專利名稱：竹節參皂苷v的降血脂作用的制作方法
技術領域：
本發明的涉及竹節參皂苷V的降血脂用途。
背景技術：
高脂血癥(hyperlipidemias)主要是以血漿中膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)升高，高密度脂蛋白(HDL-C)降低為表現的一種血脂代謝紊亂狀態，它是動脈粥樣硬化(AS)和冠心病(CHD)等心腦血管疾病發生的重要危險因素。降低血脂可以延緩AS的進展，進而降低心腦血管疾病的發生率和死亡率。降低膽固醇(TC)可使冠心病的危險性相應降低。目前雖多種化學藥物有明確的降脂作用，但長期應用多有不同程度的副作用。如他汀類藥物長期用藥，極易造成肝損傷，故研究開發療效肯定毒副作用低的中藥新藥具有重要意義。而中醫認為，高血脂癥主要是由氣滯血瘀和氣滯痰濁造成的，臨床上常通過通氣化瘀，降濁化痰進行辨證施治。在用藥上，中醫常采用天然藥食兩用藥材，因其具有降脂作用確切，毒副作用小，材料容易獲得且價格便宜等優勢，逐漸受到人們重視。然而，治療高血脂癥的中藥常常是藥味眾多的湯藥，服用攜帶均不方便。大量源于湯藥的中成藥也因為藥味眾多而難以控制質量。因此，人們期望通過對中醫藥的研究，從植物中找出單一的安全有效的活性部位或活性單體，用于高血脂癥的治療。竹節參為五加科人參屬多年生草本植物Panax japonicus Cl Al Meyl的干燥根。原是一種名貴的民間中草藥，現已收載于《中華人民共和國藥典》，藥用功能類似人參和三七。竹節參生于山坡溝邊、陰濕地區或巖石溝澗旁。主要分布于貴州、湖南、云南、安徽、 江西、湖北等地。每年秋季采挖，除去莖葉，分出肉質根，將根莖除去外皮，曬干或陰干即可入藥。始載于《本草綱目拾遺》。竹節參甘、微苦，溫。具有活血化瘀、消腫止痛、滋補強壯等多種功效。既有類似人參的滋補強壯作用，又有類似三七的散瘀止痛、止血、祛痰作用，主要用于病后虛弱，勞嗽咳血，咳嗽痰多，跌打損傷。竹節參含有多種皂苷、揮發油、糖類和多種氨基酸。本發明要解決的技術問題是研究竹節參皂苷V的降血脂用途。為解決上述問題， 提供技術方案如下。竹節參皂苷V在降血脂方面的運用。所述降血脂方面的運用包括對高血脂癥及高血脂癥導致的動脈粥樣硬化和冠心病的預防和治療。所述組合物包括竹節參皂苷V與藥學上可接受的載體或者常規食用輔料。本發明對高血脂實驗動物的TG、TC和LDL-C有顯著的降低作用，對HDL-C有顯著的升高作用。本發明包括用竹節參皂苷V與藥學上可接受載體混合。藥學上可接受的載體包括口服制劑輔料或胃腸外途徑給藥的輔料。給藥途徑可以是口服、注射、局部給藥等。根據本發明的技術方案，該組合物可以是口服制劑或注射用制劑，其中口服制劑包括膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、口服液、片劑、滴丸等。所用輔料包括淀粉、蔗糖、乳糖、糖粉、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、聚乙二醇、異丙醇、吐溫-80、甘油、丙二醇、微晶纖維素鈉、糊精、環糊精、氯化鈉、維生素C、半胱氨酸、檸檬酸、硫代硫酸鈉、亞硫酸鈉、硬脂酸鹽和明膠等常規輔料，制劑的后期制備工藝及設備均屬制藥領域的常規技術，本發明對此不作限定，故在此不予詳述。本發明組合物口服給藥的劑量為2-3次/天，0. 25 0. 50g/次。本發明竹節參皂苷V提取物是從天然的中藥竹節參中提取得到的，竹節參是常用的中草藥，有長期的中醫用藥經驗，該藥使用安全性高，無明顯毒性作用記載。竹節參皂苷V具有確切的降低高血脂實驗動物TG、TC和LDL-C的顯著性作用，具有升高HDL-C的顯著性作用，且不具有肝毒性，較之辛伐他定相對安全。因此，竹節參皂苷 V有開發成降脂藥物的前景。實施例一竹節參皂苷V的制備竹節參皂苷V的提取、純化和制備取竹節參粗粉，加入10倍量的60%的乙醇，浸泡2小時，水浴回流提取2小時，濾過，得濾液。藥渣再用10倍量的60%的乙醇回流提取 2次，每次2小時，濾過。合并3次濾液，減壓回收乙醇至無醇味，配制成藥材藥液(g/ml) 為0.5 1的溶液。上已經處理好的HPD-100大孔樹脂柱，依次用水、60%的乙醇洗脫。合并60%的乙醇洗脫液，回收溶劑至近干，經65°C減壓干燥，得到竹節參總皂苷。竹節參總皂苷再經ADS-7大孔樹脂柱純化，收集50 % -90%的乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，減壓干燥，得竹節參皂苷V，其純度大于90 %。實施例二竹節參皂苷V的降血脂實驗1.實驗材料1. 1藥物及試劑0.5% CMC-Na溶液，小鼠灌胃針管，離心管，新鮮雞蛋若干只， 辛伐他汀片(上海信誼萬象藥業股份有限公司，批號080201)，血脂康膠襄(北京北大維信生物科技有限公司，批號20080708)，甘油三酯測定試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司，批號20080610)，總膽固醇試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司， 批號20080610)，低密度脂蛋白測定試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司，批號 20080610)。竹節參皂苷V(Zl)為本實驗室自制。1. 2實驗主要儀器TDL80_2B型低速離心機，酶標儀，TGL-16高速臺式冷凍離心機。1. 3實驗動物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18_22g。2.供試液樣品實施例一中制備的竹節參皂苷V。3.試驗樣品液的配制3. 175%蛋黃乳溶液制備取新鮮雞蛋若干只，底部開一小口空出蛋清，蛋黃2輕放于空燒杯中.將針管探入蛋黃薄膜內，吸取蛋黃液，置IOOml的量筒中，量取75ml蛋黃液，以生理鹽水稀釋至刻度，用磁力攪拌器攪拌蛋黃乳溶液10分鐘，使蛋黃乳溶液均勻，減小誤差，造模時臨時配制。3. 2各供試樣品液的配制
3. 2-1. CMC-Na溶液的配制精密稱取5gCMC_Na，IOOOmL蒸餾水，配制成濃度為 0. 5%的 CMC-Na 溶液。3. 2-2.血脂康藥液的配制精密稱取5g內容物，以0. 5 % CMC-Na混懸，定容至 100ml，配制成濃度為0. 05g/ml的藥液樣品。3.2-3.辛伐他汀藥液的配制精密稱取14g辛伐他汀片(含辛伐他汀70mg)， IOOmlO. 5% CMC-Na混懸，配成濃度為0. 0007g/ml藥液樣品。3.2-4.低劑量竹節參皂苷V藥液的配制精密稱取0.375g竹節總皂苷V。 IOOmlO. 5% CMC-Na混懸，配制成濃度為0. 00375g/ml的藥液樣品。3.2-5.高劑量竹節參皂苷V藥液的配制精密稱取0.75g竹節參皂苷V， IOOmlO. 5% CMC-Na混懸，配制成濃度為0. 0075g/ml的藥液樣品。4.實驗方法昆明種小鼠72只，18_22g，雌雄各半，隨機分成6組，每組12只。分為正常空白對照組、高脂模型組、辛伐他汀陽性對照組、血脂康陽性對照組、竹節參皂苷V高劑量組，竹節參皂苷V低劑量組。灌胃給藥。正常對照組和高脂模型組每日按0.2ml/10g灌胃0.5% CMCNa，給藥組每日灌胃給予0. 2ml/10g體積的相應藥物，給藥劑量分別為血脂康對照組為lg/kg、辛伐他汀對照組為0. 014g/kg、竹節參皂苷V高劑量組為0. 15g/kg、竹節參皂苷V 低劑量組為0. 075/kg。共給藥14天。最后一次給藥2小時后，各組均腹腔注射75%蛋黃乳生理鹽水溶液0. 2ml/10g造成實驗性高脂血癥。小鼠造模20小時后，采用摘眼球采血法， 離心分離血清，按照總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白，高密度脂蛋白試劑盒說明書操作， 分別測定TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量。實驗結果如下表1_4所示。表1.竹節參皂苷V(ZV)對TG影響的實驗結果(X士 SD)
組別動物數給藥劑量g/kg給藥形式給藥時間(d)TG(mmol/L)正常對照12—Ig141.38 士 0.36高脂模型12一Ig1415.24 士 3.63**血脂康121Ig147.96±0.84aa辛伐他汀120.014Ig147.06±0.79δαZV高劑量120.15Ig149.25 士 1.04 a ΑZV低劑量120.075Ig1411.34±5.07α注表示模型與空白相比有顯著性差異，#表示模型與空白相比有極顯著性差異。‘表示各給藥組與模型組相比有顯著性差異，▲▲表示各給藥組與模型組相比有極顯著性差異。下同。表2.竹節參皂苷V(ZV)對TC影響的實驗結果(X士 SD)
表3.竹節參皂苷V(ZV)對LDL-C影響的實驗結果(X士 SD)
權利要求
1.竹節參皂苷V的降血脂用途。
2.權利要求1中所述竹節參皂苷V的降血脂用途主要是通過對膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的降低作用，以及對高密度脂蛋白的升高作用達到的。
3.權利要求1中所述竹節參皂苷V的降血脂用途可以被用在包括高血脂癥以及高血脂癥導致的動脈粥樣硬化和冠心病的預防和治療。
4.權利要求1中所述竹節參皂苷V的降血脂用途，其最終實施形式包括竹節參皂苷V 與藥學上可接受的載體或者常規食用輔料。
全文摘要
竹節參皂苷V的降血脂用途，可與藥學上可接受載體混合。
文檔編號A61P3/06GK102247391SQ20101017666
公開日2011年11月23日 申請日期2010年5月19日 優先權日2010年5月19日
發明者楊小林, 石楊, 霍夢蕊 申請人:楊小林