專利名稱：一種呋喃并吲哚類化合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種呋喃并吲哚類化合物，該化合物是溶解微血栓的海洋微生物的代 謝產(chǎn)物，還涉及呋喃并吲哚類化合物的制備方法，和該化合物對(duì)治療和/或預(yù)防各種缺血 性疾病的用途，該化合物作為溶血栓治療藥物。
背景技術(shù)：
血栓病是人類的常見多發(fā)病，心腦血管疾病中有很大比例是血栓病，溶栓療法是 治療血栓性疾病的重要方法之一。一直以來(lái)，溶血栓藥物都被作為心肌梗塞、腦栓塞、肺血 栓等重篤血栓癥急性期的治療藥物，其治療目的主要是溶解血管內(nèi)血栓和改善血液循環(huán)， 溶血栓藥是治療血栓性疾病的關(guān)鍵藥物。早期的溶血栓藥為鏈激酶(Strepto kinase, SK)、尿激酶⑴rokinase，UK)、蚓激酶(Lumbrukinase)、尿激酶原(Pro-urokinase)、葡激酶 (Staphylokinase)、甲氧苯甲酰纖溶酶原-鏈激酶激活劑復(fù)合物(Anisoylatedplasminoge n-streptokinase activator complex, APSAC))、蛇毒抗栓酶(Fibrinoenase from snake venom)，最近使用的溶血栓藥為阿替普酶(Alteplase)、瑞替普酶(Ret印Iase)等。圍繞著血栓疾病的治療既纖溶作用，在臨床上使用的溶血栓藥物會(huì)帶來(lái)出血的重 大危險(xiǎn)性，由于上述藥物的安全問(wèn)題，自20世紀(jì)90年代開始，一些研究者開始探索用組織 型纖溶酶原激活劑變異體(如TNKase、Monteplase, La noteplase)、脂質(zhì)化合物用于血栓 疾病的治療。研究發(fā)現(xiàn)，相比組織型纖溶酶原激活劑分子量小的活性化血液蛋白質(zhì)C具有 抗凝血作用和促進(jìn)纖溶作用；血小板膜特異性糖蛋白的抑制藥物阿昔單抗作為小分子量的 短肽抗凝血藥物已經(jīng)用于臨床；血液凝固因子敘的低分子抑制化合物作為藥物正處于開 發(fā)階段。但已經(jīng)用于臨床或正在試驗(yàn)階段的抗凝血藥物除了都有程度不同的出血危險(xiǎn)性以 外，阿昔單抗的使用已經(jīng)帶來(lái)了像阿司匹林投與后的血小板減少的副作用。因此，在這一 治療領(lǐng)域正急待著出血危險(xiǎn)性小、不損傷血液因子、活性能夠簡(jiǎn)單調(diào)控的低分子化合物作 為血栓疾病治療藥物的出現(xiàn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的問(wèn)題是為采用纖溶療法進(jìn)行血栓疾病的治療和/或預(yù)防提供效 果明顯、不存在出血危險(xiǎn)性的臨床藥物。為了在血栓疾病治療領(lǐng)域發(fā)現(xiàn)出血危險(xiǎn)性小、不損傷血液因子、活性能夠簡(jiǎn)單調(diào) 控的低分子化合物的藥物，發(fā)明人從海洋和陸地的微生物、動(dòng)植物的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了篩 選和廣泛而深入的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)用化合物(1)呋喃并吲哚類化合物(furan-p-indole compounds, FPIC)，該化合物是溶解微血栓的海洋微生物的代謝產(chǎn)物，該化合物作為溶血栓 藥即能為微血栓疾病的治療和/或預(yù)防提供效果明顯、不存在出血危險(xiǎn)性的臨床藥物，從 而完成本發(fā)明。本發(fā)明所需要解決的技術(shù)問(wèn)題，可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)作為本發(fā)明的第一方面，一種呋喃并吲哚類化合物，其特征在于，所述化合物具有
權(quán)利要求
1.一種呋喃并吲哚類化合物，其特征在于，所述化合物具有結(jié)構(gòu)式(1)，
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的呋喃并吲哚類化合物，其特征在于，所述氨基酸殘基包括色 氨酸殘基、蛋氨酸殘基、蘇氨酸殘基、纈氨酸殘基、賴氨酸殘基、組氨酸殘基、亮氨酸殘基、異 亮氨酸殘基、丙氨酸殘基、苯丙氨酸殘基、胱氨酸殘基、半胱氨酸殘基、精氨酸殘基、甘氨酸 殘基、絲氨酸殘基、酪氨酸殘基、谷氨酸殘基、天門冬氨酸殘基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的呋喃并吲哚類化合物，其特征在于，所述苯甲酸類似物包含 對(duì)苯甲酸殘基、間苯甲酸殘基、間羥基苯甲酸殘基、鄰羥基苯甲酸殘基、對(duì)羥基苯甲酸殘基， 具有結(jié)構(gòu)式(2)，
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的呋喃并吲哚類化合物，其特征在于，所述苯基甘氨酸類似物 包含苯基甘氨酸殘基、對(duì)羥基苯甘氨酸殘基和間羥基苯甘氨酸殘基，每個(gè)殘基又分S構(gòu)型 和R構(gòu)型，具有結(jié)構(gòu)式(3)，
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的呋喃并吲哚類化合物，其特征在于，所述二聚體類似物的R結(jié) 構(gòu)具有結(jié)構(gòu)式(4)，
6.一種如權(quán)利要求1所述的呋喃并吲哚類化合物的制備方法，其特征在于，分離 的海洋微生物斜面菌株TO216，所述菌株TO216分離自舟山群島海域，屬于小單胞菌屬 (Micromonospora sp.)，經(jīng)種子培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng)、甲醇提取、HPLC分離(即高效液相色譜分 離)、冷凍干燥步驟而得到具有溶血栓促進(jìn)作用的化合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述種子培養(yǎng)步驟接種斜面菌株 FG216的種子培養(yǎng)基是改良的查氏培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基每IOOOml人工海水中含有蔗糖50g、 硝酸鈉3g、磷酸氫二鉀0. lg、硫酸鎂0. 5g、氯化鉀0. 5g、酵母提取物lg、氯化鈷0. 0025g、 硫酸亞鐵0. 015g、氯化鈣0. 0065g，pH 5. 8經(jīng)滅菌后使用。每IOOOml人工海水含有氯化鈉 24. 72g、氯化鉀0. 67g、氯化鈣1. 36g、氯化鎂4. 66g、硫酸鎂6. 29g、碳酸氫鈉0. 18 g。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)步驟上述TO216種 子培養(yǎng)液按照1-5%的接種量分別接種于含有改良的查氏培養(yǎng)基的三角瓶，在25-30°C、 180-240r · miiT1的恒溫?fù)u床上培養(yǎng)4天后，添加培養(yǎng)基體積1 %重量的賴氨酸或苯丙氨酸 或鳥氨酸，培養(yǎng)M小時(shí)后，完成發(fā)酵培養(yǎng)。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述甲醇提取步驟培養(yǎng)結(jié)束后，三 角瓶中加入等體積的甲醇，超聲5-15min，在轉(zhuǎn)速IOOOOrpm條件下離心10-15min，棄除沉 淀，上清液40-60°C條件下減壓蒸餾蒸干，濃縮物真空干燥8-12h，干固物溶于少量甲醇，過(guò) 濾棄除沉淀，收集上清液，再減壓濃縮真空干燥，所得干固物既為含有溶血栓作用呋喃并吲 哚類化合物的微生物代謝產(chǎn)物提取物。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述HPLC分離步驟上述的微生物 代謝產(chǎn)物提取物溶于甲醇，溶解后的溶液在流動(dòng)相甲醇和0.05M乙酸銨(70-85 30-15)、 流速8-10ml/min、檢測(cè)波長(zhǎng)洸5歷的條件下被色譜柱kpax HP-C18柱Ql. 2mmX 250mm, 10 μ m)，分離出呋喃并吲哚類化合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述冷凍干燥步驟分離化合物的 洗脫峰部分在50-60°C被旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，經(jīng)冷凍干燥后得到純化的促進(jìn)微血栓溶解 的呋喃并吲哚類化合物。
12.—種如權(quán)利要求1所述的呋喃并吲哚類化合物的應(yīng)用，其特征在于，所述呋喃并吲 哚類化合物在制備治療和/或預(yù)防缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的應(yīng)用，其特征在于，所述呋喃并吲哚類化合物制備臨床治 療微血栓、急性血栓癥狀的肺血栓、腦血栓和心肌梗塞等血栓性疾病的溶血栓制劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的應(yīng)用，其特征在于，所述呋喃并吲哚類化合物制作成溶液型。
15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的應(yīng)用，其特征在于，所述呋喃并吲哚類化合物制作成固體 分散型。
全文摘要
一種呋喃并吲哚類化合物及其制備方法和其作為溶血栓治療藥物的用途。該化合物通過(guò)分離的海洋微生物斜面菌株FG216經(jīng)種子培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng)、甲醇提取、HPLC分離、冷凍干燥而得到。該化合物的溶解微血栓作用在分子水平反應(yīng)體系、in vitro反應(yīng)體系體現(xiàn)出來(lái)。該化合物是通過(guò)纖溶療法用于治療和/或預(yù)防微血栓性疾病，沒(méi)有急性毒性作用，可以做成固體片劑和液體制劑。作為溶血栓制劑能臨床治療慢性血栓、急性血栓癥狀的肺血栓、腦血栓和心肌梗塞等血栓性疾病，以及作為鏈激酶、尿激酶、瑞替普酶的協(xié)同或輔助治療藥物。
文檔編號(hào)A61P9/10GK102115478SQ20101017422
公開日2011年7月6日 申請(qǐng)日期2010年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月14日
發(fā)明者包斌, 吳文惠, 張文俊, 汪珈慧, 王幸, 瞿佳華, 郝斐, 陳志華 申請(qǐng)人:上海海洋大學(xué)