專利名稱：用于改善正常的認知功能的l-賴氨酸的制作方法
技術領域：
本發明涉及L-賴氨酸改善正常的健康受試者的認知功能的用途。
背景技術：
在一生中，我們每天經歷各種情況，此時我們希望我們具有更好的認知功能。尋找改善我們的正常認知能力的途徑中的巨大興趣鼓舞了新的發明。本發明改善了正常的受試者的認知功能。這些改善是通過L-賴氨酸的施用來實現的。L-賴氨酸是必要的和堿性的氨基酸(即，在生理學pH值下帶有陽性凈電荷)，具有高的營養價值。它是正常生長和發育所需的，容易從腸吸收，并由肝臟代謝。在肌肉中存在高含量的L-賴氨酸。相比身體的其他部分，例如血液，L-賴氨酸的增多的攝取更容易分布到肌肉組織。已經進行了使用L-賴氨酸補充劑治療疾病，例如，復發性單純皰疹感染和骨質疏松癥的研究。作為必要的氨基酸，L-賴氨酸具有非常好的口服生物利用率，容易穿透血腦屏障。L-賴氨酸對人類治療的唯一報告的副作用是少數患者中短暫的胃腸問題。根據已發表的研究，向每日膳食中長期添加6gL_賴氨酸被認為是安全的。在短期的人類研究中， 已經使用了高達40g/天的劑量。僅有的報告的副作用是腹部的痙攣和短暫的腹瀉，其隨著劑量降低而解決。對于L-賴氨酸施用的長期研究(達到2年)沒有顯示任何副作用。早先，通過測量大腦如何過濾之前注意的信息，已經證明了 L-賴氨酸可以在小鼠中恢復認知損傷。這些認知缺陷是通過schizophrenomimetic物質苯環己哌啶誘導的 (Palsson et al. Psychopharmacology (Berl). 2007May ； 192(1) :9_15)。有趣地,新近的初步研究表明，用L-賴氨酸(6g/天)的輔助治療可能改善患有精神分裂癥的患者的某些癥狀。常見的誤解是，改善病人的認知缺陷等價于增強一般健康人的認知能力。這可能是很好的觀點，但是在理解在健康人中使用L-賴氨酸的技術效果方面是關鍵的。例如，抗生素在未感染的人中將不會有用，正如同早先不知道L-賴氨酸改善健康人的記憶和認知。重要的是，L-賴氨酸具有改善正常認知功能的能力，正如本發明請求保護的那樣。 這不同于早先的研究，在早先的研究中，L-賴氨酸恢復了患有潛在疾病的患者的某些癥狀， 或實驗室疾病模型中的認知損傷。作為另一個實例，抗精神病治療可以改善精神分裂癥的認知損傷，以及減少這個患者組中的某些癥狀。然而，沒有人會聲稱抗精神病治療將改善健康個體的基線認知能力。因此，與從天然基線開始改善狀態相比，在改善由基礎的病理生理學引起的損傷方面存在著差異。另一個實例是，如果一個人患有由鏈球菌感染引起的咽喉炎，抗生素藥物將幫助抵抗這種癥狀。然而，如果你是健康的并且不具有任何與鏈球菌相關的癥狀，服用抗生素將不會使得你、或使得你的咽喉更加良好。實際上，服用抗生素可能對正常功能的人有害。來自神經精神病學領域的一個實例是選擇性血清素再吸收抑制劑或SSRI。這類藥物試劑已經被證實在治療例如抑郁癥和焦慮相關的失調方面是高效的，但是對健康個體的精神狀態沒有積極效果。疾病狀態下的作用與對正常功能的作用之間的這種差別在神經精神病學領域是公知的事實。因此，本領域的技術人員不能假定在疾病或疾病模型中有益的效果等價于在健康個體中的有益效果。這類似于假定，可以修復破損的汽車的發明也將會使得完整功能的汽車跑得更快。實際上，阿爾茨海默氏病中使用的認知增強化合物構成了治療患者群體的缺陷與增強健康志愿者的基線認知之間的區別的另一個實例。NMDA受體的拮抗劑美金剛胺和乙酰膽堿酯酶抑制物多奈哌齊(Donezepil)都增強患有阿爾茨海默氏病的患者的認知，但是對健康志愿者的認知沒有或具有有害作用。這些發現清楚地強調了改善正常的認知和受損的認知之間的方法差異，并且表明來自一個群體的給定藥物效果外推到另一個群體充其量是推測性的。因此，僅僅是因為表明了減輕與不同的疾病或缺陷相關的認知損傷，就進行這樣的假定，L-賴氨酸有可能自天然基線起改善認知能力，對于本領域的技術人員來說是非顯而易見的。如在本申請中限定的，健康個體是不患有任何潛在疾病的人，例如精神分裂癥、 ADHD、阿爾茨海默氏病、其他與癡呆相關的疾病和/或其他可能導致認知損傷的疾病。此外，健康個體不遭受缺乏L-賴氨酸的狀態或相關的缺乏癥狀。缺乏L-賴氨酸的體征和癥狀包括疲勞、惡心、眩暈和下降的專注力。W002/07768和US2004005311公開了食物增補劑，其被聲稱減輕癡呆相關的癥狀。 這些增補劑包括L-賴氨酸和菠蘿蛋白酶的核心加上一系列不同的物質和維生素，例如，番茄紅素、維生素C、維生素E和葉酸。然而，這種組合物至少包含L-賴氨酸和菠蘿蛋白酶兩者，用幾種化合物的組合減輕已經存在的損傷。網站 VitaViva 在日期 2008-08-10 (www. vitaviva-info. com)提及了 L-賴氨酸改善專注力。然而，情形是因為缺乏L-賴氨酸的癥狀包括疲倦和眩暈，所以L-賴氨酸可以改善遭受缺乏L-賴氨酸的人的專注力。因此，沒有提及L-賴氨酸將改善健康個體的專注力。WO 95/16661聲稱具有堿性氨基酸的4，7，10，13，16，19-順式-二十二碳六烯酸 (DHA)鹽，特別是精氨酸和賴氨酸，與起始酸相比具有有利的治療和技術特征。然而，在WO 95/16661中沒有表明氨基酸L-賴氨酸本身改善自天然基線起的認知性能。EPO198508聲稱L-磷酸絲氨酸與L-精氨酸和/或L-賴氨酸的氨基酸衍生物可以構成藥物組合物，以治療記憶缺陷、智力缺陷和精神衰退。在此，L-賴氨酸是另一個分子 L-磷酸絲氨酸鹽的一部分，其可以用于臨床治療認知損傷。US2007036870聲稱重量比至少為2 1的生物可獲得的鐵化合物和生物可獲得的鋅化合物與至少一種B族維生素在制造可食用組合物中的用途，用于幫助年齡達18歲的人的認知發展或認知性能。在上下文中提及了 L-賴氨酸，它可以是許多螯合配位體之一，以提高活性化合物的生物利用率。W09833498聲稱，施用治療有效量的Breflate或Breflate衍生物可以治療患有認知功能障礙的哺乳動物以及增強哺乳動物的認知功能。上述化合物的殘基可以包括氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、賴氨酸和精氨酸。再一次地，沒有證據表明，氨基酸L-賴氨酸本身改善了自天然基線起的認知性能。
總之，上述文件或其他公開信息來源都沒有預期L-賴氨酸對于改善健康個體的認知性能的令人驚訝的效果。發明概述本發明改善了正常的受試者的認知功能。這些改善是通過L-賴氨酸(L-賴氨酸鹽酸鹽)的施用來實現的。本發明的第一個方面涉及包含L-賴氨酸的組合物，用于改善正常的健康哺乳動物的認知功能和性能。在本發明的另一個實施方式中，所述哺乳動物是人。在本發明的另一個實施方式中，所述認知功能是之前注意的和注意的信息處理或注意能力。在本發明的又一個實施方式中，所述認知功能是記憶，包括長期記憶、短期記憶和工作記憶。在本發明的另一個實施方式中，所述認知功能是執行功能或推理。在本發明的進一步的實施方式中，所述組合物每天地施用。在本發明的另一個實施方式中，L-賴氨酸的有效劑量是500-40000mg/天，優選的在1000-30000mg/天之間，更優選的在2000-25000mg/天之間，最優選L-賴氨酸的劑量范圍為每天在3000-20000mg之間。在本發明的另一個實施方式中，所述組合物口服地施用。在本發明的進一步的實施方式中，所述組合物被配制為包含以下形式的組的形式或形狀片劑、丸劑小袋、小瓶、硬膠囊或軟膠囊、水性或油性懸浮液、水性或油性溶液、乳劑、粉劑、顆粒、糖漿、酏劑、錠劑、可重構的粉劑、液體制品、乳膏劑、錠劑、硬糖、噴霧劑、液體氣霧劑、干粉制劑、HFA氣霧劑、或有機或無機酸式鹽。在本發明的另一個實施方式中，所述組合物進一步包含載體或賦形劑。在本發明的另一個實施方式中，所述組合物每天作為單次劑量或通過多劑量施用。本發明的第二個方面涉及L-賴氨酸用于制造組合物的用途，所述組合物用于改善正常的健康哺乳動物的認知功能和性能。在本發明的另一個實施方式中，所述哺乳動物是人。在本發明的另一個實施方式中，所述認知功能是之前注意的和注意的信息處理或注意能力。在本發明的另一個實施方式中，所述認知功能是注意能力。在本發明的又一個實施方式中，所述認知功能是記憶，包括長期記憶、短期記憶和工作記憶。在本發明的另一個實施方式中，所述認知功能是執行功能。在本發明的另一個實施方式中，所述認知功能是推理。在本發明的另一個實施方式中，所述組合物每天地施用。在本發明的另一個實施方式中，L-賴氨酸的有效劑量是500-40000mg/天，優選的在1000-30000mg/天之間，更優選的在2000-25000mg/天之間，最優選，L-賴氨酸的劑量范圍為每天在3000-20000mg之間。
在本發明的另一個實施方式中，所述組合物口服地施用。在本發明的另一個實施方式中，所述組合物被配制為包含以下形式的組的形式或形狀片劑、丸劑小袋、小瓶、硬膠囊或軟膠囊、水性或油性懸浮液、水性或油性溶液、乳劑、粉劑、顆粒、糖漿、酏劑、錠劑、可重構的粉劑、液體制品、乳膏劑、錠劑、硬糖、噴霧劑、液體氣霧劑、干粉制劑、HFA氣霧劑、或有機或無機酸式鹽。在本發明的另一個實施方式中，所述組合物進一步包含載體或賦形劑。在本發明的另一個實施方式中，所述組合物每天作為單次劑量或通過多劑量使用。本發明的第三個方面涉及改善正常的健康哺乳動物中的認知功能和性能的方法， 其中有效量的包含L-賴氨酸的組合物被施用給哺乳動物。如在此使用的，術語“認知”、“認知功能”和“認知性能”是可互換的，是指一系列認知領域，例如·之前注意的和注意的信息處理(包括內在和外在刺激的處理)·注意能力(選擇性地專注于環境的一個方面同時忽視其他刺激的過程)·記憶(編碼、貯存、回想)·短期記憶(涉及相對短時間的信息回想的記憶)·長期記憶·工作記憶(暫時保存和操縱信息)·推理(尋找看法、結論、行為或情緒的原因的認知過程)·執行功能(處理新事物、規劃和實現、監視履行、警戒、任務不相關信息的抑制)·有意識的智力活動·智力能力然而，本領域的技術人員應當理解的是，上文提及的認知功能和/或認知性能的列表不排除其他形式的認知功能。附圖
簡要描述圖IA和圖IB顯示了通過評估大腦如何過濾注意之前的信息，L-賴氨酸以劑量相關的方式改善認知功能。圖2顯示了通過評估非聯想學習，L-賴氨酸改善認知功能。圖3A和B顯示了通過評估學習和記憶形成，L-賴氨酸改善認知功能。發明詳細說明在本發明中，顯示的是，L-賴氨酸改善天然的和基線的認知性能。以下實驗(實施例1、2和3)展現了，L-賴氨酸(L-賴氨酸鹽酸鹽)可以增強正常的健康哺乳動物的基線認知性能。實施例I-之前注意的信息處理闡明物質如何影響我們的認知功能的一個途徑是測量大腦如何處理信息。之前注意的信息處理被認為對于感覺信息的選擇性和高效處理是重要的，以及對于合乎邏輯的認知操作是重要的、因而對于記憶和認知功能是重要的。之前注意的信息處理可以通過使用聲學驚嚇反應模型的前脈沖抑制作用(PPI)來評估。PPI模型的一個主要優點是，它是翻譯的行為。因此，它可以在多個物種中研究，從嚙齒動物到人類，提供了大腦如何處理之前注意的信息的跨物種探查的獨特機會。當這種刺激緊跟在弱的前刺激之后(30-500ms)時， PPI是對強烈刺激的反射性反應的降低。前刺激的呈現，雖然沒有強到本身足以引發可測量的反應，激起了腦中短暫持續的感官門選過程，其是通過對連續的強刺激的減弱的反應顯現的。假定PPI反映了中樞神經系統在刺激到達皮層之前過濾分散注意的和不相關的刺激的能力。提高的，即，改善的PPI可以產生更好的抑制機制，其在高級的加工之前過濾或門選內在和外在的刺激。因此，改善的之前注意的信息處理可以產生更好的認知能力。此外，PPI和其他認知功能由相同的皮層-striato-pallido-丘腦回路調節，已經顯示了這些不同的認知域之間的相關性。在實施例1、2 和 3 中使用了雄性 NMRI 小鼠(Charles river, Germany, 25-35g)。 動物被安置在集群房間中，每個籠子放置9只，處在恒定溫度(20+l°C )和濕度(50士5% ) 下。在行為測試之前，容許動物適應環境至少一周。日光循環被人工地維持(從0600到 1800小時的光照)，行為實驗在光照期期間進行。瑞典哥德堡的動物試驗倫理委員會批準了當前研究中使用的所有實驗程序。聲學的驚嚇使用MOPS 3驚嚇反應記錄系統(Metod och Produkt Svenska AB, Sweden)來記錄。動物置于小的有機玻璃籠子(10X5.5X6cm)中，其懸浮在活塞的頂部。 動物在籠子中的運動導致活塞的位移，其加速度由壓電加速度計來記錄。采樣這個信號，用微型計算機數字化，微型計算機還控制聲刺激的發出。驚嚇幅度被定義為在驚嚇引發刺激之后8-30ms后發生的最大信號振幅。同時使用四個籠子，每個籠子置于微弱的光和聲減弱的柜子中(52X42X38cm)。在測試之前籠子校準為相等的敏感性，在隨后的測試中小鼠總在同一個籠子中被測試。聲刺激由白噪聲組成，其通過構建在柜子的天花板上的兩個高頻擴音器發出。每個測試階段以8分鐘的適應期開始，適應期僅含有65dB(A)的白底噪聲。驚嚇脈沖設置到105dB(A)，前脈沖強度設置在高于背景噪聲3、9和12dB(A)。對前脈沖和驚嚇脈沖兩者，聲刺激的延續時間設置在20ms，刺激間的間隔時間(ISI)設置在40ms。在適應期之后，動物經受一系列的5次單獨的驚嚇脈沖試驗，它們從分析中省去，因為它們僅用來使動物適應突然的刺激啟動。動物然后經歷每種前脈沖強度的3個單獨前脈沖試驗、45個單獨的脈沖試驗以及每種前脈沖強度的15個前脈沖+脈沖試驗的偽隨機化的組合。試驗由5-1 的間隔時間分隔。所有小鼠首先經歷預先測試，以確保它們表現基礎的驚嚇反應性。此后，動物經歷匹配測試，基于這個測試的結果，動物分成具有可比較的基礎PPI和驚嚇反應性的四個處理組。在連續三天期間(第1到3天)，小組接受每天一次的鹽水(10ml/kg，n = 16)或 L-賴氨酸(500mg/kg, η = 16 ； 1000mg/kg, η = 15 ；或 2000mg/kg, η = 17)。在第 1 天和第 3天，施用鹽水/L-賴氨酸25分鐘之后呈現第一次驚嚇刺激來測試PPI。這種設計用于評估L-賴氨酸治療的急性和亞-慢性效果。最終的PPI測試在第9天進行，此時動物已經6 天沒有經過任何L-賴氨酸治療。進行最后的測試來評估L-賴氨酸的效果是否是急性的， 或是否隨著時間的過去而持續。對每只小鼠和測試計算單獨的脈沖試驗(P)的平均反應振幅。這一測量值在統計分析中使用來評估聲學吃驚反應中藥物誘導的改變。還計算前脈沖-脈沖試驗(PP)的平均反應振幅，用于根據以下公式表述PPI百分比前脈沖抑制作用(%) = 100_[(PP/P)*100]使用這個公式，0%的值表示單獨的脈沖和前脈沖-脈沖反應振幅之間沒有差異， 因而沒有PPI。實驗的統計分析使用雙向混合模型ANOVA進行，測試天作為受試者內因子， 劑量作為受試者間因子。使用雙尾的顯著性水平，P < 0. 05認為是統計學上顯著的。結果顯示了在第1天和第3天，在超過背景噪聲9dB的前脈沖水平下，L-賴氨酸治療的顯著的效果(F (1,44) = 94. 9 ;P < 0. 05)。劑量500mg/kg和1000mg/kg以劑量相關的方式改善了 PPI應答，而最高劑量的L-賴氨酸，2000mg/kg沒有顯著地影響PPI。這些結果指出了關于認知性能和L-賴氨酸水平的反轉的U形反應曲線。用提高的L-賴氨酸水平改善了認知性能，但是僅達到一定程度。當L-賴氨酸的水平變得過高時，性能降低。就認知性能而言，反轉的U形反應曲線不是罕有的。在圖IA中，顯示了在急性施用(第1天)后L-賴氨酸(0、500、1000和2000mg/ kg，腹膜內地)的效果。在圖IB中，在第1天，與匹配測試中不同處理組的數據相比，數據表現為PPI的完全改變。圖IB展現了，過濾之前注意的信息的能力在用L-賴氨酸500mg/ kg治療的組中提高觀.7%，在用L-賴氨酸1000mg/kg施用的組中提高51. 3%，在L-賴氨酸2000mg/kg組中提高9. 0%。結果還顯示了，測試天沒有顯著的作用(比較第1天和第3天的PPI的結果)。因此，對PPI功能的有益作用不隨重復的L-賴氨酸施用提高或降低。此外，在6天的洗滌期之后，在第9天的最終的PPI測試沒有展現L-賴氨酸治療的任何顯著作用。因而，如果施用終止，L-賴氨酸的有益作用消失。最后，L-賴氨酸施用不影響單獨的脈沖應答。因此，L-賴氨酸看起來不具有任何鎮靜性質。總之，這些結果展現了，L-賴氨酸的施用改善了正常的認知功能，通過在PPI模型中大腦如何過濾之前注意的信息來測量。L-賴氨酸的施用直接增強了認知性能，如果L-賴氨酸被連續地施用，這些改善持續。然而，當施用中斷時，認知性能回到基線。實施例2-非聯想的學習目的是研究在測量非聯想學習的模型中L-賴氨酸施用的效果。根據測量之前注意的信息處理的研究(實施例1)所預測的，施用L-賴氨酸1000mg/kg的小鼠提高了篩選不相關刺激的能力，因而展現了改善的學習(參見附圖幻。用于測量非聯想學習的模型是聲學驚嚇反應的習慣化。習慣化是指對相同刺激的重復呈現的反應的下降，用于這個測試的模型在性質上也是可翻譯的。因為習慣化是大腦如何過濾掉不相關刺激并選擇性地集中于重要刺激的度量，它被認為是其他形式的學習和認知功能的前提。聲學驚嚇使用MOPS 3驚嚇反應記錄系統(參見實施例1)來記錄。根據以下方案測試小鼠的習慣化小鼠首先經歷預測試。小鼠置于處在外殼內的驚嚇籠子中，由65dB(A)背景噪聲組成的持續10分鐘的適應期。在習慣期之后，給予它們 20個單獨的脈沖的試驗。試驗之間的時間間隔總是10s。脈沖強度設置在105dB(A)，每個脈沖的持續時間是20ms。在預測試之后，根據它們的平均驚嚇反應和SEM作為參考，小鼠進行匹配并隨機到同質的組中(L-賴氨酸1000mg/kg ；η = 12，鹽水10mL/kg ；η = 12)。習慣化測試中使用的小鼠再次置于處在外殼內的驚嚇籠子中，由65dB背景噪聲組成的持續10分鐘的適應期。在這一時期之后，給予它們121個單獨的脈沖的試驗。試驗之間的時間間隔總是10s。驚嚇強度設置在105dB，每次驚嚇的持續時間是20ms。鹽水/L-賴氨酸的腹膜內施用是在第一次驚嚇刺激呈現之前25分鐘。第一次驚嚇脈沖響應從統計分析中忽略，因為它過于可變而不能實現顯著性。因此，分析中使用了 120 次驚嚇脈沖試驗。120次脈沖分成6塊，每塊含有20個脈沖。習慣化，平均反應振幅隨時間的改變利用以下公式計算習慣化(<% )=[(塊編號χ/塊編號1)χ 1001-100使用這個公式，0%值表示在塊編號1和其他隨后的塊之間沒有驚嚇反應幅度間的差異，因而沒有習慣化。負值表示隨時間降低的反應，即，聲學驚嚇反應的習慣化。在圖2中，顯示了 L-賴氨酸1000mg/kg的急性施用對聲學驚嚇反應的習慣化的影響。在塊6時(未配對的t-測驗，t = 2. 099，df = 22，ρ < 0. 05)，L-賴氨酸顯著地改善了大腦過濾不相關信息的能力。實施例3-學習和記憶形成存在著幾種適合于在嚙齒動物中研究的學習和記憶任務。一種廣泛使用的是新物體識別測試。該測試涉及將嚙齒動物短時間暴露于兩個相同的物體(介紹期)。在一定延遲之后，與在介紹期遇到的熟悉物體之一和另外的新物體一起，嚙齒動物被放回場地(認識期)。嚙齒動物一般花費更多時間探索新的物體(如果它們有來自介紹期的記憶)。任務難度可以通過，例如，延長各期之間的延遲或提高呈現的物體數量來提高。使用物體識別模型的一些優點是它是很好地表征的，不基于獎賞或處罰。物體識別測試基于動物先天行為去研究它們的環境。此外，記憶形成(涉及信息的編碼、合并和回想)的非常相似的方面可以使用修正的短暫視覺記憶任務(BVMT-R)在人類中評估。因此，物體識別測試是有效的和翻譯的模型用來研究不同物質對記憶的影響。目的是研究在物體識別模型中L-賴氨酸施用的效果。物體識別的實驗設備由占地面積40X40cm的盒形的有機玻璃場地組成。場地地面的照明是5-71ux，場地從上方用數字視頻照相機錄像。要辯別的物體是綠色木制的星形的圓筒(h，￠- :6*3.5cm)和飲水玻璃杯(高，直徑5. 5x 5. 8cm)。物體間隔Hem、距離最近的壁Ilcm放置。物體探查時間根據錄像帶人工地計算。物體探查被定義為小鼠用鼻子和/或前爪嗅聞或接觸物體。物體識別測試之前的一天，動物適應場地5分鐘。在實驗當天，動物轉移到實驗室，標記并稱重，此后在開始測試之前留下適應環境大約2. 5小時。L-賴氨酸1000mg/kg(n =17)或鹽水10ml/kg(n = 19)的施用在介紹期之前30分鐘腹膜內地給予。在第一期，即介紹期，小鼠置于場地的中間，在5分鐘內被呈現給兩個相同的物體 Al和A2 (綠色木質星形圓筒)。在本家籠子中90分鐘延遲之后，小鼠再次置于與早前同一場地的中間，在5分鐘內(識別期)被呈現給兩個物體，舊的熟悉的Al和新的物體Bl (飲水玻璃杯)。物體A2總是被替換的那個。在每個小鼠和期之間，物體用10%乙醇清潔。數據表示為平均和平均標準誤(S. Ε. M.)。如果介紹期期間的物體探查時間< 5s/ 物體，小鼠從樣品中棄去。對每個動物計算辨別力指數
Tn/(Tf+Tn)*100Tn =探查新物體(Bi)花費的時間Tf =在識別下探查物體(Al)的時間辨別力指數以百分比表示。在一個期期間動物花費相等的時間探查兩個物體將得到50%的辨別力指數，而動物探查新物體比熟悉的用更長時間將得到> 50%的值。在介紹期期間探索兩個相似的物體的時間方面，L-賴氨酸(1000mg/kg)和鹽水 (lOml/kg)治療之間沒有差異(雙向的混合模型AN0VA，治療作為受試者間因子，物體作為受試者內因子)，表明在場地中物體的某些位置沒有偏愛，以及L-賴氨酸的施用不影響探查行為。圖3A顯示了，與鹽水治療的小鼠相比，施用L-賴氨酸的小鼠花費顯著的更多的時間探查新的物體，由識別期期間的辨別力指數所展現(未配對的t-測驗，t = 2. 580，df = 34，ρ < 0. 05)。此外，在圖:3B中，與在介紹期期間探查物體的時間相比(未配對的t-測驗， t = 2. 273，df = 32，ρ < 0. 05)，L-賴氨酸的施用還引起識別期期間熟悉物體的顯著地更少的探查，而在對照組中沒有顯著差異(未配對的t-測驗，t = 1.463，df = 36，p = ns)。主要的發現是，與鹽水治療相比，L-賴氨酸的施用提高了物體識別。與介紹期相比，在識別期期間，通過對熟悉物體的減少的探查展現了更好的學習和記憶。此外，在識別期期間，相比熟悉的物體，L-賴氨酸治療的動物也更多探測新的物體。總之，這展現了， L-賴氨酸的施用改善了自天然的、非病理非缺乏基線起的認知性能。L-賴氨酸可以用作飲食中的增補劑，例如，面包、谷類、小甜點、薯片、塊狀食物 (bars)、糖果、糕餅、冰淇淋、口香糖、果汁、蘇打、能量飲料、酸奶飲料以及動物飼料中，以及作為代鹽品。優選的，L-賴氨酸以游離形式增補，因而不是例如肽的一部分。本發明的化合物可以通過標準方法以任何水平的純度分離，純化可以通過本領域技術人員已知的常規方法實現，例如，蒸餾、重結晶和層析。L-賴氨酸可以通過利用碳水化物來源的發酵過程來制造。本發明的化合物可以單獨地或與可接受的載體或稀釋劑組合地施用，這樣的施用可以在單次劑量或多劑量中進行。L-賴氨酸的口服施用的劑量范圍是500-40000mg/天。劑量優選地在 1000-30000mg/天之間，更優選的在2000-25000mg/天之間。最優選的口服劑量范圍在 3000-20000mg/天之間，其可以作為單次劑量或多劑量每天施用。組合物可以是，例如以下的形式片劑、丸劑小袋、小瓶、硬膠囊或軟膠囊、水性或油性懸浮液、水性或油性溶液、乳劑、粉劑、顆粒、糖漿、酏劑、錠劑、可重構的粉劑、液體制品、乳膏劑、錠劑、硬糖、噴霧劑、液體氣霧劑、干粉制劑、HFA氣霧劑、或有機或無機酸式鹽。本發明的組合物可以是適合于通過口腔、胃腸外、表面、真皮、皮下、靜脈內、肌肉內、口腔、直腸或陰道的途徑施用的形式，或用于通過吸入或吹入(例如，鼻的、氣管的、支氣管的)途徑來施用。然而，口服施用是優選的施用途徑。取決于受試者和施用途徑，組合物可以以可變的劑量施用。本發明的化合物可以與可接受的酸或堿形成鹽。本發明的化合物的適合的酸式鹽包括但不限于與可接受的鹽形成的那些，例如， 對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、延胡索酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、酸性檸檬酸鹽、酒石酸鹽、酒石酸氫鹽、脂肪族的、脂環族的、芳香族或雜環的羧酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、葡糖酸鹽、羥乙酸鹽、糖酸鹽、抗壞血酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、苯甲酸鹽、丙酮酸鹽、雙羥萘酸鹽[即，1，1'-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽)]、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、硫酸鹽或硫酸氫鹽。要理解的是，本發明的化合物可以以溶劑化以及未溶劑化的形式例如，水合形式存在。對于口服、口腔或舌下的施用，本發明的化合物可以與各種賦形劑組合。口服施用的固體制品經常包括結合劑(例如，糖漿和糖、阿拉伯樹膠、明膠、山梨醇、黃芪膠、聚乙烯吡咯烷酮、十二烷硫酸鈉、預膠化的玉米淀粉、羥丙基甲基纖維素、乳糖、淀粉、變性淀粉、 阿拉伯樹膠、黃蓍膠、瓜爾豆膠、果膠、蠟粘合劑、微晶纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、 羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮/醋酸乙烯共聚物、和海藻酸鈉)，崩解劑(例如淀粉、和優選的玉米、馬鈴薯或木薯淀粉，海藻酸和某些復合硅酸鹽、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明膠、阿拉伯樹膠、淀粉乙醇酸鈉、微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、交聚維酮、羥丙基甲基纖維素、和羥基丙基纖維素)，潤滑劑(例如硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、硅土聚乙二醇蠟、硬脂酸、棕櫚酸、硬脂酸鈣、棕櫚蠟、氫化植物油、礦物油、聚乙二醇和硬脂富馬酸鈉)以及填充物(包括高分子量聚乙二醇、乳糖、糖類、磷酸鈣、 山梨醇、甘氨酸硬脂酸鎂、淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、米粉、白堊、明膠、微晶纖維素、硫酸鈣、 木糖醇和拉克替醇)。這樣的制品也可以包括防腐劑和抗氧化劑。用于口服施用的液體組合物可以是，例如，乳劑、糖漿或酏劑的形式，或可以作為干燥產品存在，用于用水或其他適合的載體在使用之前重構。這樣的液體組合物可以含有常規的添加劑，例如懸浮劑(例如，山梨醇、糖漿、甲基纖維素、氫化可食用脂肪、明膠、羥基烷基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠、氫化可食用脂肪)乳化試劑(例如，卵磷脂、單油酸山梨醇酐酯或阿拉伯樹膠)、水性或非水性載體(包括食用油，例如，杏仁油、分餾椰子油)油脂(例如，甘油、丙二醇、聚乙二醇或乙醇的酯)、甘油、水或生理鹽水；防腐劑(例如， 甲基或對羥基苯甲酸丙酯或山梨酸)以及常規的調味劑、防腐劑、加甜劑或著色劑。也可以包括稀釋劑例如水、乙醇、丙二醇、甘油及其組合物。其他適合的填充物、粘合劑、崩解劑、潤滑劑和其他賦形劑是本領域的技術人員公知的。本發明的化合物也可以以可控制釋放制劑施用。化合物以需要的速率釋放以維持恒定的活性持續令人滿意的時間。這樣的劑型在預定的時間期間向身體提供了藥物供應， 因而相比常規的非控制的制劑，在治療范圍內將藥物水平維持更長時間。化合物還可以配制在可控制釋放制劑中，其中活性化合物的釋放是靶向的。例如，通過制劑的PH值敏感性， 化合物的釋放可以限于消化系統的特定區域。這樣的制劑是本領域的技術人員公知的。活性化合物可以以脂質體傳送系統的形式施用，例如，小單層脂質體、大單層脂質體和多室脂質體。脂質體可以從多種磷脂，例如，膽固醇、十八酰胺或磷脂酰膽堿形成。
權利要求
1.一種包含L-賴氨酸的組合物，用于改善正常的健康哺乳動物的認知功能和性能。
2.根據權利要求1的組合物，其中，所述哺乳動物是人類。
3.根據權利要求1的組合物，其中，所述認知功能是之前注意的和注意的信息處理。
4.根據權利要求1的組合物，其中，所述認知功能是注意能力。
5.根據權利要求1的組合物，其中，所述認知功能是記憶，包括長期記憶、短期記憶和工作記憶。
6.根據權利要求1的組合物，其中，所述認知功能是執行功能。
7.根據權利要求1的組合物，其中所述認知功能是推理。
8.根據權利要求1的組合物，其中，所述組合物每天地施用。
9.根據權利要求1的組合物，其中，L-賴氨酸的有效劑量是500-40000mg/天，優選的在1000-30000mg/天之間，更優選的在2000-25000mg/天之間，最優選，L-賴氨酸的劑量范圍為每天在3000-20000mg之間。
10.根據權利要求1的組合物，其中，所述組合物口服地施用。
11.根據權利要求1的組合物，其中，所述組合物被配制為包含以下形式的組的形式或形狀片劑、丸劑小袋、小瓶、硬膠囊或軟膠囊、水性或油性懸浮液、水性或油性溶液、乳劑、 粉劑、顆粒、糖漿、酏劑、錠劑、可重構的粉劑、液體制品、乳膏劑、錠劑、硬糖、噴霧劑、液體氣霧劑、干粉制劑、HFA氣霧劑、或有機或無機酸式鹽。
12.根據權利要求1的組合物，其中，所述組合物進一步包含載體或賦形劑。
13.根據權利要求1的組合物，其中，所述組合物作為單次劑量或通過多劑量每天地施用。
14.L-賴氨酸用于制造組合物的用途，所述組合物用于改善正常的健康哺乳動物的認知功能和性能。
15.根據權利要求14的用途，其中，所述哺乳動物是人類。
16.根據權利要求14的用途，其中，所述認知功能是之前注意的和注意的信息處理。
17.根據權利要求14的用途，其中，所述認知功能是注意能力。
18.根據權利要求14的用途，其中，所述認知功能是記憶，包括長期記憶、短期記憶和工作記憶。
19.根據權利要求14的用途，其中，所述認知功能是執行功能。
20.根據權利要求14的用途，其中，所述認知功能是推理。
21.根據權利要求14的用途，其中，所述組合物每天地施用。
22.根據權利要求14的用途，其中，L-賴氨酸的有效劑量是500-40000mg/天，優選的在14000-30000mg/天之間，更優選的在2000-25000mg/天之間，最優選，L-賴氨酸的劑量范圍為每天在3000-20000mg之間。
23.根據權利要求14的用途，其中，所述組合物口服地施用。
24.根據權利要求14的用途，其中，所述組合物被配制為包含以下形式的組的形式或形狀片劑、丸劑小袋、小瓶、硬膠囊或軟膠囊、水性或油性懸浮液、水性或油性溶液、乳劑、 粉劑、顆粒、糖漿、酏劑、錠劑、可重構的粉劑、液體制品、乳膏劑、錠劑、堅糖、噴霧劑、液體氣霧劑、干粉制劑、HFA氣霧劑、或有機或無機酸式鹽。
25.根據權利要求14的用途，其中，所述組合物進一步包含載體或賦形劑。
26.根據權利要求14的用途，其中，所述組合物作為單次劑量或通過多劑量每天地施用。
27.一種改善正常的健康哺乳動物的認知功能和性能的方法，其中，有效量的包含 L-賴氨酸的組合物被施用給哺乳動物。
全文摘要
本發明顯示了L-賴氨酸的施用直接增強了健康個體的認知性能，如果L-賴氨酸被連續地施用，這些改善持續。然而，當施用中斷時，認知性能回到基線。
文檔編號A61P25/26GK102316865SQ200980156421
公開日2012年1月11日 申請日期2009年12月11日 優先權日2008年12月12日
發明者丹尼爾·克拉默 申請人:科耐特有限公司