專利名稱：一種丹參配方顆粒的制備方法及其檢測方法
技術領域：
本發明涉及以丹參為原料制成的代替丹參飲片的中藥配方顆粒，具體地說，是涉 及一種丹參配方顆粒的制備方法，及其該丹參配方顆粒的質量檢測方法。
背景技術：
丹參始載于《神農本草經》，列為上品。“一味丹參，功同四物”(地黃、當歸、白芍、川 芎)，傳統醫藥認為丹參集養血、活血、化瘀、止痛、生新血于一體，功效顯著且性味平和， 有補有散，無毒副作用。由于丹參具有活血調經，祛瘀止痛，涼血消癰，清心除煩，養血安神 的功效，不少中藥處方中均有丹參配伍使用。但是研究表明，丹參的主要有效成份丹參酮 II A和丹酚酸B的性質均不穩定，所以傳統的丹參飲片不僅雜質含量較大，攜帶服用不方 便、而且穩定性不高，不易貯存。另外，丹參飲片傳統的煎煮方法極為麻煩，病人對丹參飲片 的加水量、浸泡時間、火候、煎煮時間、先煎、后下等不甚了解或怕麻煩，不按要求煎煮，而且 丹參的主要有效成份丹參酮IIA和丹酚酸B性質不同，丹參酮IIA是脂溶性成份，傳統的用 水煎煮中藥的方法不能使其溶出，丹酚酸B雖然是水溶性成份，傳統的用水煎煮中藥的方 法能使其溶出，但是其熱穩定性不高，在高于60°C的溫度下煎煮10分鐘左右即損失80%以 上，所以傳統的用丹參飲片配方使用于中藥處方中，丹參的療效得不到全面發揮甚至沒有 療效。同時，尚無相關的質量控制標準，其有效成分得不到相應的保證，難以保證群眾用藥 安全有效。
發明內容
本發明的首要目的，意在提供一種丹參配方顆粒的制備方法。本發明針對上述丹 參飲片存在的問題(即雜質含量較大，穩定性不高，不易貯存，攜帶服用不方便；煎煮麻 煩，病人對加水量、浸泡時間、火候、煎煮時間、先煎、后下等不甚了解或怕麻煩，不按要求煎 煮，影響療效等缺點)，根據丹參藥材的特性及丹參中主要有效成份的性質，分別采用乙醇 和水兩種溶劑提取丹參中的兩種主要有效成份，并且用不同的溫度進行濃縮和干燥來制干 膏粉，制粒后用低溫干燥顆粒，完全避免了以上問題，制成的顆粒直接供中藥處方中配伍使 用，能保證丹參的療效得到全面發揮，而且單位質量有效成份比傳統丹參飲片高若干倍；將 丹參經本制法制成單一的代替中藥丹參飲片用于中藥處方配伍使用的顆粒。本發明的另一目的，意在提供一種丹參配方顆粒的質量檢測方法。本發明根據丹 參藥材的特性及丹參中主要有效成份的性質，研究擬訂了對上述制備方法生產的丹參配方 顆粒進行質量控制的技術手段。通過以下的技術方案，除了按照藥典通則進行一般項目的 檢查外，還制定了以丹參對照藥材進行對照的薄層色譜鑒別方法，還用高效液相色譜法測 定其主要成份丹參酮IIA和/或丹酚酸B的含量，能全面地反映丹參配方顆粒的質量，保證 其有效成份保留完全，含量穩定。本發明采用的技術方案如下本發明所述的丹參配方顆粒是這樣構成的丹參IOOOg和適量輔料制備而成。
本丹參配方顆粒的制備方法取干燥的丹參1000克，粉碎成粗粉，將丹參粗粉裝入提取罐中，加入濃度為 60% 80%的乙醇3500ml 5000ml，加熱回流提取1 2小時，收集提取液；將提取液過 濾，濾液減壓回收乙醇，噴霧干燥，收集所得的膏粉，備用；將提取罐中的殘留藥渣加水，加 熱煎煮1 2小時，收集煎煮液，過濾，取濾液，減壓濃縮后，噴霧干燥，收集所得的膏粉，備 用；取兩次制得的膏粉，加入重量為膏粉總重量1 2倍的藥用輔料作填充劑和潤滑劑，混 合均勻，制粒，干燥，分裝成200袋，即得本品丹參配方顆粒。更具體的制備方法取干燥無雜質的丹參1000克，用粉碎機粉碎成粗粉，將丹參粗粉裝入提取罐中， 加入濃度為68% 75%的乙醇4000ml，加熱至沸騰，回流提取1. 5小時，收集提取液；將提 取液進行過濾，濾液于55 65°C減壓回收乙醇，于80 90°C噴霧干燥，收集所得的膏粉， 備用；將提取罐中的殘留藥渣加水，加熱至沸騰，煎煮1.5小時，收集煎煮液，過濾，取濾液， 于75 85°C減壓濃縮至相對密度為1. 03 1. 20，于90 100°C噴霧干燥，收集所得的膏 粉，備用；取兩次制得的膏粉，加入重量為膏粉總重量1. 5倍的藥用輔料，混合均勻，加適量 水，制粒，置于75 85°C沸騰干燥器中干燥，分裝成200袋，即得本品丹參配方顆粒。所述藥用輔料為蔗糖粉，或者乳糖粉，或者其它適宜藥用粉末。所述乙醇提取液的濾液于60°C左右減壓回收乙醇，乙醇回收完即可；噴霧干燥的 溫度為85°C左右；水煎煮液的濾液于78 82°C減壓濃縮至相對密度為1. 05 1. 10即可； 噴霧干燥的溫度為92 98°C。所述的干燥方法是用沸騰干燥器進行沸騰干燥，干燥溫度為75 85°C。本發明所述的丹參配方顆粒的檢測方法，包括性狀、檢查、鑒別和含量測定項目中 的部分或全部，其中性狀應為黃棕色至棕褐色的顆粒；檢查應符合中國藥典2005年版一 部附錄IC顆粒項下有關的各項規定；鑒別是以丹參對照藥材為對照，采用薄層色譜法進行 鑒別；含量測定是對丹參酮II A的含量測定和/或丹酚酸B的含量測定。鑒別是以丹參對照藥材為對照，采用薄層色譜法進行鑒別，具體鑒別方法為取本品1. 5 2. 5g，研細，加乙醚5ml，振搖，放置40 80分鐘，濾過，濾液揮干， 殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液，取丹參對照藥材lg，研細，加乙醚5ml，振搖， 放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照中國藥典 2005版一部附錄VIB薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板 上，以苯乙酸乙酯=17 21 0.7 1.3為展開齊IJ，展開，取出，晾干，供試品色譜中，在 與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；丹參酮IIA的含量測定是以丹參酮IIA為對照品，采用高效液相色譜法進行測定， 具體含量測定方法為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇水=70 80 20 30為流動相； 檢測波長為270nm ；理論板數按丹參酮IIA峰計算應不低于2000 ；精密稱取丹參酮IIA對 照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加 甲醇至刻度，搖勻，即得每Iml中含丹參酮IIA 16 yg的對照品溶液；取本品0. 5g，研細，精 密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，經功率120W、頻率59KHZ超聲處理 15 25分鐘，放冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每袋含丹參酮IIA不得少于IOmg ；丹酚酸B的含量測定是以丹酚酸B為對照品，采用高效液相色譜法進行測定，具體 含量測定方法為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇乙睛甲酸水=25 35 8 10 0. 5 1. 5 57 61為流動相；檢測波長為286nm ；理論板數按丹酚酸B峰計算應不 低于2000 ；精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75%甲醇制成每Iml含0. 14mg的溶液，即得 對照品溶液；取本品0. 4g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定 重量，經率120W、頻率59KHZ超聲處理15 25分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲醇 補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試 品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每袋含丹酚酸B不得少于150mg。本發明所述檢測方法包括性狀本品應為黃棕色至棕褐色的顆粒；鑒別取本品2g，研細，加乙醚5ml，振搖，放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸 乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液。取丹參對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液，照中國藥 典2005版一部附錄VIB薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層 板上，以苯乙酸乙酯=19 1為展開劑，展開，取出，晾干，供試品色譜中，在與對照藥材 色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄IC顆粒項下有關的各項規定；含量測定丹參酮IIA的含量測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇水=75 25 為流動相；檢測波長為270nm ；理論板數按丹參酮IIA峰計算應不低于2000 ；精密稱取丹參 酮IIA對照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml棕色量 瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每Iml中含丹參酮IIA 16 yg的對照品溶液；取本品0. 5g， 研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率120W，頻 率59KHZ) 20分鐘，放冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液，即 得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即 得；本品每袋含丹參酮IIA(C19H18O3)不得少于10mg。丹酚酸B的含量測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇乙睛甲 酸水=30 10 1 59為流動相；檢測波長為286nm;理論板數按丹酚酸B峰計算應 不低于2000 ；精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75%甲醇制成每Iml含0. 14mg的溶液，即 得對照品溶液；取本品0. 4g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱 定重量，超聲處理(功率120W，頻率59KHZ) 20分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補 足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品 溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每袋含丹酚酸B (C36H30O16)不得少于150mg。為了確保本發明的制法和質量檢測方法科學、合理、可行，本申請人對方法中成分鑒別、含量測定等方法進行了研究，具體實驗資料如下(一)提取工藝的研究為了考察提取工藝的最佳條件，申請人設計了正交試驗(見表1、表2)，第一次用 乙醇提取，乙醇濃度分別為50%、65%、80%，第一次的提取時間分別為1小時、1.5小時、2 小時；第二次用水提取，第二次的提取時間分別為1小時、1. 5小時、2小時，提取溶劑量(第 一次是乙醇，第二次是水)分別為4000ml、6000ml、8000ml，共進行了 9次試驗，分別考察收 得的總干膏粉和含丹參酮IIA的總量。表1正交試驗計劃表
權利要求
一種丹參配方顆粒的制備方法，其特征在于取干燥的丹參1000克，粉碎成粗粉，將丹參粗粉裝入提取罐中，加入濃度為60％～80％的乙醇3500ml～4500ml，加熱回流提取1～2小時，收集提取液；將提取液過濾，濾液減壓回收乙醇，噴霧干燥，收集所得的膏粉，備用；將提取罐中的殘留藥渣加水，加熱煎煮1～2小時，收集煎煮液，過濾，取濾液，減壓濃縮后，噴霧干燥，收集所得的膏粉，備用；取兩次制得的膏粉，加入重量為膏粉總重量1～2倍的藥用輔料，混合均勻，制粒，干燥，分裝成200袋，即得本品丹參配方顆粒。
2.根據權利要求1所述丹參配方顆粒的制備方法，其特征在于所述丹參配方顆粒是 由如下具體方法制備而成取干燥無雜質的丹參1000克，用粉碎機粉碎成粗粉，將丹參粗粉裝入提取罐中，加入 濃度為68% 75%的乙醇4000ml，加熱至沸騰，回流提取1. 5小時，收集提取液；將提取液 進行過濾，濾液減壓回收乙醇，噴霧干燥，收集所得的膏粉，備用；將提取罐中的殘留藥渣加 水，加熱至沸騰，煎煮1. 5小時，收集煎煮液，過濾，取濾液，減壓濃縮后，噴霧干燥，收集所 得的膏粉，備用；取兩次制得的膏粉，加入重量為膏粉總重量1.5倍的藥用輔料，混合均勻， 加適量水，制粒，置于沸騰干燥器中干燥，分裝成200袋，即得本品丹參配方顆粒。
3.根據權利要求1或2所述丹參配方顆粒的制備方法，其特征在于所述藥用輔料為 蔗糖粉，或者乳糖粉，或者其它適宜藥用粉末輔料。
4.根據權利要求1或2所述丹參配方顆粒的制備方法，其特征在于所述乙醇提取液 的濾液于55 65°C減壓回收乙醇，乙醇回收完即可，噴霧干燥的溫度為 >80 90°C ；水煎煮 液的濾液于75 85°C減壓濃縮至相對密度為1. 03 1. 20，噴霧干燥的溫度為90 100°C。
5.根據權利要求1或2所述丹參配方顆粒的制備方法，其特征在于所述的干燥方法 是用沸騰干燥器進行沸騰干燥，干燥溫度為75 85°C。
6.一種權利要求1或2所述丹參配方顆粒的檢測方法，該檢測方法含性狀、檢查、鑒別 和含量測定項目的部分或全部，其特征在于性狀應為黃棕色至棕褐色的顆粒；檢查應符 合中國藥典2005年版一部附錄IC顆粒項下有關的各項規定，鑒別是用丹參對照藥材進行 的丹參鑒別，含量測定是對丹參酮IIA的含量測定和/或丹酚酸B的含量測定；鑒別是以丹參對照藥材為對照，采用薄層色譜法進行鑒別；丹參酮IIA的含量測定是以丹參酮IIA為對照品，采用高效液相色譜法進行測定；丹酚酸B的含量測定是以丹酚酸B為對照品，采用高效液相色譜法進行測定。
7.根據權利要求6所述丹參配方顆粒的檢測方法，其特征在于以丹參對照藥材為對照，采用薄層色譜法進行鑒別，鑒別方法為取本品1. 5 2. 5g，研細，加乙醚5ml，振搖，放置40 80分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣 加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液，取丹參對照藥材lg，研細，加乙醚5ml，振搖，放置 1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照中國藥典2005 版一部附錄VIB薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以 苯乙酸乙酯=17 21 0.7 1.3為展開劑，展開，取出，晾干，供試品色譜中，在與對 照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定是對丹參酮IIA的含量測定，測定方法為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇水=70 80 20 30為流動相；檢測波長為270nm ；理論板數按丹參酮IIA峰計算應不低于2000 ；精密稱取丹參酮IIA對照品 IOmg,置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇 至刻度，搖勻，即得每Iml中含丹參酮IIA 16 yg的對照品溶液；取本品0. 5g，研細，精密 稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，經功率120W、頻率59KHZ超聲處理 15 25分鐘，放冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供 試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每袋含丹參酮IIA不得少于IOmg ； 丹酚酸B的含量測定，測定方法為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇乙睛甲酸水=25 35 8 10 0. 5 1. 5 57 61為流動相；檢測波長為286nm ；理論板數按丹酚酸B峰計算應不 低于2000 ；精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75%甲醇制成每Iml含0. 14mg的溶液，即得 對照品溶液；取本品0. 4g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定 重量，經率120W、頻率59KHZ超聲處理15 25分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲醇 補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試 品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每袋含丹酚酸B不得少于150mg。
8.根據權利要求6所述丹參配方顆粒的檢測方法，其特征在于所述檢測方法包括 性狀本品應為黃棕色至棕褐色的顆粒；鑒別取本品2g，研細，加乙醚5ml，振搖，放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙 酯Iml使溶解，作為供試品溶液。取丹參對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液，照中國藥典 2005版一部附錄VIB薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板 上，以苯乙酸乙酯=19 1為展開劑，展開，取出，晾干，供試品色譜中，在與對照藥材色 譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄IC顆粒項下有關的各項規定； 含量測定丹參酮IIA的含量測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇水=75 25為 流動相；檢測波長為270nm ；理論板數按丹參酮IIA峰計算應不低于2000 ；精密稱取丹參酮 IIA對照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶 中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每Iml中含丹參酮IIA 16 yg的對照品溶液；取本品0. 5g，研 細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，經率120W、頻率59KHZ超聲 處理25分鐘，放冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供 試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每袋含丹參酮IIA不得少于IOmg ；丹酚酸B的含量測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇乙睛甲酸水 =30 10 1 59為流動相；檢測波長為286nm;理論板數按丹酚酸B峰計算應不低于 2000 ；精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75%甲醇制成每Iml含0. 14mg的溶液，即得對照 品溶液；取本品0. 4g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重 量，功率120W、頻率59KHZ超聲處理20分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失 的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每袋含丹酚酸B不得少于150mg。
全文摘要
本發明提供一種丹參配方顆粒的制備方法及其質量檢測方法。該制備方法，是將丹參粉碎、分兩步提取，第一步是加乙醇、加熱提取、噴霧干燥、收集膏粉；第二步是加水、加熱提取、噴霧干燥、收集膏粉；將兩次的膏粉加入輔料，加適量水，制粒，干燥而得產品，其方法簡單，成本低廉，適合工業化生產。該檢測方法，包括性狀、檢查、鑒別和含量測定項目中的部分或全部，鑒別是用丹參對照藥材進行丹參的鑒別，含量測定是對丹參酮IIA的含量測定和/或丹酚酸B的含量測定。所采用的鑒別方法簡單，專屬性強，含量測定方法簡單，準確度高，重現性好，為生產單位、檢測機構提供了檢測指標、檢測手段和技術方法等，以能更好的指導生產，使生產工藝控制更加嚴格合理，在產品生產過程中，用該質量測定方法能有效的控制產品的質量，從而確保丹參配方顆粒的臨床療效和安全性。
文檔編號A61K36/537GK101961381SQ20101028601
公開日2011年2月2日 申請日期2010年9月17日 優先權日2010年9月17日
發明者古莉, 唐終國, 溫國梁, 鄒波, 鐘茂團, 黎勇 申請人:四川逢春制藥有限公司