專利名稱：用于與軟骨損傷有關的應用的藥物的制作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥組合物以及所述組合物在治療、緩解和預防與軟骨損傷相關的疾 病和與它相關的疼痛、或者預防關節病(artrose)和類風濕性關節炎和與它相關的疼痛中 的應用。
背景技術：
在工業世界中三個成年人中多達一個可能目前患有慢性關節癥狀或關節炎。最常 見的癥狀，持續的關節疼痛，可以表現為髖痛、膝痛、手痛或腕痛、以及在身體的其它區域中的 關節疼痛。所述癥狀造成痛苦并在人們被迫停止工作或削減工作時間時造成經濟損失。醫療 護理也花費不菲。顯然，需要用于緩解或治療關節癥狀和關節炎的經濟有效的解決方案。
發明內容
本發明的具體實施方式
包括包含選自由下列物質組成的組中的至少一個成員的 物質在制備用于治療或預防軟骨的炎性或非炎性損傷的疾病和與上述相關的疼痛的藥物 制劑中的應用α-酮戊二酸、谷氨酰胺、谷氨酸和這些酸的藥用鹽、α-酮戊二酸和氨基酸 或二肽或三肽的酰胺、谷氨酰胺和其它氨基酸的二肽、谷氨酰胺和其它氨基酸的三肽、谷氨 酸(glutamine acid)和其它氨基酸的二肽、谷氨酸和其它氨基酸的三肽和所述二肽和三肽 的藥用鹽、α-酮戊二酸或其藥用鹽與至少一種氨基酸的藥物學上可接受的物理狀態混合 物(physical mixture)。另外的具體實施方式
包括如上所述在用于治療或預防關節病和類風濕性關節炎 以及與上述相關的疼痛中的應用。另外的具體實施方式
包括如上所述在用于治療或預防在涉及重量減輕和/或受 損的營養、或胃切除術、部分(局部)胃切除術或胃囊帶術(胃束帶，gastric banding)的 情況下的軟骨損傷中的應用。另外的具體實施方式
包括如上所述在用于治療或預防在涉及營養不良的情況下 的軟骨損傷中的應用。另外的具體實施方式
包括如上所述用于在上述條件下減輕與軟骨損傷相關的疼 痛中的應用。另外的具體實施方式
包括如上所述在用于治療或預防與胃切除術相關的骨質疏 松癥中的應用。
通過下面的借助優選的具體實施方式
、實施例研究和附圖的描述將進一步解釋本發明，附圖中圖1是描述了飲食α-酮戊二酸鹽和胃切除術對大鼠體重的影響的圖；圖2示出了實驗大鼠的顱骨(顱蓋)的上部的四張透視照片；圖3是示出了實驗大鼠的顱蓋的透視照片上發現的陷窩面積(區域，范圍，area)的圖。
具體實施例方式因此，根據本發明的一個方面，提供了選自由下列物質組成的組中的至少一個成 員在制備用于治療或預防關節病(artrose)、類風濕性關節炎和軟骨破壞的疾病和與上述 疾病相關的疼痛的藥物制劑中的新應用，所述物質為α-酮戊二酸、谷氨酰胺、谷氨酸和 這些酸的藥用鹽、α -酮戊二酸和氨基酸或者二肽或三肽的酰胺、谷氨酰胺和其它氨基酸的 二肽、谷氨酰胺和其它氨基酸的三肽、谷氨酸和其它氨基酸的二肽、谷氨酸和其它氨基酸的 三肽和所述二肽和三肽的藥用鹽、α“酮戊二酸或其藥用鹽與至少一種氨基酸的藥物學上 可接受的物理狀態混合物。根據本發明優選的具體實施方式
，使用α-酮戊二酸或其堿金屬或堿土金屬鹽或 者它們的組合。優選地，使用α-酮戊二酸鈉。根據本發明的另一方面，提供了一種用于治療或預防哺乳動物(包括人)中選自 包括關節病的組的至少一個成員的增加的疼痛的疾病的方法，該方法包括給予需要這樣的 治療或預防的受治療者有效疼痛量的選自由下列物質組成的組中的至少一種成員，所述物 質為α -酮戊二酸、谷氨酰胺、谷氨酸和這些酸的藥用鹽、α -酮戊二酸和氨基酸或者二肽 或三肽的酰胺、谷氨酰胺和其它氨基酸的二肽、谷氨酰胺和其它氨基酸的三肽、谷氨酸和其 它氨基酸的二肽、谷氨酸和其它氨基酸的三肽和所述二肽和三肽的藥用鹽、α -酮戊二酸或 其藥用鹽與至少一種氨基酸的藥物學上可接受的物理狀態混合物。根據這些方面的優選具體實施方式
，給予α -酮戊二酸或其堿金屬或堿土金屬鹽 或者它們的組合。最優選地，給予α-酮戊二酸鈉。根據本發明所用的活性成分(有效成分，active principle)或組分(成分)的 藥物制劑可以給予脊椎動物，包括哺乳動物和鳥類，如嚙齒動物，如小鼠、大鼠、豚鼠、或兔； 鳥，如火雞、母雞或小雞和其它雛雞以及自由行走的動物；牛、馬、豬或小豬以及其它農場動 物、狗、貓和其它寵物，尤其是人。可以以不同的方式進行給藥，取決于要治療的脊椎動物是什么種類、需要所述方 法的脊椎動物的疾病、以及要治療的特異性適應癥(specific indication) 0在一個具體實施方式
中，給藥作為食物或飼料添加劑進行，如飲食添加劑和/或 固體食物形式的成分和/或飲料。另外的具體實施方式
可以在懸浮液或溶液中，如下面進 一步描述的飲料。此外，形式可以為膠囊或片劑，如可咀嚼或可溶的，如泡騰片劑，以及粉劑 和本領域技術人員已知的其它干燥形式，如丸劑，如小丸、和顆粒。給藥可以作為腸胃外、直腸或經口食物或飼料添加劑，如上所揭示的。腸道外載體包括氯化鈉溶液、林格(Ringer's)右旋糖、右旋糖和氯化鈉、乳酸林格(Ringer's)或固定 油(不揮發性油)。食物和飼料添加劑還可以被乳化。一種或多種活性治療成分隨后可以與賦形劑混合，賦形劑是藥物學上可接受的并且與活性成分是相容的。合適的賦形劑是，例如，水、鹽、 右旋糖、甘油、乙醇等以及它們的組合。此外，如果需要，該組合物可以包含少量的輔助物 質，如濕潤劑或乳化劑、PH、緩沖劑，其提高了活性成分的效能。 可以供應不同形式的親本(parental)食物或飼料添加劑，如固體食物、液體或凍 干或以其他方式干燥的制劑。它可以包括各種緩沖劑(如，Tris-HCl、乙酸鹽、磷酸鹽)、pH 和離子強度的稀釋劑、添加劑如白蛋白或凝膠(明膠)以防止吸收到表面、去垢劑(如吐溫 20、吐溫80、PluroniC F68 (聚丙二醇與環氧乙烷的加聚物F68)、膽汁酸鹽)、增溶劑(如甘 油、聚乙二醇)、抗氧化劑(如抗壞血酸、焦亞硫酸鈉)、防腐劑(如硫柳汞(工汞硫代水楊酸 鈉，Thimerosal)、苯甲醇、對羥基苯甲酸酯類(parabens))、膨脹物質(bulkingsubstance) 或張性改性劑(如乳糖、甘露醇)、聚合物如聚乙二醇到組合物的共價連接、與金屬離子絡 合、或物質進入或到達聚合化合物(如聚乳酸、聚乙醇酸、水凝膠等)的微粒制劑的并入、或 物質到達脂質體、微乳、膠束、單層或多層泡囊、紅細胞影(erythrocyteghost)、或球形體。在一個具體實施方式
中，根據本發明的方法的任何一個中，食物或飼料添加劑以 飲料或它們的干燥組合物的形式給予。飲料包括有效量的活性成分或其成分，以及營養上可接受的水溶性載體，如礦物、 維生素、碳水化合物、脂肪和蛋白質。如果飲料以干燥形式提供，則所有這些組分以干燥形 式供應。所提供的準備用于消費的飲料還包括水。最終的飲料溶液還可以具有受控的張性 (tonicity)和酸度，如根據上面段落中的一般建議作為緩沖溶液。pH優選在約2-5的范圍內，尤其是約2-4，以防止細菌和真菌生長。也可以使用無 菌飲料，其中PH為約6-8。飲料可以單獨供應或與一種或多種治療有效的組合物結合供應。根據另外的具體實施方式
，作為用于口服和直腸應用的藥物的藥物制劑可以為片 齊 、錠劑、膠囊、粉劑、水或油狀混懸劑、糖漿、酏劑、水溶液等的形式，包括活性成分或多種 成分，混合有藥用載體和/或添加劑，如稀釋劑、防腐劑、增溶劑、乳化劑、佐劑和/或載體， 在本發明披露的方法和應用中是有用的。此外，本文所用的“藥用載體”是本領域技術人員熟知的，并且可以包括，但不限 于，0.01-0. 05Μ磷酸鹽緩沖液或0.8%鹽水。此外，這樣的藥用載體可以為含水或非水溶 液、懸浮液、以及乳濁液。非水溶劑的實例是丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄欖油、以及可注 射的有機酯如油酸乙酯。含水載體包括水、醇/水溶液、乳濁液或懸浮液、包括鹽水和緩沖 介質。腸胃外載體包括氯化鈉溶液、林格右旋糖、右旋糖和氯化鈉、乳酸林格或固定油。防 腐劑和其它添加劑也可以存在，如，例如，抗菌劑、抗氧化劑、螯合劑、惰性氣體等。形成具有α -酮戊二酸的酰胺或具有谷氨酰胺或谷氨酸的二肽或具有谷氨酰胺 和/或谷氨酸的三肽的部分的氨基酸可以為自然界中作為肽中成分存在的任何氨基酸。同 樣的應用于α-酮戊二酸或其鹽與至少一個氨基酸的藥學上可接受的物理狀態混合物。優 選地，所述氨基酸或酸選自由精氨酸、鳥氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和賴氨酸組成的組。所述氨基酸優選以它們的L-構型使用。α -酮戊二酸與氨基酸或二肽或三肽的酰胺的實例包括，但不限于，α -酮戊二酸 與選自由下列物質組成的組中的氨基酸的酰胺谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸、鳥氨酸、賴氨 酸、脯氨酸、異亮氨酸和亮氨酸以及α-酮戊二酸與二肽的酰胺，其中所述二肽為谷氨酰胺與谷氨酸、精氨酸、鳥氨酸、賴氨酸、脯氨酸、異亮氨酸和亮氨酸的任何一個的二肽，以及谷氨酸與精氨酸、鳥氨酸、賴氨酸、脯氨酸、異亮氨酸和亮氨酸的任何一個的二肽。谷氨酰胺和谷氨酸與其它氨基酸的二肽和肽的實例包括上述那些，與α -酮戊二 酸與二肽或三肽的酰胺有關。α -酮戊二酸或其鹽與至少一種氨基酸的物理狀態混合物的實例包括，但不限于， 選自由α-酮戊二酸和其鈉、鉀、鈣和鎂鹽組成的組中的至少一個成員與谷氨酰胺、谷氨 酸、精氨酸、鳥氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸和脯氨酸以及所述氨基酸的任何組合中的任 何一個的物理狀態混合物。α-酮戊二酸或其鹽與所述物理狀態混合物的氨基酸或多個氨基酸的摩爾比一 般在1 0.01至1 2的限度內，優選為1 0. 1至1 1.5，并且最優選為1 0. 2至 1 1.0。待給予的劑量將根據待所用的活性成分或成分、待治療的疾病、待治療的患者的 年齡、性別、體重等而變化，但一般在1至1000mg/kg體重/天的范圍內，或從10至400mg/ kg體重/天，優選從10至100mg/kg體重/天。現在，將通過實施例的方式進一步示出本發明，該實施例不應被視為限制本發明 的范圍。實施例背景手術去除胃(胃切除術，Gx)導致動物和人類中骨質疏松癥。胃切除術主要 影響小梁骨的結構。不清楚Gx是否也不利地影響骺板。飲食α-酮戊二酸(AKG)是羥脯 氨酸(羥基脯氨酸)的前體-骨和軟骨前膠原中最豐富的氨基酸。研究的目的是突出AKG 對胃切除術依賴性骨/軟骨損失的作用。方法利用40只雌性Sprague-Dawley大鼠。將20只大鼠胃切除并分成2組 Gx+AKG和Gx+安慰劑。對另外20只大鼠進行假手術(sham-operate)并分成另外的2組 Sham (假手術)+AKG和Sham (假手術)+安慰劑。在8周后，處死動物，收集顱蓋、股骨和脛 骨。估計右股骨和脛骨中的骨質量密度(BMD)和骨礦物濃度(BMC)，并估計來自左骨的組織 形態計量學(組織形態測量學，histomorphometry)。還進行了顱蓋的透視法測量。結果飲食α _酮戊二酸揭示了對胃切除的大鼠的顱蓋骨損失的強保護作用。AKG 表現了對胃切除大鼠的骺板細胞、小梁骨體積和小梁形狀的強抗破壞作用。結論:AKG最小化大鼠胃切除術后發展的骨和軟骨破壞。手術去除胃導致人類、大鼠和其它實驗動物中骨質減少和關節炎。胃切除術與人 類中的骨質減少有關。胃功能障礙也有助于老年人中骨質減少的發展。因此，大多數研究 涉及在胃切除后對患者的骨疾病處理。胃切除術主要影響小梁骨、有時也影響皮質骨(骨皮質)、引起顱蓋骨破壞的顯著 作用。胃切除術后皮質和小梁骨質量的減少已經在兩種人類性別中報道。在胃切除術16 周后脛骨和股骨中的小梁骨體積減少60%。骨損失增加了胃切除術患者中髖、椎骨和其它 部位的骨折風險，其是當今嚴重的問題。假定胃切除患者中的骨損失不是飲食不足(如鈣)或缺乏胃酸或維生素D的結 果。胃切除術后引發的骨質疏松癥的機制仍是未知的。然而，假定，骨質疏松癥的主要原因 是骨膠原在被破骨細胞大量破壞后不能重新合成。骨前膠原的主要成分是脯氨酸-在胃腸道中經由谷氨酸鹽(谷氨酸)并經由脯氨酸從AKG合成的氨基酸，其又在AKG、維生素C和 Fe2+的存在下在骨前膠原中轉化為羥(基)脯氨酸。最近顯示AKG可以有效防止卵巢切除 的大鼠和火雞中切除神經的骨中的骨損失。考慮到上述全部，所述研究的主要目的是研究 飲食AKG是否可以防止胃切除的大鼠中的骨和軟骨損失。動物和手術過程將40 只雌性 Sprague-Dawley 大鼠，10 周大(220_230g)，容納在 Macrolon 籠中 (每個籠中2只大鼠)，并給予標準大鼠食物顆粒的飲食(Lactamin，Vadstena, Sweden)和 隨意溶解在水中的載體或AKG(表1)。該研究持續8周。對大鼠每周進行稱重。大鼠每天飲水25至50毫升。原則上，可以認為大鼠飲水在體重的10至20%之 間。AKG組大鼠每天飲用約25ml的AKG飲品(drink)。在25ml的飲品中，存在0. 36g 的AKG，其給了約1至1.4g的AKG/kg大鼠體重/天。安慰劑(對照)組大鼠每天飲用約 50ml的安慰劑飲品。手術20只大鼠被胃切除并分成2組Gx+AKG和Gx+安慰劑(每組10只大鼠)。胃的 腺部分(即，產酸部分、胃底和幽門竇)被切除，之后非腺體部分(前胃)與十二指腸首 尾相連的連接。20只大鼠被假手術并分成2組Sham(假手術)+AKG和Sham(假手術)+ 安慰劑(每組10只大鼠)。假手術涉及中線剖腹術、胃處理和切口閉合。通過皮下注射 Ketalar (50mg/kg ；Parke-Davis, MorrisPlains, NJ, U.S. A)禾口 Stresnil (40mg/kg ； Janssen-Cilag Pharma, Vienna, Austria)實現麻醉。通過皮下注身寸 Temgesic (0. 18mg/ kg ；Schering-Plough, Kenilworth, NJ, U. S. A)實現鎮痛。處理開始于用載體處理Sham(假 手術)+安慰劑和Gx+安慰劑組，同時用AKG處理Sham (假手術)+AKG和Gx+AKG。通過肌肉內途徑每隔一周(開始于術后第一周)給Gx大鼠注射0. 4mg/kg的維生 素 B12(Betolvex lmg/ml, Dumex, Copenhagen, Denmark)以補充內因子的損失，其對于S 氧化鐵聚麥芽糖復合體(Ferrum 50mgFe3+/ml，Vifor (International) Inc.，St. Gallen/ Switzerland)(作為用于由于胃酸損失的預期的鐵的不良吸收的補充)的維生素B12和 20mgFe37kg的吸收是重要的。這些補充對于沒有經歷手術過程的大鼠的體重發展沒有影 響。在實驗過程中8只動物死亡。動物的最終數量(n)在Sham(假手術)+安慰劑中 為7只，在Sham (假手術)+AKG中為10只，在Gx+安慰劑中為8只，以及在Gx+AKG組中為 7 O
‘Z、O在如上所述麻醉下通過從腹主動脈放血處死全部大鼠。研究通過了瑞典蘭德當地動物福利委員會(Animal WelfareCommittee, Lund, Sweden)的批準。組織收集和分析從每個大鼠切下顱蓋并通過仔細去除骨膜清除軟組織。通過用浸透鹽水的紗布覆 蓋每個顱蓋避免干燥，并將它們存儲在+4°C的密封容器中直到檢查。每個顱蓋被置于光源 頂端的玻璃板上(商業熒光管)，發出恒定強度的光。通過利用連接于操作顯微鏡(放大 率X16)的相機，為所獲得的透視圖像照相。將圖像進行由Imagejv. 1.33a實施的組織形態計量學(histomor phometric)計算機分析。估計骨損失(作為觀察的陷窩面積)的百 分比。收集股骨和脛骨并儲存在70%的乙醇中直到進一步分析。對右股骨和脛骨進行PIXIMUS 分析，其給出了 BMD (以g/cm2表示)和BMC (以 g/cm3 表示)。將乙醇固定的左股骨和脛骨在7%的硝酸(nitrogen acid)中脫鈣48小時。遠 端股骨和近端脛骨樣品(包括具有8mm的干骺端部分的骺)用于進一步組織學處理。將該 樣品浸入到石蠟中。股骨和脛骨樣品的縱切片(6iim厚)通過自動切片機Microm HM 360 切割。從1個個體的每1塊骨切割20張切片(每5張后具有20 y m的間隔)。在標準條件 下用蘇木精/伊紅(曙紅)將切片染色。從每個染色的切片獲取顯微鏡圖像。用于評估小 梁骨的圖片利用NikonEclipse E800-光學顯微鏡(放大率X40)和Nikon D70-數字照相 機采集。對股骨和脛骨的切片的顯微鏡圖像進行組織形態計量學計算機分析。利用ImageJ v. 1. 33a分析小梁。用于評估骺板的圖片通過Nomarski對比技術制作并通過AXI0VERT 200M(裝備有LSM5 Pascal激光掃描頭，Zeiss，放大率X 100，具有514nm氬激光波長)收 集。利用Analysis v. 3.0分析骺板。利用AXIOVERT 200M(裝備有LSM 5 Pascal激光掃描 頭，Zeiss，放大率X 100，具有514nm氬激光波長)的熒光模式捕獲關節軟骨圖像。關節軟 骨的圖片通過Zeiss LSM圖像檢查儀v.3. 1. 0. 99評估。與骺板下面的小梁相關的考慮參數 為測量的小梁骨體積(BV/TV%)以獲得網狀骨的特征、以及小梁分形維數(Box Counting Method)。關于骺板的參數為在包括靜止區、增殖區和肥厚性軟骨區的R0I (感興趣區域) 內的軟骨細胞的數量。借助LSM 5 Pascal激光掃描頭檢測器12位(bit)灰度級作為測量 規模，通過在隨機選擇R0I (對于每個切片相同的面積-6個圓圈，每個直徑為83 y m，沿著關 節軟骨)中的伊紅染色的膠原熒光強度測量進行關節軟骨的相對膠原含量的估計。對于每 個切片在嚴格相同的標準條件下進行測量。統計將數據與單因素方差分析(AN0VA)、學生(student’ s) t檢驗進行比較，并且p <0. 05被認為統計上顯著。結果在實驗的最后，手術處理的動物的身體質量(body mass)比假-手術的動物少 8%。在組之間沒有統計上的顯著性差異(圖1)。顱蓋的透視顱蓋的透視表明與Sham(假手術)+安慰劑和Sham(假手術)+AKG大鼠相比，Gx+ 安慰劑和Gx+AKG大鼠中骨陷窩的百分數的顯著增長(圖2)。與Gx+安慰劑組相比，Gx+AKG 大鼠也表現出陷窩的顯著較低的百分數fp = 0.031)(圖3)。Sham(假手術)+安慰劑和 Sham(假手術)+AKG之間的差異在統計上不顯著。股骨和脛骨中的骨礦物密度(BMD)和骨礦物含量(BMC)與Sham (假手術)+安慰劑和Sham (假手術)+AKG大鼠相比，Gx+安慰劑和Gx+AKG 大鼠中BMD和BMC較低(數據未示出)。然而，Gx+AKG中的BMD傾向于比Gx+安慰劑組大 (p = 0. 19)。組織形態計量學關節軟骨分析Gx+AKG組中的軟骨膠原的量類似于對照(假手術)組中的量并且與Gx+安慰劑組 相比明顯較高(表2)。骺板分析骺生長板細胞的定量分析表明與Gx+安慰劑相比，Gx+AKG組(均在股骨和脛骨 中)中的細胞數量增加。此外，Gx+AKG組中的軟骨細胞的數量顯著大于兩個Sham (假手術) 組(表3、4)。小梁骨分析與Sham (假手術)+安慰劑和Sham (假手術)+AKG大鼠相比，Gx+安慰劑和Gx+AKG 大鼠中的小梁骨體積減少。然而，Gx+AKG中小梁的面積減少小于Gx+安慰劑組(表5、6)。骨小梁的分形維數Gx+AKG中的分形維數類似于對照組并且高于Gx+安慰劑(表7、8)。碰實驗的目的是評估飲食a-酮戊二酸對由胃切除術引起的骨損失的影響。獲得的 數據證明假設。確實，飲食AKG防止胃切除的大鼠中的骨和軟骨損失。我們的結果與最近 的實驗一致，表明AKG防止卵巢切除的大鼠和絕經期后的婦女中骨質疏松癥的發展。胃切除術在Gx+安慰劑中引起軟骨膠原和軟骨細胞損失，但是在Gx+AKG大鼠中 沒有引起。證明在Gx+AKG中的軟骨細胞比Gx+安慰劑中多22%。這表明AKG在防止胃切 除后的大鼠中的軟骨細胞的損失中是有效的。分析表明AKG對骨和軟骨膠原的保護作用。 Gx+AKG組中膠原的量在用于實驗的對照組的范圍內，并且比Gx+安慰劑大鼠中高約18%。觀察到AKG對胃切除的大鼠中顱蓋骨的保護性作用。來自Gx+AKG大鼠的顱蓋表 現出比來自Gx+安慰劑大鼠的顱蓋的損傷少20%。BMD和BMC值表明胃切除術引起Gx+ 安慰劑和Gx+AKG大鼠中的骨質減少，這與其它實驗一致。然而，利用更敏感的組織形態計 量學方法，我們表明AKG在防止GX大鼠中的骨質減少方面可能有效。此外，表明與Gx+安慰劑動物相比，檢查的小梁骨體積在Gx+AKG大鼠中減少小 于38%。此外，Gx+AKG組中小梁的分形維數表現出與假手術組中幾乎相同的水平。因此， a-酮戊二酸確實對骨小梁的結構的重新構建具有很大影響。胃切除術對骨骼具有強大的破壞作用，引起骨質減少和關節病。AKG不能完全停止 這些損傷，但是它的確限制骨和軟骨中較大的破壞性胃切除術相關的變化并可能改善骨骼 系統的重新構建。這些觀察結果的含義對于人類中的臨床考慮可能是重要的，例如，其中部 分胃切除術被推薦用于肥胖患者中的體重減輕。所有這些患者發展了骨質減少和關節病。 因此，技術人員可以推測對于這些患者飲食的AKG可以停止或限制這些破壞性骨變化。表1. AKG和安慰劑飲品的組成 為實現每種溶液中pH相同的水平，安慰劑飲品用0. 1M HC1滴定到pH4. 6 (AKG 飲品的pH水平)。
表2. AKG和胃切除術對關節軟骨膠原相對含量的作用
處理熒光標準差(SD)
Gx+AKG2363a623
Gx+安慰劑1928'3 647
Sham+AKG2475a457
Sham+安慰劑2171'3 374
伴隨欄中的結果給出的不同字母描述了當P < 0. 05時的顯著性差異。
在 Gx+AKG 中 n =:7，在Gx+安慰劑中n = 8，在Sham(假手術)+AKG中n = 10，在Sham (假手術)+安慰劑中n = 7o
表3. AKG和胃切除術對股骨骺板軟骨細朐,的數量的作用
處理細胞的數量/mm2 SD
Gx+AKG2220a 490
Gx+安慰劑1760b 360
Sham+AKG1890b 330
Sham+安慰劑1850b 220
伴隨欄中的結果給出的不同字母描述了當P < 0. 05時的顯著性差異。
在 Gx+AKG 中 n =7，在Gx+安慰劑中n = 8，在Sham+AKG中n = 10，在Sham+安慰劑中n=7。
表4. AKG和胃切除術對脛骨骺板軟骨細胞的數量的作用
處理細胞的數量/mm2 SD
Gx+AKG2470a470
Gx+安慰劑1950b330
Sham+AKG1840b410
Sham+安慰劑2110b340
伴隨欄中的結果給出的不同字母描述了當P<0. 05時的顯著性差異。
在 Gx+AKG 中 n=7，在Gx+安慰劑中n = 8，在 Sham+AKG 中 n = 10，在 Sham+ 安慰劑中n=7。
表5. a -酮戊二二酸和胃切除術對股骨小梁骨體積的作用
處理小梁的面積(％ )SD
Gx+AKG18. 8a3. 7
Gx+安慰劑11. 2b2. 1
Sham+AKG25. 5C7. 8
Sham+安慰劑24. 5C5. 9
伴隨欄中的結果給出的不同字母描述了當P<0. 05時的顯著性差異。
在 Gx+AKG 中 n=7，在Gx+安慰劑中n = 8，在 Sham+AKG 中 n = 10，在 Sham+ 安慰劑中n=7。
表6. a -酮戊二二酸和胃切除術對脛骨小粱骨體積的作用
處理小梁的面積(％ )SD
Gx+AKG16. T3. 4
Gx+安慰劑10. 5b2. 5
Sham+AKG24. 9C5. 3
Sham+安慰劑21. lc5. 7
伴隨欄中的結果給出的不同字母描述了當P<0. 05時的顯著性差異。
在 Gx+AKG 中 n=7，在Gx+安慰劑中n = 8，在 Sham+AKG 中 n = 10，在 Sham+ 安慰劑中n=7。
表7. a-酮戊二二酸和胃切除術對股骨小梁的分形維數的作用
處理分形維數[D]SD
Gx+AKG1. 22b0. 02
Gx+安慰劑1. 19a0. 03
Sham+AKG1. 24b0. 04
Sham+安慰劑1. 25b0. 03
伴隨欄中的結果給出的不同字母描述了當P<0. 05時的顯著性差異。
在 Gx+AKG 中 n=7，在Gx+安慰劑中n = 8，在 Sham+AKG 中 n = 10，在 Sham+ 安慰劑中n=7。
表8. a-酮戊二二酸和胃切除術對脛骨小梁的分形維數的作用
處理分形維數[D]SD
Gx+AKG1. 22b 0. 02
Gx+安慰劑1. 17a0. 02
Sham+AKG1. 22b 0. 03
11
Sham+安慰劑 1. 21b0.04伴隨欄中的結果給出的不同字母描述了當ρ < 0. 05時的顯著性差異。在Gx+AKG 中 η = 7，在 Gx+ 安慰劑中 η = 8，在 Sham+AKG 中 η = 10，在 Sham+ 安慰 劑中η = 7。圖的圖灃圖1.飲食α -酮戊二酸和胃切除術對大鼠體重的作用。對照組SHAM+PLAC、GX+PLAC實驗組SHAM+AKG、GX+AKG (SHAM-假手術的大鼠、GX-胃切除的大鼠)。圖2.測試的動物的顱蓋的選擇的照片。對照組SHAM+PLAC、GX+PLAC實驗組 SHAM+AKG、GX+AKG(SHAM-假手術的大鼠、GX-胃切除的大鼠)。圖3.飲食α -酮戊二酸和胃切除術對顱蓋的透視的作用。對照組SHAM+PLAC、 GX+PLAC實驗組SHAM+AKG、GX+AKG (SHAM-假手術的大鼠、GX-胃切除的大鼠)。*p = 0. 0288
權利要求
α-酮戊二酸或α-酮戊二酸的藥用鹽在制備用于治療或預防軟骨損傷的藥物制劑中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用，其中，所述α-酮戊二酸或所述α-酮戊二酸的藥用鹽 是與至少一種氨基酸的藥物學上可接受的物理狀態混合物。
3.根據權利要求2所述的應用，其中，所述氨基酸選自谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸、鳥 氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、脯氨酸以及它們的組合。
4.根據權利要求1至3所述的應用，其中，所述α-酮戊二酸的藥用鹽是堿金屬鹽或堿 土金屬鹽或它們的組合。
5.根據權利要求1至4所述的應用，其中，所述α-酮戊二酸的藥用鹽是α-酮戊二酸鈉。
6.α -酮戊二酸和氨基酸、二肽或三肽的酰胺在制備用于治療或預防軟骨損傷的藥物 制劑中的應用。
7.根據權利要求6所述的應用，其中，所述與α-酮戊二酸形成酰胺的氨基酸選自谷 氨酰胺、谷氨酸、精氨酸、鳥氨酸、賴氨酸、脯氨酸、異亮氨酸以及亮氨酸。
8.根據權利要求6所述的應用，其中，所述與α-酮戊二酸形成酰胺的二肽是谷氨酰胺 與谷氨酸、精氨酸、鳥氨酸、賴氨酸、脯氨酸、異亮氨酸和亮氨酸中的任何一個的二肽。
9.根據權利要求1-8所述的應用，其中，所述軟骨損傷是在涉及重量減輕和/或受損的 營養、營養不良、胃切除術、部分胃切除術或胃囊帶術的情況下引起的。
10.根據權利要求1-9所述的應用，其中，給予患者的劑量在所述物質的1至IOOOmg/ kg體重/天的間隔內。
11.根據權利要求1-9所述的應用，其中，給予患者的劑量在所述物質的10至400mg/ kg體重/天的間隔內。
12.根據權利要求1-9所述的應用，其中，給予患者的劑量在所述物質的10至IOOmg/ kg體重/天的間隔內。
全文摘要
本發明涉及一種用于與軟骨損傷有關的應用的藥物。本發明還涉及用于治療醫學關節疾病如關節病、類風濕性關節炎以及軟骨損傷的物質的應用。該應用包括α-酮戊二酸、谷氨酰胺或谷氨酸、以及所述物質的鹽、酰胺、二肽或三肽的應用。
文檔編號A61K31/194GK101843609SQ20101017090
公開日2010年9月29日 申請日期2006年11月15日 優先權日2005年11月15日
發明者斯特凡·皮爾齊諾斯基 申請人:安特瑞斯公司