專利名稱：：用于神經保護和治療神經變性病癥的克拉維酸類物質制劑的制作方法
技術領域：
：本發明涉及含有克拉維酸、藥學上可接收的克拉維酸鹽、鹽組合物和衍生物的穩定固體口服劑型的用途。具體而言，本發明提供克拉維酸鉀的即釋組合物(立即釋放組合物，immediatereleasecomposition)和緩釋組合物(延長釋放組合物，extendedreleasecomposition)的用途，所述克拉維酸鉀的即釋組合物和緩釋組合物適于日常使用并實現用于神經變性病癥的神經保護和治療的克拉維酸類物質(clavulanate)的治療水平。
背景技術：
：克拉維酸的名稱來源于產生克拉維酸的棒狀鏈霉菌(Sti^ptomycesclavuligerus)微生物。克拉維酸是由氨基酸精氨酸和糖甘油醛3-磷酸酯生物合成產生的。克拉維酸具有可忽略的內在抗微生物活性，盡管具有β-內酰胺抗生素的特征性內酰胺環。然而，化學結構上的類似性容許該分子充當由某些細菌分泌的內酰胺酶的競爭抑制劑而賦予β-內酰胺抗生素抗性。當與一些β-內酰胺抗生素如替卡西林或阿莫西林聯合給予時，克拉維酸能夠拓展抗生素的抗菌譜并增強抗菌活性(AHFS，1991)。這種協同作用活性是可能的，因為克拉維酸充當天然降解和惰性化內酰胺抗生素的細菌β-內酰胺酶的不可逆的競爭性抑制劑(Brownetal.，JAntibiot(Tokyo).1976，29668-669；ReadingandCole,AntimicrobAgentsChemother.1977,11:852-857)。除了其對β-內酰胺酶的抑制作用之外，克拉維酸已經顯示出神經保護作用以及在治療焦慮癥和性功能障礙方面的功效。對克拉維酸的神經保護和神經學活性已提出了若干機理。Koppel等在美國專利6，489，319；6,610，681；和6，627，625中(通過引用將這些專利作為整體并入本文)描述了克拉維酸自身在腹腔注射給予小于1μg/kg時具有抗焦慮活性。美國專利6，426，342(通過引用將其整體并入本文)描述了當用克拉維酸1μg/kg的腹腔注射劑量處理大鼠時，克拉維酸具有有效的神經保護活性。美國專利7，166，626(通過引用將其整體并入本文)公開了通過給予克拉維酸治療性功能障礙的方法。美國專利6，489，319報道了在IOng至10μg/kg劑量下，克拉維酸能夠改變CNS活性和行為。因此，克拉維酸的獨特神經活性特性曲線(分布，profile)提供了這種化合物與獨特神經靶組相互作用的強有力的證據。Rothstein等也證實，幾種β-內酰胺抗生素能夠通過活化谷氨酸神經遞質轉運器(glutamateneurotransmittertransporter)的基因而提供神經保護作用(Nature，2005，433:73-77)。自從在1擬8年首次發現青霉素以來，β-內酰胺抗生素已經成為最廣泛使用的抗生素，而且在標準抗菌劑量下沒有顯示出顯著毒性的CNS作用。因此，β-內酰胺抗生素可以作為新的安全的治療性藥物用于CNS相關疾病的治療。含有克拉維酸及其衍生物或鹽(統稱為克拉維酸類物質)的許多干制劑的不穩定性，使得必須包含賦形劑的復雜制劑(complexformulation，復合制劑)，包括粘結劑、助流劑(glidants)、崩解劑和甚至干燥劑等以獲得藥學上可接收的載體。這部分是因為這個事實，即克拉維酸類物質是高度吸濕性的物質，其在含水介質中高度不穩定。配制的方法因此必須確保產品能夠在其儲存期間保持其效能，并且還能夠隨后產生滿意的溶解速率。WO92/19227(通過引用將其整體并入本文)中公開了一種這樣的方法，并要求同時包含胞內和胞外崩解劑。美國專利4，537，887(通過引用將其整體并入本文)中描述的另一方法特別強調在組合物自身中包含可食用的干燥劑。其它方法證實要在容納阿莫西林/克拉維酸類物質聯合制劑(combination)的容器中包含干燥劑。在這方面，美國專利4，301，149和4，441，609(通過引用將它們整體并入本文)尤為突出。克拉維酸鉀比游離酸和最低吸濕性的藥用克拉維酸鹽更穩定，因此其最常用于商業性制劑。然而，克拉維酸鉀仍是極度吸濕性并易于水解的，以致于使阿莫西林/克拉維酸類物質共制劑易于在儲存(甚至在低濕度條件下儲存)時發生降解。阿莫西林結晶中水的存在可以加劇這種劑型的不穩定性，一旦任何降解作用開始就會加速克拉維酸類物質的分解。
發明內容克拉維酸類物質因為其濕熱敏感性是異常難以配制的物質。仍需要開發單獨克拉維酸類物質的穩定固體制劑，即，無抗生素，尤其是在低劑量如10μg至10mg，例如約0.Img至約5mg下，這種劑量是口服活性的以便提供神經保護或用于神經變性病癥的治療。本發明是用于提供神經保護和用于治療神經變性疾病的方法，該方法包括口服給予穩定的含克拉維酸類物質的口服劑型組合物，所述組合物為即釋組合物或緩釋釋放組合物的形式。所述劑型可以由適于日常使用的克拉維酸或其衍生物或鹽，例如克拉維酸鉀或Clavitesse制備。本發明通過開發穩定的口服克拉維酸類物質藥物組合物和使用該組合物以提供神經保護和治療神經變性疾病的方法，克服并緩解了以上提及的缺陷和缺點。一般而言，本發明涉及穩定的固體藥物組合物的用途，尤其是包含克拉維酸類物質作為藥物活性成分的即釋或緩釋的組合物。該藥物組合物能夠以固體劑型如片劑形式、膠囊、丸劑、錠劑或粉末提供。這種固體藥物組合物能夠在一種或多種藥用賦形劑的存在下包含克拉維酸類物質，其中克拉維酸類物質的存在量為約10μg至約IOmg或，例如，約0.Img至約5mg。這種組合物在給予之后能夠提供治療有用量的克拉維酸類物質。克拉維酸類物質的實例包括克拉維酸、克拉維酸衍生物以及克拉維酸的藥用鹽。克拉維酸類物質能夠存在的量為組合物重量的約0.01%至約10%。在一些實施方式中，組合物的水分含量(濕量，moisturecontent)低于總重量的約4%。這種制劑是片劑、膠囊、丸劑、錠劑或粉末的形式。根據本發明的示例性固體藥物組合物在25°C和60%相對濕度下或在30°C和65%相對濕度下儲存3個月之后可具有低于10%的水分含量。在示例性的組合物中，克拉維酸類物質是克拉維酸鉀。克拉維酸鉀能夠作為，例如，粉末或作為與二氧化硅或微晶纖維素的11混合物提供。示例性組合物是即釋組合物，其在給予之后大約5至大約30分鐘內從藥片中釋放出超過80%的克拉維酸類物質。在示例性實施方式中，通過其中將克拉維酸鉀粉末在一種或多種藥用賦形劑存在下凍干的方法來制備這種組合物。在即釋組合物的一個實例中，該組合物能夠含有約10wt%至約20wt%的粘結劑或稀釋劑、約45wt%至約55wt%的填充劑(fi1Ier)、約20wt%至約40wt%的崩解劑和約3wt%至約6wt%的潤滑劑。在這種實施方式中，示例性粘結劑或稀釋劑是MaltrinM150，示例性填充劑是ProsolveSMCC50，示例性崩解劑是Pharmaburst和/或LHPCLH-Il和/或Acdisol，以及示例性潤滑劑是硬脂酸。在其它示例性實施方式中，這種組合物通過其中將克拉維酸鉀以11與二氧化硅或微晶纖維素的混合物在一種或多種藥用賦形劑存在下凍干的方法進行制備。在即釋組合物的另一實例中，藥物組合物能夠含有約50%-60%的填充劑、約20%-30%的崩解劑、約0.5%-5%的流動增強劑/防潮劑和/或約3%-6%的潤滑劑。在這種實施方式中，示例性填充劑是ftOsolveSMCC50，示例性崩解劑是Pharmaburst和/或Acdisol，示例性流動增強劑/防潮劑是Carbosil，而示例性潤滑劑是硬脂酸鎂。在另一實施方式中，藥物組合物是緩釋組合物，其在至少約4h內釋放克拉維酸鉀。緩釋組合物能夠通過在一種或多種藥用賦形劑存在下凍干克拉維酸鉀粉末或克拉維酸鉀與微晶纖維素的11混合物而進行制備。示例性賦形劑能夠包含一種或多種基質(matrix)、填充劑、助流劑和潤滑劑。在緩釋組合物的一個實例中，這種組合物能夠含有約20wt%至約40wt%的基質、約50wt%至約75wt%的填充劑、約0.Iwt%至約Iwt%的助流劑和約lwt%至約2襯％的潤滑劑。在這種實施方式中，示例性基質是KlucelLF,MethocelKlOOLVPremCR,EudragitS100、Carbopol971P、Carbopol974P、A型甲基丙烯酸酯共聚物(methacrylatecopolymertypeΑ)禾口B型甲基丙;I；希酸酉旨共聚物(methacrylatecopolymertypeB)及其混合物；示例性填充劑是無水乳糖、AvicelPH-112、AvicelPH-113、Isomalt,或其混合物；示例性助流劑是Carbosil，而示例性潤滑劑是硬脂酸鎂和滑石中的至少一種。在其它實施方式中，在本發明的方法中使用的固體藥物劑型通過以下進行制備提供克拉維酸類物質如克拉維酸、克拉維酸衍生物或克拉維酸的藥用鹽(藥學可接受的鹽，pharmaceuticalIyacceptablesalt)；將該克拉維酸類物質與至少一種賦形劑混合；將克拉維酸類物質和至少一種賦形劑的混合物造粒；以及凍干克拉維酸類物質和至少一種賦形劑的造粒混合物。造粒步驟可以是例如濕法造粒。示例性的克拉維酸類物質是克拉維酸鉀，例如以克拉維酸鉀粉末或克拉維酸鉀與二氧化硅或微晶纖維素的11混合物的形式。在示例性方法中，賦形劑是粘結劑、稀釋劑、填充劑、崩解劑、基質、填充劑、助流劑、流動增強劑、防潮劑和潤滑劑中的至少一種。該方法可以包括將所述劑型形成片劑或顆粒(珠體，bead)，并可選地用延遲釋放聚合物(delay-releasepolymer)對藥片或顆粒進行涂層。本發明包括口服給予根據本發明的穩定固體藥物組合物以提供對神經保護或神經變性病癥(例如帕金森氏病、阿茲海默氏病(Alzheimer'sdisease)或多發性硬化)的治療有效的克拉維酸類物質的量。本發明的其它實施方式涉及適用于口服給予的克拉維酸類物質的即釋和緩釋制劑的用途。本發明的其它實施方式涉及用于制備藥物制劑的凍干方法，其中凍干包括對水合藥物組合物脫水的干燥工藝過程。本發明其它實施方式涉及用于制備含有克拉維酸類物質的藥物組合物的方法和其作為藥物的用途。在其它實施方式中，本發明是通過口服給予穩定的口服制劑來治療神經變性疾病的方法，所述制劑包括治療有效量的克拉維酸類物質，例如克拉維酸、克拉維酸衍生物或克拉維酸的藥用鹽。其它示例性的實施方式是提供神經保護的方法，該方法包括口服給予含有克拉維酸類物質的穩定口服制劑。神經保護包括防止由神經變性疾病引起的細胞喪失(細胞損失，cellloss)或細胞死亡(細胞凋亡，celldeath)。另一實施方式是防止神經細胞喪失或死亡的方法，該方法包括口服給予克拉維酸類物質的穩定口服制劑。根據本發明的方法可治療的神經變性疾病的實例包括帕金森氏病、阿茲海默氏病和多發性硬化。治療可包括，例如，減小發作(突然發作，seizure)或震顫(tremor)的頻率、發病時間或嚴重性；減少失憶；或減少神經細胞死亡。在根據本發明的示例性方法中，克拉維酸類物質是克拉維酸鉀。所述穩定口服制劑的形式可以是片劑、膠囊、丸劑、錠劑、溶液、懸浮液、口含片劑或舌下片劑(buccalorsublingualtablet)、口服崩解劑、薄膜或粉末。所述制劑可以是在至少約4小時內釋放克拉維酸類物質的緩釋組合物；在少于約0.5小時內釋放克拉維酸類物質的即釋組合物；或其它形式。在一些實施方式中，所述克拉維酸鉀是克拉維酸鉀粉末或克拉維酸鉀與二氧化硅或微晶纖維素的11混合物。可用于本發明的制劑可以包括基質；填充劑；助流劑；以及潤滑劑中的一種或多種。基質可以是，例如，MethocelKlOOLVPremCR、EudragitS100、Carbopol971P、Carbopol974P、A型甲基丙烯酸酯共聚物、B型甲基丙烯酸酯共聚物、或其混合物。填充劑可以是，例如無水乳糖、AvicelPH-112、AvicelPH-113、Isomalt，或其混合物。助流劑可以是，例如Carbosil，以及示例性潤滑劑是硬脂酸鎂、滑石及其混合物。制備在本發明的方法中使用的制劑的示例性方法包括將克拉維酸類物質與至少一種賦形劑混合；將克拉維酸類物質和至少一種賦形劑的混合物進行造粒；然后凍干克拉維酸類物質和至少一種賦形劑的造粒混合物。根據本發明，所述制劑可以以約0.OOlmg/kg/天至約1.Omg/kg/天的克拉維酸類物質的量給予。在一些實施方式中，所述制劑可以以約0.01mg/kg/天至約1.Omg/kg/天的量給予。所述制劑可以以單日劑量或以多劑量給予。圖1示出了克拉維酸類物質即釋制劑，樣品B(·)和C(〇)的體外溶解特性曲線。圖2示出了克拉維酸類物質緩釋制劑，樣品F的體外溶解特性曲線。圖3示出了克拉維酸類物質緩釋制劑，樣品I的體外溶解特性曲線。圖4舉例說明了樣品D(5mg/片的克拉維酸鉀與微晶纖維素的11混合物)在250C/60%濕度(·)和30°C/65%濕度(▲)下的穩定性。圖5舉例說明了樣品E(5mg/片的克拉維酸鉀與二氧化硅的11混合物)在250C/60%濕度(·)和30°C/65%濕度(▲)下的穩定性。圖6舉例說明了樣品F(5mg/片的克拉維酸鉀與微晶纖維素的11混合物)在2-80C(〇)，25°C/60%濕度(·)和30°C/65%濕度(▲)下的穩定性。圖7舉例說明了樣品G(5mg/片)在2-8°C(〇)，25°C/60%濕度(·)和300C/65%濕度(▲)下的穩定性。圖8示出了酪氨酸羥化酶(TH)在黑質致密部(substantianigraparscompacta,SNpc)中的免疫組織化學。與正常組相比，MPTP(1_甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶)_鹽水組中TH-陽性神經元的數量顯著減少。在MPTP-克拉維酸類物質治療組中很好地保留了TH-陽性神經元的數量。圖9示出了在MPTP(1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶)治療的動物中對黑質致密部(SNpc)神經元存活(neuronsurvival)進行克拉維酸類物質治療的效果。圖10闡明了在小鼠PD模型中使用爬桿實驗(poletest)，克拉維酸類物質對MPTPd-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶)誘導的神經毒性的行為影響(behavioraleffect)0圖11示出了在CA3區域克拉維酸類物質對紅藻氨酸鹽(kainate，KA)誘導的海馬(hippocampal)神經毒性的影響。圖12示出了在正常、紅藻氨酸鹽+鹽水、和紅藻氨酸鹽+克拉維酸類物質治療組中，CA3區域中甲酚紫(cresylviolet)染色的結果。具體實施例方式如本文中所用的，術語克拉維酸類物質包括克拉維酸(I)、克拉維酸的藥用鹽、鹽組合物和衍生物，如酯。藥用的克拉維酸鹽的實例是克拉維酸鉀。克拉維酸鉀可以作為純化合物或作為例如Clavitesse，克拉維酸鉀與微晶纖維素的11混合物、或克拉維酸鉀與二氧化硅的11混合物(可以從荷蘭DSMAnti-InfectivesB.V.獲得)提供。權利要求1.一種治療神經變性疾病的方法，包括口服給予含有治療有效量的克拉維酸類物質的穩定口服制劑；其中，所述克拉維酸類物質選自由克拉維酸、克拉維酸衍生物或克拉維酸的藥用鹽所構成的組。2.一種提供神經保護的方法，包括口服給予含有治療有效量的克拉維酸類物質的穩定口服制劑；其中，所述克拉維酸類物質選自由克拉維酸、克拉維酸衍生物或克拉維酸的藥用鹽所構成的組。3.一種預防神經元細胞喪失或死亡的方法，包括口服給予含有治療有效量的克拉維酸類物質的穩定口服制劑；其中，所述克拉維酸類物質選自由克拉維酸、克拉維酸衍生物或克拉維酸的藥用鹽所構成的組。4.根據權利要求2所述的方法，其中，神經保護包括預防由神經變性疾病引起的細胞喪失或細胞死亡。5.根據權利要求1或4中一項所述的方法，其中，所述神經變性疾病選自由帕金森氏病、阿茲海默氏病和多發性硬化所構成的組。6.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，其中，所述克拉維酸類物質是克拉維酸鉀。7.根據權利要求1-6中任一項所述的方法，其中，所述口服制劑為片劑、膠囊、丸劑、錠劑、溶液、懸浮液、口含或舌下片劑、口服崩解片劑、薄膜或粉末的形式。8.根據權利要求1-7中任一項所述的方法，其中，所述制劑是在至少約4小時釋放所述克拉維酸類物質的緩釋組合物。9.根據權利要求1-7中任一項所述的方法，其中，所述制劑是在少于約0.5小時內釋放所述克拉維酸類物質的即釋組合物。10.根據權利要求6的方法，其中，所述克拉維酸鉀是克拉維酸鉀粉末、或作為與二氧化硅或微晶纖維素的11混合物的克拉維酸鉀。11.根據權利要求1-10中任一項所述的方法，其中，所述制劑通過以下方法制備混合所述克拉維酸類物質與至少一種賦形劑；對所述克拉維酸類物質和所述至少一種賦形劑的混合物進行造粒；以及對經造粒的所述克拉維酸類物質和所述至少一種賦形劑的混合物進行凍干。12.根據權利要求1-11中任一項所述的方法，其中，所述制劑以提供約0.001mg/kg/天至約1.Omg/kg/天的克拉維酸類物質的量給予。13.根據權利要求1-12中任一項所述的方法，其中，所述制劑以單次日劑量給予。14.根據權利要求1-13中任一項所述的方法，其中，所述制劑以多劑量給予。15.根據權利要求1-14中任一項所述的方法，其中，治療包括減小發作或震顫的頻率、發作時間或嚴重性。16.根據權利要求1-15中任一項所述的方法，其中，治療包括減少記憶喪失。17.根據權利要求1-16中任一項所述的方法，其中，所述治療包括減少神經元細胞死亡。18.根據權利要求1-17中任一項所述的方法，其中，所述制劑包括以下中的一種或多種基質、填充劑、助流劑以及潤滑劑。19.根據權利要求18所述的方法，其中，所述基質選自由MethocelKlOOLVPremCR、EudragitS100,Carbopol971P,Carbopol974P、A型甲基丙烯酸酯共聚物和B型甲基丙烯酸酯共聚物以及它們的混合物所構成的組；所述填充劑選自由無水乳糖、AvicelPH-112、AvicelPH-113、Isomalt、以及它們的混合物所構成的組；所述助流劑是Carbosil以及所述潤滑劑是硬脂酸鎂和滑石中的至少一種。全文摘要本發明總體上涉及穩定固體藥物組合物的用途，所述藥物組合物包括在即釋或緩釋固體劑型中作為藥物活性成分的克拉維酸類物質。所述組合物可用于治療神經變性疾病、提供神經保護、或防止神經元細胞喪失或死亡的方法中。示例性的神經變性疾病包括帕金森氏病、阿茲海默氏病和多發性硬化。文檔編號A61P25/28GK102413814SQ201080018447公開日2012年4月11日申請日期2010年4月29日優先權日2009年4月29日發明者安昌浩,李永福,愛德華·卡爾·朔爾茨,許永范,金德中申請人:瑞恩藥品公司