專(zhuān)利名稱(chēng)：紅茂草生物堿的提取方法及由該方法獲得的提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥提取物，尤其涉及紅茂草的提取方法及由該方法獲得的提取物。
背景技術(shù)：
紅茂草[Dicranostigma 1 印topodum(Maxim. )Fedde]，又名禿瘡花、禿子花、勒馬回，屬罌粟科禿瘡花屬二年生或多年生草本植物，《本草綱目》中記載為石長(zhǎng)生，生長(zhǎng)于海拔 600-1300m的丘陵，草坡、路邊、農(nóng)田埂或墻上、屋頂?shù)忍?。紅茂草在民間全草入藥，能清熱解 毒、消腫止痛、殺蟲(chóng)，治療扁桃腺炎，咽喉痛、淋巴結(jié)核(癟癘、老鼠瘡)，禿疤，疥癬等癥。文獻(xiàn)報(bào)道紅茂草含有多種異喹啉類(lèi)生物堿，全草主要含異紫堇啡堿(又名右 旋異紫堇定)(d-isocorydine)、紫堇堿(Corydine)、木蘭堿(Magnflorine)、異紫堇堿 (lsocorydine)、原阿片堿(Protopine)。暢若行等分離、提純和鑒定了紅茂草中的異紫 堇堿、紫堇堿、原阿片堿，見(jiàn)《藥學(xué)通報(bào)》，1981 (2) :52以及《藥物分析雜志》，1982，2(5) 273-277。從紅茂草中提取分離的總生物堿有效成分具有多種藥理作用。陳正山等報(bào)道了紅 茂草提取物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響，《上海免疫學(xué)雜志》，2001，21(4) 216-218 ；毛 愛(ài)紅等報(bào)道了紅茂草提取物對(duì)小鼠免疫性肝損傷的影響，《中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)》，2004，20(8) 940-943 ；龔燕妮等報(bào)道了紅茂草提取物對(duì)荷廇鼠免疫功能的影響，《蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué) 版)》，2008，34(3) 48-52 ；王廷璞等報(bào)道了紅茂草提取物對(duì)羊傳染性膿皰病的病原體Orf 病毒具有抑制作用，《中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志》，1998，1(1) 9-11 ；薛掌林報(bào)道了紅茂草提取物對(duì)雞 傳染性支氣管炎病毒具有抑制作用，《甘肅畜牧獸醫(yī)》，2004，174(1) :16-17;趙強(qiáng)等報(bào)道了 紅茂草提取物對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、糞腸桿菌具有抑制作用，《中國(guó)獸醫(yī) 科學(xué)》，2008，38 (12) :1098-1101。此外，陳筌等對(duì)紅茂草提取物的藥理活性進(jìn)行了綜述，公 開(kāi)了紅茂草提取物對(duì)結(jié)核病的治療作用，《天水師范學(xué)院學(xué)報(bào)》，2008，28 (2) :49-52。文獻(xiàn)報(bào)道的紅茂草總生物堿的提取方法有水提法和醇提法。水提法的工藝步驟主 要包括紅茂草粉末用水提取，用75%乙醇沉淀雜質(zhì)，去除乙醇得到紅茂草生物堿濃縮液； 見(jiàn)王廷璞等《中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志》，2008，第6期，41-44頁(yè)以及王廷璞等《安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)》2008， 36(17) :7294-96。醇提法的工藝步驟包括75%乙醇提取紅茂草粉末，85%乙醇沉淀雜質(zhì)， 去除乙醇得到紅茂草濃縮液；見(jiàn)王廷璞等《中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志》，2008，第6期，41-44頁(yè)?，F(xiàn)有技術(shù)公開(kāi)的提取方法中，醇提法成本高，水提法則收率較低，而且兩種方法得 到的紅茂草濃縮液體積較大，不適合大規(guī)模生產(chǎn)，因此本領(lǐng)域迫切需要成本低、收率高、適 合大規(guī)模生產(chǎn)的紅茂草生物堿提取方法。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種成本較低，適合大規(guī)模生產(chǎn)的紅茂草生物 堿提取方法及由該方法獲得的提取物。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)下述方法實(shí)現(xiàn)的。
一種紅茂草生物堿的提取方法，其特征是將紅茂草全草用水提取，過(guò)濾或離心； 濾液加入醇溶劑沉淀，過(guò)濾或離心；取濾液濃縮至原液量的1/10，成浸膏狀態(tài)，進(jìn)行凍干處理。 所述的紅茂草全草可以事先經(jīng)過(guò)切片或粉碎等處理，以增加藥材與水的接觸。所述水提取方式包括但不限于冷浸提取法、超聲提取法、索氏提取法等，優(yōu)選超聲 提取法。其中超聲提取0.5 3小時(shí)，優(yōu)選1小時(shí)。所述的水提取溫度是30-80°C，優(yōu)選60-80°C，更優(yōu)選80°C。所述的提取用水與紅茂草全草的液料比(體積/重量)為10 1-50 1，優(yōu)選 30 1-45 1，更優(yōu)選 30 1。所述的醇溶劑包括但不限于甲醇、乙醇、異丙醇或丁醇等，優(yōu)選乙醇。醇溶劑的體 積分?jǐn)?shù)為35-95 %，優(yōu)選75 %。所述的過(guò)濾工藝包括但不限于常壓或減壓過(guò)濾、微濾、超濾。所述的濾液在常壓或減壓的條件下進(jìn)行濃縮，其中的減壓狀態(tài)為0. 09-0. IMPa。進(jìn) 一步的，所述濾液可在室溫或加熱的條件下進(jìn)行濃縮。例如，采用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器實(shí)現(xiàn)濃 縮。所述的凍干過(guò)程，預(yù)凍溫度為-20至-70°C，優(yōu)選-40°C至_70°C，更優(yōu)選_70°C。 所述的真空冷凍干燥過(guò)程可以是程序性降溫，也可以是固定溫度的冷凍，溫度范圍 是-ere。所述的冷凍真空干燥的真空度為本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)的凍干真空條件，優(yōu)選 0. 01 IMPa。本發(fā)明所述方法制備的紅茂草生物堿可以添加生物可接受的輔料進(jìn)一步制成片 齊U、膠囊等劑型。本發(fā)明還包括由上述方法獲得的紅茂草生物堿。本發(fā)明制備紅茂草生物堿相對(duì)于傳統(tǒng)的水提取工藝的方法提取率高、重現(xiàn)性好， 且不需要大量使用乙醇等有機(jī)溶劑，極大地降低了成本，適于工業(yè)化生產(chǎn)紅茂草生物堿。
圖1、樣品和對(duì)照品的UV光譜圖2、紅茂草總生物堿標(biāo)準(zhǔn)曲線圖3、不同超聲時(shí)間對(duì)紅茂草中生物總堿提取率的影響圖4、不同液料比對(duì)紅茂草中生物總堿提取率的影響圖5、不同pH值對(duì)紅茂草中生物總堿提取率的影響圖6、溫度對(duì)紅茂草中生物總堿提取率的影響圖7、不同乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)紅茂草中生物總堿提取率的影響
具體實(shí)施例方式原藥材野生或種植的紅茂草全草收獲后洗凈、晾干，切碎，制成粉末備用。紅茂草生物堿的鑒別紅茂草提取物配制成水溶液，加入碘化鉍鉀溶液3滴，生成 淺黃色沉淀。紅茂草生物堿的定量
異紫堇啡堿(isocorydine)，又名(+)_異紫堇定、異可利定，是紅茂草的主要活性 成分之一。本發(fā)明用鹽酸異可利定(IS0C0RYDINEHYDR0CHL0RIDE)，CAS號(hào)13552-72_2作 為對(duì)照品(購(gòu)于長(zhǎng)沙?？铺厣夹g(shù)有限公司)，用于紅茂草總生物堿的定量。將對(duì)照品(異紫堇啡堿)溶液與樣品溶液在190-500nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，以 確定紅茂草總生物堿的最大吸收波長(zhǎng)。經(jīng)試驗(yàn)確定，紅茂草總生物堿提取液在210nm處有 最大吸收，見(jiàn)圖1 (曲線1為對(duì)照品溶液，曲線2為樣品溶液)。準(zhǔn)確稱(chēng)取生物堿對(duì)照品4mg，加去離子水4ml制定濃度為lmg/ml的對(duì)照液母液。 測(cè)定時(shí)加去離子水稀釋至濃度分別為0. 01,0. 02,0. 03,0. 04,0. 05,0. 06mg/ml。以去離子水 為空白對(duì)照，在210nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度0.D值，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。以濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo) (X)，吸光度A值為縱坐標(biāo)(Y)，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，見(jiàn)圖2。由標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合的回歸方程為Y = 0.43956Χ-0. 00546。表1制作標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)
權(quán)利要求
1.一種紅茂草生物堿的提取方法，其特征是將紅茂草全草用水提取，過(guò)濾或離心；濾 液加入醇溶劑沉淀，過(guò)濾或離心；取濾液濃縮至原液量的1/10，成浸膏狀態(tài)，進(jìn)行凍干處理。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的提取用水與紅茂草全草的液料比(體 積/重量)為10 1 50 1。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，所述的提取用水與紅茂草全草的液料比(體積 /重量)為30 1。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的水提取過(guò)程在溫度30 80°C的條件下 進(jìn)行。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的水提取過(guò)程用超聲處理0.5 3小時(shí)。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，所述的醇溶劑沉淀是指加入終體積分?jǐn)?shù)為 35 95%的乙醇進(jìn)行沉淀。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征是，所述的醇溶劑沉淀是指加入終體積分?jǐn)?shù)為 75%的乙醇進(jìn)行沉淀。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的凍干處理包括預(yù)冷凍和真空冷凍干燥。
9.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征是所述的凍干處理是指在-70 -20°C冷凍過(guò) 夜，然后在-61°C、0. OllMpa條件下冷凍干燥24 48小時(shí)。
10.一種紅茂草生物堿，其特征是所述的紅茂草生物堿是通過(guò)如權(quán)利要求1-9任意一 項(xiàng)所述的方法提取得到的。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種紅茂草生物堿的提取方法及其制備的提取物，所述的方法是通過(guò)水提取紅茂草全草，并經(jīng)乙醇沉淀，濃縮并經(jīng)過(guò)凍干處理獲得紅茂草生物堿。本發(fā)明公開(kāi)的方法獲得的提取物生物堿含量高，且具有提取率高、重現(xiàn)性好的優(yōu)勢(shì)，適合大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化。
文檔編號(hào)A61P11/04GK102000158SQ20101052650
公開(kāi)日2011年4月6日 申請(qǐng)日期2010年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月29日
發(fā)明者劉小東, 李一婧, 李強(qiáng), 焦成瑾, 王廷璞, 袁毅君, 趙菲佚 申請(qǐng)人:天水師范學(xué)院, 王廷璞