胃泌酸調節素類似物的制作方法

專利名稱：胃泌酸調節素類似物的制作方法
胃泌酸調節素類似物與相關申請的交叉引用本申請是2009年2月19日提交的國際專利申請No. PCT/US2009/034448的部分連續案，其內容在此以其全文引用。
背景技術：
(1)發明領域本發明涉及胃泌酸調節素(0ΧΜ，胰高血糖素-37)的肽類似物，其已被修飾以抵抗二肽基肽酶IV(DPP-IV)切割和失活并增加肽類似物的體內半衰期，同時能夠使肽類似物起到雙重GLP-I/胰高血糖素受體(GCGR)激動劑的作用，以及使用所述肽類似物來治療代謝障礙例如糖尿病和肥胖癥。(2)相關技術描述激素胃泌酸調節素(0ΧΜ、胰高血糖素-37)是前胰高血糖素原在腸和中樞神經系統(CNS)中加工的翻譯后產物，并由腸中的L-細胞對進食做出響應而分泌。OXM 在1983年發現，已被暗示參與進食和能量消耗的調節(Jarrouse等，Endocrinol. 115 102-105 (1984) ；Schjoldager 等，Eur. J. Clin. Invest.，18 :499-503 (1988))。 在大鼠中OXM的中樞或外周給藥引起短期進食降低并伴有對胃排空的極小影響 (Dakin 等，Endocrinology, 142 :4244-4250(2001) ；Dakin 等，Endocrinology, 145 沈87-2695(2004))。在大鼠中OXM的反復腦室內給藥，導致與成對飼養的動物相比核心溫度的升高和體重增加的降低，表明了對卡路里攝入和能量消耗兩者的影響(Dakin等， Am. J.Physiol. Endocrinol. Metab.，283 :E1173—E1177(2002))。在相關研究中，OXM的外周給藥劑量依賴性地抑制禁食誘導的和黑暗期進食兩者， 但是與GLP-I不同，對胃排空沒有影響。OXM也在弓狀核(ARC)中降低禁食ghrelin水平并增加c-fos免疫反應性。OXM的反復7日IP給藥在大鼠中引起體重增加和肥胖速率的減低 (參見 Dakin 等，Endocrinology, 145 :2687-2695 (2004))。OXM在小鼠中的作用的研究已經證實，盡管OXM能夠活化胰高血糖素和GLP-I受體兩者，但OXM的食欲減退作用只需要GLP-I受體，因為在胰高血糖素受體敲除小鼠中，腦室內OXM抑制了進食。然而，在GLP-I受體敲除小鼠中，OXM的食欲減退效應完全缺失。此外，在小鼠中是exendin-4而不是OXM調控能量消耗。因此，當在藥理學濃度下使用時，OXM似乎是 GLP-I 受體的弱激動劑(參見 Baggio 等，Gastroenterol. 127 :546-58 (2004))。還發現 OXM 在喂食高脂肪飲食的小鼠中改善葡萄糖不耐受性(Dakin等，Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 294 :E142_E147 (2008))并在小鼠中不依賴于GLP-I受體增加固有心率(Sowden等， Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 292 :R962_R970 (2007))。也已顯示，OXM 差異影響GLP-I受體β-視紫紅質抑制蛋白召集和通過G-α的信號傳導(Jorgensen等， J. Pharma. Exp. Therapeut. 322 :148-154(2007)),并且在外周注射OXM后差異影響下丘腦神經元活化(Choudhri 等，Biochem. Biophys. Res. Commun. 350 :298-306 (2006)) 在人類中，在正常體重的健康對象中進行單次90分鐘的OXM靜脈內灌注降低了饑餓分值，并將自助餐的進食量降低了約19%。累積12小時卡路里攝入量降低了約11%,沒有惡心或食物可口性變化的報告(Cohen等，J. Clin. Endocrinol. Metab. ,88 4696-4701(2003) ；Lykkegaard 等，ADA Scientific kssions，摘要 #1506_P U003))。更近些時候，在肥胖的健康志愿者(BMI約為33)中，在為期四周內正餐前注射OXM導致在治療的第一天卡路里攝入量顯著降低(約25% )，其在整個研究過程中得以維持(四周后降低 35% ) (Wynne等，Diabetes 54 =2390-2395 (2005)) 在治療對象中，在研究結束時觀察到強的體重喪失(1.9%，經安慰劑校正過)。OXM的血漿水平與灌輸研究中觀察到的相似(峰值濃度約為950pM)。盡管由于OXM的不良體內穩定性(血漿t1/2 < 12分鐘)而需要相對高的劑量，但不存在任何快速脫敏，以及輕度和暫時惡心的低發生率(約3% )，使得這種激素成為既經過人類驗證又具有吸引人的耐受性情況的很少的幾個肥胖癥靶點之一。OXM具有非常短的半衰期，并被細胞表面的二肽基肽酶IV(DPP-IV)快速失活(Zhu 等，J. Biol. Chem. 278 :22418-22423 (2002))。然而，DPP-IV抑制劑在臨床上對體重沒有影響，表明可能需要超生理水平的0XM(900-1000pM)才能在人類中實現體重喪失。用于在人類中誘導體重喪失的OXM肽類似物成為已公開的國際申請號W003/022304、W02004/062685 和 W02006/1 ；34340 的目標。因此，OXM顯示出作為代謝障礙例如糖尿病和肥胖癥的治療方法的潛力。此外，因為OXM的不良體內穩定性，因此對于開發能夠安全有效地給藥以治療代謝疾病例如糖尿病和肥胖癥的0ΧΜ，存在著需求。此外，如果開發出通過與改進穩定性和藥物動力學的部分偶聯進行修飾、更具體為提供了對DPP-IV切割的抗性的修飾的類似物或衍生物，將是更加理想的。提供能夠起到GLP-I受體/胰高血糖素受體雙重激動劑作用的OXM類似物，也將是理想的。發明簡述本發明提供了胃泌酸調節素(0ΧΜ、胰高血糖素-37)肽類似物，其已被修飾以抵抗二肽基肽酶IV(DPP-IV)切割和失活并增加肽類似物的體內半衰期，同時能夠使肽類似物起到GLP-I/胰高血糖素受體(GCGR)雙重激動劑的作用，以及使用這樣的肽類似物來治療代謝障礙例如糖尿病和肥胖癥。具體來說，本文公開的類似物降低食物攝入量和體重、增加代謝速率、介導來自胰島的葡萄糖依賴性胰島素分泌(GDIQ并增加葡萄糖耐受性，從而為患有代謝障礙例如代謝綜合征、肥胖癥、糖尿病、代謝綜合征X、高血糖、禁食血糖受損、血脂異常、動脈粥樣硬化和其他糖尿病前期狀態的個體提供治療選項。因此，本發明提供了包含SEQ ID NO 1中顯示的人類胃泌酸調節素(OXM)的氨基酸序列的肽，其中從肽的N-末端起第二個氨基酸被使肽對二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代，所述肽包括與肽共價連接的脂類或膽固醇部分；除了 2位處的取代之外，肽任選包括1至3個氨基酸取代；并且肽任選包括保護性基團，其如果存在的話，與肽的 C-末端羧基相連；其中肽能夠起到GLP-I受體和胰高血糖素受體雙重激動劑的作用，并具有與人類OXM的血清半衰期相比更長的血清半衰期，及其可藥用鹽。在其他情況下，取代從 N-末端起第二個氨基酸的氨基酸選自D-絲氨酸和α -氨基異丁酸。還提供了包含SEQ ID NO 1中顯示的人類胃泌酸調節素(OXM)的氨基酸序列的肽，其中從N-末端起第二個氨基酸被選自D-絲氨酸和α -氨基異丁酸的氨基酸取代；肽的 C-末端包括半胱氨酸殘基，其中半胱氨酸殘基的硫醇基通過親水性連接物與膽固醇部分共價連接；除了 2位處的取代之外，肽任選包括1至3個氨基酸取代；并且肽任選包括保護性基團，其如果存在的話，與肽的C-末端羧基相連；其中肽起到GLP-I受體和胰高血糖素受體雙重激動劑的作用，并具有與人類OXM的血清半衰期相比更長的血清半衰期，及其可藥用
Τττ . ο還提供了包含SEQ ID NO 1中顯示的人類胃泌酸調節素(OXM)的氨基酸序列的肽，其中從N-末端起第二個氨基酸被使肽對二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；所述肽包括與肽共價連接的脂類或膽固醇部分；所述肽包括在選自17、18和27位的氨基酸位置處包括一個或多個氨基酸取代；并且所述肽任選包括保護性基團，其如果存在的話，與肽的C-末端羧基相連；其中所述肽起到GLP-I受體和胰高血糖素受體雙重激動劑的作用，并具有與人類OXM的血清半衰期相比更長的血清半衰期，及其可藥用鹽。在其他情況下，一個或多個氨基酸取代選自谷氨酸取代17位處的精氨酸、丙氨酸取代18位處的精氨酸、正亮氨酸或0-甲基-L-高絲氨酸取代27位處的甲硫氨酸。還提供了包含SEQ ID NO 1中顯示的人類胃泌酸調節素(OXM)的氨基酸序列的肽，其中從N-末端起第二個氨基酸被使肽對二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；肽包括與肽共價連接的脂類或膽固醇部分；除了 2位處的取代之外，肽任選包括1至 3個氨基酸取代；肽缺少氨基酸序列RNRNNIA (SEQ ID NO 104)；并且肽任選包括保護性基團，其如果存在的話，與肽的C-末端羧基相連；其中肽起到GLP-I受體和胰高血糖素受體雙重激動劑的作用，并具有與人類OXM的血清半衰期相比更長的血清半衰期，及其可藥用鹽。在其他情況下，在2位的氨基酸取代是選自D-絲氨酸和α-氨基異丁酸的氨基酸，膽固醇部分通過親水性連接物與半胱氨酸的硫醇基共價連接，并且半胱氨酸殘基通過肽鍵與肽的C-末端共價連接。在其他情況下，肽還包含在選自17、18和27位的氨基酸位置處的一個或多個氨基酸取代。在其他情況下，肽還包括一個或多個氨基酸取代，其選自谷氨酸取代17位處的精氨酸、丙氨酸取代18位處的精氨酸、正亮氨酸或0-甲基-L-高絲氨酸取代27位處的甲硫氨酸。在上述任一種肽的其他情況下，肽包括膽固醇部分，其與位于肽的C-末端的半胱氨酸殘基的硫醇基共價連接。在特定情況下，膽固醇部分通過親水性連接物與硫醇基共價連接。親水性連接物可以是肽或聚合物，例如包括1至10個乙氧基單元的乙氧基聚合物。 在其他情況下，親水性連接物是包括4個乙氧基單元的乙氧基聚合物。在肽的其他情況下， 肽包括與共價連接到肽的C-末端的賴氨酸殘基的ε -氨基共價連接的脂類部分，其在特定實施方案中是棕櫚酰基。在其他實施方案中，賴氨酸殘基通過連接物部分與肽的C-末端相連。在特定情況下，連接物部分包括一個或多個Y-谷氨酸殘基，并且在其他情況下，連接物部分是1-氨基_4，7，10-三氧雜-13-三癸胺琥珀酰胺酸。此外，還提供了選自表1和表2中顯示的肽類似物的OXM肽類似物，以及表1和表 2中顯示的一種或多種OXM肽類似物在制備用于治療代謝障礙的藥物的應用。還提供了肽類似物，其包含結構Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQffLX7NTK (SEQ ID NO :106)其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、l_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ；α-氨基丁酸(AbU) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(Prg)；烯丙基甘氨酸(Alg)； 2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D_tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)；或I-氨基-I-環戊烷羧酸(Acpe) ；x2是Ser(s))或Lys (K) ；X3 是Ser(S)或Glu (E)式是精氨酸(R)或谷氨酸(E)殘基；&是精氨酸(R)或丙氨酸(A)殘基成是Gln (Q)或Lys (K) ;X7是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是氨基酸序列RNRNNIA (SEQ ID NO 104)或連接物部分J2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1I2可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在上述肽的其他情況下，Z2是半胱氨酸殘基，其在特定實施方案中，可以通過其硫醇基與膽固醇部分或脂類部分共價連接。在其他實施方案中，膽固醇部分或組成部分通過親水性連接物與半胱氨酸的硫醇基共價連接。在特定情況下，親水性連接物是包括1至M 個乙氧基單元的乙氧基聚合物，或者在更具體情況下，親水性連接物是包括4個乙氧基單元的乙氧基聚合物。在上述肽的其他情況下，Z2是賴氨酸殘基，在特定實施方案中，賴氨酸的ε -氨基與膽固醇部分或組成部分直接或通過親水性連接物共價連接。在特定實施方案中，脂類部分是棕櫚酰基。在上述肽的其他情況下，L1是連接物部分。在特定情況下，連接物部分是親水性連接物部分。在其他情況下，連接物部分包含一個或多個Y-谷氨酸殘基，而在其他情況下， 連接物部分是1-氨基_4，7，10-三氧雜-13-三癸胺琥珀酰胺酸。在上述肽的特定實施方案中，肽包含選自0XM70(SEQ ID NO :12)、0XM110 (SEQ ID NO :19)、OXMl 15 (SEQ ID NO :21)、0XM177 (SEQ ID NO :24)、0XM212 (SEQ ID NO :27)、 0XM213(SEQ ID NO :28)、0XM216 (SEQ ID NO :29)、0XM290 (SEQ ID NO :46)、0XM301(SEQ ID N0:51)或0XM325(SEQ ID NO :65)的結構。在上述肽的其他特定實施方案中，肽包含選自 0XM237 (SEQ ID NO 31)、0XM238 (SEQ ID NO 32)、0XM259 (SEQ ID NO 33)、0XM260 (SEQ ID NO 34)、0XM261 (SEQ ID NO 35)、0XM262 (SEQ ID NO 36)、0XM263 (SEQ ID NO 37)、 0XM264 (SEQ ID NO :38)、0XM265 (SEQ ID NO 39), 0XM266 (SEQ ID NO :40)、0XM267 (SEQ ID NO 41)、0XM268 (SEQ ID NO 42)、0XM306 (SEQ ID NO 43)、0XM307 (SEQ ID NO 44)和 0XM308 (SEQ ID NO 45)的結構。在上述肽的特定實施方案中，當肽缺少RNRNNIA (SEQ ID NO 104)時，肽包含選自 0XM291 (SEQ ID NO 47)、0XM292 (SEQ ID NO 48)、0XM293 (SEQ ID NO 49)、0XM294 (SEQ ID NO 50)、0XM302 (SEQ ID NO 52)、0XM303 (SEQ ID NO 53)、0XM304 (SEQ ID NO 54)、 0XM305 (SEQ ID NO :55)、0XM311 (SEQ ID NO :56)、XM312 (SEQ ID NO :57)、0XM314 (SEQ ID NO 58)、0XM313(SEQ ID NO :59)、0XM317(SEQ ID NO :60)、0XM318(SEQ ID NO :61)、 0XM319(SEQ ID NO :62)、0XM323 (SEQ ID NO :64)、0XM327 (SEQ ID NO :66)或 0XM329 (SEQ ID NO 67)的結構。
在其他特定實施方案中，當肽缺少RNRNNIA(SEQ ID NO 104)時，肽包含選自 0XM345 (SEQ ID NO :69)、0XM355 (SEQ ID NO :70)、0XM357 (SEQ ID NO :71)、0XM359 (SEQ ID NO 72)、0XM361 (SEQ ID NO 73)、0XM373 (SEQ ID NO 74)、0XM374 (SEQ ID NO 75)、 0XM380 (SEQ ID NO :76)、0XM381 (SEQ ID NO :77)、0XM383 (SEQ ID NO :78)、0XM388 (SEQ ID NO 79)、0XM392 (SEQ ID NO 80)、0XM395 (SEQ ID NO 81)、0XM398 (SEQ ID NO 82)、 0XM399 (SEQ ID NO :83)、0XM400 (SEQ ID NO :84)、0XM401 (SEQ ID NO :85)、0XM404 (SEQ ID NO 86)、0XM406 (SEQ ID NO 87)、0XM407 (SEQ ID NO 88)、0XM408 (SEQ ID NO 89)、 0XM410(SEQ ID NO :91)、0XM411 (SEQ ID NO :92)、0XM412 (SEQ ID NO :93)、0XM414 (SEQ ID NO :95)、0XM415(SEQ ID NO :96)、0XM416 (SEQ ID NO :97、0XM417 (SEQ ID NO :98)、 0XM418(SEQ ID NO :99、0XM419 (SEQ ID NO :100、0XM420 (SEQ ID NO :101)或 0XM421(SEQ ID NO 102)的結構。此外，還提供了肽類似物，其包含以下結構Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQffLX7NTK (SEQ ID NO :106)其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、l_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ；α-氨基丁酸(AbU) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg)； 2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D_tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)或1-氨基-1-環戊烷羧酸(Acpe) ；)(2是％鳴)或Lys (K) ；X3 ^ Ser(S)或Glu (E) ；)(4是精氨酸(R)或谷氨酸(E)殘基；)(5是精氨酸(R)或丙氨酸㈧殘基成是Gln (Q)或Lys (K) ;X7是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是連接物部分(L2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1-A可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在上述肽的其他情況下，Z2是半胱氨酸殘基，其在特定實施方案中，可以通過其硫醇基與膽固醇部分或脂類部分共價連接。在其他實施方案中，膽固醇部分或脂類部分通過親水性連接物與半胱氨酸的硫醇基共價連接。在特定情況下，親水性連接物是包括1至M 個乙氧基單元的乙氧基聚合物，或者在更具體情況下，親水性連接物是包括4個乙氧基單元的乙氧基聚合物。在上述肽的其他情況下，Z2是賴氨酸殘基，在特定實施方案中，賴氨酸的ε -氨基與膽固醇部分或脂類部分直接或通過親水性連接物共價連接。在特定實施方案中，脂類部分是棕櫚酰基。在上述肽的其他情況下，L1是連接物部分。在特定情況下，連接物部分是親水性連接物部分。在其他情況下，連接物部分包含一個或多個Y-谷氨酸殘基，而在其他情況下，連接物部分是1-氨基_4，7，10-三氧雜-13-三癸胺琥珀酰胺酸。在上述肽的特定實施方案中，肽包含選自0XIC91 (SEQ ID NO :47)、0XM292 (SEQ ID NO 48)、0XM293 (SEQ ID NO 49)、0XM294 (SEQ ID NO 50)、0XM302 (SEQ ID NO 52)、 0XM303 (SEQ ID NO :53)、0XM304 (SEQ ID NO :54)、0XM305 (SEQ ID NO :55)、0XM311 (SEQ ID NO 56)、0XM312(SEQ ID NO :57)、0XM314(SEQ ID NO :58)、0XM313(SEQ ID NO :59)、 0XM317(SEQ ID NO :60)、0XM318(SEQ ID NO :61)、0XM319 (SEQ ID NO :62)、0XM323(SEQ ID NO :64)、0XM327 (SEQ ID NO :66)或 0XM329 (SEQ ID NO :67)的結構。在其他特定實施方案中，肽包含選自0XM;M5 (SEQ ID NO :69)、0XM355 (SEQ ID NO: 70)、0XM357(SEQ ID NO :71)、0XM359(SEQ ID NO :72)、0XM361(SEQ ID NO :7 、0XM373(SEQ ID NO 74)、0XM374 (SEQ ID NO :75)、0XM380 (SEQ ID NO :76)、0XM381 (SEQ ID NO :77)、 0XM383 (SEQ ID NO :78)、0XM388 (SEQ ID NO :79)、0XM392 (SEQ ID NO :80)、0XM395 (SEQ ID NO 81)、0XM398 (SEQ ID NO :82)、0XM399 (SEQ ID NO :83)、0XM400 (SEQ ID NO :84)、 0XM401 (SEQ ID NO :85)、0XM404 (SEQ ID NO :86)、0XM406 (SEQ ID NO :87)、0XM407 (SEQ ID NO 88)、0XM408 (SEQ ID NO :89)、0XM410(SEQ ID NO :91)、0XM411 (SEQ ID NO :92)、 0XM412(SEQ ID NO :93)、0XM414 (SEQ ID NO :95)、0XM415 (SEQ ID NO :96)、0XM416 (SEQ ID NO 97)、0XM417(SEQ ID NO :98)、0XM418(SEQ ID NO :99)、0XM419(SEQ ID NO :100)、 0XM420 (SEQ ID NO :101)或 0XM421(SEQ ID NO :102)的結構。還提供了肽類似物，其包含結構Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDYsX2YLDX3X4X5AX6DFVQffLX7NTKRNRNNIA (SEQ ID NO :107)其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、l_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ；α-氨基丁酸(AbU) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg)； 2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D_tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)；或I-氨基-I-環戊烷羧酸(Acpe) ；)(2是^^(幻或Lys (K) ；X3 ^Ser(S)或Glu (E)式是精氨酸(R)或谷氨酸(E)殘基；&是精氨酸(R)或丙氨酸(A)殘基成是Gln (Q)或Lys (K) ;X7是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或O-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是連接物部分(L2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1-A可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在上述肽的其他情況下，Z2是半胱氨酸殘基，其在特定實施方案中，可以通過其硫醇基與膽固醇部分或脂類部分共價連接。在其他實施方案中，膽固醇部分或脂類部分通過親水性連接物與半胱氨酸的硫醇基共價連接。在特定情況下，親水性連接物是包括1至M 個乙氧基單元的乙氧基聚合物，或者在更具體情況下，親水性連接物是包括4個乙氧基單元的乙氧基聚合物。在上述肽的其他情況下，Z2是賴氨酸殘基，在特定實施方案中，賴氨酸的ε -氨基與膽固醇部分或脂類部分直接或通過親水性連接物共價連接。在特定實施方案中，脂類部分是棕櫚酰基。在上述肽的其他情況下，L1是連接物部分。在特定情況下，連接物部分是親水性連接物部分。在其他情況下，連接物部分包含一個或多個Y-谷氨酸殘基，而在其他情況下， 連接物部分是1-氨基_4，7，10-三氧雜-13-三癸胺琥珀酰胺酸。在上述肽的特定實施方案中，肽包含選自0ΧΜ290 (SEQ ID NO 46)、0XM301 (SEQ ID NO 51)、0XM321 (SEQ ID NO :63)、0XM325 (SEQ ID NO :65)或 0XM330 (SEQ ID NO :68)的結構。在上述肽的其他特定實施方案中，肽包含選自0XM70 (SEQ ID NO 12) ,0XM110 (SEQ ID NO :19)、OXMl 15 (SEQ ID NO :21)、0XM177 (SEQ ID NO :24)、0XM212 (SEQ ID NO :27)、 0XM213(SEQ ID NO :28)或 0XM216(SEQ ID NO :29)的結構。在上述肽的其他特定實施方案中，肽包含選自0XM237 (SEQ ID NO 31)、 0XM238 (SEQ ID NO :32)、0XM259 (SEQ ID NO :33)、0XM260 (SEQ ID NO :34)、0XM261 (SEQ ID NO 35)、0XM262 (SEQ ID NO 36)、0XM263 (SEQ ID NO 37)、0XM264 (SEQ ID NO 38)、 0XM265(SEQ ID NO 39)、0XM266(SEQ ID NO 40)、0XM267(SEQ ID NO 41)、0XM268 (SEQ ID NO 42)、0XM306 (SEQ ID NO 43)、0XM307 (SEQ ID NO 44)和 0XM308 (SEQ ID NO 45)的結構。還提供了肽類似物，其是GLP-I/胰高血糖素受體(GCGR)雙重激動劑，并具有低于 6. 0的pi。已發現包含膽固醇或脂肪酸部分并具有低于6的pi的肽類似物，具有降低的刺激肥大細胞脫顆粒的能力，正如使用人類肥大細胞系LAD2通過體外反向篩選測定法所確定的。因此，還提供了肽類似物，其包含氨基酸序列HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK(SEQ ID NO :109)，其中從肽的N-末端起第二個氨基酸被使肽對二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；肽包括脂類或膽固醇部分，其通過包含一個或多個Y-谷氨酸殘基的間隔物與肽共價連接；除了 2位處的取代之外，肽任選包括1至3個氨基酸取代；并且肽任選包括保護性基團，其如果存在的話，與肽的C-末端羧基相連；其中肽類似物具有低于6. 0 的pl，并且是雙重的GLP-I受體激動劑和胰高血糖素受體激動劑，及其可藥用鹽。在特定情況下，肽類似物具有介于4至6之間的pl，或約5. 0的pi，例如約5. 4的pi。在其他情況下，取代從肽類似物的N-末端起第二個氨基酸的氨基酸選自D-絲氨酸、α -氨基異丁酸和1-氨基-1-環丁烷羧酸。在特定情況下，肽類似物包括與半胱氨酸殘基的硫醇基共價連接的膽固醇部分， 所述半胱氨酸殘基通過包含一個或多個Y -谷氨酸殘基的間隔物與位于肽類似物C-末端的賴氨酸殘基的氨基共價連接。在其他實施方案中，膽固醇部分通過親水性連接物與硫醇基共價連接，所述親水性連接物在特定實施方案中是包括1至12個乙氧基單元的乙氧基聚合物，例如包括4個乙氧基單元的乙氧基聚合物。在特定情況下，肽類似物包括與賴氨酸殘基的ε -氨基共價連接的脂類部分在特定實施方案中，脂類部分是脂肪酸例如棕櫚酰基、豆蔻酰基或硬脂酰基部分。在其他實施方案中，脂類部分通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與賴氨酸殘基的氨基共價連接。在其他實施方案中，脂類部分通過一個或多個Y -谷氨酸殘基與位于C-末端的賴氨酸殘基的 ε -氨基共價連接。在其他實施方案中，脂類部分通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與賴氨酸殘基的氨基共價連接，并且賴氨酸殘基通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與位于C-末端的賴氨酸殘基相連。在其他情況下，肽類似物還包括一個或多個在選自10、12、16、17、18和27位的氨
基酸位置處的氨基酸取代。在特定實施方案中，肽類似物包括一個或多個氨基酸取代，其選自賴氨酸取代10位處的酪氨酸、絲氨酸取代12位處的賴氨酸、谷氨酸或氨基異丁酸取代16 位處的絲氨酸、谷氨酸取代17位處的精氨酸、丙氨酸取代18位處的精氨酸、賴氨酸取代20 位處的谷氨酰胺以及正亮氨酸或0-甲基-L-高絲氨酸取代27位處的甲硫氨酸。在其他實施方案中，肽類似物中位于10位處的酪氨酸被賴氨酸取代，并且脂類部分通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與賴氨酸殘基的ε_氨基共價連接。在另一個實施方案中，肽類似物中位于20位處的谷氨酰胺被賴氨酸取代，并且脂類部分通過一個或多個 Y-谷氨酸殘基與賴氨酸的ε -氨基共價連接。在任一實施方案中，肽類似物還包括與C-末端共價連接的一個或多個Y-谷氨酸殘基。還提供了肽類似物，其包含結構Z1-P-M-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDx2SX3YLDX4X5X6AX7DFVQffLX8NTKX9X10 (SEQ ID NO :110)其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、l_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ；α-氨基丁酸(AbU) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg)； 2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D_tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)；或1-氨基-1-環戊烷羧酸(Acpe)殘基是酪氨酸(Y)或賴氨酸⑷殘基；X3是絲氨酸⑶或賴氨酸⑷殘基-J4是絲氨酸(S)、α -氨基異丁酸(aib) 或谷氨酸(E)殘基·’Χ5是精氨酸(R)或谷氨酸(E)殘基；X6是精氨酸(R)或丙氨酸㈧殘基；X7是谷氨酰胺(Q)或賴氨酸(K)殘基是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；知是Y -谷氨酸(Y Glu)殘基；Xltl是γ -谷氨酸 (YGlu)殘基或空缺(L1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，M 是(i)通過親水性連接物與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基，( )通過包含一個或多個Y-谷氨酸殘基的間隔物與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基，或(iii)脂類部分，其中M 通過包含一個或多個Y-谷氨酸殘基的間隔物與P的C-末端或內部氨基酸共價連接；并且 Z2是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽，其中肽類似物或其鹽具有低于6. 0的pl，并且是雙重的GLP-I受體激動劑和胰高血糖素受體激動劑。在特定情況下，肽類似物具有介于4至6之間的pi，或約5. 0、5. 1、5. 2、5. 3、5. 4、5. 5、 5. 6,5. 7,5. 8 或 5. 9 的 pl，或約 5. 4 至 5. 5 的 pi。在肽類似物的其他情況下，M是通過親水性連接物與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基，并且半胱氨酸殘基與P的C-末端相連。在其他實施方案中，親水性連接物是包括1至M個乙氧基單元的乙氧基聚合物，其在特定情況下可以包括例如4個乙氧基單元。在其他情況下，M是通過包含一個或多個Y -谷氨酸殘基的間隔物與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基，并且賴氨酸殘基與P的C-末端相連，或者M是通過包含一個或多個 Y -谷氨酸殘基的間隔物與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基，并且賴氨酸殘基位于P的\ 或X7位。在特定情況下，脂類部分是棕櫚酰基、豆蔻酰基或硬脂酰基部分。在特定情況下，肽類似物是0XM317(SEQ ID NO :60)、0XM318 (SEQ ID NO :61)、 0XM319(SEQ ID NO :62)、0XM323 (SEQ ID NO :64)、0XM327 (SEQ ID NO :66) Wk 0XM329 (SEQ ID NO :67)。在其他情況下，肽類似物是 OXM;345(SEQ ID NO 69), 0XM355 (SEQ ID NO :70)、 0XM357 (SEQ ID NO :71)、0XM359 (SEQ ID NO :72)、0XM361 (SEQ ID NO :73)、0XM373 (SEQ ID NO 74)、0XM374 (SEQ ID NO :75)、0XM380 (SEQ ID NO :76)、0XM381 (SEQ ID NO :77)、 0XM383 (SEQ ID NO :78)、0XM388 (SEQ ID NO :79)、0XM392 (SEQ ID NO :80)、0XM395 (SEQ ID NO 81)、0XM398 (SEQ ID NO :82)、0XM399 (SEQ ID NO :83)、0XM400 (SEQ ID NO :84)、 0XM401 (SEQ ID NO :85)、0XM404 (SEQ ID NO :86)、0XM406 (SEQ ID NO :87)、0XM407 (SEQ ID NO 88)、0XM408 (SEQ ID NO :89)、0XM410(SEQ ID NO :91)、0XM411 (SEQ ID NO :92)、 0XM412(SEQ ID NO :93)、0XM414 (SEQ ID NO :95)、0XM415 (SEQ ID NO :96)、0XM416 (SEQ ID NO 97)、0XM417(SEQ ID NO :98)、0XM418(SEQ ID NO :99)、0XM419(SEQ ID NO :100)、 0XM420(SEQ ID NO :101)或 0XM421(SEQ ID NO :102)。還提供了任一種上述肽及其可藥用鹽在制造用于治療代謝障礙的藥物中的應用。GLP-I激動劑是與GLP-I受體結合并刺激與GLP-I相同的生物活性的肽、小分子或化學化合物。在一個實施方案中，GLP-I受體的激動劑以與天然GLP-I相比至少1 %的親和性與受體結合。在另一個實施方案中，GLP-I受體的激動劑以與天然GLP-I相比相等或更高的親和性與受體結合。胰高血糖素激動劑是與胰高血糖素受體結合并刺激與胰高血糖素所做的相同的生物活性的肽、小分子或化學化合物。在一個實施方案中，胰高血糖素受體的激動劑以與天然胰高血糖素相比至少1 %的親和性與受體結合。在另一個實施方案中，胰高血糖素受體的激動劑以與天然胰高血糖素相比相等或更高的親和性與受體結合。當在本文中使用時，“GLP1/胰高血糖素受體雙重激動劑”是“GLP1受體/胰高血糖素受體共同激動劑分子”，其對胰高血糖素受體和GLPl受體兩者都顯示出活性。一般來說， 雙重的GLPl受體激動劑和胰高血糖素受體激動劑，對胰高血糖素受體表現出相對于天然胰高血糖素至少約10%的活性，并且也對GLP-I受體表現出相對于天然GLP-I至少約10% 的活性。附圖簡述

圖1顯示了比較天然OXM與0XMO13E)的糖原分解作用的離體測定的結果。該圖顯示，天然OXM以劑量依賴性方式誘導糖原分解作用，在1. 5nM下誘導完全的糖原分解作用并具有0. 5nM的近似EC5tl，而0XM-Q3E在300nM下只誘導約58%，與其不良的GCGR激動劑效能相一致。圖2顯示了體內GCG受體占據實驗的結果，其顯示出胰高血糖素(GCG)在1. 5mpk 下給出84%的GCGR占有率，3mpk的OXM給出31%的GCGR占有率，但是0XM-Q3E給出0% 的GCGR占有率。圖3A和;3B分別顯示了對OXM和0XM-Q3E做出響應的血糖水平和葡萄糖輸注率。
圖4顯示了在瘦小鼠中皮下(s. c.)給藥OXM和0XM-Q3E的腹膜內葡萄糖耐受測試的結果。圖5A顯示了在灌注肝臟中，在0XM70、OXMl 10, OXMl77, OXMl 15和0XM216存在下
糖原分解作用的離體測量。圖5B顯示了在野生型小鼠中，在競爭測定法中，皮下(s. C.)或靜脈內(i.v.)給藥 0XM70、OXMl 10、OXMl77, OXMl 15 和 0XM216 后與天然 OXM 相比的 GGCR 占有率。圖6概述了 0XM70對于在已建立的DIO小鼠中降低攝食量和體重的劇烈體內效能。在約2小時和18小時后測量攝食量。也測量了 18小時時(過夜)的體重變化(*與介質相比P < 0. 05，η =每組5-6只)。圖7概述了 0ΧΜ110和0ΧΜ177對于在已建立的DIO小鼠中降低攝食量和體重的急性體內效能。在約2小時和18小時后測量攝食量。也測量18小時時(過夜)的體重變化 (*與介質相比P < 0. 05, η =每組5-6只)。圖8概述了 0ΧΜ216、OXMl 15和0ΧΜ177對于在已建立的DIO小鼠中降低攝食量和體重的急性體內效能。在約2小時和18小時后測量攝食量。也測量18小時時(過夜)的體重變化(*與介質相比P < 0. 05，η =每組5-6只)。圖9A-D顯示了在DIO小鼠中對OXM肽類似物0ΧΜ110、0ΧΜ177和0ΧΜ115進行的長期體重和攝食量研究的藥理學終點。圖9Α顯示了攝食量的累積變化。圖9Β顯示了體重的累積變化。圖9C顯示了在研究的幾天內的基礎血糖水平。圖9D顯示了在研究的第13天進行的IPGTT測定。圖10顯示了在瘦小鼠中皮下給藥0ΧΜ70的腹膜內葡萄糖耐受測試(IPGTT)的結
果ο圖11顯示了在瘦小鼠中皮下給藥0XM110的腹膜內葡萄糖耐受測試(IPGTT)的結
果ο圖12顯示了在瘦小鼠中皮下給藥0XM177的腹膜內葡萄糖耐受測試(IPGTT)的結
果ο圖13顯示了在瘦小鼠中皮下給藥0XM115的腹膜內葡萄糖耐受測試(IPGTT)的結
果ο圖14A顯示了 0XM115對DIO小鼠中代謝率影響隨時間的變化。圖14B顯示了由0XM115在DIO小鼠中引起的代謝率變化百分數。圖15概述了幾種+/+肽對于在已建立的DIO小鼠中降低攝食量和體重的急性體內效能。圖16顯示了進食后單劑使用幾種+/+肽對于在已建立的DIO小鼠中降低攝食量和體重的影響。發明詳述基于OXM的治療具有有利影響肥胖癥以及尚需仔細定性的對改善糖尿病的相伴效應的潛力。在外周給藥OXM后的降低體重效能和攝食量降低，已在人類中得到很好驗證 (Wynne等，Diabetes 54 :2390-2395 (2005))。更近些時候，已經顯示OXM在肥胖對象中增加代謝率以及特別是活動相關的能量消耗(Wynne等，Int. J. Obes. 30 :1729-1736(2006)， 2006年4月18日預先在線發表；doi :10. 1038/sj. i jo. 0803；344)。也已顯示，OXM在人類中降低體重(參見例如已發表的國際專利申請號W003/022304、W02004/062685和 W02006/134340)；然而，OXM肽和類似的雙重GLP-I受體/胰高血糖素受體(GLP-1R/GCGR) 激動劑對不依賴于體重的血糖控制的影響，還沒有系統地研究。OXM對胰高血糖素受體和 GLP-I受體兩者具有激動劑活性的能力，使其成為對于希望治療與胰高血糖素和GLP-I受體正面相互作用的代謝疾病的治療來說有吸引力的候選者。OXM(和GLP-1)具有非常短的半衰期，并被細胞表面的二肽基肽酶IV(DPP-IV)快速失活。可以在OXM肽中引入突變以使肽對DPP-IV切割具有抗性；然而，也已發現這些突變中的許多使天然肽失活，或者不利地影響肽與胰高血糖素受體(GCGR)或GLP-I受體 (GLP-IR)相互作用的能力(參見已發表的國際專利申請號W02007/100535，在此以其全文引為參考)。OXM(和GLP-1)也被腎臟快速清除。肽與大體積取代基例如聚乙二醇的偶聯能夠降低肽的腎清除率；然而，當這些大體積取代基被引入到OXM肽中時，發現得到的許多 OXM肽類似物與胰高血糖素受體有效相互作用的能力降低或消失。在能夠推進基于給藥 OXM肽的有效的代謝疾病療法之前，需要解決與穩定性和藥物動力學相關的問題。本文公開的OXM肽類似物解決了這些問題。首先，通過突變DPP-IV切割位點(位于N-末端的倒數第二位殘基)和脂化OXM 肽以增加體內半衰期(t1/2)，解決了由DPP-IV切割和快速腎清除導致的天然OXM和GLP-I 的有限的體內穩定性，這是在人類中以高劑量頻繁給藥(每日三次皮下注射0ΧΜ，連續灌注 GLP-1)所必需的。預計脂化(例如乙酰化或與膽固醇部分偶聯)的OXM肽類似物在人類中的t1/2將適合于至少每日一次給藥。本文公開的OXM肽類似物與需要每日三次給藥的天然OXM相比對于治療目的來說更加方便。其次，預期本發明的多肽在人類中的耐受性情況與天然OXM相似，其可能優于常規的GLP-I模擬物例如艾塞那肽(exenatide)和利拉魯肽 (Iiraglutide)的情況。因此，由于極少的惡心和嘔吐，本文公開的OXM類似物的長期效能可能優于常規的GLP-I模擬物例如Byetta (Amylin Pharmaceuticals)，所述惡心和嘔吐典型是GLP-I模擬物劑量的限制因素。與后者不同，本發明的多肽可能不需要劑量滴定來減輕惡心。第三，還沒有進行系統的研究來評估改進血糖控制的潛力。因為OXM是胰高血糖素受體的強力激動劑，因此預計長期給藥將導致血糖控制受損(高血糖)。然而，出人意料的是，本文公開的引入了平衡的GLP-I受體和GCGR共激動作用的OXM類似物，在長期給藥時引起增加的攝食量和體重降低，并導致葡萄糖耐受性提高。具有GLP-I受體(GLP-IR)和胰高血糖素受體(GCGR)雙重激動劑活性的OXM肽類似物在本文中表示成(+/+)。僅僅是 GLP-I激動劑的OXM肽類似物在本文中表示成(+/0)。生產長效OXM肽類似物不是一帆風順的。我們的最初研究聚焦于大體積聚乙二醇 (PEG)取代基在整個肽中有希望的位置處的位點特異性偶聯。令人吃驚的是，在所有測試位置處添加PEG導致GCGR和/或GLP-IR效能的顯著降低。因此，我們研究了改進藥物動力學性質并同時維持GCGR活性的其他方法。在肽中的各個位置添加膽固醇偶聯物表明C-末端偶聯是最有利的方法。然而，體外和體內研究表明，膽固醇化導致顯著的血清效價漂移和體內效能降低。因此，進一步研究導致在肽與膽固醇基團之間包含不常見的親水性連接物， 或向C-末端殘基直接添加酰基鏈。可以使用本公開的OXM類似物的主要適應癥是肥胖癥和/或糖尿病的治療。次級適應癥是代謝綜合征、高血糖、禁食血糖受損和其他糖尿病前期狀態。其他適應癥包括 GLP-I的所有適應癥，例如過敏性腸綜合征和腸的其他吸收疾病、局部缺血、中風和神經障礙包括焦慮、認知受損和阿茨海默氏病。根據已發表的使用OXM的人類研究，預期本文公開的OXM類似物與當前的抗肥胖癥藥劑例如常見副作用分別為GI不耐受(腹瀉、胃腸氣脹)和高血壓的奧利司他(Xenical (Roche)，一種脂肪酶抑制劑)和西布曲明(Meridia (Abbott Laboratories)，一種血清素/去甲腎上腺素重吸收抑制劑)相比，顯示出如果不是更優也是至少相當的效能和更好的安全性情況。在特定情況下，OXM肽類似物任選包括與N-末端氨基共價連接的保護性基團。與肽的N-末端氨基共價連接的保護性基團降低了氨基端在體內條件下的反應性。氨基保護性基團包括-C1,烷基、-C1,取代烷基、-C2,烯基、-C2,取代烯基、芳基、-CV6烷基芳基、-C (0) - (CH2) ^6-COOH, -C (0) -C1^6 烷基、-C (0)-芳基、-C (0) -O-C1^6 烷基或-C (0) -0-芳基。在特定實施方案中，氨基端保護性基團選自乙酰基、丙基、琥珀酰基、苯甲基、苯甲基氧基羰基和叔丁基氧基羰基。N-末端氨基酸的脫胺是可以考慮用來降低氨基端在體內條件下的反應性的另一種修飾。可以修飾OXM肽類似物以使保護性基團與C-末端羧基共價連接，其降低了羧基端在體內條件下的反應性。例如，肽的羧酸基團，無論是在羧基端還是側鏈上，可以提供成可藥用陽離子的鹽的形式，或酯化形成Cp6酯，或轉變成式NRR2的酰胺，其中R和民各自獨立地是H或CV6烷基，或組合形成雜環例如5-或6員環。羧基端保護性基團優選連接到最后一個氨基酸的α -羰基上。羧基端保護性基團包括但不限于酰胺、甲酰胺和乙酰胺。肽的氨基，無論是N-末端還是側鏈上的，可以采取可藥用酸加成鹽的形式例如HC1、HBr、乙酸、苯甲酸、甲苯磺酸、馬來酸、酒石酸和其他有機酸鹽，或者可以修飾成C^6烷基或二烷基氨基， 或進一步轉變成酰胺。能夠用作雙重GLP-I和胰高血糖素激動劑的OXM肽類似物包含SEQ ID NO :1中顯示的人類胃泌酸調節素(OXM)的氨基酸序列，其中從N-末端起第二個氨基酸被使肽對二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；與OXM肽類似物共價連接的脂類或膽固醇部分；除了 2位處的取代之外，任選的1至3個氨基酸取代；并且任選具有保護性基團， 其如果存在的話，與肽的C-末端羧基相連。在其他實施方案中，肽類似物還缺少氨基酸序列RNRNNIA (SEQ ID NO :104)。一般來說，具有上述結構的OXM肽類似物將起到GLP-I受體和胰高血糖素受體雙重激動劑的作用，并具有高于天然人類OXM的血清半衰期的血清半衰期。在更具體的實施方案中，OXM肽類似物可以由下列結構表示Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTSDYSKYLDSX2X3AQDFVQffLX4NTK (SEQ ID NO 103)其中&是D-絲氨酸或α-氨基異丁酸(aib)殘基；)(2是精氨酸(R)或谷氨酸 (E)殘基；X3是精氨酸(R)或丙氨酸㈧殘基式是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的，但是當存在時是氨基酸序列RNRNNIA (SEQ ID NO 104)或連接物部分J2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1I2可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在其他實施方案中，OXM肽類似物可以由下列結構表示Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTSDYSKYLDSX2X3AQDFVQffLX4NTK (SEQ ID NO :103)其中&是D-絲氨酸或α-氨基異丁酸(aib)殘基；)(2是精氨酸(R)或谷氨酸 (E)殘基；X3是精氨酸(R)或丙氨酸㈧殘基式是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是連接物部分(L2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1^2可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在其他實施方案中，OXM肽類似物可以由下列結構表示Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDYSKYLDSX2X3AQDFVQffLX4NTKRNRNNIA (SEQ ID NO :105)其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、1_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ；α-氨基丁酸(AbU) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg)； 2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D_tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)；或1-氨基-1-環戊烷羧酸(Acpe) ;)(2是精氨酸(R)或谷氨酸 (E)殘基；X3是精氨酸(R)或丙氨酸㈧殘基式是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是氨基酸序列RNRNNIA (SEQ ID NO 104)或連接物部分J2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1I2可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在其他特定實施方案中，OXM肽類似物可以由下列結構表示Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQffLX7NTK (SEQ ID NO :106)
其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、l_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ；α-氨基丁酸(Abu) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg)； 2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D_tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)；或I-氨基-I-環戊烷羧酸(Acpe) ；)(2是^^(幻或Lys (K) ；X3 ^Ser(S)或Glu (E)式是精氨酸(R)或谷氨酸(E)殘基；&是精氨酸(R)或丙氨酸(A)殘基成是Gln (Q)或Lys (K) ;X7是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是氨基酸序列RNRNNIA (SEQ ID NO 104)或連接物部分J2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1I2可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在其他實施方案中，OXM肽類似物可以由下列結構表示Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQffLX7NTK (SEQ ID NO :106)其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、l_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ；α-氨基丁酸(AbU) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg)； 2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D_tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)；或I-氨基-I-環戊烷羧酸(Acpe) ；)(2是^^(幻或Lys (K) ；X3 ^Ser(S)或Glu (E)式是精氨酸(R)或谷氨酸(E)殘基；&是精氨酸(R)或丙氨酸(A)殘基成是Gln (Q)或Lys (K) ;X7是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是連接物部分；z2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或4任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1-A可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在其他實施方案中，OXM肽類似物可以由下列結構表示Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDYsX2YLDX3X4X5AX6DFVQffLX7NTKRNRNNIA (SEQ ID NO :107)其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、l_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ；α-氨基丁酸(AbU) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg)；2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D_tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)；或I-氨基-I-環戊烷羧酸(Acpe) ；)(2是^^(幻或Lys (K) ；X3 ^Ser(S)或Glu (E)式是精氨酸(R)或谷氨酸(E)殘基；&是精氨酸(R)或丙氨酸(A)殘基成是Gln (Q)或Lys (K) ;X7是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是連接物部分(L2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1-A可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在其他特定實施方案中，OXM肽類似物可以由下列結構表示Z1-P-L1-Z2其中P是具有下列氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDx2SX3YLDX4X5X6AX7DFVQffLX8NTKX9 (SEQ ID NO :108)其中&是D-絲氨酸、α-氨基異丁酸(aib)、l_氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、 1-氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ； α-氨基丁酸(AbU) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸 Nva) ； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg) ；2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D-tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸(Acp)；或1-氨基-1-環戊烷羧酸(Acpe)殘基；X2是Tyr或Lys ；X3是Ser (S)或Lys (K)； X^er(S)或Glu (E) ；&是精氨酸(R)或谷氨酸(E)殘基；&是精氨酸(R)或丙氨酸(A) 殘基;X7是Glr^Q)或Lys (K) J8是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；X9是任選的，但是當存在時是一個或多個Y-谷氨酸殘基。Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連，L1是任選的， 但是當存在時是氨基酸序列RNRNNIA (SEQ ID NO 104)或連接物部分J2是任選的，但是當存在時是賴氨酸(K)殘基、與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的賴氨酸殘基、半胱氨酸(C)殘基、與脂類部分共價連接的半胱氨酸殘基、與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基；并且P或&任選包括保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽。L1I2可以與P的C-末端氨基酸或與P的內部氨基酸相連。在每個上述實施方案中，脂類或膽固醇部分可以與氨基酸的側鏈直接或間接相連。當脂類或膽固醇部分與氨基酸側鏈間接相連時，脂類或膽固醇部分通過連接物部分與氨基酸側鏈間接相連。在特定情況下，脂類或膽固醇與氨基酸的側鏈直接相連，然后其通過連接物部分(L1)與OXM肽類似物相連。在本文公開的OXM類似物的特定實施方案中，當16和20位殘基分別為Glu和Lys 時，所述殘基的側鏈可以參與所述Glu和Lys殘基之間的內酰胺橋。在許多實施方案中，連接物部分是親水性連接物。然而，連接物部分的化學結構不是關鍵的，因為它主要用作間隔物。但是，在某些實施方案中，連接物部分自身可以為OXM 肽類似物提供改進的性質。連接物部分的實例包括但不限于氨基酸和肽；烷基連接物例如-NH-(CH2)s-C(O)-,其中s = 2-20，這些烷基連接物可以被任何非空間位阻基團例如短鏈烷基(例如(^_6)、短鏈酰基、鹵素(例如Cl、Br)、CN、NH2、苯基等進一步取代；包括1至12個乙氧基單元的乙氧基聚合物；Ttds (1-氨基-4，7，10-三氧雜-13-三癸胺-琥珀酰胺酸)； 以及1、2、3個或更多個Y-谷氨酸殘基。一般來說，連接物部分與肽(P)的C-末端氨基酸共價連接，并且&與連接物部分共價連接。在特定情況下，連接物部分與P的內部氨基酸共價連接，并且與連接物部分共價連接。在其他情況下，當L1-Z2與P的內部氨基酸共價連接時，X9可以包括一個或多個 Y-谷氨酸殘基。OXM肽類似物包括非對映異構體及其消旋和拆分的對映異構純形式。一般來說， 氨基酸采取L-型，其中特定氨基酸采取D-型。正如本技術領域中已知的，各個氨基酸可以如下表示A = Ala =丙氨酸；C = Cys =半胱氨酸；D = Asp =天冬氨酸；E = Glu =谷氨酸；F = Phe =苯丙氨酸；G = Gly =甘氨酸；H = His =組氨酸；I = lie =異亮氨酸；K = Lys =賴氨酸；L = Leu =亮氨酸；M = Met =甲硫氨酸；N = Asn =天冬酰胺；P = Pro =脯氨酸；Q = Gln =谷氨酰胺；R = Arg =精氨酸；S = Ser =絲氨酸；T = Thr =蘇氨酸；V = Val =纈氨酸；W = Trp =色氨酸；并且Y = Tyr =酪氨酸。表1顯示了基于對胰高血糖素受體和GLP-I受體兩者具有活性(+/+)的全長OXM 分子的多種代表性OXM肽類似物。OXM肽類似物0XiC9、208、209和2 是用于與溴代膽固醇部分進行偶聯反應的肽類似物前體(硫醇化肽)。
權利要求
1.一種肽類似物，其包含氨基酸序列HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQffLMNTK(SEQ ID NO :109)，其中(A)將從肽的N-末端起的第二個氨基酸，用使肽對二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；(B)肽包括脂類或膽固醇部分，其通過包含一個或多個Y-谷氨酸殘基的間隔物與肽共價連接；(C)除了第2位處的取代之外，肽任選包括1至3個氨基酸取代；并且(D)肽任選包含保護性基團，其如果存在的話，與肽的C-末端羧基相連；其中肽類似物具有低于6. 0的pl，并且是雙重的GLP-I受體激動劑和胰高血糖素受體激動劑，及其可藥用鹽。
2.權利要求1的肽類似物，其中用于取代從N-末端起的第二個氨基酸的氨基酸選自 D-絲氨酸、α -氨基異丁酸和1-氨基-1-環丁烷羧酸。
3.權利要求1的肽類似物，其中肽類似物包括與半胱氨酸殘基的硫醇基共價連接的膽固醇部分，所述半胱氨酸殘基與位于肽類似物C-末端的賴氨酸殘基的ε -氨基通過包含一個或多個Y谷氨酸殘基的間隔物共價連接。
4.權利要求3的肽類似物，其中膽固醇部分通過親水性連接物與硫醇基共價連接。
5.權利要求4的肽類似物，其中親水性連接物是包含1至12個乙氧基單元的乙氧基聚合物。
6.權利要求4的肽類似物，其中親水性連接物是包含4個乙氧基單元的乙氧基聚合物。
7.權利要求1的肽類似物，其中肽類似物包括與賴氨酸殘基的ε_氨基共價連接的脂類部分。
8.權利要求7的肽類似物，其中脂類部分是棕櫚酰基。
9.權利要求7的肽類似物，其中脂類部分通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與賴氨酸殘基的ε-氨基共價連接。
10.權利要求7的肽類似物，其中脂類部分通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與位于 C-末端的賴氨酸殘基的氨基共價連接。
11.權利要求7的肽類似物，其中脂類部分通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與賴氨酸殘基的氨基共價連接，并且所述賴氨酸殘基通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與位于C-末端的賴氨酸殘基相連。
12.權利要求1的肽類似物，其中肽類似物在選自10、12、16、17、18和27位的氨基酸位置處還包括一個或多個氨基酸取代。
13.權利要求1的肽類似物，其中肽類似物還包括一個或多個氨基酸取代，所述氨基酸取代選自賴氨酸取代第10位處的酪氨酸、絲氨酸取代第12位處的賴氨酸、谷氨酸或a-氨基異丁酸取代第16位處的絲氨酸、谷氨酸取代第17位處的精氨酸、丙氨酸取代第18位處的精氨酸、賴氨酸取代第20位處的谷氨酰胺以及正亮氨酸或0-甲基-L-高絲氨酸取代第 27位處的甲硫氨酸。
14.權利要求13的肽類似物，其中第10位處的酪氨酸被賴氨酸取代，并且脂類部分通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與賴氨酸殘基的ε-氨基共價連接。
15.權利要求13的肽類似物，其中第20位處的谷氨酰胺被賴氨酸取代，并且脂類部分通過一個或多個Y-谷氨酸殘基與賴氨酸的ε-氨基共價連接。
16.權利要求14的肽類似物，其中肽類似物還包括一個或多個與C-末端共價連接的 Y-谷氨酸殘基。
17.權利要求15的肽類似物，其中肽類似物還包括一個或多個與C-末端共價連接的Y-谷氨酸殘基。
18.權利要求1-17的一種或多種肽類似物在制造用于治療代謝障礙的藥物中的應用。
19.一種肽類似物，其包含以下結構 Z1-P-M-Z2其中P是具有下述氨基酸序列的肽Hx1QGTFTsDx2SX3YLDX4X5X6AX7DFVQffLX8NTKX9X10 (SEQ ID NO 110) 其中&是D-絲氨酸、α -氨基異丁酸(aib)、1-氨基-1-環丁烷羧酸(Acb)殘基、1_氨基-1-環己烷羧酸(Acx) ； α-氨基丁酸(Abu) ；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva)； β-環丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(I^rg)；烯丙基甘氨酸(Alg) ；2-氨基-2-環己基-丙酸(2-Cha) ；D-叔丁基甘氨酸(D-tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg) ； 1-氨基-1-環丙烷羧酸 (Acp)；或1-氨基-1-環戊烷羧酸(Acpe)殘基； X2是酪氨酸(Y)或賴氨酸(K)殘基； X3是絲氨酸( 或賴氨酸(K)殘基； X4是絲氨酸(S)、α -氨基異丁酸(aib)或谷氨酸(E)殘基； X5是精氨酸( 或谷氨酸(E)殘基； X6是精氨酸( 或丙氨酸(A)殘基； X7是谷氨酰胺(Q)或賴氨酸(K)殘基；&是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亞砜(m)或0-甲基-L-高絲氨酸(ο)殘基；父9是Y-谷氨酸(YGlu)殘基；X1。是Y -谷氨酸(Y Glu)殘基或不存在；Z1是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與N-末端氨基相連， M是(i)通過親水性連接物與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基，(ii)通過包含一個或多個Y-谷氨酸殘基的間隔物與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基，或(iii)脂類部分， 其中M通過包含一個或多個Y -谷氨酸殘基的間隔物與P的C-末端或內部氨基酸共價連接；并且Z2是任選存在的保護性基團，其如果存在的話，與C-末端羧基相連；及其可藥用鹽， 其中肽類似物或其鹽具有低于6. 0的pl，并且是雙重的GLP-I受體激動劑和胰高血糖素受體激動劑。
20.權利要求19的肽類似物，其中M是通過親水性連接物與膽固醇部分共價連接的半胱氨酸殘基，并且半胱氨酸殘基與P的C-末端相連。
21.權利要求19的肽類似物，其中M是通過包含一個或多個Y-谷氨酸殘基的間隔物與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基，并且賴氨酸殘基與P的C-末端相連。
22.權利要求19的肽類似物，其中M是通過包含一個或多個Y-谷氨酸殘基的間隔物與脂類部分共價連接的賴氨酸殘基，并且賴氨酸殘基位于P的&或X7位處。
23.權利要求19的肽類似物，其中親水性連接物是包括1至M個乙氧基單元的乙氧基聚合物。
24.權利要求19的肽類似物，其中親水性連接物是包括4個乙氧基單元的乙氧基聚合物。
25.權利要求19的肽類似物，其中脂類部分是棕櫚酰部分。
26.權利要求19的肽類似物，其中肽類似物是0XM317(SEQ ID NO :60)、0XM318 (SEQ ID NO 61)、0XM319(SEQ ID NO :62)、0XM323 (SEQ ID NO :64)、0XM327 (SEQ ID NO :66)或 0XM329(SEQ ID NO :67)。
27.權利要求19的肽類似物，其中肽類似物是0XM345(SEQ ID NO :69)、0XM355 (SEQ ID NO 70)、0XM357 (SEQ ID NO :71)、0XM359 (SEQ ID NO :72)、0XM361 (SEQ ID NO :73)、 0XM373 (SEQ ID NO :74)、0XM374 (SEQ ID NO :75)、0XM380 (SEQ ID NO :76)、0XM381 (SEQ ID NO 77)、0XM383 (SEQ ID NO :78)、0XM388 (SEQ ID NO :79)、0XM392 (SEQ ID NO :80)、 0XM395 (SEQ ID NO :81)、0XM398 (SEQ ID NO :82)、0XM399 (SEQ ID NO :83)、0XM400 (SEQ ID NO 84)、0XM401 (SEQ ID NO :85)、0XM404 (SEQ ID NO :86)、0XM406 (SEQ ID NO :87)、 0XM407 (SEQ ID NO :88)、0XM408 (SEQ ID NO :89)、0XM410 (SEQ ID NO :91)、0XM411 (SEQ ID NO 92)、0XM412(SEQ ID NO :93)、0XM414(SEQ ID NO :95)、0XM415(SEQ ID NO :96)、 0XM416(SEQ ID NO :97)、0XM417 (SEQ ID NO :98)、0XM418 (SEQ ID NO :99)、0XM419 (SEQ ID NO :100)、0XM420(SEQ ID NO :101)或 0XM421(SEQ ID NO :102)。
全文摘要
本申請描述了胃泌酸調節素(OXM，胰高血糖素-37)的肽類似物，其已被修飾以抵抗二肽基肽酶IV(DPP-IV)切割和失活并增加肽類似物的體內半衰期，同時能夠使肽類似物起到雙重GLP-1/胰高血糖素受體(GCGR)激動劑的作用。肽類似物可用于治療代謝障礙例如糖尿病和肥胖癥。
文檔編號A61K38/00GK102573872SQ200980158734
公開日2012年7月11日 申請日期2009年12月18日 優先權日2009年2月19日
發明者喬治·J·埃爾曼, 伊利薩貝塔·比安奇, 伊萊納·卡皮托, 保羅·E·卡靈頓, 多納德·J·瑪什, 安東內洛·佩西, 布萊恩·瓦爾德, 帕奧羅·因加利內拉, 拉納比爾·辛哈羅伊, 理查德·迪瑪奇, 約瑟夫·M·梅茨格, 阿萊西亞·桑托普萊特, 阿雷桑德羅·波卡伊 申請人:P·安杰萊蒂分子生物學研究所責任有限公司, 印第安納大學研究科技公司, 默沙東公司