專利名稱：一種斷血流總皂苷的制備方法
技術領域：
本發明屬于生物分離技術領域，特別是一種采用沉析法制備斷血流總皂苷的方法。
背景技術：
中藥斷血流，為唇形科植物風輪菜與蔭風輪的干燥地上部分，最初是從安徽省發 掘出來的民間使用的草藥。含有皂苷類、黃酮類、氨基酸類、多糖類、酚性物質和揮發油等化 合物，主要用于治療崩漏、子宮肌瘤出血、尿血、鼻衄、牙齦出血、刨傷出血等出血癥。斷血流 為70年代從民間驗方篩選，經臨床驗證后被國家藥典錄入的少數幾個單味藥之一，其療效 確切，安全性高，被公認為中醫臨床首選口服婦科止血藥。皂苷類物質是斷血流藥材止血的 功能性成分。斷血流皂苷屬于三萜類皂苷，易溶于熱水、稀醇，難溶于丙酮、乙醚、氯仿等溶劑。 昝麗霞發表的“超聲提取_分光光度法測定斷血流總皂苷含量”文獻中測得皂苷2%左右。成藥斷血流片，《藥典》明確了其提取方法和功效及鑒別證實總皂苷是功能性成 分。制法，取斷血流4500g，切段，加水煎煮二次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮 至相對密度為1. 15(80°C )，加1.7倍量的乙醇，充分攪拌，靜置24小時，取上清液，減壓濃 縮成稠膏狀，干燥成干浸膏，加輔料適量，制成顆粒，壓制成片功能與主治涼血止血。用 于功能性子宮出血，月經過多，產后出血，子宮肌瘤出血，尿血，便血，吐血，咯血，鼻衄，單純 性紫癜，原發性血小板減少性紫癜等；含量測定，色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅 烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(80 20)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數按醉 魚草皂苷IV b峰計算應不低于3000。對照品溶液的制備取醉魚草皂苷IV b對照品適量， 精密稱定，加甲醇制成每Iml含15 μ g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品20片，除去 包衣，精密稱定，研細，取約0. 3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇20ml，密塞，超聲處理 (功率220W，頻率50kHz) 15分鐘，濾過.濾渣再加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過，合并 濾液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，移入分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次 20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的氨試液30ml洗滌，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每 次30ml，分取正丁醇液，回收至干，殘渣用甲醇溶解，轉移至IOOml量瓶中，加甲醇至刻度， 搖勻，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μ 1，注入 液相色譜儀，測定，即得。現有提取與分離斷血流皂苷所得產品含量較低，方法多是水或乙醇回流提取、萃 取、大孔樹脂純化。如張毅等發表的《大孔吸附樹脂純化斷血流總皂苷工藝研究》，該文獻采 用大孔樹脂純化斷血流皂苷，并對比了洗脫劑的洗脫效果，含量有原來固形物的7. 7%提高 到了 11.8%。專利200510027812. 4 “中藥斷血流總皂苷的提取方法”，公開的方法也是采 用水提取和大孔樹脂純化。而專利200510038206. 4“中藥斷血流總皂苷的制備方法”，該法所得產品總皂苷大 于50%，醉魚草皂苷大于5%，所公開的工藝是水提、醇沉、樹脂純化、硅膠氧化鎂層析及正丁醇萃取等多道工序，操作繁雜。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種斷血流皂苷的制備方法，該方法能夠提高產品含量高，縮短生產周期。本方法之所以采用超聲提取，因為超聲提取速度快，能耗低。昝麗霞發表的“超聲提取-分光光度法測定斷血流總皂苷含量”也比較了超聲提取和回流提取效果，實驗結果證 實超聲提取優于回流提取。本發明的目的是這樣來實現的一種斷血流總皂苷的制備方法，其特征在于包括以下幾個步驟取斷血流藥材粉碎和其5-7倍量醇溶液加入頻率為40-80KHZ超聲波提取罐中超 聲提取1-2小時，提取2-3次，合并提取液；將提取液減壓濃縮至密度1. 1-1. 2加入正丁醇萃取2-3次，收集正丁醇萃取液回 收正丁醇，濃縮液加入丙酮，靜置沉析；將沉析物濾出，加入正丁醇回流溶解，完全溶解后加入活性碳和氧化鋁脫色，濾 過，溶液再加入丙酮，沉析，重復2-3次，干燥即得產品。步驟1)中醇溶液為甲醇或乙醇的水溶液，醇濃度50-70%。優選60%甲醇溶液。步驟2)中正丁醇用量為濃縮液的3-5倍。步驟3)中活性炭為針劑類藥用活性炭，用量1_2%，氧化鋁為100-200目中性氧化 鋁，用量為5-8%，丙酮加入量為液體的1/10-1/5。綜上所述，本發明存在以下優點50_70%醇超聲提取可以減少其他成分的溶出， 提取效率高，能耗低；正丁醇萃取是除去水溶性雜質，丙酮的加入又減少了非極性成分在沉 析過程中析出；沉析溶劑選擇正丁醇和丙酮有利于試劑的回收和重復利用。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限 于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 取5kg斷血流藥材，粉碎投入超聲提取罐，加入35L50%甲醇溶液，以頻率40KHz 超聲提取2小時，提取兩2次，合并提取液濾過，減壓濃縮至密度1. 2，放出液體400ml轉入 萃取罐內加入1200ml正丁醇充分萃取，萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后加入 IOOml丙酮，攪拌均勻放置沉析，充分沉析后濾出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物用900ml 正丁醇回流溶解后，再加入9g針劑活性炭和27g氧化鋁脫色，濾過，濾液中加入90ml丙酮， 充分攪拌，靜止沉析，溶解脫色沉析3次，真空干燥沉淀物，得產品150g總皂苷含量80%。實施例2:取5kg斷血流藥材，粉碎投入超聲提取罐，加入35L70%甲醇溶液，以頻率80KHz 超聲提取1小時，提取兩2次，合并提取液濾過，減壓濃縮至密度1. 1，放出液體370ml轉 入萃取罐內加入1500ml正丁醇充分萃取，萃取2次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后加 入120ml丙酮，攪拌均勻放置沉析，充分沉析后濾出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物用IOOOml正丁醇回流溶解后，再加入20g針劑活性炭和50g氧化鋁脫色，濾過，濾液中加入 200ml丙酮，充分攪拌，靜止沉析，溶解脫色沉析2次，真空干燥沉淀物，得產品130g總皂苷 含量82%。實施例3 取5kg斷血流藥材，粉碎投入超聲提取罐，加入25L60%乙醇溶液，以頻率60KHz 超聲提取1.5小時，提取兩3次，合并提取液濾過，減壓濃縮至密度1. 12，放出液體380ml 轉入萃取罐內加入1200ml正丁醇充分萃取，萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后 加入150ml丙酮，攪拌均勻放置沉析，充分沉析后濾出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物 用IOOOml正丁醇回流溶解后，再加入7g針劑活性炭和28g氧化鋁脫色，濾過，濾液中加入 IOOml丙酮，充分攪拌，靜止沉析，溶解脫色沉析3次，真空干燥沉淀物，得產品145g總皂苷 含量81%。實施例4 取IOkg斷血流藥材，粉碎投入超聲提取罐，加入60L60%甲醇溶液，以頻率80KHz 超聲提取1小時，提取兩3次，合并提取液濾過，減壓濃縮至密度1. 15，放出液體600ml轉 入萃取罐內加入1800ml正丁醇充分萃取，萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后加 入300ml丙酮，攪拌均勻放置沉析，充分沉析后濾出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物用 2000ml正丁醇回流溶解后，再加入20g針劑活性炭和IOOg氧化鋁脫色，濾過，濾液中加入 300ml丙酮，充分攪拌，靜止沉析，溶解脫色沉析3次，真空干燥沉淀物，得產品308g總皂苷 含量81%。實施例5 取IOkg斷血流藥材，粉碎投入超聲提取罐，加入50L60%甲醇溶液，以頻率80KHz 超聲提取1小時，提取兩3次，合并提取液濾過，減壓濃縮至密度1. 15，放出液體580ml轉 入萃取罐內加入2000ml正丁醇充分萃取，萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后加 入350ml丙酮，攪拌均勻放置沉析，充分沉析后濾出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物用 2000ml正丁醇回流溶解后，再加入20g針劑活性炭和IOOg氧化鋁脫色，濾過，濾液中加入 200ml丙酮，充分攪拌，靜止沉析，溶解脫色沉析3次，真空干燥沉淀物，得產品290g總皂苷 含量82%。
權利要求
一種斷血流總皂苷的制備方法，其特征在于包括以下幾個步驟1)取斷血流藥材粉碎和其5-7倍量醇溶液加入頻率為40-80KHz超聲波提取罐中超聲提取1-2小時，提取2-3次，合并提取液；2)將提取液減壓濃縮至密度1.1-1.2加入正丁醇萃取2-3次，收集正丁醇萃取液回收正丁醇，濃縮液加入丙酮，靜置沉析；3)將沉析物濾出，加入正丁醇回流溶解，完全溶解后加入活性碳和氧化鋁脫色，濾過，溶液再加入丙酮，沉析，重復2-3次，干燥即得產品。
2.根據權利要求1所述斷血流總皂苷的制備方法，其特征在于步驟1)中醇溶液為甲醇 或乙醇的水溶液，醇濃度50-70%。
3.根據權利要求1所述斷血流總皂苷的制備方法，其特征在于步驟2)中正丁醇用量為 濃縮液的3-5倍。
4.根據權利要求1所述斷血流總皂苷的制備方法，其特征在于步驟3)中活性炭為針劑 類藥用活性炭，用量1-2%，氧化鋁為100-200目中性氧化鋁，用量為5-8%，丙酮加入量為 液體的1/10-1/5。
全文摘要
本發明涉及一種斷血流總皂苷的制備方法。工藝步驟包括甲醇或乙醇溶液超聲提取，正丁醇萃取2-3次，回收正丁醇，加入丙酮沉析，正丁醇回流溶解，加活性炭氧化鋁去雜，加如丙酮再沉析2-3次等。采用本方法生產斷血流總皂苷，能耗低、廢液少、周期短、產品含量高，所得產品可以直接用作藥品和保健品原料。
文檔編號A61K36/53GK101804092SQ20101015609
公開日2010年8月18日 申請日期2010年4月27日 優先權日2010年4月27日
發明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司