專利名稱：含膠原修飾脂質體的化妝品主劑和含該主劑的皮膚化妝品的制作方法
技術領域：
本發明涉及含有膠原修飾脂質體的化妝品主劑、和含有該主劑的皮膚化妝品。
技術背景
所謂膠原，一般是構成我們身體的纖維狀蛋白質，在皮膚組織中，真皮的主要成分 是膠原。正常皮膚的膠原起到所謂的皮膚中支柱的作用，牢固地支撐表皮，給皮膚帶來彈性 和張力。這種膠原具有三螺旋結構，由于其結構形狀，水分保持能力非常高，而且化合水量也高。
一直以來，出于對這種膠原的高水分保持能力所帶來的保濕效果的期待，開發了 許多皮膚化妝品和添加物等，但是，由于膠原的平均分子量非常高，達到約20萬 約40萬， 因此，對于提高在各制劑中的溶解性、改善對皮膚的滲透，利用進行加熱處理使溶解性提高 的明膠、或對該明膠進行切斷處理而得到的低分子明膠(所謂的水解膠原)應對。
非專利文獻 1 Takada, Μ. , Yuzuriha, T. , Katayama, K. , Iwamoto, K. , Sunamoto, J.，Biochim. Biophys. Acta,802，237(1984)
非專利文獻 2 Sunamoto, J. , Iwamoto, K. , Takada, M. , Yuzuriha, Τ. , Katayama, K. , In Polymers in Medicine ；Chillini, Ε. , Giusti, P.Α., Eds. Plenum Publishing Co.New York,1984，pl57,Moellerfeld, J.，Press, W.，Ringsdorf
非專利文獻 3 Hamazaki, H. , Sunamoto, J. , J. Biochim. Biophys. Acta,857, 265(1986)
非專 利文獻 4 Sunamoto, J. , Sato, Τ. , Taguchi, Τ. , Hamazaki, H., Macromolecules,25，5567(1992)
這些論文都是通過使疏水性長鏈烷基或膽固醇與支鏈淀粉等多糖類化學結合，將 這些疏水基修飾的多糖類與脂質體混合，從而疏水性基團自發地整合到脂質體膜上，制備 出被疏水基修飾的多糖類包覆的脂質體。因此，這是一種抑制脂質體內容物泄露、并使之穩 定的技術。而且，也可以通過上述包覆實現脂質體在血中的穩定性。但是，對于膠原來說， 由于在向膠原分子中導入疏水性基團的過程中包括加熱工序，導致膠原的三螺旋結構被破 壞，因此，這些論文中公開的技術并不適用。而且，包覆方法和目的也不同。因此，盡管從向 脂質體包覆高分子物質的觀點出發，可以認為是現有技術文獻，但是，與本申請相比，在包 覆技術和/或目的方面都存在明顯差異。發明內容
本發明的目的在于不損害膠原原有的三螺旋結構，提高對肌膚的親和性和駐留 性，提高作為皮膚化妝品使用時皮膚的水分保持能力，并且提高化合水量，更有效地發揮保 濕效果。
反復進行深入研究，結果發現通過使用使維持了三螺旋結構的水溶性膠原吸附 在脂質體表面的膠原修飾脂質體，能夠解決上述問題，從而完成了本發明，其中，所述脂質體具有與角質層細胞間脂質結構類似的雙分子膜結構。
也就是說，本發明涉及以下內容。
(1) 一種化妝品用主劑，其特征在于含有用具有三螺旋結構的水溶性膠原進行 表面修飾后的脂質體的水溶液。
(2)根據上述(1)所述的化妝品用主劑，其特征在于含有用具有三螺旋結構的水 溶性膠原進行表面修飾后的脂質體的水溶液、和透明質酸和/或水解彈性蛋白。
(3)根據上述(1)或(2)所述的化妝品用主劑，其特征在于具有三螺旋結構的水 溶性膠原是去端肽膠原(atelocollagen)。
(4)根據上述(1) (3)中任一項所述的化妝品用主劑，其特征在于其經過凍干。
(5) 一種皮膚化妝品，其特征在于含有上述(1) (3)中任一項所述的化妝品用主劑。
(6)根據上述(5)所述的皮膚化妝品，其特征在于其經過凍干。
發明效果
本發明的膠原修飾脂質體通過將不進行用于提高在水中的溶解性和分散性的化 學處理等、維持了三螺旋結構狀態的水溶性膠原吸附到脂質體上而成，使用水分保持能力 高的狀態的膠原，提供對皮膚的保水效果優異的化妝品。
通常，水溶性膠原由于其帶電狀態，在與透明質酸共存時形成復合體，溶液形成不 均勻的狀態，各自原本的保水功能缺失。但是，根據本發明，通過使水溶性膠原吸附在預先 控制了表面電荷的脂質體上，能夠穩定地保持水溶性膠原的結構，在與透明質酸和水解彈 性蛋白共存的條件下，不形成上述復合體，能夠得到均勻穩定的組合物。
而且，為了維持膠原所具有的三螺旋結構，對于水溶液、凝膠、乳劑等存在游離水 的劑型，通過在膠原的變性溫度(魚類20 30°C，哺乳類36 38°C)以下制造、保管，能 夠實現其穩定化。另一方面，通過進行凍干，使游離水為0%，即使在變性溫度以上也能夠維 持三螺旋結構，使用時添加水溶液將凍干組合物分散，涂布在肌膚上，之后在變性溫度以下 保管、維持，即使是這種使用時調制的類型，也可以以使膠原三螺旋結構穩定化的制劑來使 用。在此，膠原的三螺旋結構，由于存在游離水而在變性溫度以上其結構破壞，形成明膠，但 是，即使存在水，只要其為化合水，則即使在變性溫度以上，三螺旋結構也不會破壞。
具體實施方式
本發明的化妝品用主劑膠原修飾脂質體是通過使水溶性膠原吸附到預先控制了 表面電荷的脂質體上，并經過表面處理而得到的。
為了將脂質體的表面電荷控制為正，在作為脂質體膜主要成分的磷脂酰膽堿(表 面電荷為0)中添加具有正電荷的磷脂酰乙醇胺、二烷基醚銨鹽等，獲得控制為正電荷的脂 質體。
此外，為了將脂質體的表面電荷控制為負，在作為脂質體膜主要成分的磷脂酰膽 堿(表面電荷為0)中添加具有負電荷的磷酸二鯨蠟酯(di phosphate)、磷脂酰肌醇、磷脂 酰甘油、磷脂酸等，獲得控制為負電荷的脂質體。
為了控制吸附在脂質體表面的水溶性膠原的電荷，可以通過酶處理，獲得具有正電荷的膠原；通過堿處理，獲得具有負電荷的膠原。
脂質體的分子量，平均來說，可以在約1萬 約300萬之間適當選擇。
吸附在脂質體表面的水溶性膠原，可以按脂質體膠原=1 0.01 1 100，優 選1 0. 1 1 10的摩爾比吸附。
本發明中使用的水溶性膠原是不進行用于提高在水中的溶解性和分散性的化學 處理等，維持了三螺旋結構的狀態的膠原。水溶性膠原的分子量優選為約20萬 約40萬。 此外，從排除末肽偶爾產生的變態反應方面考慮，優選除去了位于膠原分子兩末端的末肽 的去端肽膠原。
通常，由于制造、保管的復雜性以及提高在水中的溶解性，大部分情況下使用經過 加熱處理的明膠、或通過化學或酶處理等切割原來的膠原的分子量而使其低分子化的產 物，但是，本發明所使用的水溶性膠原使用維持了膠原原有的三螺旋結構的狀態的膠原，因 此，水分保持能力高。
本發明中的所謂脂質體是通過混合磷脂和水而獲得的、由磷脂單層或多層構成的 封閉小泡，與細胞的親和性高。作為脂質體的膜形成基材，可以列舉磷脂酰膽堿、磷脂酰乙 醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、溶血磷脂酰膽堿、神經鞘磷脂、蛋黃 卵磷脂、大豆卵磷脂等天然或合成的磷脂或者氫化磷脂、膽固醇類，例如膽固醇、膽固醇的 烷基酯、植物留醇、植物留醇的烷基酯、甘油糖脂、十六烷基半乳糖苷等酰基葡糖苷、磷酸二 鯨蠟酯、二烷基型合成表面活性劑、N-酰基-神經鞘氨醇或其硫酸酯、N-酰基糖鞘脂、N-高 級酰基谷胱甘肽的一種或兩種以上的混合物。此外，為了脂質體的穩定化或相轉換溫度的 改善，可以根據需要配合多元醇、高級醇、高級脂肪酸等。
而且，也可以在脂質體中內包親水性藥效成分和/或親油性藥效成分。作為親水 性藥效成分或親油性藥效成分，例如可以列舉抗氧化劑、抗菌劑、抗炎癥劑、血液循環促進 劑、美白劑、防皮膚粗糙劑、防老化劑、保濕劑、激素劑、維生素劑、色素和蛋白質類。
作為脂質體的制造方法，可以列舉超聲波法、醇注入法、膽酸除去法、逆相蒸發法、 擠出(Extruder)法、微射流(Microfluidizer)法等。
并且，通過使之與具有高保濕效果的透明質酸和/或水解彈性蛋白共存，能夠制 備水分保持能力優異的高功能保水化妝品，由此也能夠調節由于皮膚干燥引起的皺紋、皮 膚的代謝。
彈性蛋白和膠原都是位于項韌帶、血管、皮膚等結締組織中的重要的蛋白質，具有 幾乎不溶于水的性質。本發明中的所謂水解彈性蛋白，是通過對項韌帶等進行酶處理或草 酸處理，使得在水中的溶解性提高的水解彈性蛋白。
在本發明中，配合上述膠原修飾脂質體、或者在膠原修飾脂質體中混合有透明質 酸和/或水解彈性蛋白而形成的化妝品用主劑，能夠得到皮膚化妝品。
作為本發明的皮膚化妝品，沒有特別限定，例如可以列舉包括美容液、乳液、霜、化 妝水、面膜、洗面劑、按摩劑、粉底液、粉底乳或粉狀粉底等的面妝化妝品等的化妝品、以及 身體用化妝品。
在本發明的皮膚化妝品中，作為膠原修飾脂質體的配合標準，為皮膚化妝品中的 0. 001 IOwt %，優選為 0. 01 5wt%。
在本發明的皮膚化妝品中，膠原修飾脂質體與透明質酸和/或水解彈性蛋白的配合比例可以以任意比例使用，但是，透明質酸和/或水解彈性蛋白的總配合比例優選每份 皮膚化妝品為0. 001 IOwt %，更優選為0. 005 lwt%。如果配合量超過上述量，水中的 分散性變得困難，可能會發生分離、變色或變臭等對穩定性以及作為皮膚化妝品的感官產 生不良影響，因此不優選。
除了上述必需成分之外，在不損害本發明效果的范圍內，可以適當選擇使用通常 在化妝品中配合的成分，例如油脂類、烴、蠟類、脂肪酸、合成酯類等、醇類、粉末、表面活性 劑、增稠齊 、高分子化合物、凝膠化齊 、紫外線吸收齊 、紫外線散射劑、防氧化齊 、色素、顏料、 防腐劑、香料、藥劑或水等。
作為油脂類，可以列舉霍霍巴油、蓖麻油、橄欖油、大豆油、椰子油、棕櫚油、可可 油、貂油、鱉油等。
作為烴類，可以列舉液體石蠟、凡土林、微晶蠟、角鯊烷等。
作為蠟類，可以列舉蜂蠟、羊毛脂、巴西棕櫚蠟(carnaiAa wax)、小燭樹蠟等。
作為脂肪酸，可以列舉肉豆蔻酸、軟脂酸、硬脂酸、油酸、異硬脂酸、月桂酸等。
作為合成酯類，可以列舉肉豆蔻酸異丙酯、軟脂酸異丙酯、油酸丁酯、肉豆蔻酸肉 豆蔻酯、肉豆蔻酸辛基十二烷基酯、單硬脂酸丙二醇酯、乳酸肉豆蔻酯、蘋果酸異硬脂醇酯、 單硬脂酸甘油酯、二硬脂酸二甲基氯化銨等。
油脂類、烴、蠟類、脂肪酸、合成酯類，通常按每份皮膚化妝品共計0 30w/w%的 比例配合。
作為醇類，可以列舉乙醇、1，3-丁二醇、丙二醇、月桂醇、鯨蠟醇、硬脂醇、油醇等。 醇類通常按每份皮膚化妝品0 25W/W%的比例配合。
作為表面活性劑，可以列舉聚甘油脂肪酸酯類、山梨糖醇酐脂肪酸酯類、聚氧 乙烯脂肪酸酯類、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯類、聚氧乙烯烷基醚類、椰子油脂肪酸 單乙醇胺(coconut oil fatty acidmonoethanol amid)、聚氧乙烯固化蓖麻油、月桂基 硫酸鈉、焦谷氨酸異硬脂酸聚氧乙烯甘油、烷基苯磺酸鈉、聚氧乙烯硬脂醚、二烷基磺基 琥珀酸、溴化鯨蠟基吡啶、氯化正十八烷基三甲基銨、單烷基磷酸、N-酰基氨基磺酸酯 (N-acylsulfamatehN-酰基谷氨酰胺、蔗糖脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐單硬脂醇酯、聚 氧乙烯月桂基醚硫酸鈉、聚氧乙烯還原羊毛脂、糖酯等。表面活性劑通常按每份皮膚化妝品 0 10w/w%的比例配合。
作為增稠劑，可以列舉羧基乙烯基聚合物、甲基聚硅氧烷、葡聚糖、羧甲基纖維素、 角叉菜膠、羥丙基甲基纖維素等。增稠劑通常按每份皮膚化妝品0 的比例配合。
作為保濕劑，可以列舉甘油、丙二醇、1，3_ 丁二醇、焦谷氨酸、乙酰谷氨酸、原花青 素(procyanidin)等。保濕劑通常按每份皮膚化妝品0 25%的比例配合。
作為防腐劑，可以列舉苯甲酸、水楊酸、脫氫乙酸或它們鹽類、對氧苯甲酸酯類的 酚類、三氯生、鹵代烴(halocarbon)等。防腐劑通常按每份皮膚化妝品0 0. 的比 例配合。
香料可以使用通常在皮膚化妝品中使用的任意香料。
作為顏料，可以列舉氧化鐵、二氧化鈦、氧化鋅、高嶺土、滑石等。顏料通常按每份 皮膚化妝品0 的比例配合。
作為藥劑，可以列舉小麥胚芽油、維生素Α、維生素Β2、維生素Ε、抗壞血酸_2_磷酸鎂或鈉、D-泛醇、甘草酸二鉀、谷胱甘肽、UV吸收劑、螯合劑、植物提取物、微生物代謝物/ 提取物等。藥劑通常按每份皮膚化妝品0 的比例配合。
作為水，可以列舉自來水、礦泉水、鹽水、海水、海洋深層水、超純水、來自極地冰的 水、含礦水、精制水等。水可以按任意比例配合。
此外，本發明的所謂海洋深層水，是表面海水沉降形成層的產物，是低溫、純凈、富 含營養鹽的特有水，其取水海域為1000 4000m，優選為2000 3000m，取水深度為250 500m，優選為 300 400m。
由于海洋深層水含有豐富的礦物質，因此保濕性優異，并且滲透感優異，可以認為 其能夠促進混合于化妝品中的有效成分向皮膚內的滲透。
本發明的皮膚化妝品可以為任意劑型，例如可以為可溶類乳化劑型或分散型的劑型。
在本發明中，為了在膠原的變性溫度以上進行保管，可以將上述化妝品用主劑或 皮膚化妝品凍干。所謂凍干法表示，以三相點以下的壓力，在固液平衡線上產生相變化，水 分通過升華從固相(冰)中直接氣化而除去，實現水分除去、即干燥。將這種通過升華進行 的脫水干燥法稱為真空凍干，通過使用這種方法，可以在水分的存在下，使容易隨著溫度變 性的有效成分穩定化。在本發明中，通過將膠原修飾脂質體水溶液凍干，制備由除去了水 分的固體成分構成的制劑，在使用時添加水溶液進行振動，獲得膠原修飾脂質體的均勻分 散液。涂抹在面部的想要涂抹的部位等之后，將分散液保存在20°C以下的條件下。這樣一 來，能夠穩定地提供具有三螺旋結構的膠原，而且伴隨脂質體的滲透過程，能夠同時實現膠 原在皮膚角質層中的吸收。
下面表示本發明的實施例和試驗例。
其中，本發明不受本實施例的限定。
[實施例1]
水溶性膠原修飾后的脂質體水溶液
通過擠出法(M.J. Hope, Μ. B. Bally, G. Webb and P. R. Cullis, Biochim. Biophys. Acta, vol. 812,55(1985))制備含有0. 9wt %的蛋黃卵磷脂的脂質體水溶液。該脂質體膜 以蛋黃卵磷脂膽固醇磷酸二鯨蠟酯=4 4 2(摩爾比)構成，在pH 7.0帶負電荷。 該脂質體的平均分子量為約50萬 約100萬。在18°C，將該水溶液與中性條件下帶正電荷 的去端肽膠原0.5wt%水溶液按1 5的比例一邊攪拌，一邊在上述脂質體水溶液中滴加分 子量為約30萬的去端肽膠原水溶液，再用分散機攪拌1小時，獲得水溶性膠原修飾后的脂 質體水溶液。在5°C保管。
[實施例2]
水溶性膠原修飾后的脂質體水溶液
通過擠出法(M.J. Hope, Μ. B. Bally, G. Webb and P. R. Cullis, Biochim. Biophys. Acta, vol. 812,55(1985))制備含有1. 2wt %的蛋黃卵磷脂的脂質體水溶液。該脂質體膜 以蛋黃卵磷脂膽固醇磷脂酰乙醇胺=4 4 2(摩爾比)構成，在pH 7.0帶正電荷。 該脂質體的平均分子量為約50萬 約100萬。在18°C，將該水溶液與中性條件下帶負電荷 的分子量約30萬的去端肽膠原0.5wt%水溶液按2 5的比例一邊攪拌，一邊在上述脂質 體水溶液中滴加去端肽膠原水溶液，再用分散機攪拌1小時，獲得水溶性膠原修飾后的脂質體水溶液。在5°C保管。
[實施例3]
由水溶件膠原表面修飾后的脂質體、誘明質酸和水解彈件蛋白構成的凍干制劑
在17°C，在40重量份的實施例1中獲得的水溶性膠原表面修飾后的脂質體水溶液 中，滴加10重量份的0. 5wt%透明質酸鈉水溶液，接著滴加50重量份的0. 水解彈性 蛋白水溶液，在同溫度下再攪拌30分鐘。在90重量份的該溶液中邊攪拌邊溶解10重量份 的甘露醇。將得到的溶液凍干，得到凍干組合物。在該組合物中添加水，獲得由水溶性膠原 表面修飾后的脂質體、透明質酸和水解彈性蛋白構成的水溶液，可知沒有產生通常觀察到 的膠原與透明質酸鈉的復合體導致的沉淀。
在45°C觀察該凍干組合物的水溶性膠原的三螺旋結構的穩定性。通過SDS-聚丙 烯酰胺凝膠電泳、以及與變性溫度以下保存的同一試樣的粘度的比較，確認三螺旋結構的 穩定性(三螺旋結構一旦破壞，粘度就會降低)。
[表1]
權利要求
1.一種化妝品用主劑，其特征在于含有用具有三螺旋結構的水溶性膠原進行表面修飾后的脂質體的水溶液。
2.根據權利要求1所述的化妝品用主劑，其特征在于含有用具有三螺旋結構的水溶性膠原進行表面修飾后的脂質體的水溶液、和透明質酸 和/或水解彈性蛋白。
3.根據權利要求1或2所述的化妝品用主劑，其特征在于 具有三螺旋結構的水溶性膠原是去端肽膠原。
4.根據權利要求1 3中任一項所述的化妝品用主劑，其特征在于 其是經過凍干的化妝品用主劑。
5.一種皮膚化妝品，其特征在于含有權利要求1 3中任一項所述的化妝品用主劑。
6.根據權利要求5所述的皮膚化妝品，其特征在于 其是經過凍干的皮膚化妝品。
全文摘要
本發明提供一種化妝品用主劑和使用該主劑的化妝品。能夠不損害膠原原有的三螺旋結構，提高對肌膚的親和性和駐留性，提高作為皮膚化妝品使用時皮膚的水分保持能力，并且提高化合水量，更有效地發揮保濕效果。本發明的化妝品用主劑的特征在于，含有用具有三螺旋結構的水溶性膠原進行表面修飾后的脂質體的水溶液。
文檔編號A61K8/64GK102028629SQ201010176940
公開日2011年4月27日 申請日期2010年3月19日 優先權日2009年10月2日
發明者吉川洋行, 小島真一, 小島豪, 計盛智美, 貝瀬千尋, 金子晃久 申請人:株式會社妃頤思