抗腫瘤劑的制作方法

專利名稱：抗腫瘤劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及新型抗腫瘤劑，具體地說，涉及將具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質與抗炎癥活性物質組合的抗腫瘤劑。通過將含有抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤性藥物(抗腫瘤劑)與抗炎癥活性物質組合使用，大幅提高了抑制微管蛋白聚合的活性物質的致死劑量，并且藥物有效劑量可保持與未聯合使用時大致相同的程度，因此可以擴大藥物的安全范圍。同時還可顯著改善藥物有效劑量范圍內的抑制微管蛋白聚合的活性物質的毒性。結果與傳統的未聯合使用的情況相比，顯著擴大了醫生等處方時作為抗腫瘤劑的應用性，還可減輕患者等的負擔。
本發明還提供含有具有抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質，與抗炎癥活性物質組合使用的抗腫瘤制劑；含有上述抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤制劑的毒性降低(減輕)劑，該毒性降低(減輕)劑還含有抗炎癥活性物質。
本發明進一步涉及抗腫瘤的方法(用于生物體內腫瘤的治療、改善、發展防止、預防等的處置方法)；上述2種有效成分在抗腫瘤劑等醫藥制品中的應用；作為抗腫瘤劑等醫藥制品，同時或分開使用的上述2種有效成分的聯合等。

背景技術：
目前，作為抗腫瘤劑開發中值得期待的一個方向，以抑制微管蛋白聚合的活性物質為有效成分的藥物(抗腫瘤劑)開發取得了進展(參照Biochem.Molecular Biology Int.35(6)，1153-1159，1995；Br.JournalCancer 71(4)，705-711，1995；Journal Med.Chem.34(8)，2579-2588，1991；Biochemistry 28(17)，6984-6991，1989；美國專利第5,561,122號說明書；特開平7-228558號說明書；特開平8-301831號說明書等。) 本發明人對以抑制微管蛋白聚合的活性物質為有效成分的藥物進行了詳細研究，結果本發明人從該藥物在安全范圍(致死劑量和藥物有效劑量之比)和藥物有效劑量范圍內的毒性問題而使其應用受到限制出發，推測通過在保持其藥物有效劑量的同時提高致死劑量，并改善藥物有效劑量范圍內的毒性，可以大幅提高該藥物的利用價值，本發明人認為在保持該抗腫瘤劑有效成分的藥物有效劑量的同時提高致死劑量，擴大其安全范圍，并降低(減輕)藥物有效劑量范圍內的毒性，應該可以制造出能夠擴大藥物應用性、減輕患者負擔的藥物，并對此進行了調查、研究。
在上述情況下，需要開發出保持以抑制微管蛋白聚合的活性物質為有效成分的抗腫瘤劑的有效性(藥效)，只改善毒性的抗腫瘤劑。
本發明要解決的課題是開發出當使用抑制微管蛋白聚合的活性物質作為抗腫瘤劑的有效成分時，能在保持該有效成分的藥物有效劑量的同時大幅改善該抑制微管蛋白聚合的活性物質的致死劑量和藥物有效量范圍內的毒性的藥物(抗腫瘤劑)。


發明內容
本發明人為解決上述課題，以考布他汀類和芪類以及它們的衍生物等為中心，對作為可用于抗腫瘤劑有效成分的抑制微管蛋白聚合的活性物質進行了調查研究，深入探討了在保持其藥物有效劑量的同時提高致死劑量，并改善在該藥物有效劑量范圍內產生的各種毒性，特別是消化道毒性、肝毒性和循環器官毒性的方法，結果發現通過與抗炎癥活性物質，特別是類固醇性抗炎癥活性物質聯合使用，可大幅提高抑制微管蛋白聚合的活性物質的致死劑量，有的可提高約2倍以上，毒性特別是消化道毒性、肝毒性和循環器官毒性大幅降低，另一方面，不管是否聯合使用，藥物有效劑量均大體相同，即，作為藥物的安全范圍顯著擴大，同時在藥物有效劑量范圍內毒性顯著改善等。本發明人根據上述各種認識完成了本發明。
即，本發明涉及抗腫瘤劑(本發明的抗腫瘤劑)，其特征在于含有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質(包括將兩者組合)。
本發明的抗腫瘤劑可以是在一種制劑中至少含有該抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質的制劑形式，也可以是以包含2種制劑例如抗炎癥劑、該抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤制劑的形式成套存在，還可以是以2種組合使用的形式分別存在。
該抑制微管蛋白聚合的活性物質只要具有抑制微管蛋白聚合的活性即可，并無特別限定。需要選擇具有抗腫瘤活性作用的物質，目前已知或今后開發的這樣的物質均可使用。例如可以選自考布他汀類及其衍生物、長春堿等長春花生物堿類及其衍生物、colchicinoid類及其衍生物、多拉司他汀類及其衍生物、鬼臼毒素及其衍生物、steganacin類及其衍生物、amphethinile類及其衍生物、黃烷類及其衍生物、根霉素類及其衍生物、curacin類A及其衍生物、大環內酯類A及其衍生物、大環內酯類B及其衍生物、welwistatin類及其衍生物、phenstatin類及其衍生物、2-stryl喹唑啉-4(3H)-酮類及其衍生物、茋類及其衍生物、2-芳基-1，8-二氮雜萘-4(1H)-酮類及其衍生物、5，6-二氫吲哚并(2，1-a)異喹啉類及其衍生物、2，3-苯并(b)噻吩類及其衍生物、2，3-取代苯并(b)呋喃類及其衍生物、2，3-取代吲哚類及其衍生物以及2-甲氧基雌二醇(參照WO00/48606說明書等。)。
關于具有抗腫瘤活性作用的考布他汀類、芪類以及它們的衍生物已有各種報道(參照J.Med.Chem.413022-3032，1998；Bioorg.Med.Chem.Lett.83153-3158，1998；Bioorg.Med.Chem.Lett.83371-3374，1998；美國第5,561,122號、美國第5,430,062號專利、特開平7-228558號公報；特開平8-301831號公報、WO93/23357號說明書、WO99/51246號說明書等。)，其中記載的物質可在本發明中使用(這些關于抑制微管蛋白聚合的活性物質的記載全部引入本說明書中作為參考)，其代表性衍生物可例舉(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-絲氨酰胺鹽酸鹽；以下簡稱為“AC-7700”)。
進一步，WO00/48606說明書中所示的具有微管蛋白聚合抑制活性的物質均可作為本發明中使用的抑制微管蛋白聚合的活性物質使用，所示的具有微管蛋白聚合抑制活性的物質或與該物質有關的該國際公報(說明書)的記載和其中引用的先有文獻(有關記載)也全部引進本說明書作為參考。
本發明中使用的抗炎癥活性物質并沒有特別限定，可以優選選自類固醇性抗炎癥活性物質及其類似化合物、非類固醇性抗炎癥活性物質及其類似化合物、以及具有抗炎癥作用或免疫抑制作用的物質。
本發明中使用的抗炎癥活性物質可更優選使用類固醇性抗炎癥活性物質。
上述抗炎癥活性物質可以選自地塞米松及其衍生物、潑尼松龍及其衍生物、甲基潑尼松龍及其衍生物、倍他米松及其衍生物、曲安西龍及其衍生物、帕拉米松及其衍生物、倍氯米松及其衍生物、氟輕松及其衍生物以及皮質醇(天然糖皮質類固醇)及其衍生物。
可優選選擇地塞米松及其衍生物，特別優選地塞米松、其磷酸酯及其鹽(鈉鹽等)。可以容易地從市場上購得作為抗炎癥劑銷售的藥物。
若從上述2種有效成分中例舉代表性的例子，則作為該抑制微管蛋白聚合的活性物質，可以選自考布他汀類及其衍生物、芪類及其衍生物；作為抗炎癥活性物質，可以選自地塞米松及其衍生物(酯等)。
含有該抑制微管蛋白聚合的活性物質的制劑(抗腫瘤制劑)和含有抗炎癥活性物質的制劑(抗炎癥劑)可以同時使用(給予)，也可以不同時使用(給予)。因此可以是分別給予的形式，也可以是同一個制劑的形式。兩者的給藥形式可以分別不同，此時需要制成分別不同的制劑。
可以將該抑制微管蛋白聚合的活性物質以抗腫瘤制劑的形式，將抗炎癥活性物質以抗炎癥劑的形式使用。
作為本發明的一種實施方式，有具下述特征的抗腫瘤制劑(本發明的抗腫瘤制劑)是含有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤制劑，與抗炎癥活性物質組合或成套使用。
作為本發明的另一實施方式，有以含有抗炎癥活性物質為特征的含抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤制劑用毒性降低(減輕)劑(本發明的毒性降低劑)。
首先，本發明中包括本發明的上述抗腫瘤劑，還包括除此之外的上述2種不同形式的發明，這2種不同形式的發明在將2種有效成分，即，具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質組合而成藥物這點上，與上述本發明的抗腫瘤劑實質上相同，因此根據對上述抗腫瘤劑的發明的說明，可以容易地實施。“抗腫瘤制劑”是為了與本發明的所述“抗腫瘤劑”區別而使用的名稱，只要是含有該抑制微管蛋白聚合的活性物質的腫瘤的治療、改善等藥物，包括抗腫瘤劑以及其他名稱，均具有同等的意義。
本發明中，用作抗腫瘤的藥物可以是例如可以將上述2種有效成分以分別不同的制劑形式組合，并且可以以同時或不同時的給藥時間的形式組合。另外，還可以將2種成分包含在一個制劑中，按照制劑單位分別給藥，上述應用形式以及至少包含上述2種成分的藥物均包含在本發明的抗腫瘤劑中。
因此，例如無需將分別含有本發明中使用的至少2種有效成分的多個制劑一起固定包含在特定的包裝容器內，即使分別獨立存在，只要是為了上述目的(取得抗腫瘤效果)而使用，就包含在本發明的抗腫瘤劑中。
本發明的抗腫瘤劑的必要條件是含有上述2種有效成分，并適當地組合，只要不妨礙本發明的效果——有效地尋求抗腫瘤效果，還可以將其他有效成分(相同藥效成分“抗腫瘤成分”或其他藥效成分、提高目標藥效或進一步降低(減輕)毒性(副作用)的成分等)組合使用，或可包含在本發明藥物中使用，在藥物的制備中，可以適當選擇使用藥物制備上必要的添加成分。
本發明的另一種實施方式，有抗腫瘤的方法(腫瘤的治療、改善、發展防止和/或預防方法)，其特征在于將具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質給予到生物體內。可以將這2種有效成分同時或分別不同時間給予到生物體內。
該給予形式可以選自上述本發明的抗腫瘤劑、抗腫瘤制劑或毒性降低劑等各種形式。
本發明的其他實施方式有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質在抗腫瘤制劑醫藥制品中的應用。具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質可以分別以不同的制劑形式使用。
在所述醫藥制品中的應用形式可以從上述本發明的抗腫瘤劑、抗腫瘤制劑或毒性降低劑等各種形式中選擇采用。
本發明的實施方式還有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質的作為抗腫瘤劑等醫藥制品同時或分開使用的聯合藥物。
附圖簡述 [

圖1] 圖1表示實施例1中腫瘤移植大鼠的毒性試驗結果(Sceffe’s F檢驗；*p＜0.05，**p＜0.01)。
皮下移植MT-9腫瘤的F344大鼠/地塞米松(1mg/kg)/AC-7700(10mg/kg)；血液生化指標GPT、■-DEX；□+DEX。
[圖2] 圖2表示實施例1中腫瘤移植大鼠的毒性試驗結果(Sceffe’s F檢驗；*p＜0.05)。
皮下移植MT-9腫瘤的F344大鼠/地塞米松(1mg/kg)/AC-7700(10mg/kg)；血液生化指標CPK、■-DEX；□+DEX。
發明的實施方式 下面以本發明的抗腫瘤劑為中心，對本發明的實施方式進行說明。由于在將2種藥物成分即具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質組合這點上都是相同的，因此基于這些說明，同樣也可以理解其他形式的發明。
本發明的抗腫瘤劑至少含有上述2種有效成分，可將給藥時間定為同時或不同時地給予多種成分，以將該2種成分制成一個制劑或另外組合給藥的制劑形式使用，是以改善、預防、治療、抑制腫瘤增殖等廣泛的腫瘤抑制作用為目而使用的藥物，只要能實現上述效果，還可以含有或組合其他藥效成分，制劑中也可以含有制備制劑必需的成分。
本發明中使用的抑制微管蛋白聚合的活性物質，可以如上說明，從已知作為具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質當中選擇(參考上述先有文獻)，特別優選的例子有下述芪衍生物。
作為可在本發明中使用的芪衍生物的例子，可以采用以順式芪為基本骨架的化合物并且體外顯示微管蛋白聚合抑制活性和抗腫瘤活性的化合物。關于抗腫瘤活性，特別優選顯示腫瘤細胞增殖抑制活性的化合物。除公知化合物外，對于今后發現的化合物，如果屬于該芪衍生物，則包含在本發明可使用的芪衍生物中。該芪衍生物中還包括在動物體內轉化為芪衍生物的衍生物。只要在體內使用時顯示所述目標抗腫瘤活性，只要是醫藥上可接受的衍生物，各種鹽、酯、水合物等溶劑合物等衍生物均可在本發明中作為顯示微管蛋白聚合抑制活性的芪衍生物使用。
以順式芪為基本骨架的代表性芪衍生物中，優選包含下述通式(1)和(2)所示的化合物。這些化合物包括各種鹽、酯、水合物或溶劑合物形式的化合物，特別包括醫藥上可接受的形式的化合物。

上式中，R1、R2和R3各自獨立表示低級烷氧基；R4、R5和R6各自獨立，表示氫原子、鹵原子(氟原子、氯原子等)、硝基、羥基、低級烷氧基、磷酸酯(與羥基之間磷酸酯化形成的取代基-OPO3H2、以下相同。)、磷酸酰胺(與氨基之間磷酸酰胺化形成的取代基-NHPO3H2、以下相同。)、氨基低級烷氧基、低級烷基氨基低級烷氧基、二低級烷基氨基低級烷氧基、巰基、低級烷硫基、氨基、低級烷基氨基、二低級烷基氨基、低級烷基、氨基低級烷基、三氟甲基、低級烷酰基、低級烷酰基氨基和氨基酸酰氨基中的任一種取代基；X表示氫原子或腈基；Het表示雜環。
上述低級烷基和低級烷氧基中的碳原子數分別為1-5個。低級烷酰基中的碳原子數為2-6個。
氨基酸酰氨基中的氨基酸酰基是由氨基酸衍生的酰基，氨基酸有α-氨基酸、β-氨基酸、γ-氨基酸。優選的氨基酸有甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、絲氨酸、賴氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、鳥氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、酪氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、β-丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、組氨酸等。從藥效和安全性考慮，特別優選蘇氨酸或絲氨酸。這些氨基酸可以是L-體、D-體和DL-體的任意一種，優選L-體。
雜環的例子有四唑環、噻唑環等。雜環為噻唑環時可以具有取代基，此時的取代基有低級烷基、氨基、一低級烷基氨基、二低級烷基氨基、肼基、鹵原子(氟原子、氯原子等)、低級烷氧基。低級烷基和低級烷氧基的碳原子數為1-5。
如上所述，本發明可使用的芪衍生物是結構上具有順式芪骨架的化合物，是顯示微管蛋白聚合抑制活性和/或抗腫瘤活性的化合物。芪衍生物的具體例子有考布他汀-A4，但并不限定于此，有先有文獻例如專利公報等公開的具有腫瘤增殖抑制性的芪衍生物(參照美國專利第4,996,237號、第5,561,122號和第5,430,062號專利、日本特開平7-228558號、特開平8-301831號公報、特開平10-81673號公報等)。這些先有文獻中記載的芪衍生物只要包含上述定義，均可作為本發明中可使用的芪衍生物使用，如上所述，這些先有文獻的內容也作為本說明書內容的一部分引進本說明書。
制備上述芪衍生物時，可通過包括上述文獻所公開方法等的常規技術制備。今后開發的芪衍生物也可如上所述制備并使用。
如上所述，只要在動物體內顯示所述活性，本發明中可使用的芪衍生物也包括鹽、酯、水合物等溶劑合物、其他衍生物形式的化合物，以及在體內可轉化為芪衍生物的衍生物。
本發明中可使用的芪衍生物更優選下述通式(1’)所示的化合物。

上式(1’)中，R1、R3、R5和R5分別表示甲氧基；R4表示氨基和氨基酸酰氨基中的任何取代基；R6和X分別表示氫原子。
上述通式(1’)所示的化合物中，特別優選下述結構式(3)所示的化合物((Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-絲氨酰胺(以下也稱為化合物(3))。所述化合物(3)可以是鹽的形式，其鹽的形式有鹽酸鹽(AC-7700)、乙酸鹽和甲磺酸鹽等。

關于上述化合物(3)(包括其醫藥上可接受的鹽、水合物和溶劑合物)的制備以及含有該化合物(3)和非活性醫藥上可接受的載體或稀釋劑的經口和非經口藥物組合物的制備，已在特開平8-301831號公報中廣范公開，制備時可以參考。
本發明的藥物可以以含有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質的制劑的形式使用。這種情況下，可以以含有該抑制微管蛋白聚合的活性物質作為有效成分(主成分)的單獨制劑的形式使用，也可以在該成分中聯合使用上述抗炎癥活性物質的制劑(2種有效成分聯合使用制劑)的形式使用。這種情況下的制劑的形式并沒有特別限定。可以以經口制劑、非經口制劑、特別是注射劑的形式使用。對于抑制微管蛋白聚合的活性物質，對其中一些物質(例如考布他汀類、長春花生物堿類、秋水仙堿類(colchicinoid)、多拉司他汀類、鬼臼毒素類、根霉素類、2-甲氧基雌二醇等)作為抗腫瘤劑已經得到研究，依據由此而獲得的公知技術，可容易地制備其制劑。
本發明的抗腫瘤劑中，所用抗炎癥活性物質可在上述制劑中聯合使用，也可以將已知并應用的抗炎癥劑與含有具上述抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質的制劑以其它形式組合使用。使用方法等可以按照已知抗炎癥劑的方法。通過聯合使用本發明中使用的聯合使用成分抗炎癥活性物質，可以提高抑制微管蛋白聚合的活性物質的致死劑量，有的可提高約2倍或以上，并可大幅改善藥物有效劑量范圍內的毒性，特別是消化道毒性(改善腹瀉等)、肝毒性(降低GPT等)、循環器官毒性(CPK的降低等)，另一方面發現了不管有否進行本發明的聯合使用，藥物有效劑量均大體相同。
結果，使用抑制微管蛋白聚合的活性物質作為抗腫瘤劑時，由于其致死毒性和藥物有效劑量范圍內的毒性得到大幅改善，醫生等相關人員可以方便地使用該藥物，服用患者的負擔也得到大幅減輕。
例如使用AC-7700(注射劑)時，根據患者癥狀等，抑制微管蛋白聚合的活性物質的給藥量可優選約為每天0.1-10000mg，更優選約0.5-1000mg，進一步優選約1-500mg。將例如磷酸地塞米松鈉(注射劑)給予患者時，本發明中聯合使用的抗炎癥活性物質的給藥量可優選每天使用約0.1-10000mg，更優選約0.5-1000mg，進一步優選約1-500mg。
作為經口制劑使用時，可以分別以上述注射劑成分量的約2-20倍范圍給藥。
另外，本發明中，如果使用上述成分以外的成分或使用其衍生物作為本發明的2種有效成分，則給藥量可分別參考上述給藥量范圍，利用傳統技術、方法進行適當選擇。
可以將本發明中使用的必須成分即上述2種成分分別包含在不同的制劑形式中，分別給予尋求抗腫瘤效果的患者，也可以如上所述，作為含有或組合除上述2種以外的藥物成分，發揮抗腫瘤效果的藥物使用，這種情況下，只要能表達抗腫瘤效果，也當然包含在本發明中。另外還可以將抑制微管蛋白聚合的活性物質與抗炎癥活性物質組合使用，這種情況下，除上述2種成分以外，還可以含有或與其組合其他成分使用，同樣地，發揮抗腫瘤效果的抑制微管蛋白聚合的活性物質的應用也包含在本發明中。
關于制劑的制備，可以含有藥理學上可接受的各種制劑用輔料(作為助劑等)。制劑用輔料可以根據制劑的劑型適當選擇，例如可以有賦形劑、稀釋劑、添加劑、崩解劑、粘合劑、包衣劑、潤滑劑、滑動劑、光滑劑、芳香劑、甜味劑、增溶劑等。進一步例舉制劑用輔料有碳酸鎂、二氧化鈦、乳糖、甘露糖醇及其他糖類、滑石粉、乳酪蛋白、明膠、淀粉、纖維素及其衍生物、動物及植物油、聚乙二醇、以及溶劑如滅菌水、一元或多元醇如甘油。
本發明使用的有效成分無需全部包含在一個制劑中，可以將各種成分或其中2種成分包含在適當的1種或2種制劑中。這種情況下，可以制備成公知的或將來開發的各種藥物制劑形式，例如經口給藥、腹腔內給藥、經皮給藥、吸入給藥等各種給藥形式。為了將本發明中使用的藥物成分制備成上述各種藥物制劑的形式，可以適當采用公知的或將來開發的方法。
上述各種藥物制劑的形式例如有適當的固體或液體制劑形式，例如顆粒、散劑、包衣片劑、片劑、(微)膠囊、栓劑、糖漿劑、浸膏、混懸液、乳劑、滴劑、注射用溶液、延緩活性物質釋放的制劑等。
毋庸置言，本發明的以上例舉的制劑形式的藥物應至少含有可發揮目標藥效的有效量的上述成分。
(本發明的抗腫瘤制劑) 如上所述，具有下述特征的抗腫瘤制劑也包含在本發明中是含有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤制劑，與抗炎癥活性物質組合使用。將2種藥物成分組合，這與上述本發明的抗腫瘤劑實質相同，因此根據上述詳細的說明和后述的實施例，并根據公知技術，同樣可以容易地實施該發明。
(本發明的毒性降低劑) 同樣地，以含有抗炎癥活性物質為特征的含抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤制劑用毒性降低劑也包含在本發明中，與前述相同，將2種藥物成分組合，這與上述本發明的抗腫瘤劑實質相同，因此根據上述詳細說明和后述的實施例以及公知技術，同樣可以容易地實施該發明。
如上所述，本發明的其他形式有 (1)抗腫瘤方法(腫瘤的治療、改善、發展防止和/或預防方法)，其特征在于將具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質給予到生物體內； (2)具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質在抗腫瘤劑等醫藥制品中的應用；以及 (3)具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質的用于作為抗腫瘤劑等醫藥制品同時或分開使用的聯合藥物。
這些發明均可參考上述本發明的抗腫瘤劑、抗腫瘤制劑或毒性降低劑的說明以及后述實施例，或根據需要參考傳統已知的技術，容易地實施。
優選的實施方式 以下根據實施例詳細說明本發明，但本發明并不受這些實施例的任何限制。
(實施例1) (1)腫瘤細胞株·實驗動物 大鼠腫瘤株(移植大鼠系)； 惡性纖維性組織細胞瘤MT-9(F344、雄性)。
MT-9作為體外培養細胞而獲得，在含10％FBS的PRMI1640培養液中培養后，將107個以上的細胞移植入大鼠背部皮下。形成腫瘤后，將腫瘤切片(約100mg)用套管傳代移植。
F344(5周齡)購自Charles River Japan(CRJ)。
(2)藥物及給藥方法 使用上述結構式(3)所示的(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-絲氨酰胺的鹽酸鹽(AC-7700)作為具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質。
AC-7700合成后在避光、低溫下(5℃)下保存，稱量后，在臨給藥前溶解于生理鹽水中。
作為地塞米松(其衍生物)，將萬有制藥生產的“Decadron S注射液”(磷酸地塞米松鈉；Dexamethasone sodium phosphate；化學名16α-甲基-9α-氟潑尼松龍21-磷酸二鈉鹽)(以下簡稱為“地塞米松”或“DEX”。)在臨給藥前用生理鹽水稀釋，尾靜脈內給藥。
(3)血液生化學檢查方法 在乙醚麻醉下，將大鼠腹部切開，用裝有肝素的注射器由下腔靜脈采血。將血液以3000rpm離心10分鐘，取血漿，用富士Dry Chem測定血漿中GOT、GPT、CPK、LDH。不立即進行測定時，要保存在-80℃，直到測定時。
(4)體內藥效評價方法(抗腫瘤效果) MT-9/F344系；將通過皮下移植腫瘤而傳代的腫瘤摘出，除去附著的結締組織和壞死部位，然后用剪刀將腫瘤組織切碎，制成糊狀，用套管將約50-100mg的腫瘤組織移植到F344大鼠背部皮下(第0天)。
待腫瘤繁殖到可測定的程度后(約1-2周后)，測定腫瘤大小(腫瘤體積)、體重，進行分組。
每天測量腫瘤大小(腫瘤體積)、體重，直到給藥結束后的第二天-第三天。腫瘤體積按下式計算。
腫瘤體積(mm3)＝(長徑(mm))×(短徑(mm))2×1/2。
由下式計算T/C和I.R.作為抗腫瘤效果，T/C在50％以下(I.R.在50％以上)，且與對照組相比有統計學顯著差異時，則判斷具有抗腫瘤效果，以得到最大抗腫瘤效果那天的抗腫瘤效果作為藥效。
T/C(％)＝(給藥組的腫瘤體積)/(對照組的腫瘤體積)×100。
I.R.(％)＝100-T/C。
體重變化是藥效評價日的體重減去治療開始日的體重的值。以(腫瘤體積×1/1000)換算腫瘤重量(g)，將其分別從體重中減去，并以該值為基礎，計算除去腫瘤重量后的體重變化。
(5)統計分析 大鼠腫瘤的增殖作為不遵循正態分布的數值進行統計處理。將對照組和不同用量的給藥組進行比較(2組間比較)時，用mann-Whitney U檢驗，判定P值在0.05以下時具有顯著性。進行多組比較時，用Scheffe’sF檢驗，判定P值在0.05以下時具有顯著性。
(6)結果 (1)地塞米松對AC-7700毒性的減輕 將MT-9移植入F344大鼠背部皮下，形成腫瘤后給予藥物。AC-7700的單劑藥物有效劑量為10mg/kg，地塞米松為1mg/kg，在給予AC-7700前一天給予。測定給予AC-7700結束6小時后的血液生化指標。結果如圖1和圖2所示。
由上述結果可知植癌大鼠中，地塞米松(1mg/kg)顯著減輕了AC-7700(10mg/kg)的毒性、肝毒性(GPT)和循環器官毒性(CPK)。
另外，使用小鼠對消化道毒性進行研究表明通過聯合使用地塞米松，顯著改善了AC-7700誘發的腹瀉。
(2)地塞米松對AC-7700藥效的影響 使用皮下移植MT-9的F344大鼠來研究地塞米松對AC-7700藥效的影響。AC-7700的量為10mg/kg，地塞米松為1mg/kg，在給予AC-7700前一天給予。每種藥物的給予均是每隔3天給予3次。
單獨給予AC-7700時，可觀察到對腫瘤增殖的顯著抑制。聯合使用地塞米松時，腫瘤的生長同樣受到抑制(參照表1)。以有否聯合使用地塞米松來比較AC-7700的抗腫瘤效果，兩者之間并未見有顯著差異(Scheffe’s F檢驗)。
[表1] 地塞米松對AC-7700藥效的影響 (mann-Whitney's U檢驗；**p＜0.01相對于對照組) 使用CDF1小鼠(雌性)進一步研究表明，地塞米松(5mg/kg/天、尾靜脈內給藥，在AC-7700給藥前一天和給藥當天分別給予)使AC-7700(皮下給藥、每間隔3天給藥3次)的最大耐受量由43.6mg/kg/天提高到高于90mg/kg/天的用量。
發明的效果 本發明提供在含有抑制微管蛋白聚合的活性物質作為有效成分的抗腫瘤劑中，與抗炎癥活性物質聯合使用，在保持藥物有效劑量的同時，大幅改善該抑制微管蛋白聚合的活性物質的藥物有效劑量范圍內的毒性，并提高致死劑量，擴大其安全范圍的藥物(抗腫瘤劑)。
擴大了安全范圍，醫生等在腫瘤治療、改善等方面的應用也得到擴大，同時減輕了患者的負擔。
本發明還進一步提供抗腫瘤方法(生物體內腫瘤的治療、改善、發展防止、預防等的處置方法)；上述2種有效成分在抗腫瘤劑等醫藥制品中的應用；以及上述2種有效成分用于作為抗腫瘤劑等醫藥制品同時或分開使用的聯合藥物。
本發明可在醫藥制品領域內實施，因此在工業上極為有用。
權利要求
1.抗腫瘤劑，其特征在于含有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質。
2.權利要求1的抗腫瘤劑，其中所述抑制微管蛋白聚合的活性物質選自考布他汀類及其衍生物、長春花生物堿類及其衍生物、colchicinoid類及其衍生物、多拉司他汀類及其衍生物、鬼臼毒素及其衍生物、steganacin類及其衍生物、amphethinile類及其衍生物、黃烷類及其衍生物、根霉素類及其衍生物、curacin類A及其衍生物、大環內酯類A及其衍生物、大環內酯類B及其衍生物、welwistatin類及其衍生物、phenstatin類及其衍生物、2-stryl喹唑啉-4(3H)-酮類及其衍生物、茋類及其衍生物、2-芳基-1，8-二氮雜萘-4(1H)-酮類及其衍生物、5，6-二氫吲哚并(2，1-a)異喹啉類及其衍生物、2，3-苯并(b)噻吩類及其衍生物、2，3-取代苯并(b)呋喃類及其衍生物、2，3-取代吲哚類及其衍生物以及2-甲氧基雌二醇。
3.權利要求1的抗腫瘤劑，其中抗炎癥活性物質選自類固醇性抗炎癥活性物質及其類似化合物、非類固醇性抗炎癥活性物質及其類似化合物、以及具有抗炎癥作用或免疫抑制作用的物質。
4.權利要求1或3的抗腫瘤劑，其中抗炎癥活性物質為類固醇性抗炎癥活性物質。
5.權利要求1或4的抗腫瘤劑，其中抗炎癥活性物質選自地塞米松、潑尼松龍、甲基潑尼松龍、倍他米松、曲安西龍、帕拉米松、倍氯米松、氟輕松、皮質醇以及它們的衍生物。
6.權利要求5的抗腫瘤劑，其中地塞米松及其衍生物選自地塞米松、其酯以及它們的鹽。
7.權利要求1的抗腫瘤劑，其中所述抑制微管蛋白聚合的活性物質選自考布他汀類及其衍生物、茋類及其衍生物，抗炎癥活性物質選自地塞米松及其衍生物。
8.權利要求1的抗腫瘤劑，其中所述抑制微管蛋白聚合的活性物質為(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-絲氨酰胺或其鹽。
9.權利要求1的抗腫瘤劑，其中所述抑制微管蛋白聚合的活性物質以抗腫瘤制劑的形式存在，抗炎癥活性物質以抗炎癥劑的形式存在。
10.權利要求9的抗腫瘤劑，其中所述抗腫瘤制劑和抗炎癥劑以分別給藥的形式存在。
11.抗腫瘤制劑，該制劑為含有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤制劑，其特征在于與抗炎癥活性物質組合使用。
12.含抑制微管蛋白聚合的活性物質的抗腫瘤制劑用毒性降低劑，其特征在于含有抗炎癥活性物質。
13.抗腫瘤方法，其特征在于將具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質給予到生物體內。
14.權利要求13的方法，其中所述給藥形式為權利要求1-11中任一項記載的抗腫瘤劑或抗腫瘤制劑的形式。
15.具有抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質在醫藥制品中的應用。
16.權利要求15的應用，其中具有抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質以分別的制劑形式存在。
17.權利要求15或16的應用，其中所述在醫藥制品中的應用形式為權利要求1-11中任一項記載的抗腫瘤劑或抗腫瘤制劑的形式。
18.具有抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質的用于作為醫藥品同時或分開使用的聯合藥物。
全文摘要
含有具抗腫瘤活性的抑制微管蛋白聚合的活性物質和抗炎癥活性物質(聯合藥物；聯合使用)，構成抗腫瘤劑。在同一個制劑中可以含有所述2種有效成分，也可以以分別給藥的2種制劑形式組合。抗腫瘤劑中使用抑制微管蛋白聚合的活性物質作為有效成分時，可以在保持藥物有效劑量的同時，大幅改善該抑制微管蛋白聚合的活性物質的藥物有效劑量范圍內的毒性，并提高致死劑量，擴大其安全范圍。本發明還進一步提供抗腫瘤方法(生物體內腫瘤的治療、改善、發展防止、預防等的處置方法)，上述2種有效成分在抗腫瘤劑等醫藥制品中的應用，以及上述2種有效成分作為抗腫瘤劑等醫藥制品同時或分開使用的聯合藥物。
文檔編號A61K45/00GK101816794SQ20101017048
公開日2010年9月1日 申請日期2002年6月24日 優先權日2001年6月25日
發明者二瓶幸夫, 森永芳弘, 鈴木學, 須賀泰世 申請人:味之素株式會社