專利名稱：抑制癌細胞生長的中藥組成物及其中藥萃取物的制作方法
技術領域：
本發明是關于抑制癌細胞生長的中藥組成物及其中藥萃取物，尤其是指抑制肺癌細胞生長的中藥組成物及其中藥萃取物。
背景技術：
癌癥是位于十大死因之一，已連續二十七年為居十大死因的榜首。引發癌癥起因主要為細胞變成異常，且持續的自行分裂，形成更多的異常細胞，就是癌癥。一般腫瘤細胞中，潛存些許具有干細胞特性的癌細胞，此種癌細胞雖然數量不多， 但卻類似干細胞，可以不斷的進行癌細胞分裂及分化，因此稱之為癌干細胞。由于癌干細胞具有極高的抗藥性，西方醫學化學治療藥物難以將其毒殺，因此，常聽到許多經過化療的病患，體內癌癥復發的情形，目前生物醫學已知的標準癌癥療法，對癌干細胞根本束手無策。況且，目前西醫療法所使用的手術、放射線治療、化學療法、賀爾蒙療法、生物制劑療法等，常常對于患者身體產生強烈副作用，因此，若能使用比較溫和，且能抑制癌干細胞分化的療法，進行癌癥治療，對于病患而言將是一大福音。現今，民眾普遍認以中藥對患者進行治療，屬于比較溫和的治療方法，且具有相當高的市場接受度。因此，若能發展出一種中藥組成物，其經實驗證實后，確實可抑制癌細胞， 或阻止癌干細胞進行分裂，勢必可對于癌癥治療具有相當的幫助。
發明內容
本發明的目的在于提供一種抑制癌細胞生長的中藥組成物及其中藥萃取物，能抑制如肺癌等癌細胞生長。為實現上述目的，本發明的一態樣提供一種抑制癌細胞生長的中藥組成物， 包括龍膽草(Gentiana scabra Bunge)、黃苳(Scutellaria baicalensisGeorgi)、 梔子(Gardenia jasminoides Ellis)、當歸(Angelica sinensis Diels)、生地 (Rehmannia glutinosa Libosch. f. hueichingensis (Chao et Schih)Hsiao)、木通 (Hocquartia manshuriensis (Kom. )Nakai)、北柴古月(Bupleurum falcatumLinne)、車前子 (Plantago asiatica Linne)、蒼龍(Atractylodes lancea DeCandolle)、澤 寫(Alisma plantago-aquatica L var. orientale SAM.)以及甘草(Glycyrrhiza uralensis Fischer et DC)。將此中藥組成物進行萃取，亦即將龍膽草、黃芩、桅子、當歸、生地、木通、北柴胡、車前子、蒼朮、澤瀉以及甘草混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，同樣可以達到抑制癌細胞生長的功效。較佳而言，該龍膽草為1.5至6重量份、該黃芩為1.5至6重量份、該桅子為1.5 至6重量份、該當歸為1. 5至6重量份、該生地為1. 5至6重量份、該木通為1. 5至6重量份、該北柴胡為1. 5至6重量份、該車前子為1. 5至6重量份、該蒼朮為2至8重量份、該澤瀉為2至8重量份以及該甘草為2. 5至10重量份。更佳而言，該龍膽草為2至4重量份、該黃芩為2至4重量份、該桅子為2至4重量份、該當歸為2至4重量份、該生地為2至4重量份、該木通為2至4重量份、該北柴胡為 2至4重量份、該車前子為2至4重量份、該蒼朮為3至6重量份、該澤瀉為3至6重量份以及該甘草為4至7重量份。本發明另一態樣提供一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括連翹(Forsythia suspense (Thunb. ) Vahl)、薄荷(Mentha haploclyx BRIQ.)、桅子(Gardenia jasminoides Ellis)、黃苳(Scutellaria baicalensis Georgi)、竹葉(Lophatherum gracile Brongniart)、甘草(Glycyrrhiza uralensis Fischer etDC)、大黃(Rheum palmatum Linne)、樸硝(Na2SO4)以及蒼朮(Atractylodeslancea De Cando 11 e)。將此中藥組成物進行萃取，亦即將連翹、薄荷、桅子、黃芩、竹葉、甘草、大黃、樸硝以及蒼朮混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，同樣可以達到抑制癌細胞生長的功效。較佳而言，該連翹為1.5至6重量份、該薄荷為1.5至6重量份、該桅子為1. 5至 6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該竹葉為1. 5至6重量份、該甘草為1. 5至6重量份、 該大黃為0. 5至2重量份、該樸硝為0. 5至2重量份以及該蒼朮為2至8重量份。更佳而言，該連翹為2至4重量份、該薄荷為2至4重量份、該桅子為2至4重量份、該黃芩為2至4重量份、該竹葉為2至4重量份、該甘草為2至4重量份、該大黃為0. 75 至1. 5重量份、該樸硝為0. 75至1. 5重量份以及該蒼朮為3至6重量份。本發明再另一態樣提供一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括當歸(Angelica sinensis Diels)、川彎(Ligusticum chuanxiong Hortorum)、赤茍(Paeonia veitchii Lynch·)、生地(R. glutinosa Libosch. f. hueichingensis (Chaoet Schih. ) Hsiao)、甘草 (Glycyrrhiza uralensis Fischer et DC)、黃萃(Scutellariabaicalensis Georgi)、地 #1 (Lycium chinense Mill. Root)(Paeoniasuffruticosa Andr. Root) UR^jt (Atractylodes lancea De Candolle)。將此中藥組成物進行萃取，亦即將當歸、川芎、赤芍、 生地、甘草、黃芩、地骨皮、丹皮以及蒼朮混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物， 同樣可以達到抑制癌細胞生長的功效。較佳而言，該當歸為1.5至6重量份、該川芎為1.5至6重量份、該赤芍為1. 5至 6重量份、該生地為1. 5至6重量份、該甘草為1. 5至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、 該地骨皮為2. 5至10重量份、該丹皮為2. 5至10重量份以及該蒼朮為2至8重量份。更佳而言，該當歸為2至4重量份、該川芎為2至4重量份、該赤芍為2至4重量份、該生地為2至4重量份、該甘草為2至4重量份、該黃芩為2至4重量份、該地骨皮為4 至7重量份、該丹皮為4至7重量份以及該蒼朮為2至8重量份。本發明還有一態樣提供一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括當歸(Angelica sinensis Diels)、川彎(Ligusticum chuanxiong Hortorum)、白茍(Paeonia lactiflora Pall·)、生地(R. glutinosa Libosch. f. hueichingensis (Chaoet Schih. ) Hsiao)、白 Jtt (Atractylodes ovata De Canndolle)、甘草(Glycyrrhizauralensis Fischer et DC)、 續斷(Dipsacus asper Wall·)、杜仲(EucommiauImoides Oliv·)、黃苳(Scutellaria baicalensis Georgi)、山藥(Dioscoreaopposita Thunb.)以及艾草(Artemisia argyi Levi, et Vant.)。將此中藥組成物進行萃取，亦即將當歸、川芎、白芍、生地、白朮、甘草、續斷、杜仲、黃芩、山藥以及艾草混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，同樣可以達到抑制癌細胞生長的功效。
較佳而言，該當歸為1.5至6重量份、該川芎為1.5至6重量份、該白芍為1. 5至 6重量份、該生地為1. 5至6重量份、該白朮為1. 5至6重量份、該甘草為1. 5至6重量份、 該續斷為1.5至6重量份、該杜仲為1.5至6重量份、該黃芩為1.5至6重量份、該山藥為 2. 5至10重量份以及該艾草為2. 5至10重量份。更佳而言，該當歸為2至4重量份、該川芎為2至4重量份、該白芍為2至4重量份、該生地為2至4重量份、該白朮為2至4重量份、該甘草為2至4重量份、該續斷為2至 4重量份、該杜仲為2至4重量份、該黃芩為2至4重量份、該山藥為4至7重量份以及該艾草為4至7重量份。本發明另外一態樣提供一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括玉桂 (Cinnamomum cassia Presl.)、赤茍(Paeonia veitchii Lynch.)、甘草(Glycyrrhiza uralensis Fischer et DC)、生姜(Zingiber officinale Roscoe)、黃苳(Scutellaria baicalensis Georgi)以及紅棗(Ziziphus jujuba Mill·)。將此中藥組成物進行萃取， 亦即將玉桂、赤芍、甘草、生姜、黃芩以及紅棗混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，同樣可以達到抑制癌細胞生長的功效。較佳而言，該玉桂為2. 5至10重量份、該赤芍為2. 5至10重量份、該甘草為2. 5 至10重量份、該生姜為2. 5至10重量份、該黃芩為1. 5至6重量份以及該紅棗為2. 5至10
重量份。更佳而言，該玉桂為4至7重量份、該赤芍為4至7重量份、該甘草為4至7重量份、該生姜為4至7重量份、該黃芩為2至4重量份以及該紅棗為4至7重量份。本發明再另外一態樣提供一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括升麻 (Cimicifuga heracleifolia Kam)、生地(R. glutinosa Libosch. F. hueichingensis (Chao et Schich. ) Hsiao)、赤茍(Paeonia veitchii Lynch.)、丹皮(P. suffruticosa An dr. Root)以及黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)。此中藥組成物進行萃取，亦即將升麻、生地、赤芍、丹皮以及黃芩混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，同樣可以達到抑制癌細胞生長的功效。較佳而言，該升麻為1至4重量份、該生地為7. 5至30重量份、該赤芍為5至20 重量份、該丹皮為5至20重量份以及該黃芩為5至20重量份。更佳而言，該升麻為1. 5至3重量份、該生地為10至20重量份、該赤芍為8至15 重量份、該丹皮為8至15重量份以及該黃芩為8至15重量份。此外，上述中藥組成物及其中藥萃取物中，水的加熱溫度及時間、水添加的重量及水的濃縮比例沒有特別限定，較佳如下所述加熱系將水加熱至90-100°C且持續60分鐘至 90分鐘；水的重量為所萃取藥材總重量的5至15倍；以及加熱萃取系將水濃縮至原始重量的 1/2 至 1/4。
圖1系本發明實施例5的處理時間與A549肺癌細胞的存活率的關系圖，其中_表示經過學生氏t檢測(Student，s t test)分析后，ρ值小于0. 001。圖2顯示Α549肺癌細胞經過本發明實施例5不同時間的處理后，各周期的細胞所占比率，其中*、**及***分別表示經過學生氏t檢測分析后，ρ值小于0. 05,0. 01及0. 001。
圖3顯示A549肺癌細胞經過本發明實施例5處理后，周期為GO期的A549肺癌細胞的比率，其中_表示經過學生氏t檢測(Student' s t test)分析后，ρ值小于0. 001。
具體實施例方式以下由特定的具體實施例說明本發明的實施方式，本領域技術人員可由本說明書所揭示的內容，輕易地了解本發明的其它優點與功效，亦可了解以下實施例僅為說明用，并非用于限制本發明范圍。本發明亦可由其它不同的具體實施例加，以施行或應用，本說明書中的各項細節，亦可基于不同觀點與應用，在不悖離本發明的精神下進行各種修飾與變更。實施例1取藥材龍膽草11. 25克、黃芩11. 25克、桅子11. 25克、當歸11. 25克、生地11. 25 克、木通11. 25克、北柴胡11. 25克、車前子11. 25克、蒼朮15克、澤瀉15克以及甘草18. 75 克，分別進行切片后，加入水1200克并加熱至90°C以上，持續萃取60至90分鐘后成400 克，濾除藥渣便可獲得萃取物。實施例2取藥材連翹11. 25克、薄荷11. 25克、桅子11. 25克、黃芩11. 25克、竹葉11. 25克、 甘草11. 25克、大黃3. 75克、樸硝3. 75克以及蒼朮15克，分別進行切片后，加入水1200克并加熱至90°C以上，持續萃取60至90分鐘后成400克，濾除藥渣便可獲得萃取物。實施例3取藥材當歸11. 25克、川芎11. 25克、赤芍11. 25克、生地11. 25克、甘草11. 25 克、黃芩11. 25克、地骨皮18. 75克、丹皮18. 75克以及蒼朮15克，分別進行切片后，加入水 1200克并加熱至90°C以上，持續萃取60至90分鐘后成400克，濾除藥渣便可獲得萃取物。實施例4取藥材當歸11. 25克、川芎11. 25克、白芍11. 25克、生地11. 25克、白朮11. 25克、 甘草11. 25克、續斷11. 25克、杜仲11. 25克、黃芩11. 25克、山藥18. 75克以及艾草18. 75 克，分別進行切片后，加入水1200克并加熱至90°C以上，持續萃取60至90分鐘后成400 克，濾除藥渣便可獲得萃取物。實施例5取藥材玉桂18. 75克、赤芍18. 75克、甘草18. 75克、生姜18. 75克、黃芩11. 25克以及紅棗18. 75克，分別進行切片后，加入水1200克并加熱至90°C以上，持續萃取60至90 分鐘后成400克，濾除藥渣便可獲得萃取物。實施例6取藥材升麻7. 5克、生地56. 25克、赤芍37. 5克、丹皮37. 5克以及黃芩37. 5克， 分別進行切片后，加入水1200克并加熱至90°C以上，持續萃取60至90分鐘后成400克，濾除藥渣便可獲得萃取物。測試例研究指出癌細胞中，存在一群展現干細胞特性的癌干細胞，因此，倘若只針對一般癌細胞進行治療，腫瘤中續存的癌干細胞，因為具有干細胞的特性，仍可分化成一般的癌細胞而形成惡性腫瘤，造成治療后癌癥復發的情況；反的，假使針對癌干細胞進行治療的話， 則腫瘤中沒有續存的癌干細胞，可以持續分化并補充一般癌細胞的數量，如此便可抑制腫
根據文獻報導，已有學者自A549肺癌細胞株中，分離出具有干細胞特性的癌干細胞族群，因此本發明于下述實施例中，利用A549肺癌細胞株，分析本發明中藥組成物的萃取物，對細胞存活率的影響，并以流式細胞儀，檢測細胞周期是否受本發明中藥組成物阻斷，也以染色分析法，研究本發明中藥組成物的萃取物，促進細胞自戕的作用，再以流式細胞儀、雙熒光染色法，判斷本發明中藥組成物的萃取物，對癌細胞毒殺效果。測試例1細胞存活率測試分別以10%、20%及100%濃度的實施例1至6萃取物，針對A549肺癌細胞處理 72小時后，以MTT法測定細胞存活率，實驗結果如下表1所示。表 1
不同劑量的存活率
中藥5 μ 10 μ 50 μ 二次水45 μ 40 μ Ομ 實施例196%96%35%實施例289%83%29%實施例324%11%5%實施例4107%80%7%實施例597%77%41%實施例676%70%12%存活率(％ )=實S金組平均吸光值/1對照組平均吸光值對照組僅以二次水處理，未添加中藥處理上述表1的結果顯示，隨著醫藥組成物的用量越高，A549細胞在72小時處理后的細胞存活率越低。測試例2處理時程對細胞存活的影響由測試例1的結果，可推知實施例5的半抑制劑量為35 μ 1，使用此半抑制劑量處理Α549肺癌細胞，分別于Μ、48及72小時三個時間點，以MTT法檢測Α549肺癌細胞的存活情形，其結果如圖1所示。圖1的結果顯示，相較于未經實施例5處理的對照組Α549肺癌細胞，經實施例5 處理Μ、48及72小時的Α549肺癌細胞，其存活率有顯著的降低，且隨著時間增加，存活率差異程度越大。測試例3細胞周期阻斷測試(I)PI 染色取半抑制劑量35 μ 1的實施例5，處理Α549肺癌細胞24、48及72小時后，進行PI 染色，而后以流式細胞儀檢測肺癌細胞的DNA含量，經定量統計后結果如圖2所示，其中，橫軸的G0/G1、S、G2/M分別代表細胞周期，而縱軸則代表各周期細胞所占的比率。本測試是觀測A549肺癌細胞在實施例5 (半抑制劑量)不同時間的處理下，細胞周期的分布情形。圖2的結果顯示，相較于未經實施例5處理的對照組A549肺癌細胞，經實施例5處理的A549肺癌細胞，無論是經過M、48或72小時，其G0/G1期的細胞比率均有顯著上升，此表示實施例5可能造成A549肺癌細胞停滯在G0/G1的細胞周期。(2) PI及Ki67抗體共染色取半抑制劑量35 μ 1的實施例5，處理Α549肺癌細胞72小時后，進行PI及Ki67 抗體共染，而后以流式細胞儀檢測，以測量GO期A549肺癌細胞的細胞比率，經定量統計后結果如圖3所示。圖3的結果顯示，相較于未經實施例5處理的A549肺癌細胞，經實施例5處理的 A549肺癌細胞中，處于GO期的細胞比率有顯著的上升，此結果表示經由實施例5處理后，有較多的A549肺癌細胞離開細胞周期，進入不分裂的GO期。由上述測試例的結果，可知本發明所提供的中藥組成物及其中藥萃取物，可達到抑制癌細胞生長的功效，也可讓癌細胞進入分裂停滯期，進而阻止癌細胞持續分裂。上述實施例僅為了方便說明而舉例而已，本發明所主張的權利范圍自應以申請的權利要求范圍所述為準，而非僅限于上述實施例。
權利要求
1.一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括龍膽草、黃芩、桅子、當歸、生地、木通、北柴胡、車前子、蒼朮、澤瀉以及甘草，其中，該龍膽草為1. 5至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該桅子為1. 5至6重量份、該當歸為1. 5至6重量份、該生地為1. 5至6重量份、該木通為1. 5至6重量份、該北柴胡為1. 5至6重量份、該車前子為1. 5至6重量份、該蒼朮為 2至8重量份、該澤瀉為2至8重量份以及該甘草為2. 5至10重量份。
2.一種抑制癌細胞生長的中藥萃取物，包括將龍膽草、黃芩、桅子、當歸、生地、木通、 北柴胡、車前子、蒼朮、澤瀉以及甘草混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，其中，該龍膽草為1. 5至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該桅子為1. 5至6重量份、該當歸為1. 5至6重量份、該生地為1. 5至6重量份、該木通為1. 5至6重量份、該北柴胡為1. 5 至6重量份、該車前子為1. 5至6重量份、該蒼朮為2至8重量份、該澤瀉為2至8重量份以及該甘草為2. 5至10重量份。
3.一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括連翹、薄荷、桅子、黃芩、竹葉、甘草、大黃、樸硝以及蒼朮，其中，該連翹為1. 5至6重量份、該薄荷為1. 5至6重量份、該桅子為1. 5 至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該竹葉為1. 5至6重量份、該甘草為1. 5至6重量份、該大黃為0. 5至2重量份、該樸硝為0. 5至2重量份以及該蒼朮為2至8重量份。
4.一種抑制癌細胞生長的中藥萃取物，包括將連翹、薄荷、桅子、黃芩、竹葉、甘草、大黃、樸硝以及蒼朮混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，其中，該連翹為1. 5至6 重量份、該薄荷為1. 5至6重量份、該桅子為1. 5至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該竹葉為1. 5至6重量份、該甘草為1. 5至6重量份、該大黃為0. 5至2重量份、該樸硝為0. 5 至2重量份以及該蒼朮為2至8重量份。
5.一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括當歸、川彎、赤芍、生地、甘草、黃芩、地骨皮、丹皮以及蒼朮，其中，該當歸為1. 5至6重量份、該川芎為1. 5至6重量份、該赤芍為1. 5 至6重量份、該生地為1. 5至6重量份、該甘草為1. 5至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該地骨皮為2. 5至10重量份、該丹皮為2. 5至10重量份以及該蒼朮為2至8重量份。
6.一種抑制癌細胞生長的中藥萃取物，包括將當歸、川彎、赤芍、生地、甘草、黃芩、地骨皮、丹皮以及蒼朮混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，其中，該當歸為1.5 至6重量份、該川芎為1. 5至6重量份、該赤芍為1. 5至6重量份、該生地為1. 5至6重量份、該甘草為1. 5至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該地骨皮為2. 5至10重量份、該丹皮為2. 5至10重量份以及該蒼朮為2至8重量份。
7.一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括當歸、川芎、白芍、生地、白朮、甘草、續斷、杜仲、黃芩、山藥以及艾草，其中，該當歸為1. 5至6重量份、該川芎為1. 5至6重量份、 該白芍為1.5至6重量份、該生地為1.5至6重量份、該白朮為1.5至6重量份、該甘草為 1. 5至6重量份、該續斷為1. 5至6重量份、該杜仲為1. 5至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該山藥為2. 5至10重量份以及該艾草為2. 5至10重量份。
8.一種抑制癌細胞生長的中藥萃取物，包括將當歸、川芎、白芍、生地、白朮、甘草、續斷、杜仲、黃芩、山藥以及艾草混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，其中，該當歸為1.5至6重量份、該川芎為1.5至6重量份、該白芍為1.5至6重量份、該生地為1.5 至6重量份、該白朮為1.5至6重量份、該甘草為1.5至6重量份、該續斷為1.5至6重量份、該杜仲為1. 5至6重量份、該黃芩為1. 5至6重量份、該山藥為2. 5至10重量份以及該艾草為2. 5至10重量份。
9.一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括玉桂、赤芍、甘草、生姜、黃芩以及紅棗， 其中，該玉桂為2. 5至10重量份、該赤芍為2. 5至10重量份、該甘草為2. 5至10重量份、 該生姜為2. 5至10重量份、該黃芩為1. 5至6重量份以及該紅棗為2. 5至10重量份。
10.一種抑制癌細胞生長的中藥萃取物，包括將玉桂、赤芍、甘草、生姜、黃芩以及紅棗混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，其中，該玉桂為2. 5至10重量份、該赤芍為2. 5至10重量份、該甘草為2. 5至10重量份、該生姜為2. 5至10重量份、該黃芩為 1. 5至6重量份以及該紅棗為2. 5至10重量份。
11.一種抑制癌細胞生長的中藥組成物，包括升麻、生地、赤芍、丹皮以及黃芩，其中， 該升麻為1至4重量份、該生地為7. 5至30重量份、該赤芍為5至20重量份、該丹皮為5 至20重量份以及該黃芩為5至20重量份。
12.—種抑制癌細胞生長的中藥萃取物，包括將升麻、生地、赤芍、丹皮以及黃芩混合后，以水加熱萃取后濾除藥渣所得的萃取物，其中，該升麻為1至4重量份、該生地為7. 5至 30重量份、該赤芍為5至20重量份、該丹皮為5至20重量份以及該黃芩為5至20重量份。
全文摘要
本發明是關于抑制癌細胞生長的中藥組成物及其中藥萃取物，其中一態樣包括連翹、薄荷、梔子、黃芩、竹葉、甘草、大黃、樸硝以及蒼朮，其余態樣如說明書所述。
文檔編號A61K36/9068GK102335301SQ20101023714
公開日2012年2月1日 申請日期2010年7月21日 優先權日2010年7月21日
發明者李政育 申請人:李政育