專利名稱：一種活性牛蒡寡糖在水產養殖中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種活性牛蒡寡糖在養殖水產動物方面的應用，尤其涉及一種活性牛 蒡寡糖作為飼料營養成分和免疫增強劑在水產養殖中的應用。
背景技術：
隨著漁業生產的日益發展，我國的水產養殖取得了極大成就，養殖產量持續、穩步 增長，成為世界第一養殖大國。但是近年來，隨著集約化程度的不斷加強，養殖密度的加大 及養殖環境的不斷惡化，隨之帶來的病害日趨嚴重，這給養殖業造成了巨大的經濟損失。因 此，水產動物的健康養殖及疾病防治已越來越受到人們的關注。目前，對水產養殖動物疾病的控制主要有3種方法即化學療法、疫苗接種和使用 免疫增強劑。化學療法是目前最主要的藥物防治方法，而其最常使用的是抗生素類藥物，我國 的防治對策也基本依靠抗生素類藥物。由于養殖者在藥物的選擇和用量上存在一定混亂， 引起耐藥性菌株增加、破壞或干擾了水體原有正常微生物區系的生態平衡和危害養殖生態 環境等許多不良后果，從而增加了水產養殖動物感染病菌的機會，造成水產品品質的下降 和健康安全隱患。并且，抗生素在水體中和水產動物體內的殘留也會威脅到人類的健康和 安全。世界上許多國家已經禁止多種抗生素在水產養殖中的應用。當前，先進國家對付養殖病害中所采用的疫苗接種技術已進入疫苗實用化階段， 疫苗雖然可以成為控制水產養殖動物疾病最直接有效的方法，但是目前疫苗的開發和廣泛 應用也有困難。由于免疫反應具有特異性，一種疫苗只能特異地預防相應的某種疾病，所以 實際作用也非常有限。免疫增強劑由于能彌補化學療法和疫苗法的不足，被認為是一種比化學療法更安 全、比疫苗法更有廣泛效力的防治方法。用免疫學的方法改善水產養殖動物的體質，增強它 們對病原微生物的抵抗力不失為一種好方法。健康意識的提高以及加入WT0，對我國水產品 的品質提出了更高的要求。在這種“綠色養殖”的大環境下，越來越多的國內外學者進行深 入研究，期望研制一種產品。該產品應該既具有性質穩定，又無需要特殊加工技術就能直接 使用，不但可以直接提高水產養殖動物的免疫力和抗病力，還可以促進動物的生長，增加動 物成活率和生長率，改善養殖動物的營養狀況，以實現防在先、治在后的健康養殖目標。牛蒡寡糖是一種采用生物技術處理從菊科植物牛蒡的根部提取分離的天然水溶 性的功能性低聚糖，在技術上突破了傳統的酶法合成或水解生產不能控制聚合程度的弊 端。它的生產成本較低，純度較高，均一性和穩定性較好，具有其它寡糖不可比擬的優越性， 已經獲得國家發明專利授權(ZL03156256.6)。功能實驗表明，牛蒡寡糖能顯著促進機體 胃腸道內的有益菌群的生長和增殖，是有效的雙歧桿菌促生長因子。它能促進農作物的生 長，誘導提高作物的系統抗性，在農業上是一種很好的抗病誘導因子，已經獲得國家發明專 利授權(ZL200710013126.2)。牛蒡寡糖還具有較強的調節小鼠體液免疫功能、小鼠巨噬細 胞吞噬功能和促進小鼠脾淋巴細胞增殖的功能，從而提高動物機體的非特異性免疫力，可以應用在制備具有增強免疫功能的抗腫瘤藥物和保健食品上，已經獲得國家發明專利授權 (ZL200810138023. 3)。然而，牛蒡寡糖作為一種活性寡糖，在動物飼料添加劑中的研究剛剛 起步，在水產養殖方面的應用目前國內外尚未有報道。
發明內容
本發明的目的是為了解決現有水產養殖中病害防治技術所存在的不足，提供了一 種活性牛蒡寡糖作為免疫增強劑在水產養殖中的應用，從而減少抗生素在水產養殖中的應 用，以確保飼料和水產品安全與衛生、改善水產養殖動物的體質、增強其對病原微生物的抵 抗力和免疫力，進而獲取一種無污染、無殘留、促生長且能提高動物非特異性免疫力、價格 低廉、使用簡便可行的多功能免疫增強劑應用方法。本發明是通過下述技術方案來實現上述發明目的的一種活性牛蒡寡糖在水產養殖中的應用，其特征在于活性牛蒡寡糖作為免疫增 強劑在水產養殖中的應用，所述牛蒡寡糖(Burdockoligosaccharide，BOS)為從牛蒡根中 提取分離出的一種水溶性和穩定性較好、純度較高的天然寡糖，寡糖含量95%以上，平均分 子量在2134Da，由12個呋喃型的果糖以β (2-1)糖苷鍵相連，末端為一個吡喃型葡萄糖以 α (1-2)糖苷鍵連接在果糖上的線性直鏈結構的、聚合度為13，在水產養殖中作為促生長 劑和免疫增強劑的應用時，所述牛蒡寡糖添加量為飼料總重量的0. 5 5. 0%。所述在水產養殖中的應用對象主要為鲆鰈魚類。所述活性牛蒡寡糖作為免疫增強劑應用時，活性牛蒡寡糖添加量為飼料總重量的 2. 0%。本發明的有益效果為1本發明所述活性牛蒡寡糖有著廣泛的生物學作用，是一種比化學療法更安全、 比疫苗法更有廣泛效力的、能改善水產養殖動物的體質、促生長、增強抗病力的多功能的免 疫增強劑。選擇本應用在作為水產養殖動物的免疫增強劑的同時還可以作為飼料營養成 分，把它們添加到飼料中，養殖動物的成活率、增重率和增長率以及飼料利用率均比對照組 顯著提高，還能改善養殖水產品的營養狀況，其體蛋白質含量明顯提高，體脂肪含量有所降 低。2本發明免疫增強劑可以減少或免除抗生素的使用，提高水產養殖動物的非特異 性防御機制，提高水產食品質量安全，減少對環境的污染。可以直接添加到飼料中，口服投 喂。3該活性牛蒡寡糖免疫增強劑的原料來源穩定，生產工藝簡單，成本低廉，使用方 法方便可行。
具體實施例方式以下結合實施例，對本發明作進一步的說明。 一種活性牛蒡寡糖在水產養殖中的應用，所述活性牛蒡寡糖作為免疫增強劑在水 產養殖中的應用，所述牛蒡寡糖(Burdockoligosaccharide，B0S)為從牛蒡根中提取分離 出的一種水溶性和穩定性較好、純度較高的天然寡糖，寡糖含量95%以上，平均分子量在 2134Da,由12個呋喃型的果糖以β (2-1)糖苷鍵相連，末端為一個吡喃型葡萄糖以α (1-2)糖苷鍵連接在果糖上的線性直鏈結構的、聚合度為13，在水產養殖中作為促生長劑和免疫 增強劑的應用時，所述牛蒡寡糖添加量為飼料總重量百分比為0. 5%至5. 0%。所述在 水產養殖中的應用對象主要為鲆鰈魚類。優選地，所述活性牛蒡寡糖作為免疫增強劑應用時，活性牛蒡寡糖添加量為飼料 總重量的2.0%。活性牛蒡寡糖飼料的配制稱取飼料總重量的0. 5 5. 0%的活性牛蒡寡糖加入飼料中，充分混勻后，備用。 該寡糖包埋于飼料內部能夠減緩寡糖在水體中的溶解速率，從而能最大限度地提高寡糖的 利用效率。本發明的活性牛蒡寡糖經養殖試驗證實作為新型免疫增強劑在水產養殖中具有 促生長、改善水產養殖動物的體質和營養狀況以及提高養殖動物的免疫力和抗病力等多種 功能。下面結合實施例對本發明作進一步詳細說明，但本發明要求保護的范圍并不限于此 例的范圍。實施例1試驗用大菱鲆幼魚由煙臺開發區天源水產有限公司提供。選擇健康均勻的馴化后 的大菱鲆1200尾隨機分為5組，各設1平行組，分別使用不同的餌料，按正常的飼養管理程 序進行。第5組為對照組，飼喂基礎飼料。第1、2、3和4組為試驗組，分別飼喂含0. 5%, 1.0%、2. 0%和5. 0%牛蒡寡糖的飼料，于網箱(120cmX IOOcmX 100cm)中進行流水充氣養 殖。養殖用水為地下海水與自然海水混合后，經過一次性沙濾流入試驗網箱。試驗期間水質 狀況溶解氧DO為6. 0 8. Omg/L, pH為7. 8 8. 1，溫度T為18 22°C，鹽度S為30 31。試驗在天源水產有限公司養殖車間內進行，試驗期為100d，測定其生長的影響。(1)對大菱鲆成活率、增重率和魚體增長率指標測定試驗期間大菱鲆成活率、增重率和魚體增長率分別如表1、表2和表3所示。試驗組魚體的生長性能顯著優于對照組，各生長指標有不同程度的提高。由表1 可見，試驗期間試驗組大菱鲆的平均成活率均在95. 0%以上，而對照組成活率為94. 0%， 試驗組的成活率高于對照組。由表2可見，試驗組大菱鲆增重率顯著優于對照組(P < 0.01)，說明所用牛蒡寡糖免疫增強劑對大菱鲆增重有促進作用。另外，試驗組魚的飼料 利用率均明顯高于對照組(P < 0.01)，說明飼料中添加牛蒡寡糖免疫增強劑在一定程度 上可以促進大菱鲆對飼料的消化吸收，提高飼料利用率，使飼料系數下降，繼而調控機體代 謝，促進生長。由表3可見，試驗期間各試驗組魚體增長率顯著優于對照組(P < 0. 05)，說 明牛蒡寡糖免疫增強劑還能促進大菱鲆魚體的生長。結果表明，在大菱鲆的基礎飼料中添 加適量的牛蒡寡糖，對大菱鲆表現出優良的促生長效果，能夠顯著提高飼料利用率、降低飼 料系數，其中試驗組3 (B0S 2.0%)的使用效果最為顯著。表1試驗組與對照組大菱鲆的成活率
權利要求
1.一種活性牛蒡寡糖在水產養殖中的應用，其特征在于活性牛蒡寡糖作為免疫增強 劑在水產養殖中的應用，所述牛蒡寡糖為從牛蒡根中提取分離出的一種水溶性和穩定性較 好、純度較高的天然寡糖，寡糖含量95%以上，平均分子量在2134Da，由12個呋喃型的果糖 以β (2-1)糖苷鍵相連，末端為一個吡喃型葡萄糖以α (1-2)糖苷鍵連接在果糖上的線性 直鏈結構的、聚合度為13，在水產養殖中作為促生長劑和免疫增強劑的應用時，牛蒡寡糖添 加量為飼料總重量的0. 5-5. 0%。
2.根據權利要求1所述的活性牛蒡寡糖在水產養殖中的應用，其特征在于所述在水 產養殖中的應用對象為鲆鰈魚類。
3.根據權利要求1所述的活性牛蒡寡糖在水產養殖中的應用，其特征在于所述活性 牛蒡寡糖作為免疫增強劑應用時，活性牛蒡寡糖添加量為飼料總重量的2. 0%。
4.根據權利要求1-3任一所述的活性牛蒡寡糖在水產養殖中的應用，其特征在于含 活性牛蒡寡糖飼料的制備方法為將活性牛蒡寡糖加入飼料中，充分混勻后備用。
全文摘要
本發明公開了一種活性牛蒡寡糖在水產養殖中的應用，活性牛蒡寡糖作為免疫增強劑在水產養殖中的應用，所述牛蒡寡糖為從牛蒡根中提取分離出的一種水溶性和穩定性較好、純度較高的天然寡糖，寡糖含量95％以上，平均分子量在2134Da，由12個呋喃型的果糖以β(2-1)糖苷鍵相連，末端為一個吡喃型葡萄糖以α(1-2)糖苷鍵連接在果糖上的線性直鏈結構的、聚合度為13，在水產養殖中作為促生長劑和免疫增強劑的應用時，牛蒡寡糖添加量為飼料總重量的0.5-5.0％。本發明的有益效果促進養殖動物的生長、能改善動物體的營養成分和提高動物的非特異性免疫力和抗病力，在抵抗細菌感染方面也有很高的活性；使用方法簡便可行、能適用于多種水產養殖。
文檔編號A61P37/04GK102091089SQ20101055309
公開日2011年6月15日 申請日期2010年11月22日 優先權日2010年11月22日
發明者孫丕喜, 李繼業, 郝林華 申請人:國家海洋局第一海洋研究所