專利名稱：納米結構脂質載體及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及納米粒制劑領域，尤其涉及一種凝集素修飾的納米結構脂質載體及其 制備方法和應用。
背景技術：
納米結構脂質載體(nanostructured lipid carriers, NLC)是新一代脂質納米 粒，與固體脂質納米粒(solid lipid nan0partiCles，SLN)不同之處在于，它是采用混合類 脂為載體材料，將液體脂質混合到固體脂質中制備而得。液體脂質的加入，可擾亂固體脂質 規則的晶格結構，增加納米粒結構中不規則晶型的比例，使承載脂溶性藥物的空間容量增 加，從而提高載體的載藥能力。因此，納米結構脂質載體既具備固體脂質納米粒生物相容性 好的優點，同時也改善了固體脂質納米粒在載藥量方面的不足，具有較好的發展前景。在口服制劑研究中，納米結構脂質載體具有一定的黏附性，有助于增加其在腸粘 膜吸收部位表面接觸面積，延長滯留時間，但該粘附作用主要通過機械嵌合、范德華力、氫 鍵等理化作用粘附于粘膜表面，受黏液凝膠層更新的影響，黏附時間較短，屬于非特異性黏 附作用。來源于植物的花生凝集素或麥胚凝集素能夠特異性結合腸上皮細胞表面受體，是 實現特異性生物黏附作用的理想生物黏附材料。張娜等以麥胚凝集素為生物黏附材料，將 麥胚凝集素與磷脂酰乙醇胺通過化學反應共價結合，然后將反應產物作為處方中脂質成分 制備了麥胚凝集素修飾固體脂質納米粒，其降低血糖效果比未修飾制劑更顯著，相對生物 利用度更高[張娜，平其能，閆婷婷，等.麥胚凝集素修飾胰島素固體脂質納米粒的研究，山 東大學學報，2006,44 (2) : 122-126]，但以上制備過程需要磷脂酰乙醇胺，成本較高，且上述 研究僅對固體脂質納米粒進行了麥胚凝集素修飾。
發明內容
本發明要解決納米結構脂質載體在腸粘膜表面黏附時間短的技術問題，提供一種 凝集素修飾的納米結構脂質載體，該納米粒與腸上皮細胞產生特異性結合，促進細胞對納 米粒的攝取，從而促進藥物口服吸收，提高藥物生物利用度。此外，還需要提供一種納米結構脂質載體的制備方法和應用。為了解決上述技術問題，本發明通過如下技術方案實現在本發明的一個方面，提供了一種納米結構脂質載體，包含以下重量百分比的成 分脂質材料2 10% ；乳化劑5 20% ；凝集素0. 1 ；水70 92%。優選的，該納米結構脂質載體的組成成分按其重量百分比計為脂質材料2 10% ；乳化劑5 20% ；凝集素0. 1 ；其余為水。優選的，所述乳化劑為聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯(吐溫)與聚乙烯醇的混合物。更 優選的，所述乳化劑為吐溫80與聚乙烯醇的混合物，因為吐溫80比其他吐溫產品乳化性更強。
所述脂質材料包括固體脂質和液體脂質；優選的，所述固體脂質選自山崳酸甘 油酯、單硬脂酸甘油脂、甘油棕櫚酸硬脂酸酯；所述液體脂質選自單亞油酸甘油酯、油酸 聚乙二醇甘油酯。所述納米結構脂質載體的粒徑范圍為lOOnm 300nm。所述凝集素包括麥胚凝集素或花生凝集素。在本發明的另一方面，還提供了一種上述納米結構脂質載體的制備方法，包括以 下步驟將脂質材料加熱至熔融作為油相，將含有乳化劑的水相加熱至相同溫度并與該油 相混合，制成分散液a，將分散液a經高壓均質機在適宜壓力下均質處理，得分散液b ；取分散液b在適宜轉速下超濾離心，將離心所得的濃縮液加戊二醛溶液孵育，透 析處理后，加凝集素溶液孵育，經親和層析柱純化，獲得凝集素修飾的納米結構脂質載體。優選的，所述方法中加熱至熔融的溫度為60 80°C;均質壓力為500 lOOObar ； 超濾離心的轉速為2000 5000rpm ；戊二醛溶液孵育時間為10 30min。本發明的制備方法采用截留分子量為1000kd的超濾器將分散液b離心，能夠有效 除去水相中游離的聚乙烯醇；透析袋的截留相對分子量(即留在透析袋內的生物大分子的 最小相對分子質量)為12000，能夠有效除去游離戊二醛。在本發明的另一方面，還提供了一種上述納米結構脂質載體的應用，用于作為藥 物的給藥載體。一般的，本發明的納米結構脂質載體可作為口服、經皮及靜脈注射等給藥的載體。優選的，本發明的納米結構脂質載體適于作為難溶性藥物口服給藥的載體。本發明納米結構脂質載體，能有效促進藥物口服吸收，提高藥物生物利用度；并且 由于本發明納米結構脂質載體的制備過程中未使用磷脂酰乙醇胺，生產成本較低。此外，本 發明納米結構脂質載體可以包封脂溶性較強的藥物，達到較高包封率。
下面結合附圖和具體實施方式
對本發明作進一步詳細的說明。圖1是本發明凝集素修飾的納米結構脂質載體的制備方法流程圖。
具體實施例方式本發明利用納米結構脂質載體表面輔料羥基為功能基團，通過戊二醛交聯羥基以 及對蛋白氨基的偶聯作用，將特異性生物黏附材料凝集素與納米結構脂質載體共價結合， 實現對納米結構脂質載體表面進行凝集素修飾，旨在增強腸上皮細胞與納米粒的黏附性和 對納米粒的攝取能力，從而提高藥物口服生物利用度。本發明的納米結構脂質載體，包含以下重量百分比的組分脂質材料2 10%;乳 化劑5 20% ；凝集素0. 1 1 %。優選的，該納米結構脂質載體的組成成分按其重量百分比計為脂質材料2 10% ；乳化劑5 20% ；凝集素0. 1 ；其余為水。本發明納米結構脂質載體的粒徑范圍為lOOnm 300nm。本發明納米結構脂質載體的制備方法，包括以下步驟(見圖1)
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將脂質材料加熱至熔融作為油相，將含有乳化劑的水相加熱至相同溫度并與該油 相混合，制成分散液a，將分散液a經高壓均質機在適宜壓力下均質處理，得分散液b ；取分散液b在適宜轉速下超濾離心，將離心所得的濃縮液加戊二醛溶液孵育，透 析處理除去多余的游離戊二醛后，加凝集素溶液孵育，以使凝集素與納米結構脂質載體共 價結合，再經親和層析柱純化，除去未結合的凝集素，獲得凝集素修飾的納米結構脂質載 體。優選的，該制備方法中加熱至熔融的溫度為60 80°C ；均質壓力為500 lOOObar ；超濾離心的轉速為2000 5000rpm ；戊二醛溶液孵育時間為10 30min。實施例1將山崳酸甘油酯-油酸聚乙二醇甘油酯((2 1)2%)加熱至80°C熔融作為油相， 將含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇(5% )溶液的水相加熱至與油相相同溫度，并 與該油相混合，制成分散液a，將分散液a經高壓均質機在800bar壓力下均質，得分散液b ；取分散液b在3000rpm超濾離心，將離心所得的濃縮液加戊二醛溶液孵育lOmin， 透析處理后，加凝集素溶液(0.5% )孵育，經親和層析柱，磷酸鹽緩沖液洗脫，收集凝集素 修飾的脂質納米粒。檢測制備的凝集素修飾納米結構脂質載體的平均粒徑為251. 9nm,凝集素修飾 率為6. 8%。實施例2將山崳酸甘油酯-單亞油酸甘油酯((2 1)2%)加熱至80°C熔融作為油相，將 含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇(5%)溶液的水相加熱至與油相相同溫度，并與 該油相混合，制成分散液a，將分散液a經高壓均質機在800bar壓力下均質，得分散液b ；取分散液b在2000rpm超濾離心，將離心所得的濃縮液加戊二醛溶液孵育lOmin， 透析處理后，加凝集素溶液(0.2% )孵育，經親和層析柱，磷酸鹽緩沖液洗脫，收集凝集素 修飾的脂質納米粒。檢測制備的凝集素修飾納米結構脂質載體的平均粒徑273. 2nm,凝集素修飾率 為 10. 4%。實施例3將單硬脂酸甘油酯-油酸聚乙二醇甘油酯((2 1)5% )加熱至60°C熔融作為 油相，將含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇(8%)溶液的水相加熱至與油相相同溫 度，并與該油相混合，制成分散液a，將分散液a經高壓均質機在500bar壓力下均質，得分散 液b ；取分散液b在4000rpm超濾離心，將離心所得的濃縮液加戊二醛溶液孵育20min， 透析處理后，加凝集素溶液(0.2% )孵育，經親和層析柱，磷酸鹽緩沖液洗脫，收集凝集素 修飾的脂質納米粒。檢測制備的凝集素修飾的納米結構脂質載體的平均粒徑為184. 5nm，凝集素修 飾率為18. 2%。實施例4將甘油棕櫚酸硬脂酸酯-油酸聚乙二醇甘油酯((2 1)8% )加熱至75°C熔融作 為油相，將含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇(10% )溶液的水相加熱至與油相相同溫度，并與該油相混合，制成分散液a，將分散液a經高壓均質機在lOOObar壓力下均質， 得分散液b;取分散液b在4500rpm超濾離心，將離心所得的濃縮液加戊二醛溶液孵育30min， 透析處理后，加凝集素溶液(0.8% )孵育，經親和層析柱，磷酸鹽緩沖液洗脫，收集凝集素 修飾的脂質納米粒。檢測制備的凝集素修飾的納米結構脂質載體的平均粒徑為243. 4nm，凝集素修 飾率為15. 6%。實施例5將甘油棕櫚酸硬脂酸酯_(單亞油酸甘油酯油酸聚乙二醇甘油酯，1 1) ((2 1)8%)加熱至75°C熔融作為油相，將含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇 (15% )溶液的水相加熱至與油相相同溫度，并與該油相混合，制成分散液a，將分散液a經 高壓均質機在800bar壓力下均質，得分散液b ；取分散液b在5000rpm超濾離心，將離心所得的濃縮液加戊二醛溶液孵育30min， 透析處理后，加凝集素溶液(0.5% )孵育，經親和層析柱，磷酸鹽緩沖液洗脫，收集凝集素 修飾的脂質納米粒。檢測制備的凝集素修飾的納米結構脂質載體的平均粒徑為155. lnm，凝集素修 飾率為17. 3%。以上所述實施例僅表達了本發明的實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能 因此而理解為對本發明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說， 在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發明的保護范 圍。因此，本發明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。
權利要求
一種納米結構脂質載體，其特征在于，包含以下重量百分比的成分脂質材料2～10％；乳化劑 5～20％；凝集素 0.1～1％；水 70～92％。
2.根據權利要求1所述的納米結構脂質載體，其特征在于，所述乳化劑為聚氧乙烯山 梨醇脂肪酸酯與聚乙烯醇的混合物。
3.根據權利要求1所述的納米結構脂質載體，其特征在于，所述脂質材料包括固體 脂質和液體脂質；所述固體脂質選自山崳酸甘油酯、單硬脂酸甘油脂、甘油棕櫚酸硬脂酸 酯；所述液體脂質選自單亞油酸甘油酯、油酸聚乙二醇甘油酯。
4.根據權利要求1所述的納米結構脂質載體，其特征在于，所述納米結構脂質載體的 粒徑范圍為lOOnm 300nm。
5.根據權利要求1所述的納米結構脂質載體，其特征在于，所述凝集素包括麥胚凝集 素或花生凝集素。
6.一種權利要求1所述納米結構脂質載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 將脂質材料加熱至熔融作為油相，將含有乳化劑的水相加熱至相同溫度并與該油相混合，制成分散液a，將分散液a經高壓均質機在適宜壓力下均質處理，得分散液b ；取分散液b在適宜轉速下超濾離心，將離心所得的濃縮液加戊二醛溶液孵育，透析處 理后，加凝集素溶液孵育，經親和層析柱純化，獲得凝集素修飾的納米結構脂質載體。
7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述加熱至熔融的溫度為60 80°C； 所述壓力為500 lOOObar ；所述超濾離心的轉速為2000 5000rpm。
8.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述戊二醛溶液孵育時間為10 30mino
9.權利要求1所述的納米結構脂質載體的應用，其特征在于，用于作為藥物的給藥載體。
10.根據權利要求9所述的納米結構脂質載體的應用，其特征在于，用于作為難溶性藥 物口服給藥的載體。
全文摘要
本發明涉及納米粒制劑技術領域，公開了一種凝集素修飾的納米結構脂質載體，包含脂質材料、乳化劑、以及凝集素。本發明還公開了上述納米結構脂質載體的制備方法及應用。本發明的納米結構脂質載體，能有效促進藥物口服吸收，提高藥物生物利用度。
文檔編號A61K9/14GK101890170SQ20101022486
公開日2010年11月24日 申請日期2010年7月13日 優先權日2010年7月13日
發明者馮年平, 劉穎, 巫姍, 譚蓉, 陳志強 申請人:上海中醫藥大學