專利名稱：水溶性還原型輔酶q10組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，具體涉及一種輔酶QlO組合物及其制備方法。
背景技術：
輔酶Q是在從細菌到哺乳動物的生物體中廣泛分布的必需成分。輔酶Q的基 本結構是含有類異戊二烯側鏈的2，3-二甲氧基-5-甲基苯醌核，在人體中的輔酶Q含有 十個這樣的基本結構，即輔酶Q10，1957年首次由Frederrick從牛心肌中分離得到。已 知在人體中，輔酶Q的側鏈具有10個重復結構即輔酶QlO為主要成分。輔酶QlO (分子式 C59H9tlO4)是作為生物體的細胞中的線粒體的電子傳遞體系構成成分存在的生理學成分，在 生物體內反復進行氧化和還原而在電子傳遞體系中作為傳遞成分而起作用。已知輔酶QlO具有氧化型和還原型兩種，在生物體內通常約40-90%以還原型存 在。與氧化型輔酶QlO相比，還原型輔酶QlO顯示高水平的口服可吸收性。還原型輔酶QlO是脂溶性物質，難溶于水，還原型輔酶QlO對光、熱、空氣不穩定在 空氣暴露極短時間即被氧化，變成輔酶Q10，生物活性大大降低。針對這種情況，近年已經開 發出多種提高口服給藥生物利用度及注射給藥技術的方法，如包合技術、自乳化技術、脂質 體等。包合技術是解決還原型輔酶QlO溶解度和提高其穩定的一個較好方法。CN03802446. 2公開了一種還原型輔酶QlO的穩定方法和組合物，其方法是將還 原型輔酶Q10、油脂(其中橄欖油除外)和/或多元醇制成實質上不阻礙還原型輔酶QlO 的穩定化的組合物。另外，還制成含有還原型輔酶Q10、聚甘油脂肪酸酯與油脂和/或多元 醇的組合物。另外CN02813705. 1 和 CN02824009. X02824009. X 也公開了還原型輔酶 QlO 的穩定 方法，其方法是將氧化型輔酶QlO在一定條件下還原成還原型輔酶QlO使其穩定。然而，以上專利均未報道有如何制備穩定的水溶性還原型輔酶Q10。
發明內容
本發明的目的之一是提供一種水溶性還原型輔酶QlO組合物，它的溶解度高、有 效物質含量高、穩定性高、成本低。本發明的目的之二是提供一種水溶性還原型輔酶QlO組合物的制備方法。本發明的技術解決方案是
一種水溶性還原型輔酶QlO組合物，包括原料輔酶Q10、水溶性載體和乳化劑，其特征 在于各原料的質量份組成為還原型輔酶QlO 5-15、水溶性載體10-120、乳化劑0.5-40 ； 其中所述的水溶性載體為麥芽糊精、羧甲基纖維素(CMC)、純膠、可溶性淀粉、乳糖、果 糖、山梨醇、甘露醇、阿拉伯膠、卡拉膠中的一種或幾種；
3所述的乳化劑為非離子表面活性劑。固體分散技術是將難溶性藥物高度分散在另一種固體載體中的技術，它的優點是 可以增加難溶性藥物的溶解度和溶出速率，缺點是固體分散體的分散狀態穩定性不高。本 發明采用包合技術與固體分散技術相結合的方法將難溶性的還原型輔酶Q10、水溶性載體 與乳化劑混合制成一種新的固體分散體，它是一種新的物相，即還原型輔酶QlO被分散包 合在水溶性載體中，并通過噴霧干燥獲得噴霧粉，即粉狀固體，擴大了表面積；另外，本發明 的水溶性載體本身對藥物的溶出有促進作用，從而使藥物的溶解度大大提高，改善了藥物 的吸收和生物利用度。本發明通過水溶性載體與乳化劑材料的選擇及配比試驗，發現制得的水溶性還原 型輔酶QlO組合物，溶出速度快，無懸浮或沉淀，且不易被氧化成氧化型輔酶，穩定性提高。所述的水溶性還原型輔酶QlO組合物還包括0. 1-2質量份的活性成分，所述的活 性成分為維生素、氨基酸、礦物質、多酚、有機酸、糖類、肽或蛋白質中的一種或幾種。所述的乳化劑為多元醇型非離子表面活性劑或聚氧乙烯型非離子表面活性劑。所述的多元醇型非離子表面活性劑為蔗糖脂肪酸酯類、甘油脂肪酸酯類、聚甘油 脂肪酸酯類、吐溫類、山梨醇脂肪酸酯類等非離子表面活性劑。所述的聚氧乙烯型非離子表面活性劑為賣澤類、芐澤類、聚氧乙烯硬脂酸酯類、泊 洛沙姆等非離子表面活性劑。更優選地，所述的聚氧乙烯型非離子表面活性劑為聚氧乙烯-40-硬脂酸酯。一種水溶性還原型輔酶QlO組合物的制備方法，用還原型輔酶QlO與乳化劑直接 加熱熔融制備或先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑后再與乳化劑混合溶解制備
所述還原型輔酶QlO與乳化劑直接加熱熔融制備的方法是按質量份取還原型輔酶 Q10、水溶性載體和乳化劑，溶于相當于水溶性載體10-20倍水中，加熱至40-60°C，然后用 剪切分散機或均質機使溶液均一，再噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成品；
所述先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑后再與乳化劑混合溶解制備的方法是按質量 份取還原型輔酶QlO和乳化劑，加入相當于還原型輔酶QlO的10倍量的有機溶劑中，攪拌 成澄清透明溶液作備用液；然后按質量份取水溶性載體，溶于相當于水溶性載體10-20倍 的40-60°C水中，攪拌成澄清溶液，以0. 2-0. 5ml/s的滴加速率加入備用液，然后用均質機 均質兩次后，取出噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成品。所述先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑、再與乳化劑混合溶解制備的方法還包括 在攪拌澄清溶液前按質量份加入活性成分。所述的有機溶劑是丙酮、乙酸乙酯或乙醇中的一種或幾種。所述噴霧干燥的參數為進風150_190°C，出風70_110°C。按照上述方法得到的水溶性還原型輔酶QlO組合物為乳白色或淡黃色粉狀固體。本發明的有益效果是本發明將難溶性的還原型輔酶Q10、水溶性載體(如麥芽糊 精、CMC、純膠、可溶性淀粉、乳糖、果糖、山梨醇、甘露醇、阿拉伯膠、卡拉膠)、乳化劑(多元醇 型非離子表面活性劑或聚氧乙烯型非離子表面活性劑)混合制成水溶性還原型輔酶QlO組 合物，綜合了包合技術與固體分散技術的優點，克服了其缺點，解決了還原型輔酶QlO難溶 性的問題，經過一系列試驗證明其具有水溶性且溶解度高；溶出速度快，無懸浮或沉淀，且 不易被還原成還原型輔酶，因此穩定性高；選用的水溶性載體和乳化劑在市面上容易獲得，
4成本低；經采用高效液相色譜法測定，其有效物質即還原型輔酶QlO含量高。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明作進一步說明，但本發明不局限于這些實施例。實施例一
采用先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑后再與乳化劑混合溶解的方法制備 取IOg還原型輔酶QlO和20g聚氧乙烯-40-硬脂酸酯，溶解在20ml乙酸乙酯中，攪 拌成澄清透明溶液作備用液；取IOOOml的50°C熱水，加入69g純膠和Ig維C，在氮氣氣氛 下攪拌溶解使溶液澄清的同時，以0. 35 ml/s的滴加速率加入備用液，用均質機以80MPa、 160MPa均質兩次，每次20min后取出，在進風170°C、出風90°C的干燥參數下噴霧干燥，收集 噴霧粉過篩得成品。以下是對所得水溶性還原型輔酶QlO組合物的性能測試水溶性還原型輔酶QlO 組合物含量測定方法主要是采用高效液相色譜法，方法是取適量還原型輔酶QlO組合物， 用甲醇定容至規定濃度后，過濾，取濾液作為供試品溶液，進樣，色譜條件C18柱，流動相 為甲醇無水乙醇=1:1，檢測波長291nm，外標法定量。1.穩定性試驗
氧化型輔酶QlO的最大吸收波長為275士 lnm，還原型輔酶QlO的最大吸收波長為 291 士 1 nm nm。本實驗水溶性還原型輔酶QlO組合物在色譜條件(C18柱，流動相為甲醇 無水乙醇=1:1，檢測波長275nm)下檢測值為0，證明本實驗水溶性還原型輔酶QlO組合物 穩定，不會轉化成氧化型輔酶Q10。而傳統的輔酶QlO的環糊精包合物至少15%轉化成氧化 型輔酶Q10。取以往專利制備的輔酶QlO的環糊精包合物、原料還原型輔酶QlO與本實施例的 水溶性還原型輔酶QlO組合物進行影響因素試驗及長期穩定性考察。(1)光影響試驗
取本實施例組合物(5%)、輔酶QlO的環糊精包合物(5%)、原料還原型輔酶QlO在 4000LX光下放置10天，分別于0天、5天、10天取樣測定，結果見表1。表1表明光對輔酶QlO有較大影響。本發明實施例一的水溶性還原型輔酶QlO組 合物穩定性最高，其次是輔酶QlO的環糊精包合物，原料還原型輔酶QlO穩定性最低。(2)高溫影響試驗
取本實施例組合物、輔酶QlO的環糊精包合物、原料還原型輔酶QlO在60°C下放置 10天，分別于0天、5天、10天取樣測定，結果見表2。表2表明高溫對原料還原型輔酶QlO影響最大，對實施例一的水溶性還原型輔酶 QlO組合物和輔酶QlO的環糊精包合物影響小。2.溶解度測定分別取本實施例組合物、輔酶QlO的環糊精包合物、原料還原型 輔酶QlO適量，加入到IOml純水中，超聲振蕩10分鐘，過濾，取濾液為供試液，采用高效液 相法測定，結果表明，本實施例組合物以C59H9tlO4計溶解度為250 μ g/ml，而以往專利制備的 輔酶QlO的環糊精包合物的溶解度為210 μ g/ml，原料還原型輔酶QlO的溶解度為0。3.溶出度測定分別取本實施例組合物、輔酶QlO的環糊精包合物(以C59H9tlO4計
5為10mg)、原料還原型輔酶QlO 10mg，加入到IOml純水中，超聲振蕩10分鐘，過濾，取濾液
為供試液，采用高效液相法測定，結果見表3。表3表明本實施例組合物溶出度在15min內達到最大值99，較輔酶QlO的環糊精 包合物的溶出度快；而且證明本實施例組合物溶解度最大。4.生物利用度試驗
10名健康男性，體重60-80公斤，年齡20-30歲，無肝腎功能及心功能異常，兩周內未 服用其他藥物，無過敏史，受試者均填寫知情志愿書。血漿中輔酶QlO組合物含量測定方 法主要是采用高效液相色譜法，色譜條件C18柱，流動相為無水乙醇水冰乙酸=90:2 0. 7，檢測波長275nm。血漿樣品處理，于暗室中，取肝素化的血漿適量，加輔酶Q9為內標溶 液(15 μ g/ml )，經處理得供試品溶液。試驗采用交叉實驗設計，分別服用本實施例水溶性還原型輔酶QlO組合物及輔酶 QlO的環糊精包合物，連續服用5天，采血測定及數據統計，得出本實施例水溶性還原型輔 酶QlO組合物相對生物利用度是輔酶QlO的環糊精包合物的195%，因此證明實施例一的水 溶性還原型輔酶QlO組合物的有效物質含量高。
實施例二
采用還原型輔酶QlO與乳化劑直接加熱熔融的方法制備
取IOg還原型輔酶Q10、80g純膠、30g蔗糖脂肪酸酯和0. 5g維生E，溶于200ml水中， 加熱至60°C熔融，然后用均質機以100MPa、180MPa均質兩次，每次15min后取出，在進風 170°C、出風90°C的干燥參數下噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成品。所得水溶性還原型輔酶QlO組合物的性能測試方法同實施例一。1.穩定性試驗
本實驗水溶性還原型輔酶QlO組合物在色譜條件(C18柱，流動相為甲醇無水乙醇 =1 1，檢測波長275nm)下檢測值為0，證明本實驗水溶性還原型輔酶QlO組合物穩定，不會 轉化成氧化型輔酶Q10。取以往專利制備的輔酶QlO的環糊精包合物、原料還原型輔酶QlO與本實施例的 水溶性還原型輔酶QlO組合物進行影響因素試驗及長期穩定性考察。(1)光影響試驗
取本實施例組合物(5%)、輔酶QlO的環糊精包合物(5%)、原料還原型輔酶QlO在 4000LX光下放置10天，分別于O天、5天、10天取樣測定，結果見表1。表1表明光對輔酶QlO有較大影響。本發明實施例2的水溶性還原型輔酶QlO組 合物穩定性最高，其次是輔酶QlO的環糊精包合物，原料還原型輔酶QlO穩定性最低。(2)高溫影響試驗
取本實施例組合物、輔酶QlO的環糊精包合物、原料還原型輔酶QlO在60°C下放置 10天，分別于O天、5天、10天取樣測定，結果見表2。表2表明高溫對原料還原型輔酶QlO影響最大，對本發明實施例2的水溶性還原 型輔酶QlO組合物和輔酶QlO的環糊精包合物影響小。2.溶解度測定分別取本實施例組合物、輔酶QlO的環糊精包合物、原料還原型 輔酶QlO適量，加入到IOml純水中，超聲振蕩10分鐘，過濾，取濾液為供試液，采用高效液相法測定，結果表明，本實施例組合物以C59H9tlO4計溶解度為230 μ g/ml，而以往專利制備的 輔酶QlO的環糊精包合物的溶解度為210 μ g/ml，原料還原型輔酶QlO的溶解度為0。3.溶出度測定分別取本實施例組合物、輔酶QlO的環糊精包合物(以C59H9tlO4計 為10mg)、原料還原型輔酶QlO 10mg，加入到IOml純水中，超聲振蕩10分鐘，過濾，取濾液 為供試液，采用高效液相法測定，結果見表3。表3表明本實施例組合物溶出速度較輔酶QlO的環糊精包合物快，溶解度高。4.生物利用度試驗 檢測方法同實施例一。試驗采用交叉實驗設計，分別服用本實施例水溶性還原型輔酶QlO組合物及輔酶 QlO的環糊精包合物，連續服用5天，采血測定及數據統計，得出本實施例水溶性還原型輔 酶QlO組合物相對生物利用度是輔酶QlO的環糊精包合物的190%，因此證明實施例二的水 溶性還原型輔酶QlO組合物的有效物質含量高。
實施例三
采用先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑后再與乳化劑混合溶解的方法制備 取15g還原型輔酶Q10、20g山梨醇脂肪酸酯和20g泊洛沙姆，溶解在150ml乙酸乙酯 中，攪拌成澄清透明溶液作備用液；取3000ml的40°C熱水，加入60g乳糖和40g阿拉伯膠， 攪拌溶解使溶液澄清的同時，以0. 5 ml/s的滴加速率加入備用液，用用均質機以70MPa均 質75min后取出，在進風190°C、出風110°C的干燥參數下噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成
P
ΡΠ O所得水溶性還原型輔酶QlO組合物的性能測試方法同實施例一，結果見表1、表2 和表3。表1表明光對輔酶QlO有較大影響。本發明實施例3的水溶性還原型輔酶QlO組 合物穩定性最高，其次是輔酶QlO的環糊精包合物，原料還原型輔酶QlO穩定性最低。表2表明高溫對原料還原型輔酶QlO影響最大，對本發明實施例2的水溶性還原 型輔酶QlO組合物和輔酶QlO的環糊精包合物影響小。表3表明本實施例組合物溶出速度較輔酶QlO的環糊精包合物快，溶解度高。反映有效物質含量的生物利用度試驗同實施例一，結果表明本實施例水溶性還原 型輔酶QlO組合物相對生物利用度是輔酶QlO的環糊精包合物的185%，因此證明本發明的 水溶性還原型輔酶QlO組合物的有效物質含量高。
實施例四
采用還原型輔酶QlO與乳化劑直接加熱熔融的方法制備
取IOg還原型輔酶Q10、30g卡拉膠、30g麥芽糊精和1.5g蛋白質，溶于IOOml水中，加 熱至50°C熔融，然后用剪切分散機以2000rpm速度剪切50min后取出，在進風160°C、出風 80°C的干燥參數下噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成品。所得水溶性還原型輔酶QlO組合物的性能測試方法同實施例一，結果見表1、表2 和表3。反映有效物質含量的生物利用度試驗同實施例一，結果表明本實施例水溶性還原
7型輔酶QlO組合物相對生物利用度是輔酶QlO的環糊精包合物的180%，因此證明本發明的 水溶性還原型輔酶QlO組合物的有效物質含量高。
實施例五
采用先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑后再與乳化劑混合溶解的方法制備 取IOg還原型輔酶Q10、15g聚甘油脂肪酸酯和15g吐溫20，溶解在IOOml丙酮中，攪拌 成澄清透明溶液作備用液；取2000ml的40°C熱水，加入70g果糖、50g甘露醇和2g肽，攪 拌溶解使溶液澄清的同時，以0. 4 ml/s的滴加速率加入備用液，用用均質機以IOOMPa均質 65min后取出，在進風150°C、出風70°C的干燥參數下噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成品。
實施例六
采用還原型輔酶QlO與乳化劑直接加熱熔融的方法制備
取IOg還原型輔酶Q10、30g水溶性淀粉、30gCMC，溶于IOOml水中，加熱至45°C熔融，然 后用剪切分散機以2500rpm速度剪切70min后取出，在進風175°C、出風100°C的干燥參數 下噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成品。
實施例七
采用先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑后再與乳化劑混合溶解的方法制備 取IOg還原型輔酶Q10、30g聚氧乙烯-40-硬脂酸酯，溶解在IOOml乙酸乙酯中，攪拌成 澄清透明溶液作備用液；取IOOOml的65°C熱水，加入IOOg純膠和0. 3g苯二酚，攪拌溶解 使溶液澄清的同時，以0. 25 ml/s的滴加速率加入備用液，用用均質機以SOMPa均質20min、 以280MPa均質12min后取出，在進風175°C、出風70°C的干燥參數下噴霧干燥，收集噴霧粉 過篩得成品。
8
權利要求
一種水溶性還原型輔酶Q10組合物，包括原料輔酶Q10、水溶性載體和乳化劑，其特征在于各原料的質量份組成為還原型輔酶Q10 5 15、水溶性載體 10 120、乳化劑0.5 40；其中所述的水溶性載體為麥芽糊精、羧甲基纖維素(CMC)、純膠、可溶性淀粉、乳糖、果糖、山梨醇、甘露醇、阿拉伯膠、卡拉膠中的一種或幾種；所述的乳化劑為非離子表面活性劑。
2.根據權利要求1所述的水溶性還原型輔酶QlO組合物，其特征在于還包括0.1-2質 量份的活性成分，所述的活性成分為維生素、氨基酸、礦物質、多酚、有機酸、糖類、肽或蛋白 質中的一種或幾種。
3.根據權利要求1所述的水溶性還原型輔酶QlO組合物，所述的乳化劑為多元醇型非 離子表面活性劑或聚氧乙烯型非離子表面活性劑。
4.根據權利要求3所述的水溶性還原型輔酶QlO組合物，其特征在于所述的多元醇型 非離子表面活性劑為蔗糖脂肪酸酯類、甘油脂肪酸酯類、聚甘油脂肪酸酯類、吐溫類、山梨 醇脂肪酸酯類等非離子表面活性劑。
5.根據權利要求3所述的水溶性還原型輔酶QlO組合物，其特征在于所述的聚氧乙烯 型非離子表面活性劑為賣澤類、芐澤類、聚氧乙烯硬脂酸酯類、泊洛沙姆等非離子表面活性 劑。
6.根據權利要求5所述的水溶性還原型輔酶QlO組合物，其特征在于所述的聚氧乙烯 型非離子表面活性劑為聚氧乙烯-40-硬脂酸酯。
7.根據權利要求1所述的一種水溶性還原型輔酶QlO組合物的制備方法，其特征在 于用還原型輔酶QlO與乳化劑直接加熱熔融制備或先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑后 再與乳化劑混合溶解制備所述還原型輔酶QlO與乳化劑直接加熱熔融制備的方法是按質量份取還原型輔酶 Q10、水溶性載體和乳化劑，溶于相當于水溶性載體10-20倍水中，加熱至40-60°C，然后用 剪切分散機或均質機使溶液均一，再噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成品；所述先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑后再與乳化劑混合溶解制備的方法是按質量 份取還原型輔酶QlO和乳化劑，加入相當于還原型輔酶QlO的10倍量的有機溶劑中，攪拌 成澄清透明溶液作備用液；然后按質量份取水溶性載體，溶于相當于水溶性載體10-20倍 的40-60°C水中，攪拌成澄清溶液，以0. 2-0. 5ml/s的滴加速率加入備用液，然后用均質機 均質后，取出噴霧干燥，收集噴霧粉過篩得成品。
8.根據權利要求7所述的一種水溶性還原型輔酶QlO組合物的制備方法，其特征在 于所述先把還原型輔酶QlO溶于有機溶劑、再與乳化劑混合溶解制備的方法還包括在攪 拌成澄清溶液前按質量份加入活性成分。
9.根據權利要求7或8所述的一種水溶性還原型輔酶QlO組合物的制備方法，其特征 在于所述有機溶劑是丙酮、乙酸乙酯或乙醇中的一種或幾種。
10.根據權利要求7或8所述的一種水溶性還原型輔酶QlO組合物的制備方法，其特征 在于所述噴霧干燥的參數為進風150-190°C，出風70-110°C。
全文摘要
本發明涉及一種還原型輔酶Q10組合物及其制備方法，提供了一種水溶性還原型輔酶Q10組合物，包括原料及其質量份組成為還原型輔酶Q105-15、水溶性載體10-120、乳化劑0.5-40；其中所述的水溶性載體為麥芽糊精、CMC、純膠、可溶性淀粉、乳糖、果糖、山梨醇、甘露醇、阿拉伯膠、卡拉膠中的一種或幾種；所述的乳化劑為非離子表面活性劑。本發明還提供了所述水溶性還原型輔酶Q10組合物的制備方法。本發明將難溶性的還原型輔酶Q10與水溶性載體、乳化劑混合制成水溶性還原型輔酶Q10組合物，綜合了包合技術與固體分散技術的優點，克服了其缺點，解決了還原型輔酶Q10難溶性的問題，經過一系列試驗證明其具有水溶性且溶解度高；溶出速度快，穩定性高，有效物質含量高。
文檔編號A61K38/00GK101966171SQ201010297959
公開日2011年2月9日 申請日期2010年9月30日 優先權日2010年9月30日
發明者周建仁, 毛海明, 王維, 蔣風 申請人:杭州華東醫藥集團康潤制藥有限公司