神經(jīng)調(diào)節(jié)肽u衍生物的制作方法

專利名稱：神經(jīng)調(diào)節(jié)肽u衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U衍生物。
背景技術(shù)：
使用子宮平滑肌收縮活性作為指標(biāo)，第一次從豬小腸以由25個(gè)氨基酸殘基組成的肽或以由8個(gè)氨基酸殘基組成的肽分離出神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U(NeUr0medin U，NMU)。基于氨基酸殘基的數(shù)目，這些肽命名為豬NMU-25或豬NMU-8。豬NMUS由豬NMU-25的C端8個(gè)殘基組成，是切割豬NMU-25得到的物質(zhì)。類似地，NMU-25在人類中是已知的。人NMU-25的C端8個(gè)殘基的氨基酸序列與豬NMU-8的C端8個(gè)殘基的氨基酸序列相同。大鼠NMU由23個(gè)氨基酸殘基組成，并且命名為NMU-23。大鼠NMU-23的C端8個(gè)殘基的氨基酸序列與豬NMU-8的C端8個(gè)殘基的氨基酸序列相差1個(gè)氨基酸殘基。作為NMU的受體，最初鑒定出FM3，其是孤獨(dú)GPCR(orphan GPCR)；隨后，鑒定出 TGR1。目前，這些受體分別稱作NMURl和NMUR2。FM3主要分布于腸道中，而TGRl位于下丘腦中。另外，作為TGRl的受體，已經(jīng)從大鼠腦分離出新的肽。因?yàn)榇穗奈挥谙虑鹉X內(nèi)的視交叉上核中，所以使用視交叉上核(Suprachiasmatic Nucleus)的詞首字母來(lái)將它命名為神經(jīng)調(diào)節(jié)肽 S (Neuromedin S，NMS)。人匪S由33個(gè)氨基酸殘基組成，并且C端8個(gè)氨基酸殘基的氨基酸序列與大鼠 NMU-23的C端8個(gè)殘基的氨基酸序列相同。NMURl和NMUR2對(duì)NMU、NMSjP NMU-8展現(xiàn)出相似的親和力。已經(jīng)提示了，這些受體強(qiáng)烈地識(shí)別作為NMU和匪S共通序列的由C端8個(gè)殘基構(gòu)成的氨基酸序列。大鼠NMU-23在大鼠中的腦室內(nèi)施用誘導(dǎo)食物攝取抑制。還已經(jīng)報(bào)告了 NMU對(duì)室旁核(PVN)或弓狀核(ARC)的局部施用誘導(dǎo)食物攝取抑制，與腦室內(nèi)施用的情況中一樣；因此，可以認(rèn)為NMU的作用部位是PVN和ARC。此外，已經(jīng)顯示了抗NMU抗體的腦室內(nèi)施用提高食物攝取量，這提示了中樞的NMU在生理方面產(chǎn)生抑制食物攝取的效果。還已經(jīng)報(bào)告了， NMU KO小鼠展現(xiàn)出肥胖表型，而且過(guò)表達(dá)NMU的小鼠展現(xiàn)出較低的體重和低食物攝取量。 這闡明內(nèi)源NMU的生理學(xué)意義。已經(jīng)進(jìn)一步報(bào)告了，NMU的腦室內(nèi)施用引起體溫的升高、熱產(chǎn)生、和氧消耗的升高。 可以認(rèn)為該作用是由交感神經(jīng)引起的脂肪組織和肌肉系統(tǒng)的活化。還已經(jīng)報(bào)告了，通過(guò)NMU的腦室內(nèi)施用來(lái)引起對(duì)胃酸分泌的抑制和對(duì)胃排空 (gastric emptying)的抑制。可以認(rèn)為該作用是經(jīng)由CRH分泌的中樞性作用。這些作用是導(dǎo)食物攝取量降低的作用。尚未詳細(xì)檢查為何NMU的外周施用引起對(duì)腸道的作用；然而，考慮到NMURl是在腸道中表達(dá)的，可以認(rèn)為NMU的外周施用對(duì)腸道會(huì)引起某種作用?；诖送茰y(cè)，檢查通過(guò)NMU 外周施用引起的對(duì)胃或腸道的作用，并且已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了大腸特異性促運(yùn)動(dòng)活性(prokinetic activity)。
專利文獻(xiàn)1和2披露了通過(guò)NMU的外周施用來(lái)獲得食物攝取抑制效果。本發(fā)明人還獨(dú)立地發(fā)現(xiàn)了，NMU-23經(jīng)由外周施用而體現(xiàn)食物攝取抑制作用。另一方面，NMU-8經(jīng)由外周施用不體現(xiàn)食物攝取抑制作用，盡管NMU-8對(duì)受體NMURl和NMUR2具有足夠強(qiáng)的激動(dòng)劑活性。為了使神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U作為食物攝取抑制劑有用，神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U即使在利用通常的施用方式(例如外周施用)時(shí)也體現(xiàn)出高的食物攝取抑制作用是非常重要的。此外，作為用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的化學(xué)修飾用途的PEG衍生物，多種化合物是已知的。現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1 :W0 2007/075439專利文獻(xiàn)2 :W0 2007/109135發(fā)明概述發(fā)明要解決的問(wèn)題本發(fā)明的目的是提供一種新的食物攝取抑制劑(anorectic agent)。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U衍生物，其即使利用通常的施用方式(例如外周施用)時(shí)也表現(xiàn)出高的食物攝取抑制作用。解決問(wèn)題的方法本發(fā)明的發(fā)明人等推測(cè)外周施用后未表現(xiàn)出食物攝取抑制作用的原因在于 NMU-8在血液中的不穩(wěn)定性。此外，發(fā)明人等推測(cè)如果是在血液中高度穩(wěn)定的NMU-8衍生物(或修飾體)則會(huì)表現(xiàn)出足夠的食物攝取抑制作用。如此，發(fā)明人制備了神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U衍生物，其是經(jīng)由接頭，使特定的多肽，與甲氧基聚乙二醇結(jié)合而成的，該特定的多肽是在神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U的氨基酸序列的C端的8個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的多肽中進(jìn)行了 1 4個(gè)氨基酸的取代而得到的。發(fā)明人揭示了，這樣的NMU-8修飾體即使在外周施用時(shí)也顯示出足夠強(qiáng)的食物攝取抑制作用和體重減輕作用?；诖税l(fā)現(xiàn)，發(fā)明人等繼續(xù)其研究，并完成本發(fā)明。更具體地，本發(fā)明提供了項(xiàng)[1] [9]的化合物、項(xiàng)[10]和[11]的藥劑、項(xiàng)[12] 的方法、和項(xiàng)[13]的用途等。[1] 一種以下式表示的化合物或其鹽，
權(quán)利要求
1. 一種下式表示的化合物或其鹽，
2.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中所述氨基酸取代選自(1)用Ala、Arg、Glu、Ser、Gln、NMeArg、或 Pro 取代第 1 位的 Tyr ；(2)用Val.Gln, Arg, Glu、Ser、Tyr、Pro、Cha、或 Aib 取代第 2 位的 Phe ；(3)用6111、六印、6111、561~、￥31、卩1^、卩1~0、1111~、0^、肌6、匪6六印、或六讓取代第3位的Leu ；(4)用Gin、Leu、Pro、Cha、NMePhe、或 Aib 取代第 4 位的 Phe ；(5)用Nle、Gin、NMeArg、或 Aib 取代第 5 位的 Arg ；(6)用Ala或Aib取代第6位的Pro；(7)用Arg(Me)取代第7位的Arg；和(8)用Nle、Gin、Arg、Asp、Pro、或 Aib 取代第 8 位的 Asn。
3.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中所述氨基酸取代選自(1)用Arg、NMeArg、或 Pro 取代第 1 位的 Tyr ；(2)用Gln取代第2位的Phe；(3)用Gin、Arg、Cha、NMeArg、或 Val 取代第 3 位的 Leu ；(4)用Gln或WeArg取代第5位的Arg；和(5)用Arg(Me)取代第7位的Arg。
4.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中所述氨基酸取代選自(1)用Arg、Phe、NMeTyr、或 Pro 取代第 1 位的 Tyr ；(2)用Glu、Tyr、Trp、或 Nal (2)取代第 2 位的 Phe ；(3)用Gin、Arg、Val、Cha、或 NMeLeu 取代第 3 位的 Leu ；(4)用Trp取代第4位的Phe；(5)用Gln或WeArg取代第5位的Arg；(6)用Ala或NMeAla取代第6位的Pro；和(7)用Arg(Me)或NMeArg取代第7位的Arg。
5.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中Y是由從SEQID NO. :2 20中選擇的任一個(gè)所表示的氨基酸序列組成的多肽。
6.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中從所述Lc中的與Lb最接近的氮原子到在神經(jīng)調(diào)節(jié)肽υ的N端的氮原子之間的距離是3.5 30A。
7.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中Lc是式(i)CNH-Qe-Cb-表示的二價(jià)基團(tuán)上式(i)中，Qe是式_ (CH2)ml-表示的二價(jià)基團(tuán)，其中ml表示0 15的整數(shù)，且Cb表示鍵、-CO-、或-SO2-。
8.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中Lc是式(i)CNH-Qe-Cb-表示的二價(jià)基團(tuán)， 上式⑴中，Q。表示式-(CH2)ml-Z。-(CH2)m2-表示的二價(jià)基團(tuán)上式中，ml表示0 10的整數(shù)，Zc 是選自下組的二價(jià)基團(tuán)-CO-、-0-C0-、-C0-0-、-CO-NH-、-NH-CO-、-CO-NH-CO-、-NH-C0-NH-、-CH (NH2) -、-CH (-NHRzcl) -、-CH (Rzc2) -、-CH (OH) -、-CH (COOH) -、-C ( = NH) -、-S-、-S-S -、-SO-、-SO2-、-NH-SO2-、-SO2-NH-、
9.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中Lc是式(ii) :-(T -Cb'-表示的二價(jià)基團(tuán)上式( )中，Qc，為-(CH2)mr-Zc-(CH2)ffl2,-上式中，ml，表示0 15的整數(shù)，
10.包含權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽的食物攝取抑制劑。
11.一種用于預(yù)防或治療肥胖癥的藥劑，其包含權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽。
12.一種用于預(yù)防或治療肥胖癥的方法，其中，對(duì)哺乳動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽。
13.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽用于生產(chǎn)供預(yù)防或治療肥胖癥用的藥劑的用途。
全文摘要
本發(fā)明的目的是提供一種新的食物攝取抑制劑。此外，本發(fā)明的目的是提供一種NMU衍生物，其即使在以通常的方式，例如外周施用時(shí)也體現(xiàn)出高的食物攝取抑制作用。這些目的可以通過(guò)式(I)表示的化合物或其鹽來(lái)實(shí)現(xiàn)。在式(I)中，Y表示如下多肽，該多肽由在SEQ ID NO.1所表示的氨基酸序列中具有1～4個(gè)氨基酸取代的氨基酸序列構(gòu)成；X表示甲氧基聚乙二醇；X’是不存在的或者表示甲氧基聚乙二醇；式La-Lb-[Lc]j表示的部分表示接頭。
文檔編號(hào)A61K38/00GK102459311SQ201080025348
公開(kāi)日2012年5月16日 申請(qǐng)日期2010年4月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月8日
發(fā)明者井岡博, 淺見(jiàn)泰司, 西澤直城 申請(qǐng)人:武田藥品工業(yè)株式會(huì)社