抗痛風組合物、其制備方法及其在制備抗痛風藥物中的應用的制作方法

專利名稱：抗痛風組合物、其制備方法及其在制備抗痛風藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物，具體涉及一種抗痛風組合物，這種抗痛風組合物的 制備方法，以及這種抗痛風組合物在制備抗痛風藥物中的應用。
背景技術：
痛風曾被普遍認為是富貴病，后來發現它是一種遍布世界的常見病。無論是在歐 美國家還是在東方民族痛風的患病率都有逐年增高的趨勢。近年來的統計結果表明，在所 有年齡段痛風的患病率為0.84%。目前我國痛風患者已達800-1200萬人。高尿酸血癥是 痛風主要的生化基礎，其發生率更高，且發病年齡趨于年輕化，20歲以上的人群中1.4% 5. 7%存在血尿酸值過高，40 50歲為發病高峰。5% 12%的高尿酸血癥最終會發展為痛 風。故該類病變已成為威脅中老年健康的常見病、多發病。1998年在上海調查顯示高尿酸 血癥發病率上升10. 1%，痛風發病率達0. 34% ；2003年在南京的調查顯示，我國部分地區 高尿酸血癥發病率已達13. 3%，與歐美地區(為2% 18%)相當，痛風發病率達1.33%， 低于目前美國痛風發病率(2.7%)。目前痛風急性發作期的藥物治療，仍以西藥口服制劑為主，主要為炎癥干擾藥及 降尿酸藥兩大類，前者為秋水仙堿、非留體抗炎藥、腎上腺皮質激素類，后者包括尿酸促排 藥、抑制尿酸生成類。秋水仙堿是治療痛風尤其是重癥急性發作痛風的特效藥物，但其毒性 反應明顯，嘔吐、腹瀉、痙攣性腹痛是常見的不良反應，治療有效劑量與其引起胃腸道癥狀 的劑量相近。非留體抗炎藥最常見的副作用是胃腸反應和腎臟損害。前者有消化不良、惡 心、上腹痛、潰瘍、出血等；后者包括腎病綜合征、間質性腎炎、腎乳頭壞死和急性腎衰。腎上 腺皮質激素類撤藥后發生反跳現象，故最好同時和接著應用維持量秋水仙堿或消炎痛等藥 物。其他各類藥物均有其用藥的局限性或不良反應，因此醫生在臨床用藥方面可選擇性很 小。中成藥在市場上暫時開發相對較少。本藥物利用現代中藥的提取純化技術，從中藥原藥材中取得治療痛風的有效成 分，發揮中藥的經皮給藥技術而發揮藥物的療效。外用制劑與前述痛風的口服制劑相比，具 有以下明顯的優勢特點①局部治療，針對性強；②提高對全身疾病局部病變的治療效果； ③避免口服痛風藥物可能帶來的各種不良毒性反應；④使用方便，療效迅速；⑤聯合用藥 時可有效減少口服藥劑量。經皮給藥繞過了肝臟和胃腸道，避免了全身用藥的首過效應，既 保證了局部療效，又降低了全身毒性。治療痛風的外用制劑與口服制劑優勢比對

發明內容
本發明的目的是提供一種抗痛風組合物，并提供這種抗痛風組合物的制備方法， 以及這種抗痛風組合物在制備抗痛風藥物中的應用；以彌補現有技術中缺少中藥抗痛風藥 物的不足，并能夠取得更好的抗痛風治療效果。完成上述發明任務的方案是一種抗痛風組合物，其特征在于，該組合物原料藥的 重量比組成如下山慈菇160 220大黃(或重樓) iso透骨草100 150冰片(或薄荷腦)3 8本申請推薦，該組合物原料藥中的山慈菇，采用麗江山慈菇；進一步優化，該組合物原料藥的重量比組成如下麗江山慈菇180大黃(或重樓)150透骨草120冰片(或薄荷腦)5制成 1000ml 或 1000g。更優化和更具體地說，本發明抗痛風組合物的構成是采用以下方法得到的大黃、 麗江山慈菇與透骨草的提取物和冰片溶液大黃(或重樓)粉碎，以乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，裝滲漉桶，加入乙醇，浸 泡24小時，收集滲漉液；麗江山慈菇與透骨草以乙醇回流提取，濃縮得到浸膏；在此浸膏中緩緩加入上述大黃滲漉液，邊加邊攪拌，混合均勻，離心，備用； 冰片(或薄荷腦)，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液中，攪勻，調節pH 至5. 0 7. 0，加純化水至全量，放置24小時，離心(10000 15000r/m)，灌封，即可。將大黃粉碎成粗顆粒，以適量體積80%的乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，約1小 時，裝滲漉桶，加入80%的乙醇適量，浸泡24小時，收集滲漉液至800ml ；麗江山慈菇與透骨 草以8倍量70%醇回流提取2次，每次1. 5小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至相對密度 1. 10 1. 15(50°C )的浸膏。將大黃滲漉液緩緩加入浸膏中，邊加邊攪拌，混合均勻，放置， 離心(10000 15000r/m)，備用。冰片研細，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液 中，加純化水至全量，攪勻，調節pH至5. 0 7. 0，放置24小時，離心(10000 15000r/m)， 灌封，即可。完成本申請第2個發明任務的方案是以上所述的抗痛風組合物的制備方法，其 特征在于，步驟如下大黃(或重樓)粉碎，以乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，裝滲漉桶，加入乙醇，浸 泡24小時，收集滲漉液；麗江山慈菇與透骨草以乙醇回流提取，濃縮得到浸膏；在此浸膏中緩緩加入上述大黃滲漉液，邊加邊攪拌，混合均勻，離心，備用；
冰片 (或薄荷腦)研細，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液中，攪勻，調 節pH至5. 0 7. 0，加純化水至全量，放置24小時，離心(10000 15000r/m)，灌封，即可。更優化地說，本發明的制備方法各步驟的具體操作如下將大黃粉碎成粗顆粒，以 適量體積80%的乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，約1小時，裝滲漉桶，加入80%的乙醇適 量，浸泡24小時，收集滲漉液至800ml ；麗江山慈菇與透骨草以8倍量70%乙醇回流提取 2次，每次1. 5小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至相對密度1. 10 1. 15 (500C )的浸膏。 將大黃滲漉液緩緩加入浸膏中，邊加邊攪拌，混合均勻，放置，離心(10000 15000r/m)，備 用。冰片研細，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液中，加純化水至全量，攪勻，調 節pH至5. 0 7. 0，放置24小時，離心(10000 15000r/m)，灌封，即可。
完成本申請第3個發明任務的方案是以上所述的抗痛風組合物在制備抗痛風藥 物中的應用。本發明彌補了現有技術中缺少中藥抗痛風藥物的不足，提供了有效的抗痛風中藥 組合物。能夠取得更好的抗痛風治療效果。實驗一、小鼠鎮痛試驗(熱板法、扭體法)1.實驗材料1. 1實驗動物ICR小鼠，體重18_22g，雌性100只，雄性80只，上海斯萊克動物有 限公司，生產許可證號SCXY (滬)2007-0005 ；使用許可證號SYXK (蘇)2007-0030。1. 2 受試藥抗痛風制劑01號(處方麗江山慈菇、大黃、透骨草、冰片)凝膠劑抗痛風制劑02號(處方麗江山慈菇、大黃、透骨草、冰片)搽劑抗痛風制劑03號(處方麗江山慈菇、重樓、透骨草、薄荷腦)凝膠劑抗痛風制劑04號(處方麗江山慈菇、重樓、透骨草、薄荷腦)搽劑口服抗痛風制劑(處方麗江山慈菇、大黃、透骨草、冰片)雪山金羅漢止痛涂膜劑，陽性對照藥規格20ml/瓶，西藏康達藥業有限公司，批 號090708布洛芬片，陽性對照藥規格0. Ig/片，江蘇平光制藥有限責任公司，批號 0811262以上試驗藥物均為江蘇南星藥業有限責任公司提供，批號201001261. 3試劑冰醋酸(廣東汕頭市西隴化工廠，批號050929)1. 4儀器YLS_6B智能熱板儀(山東醫學科學院設備站)2.實驗方法2.1熱板致小鼠疼痛試驗2. 1. 1篩選合格小鼠將小鼠放在熱板上至出現舔后足所需時間(S)作為該小鼠 的痛閾值，凡舔足時間小于5s或大于30s或喜跳躍者棄之不用。再測合格小鼠痛閾值，作 為該小鼠的給藥前基礎痛閾值，并按痛閾值及體重分為8組，分別為空白對照組(等容積 的生理鹽水)、陽性藥對照組(灌胃給予布洛芬0. 312mg/kg)、雪山金羅漢止痛涂膜劑組、口 服制劑組(灌胃給藥0. 45g生藥/kg)、01號藥、02號藥、03號藥、04號藥組。2. 1.2觀察受試藥的鎮痛作用各組小鼠涂藥后15min、30min、60min、90min、 120min分別測小鼠痛閾值，如60s仍無反應，將小鼠取出，以免燙傷，其痛閾值以60s計。
2.2醋酸致小鼠扭體試驗各組小鼠隨機分為8組空白對照組、陽性藥對照組(灌胃給予布洛芬0. 312mg/ kg)、雪山金羅漢止痛涂膜劑組、口服制劑組(灌胃給藥0. 45g生藥/kg)灌胃給藥后30min、 01號藥、02號藥、03號藥、04號藥組，然后腹部脫毛，按分組涂藥(5ml/kg)后，立即腹腔注 射0. 7%醋酸溶液0. lml/10g，記錄15min內各組小鼠首次出現扭體反應(腹部內凹，伸展 后肢，臀部抬高)的時間及扭體次數。2. 3統計方法實驗數據以]F士SD表示。組間比較用t檢驗，P < 0. 05為差異有顯著性。3.實驗結果3. 1熱板致小鼠疼痛試驗結果布洛芬在30min、60min，布洛芬、01、02號藥在90min，01號藥在120min，口服制 劑組在60、90min時能延長小鼠痛閾值，與空白對照組比較差異有顯著性(P < 0. 01，P < 0. 05)，見表 1-1。表1-1.受試藥對熱板法小鼠痛閾值的影響(又tSD) 3.2醋酸致小鼠扭體試驗各給藥組均能延長小鼠扭體實驗潛伏期，降低扭體次數，與空白組比較差異均有 顯著性(P < 0.01)，見表1-2。表1-2.受試藥對醋酸致小鼠扭體潛伏期和次數的影響(XtSD)

結論4. 1熱板實驗結果證明01號藥90、120min，02號藥90min，口服制劑60、90min時 痛閾值升高，說明01、02號藥和口服制劑有一定的鎮痛作用。4.2扭體實驗結果表明01、02、03、04號藥和口服制劑均能顯著延長小鼠扭體潛 伏期和降低小鼠扭體次數。實驗二、小鼠抗炎試驗(二甲苯致耳廓腫脹法)1.實驗材料1. 1實驗動物ICR小鼠，體重18_22g，雄性80只，上海斯萊克動物有限公司，生產 許可證號SCXY (滬)2007-0005 ；使用許可證好SYXK (蘇)2007-0030。1.2受試藥同前。1. 3試劑二甲苯(上海久億化學試劑有限責任公司，批號20070401)2.實驗方法2. 1各組小鼠隨機分為8組(空白組、布洛芬、雪山金羅漢止痛涂膜劑組、01號藥、 02號藥、03號藥、04號藥、口服制劑組)，將二甲苯0. 08ml/只涂于小鼠右耳兩面，左耳不 涂作為對照，致炎后立即涂抹耳廓給藥(陽性藥布洛芬和口服制劑組灌胃給藥30min后致 炎)，30min后將小鼠脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8mm的打孔器分別在左、右 耳同一部位打下圓耳片，稱重，求左、右兩耳重量之差，作為腫脹度，再按下式計算腫脹率和 腫脹抑制率耳腫脹率=(右耳重量-左耳重量)/左耳重量X 100%耳腫脹抑制率(空白組平均耳腫脹度-給藥組平均耳腫脹度空白組平均 耳腫脹度X100%2. 2統計方法實驗數據以]F士SD表示。組間比較用t檢驗，P < 0. 05為差異有顯著性。3.實驗結果各給藥組小鼠耳廓腫脹度和腫脹率均有下降趨勢，且布洛芬、01號藥、02號藥、04 號藥組和口服制劑組與空白對照組比較差異有顯著性(P < 0. 01，P < 0. 05)見表2
表2-1受試藥對小鼠耳廓腫脹的影響(X±SD) 結論布洛芬、金羅漢組、01號、02號、03號、04號藥以及口服制劑均能降低二甲苯 所致小鼠耳廓腫脹率，具有一定的抗炎作用。但其中作用最強的為02號藥。綜合評價鎮痛抗炎作用最好的為02號藥，其次為01和04號藥。
具體實施例方式實施例1，抗痛風組合物，其特征在于，該組合物原料藥的重量比組成如下麗江 山慈菇180 ；大黃150 ；透骨草120 ；冰片5 ；制成1000ml。其中，將大黃粉碎成粗顆粒，以 適量體積80%的乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，約1小時，裝滲漉桶，加入80%的乙醇適 量，浸泡24小時，收集滲漉液至800ml ；麗江山慈菇與透骨草以8倍量70%乙醇回流提取 2次，每次1. 5小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至相對密度1. 10 1. 15(50°C )的浸膏。 將大黃滲漉液緩緩加入浸膏中，邊加邊攪拌，混合均勻，放置，離心(10000 15000r/m)，備 用。冰片研細，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液中，加純化水至全量，攪勻，調 節pH至5. 0 7. 0，放置24小時，離心(10000 15000r/m)，灌封，即可。本發明處方的篩選、提取工藝及輔料的確定研究過程如下一、提取工藝研究(一 )麗江山慈菇、透骨草醇回流提取工藝的正交試驗研究1、正交試驗設計在對麗江山慈菇、透骨草回流提取工藝考察時，基于前期對參考文獻的查閱理解 及對原藥材的處理經驗，確定乙醇濃度、加乙醇量、回流時間、回流次數四個因素采用以下 正交試驗條件進行優選，選用L 9(34)表進行實驗，合并回流液，回收乙醇，浸膏濃縮并定容 至100ml容量瓶中。以秋水仙堿、槲皮素的含量和回流藥液的出膏率為指標進行檢測，來優 選工藝，各因素水平見下表。
表1回流提取工藝試驗因素水平表 2、正交試驗的樣品制備(1)樣品制備按處方比例，稱取麗江山慈菇9g、透骨草6g，共9份，分別按正交試 驗表各行所列條件提取，合并提取液，回收乙醇，適量濃縮，分別定容至100ml，備用。(2)含量測定①秋水仙堿的測定色譜條件Phenomenex Iuna C18 (4. 6mm X 150mm, 5 μ m)；流動相甲醇-水(45 55)；流速1·Oml/min ；柱溫30°C ；檢測波長245nm。儀器安捷倫1200高效液相色譜儀供試品溶液的制備取醇提正交樣品，精密移取Iml至IOml容量瓶中，以70%甲 醇稀釋至刻度，再精密移取Iml至5ml容量瓶中，以70%甲醇稀釋至刻度，離心，取上清液以 0. 45 μ m微孔濾膜濾過，即得。結果表2秋水仙堿對照品的濃度及校正因子 表3正交試驗樣品中秋水仙堿測定結果 ②槲皮素的測定色譜條件Phenomenex luna C18 (4. 6mmX 150mm, 5 u m)流動相甲醇-0. 磷酸水(40 60)檢測波長360nm儀器安捷倫1200高效液相色譜儀供試品溶液的制備取醇提正交樣品，精密移取10ml至蒸發皿中，蒸至近干，加入 15ml甲醇、25%鹽酸7ml溶解殘渣并轉移至錐形瓶中，水浴回流30分鐘，濾過，轉移至25ml 容量瓶中，以甲醇稀釋至刻度，離心，取上清液以0. 45 y m微孔濾膜濾過，即得。結果表4槲皮素對照品的濃度及校正因子 表5正交試驗樣品中槲皮素測定結果 3、正交試驗表及結果按正交試驗條件，采用綜合評分法，對于影響提取工藝的主要因素秋水仙堿轉移 率Ya權重系數設定為0. 5，槲皮素轉移率Yb權重系數設定為0. 3，出膏率Y。權重系數設定 為0. 2，進行加權評分，公式為Y = O. 5Ya+0. 3Yb+0. 2Y。，結果見下表。表6回流提取工藝正交試驗方案及結果 4、方差分析將試驗結果進行方差分析，結果見下表。表7正交試驗方差分析結果表 5、分析結果由方差分析結果可知，各因素對提取的影響大小順序為D > A > C > B，回流次數 為第一因素，乙醇濃度為第二因素，回流時間為第三因素，乙醇用量為第四因素；最優工藝 水平:A2B3C2D2。即用10倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1. 5小時。回流次數為最顯著影響因素(P < 0. 01)。乙醇用量為最小影響因素(P》0. 05)，而 8倍量溶劑(K = 213. 29)與10倍量溶劑(K = 213. 53)在提取效率上無顯著性差異。從節 約能耗方面考慮，選擇8倍量溶劑進行回流提取。回流提取工藝結論麗江山慈菇粉碎成粗顆粒、透骨草切段，用8倍量70%乙醇， 回流提取2次，每次1.5小時。( 二)大黃乙醇滲漉提取工藝研究1、藥材粉碎粒度的比較將大黃飲片分別進行手工破碎和粉碎成粗顆粒及粗粉，分別稱取15g，以1倍藥材 量體積的80%乙醇潤濕藥材，拌勻，約1小時，裝滲漉柱，加入80%的乙醇至高出藥材層面 約5cm，浸泡24小時，裝滲漉柱，以3 5ml/min的速度收集滲漉液，收集過程中補充80%乙 醇約45ml，收集滲漉液共70ml左右，轉移至100ml容量瓶中，用80 %乙醇定容至刻度。以 大黃總蒽醌的含量為指標進行檢測比較。結果見下表表8不同粉碎粒度的藥材滲漉液中總蒽醌的比較
13 結論從上表可知，在相同浸泡時間和滲漉條件下，手工破碎的總蒽醌提取得率較 小，而粗顆粒和粗粉的提取得率基本一致，故在滲漉工藝中將大黃粉碎成粗顆粒。2、浸潤藥材溶劑用量的考察關于藥材浸潤乙醇用量，如均為10-24目粗顆粒，1倍藥材量體積的乙醇足以將藥 材潤濕。但實際大生產藥材粉碎過程中會產生細粉，一般會在5%-10%左右。藥材粗顆粒 中混有一些細粉，則所用浸潤乙醇會稍多一些。表9浸潤藥材溶劑用量的考察 考慮滲漉過程中細粉過多會堵塞滲漉桶，將大于50目的細粉量控制在10%以內 有利于滲漉工序的順利開展，參照上表乙醇量，將大黃粗顆粒浸潤乙醇用量定為1 1. 3倍 藥材量體積。3、滲漉條件的優選為了選擇大黃乙醇滲漉的最佳條件，我們對滲漉用乙醇濃度、滲漉液收集體積、藥 材浸泡時間三個因素進行考察。(1)乙醇滲漉濃度的考察表10乙醇濃度優選考察表 ①樣品制備將大黃飲片粉碎成粗顆粒，按照十分之一處方量，稱取15g，平行4 份，分別以60%、70%、80%、90%乙醇1倍量體積潤濕藥材，拌勻，使藥材充分溶脹，約1小 時，裝滲漉柱，加入相應濃度的乙醇至高出藥材層面約5cm，浸泡24小時，以3 5ml/min的 速度收集滲漉液，同時向滲漉柱中分別補充相應濃度的乙醇，收集滲漉液共80ml左右，轉 移至100ml容量瓶中，用相應濃度乙醇定容至刻度。②總蒽醌的測定參照中國藥典2010年版大黃含量測定項下測定方法。色譜條件Phenomenex luna C18(4. 6mm X 150mm, 5 u m)；流動相甲醇-0. 磷酸水(66 34)；流速1.Oml/min ；柱溫:30°C ；檢測波長254nm。儀器安捷倫1200高效液相色譜儀供試品溶液的制備取上述樣品，精密移取2ml至燒瓶中，揮去乙醇，加10%鹽酸 溶液10ml，超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時，放冷，至分液漏斗中，用 少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次， 每次20ml，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘渣加甲醇25ml使溶解，轉移至25ml量瓶 中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。③出膏率的測定精密移取樣品10ml至恒重后的蒸發皿中，照中國藥典2010版一部浸出物測定
項下方法測定。④指標比較方法以大黃總蒽醌的含量和滲漉液的出膏率為指標進行比較。采用綜合評分法，對于 影響提取工藝的主要因素大黃總蒽醌含量轉移率權重系數設定為0. 7 ；出膏率權重系數設 定為0. 3，進行加權評分，公式為Y = 0. 7YJ0. 3Y2，⑤結果分析從上表看出，綜合評分方面為80%乙醇最高，90%乙醇的大黃總蒽醌的轉移率稍 高于80%乙醇提取，但出膏率較低，總體評價低于80%乙醇的提取，因此最終選擇滲漉乙 醇濃度為80%。(2)滲漉液收集體積的考察表11滲漉液收集體積的優選考察 ①樣品制備將大黃飲片粉碎成粗顆粒，按照十分之一處方量，稱取15g，平行4 份，以1倍量體積80%的乙醇潤濕藥材，拌勻，使藥材充分溶脹，約1小時，裝滲漉柱，加入 80%的乙醇至高出藥材層面約5cm，浸泡24小時，以3 5ml/min的速度收集滲漉液，同時 向滲漉柱中補充80 %的乙醇，分別收集滲漉液60、70、80、90ml，轉移至100ml容量瓶中，用 80%乙醇定容至刻度。②總蒽醌及出膏率的測定同前。③指標比較方法同前。④結果分析從上表看出，滲漉液收集體積為90ml時，綜合評分最高。90ml滲漉液中總蒽醌含 量僅比80ml滲漉液高出約0.5%，說明80ml滲漉液中大黃總蒽醌已基本收集完全；而90ml 滲漉液比80ml滲漉液所耗用乙醇量則高出12. 5%，綜合考慮乙醇消耗量與有效成分轉移 水平，我們選擇大黃藥材處方量收集滲漉液為80ml。(3)浸泡時間的考察表12浸泡時間條件的優選考察 ①樣品制備將大黃飲片粉碎成粗顆粒，按照十分之一處方量，稱取15g，平行3 份，以1倍量體積80%的乙醇潤濕藥材，拌勻，使藥材充分溶脹，約1小時，裝滲漉柱，加入 80%的乙醇至高出藥材層面約5cm，分別浸泡12、24、36小時，以3 5ml/min的速度收集滲 漉液，同時向滲漉柱中補充80 %的乙醇，收集滲漉液80ml，轉移至100ml容量瓶中，用80 %
乙醇定容至刻度。②總蒽醌及出膏率的測定同前。③指標比較方法同前。④結果分析從上表看出，浸泡時間12小時大黃總蒽醌的含量較低，浸泡時間為24小時和36 小時，大黃總蒽醌的轉移率、出膏率及綜合評分數據相近，基本無差異。從工業化生產效率 方面考慮，選擇大黃藥材浸泡時間為24小時。最終確定大黃滲漉工藝為按照處方量將大黃粉碎成粗顆粒，以1 1. 3倍藥材量 體積80 %的乙醇潤濕藥材，拌勻，使藥材充分溶脹，約1小時，裝滲漉桶，加入80 %的乙醇適 量，浸泡24小時，以3 5ml/min的速度收集滲漉液，同時向滲漉桶中補充80%的乙醇，收 集滲漉液共800ml。三、濃縮及初步配液工藝
1、回流提取液濃縮工藝按照前述提取工藝正交試驗結果，麗江山慈菇、透骨草按照處方量以8倍量70% 乙醇回流2次，每次1. 5小時，合并回流液，回收乙醇。分別將回流液濃縮至100、90、80ml， 測定其相對密度如下表13回流液不同濃縮體積浸膏相對密度考察表 根據上述數據，確定回流液濃縮至相對密度1. 10 1. 15(50°C )的浸膏。2、初步配液工藝大黃按照處方量以80%乙醇浸泡24小時，以3 5ml/min速度滲漉，收集滲漉液 800ml，備用；麗江山慈菇、透骨草按照處方量以8倍量70%乙醇回流2次，每次1. 5小時， 合并回流液，回收乙醇，并濃縮至相對密度1. 10 1. 15(50°C )的浸膏。考慮到濃縮浸膏較為稠厚，直接加入滲漉液中不易混勻，不利于浸膏中有效成分 的充分溶出。因此先用部分的滲漉液對浸膏進行稀釋，再進行整體混合配液。取部分大黃滲漉液緩緩加入浸膏中，邊加邊攪拌，分別觀察加入量約為浸膏體積 的1倍、2倍、3倍體積時混合藥液的性狀情況，如下表表14不同稀釋體積混合藥液的性狀觀察
大黃滲漉液加入體積倍數 混合藥液性狀 ~Tm攪拌后藥液中有明顯的塊狀沉淀，不溶物較多。
攪拌后有少量的顆粒物不溶，但能均勻分布，不結塊 攪拌后仍有少量的顆粒物不溶，均勻分布，不結塊^從上表可以看出，1倍量大黃滲漉液的加入不能將濃縮浸膏充分稀釋，仍有大量不 溶物存在；加入大黃滲漉液體積達到2倍時，混合藥液中不再有成團結塊的沉淀，加入3倍 滲漉液稀釋與2倍滲漉液稀釋的藥液性狀相接近，仍存有部分的沉淀。因此，初步稀釋加入 2倍浸膏體積的大黃滲漉液。初步稀釋后的混合藥液繼續緩緩加入剩余的大黃滲漉液，邊加邊攪拌，混合均勻。在實際生產過程中，可將上述回流液濃縮浸膏先加入配液罐中，緩緩加入2倍浸 膏體積的大黃滲漉液，攪拌均勻，再緩緩加入剩余的大黃滲漉液，邊加邊攪拌，混合均勻。上述配液過程符合實際液體生產情況，具備可操作性。濃縮初步配液工藝結論麗江山慈菇、透骨草的回流提取液濃縮至相對密度 1. 10 1. 15(50°C)的浸膏。取2倍浸膏體積量的大黃滲漉液緩緩加入浸膏，攪拌均勻，繼 續將剩余的大黃滲漉液緩緩加入混合藥液中，邊加邊攪拌，混合均勻，放置，待離心。四、離心工藝考察 以藥液的性狀、秋水仙堿含量、大黃總蒽醌含量三個指標對離心時間和離心轉速 進行比較考察。1、離心時間的考察取上述混合后的藥液按照lOOOOr/m的轉速進行離心操作，分別離心3分鐘、5分 鐘、8分鐘。分別取上清液按照以下供試品處理方法處理，測定離心前及離心后藥液中的秋 水仙堿、大黃總蒽醌含量。秋水仙堿的測定供試品處理方法精密移取藥液1ml，置25ml容量瓶中，用甲醇稀釋定容至刻度， 搖勻，以微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過，即得。色譜條件同前述“提取工藝研究”項下秋水仙堿含量測定條件。大黃總蒽醌的測定供試品處理方法精密移取Iml藥液至燒瓶中，揮去乙醇，加10%鹽酸溶液10ml， 超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時，放冷，至分液漏斗中，用少量三氯甲 烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次20ml，合 并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘渣加甲醇IOml使溶解，轉移至IOml量瓶中，加甲醇至 刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。色譜條件同前述“滲漉條件的優選”項下大黃總蒽醌含量測定條件。測定結果見 下表表15不同離心時間藥液性狀及相關成分含量情況 分析從上表可知，離心達到3分鐘藥液性狀澄清透明；對秋水仙堿的含量，離心 前后未見明顯變化，且不同離心時間對其含量沒有明顯影響(RSD = 0. 99%< 2% )；對大 黃總蒽醌含量而言，離心后藥液中含量有所下降，但不同離心時間對其含量沒有明顯影響(RSD = 0.81%<2%)o結合實際大生產管式離心機的工作狀態為邊離心邊出液，藥液在 離心機中停留時間約為3 5分鐘，因此我們參照時間生產情況將離心時間定為3 5分鐘。2、離心轉速考察取上述混合后的藥液分別按照5000r/m、10000r/m、15000r/m三種轉速進行離心 操作，離心時間5分鐘。分別取上清液按照上述供試品處理方法處理，測定離心前及離心后 藥液中的秋水仙堿、大黃總蒽醌含量。表16不同離心轉速藥液性狀及相關成分含量情況 分析從上表可知，離心轉速達到lOOOOr/min藥液性狀澄清透明；對秋水仙堿 的含量，離心前后未見明顯變化，且不同離心轉速對其含量沒有明顯影響(RSD = 0. 97% < 2% )；對大黃總蒽醌含量而言，離心后藥液中含量有所下降，但不同離心轉速對其含量 沒有明顯影響(RSD = 0. 96%< 2% )。離心工藝結論根據上述分析，我們確定藥液離心轉速為10000 15000r/min，離 心時間為3 5分鐘。五、冰片的加入和增溶劑用量的考察1、增溶劑的選擇處方中的冰片需要用一定量的增溶劑才能均勻的溶解在藥液中。我們嘗試了聚山 梨酯-80、聚乙二醇400兩種增溶劑。經過多次試驗，確定了用3%的聚山梨酯-80和4%聚乙二醇400可以完全的增 溶冰片。但在將其加入藥液的過程中發現，含有聚山梨酯-80的混合物加入到藥液中即產 生大量的絮狀沉淀，應為聚山梨酯-80與藥液中大黃的鞣酸成分發生反應。因此，聚山梨 酯-80不適合作為本制劑的增溶劑。聚乙二醇400和冰片的混合物可以均勻的分散在藥液 中，未見有沉淀析出。因此，我們以聚乙二醇400為冰片的增溶劑。2、增溶劑用量的考察冰片用聚乙二醇400溶解后加入，考察聚乙二醇400使用比例和冰片溶解后加入 藥液的條件。
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按照處方比例稱取冰片，研細，以下表中相應比例聚乙二醇400混合溶解，混合物 溶于藥液中，放置36小時，觀察24小時和36小時藥液的性狀情況。表17聚乙二醇用量的考察 由于聚乙二醇400較為粘稠，冰片溶解均勻后如果直接加入整體藥液中不易分散 均勻，特別在大生產過程中會沉積在藥液底部。因此，先用少量離心后的藥液稀釋分散聚乙 二醇冰片混合物，再加入藥液中攪拌均勻。根據上述試驗結果冰片研細后用聚乙二醇400溶解，用量為4% ；用少量離心后 藥液稀釋分散聚乙二醇冰片混合物，再加入藥液中攪拌均勻。六、藥液PH值的考察本制劑中間體藥液ρΗ值為4. 5-4. 9之間，呈酸性。研究表明，正常人體皮膚的ρΗ 值為5左右，隨著ρΗ值的升高(ρΗ > 5. 5)，皮膚的屏障功能減弱，角質層的致密性和黏合性 降低，將有利于增加藥物的透皮吸收。綜合考慮藥液的性狀、有效成分含量變化和制劑穩定 性等因素，我們將藥液的PH值調節至5. 0 7. 0，考察ρΗ值的變化對藥液性狀、指標成分及 穩定性的影響，并最終確定PH值的范圍。1、ρΗ調節劑的選擇氫氧化鈉作為ρΗ調節劑，需要溶解在水中才能對藥液ρΗ進行調節。我們在試驗 中發現。高濃度的氫氧化鈉水溶液在滴加入藥液的瞬間，會使局部藥液顏色變紅，應為藥液 中大黃蒽醌類成分受到局部高濃度堿的影響遭到破壞。而且用氫氧化鈉的水溶液調節藥液 PH值后，藥液中隨即會產生沉淀物，造成藥液有效成分的破壞。三乙醇胺的性質較為溫和，作為ρΗ調節劑加入藥液中未發生局部藥液顏色變化 情況，完成PH調節過程后，藥液也未隨即出現沉淀現象。根據上述實際試驗情況，我們決定選擇三乙醇胺為PH調節劑。2、ρΗ值范圍的確定取本品離心后的中間體藥液50ml (ρΗ = 4. 6)，共7份，其中6份分別用三乙醇胺調 節PH值為5. 0、5. 5、6. 0、6. 5、7. 0、7. 5。室溫放置24小時，觀察記錄其性狀，同時測定藥液 中的秋水仙堿及大黃總蒽醌的含量。如藥液中出現沉淀，則將藥液離心后取上清液進行測定。秋水仙堿的測定供試品處理方法精密移取藥液1ml，置25ml容量瓶中，用甲醇稀釋定容至刻度， 搖勻，以微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過，即得。色譜條件同前述“提取工藝研究”項下秋水仙堿含量測定條件。
大黃總蒽醌的測定供試品處理方法精密移取1ml藥液至燒瓶中，揮去乙醇，加10%鹽酸溶液10ml， 超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時，放冷，至分液漏斗中，用少量三氯甲 烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次20ml，合 并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘渣加甲醇10ml使溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至 刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。色譜條件同前述“滲漉條件的優選”項下大黃總蒽醌含量測定條件。測定結果見下表表18不同pH值條件下藥液性狀及有關成分含量情況(1) 分析從上可以看出，隨著pH值的升高，藥液中秋水仙堿的含量未見顯著性變化 (RSD = 1.69% )0大黃總蒽醌的含量未見有顯著性變化(RSD = 1. 03% )，pH值在5. 0 7. 5范圍內對大黃總蒽醌的含量沒有顯著性影響。在上述數據的基礎上，繼續對不同pH值條件下成分含量情況細化研究，分別調節 藥液pH值至5. 3、5. 7、5. 9、6. 1、6. 3、6. 7，測定分析結果如下表19不同pH值條件下藥液性狀及有關成分含量情況(2) 分析從上可以看出，隨著pH值的升高，藥液中秋水仙堿的含量未見顯著性變化 (RSD = 0. 62% ) 大黃總蒽醌的含量未見有顯著性變化(RSD = 2. 52% )0結論綜合上 述藥液性狀、含量變化情況分析，pH值在5. 0 7. 5的范圍內秋水仙堿和大黃總蒽醌的含 量未見有明顯變化。pH值為7. 5時，藥液中出現了比較多的絮狀沉淀物，會造成藥液中其他 成分的損失。確定本制劑成品PH值范圍為5. 0 7. 0。實施例2，與實施例1基本相同，但有以下改變 180 ；大黃150 ；透骨草120 ；冰片5。實施例3，與實施例1基本相同，但有以下改變 160 ；大黃120 ；透骨草100 ；冰片3。實施例4，與實施例1基本相同，但有以下改變 220 ；大黃180 ；透骨草150 ；冰片8。實施例5，與實施例1基本相同，但有以下改變 160 ；大黃180 ；透骨草120 ；冰片8。實施例6，與實施例1基本相同，但有以下改變 220 ；大黃120 ；透骨草100 ；冰片3。實施例7，與實施例1基本相同，但有以下改變 180 ；大黃150 ；透骨草100 ；冰片3。實施例8 14，分別與實施例1 7基本相同，但其中的大黃改為重樓。實施例15 21，分別與實施例1 7基本相同，但其中的冰片改為薄荷腦。實施例22、13，與實施例1基本相同，但有以下改變劑型分別改變為凝膠、噴霧 劑。原料藥的重量比組成是山慈菇 原料藥的重量比組成是山慈菇 原料藥的重量比組成是山慈菇 原料藥的重量比組成是山慈菇 原料藥的重量比組成是山慈菇 原料藥的重量比組成是山慈菇
權利要求
一種抗痛風組合物，其特征在于，該組合物原料藥的重量比組成如下山慈菇 160～220大黃或重樓 120～180透骨草 100～150冰片或薄荷腦3～8
2.根據權利要求1所述的抗痛風組合物，其特征在于，該組合物原料藥的重量比組 成如下山慈菇180 ；大黃或重樓150 ；透骨草120 ；冰片或薄荷腦5 ；制成1000g或 1000ml。
3.根據權利要求1所述的抗痛風組合物，其特征在于，所述的山慈菇采用麗江山慈菇。
4.根據權利要求1或2或3所述的抗痛風組合物，其特征在于，所述的抗痛風組合物的 原料藥的構成是大黃或重樓、麗江山慈菇與透骨草的提取物和冰片的溶液。
5.根據權利要求4所述的抗痛風組合物，其特征在于，所述的抗痛風組合物的原料藥 是以下方法得到的提取物大黃或重樓粉碎，以乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，裝滲漉桶，加入乙醇，浸泡24小 時，收集滲漉液；麗江山慈菇與透骨草以乙醇回流提取，濃縮得到的浸膏； 在此浸膏中緩緩加入上述大黃滲漉液，邊加邊攪拌，混合均勻，離心，備用； 冰片或薄荷腦研細，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液中，攪勻，調節pH至 5. 0 7. 0，加純化水至全量，放置24小時，10000 15000r/m離心，灌封，即可。
6.根據權利要求5所述的抗痛風組合物，其特征在于，原料藥提取物的具體提取操作 如下將大黃粉碎成粗顆粒，以適量體積80%的乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，約1小時， 裝滲漉桶，加入80%的乙醇適量，浸泡24小時，收集滲漉液至800ml ；麗江山慈菇與透骨草 以8倍量70%乙醇回流提取2次，每次1. 5小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至50°C相對 密度1. 10 1. 15的浸膏。將大黃滲漉液緩緩加入浸膏中，邊加邊攪拌，混合均勻，放置， 10000 15000r/m離心，備用。冰片研細，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液中， 加純化水至全量，攪勻，調節pH至5. 0 7. 0，放置24小時，10000 15000r/m離心，灌封， 即可。
7.權利要求1所述的抗痛風組合物的制備方法，其特征在于，步驟如下大黃或重樓粉碎，以乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，裝滲漉桶，加入乙醇，浸泡24小 時，收集滲漉液；麗江山慈菇與透骨草以乙醇回流提取，濃縮得到的浸膏； 在此浸膏中緩緩加入上述大黃滲漉液，邊加邊攪拌，混合均勻，離心，備用 冰片或薄荷腦研細，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液中，攪勻，調節pH至 5. 0 7. 0，加純化水至全量，放置24小時，10000 15000r/m離心，灌封，即可。
8.根據權利要求7所述的抗痛風組合物的制備方法，其特征在于，各步驟的具體操作 如下將大黃粉碎成粗顆粒，以適量體積80%的乙醇潤濕藥材，使藥材充分溶脹，約1小時， 裝滲漉桶，加入80%的乙醇適量，浸泡24小時，收集滲漉液至800ml ；麗江山慈菇與透骨草 以8倍量70%乙醇回流提取2次，每次1. 5小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至50°C相對密度1. 10 1. 15的浸膏。將大黃滲漉液緩緩加入浸膏中，邊加邊攪拌，混合均勻，放置， 10000 15000r/m離心，備用。冰片研細，加適量聚乙二醇400研勻，緩緩加入上述藥液中， 加純化水至全量，攪勻，調節pH至5. 0 7. 0，放置24小時，10000 15000r/m離心，灌封，即可。
9.權利要求1所述的抗痛風組合物在制備抗痛風藥物中的應用。
全文摘要
抗痛風組合物、其制備方法及其在制備抗痛風藥物中的應用組合物原料藥的重量比山慈菇160～220；大黃或重樓120～180；透骨草100～150；冰片或薄荷腦3～8。優化的重量比麗江山慈菇180；大黃或重樓150；透骨草120；冰片或薄荷腦5。制成1000ml或1000g。進一步優化，原料藥構成是大黃或重樓、麗江山慈菇與透骨草的提取物、冰片或薄荷腦的溶液。本發明還提供這種抗痛風組合物的制備方法，以及這種抗痛風組合物在制備抗痛風藥物中的應用。本發明彌補了現有技術中缺少中藥的抗痛風藥物的不足，提供了有效的抗痛風中藥組合物。能夠取得更好的抗痛風治療效果。
文檔編號A61K36/898GK101869670SQ20101019499
公開日2010年10月27日 申請日期2010年6月8日 優先權日2010年6月8日
發明者夏月, 徐超, 李吉峰, 林新艷, 殷書梅, 王宓 申請人:江蘇南星藥業有限責任公司