專利名稱：苝醌類化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C在制備抗真菌藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，是茈醌類化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C在 制備抗真菌藥物中的應用。
背景技術：
據報道茈醌類化合物自然界產量很低，如竹紅菌素只產生于兩種菌株中竹紅菌 Hypocrella bambusae和竹黃菌Shiraia bambusicola。茈醌類化合物是天然光敏色素， 具有良好的光敏抗腫瘤、抗菌、抗病毒等活性，臨床作為光敏劑應用于光動力療法治療皮膚 腫瘤疾病。近年來研究發現此類化合物具有優良光敏殺腫瘤細胞和抑制艾滋病毒HIV-1 的作用，且可作為新型光活化農藥和潛在的光電轉換材料。茈醌類化合物Hypocrellin B， Hypocrellin C作為重要的天然光敏色素，在醫藥、食品和材料領域研究和應用前景十分廣
闊，它們的化學結構式分別如下但至今未見它們具有抗真菌活性的報道。
發明內容
本發明對Hypocrellin B或Hypocrellin C提供一種制備抗菌藥物的新用途。經體外抗真菌試驗，表明化合物Hypocrellin B和或Hypocrellin C均具有很強 的抗真菌活性，因此可用于制備抗真菌藥物。本發明為研制新的抗真菌藥物提供了先導化合物。
具體實施例方式本發明所用的Hypocrellin B 或 Hypocrellin C 由內生真菌 PeniciIlium chrysogenum的發酵物制備，內生真菌Penicillium chrysogenum的發酵物由由德國不倫 瑞克大學提供。他們從西班牙戈梅拉島采集蒺藜科植物Fagonia cretica，從該植物上分 離并鑒定得到黃霉菌菌株，然后將黃霉菌于1. 5 %麥芽提取物室溫培養28天，得到發酵液 12L，用乙酸乙酯萃取得到浸膏19. 8g。利用他們提供的19. 8g，經正向柱色譜和凝膠柱色譜 純化后，得到Hypocrellin B和Hypocrellin C單體，化合物的波譜數據如下表1，2 :表1.化合物Hypocrellin B的屮和13C核磁共振波譜數據(CDC13，500MHz/125MHz) 表2.化合物HypocrelIin C 的1H和 13C 核磁共振波譜數據(CDCl3, 500MHz/125MHz) 本發明所用的實驗用菌株為
1)白念珠菌(Candida albicans) SC5314 ；
2)新生隱球菌(Cryptococcus neoformans) BLS108 ；
3)紅色毛癬菌(Trichophyton rubrum)；
4) ^ββ · (Aspergillus fumigatus)。
陽性對照藥為
1)TBR(Terbinafine)；
2)KCZ(Ketoconazole)；
3)AMB(Amphotericin B)；
4)FCZ(Fluconazole)。
實驗方法如下
(1)菌液制備
實驗前，用接種圈從4°C保存的SDA培養基上挑取新生隱球菌、白念珠菌等球狀菌
少量，接種至ImlYEPD培養液，于35°C，250rpm振蕩培養，活化16h，使真菌處于指數生長期后期。取該菌液至ImlYEPD培養液中，用上述方法再次活化，16h后用血細胞計數板計數，以 RPMI1640培養液調整菌液濃度至1 X IO3 5 X IO3個/ml。(2)藥液制備受試樣品分別用DMSO配成6. 4mg/ml的溶液，-20°C保存，實驗前將藥液取出置 35°C溫箱融化備用。(3)藥敏板制備取無菌96孔板，于每排1號孔加RPMI1640 IOOml作空白對照；3 12號孔各加新 鮮配制的菌液IOOml ；2號孔分別加菌液200ml和受試化合物溶液2ml。2 11號孔10級 倍比稀釋，使各孔中的藥物終濃度依次分別為64,32,16,8,4,2,1,0.5,0. 25和0. 125 μ g/ ml，各孔中DMSO含量均低于；12號孔不含藥物，作陰性對照。各藥敏板于35°C培養。(4) MIC 值判定四種真菌分別于35°C培養24h和72h后，用酶標分析儀于620nm測各孔OD值。與 陰性對照孔比，以OD值下降80%以上的最低濃度孔中的藥物濃度為MIC8tl (真菌生長80% 被抑制時的樣品濃度)。當樣品的MIC8tl值超過測定濃度范圍時，按以下方法進行統計=MIC8tl 值高于最高濃度64μ g/ml時，計為> 64μ g/ml ；MIC8tl值為最低濃度或在最低濃度以下時， 不作區別，均計為< 0. 125 μ g/ml。上述實驗均平行操作2到3次，當MIC8tl值能準確重復或只差一個濃度時才被接 受，并以較高濃度作為MIC8tl值；當MIC8tl值相差兩個濃度以上時，則需重新實驗，直到符合 要求為止。結果見表4:表4 Hypocrellin B 和 C 的抗真菌試驗(MIC8tl μ g/ml) 由表4可見，化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C對四種真菌均具有很強的 抑制作用，且Hypocrellin B對真菌抑制作用強于Hypocrellin C。Hypocrellin B對紅色 毛癬菌的抑制作用強于陽性對照藥AMB和FCZ，因此可用于制備抗真菌藥物。
權利要求
苝醌類化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C在制備抗真菌藥物中的應用，它們的化學結構式分別如下FSA00000168675200011.tif
全文摘要
本發明涉及醫藥技術領域，是苝醌類化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C在制備抗真菌藥物中的應用。它們的化學結構式分別如下。經體外抗真菌試驗，表明化合物Hypocrellin B和Hypocrellin C均具有很強的抗真菌活性，因此可用于制備抗真菌藥物。本發明為研制新的抗真菌藥物提供了先導化合物。
文檔編號A61K31/122GK101879150SQ20101020792
公開日2010年11月10日 申請日期2010年6月23日 優先權日2010年6月23日
發明者劉寶姝, 孫鵬, 孟麗媛, 張文, 易楊華, 李玲, 湯華 申請人:中國人民解放軍第二軍醫大學