ M))，從分化誘導開始經過2天后(day4)得到的結果。圖IlC中分別示出對于根據方案a沒有用AIM處理時(None)、根據方案f用AIM處理時(AIM(5 μ g/ ml))、根據方案f用FAS抑制劑處理時(C75 (25 μ M))，從分化誘導開始經過10天后(dayl2) 得到的結果。如圖IlB以及圖IlC所示，任意一種方案中，用AIM處理時與沒有用AIM處理時相比，FAS的酶活性均顯著下降。該AIM降低FAS的酶活性的程度與用作為FAS抑制劑的C75的有效濃度(25 μ M)處理時相同。并且，圖12Α以及圖12Β中分別示出對于根據方案a沒有用AIM處理時(None)Jg 據方案d用AIM處理時(AIM (5 μ g/ml))、根據方案d用FAS抑制劑處理時(C75(25yM)), 分別從分化誘導開始經過2天后(day4)，進行細胞的油紅0染色以及基因表達的RT-PCR分析的結果。并且，圖13A以及圖13B中分別示出對于根據方案a沒有用AIM處理時(None)、 根據方案f用AIM處理時(AIM)、根據方案f用FAS抑制劑處理時(C75)，從分化誘導開始經過10天后(day 12)，測定培養液中的甘油濃度(甘油釋放量)(mM)以及游離脂肪酸濃度 (FFA釋放量)(XlOmM)的結果。如這些圖12A、圖12B、圖13A以及圖1 所示，用AIM處理時和用FAS抑制劑(C75) 處理時，發現對于細胞的形態、基因表達、甘油以及游離脂肪酸的細胞外釋放，具有相同的效果。即，在前脂肪細胞的分化以及成熟脂肪細胞中的脂解作用(lipolysis)這兩個方面， AIM表現出與C75相同的效果。在上述的實施例4中只有FAS基因的表達沒有被AIM抑制的原因，認為是根據AIM 的FAS功能抑制，可能出現了負反饋(negative feedback)，根據PPAR γ以外的表達調控系統(例如，基于LXR-SREBP1系統的調控等)，FAS基因的表達被上調。并且，認為如果對成熟脂肪細胞用AIM處理，以抑制FAS功能，則由于內源性的游離脂肪酸(FFAs)的量會下降，因此作為對游離脂肪酸(FFAs)的量下降的反饋，誘導脂解作用(lipolysis)，從而調節FFAs的量。實施例6[脂肪細胞內的AIM和FAS的結合]細胞中的FAS活性調節，并不是根據磷酸化等蛋白修飾而進行的，而主要是根據表達調控和分子結構調節而進行的。通過AIM處理，即使FAS的活性降低，在FAS的表達上， 如上所述，并沒有確認出在mRNA水平、蛋白質的量中的任意一方面的下調。因此，作為一種可能性，認為AIM與FAS結合，在結構上抑制其活性。為此，為了證實上述的假設，首先，構建均表達添加有HA標簽的AIM(小鼠AIM)和添加有FLAG標簽的FAS的HEK293T細胞。并且，將該HEK293T細胞培養預定時間之后，回收，配制細胞裂解液(cell lysate)，采用抗FLAG抗體進行免疫沉淀。其結果，如圖14所示，確認出添加有HA標簽的AIM(HA-AIM)和添加有FLAG標簽的FAS(FL-FAS)的共沉淀。即，可以確認存在AIM與FAS結合的可能性。該結果支持上述的假設。實施例7[AIM的向脂肪細胞的內吞]AIM是由巨噬細胞分泌的可溶性蛋白。通常，分泌蛋白分子與存在于靶細胞的膜表面的受體結合，引起信號轉導，由此功能性地作用于靶細胞。然而，如上所述，要想使AIM與 FAS結合而抑制其活性，AIM作為分子需要內吞進入到細胞內。為了證明上述觀點，與上述的其他實施例同樣地，分化誘導3T3L1細胞，從分化誘導后的培養第四天(day4)起用AIM(小鼠AIM) (5 μ g/ml)處理3小時。然后，回收細胞，用抗AIM抗體對細胞內進行染色。在此，進一步地對細胞核采用DAPI進行染色。
圖15A以及圖15B示出用AIM處理培養3小時后染色的細胞在共焦顯微鏡下觀察的結果的一種示例。圖15A示出用200倍的倍數，圖15B示出用400倍的倍數拍攝的結果。 如圖15A以及圖15B所示，確認出AIM以圓點(dot)狀(在原圖中呈紅色)內吞到細胞質內。進一步地，通過采用膠體金標記的抗AIM抗體的免疫電子顯微鏡法，確認AIM內吞到脂肪細胞的現象。圖16A以及圖16B中分別示出用AIM處理后培養3小時(3hr)以及12 小時(overnight，過夜)的細胞的免疫電子顯微鏡照。圖16A示出從用AIM處理經過3小時CBhr)后回收的細胞，圖16B示出從用AIM處理經過12小時后回收的細胞的結果。如圖16A所示，在AIM的存在下培養3小時的細胞的細胞質內，AIM以圓點狀聚集在被認為是內涵體(endosome)的粒子(particle)的膜上。這認為是AIM與脂肪細胞表面的某種分子結合，并以結合的狀態與該表面分子一同內吞(Endocytosis)到細胞內而出現的現象。并且，如圖16B所示，在AIM的存在下培養12小時的細胞的細胞質內，內涵體 (endosome)變性，從此處還可以觀察到AIM進入到細胞質中。其中，AIM沒有聚集在吞噬體 (Phagosome)、吞噬溶酶體(Phagolysosome)或者線粒體(mitochondria)上。圖17以模式化示出基于這些觀點推測的AIM內吞進入細胞內的機制。實施例8[細胞表面的CD36分子介導下的AIM內吞(internalization)]如上所述，認為AIM在細胞表面分子的介導下內吞到細胞內。因此，認定了該細胞表面分子。⑶36是二次跨膜分子，在脂肪細胞或巨噬細胞中表達，參與包括脂肪酸、LDL等的多種分子的細胞內內吞。因此，構建超表達C端上添加有FLAG標簽的小鼠⑶36的HEK293 細胞，將該細胞與小鼠AIM —同培養3小時。然后，回收細胞，采用抗AIM抗體以及抗CD36 抗體染色，通過共焦顯微鏡觀察。圖18A至圖18D中示出得到的共焦顯微鏡照。圖18示出以二維方式分析的結果 (2-dimensional analysis，二維分析)，圖18B至圖18D分別示出以三位方式分析的結果 (3-dimensional analysis，三位分析)。如圖18A至圖18D所示，如果以二維以及三位方式進行分析，則觀察到，在細胞的表達有CD36的部位(原圖中FLAG以紅色表示)上結合有 AIM圓點(dot)(原圖中以綠色表示)的形態。并且，在部分細胞上，還觀察到AIM內吞到細胞內的形態。從這些結果認為，AIM與⑶36結合，內吞(internalize)到細胞內。但是，本次使用的HEK293T細胞中，主要觀察到的是AIM存在于細胞表面的形態， 與上述的實施例7的脂肪細胞(分化的3T3-L1細胞)相比，幾乎沒有觀察到AIM進入到細胞內的形態。其原因認為是，HEK293T細胞與脂肪細胞相比，內吞(endocytosis)能力較弱， 因此與CD36結合的AIM容易以結合的狀態停留在細胞表面上。并且，進一步地，為了確認AIM在⑶36介導下內吞的事實，用AIM處理通過上述的分化誘導而分化的3T3L1脂肪細胞時，同時用抑制與CD36的配體(Iigand)結合的中和抗體處理。然后，回收培養的3T3L1脂肪細胞，用抗AIM抗體染色。并且，對沒有用CD36中和抗體處理而僅用AIM進行同樣的處理而培養的3T3L 1脂肪細胞，也進行同樣的染色。圖19A以及圖19B分別示出沒有用CD36中和抗體處理時(no CD36 antibody，無CD36 抗體)以及用 CD36 中和抗體處理時(with CD36 neutralizing antibody，使用 CD36 中和抗體)的染色結果。如圖19A所示，沒有用CD36中和抗體處理時，可以觀察到AIM內吞到細胞內的現象(原圖中AIM在細胞內以紅色的圓點狀被檢測出)。另一方面，如圖19B 所示，當用CD36中和抗體處理時，細胞內完全沒有被抗AIM抗體染色，沒有觀察到AIM的內吞。S卩，由于用⑶36中和抗體進行處理，因此向細胞內的AIM的內吞被顯著地抑制住。 從以上結果可以明確，負責向脂肪細胞的AIM的內吞作用的至少一種分子是CD36。實施例9[AIM缺失小鼠的體重以及脂肪量的增加]從上述的實施例中得到的實驗結果可以明確，AIM抑制前脂肪細胞的成熟以及分化，并且誘導成熟的脂肪細胞中發生脂解作用(lipolysis)。因此，為了研究該作用在生物機體內的效果，對AIM被敲除的AIM缺失小鼠(AIM+小鼠)以及AIM沒有被敲除的正常的小鼠(AIMv+小鼠)，采用高脂飲食(HFD)喂養20周以上，測定體重和內臟白色脂肪的重量。 其結果，AIM缺失的AIM+小鼠與AIMv+小鼠相比，體重以及內臟白色脂肪的重量的增加有意義地被加劇(沒有示出數據)。進一步地，為了增強肥胖的發展效果，將上述的兩種小鼠分別與脂聯素 (adiponectin)基因敲除小鼠(Adipo+小鼠)交配，構建AIM+ Adipo+小鼠和AIM"+ Adipo+小鼠。并且，對這些小鼠同樣采用HFD處理20周以上，進行分析。圖20A以及圖20B分別示出拍攝AIM+ Adipo+小鼠(AIM+)以及AIM+" Adipo+小鼠(AIMv+)的腹腔內的照片。在圖20A中，上側的箭頭表示腸粘膜脂肪組織，下側的箭頭表示附睪脂肪組織。圖21A以及圖21B分別示出AIM"+ Adipo+小鼠(WT)以及 AIM+ Adipo+小鼠(KO)的體重(Body weight (g))以及內臟白色脂肪組織的重量(Total fat tissue (g)，總脂肪組織(g))的測定結果。如圖21A以及圖21B所示，與上述的沒有被敲除脂聯素基因的小鼠同樣地，AIM缺失的AIM+ Adipo+小鼠與AIMv+ Adipo+小鼠相比，體重以及內臟白色脂肪重量的增加被加劇。這種體重增加的加劇，主要是由于脂肪組織重量增加的加劇而引起的。這些結果支持以下結論。S卩，由浸潤到脂肪組織的巨噬細胞分泌的AIM在周圍的脂肪細胞中，通過降低FAS活性，誘導脂解作用(lipolysis)，同時抑制新的成熟脂肪細胞的分化，由此抑制性地調節脂肪組織的量(mass)。并且，有報道指出，對于小鼠給予FAS抑制劑(C75)，會降低下丘腦的神經肽 Y(NPY)的產生量，引起顯著的食欲減退以及體重減少。與此相比，AIM+小鼠和AIMv+小鼠之間在攝入量(Food intake)上沒有出現差異。因此，本次的AIM給予實驗中，不存在如同全身給予上述的FAS抑制劑(C75)時出現的對于腦神經系統的作用，在AIM+小鼠中出現的脂肪量的增加，認為是AIM的缺失直接對脂肪細胞引起影響的結果。這認為是，由于AIM需要在不包含于下丘腦的細胞中，而包含于脂肪細胞中的作為特異性的內吞中介物(endocytosis mediator)的CD36的存在下，發揮作用的結果。實施例10[向肥胖小鼠給予AIM而引起的脂解(Lipolysis)的誘導]
構建采用HFD處理20周以上的肥胖的AIM+小鼠。另一方面，準備純化的小鼠重組AIM蛋白，將該AIM以0. 2mg/m濃度溶解于PBS (磷酸緩沖液，pH7. 4)的AIM溶液配置成注射劑。并且，將該AIM注射劑通過小鼠的尾靜脈，一周兩次，四周給藥。對于劑量來說，每Ig小鼠體重給予1 μ g。其中，決定該劑量時，基于上述的體外 (in vitro)實驗中的培養液中的AIM濃度，考慮使小鼠血液中的AIM濃度達到與該培養液中的AIM濃度相同的程度而決定。并且，作為對照，同樣地對于用HFD處理20周以上的肥胖的AIM+小鼠，根據同樣的方案，從尾靜脈注射相同量的牛血清白蛋白(BSA)。并且，對于給藥后的小鼠，測定體重， 同時采集內臟白色脂肪組織而測定重量。其結果，在體重以及脂肪組織的總重量上，根據AIM給予與否而沒有確認出有意義的差異，但是在采集的脂肪組織中，在局部(點狀)觀察到脂肪細胞的縮小以及分解，為了處理這個而聚集的巨噬細胞，而且好像是大致釋放出(分解)了脂滴的脂肪細胞的、脂肪細胞的前細胞(分化誘導前的3T3L1那樣的細胞)。圖22A以及圖22B中示出用顯微鏡觀察被蘇木精-伊紅(Hematoxylin-Eosin， HE)染色的脂肪組織切片的結果。圖22A示出關于給予白蛋白的小鼠(BSA injected (control), BSA注射(對照))的結果，圖22B示出關于給予AIM的小鼠(rAIM injected，rAIM注射)的結果。如圖22A以及圖22B所示，可以確認出當給予AIM時與給予白蛋白時相比，脂肪組織的脂肪細胞的大小顯著減小的同時，巨噬細胞顯著聚集。即，向肥胖小鼠全身(systemic) 靜脈注射純化AIM蛋白時，在該肥胖小鼠的脂肪組織中誘導脂肪分解(Lipolysis)。本次實驗中，在部分脂肪組織中局部觀察到脂解(Lipolysis)的原因認為可能是，通過靜脈注射全身給藥時，脂肪組織中的局部濃度只在局部充分上升(認為局部濃度根據毛細血管的走行等而被決定)，而不能達到在整個脂肪組織中誘導脂解(lipolysis) 且減少脂肪組織的總重量以及體重的程度的可能性較高。但是，如上所述，可以明確地確認 AIM在生物機體中也表現出誘導脂解(lipolysis)的作用。在此，沒有確認出根據AIM的給予而導致小鼠的攝入量發生變化。如上所述，為了根據AIM而誘導脂解(lipolysis)，認為有效的是提高生物機體內的局部濃度。因此，認為例如通過局部注射，將AIM局部注射到脂肪組織內，由此可以更有效地誘導脂解(lipolysis)，并有效地減少脂肪組織的重量以及體重。并且，認為通過將 AIM全身給藥以及局部給藥，還可以得到抑制生物機體內的前脂肪細胞的分化的效果。在此，說明通過上述的實施例1至10得到的部分見解。在實施例1中，確認出浸潤到肥胖的小鼠脂肪組織中的巨噬細胞產生AIM。了解到巨噬細胞也同樣地浸潤到肥胖的人類脂肪組織中。因此，認為浸潤到人的脂肪組織中的巨噬細胞也產生AIM。在實施例2中，確認出AIM抑制前脂肪細胞的成熟分化。并且，在小鼠AIM以及人類AIM中的任意一個均表現出同樣的分化抑制功能。這種小鼠和人之間的分化抑制功能的互換性，認為是由于AIM氨基酸序列具有高的同源性，而且參與前脂肪細胞的分化以及AIM 的功能表達的分子之間也具有高的同源性而導致的。在實施例3中，確認出AIM作用于成熟的脂肪細胞而誘導脂滴分解(Lipolysis)。 在實施例7以及實施例8中，確認出AIM與脂肪細胞的細胞膜表面上的CD36分子結合，通過內吞作用(endocytosis)而進入到細胞質內。在實施例5以及實施例6中，確認出內吞到細胞內的AIM進入到細胞質內，與脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase ；FAS)結合而抑制其酶活性。因此，基于AIM的前脂肪細胞的分化抑制以及成熟脂肪細胞中的脂肪分解誘導，認為是該AIM抑制FAS而產生的結果。在實施例9中，確認出如果采用高脂飲食(High Fat Diet, HFD)處理，則AIM缺失 (AIM+)小鼠與正常(AIMv+)小鼠相比，體重以及脂肪組織的重量增加得更快。但是，沒有確認出AIM缺失(AIM+)小鼠和正常(AIMv+)小鼠之間的在攝入量上的差異。即，認為AIM并不像現有的抗肥胖藥物那樣誘導食欲減退，而根據完全不同的機制 (AIM直接特異性地作用于脂肪細胞或脂肪組織的機制)抑制體重以及脂肪組織重量的增加。進一步地，在實施例10中，確認出如果向肥胖的AIM+小鼠從尾靜脈全身注射純化重組AIM蛋白0周)，則在脂肪組織中局部發生脂解(lipolysis)。即，實際在生物機體也確認出與在體外(in vitro)實驗中確認出的對于培養細胞的效果相同的效果。如上所述，人類AIM以及小鼠AIM中含有保守的三個特征性的結構域(SRCR1 3)，氨基酸序列的同源性高達68%。而且，參與AIM向脂肪細胞的內吞的⑶36以及作為AIM 的一種靶分子的FAS也在人與小鼠之間具有較高的同源性。即，負責基于AIM的前脂肪細胞的分化以及成熟脂肪細胞中的脂解(lipolysis)的分子的任意一個，均在人與小鼠之間具有較高的同源性。在此，對于現有的其他藥物而言，存在雖然在利用小鼠的實驗中有效果， 但在人體上沒有得到效果的例子，這主要是因為參與該效果的分子在小鼠和人之間同源性較低而引起的。并且，在體外(in vitro)實驗中，人類AIM以及小鼠AIM中的任意一個在相同的濃度范圍下均對于來源于小鼠的脂肪細胞發揮同樣的分化抑制功能以及脂肪分解誘導功能。并且，采用與在體外(in vitro)實驗中獲得效果的濃度對應的劑量，向小鼠機體內給予AIM時，實際確認出在脂肪組織中發生脂解(lipolysis)。因此，認為AIM在人的機體內也同樣作用于脂肪細胞，獲得同樣的效果的可能性非常之高。并且，AIM為了發揮如上所述的功能，需要在⑶36的介導下內吞進入到細胞內。根據該作用機制，向生物機體內給予AIM時，不需要考慮如同現有的FAS抑制劑中出現的那種對腦神經系統引起的副作用。實際上，AIM缺失小鼠的攝入量與正常的小鼠相比，沒有出現差異。因此，認為向人機體給予AIM時，至少不會出現如同現有的FAS抑制劑中出現的那種對腦神經系統引起的副作用。實施例11[給予肥胖小鼠的AIM的向脂肪細胞的內吞以及與FAS的結合]對于從肥胖小鼠采集的脂肪組織樣品，采用抗巨噬細胞F4/80抗體(紅色)以及抗小鼠AIM多克隆抗體(SA-I)(綠色)進行共染色，在熒光顯微鏡下觀察。其結果，包圍巨噬細胞的若干個脂肪細胞被抗AIM抗體染色。另一方面，與巨噬細胞分開的脂肪細胞沒有被抗AIM抗體染色。發明人認為，這些結果說明來源于巨噬細胞的AIM被組織內的脂肪細胞內吞。進一步地，向肥胖AIM+小鼠的附睪脂肪組織直接注射小鼠rAIM，然后在組織學上分析該脂肪組織。即，向附睪脂肪組織的若干處直接注射共100 μ g的rAIM。從注射經過 3小時后，從附睪脂肪組織制作組織切片，將該組織切片用抗AIM抗體以及抗巨噬細胞抗體染色。其結果，在注射了 rAIM的脂肪組織內，AIM+脂肪細胞被染色成AIM陽性。艮口， 確認出脂肪組織中的外源性的rAIM內吞進入脂肪細胞。在更高倍數的熒光顯微鏡下觀察時，觀察到在脂肪細胞的細胞質內，內吞(endocytosed)的rAIM以點狀聚集(dot-forming accumulation)。并且，將rAIM通過靜脈注射而向AIM+小鼠全身給藥，然后在組織學上分析脂肪組織。即，向AIM+小鼠通過靜脈內注射全身給予200yg的rAIM。從注射經過3小時后， 從附睪脂肪組織制作組織切片，將該組織切片用抗AIM抗體以及抗巨噬細胞抗體染色。其結果，在脂肪組織的脂肪細胞內，雖然與上述的向組織內直接注射時相比程度較低，但是檢測出內吞的rAIM信號。非常有趣的是，脂肪組織的巨噬細胞也被抗AIM抗體染色。該結果給出以下啟示，即外源性rAIM同樣內吞到巨噬細胞內。進一步地，使用來源于這些脂肪組織的裂解物(Iysate)，使內吞的rAIM沉淀， 研究內源性FAS是否發生共沉淀。S卩，使用HA-tagged rAIM和抗HA抗體，通過免疫印跡 (Western blotting)分析在沉淀物中是否包含FAS。其結果，rAIM以及FAS兩種蛋白發生共沉淀。從該結果確認出，內吞的rAIM和細胞質內的FAS結合。從這些所有的結果證實，在體內(in vivo)在生理學上實現了通過脂肪細胞的 AIM的內吞以及隨之發生的該AIM與細胞質內的FAS的結合。實施例12[AIM缺失導致的肥胖的促進]為了試驗在體內(in vivo)中AIM對脂肪細胞的效果，分析了采用HFD喂食40周以上的AIM+ Adipo+小鼠以及AIMv+ Adipo+小鼠的肥胖狀態。在此，采用Adipo+背景的小鼠是有用的，因為在實驗AIM缺失對于脂肪組織量的影響時，可以排除脂聯素 (Adiponectin)白勺#=%。分析結果示出在圖23A至圖23E。圖23A示出用HFD喂食之前的體重(BW(pre)) (g)，圖2 示出用HFD喂食之后的體重(BW(HFD)) (g)。圖23C、圖23D以及圖23E分別示出用HFD喂食之后的內臟脂肪(Visceral Fat)的重量(g)、皮下脂肪(Subcutaneous Fat)的重量(g)以及肝臟(Liver)的重量(g)。在圖23A至圖23E中，“v+”表示AIMv+ Adipo+小鼠的結果，“ + ”表示AIM+ Adipo+小鼠的結果。如圖23A以及圖2 所示，在體重增加方面，與AIMv+ Adipo+小鼠相比，在AIM+ Adipo+小鼠中被加快。如圖23C以及圖23D所示，這種體重的差異主要是因脂肪組織的重量增加而導致的。并且，如圖23E所示，肝臟組織的重量也同樣地與AIMv+ Adipo+小鼠相比，在 AIM+ Adipo+小鼠中得到顯著地增加。該結果揭示AIM還作用于肝細胞(h印atocyte)，并控制該細胞內的甘油儲藏的可能性。其中，心臟或腎臟等其他臟器的重量在兩種小鼠之間大致相同。在用HFD喂食40周以上的沒有敲除脂聯素(Adiponectin)基因的AIM+小鼠以及AIMv+小鼠分析中，也觀察到同樣的結果。將分析結果示出在圖24A至圖ME中。如圖24A 至圖24E所示，與Adipo+背景的小鼠同樣地，與AIM"+小鼠相比，AIM+小鼠的體重、脂肪組織重量以及肝臟重量的增加更顯著。圖25中示出對于用HFD喂食的AIM+小鼠以及AIM+a小鼠評價成為其食欲指標的飼料攝入量(Food intake (g/24h))的結果。在圖25中，“+/+”表示AIMv+小鼠的結果， 表示AIM+小鼠的結果。在此，如上述的實施例9中也記載的那樣，有報道指出給予FAS抑制劑C75時， 會降低小鼠下丘腦的神經肽Y(NPY)的產生，其結果引起顯著的食欲減退，作為整體， 力口速體重的減少(Loftus, Τ. M.等 Reduced food intake and body weight in mice treated with fatty acid synthase inhibitors.Science 288,2379-2381 (2000) ；Kumar, Μ. V. , Shimokawa, Τ. , Nagy, T. R. & Lane, M. D. Differential effects of a centrally acting fatty acid synthase inhibitor in lean and obese mice. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 99,1921-1925 (2002) ；Shimokawa, T. ， Kumar, Μ. V. & Lane， M. D. Effect of a fatty acid synthase inhibitor on food intake and expression of hypothalamic neuropeptides. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 99,66-71 (2002) ；Chakravarthy, Μ. V.等 Inactivation of hypothalamic FAS protects mice from diet-induced obesity and inflammation. J. Lipid Res.50,630-640(2009)) 與此相比，本發明所涉及的實驗中，如圖25所示，AIM+小鼠和AIMv+小鼠之間在 M小時的飼料攝入量(g/Mh)上大致相同。即，說明AIM不具有神經學上的效果。發明人認為，其原因在于，AIM的作用需要由沒有報道出在下丘腦的細胞中表達的CD36介導的、特異性內吞過禾呈(endocytotic process)。在此，用HFD喂食的AIM+小鼠以及AIMv+小鼠(無論Adipo+背景還是Adipo"+ 背景)中，血清中的TNFa以及IL-6的水平沒有顯著的差異，且血液中的葡萄糖水平也大致相同。實施例13[AIM缺失小鼠的脂肪細胞大小、脂肪組織量以及體重的增加]給AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠用HFD喂食20周。并且，從各小鼠采集的附睪脂肪組織切片用HE染色，在顯微鏡下觀察。并且，利用安裝有圖像分析軟件的計算機，評價各組織切片的顯微鏡照內的不同區域中的50個獨立的脂肪細胞的大小。脂肪細胞的大小以平均值士標準偏差(SEM) (in pixels)來表示。圖沈中示出分別對于AIM"+小鼠(“+A”)以及AIM+小鼠(“ + ”)測定脂肪細胞的大小(pixel/cell)的結果。圖27A以及圖27B中示出從AIM"+小鼠(“+/+”)以及 AIM+小鼠(“+”)采集的內臟脂肪組織切片用HE染色而在相差顯微鏡下觀察的結果。其中，在圖27A以及圖27B中示出的比例尺表示100 μ m。如圖沈、圖27A以及圖27B所示，與上述的體外(in vitro)實驗中的3T3-L1細胞的觀察結果相同，肥胖AIM+小鼠的內臟脂肪細胞的大小與肥胖AIM"+小鼠相比，更大。并且，給AIM+小鼠以及AIM+/+小鼠采用HFD喂食12周，測定體重以及脂肪組織的重量。圖28A、圖28B以及圖28C中分別示出對于AIM+"小鼠(“+/+”)以及AIM+小鼠 (“+”)分別測定體重(Body) (g)、內臟脂肪組織(Visceral fat)的重量(g)以及皮下脂肪組織(Subcutaneous fat)的重量(g)的結果。如圖^A至圖28C所示，關于上述的脂肪細胞的增大，在用HFD喂食12周后的體重、內臟脂肪組織的重量以及皮下脂肪組織的重量的增加方面，與AIMv+小鼠相比，在 AIM+小鼠中增加得更快。在此，需要說明的是，用HFD喂食的AIM+/+小鼠和AIM+小鼠中，代謝速度 (metabolic rates)大致相同。圖^A、圖^B、圖^C中分別示出對于AIMv+小鼠(“"+”)以及AIM+小鼠(“ + ”)，作為反映代謝速度的指標分別評價體溫(Body temperature) (°C ), 耗氧速率(Oxygen Consumption) (V02/min/kg)以及飼料攝入量(Food Intake) (g/24h)的結果。其中，在圖29C中表示在用HFD喂食時(HFD)和用普通飼料喂食時(normal chow，普通食物)，每M小時攝食的飼料的量。如圖29A至圖29C所示，在體溫、耗氧速率以及飼料攝入量中的任意一項上，AIM+/+小鼠和AIM+小鼠之間不存在較大的差異。進一步地，用HFD喂食的AIM+"小鼠和AIM+小鼠的活動性(Locomotor activity) 也大致相同。圖四0中示出對于AIM"+小鼠(“"+”)以及AIM+小鼠(“+”)，分別評價活動性(Locomotor activity) (count)的結果。圖^D中示出黑暗環境下(Dark) 12小時以及光照環境下(light) 12小時的活動性以及共M小時的綜合活動性(Total)。從這些結果認為，AIM通過特異性地作用于脂肪細胞，由此對脂肪組織量產生影響。實施例14[基于向AIM缺失小鼠給予AIM而引起的對脂肪組織量以及體重增加的抑制]向AIM+小鼠用HFD喂食15周期間，在最后9周向該AIM+小鼠的腹腔內注射小鼠rAIM，研究該rAIM的給予是否抑制脂肪組織量的增加。即，最后的9周，向AIM+小鼠的腹腔內每周3次注射rAIM([150 μ g/注射/小鼠]X [3次/周]=[450 μ g/小鼠/周])， 第15周測定體重、內臟脂肪的重量以及皮下脂肪的重量。其中，作為對照，對于按照同樣的方案而向腹腔內給予BSA (Bovine Serum Albumin，牛血清白蛋白)的AIM+小鼠，也測定體重、內臟脂肪的重量以及皮下脂肪的重量。圖30A、圖30B以及圖30C中示出對于給予BSA的AIM+小鼠(“BSA”)以及給予 rAIM的AIM+小鼠(“rAIM”)，分別測定體重(Body) (g)、內臟脂肪組織(Visceral fat) 的重量(g)以及皮下脂肪組織(Subcutaneous fat)的重量(g)的結果(n = 3，即給予BSA 的AIM+小鼠以及給予rAIM的AIM+小鼠分別為3例)。如圖30A至圖30C所示，對于內臟脂肪的重量以及皮下脂肪的重量這兩項指標的增加來說，與體重同樣地，相比于作為對照而注射BSA的小鼠，在注射rAIM的小鼠中顯著減小。進一步地，對于給予BSA的AIM+小鼠以及給予rAIM的AIM+小鼠，分別評價 FSP27、Perilipin (圍脂滴蛋白)以及Adipophilin (脂肪分化相關蛋白)的mRNA水平。 mRNA水平使用從附睪脂肪分離的RNA，通過QPCR測定。圖31中示出對于給予BSA的AIM+小鼠(“BSA”)以及給予rAIM的AIM+小鼠 ("rAIM")，分別進行評價的 FSP27、Perilipin 以及 Adipophilin 的 mRNA 水平(n = 3)。其中，圖31中示出的值表示經GAPDH歸一化(normalized to GAPDH)的、相對于注射BSA的小鼠的結果的相對值(Relative Expression)。
如圖31所示，與用rAIM處理上述的3T3-L1脂肪細胞時觀察到的結果同樣地，隨著進行脂解(Iipolysis)而減少的FSP27、Perilipin以及Adipophilin的mRNA水平，也相比于作為對照而注射BSA的小鼠，注射rAIM的小鼠中較低。因此，認為根據AIM的注射，生物機體內進行了脂解(lipolysis)。實施例15[AIM的向FAS的結合]體內(in vivo)以及體外(in vitro)兩種實驗中，均確認出AIM與FAS的結合。 艮口，向肥胖AIM+小鼠的附睪脂肪組織的若干處直接注射共IOOyg的用HA標記的小鼠 rAIM。從注射經過3小時后，采集附睪脂肪組織。接著，使用抗HA抗體，從該脂肪組織的裂解物沉淀分離內吞的rAIM。并且，采用免疫印跡(WB)，分析在得到的沉淀物中是否包含 FAS。其結果，如圖32所示，確認出兩種蛋白發生共沉淀，內吞的rAIM和內源性的細胞質內 FAS結合。進一步地，使用表達用Flag標記的FAS和用HA標記的小鼠AIM這兩種蛋白的 HEK293T細胞以及抗Flag抗體或抗HA抗體，進行共免疫沉淀試驗。其結果，如圖33A以及圖3 所示，兩種蛋白均發生共沉淀。因此，認為AIM具有與FAS結合的能力。進一步地，試圖繪出FAS中的對于AIM的結合區域。如圖34A所示，FAS由下還的 7個獨立的功能結構域構成。S卩，酮脂酰合成酶(ketoacyl synthase，KS)、丙二酰轉移酶和乙酰轉移酶(malonyl/acetyl transferase，MAT)、脫水酶(dehydrase，DH)、烯酰還原酶 (enoylreductase, ER)、酮月旨酉先還原酶(ketoreductase, KR)、酉先基載體蛋白(acyl carrier protein, ACP)以及硫酯酶(thioesterase，TE)。在DH結構域和ER結構域之間包含中央核心區(central core，CC)。認為，該CC不具有已知的酶功能，而起結構上穩定二聚體的作用。在此，圖34A中示出頭尾(head-to-tail) 二聚化的FAS以及其各區域的主要功能。因此，通過共沉淀試驗，研究用Flag標記的FAS的各區域與用HA標記的AIM的結合。即，使N末端中添加有Flag標簽的FAS的各結構域，在表達用HA標記的小鼠AIM的 HEK293T細胞中，穩定表達。并且，使用抗Flag抗體以及抗HA抗體，通過共免疫沉淀試驗，研究各區域與AIM的結合。其結果，如圖34B所示，AIM特異性地結合于ER、DH、TE以及CC結構域。但是，AIM不結合于參與初期的酰基鏈集合體(initial asyl chain assembly，初期的酰基鏈裝配)(即，伴隨二氧化碳的釋放的、乙酰基以及丙二酰基向3-ketobutyryl-ACP 的縮合(condensation))的、包含KS以及MAT的N末端區域(參照圖34A)。因此，認為AIM 對于脂肪酸鏈延長(由ER以及DH參與)以及釋放合成的棕櫚酸酯(palmitate)(依賴于 TE)產生影響。其中，ER或KR的過度表達會帶來多數細胞的死亡。這會引起使用這些細胞裂解物的WB中的信號低下(圖34B的下側板，通道ER以及KR)。實施例16[細胞表面⑶36介導下的AIM的內吞]對于缺失⑶36的⑶36+小鼠以及野生型⑶36v+小鼠，分別從靜脈注射小鼠rAIM， 分析向脂肪組織的rAIM的內吞。S卩，將在PSB中溶解rAIM而配制的注射液分別靜脈注射到⑶36+小鼠以及CD36+/+小鼠(300 μ g/小鼠)。從注射經過16小時后，處死小鼠，從其附睪脂肪組織制作組織切片。并且，將組織切片用抗AIM抗體染色。其結果，如圖35A以及圖35B所示，在CD36+小鼠(CD36+)的脂肪組織中檢測出的AIM的信號水平與CD36+/+小鼠(CD36+/+)相比，顯著地低下。即，向脂肪細胞的rAIM內吞，相比于0)36+/+小鼠(CD36V+)，在CD36+小鼠(CD36—勺中顯著地少。實施例17[人rAIM的對人前脂肪細胞的成熟的抑制]為了確認AIM在人細胞中也作用于脂肪細胞分化(adipogenesis)，在重組人 AIM(rhAIM)的存在以及不存在下，刺激人間葉干細胞(human mesenchymal stem cell, HMSC) (Lonza Walkersville Inc.，USA)的分化。S卩，將 HMSC，在間葉干細胞基礎培養基(Mesenchymal Stem Cell Basal Medium, MSCBM) (Lonza Walkersville Inc.)中培養10天，以達到匯合。然后，將細胞在rhAIM 存在(lOyg/mL)或者不存在下，加入人胰島素、MCGS、地塞米松(dexamethasone)、吲哚美辛(indomethacin)以及IBMX，培養3天，由此刺激該細胞的分化(adipogenesis) (adipogenesis induction)(參考文獻Janderrova 等，Obes. Res. 11 :65,2003)。經過該刺激后，將細胞在添加有人胰島素以及MCGS的MSCBM中培養10天。并且，回收細胞，用油紅0染色。圖36A、圖36B以及圖36C中分別示出在相差顯微鏡下觀察分化刺激前 (Pre-stimulation)、rhAIM 不存在下刺激后(rhAIM (-))以及 10 μ g/mL 的 rhAIM 存在下刺激后(rhAIM(10 μ g/mL))的細胞的結果。如圖36A至圖36C所示，rhAIM戲劇性地抑制HMSC的分化。并且，通過RT-PCR評價在成熟脂肪細胞中表達的Glut-4的mRNA水平。并且，對于β肌動蛋白的mRNA，也同樣地進行評價。在圖37中示出其結果。圖37中示出評價分化刺激前O^re)、rhAIM不存在下刺激后(-rhAIM)以及10 μ g/mL的rhAIM存在下刺激后(+rhAIM)的細胞中的Glut_4以及 β肌動蛋白的mRNA的水平的結果。如圖37所示，與上述的組織學分析結果一致，Glut-4 的mRNA水平，相比于rhAIM不存在的狀態，在rhAIM存在下顯著地減少。實施例18[狗以及貓中的AIM的表達]為了研究狗以及貓中的AIM的表達，采用抗小鼠AIM多克隆抗體(SA-I)，對從3只狗以及3只貓采集的血清進行免疫印跡試驗。并且，為了進行比較，對小鼠血清也同樣進行免疫印跡試驗。圖38中示出對于狗3例(dog 1、2、3)、貓3例(cat 1、2、3)以及小鼠(mouse)分別進行免疫印跡的結果。如圖38所示，在狗血清中檢測出明顯的條帶。另一方面，在貓血清中檢測出分子量比狗更大、而與小鼠大致相同的、較淺的條帶。即，確認出在狗以及貓中也表達，與小鼠AIM具有能夠被抗小鼠AIM多克隆抗體檢測出的程度的同源性的AIM。在此，說明通過上述的實施例11至18得到的部分見解。在實施例11中，在向 AIM+小鼠的附睪脂肪組織直接注射rAIM以及向AIM+小鼠靜脈注射rAIM的任意一種情況下，均出現給予的外源性rAIM內吞進入脂肪細胞，且內吞的rAIM與該脂肪細胞的細胞質內的內源性FAS結合的現象。并且，在實施例16中，確認出向⑶36+小鼠以及野生型⑶36v+ 小鼠分別靜脈注射rAIM時，向脂肪細胞的rAIM的內吞，相比于⑶36v+小鼠，在⑶36+小鼠中顯著地少。即，在上述的實施例5至8中采用培養細胞進行的體外(in vitro)實驗中確認出的現象，在采用小鼠進行的體內(in vivo)實驗中也被確認出。其中，實施例15中，再次確認出在細胞內AIM與FAS結合，同時還獲得關于FAS的與AIM結合的區域的見解。在實施例12以及實施例13中，示出以下現象用HFD喂食的AIM+小鼠的體重、月旨肪組織的重量、肝臟的重量以及脂肪組織中所包含的脂肪細胞的大小的增加，與同樣用HFD 喂食的AIMv+小鼠相比，被顯著地促進；但是該AIM+小鼠的飼料攝入量、代謝速率以及活動性方面，與該AIMv+小鼠大致相同。即，更加詳細地確認出在上述的實施例9中被確認出的現象。在實施例14中，示出同時實施攝取HFD和腹腔內注射rAIM的處理的AIM+小鼠的體重、內臟脂肪的重量以及皮下脂肪的重量的增加，與同時實施攝取HFD和腹腔內注射 BSA的處理的AIM+小鼠相比，被顯著地抑制的結果。并且，這種由AIM引起的效果還可以根據以下分析結果證實，即，隨著脂解(lipolysis)的進行而減少的FSP27、Perilipin(圍脂滴蛋白)以及Adipophilin(脂肪分化相關蛋白)的mRNA水平，相比于腹腔內注射BSA 的AIM+小鼠，在腹腔內注射rAIM的AIM+小鼠中更低。即，如在上述的實施例10中已經理解的那樣，通過相比于靜脈注射可以提高脂肪組織中的局部濃度的腹腔內注射，明確地確認出由于給予AIM而抑制體重以及脂肪組織重量的增加的效果。在實施例17中，確認出人AIM通過作用于人前脂肪細胞，抑制該人前脂肪細胞向人脂肪細胞的分化。即，確認出如同基于上述的實施例1至10中得到的見解以及與AIM分子結構及其作用機制相關的小鼠和人的同源性而已經理解的那樣，小鼠AIM作用于小鼠細胞，同樣地人AIM作用于人細胞。該結果加強了支持下述理解的依據，即AIM在人的機體內與在小鼠機體內同樣地作用于脂肪細胞，帶來前脂肪細胞的分化抑制、脂肪細胞中的脂解 (lipolysis)、脂肪組織重量的增加抑制、體重的增加抑制的效果。在實施例18中，確認出在狗以及貓中也表達，與小鼠AIM具有能夠被抗小鼠AIM 多克隆抗體檢測出的程度的同源性的AIM。實際上，由序列表11中示出的氨基酸序列構成的狗AIM與由序列表1中示出的人AIM具有66%的同源性，并與序列表5中示出的小鼠AIM 具有60%的同源性。如上所述，得到以下見解，即AIM基于在各種哺乳動物的種間的氨基酸序列的同源性以及該AIM的作用機制的同源性，通過向生物機體給藥，帶來該生物機體的脂肪組織的量和/或體重的減少、增加的抑制、增加程度的降低等效果。進一步地，在作為藥物的有用性以及安全性方面還得到極其令人感興趣的見解，即AIM基于在CD36的介導下內吞進入細胞內而作用于該細胞的機制，不會改變生物機體的代謝狀態，而特異性地作用于該生物機體的脂肪細胞。
權利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于，作為有效成分而包含下述的(I)或(II)的蛋白質(I)巨噬細胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，作為有效成分而包含所述(I)的蛋白質。
3.如權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述(I)的蛋白質是由序列表1中示出的氨基酸序列構成的蛋白質。
4.如權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述(I)的蛋白質是動物的巨噬細胞凋亡抑制因子。
5.如權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或貓。
6.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，作為有效成分而包含所述(II)的蛋白質。
7.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表1中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
8.如權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
9.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由序列表1中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成，并且由序列表2中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表2中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表3中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4 中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與序列表4中示出的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，而且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
10.如權利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由序列表2 中示出的氨基酸序列或者序列表2中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者序列表3中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者序列表4中示出的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
11.如權利要求10所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由序列表2 中示出的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
12.如權利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，所述第一結構域、所述第二結構域以及所述第三結構域直接串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
13.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由序列表2 中示出的氨基酸序列或者在序列表2中示出的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由序列表3中示出的氨基酸序列或者在序列表3中示出的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由序列表4中示出的氨基酸序列或者在序列表4中示出的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
14.如權利要求13所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，所述第一結構域、所述第二結構域以及所述第三結構域直接串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
15.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是下述的(xl)、 (x2)或(x3)蛋白質(xl)由序列表2中示出的氨基酸序列構成的第一結構域蛋白或者多個所述第一結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(x2)由序列表3中示出的氨基酸序列構成的第二結構域蛋白或者多個所述第二結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(x3)由序列表4中示出的氨基酸序列構成的第三結構域蛋白或者多個所述第三結構域蛋白串聯而成的蛋白質，且是具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
16.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由動物的巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述動物的巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
17.如權利要求16所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
18.如權利要求16所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由動物的巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
19.如權利要求18所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
20.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由包含 SRCRl結構域、SRCR2結構域以及SRCR3結構域的動物的巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成，并且由所述SRCRl結構域的氨基酸序列或者所述SRCRl結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述SRCRl的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第一結構域、 由所述SRCR2結構域的氨基酸序列或者所述SRCR2結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述SRCR2結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由所述SRCR3結構域的氨基酸序列或者所述SRCR3結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述SRCR3結構域的氨基酸序列具有80%以上的同源性的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，而且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
21.如權利要求20所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
22.如權利要求20所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由所述 SRCRl結構域的氨基酸序列或者所述SRCRl結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由所述SRCR2結構域的氨基酸序列或者所述SRCR2結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由所述SRCR3結構域的氨基酸序列或者所述SRCR3結構域的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或幾個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成， 且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
23.如權利要求22所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
24.如權利要求20所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由所述 SRCRl結構域的氨基酸序列構成的第一結構域、由所述SRCR2結構域的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由所述SRCR3結構域的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
25.如權利要求M所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
26.如權利要求20所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，所述第一結構域、所述第二結構域、以及所述第三結構域直接串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
27.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，由包含 SRCRl結構域、SRCR2結構域以及SRCR3結構域的動物的巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成，并且由所述SRCRl結構域的氨基酸序列或者在所述SRCRl結構域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第一結構域、由所述SRCR2結構域的氨基酸序列或者在所述SRCR2結構域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第二結構域、以及由所述SRCR3結構域的氨基酸序列或者在所述SRCR3結構域的氨基酸序列中除了共有序列以外的部分經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的第三結構域串聯而成，而且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
28.如權利要求27所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
29.如權利要求27所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是，所述第一結構域、所述第二結構域、以及所述第三結構域直接串聯而成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
30.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述(II)的蛋白質是下述的(pi)、 (p2)或(p3)蛋白質(Pl)由動物的巨噬細胞凋亡抑制因子的SRCRl結構域的氨基酸序列構成的第一結構域蛋白或者多個所述第一結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(p2)由動物的巨噬細胞凋亡抑制因子的SRCR2結構域的氨基酸序列構成的第二結構域蛋白或者多個所述第二結構域蛋白串聯而成的蛋白質；(p3)由動物的巨噬細胞凋亡抑制因子的SRCR3結構域的氨基酸序列構成的第三結構域蛋白或者多個所述第三結構域蛋白串聯而成的蛋白質，且是具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
31.如權利要求30所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
32.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，是給予人的藥物組合物。
33.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，是給予動物的藥物組合物。
34.如權利要求33所述的藥物組合物，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
35.一種蛋白質，其特征在于，是如權利要求1至34中任意一項記載的所述(I)的蛋白質或所述(II)的蛋白質，且作為藥物組合物的有效成分使用。
36.一種方法，其特征在于，制備如權利要求1至34中任意一項記載的藥物組合物。
37.一種方法，其特征在于，向生物機體給予如權利要求1至34中任意一項記載的藥物組合物。
38.如權利要求37所述的方法，其特征在于，所述生物機體是人。
39.如權利要求37所述的方法，其特征在于，所述生物機體是動物。
40.如權利要求39所述的方法，其特征在于，所述動物是小鼠、狗或者貓。
41.一種食品飲料，其特征在于，包含下述的(I)或(II)的蛋白質(I)巨噬細胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。
42.一種方法，其特征在于，制造如權利要求41所述的食品飲料。
全文摘要
本發明提供一種新型藥物組合物、食品飲料以及與它們相關的方法。根據本發明的藥物組合物，特征在于，作為有效成分而包含下述的(I)或(II)的蛋白質(I)巨噬細胞凋亡抑制因子；(II)由巨噬細胞凋亡抑制因子的氨基酸序列經過缺失、取代或添加一個或多個氨基酸的與所述氨基酸序列具有同源性的氨基酸序列構成，且具有抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的蛋白質。即，本發明所涉及的藥物組合物作為有效成分，例如包含由序列表1中示出的氨基酸序列構成的蛋白質、由序列表5中示出的氨基酸序列構成的蛋白質、或者這些蛋白質在不損壞抑制前脂肪細胞向成熟脂肪細胞的分化的功能和/或在成熟脂肪細胞中誘導脂滴分解的功能的范圍內發生變異的蛋白質。
文檔編號A61K45/00GK102458472SQ20108003081
公開日2012年5月16日 申請日期2010年5月27日 優先權日2009年6月1日
發明者宮崎徹 申請人:宮崎徹