專利名稱：抗葉酸劑的葉酸受體結(jié)合軛合物的制作方法
抗葉酸劑的葉酸受體結(jié)合軛合物相關(guān)申請的交叉引用根據(jù)35 U. S. C. § 1. 119(e)，本申請要求于2008年9月17日提交的美國臨時(shí)專禾Ij 申請序列第61/097，655號的權(quán)益，其公開內(nèi)容在此整體通過引用并入。發(fā)明背景和概述葉酸(FA)，或維生素B9，是所有活細(xì)胞維持一碳途徑正常代謝和核苷酸生物合成所需的必需營養(yǎng)物。這種配體對稱作葉酸受體(FR)的細(xì)胞表面定向的糖蛋白表現(xiàn)出極高的親和力(KD IOOpM)，該糖蛋白是從細(xì)胞外環(huán)境中捕捉其配體的糖基磷脂酰肌醇連接的蛋白。葉酸受體(FR)是與葉酸(FA)結(jié)合的腫瘤相關(guān)膜蛋白且能夠在細(xì)胞內(nèi)通過胞吞機(jī)制轉(zhuǎn)運(yùn)與葉酸結(jié)合的分子。結(jié)合之后，包圍FR-配體復(fù)合物的質(zhì)膜將立即內(nèi)陷以形成內(nèi)部囊泡，稱作內(nèi)體。囊泡腔的PH通過共定位在內(nèi)體膜中的質(zhì)子泵的作用稍微變低，且這種酸化作用可能介導(dǎo)著FR蛋白中的構(gòu)象改變以釋放其所結(jié)合的配體從而允許進(jìn)入胞質(zhì)。FR還是公認(rèn)的腫瘤抗原；并且因此，已為了可能的治療價(jià)值探索了開發(fā)其存在和功能的方法。FR-α在正常成人組織中的分布限于一些極化的上皮細(xì)胞的頂膜表面，包括肺、脈絡(luò)叢和一些腺組織。在胚胎滋養(yǎng)層中和近端腎小管上皮細(xì)胞的腔表面上也是高表達(dá)，后者可能對于葉酸從尿中的重吸收是重要的。然而，在某些癌癥類型中FR-α的表達(dá)增高。非黏液性卵巢癌(多數(shù)卵巢癌)是首個與“過表達(dá)”相關(guān)的腫瘤類型。一些研究證實(shí)了這些腫瘤的 80-90%過表達(dá)FR-α。其他婦科癌癥(例如， 50%的子宮漿液性腫瘤)也過表達(dá)該受體。雖然子宮內(nèi)膜組織亞型可能較不頻繁地表達(dá)該受體，但目前為止它是子宮癌的最常見形式。因此，本文認(rèn)為相當(dāng)數(shù)量的子宮癌患者可能從一些形式的FR-靶向的治療中受益。被報(bào)道的不同頻率過表達(dá)FR-α的其他腫瘤包括小兒室管膜腦瘤、乳腺腫瘤、結(jié)腸腫瘤、腎腫瘤和肺腫瘤，以及間皮瘤。盡管常被公認(rèn)的是FA可以和幾乎任何分子軛合以介導(dǎo)FR-陽性細(xì)胞內(nèi)部的遞送， 但并不能預(yù)料所有的軛合物以同樣的親和力與FR結(jié)合。本文認(rèn)為例如，與FA部分極接近地連接的大藥物也許可以因?yàn)榭臻g相互作用，改變FA進(jìn)入FR的結(jié)合口袋的能力。并且，藥物的性質(zhì)也可能是重要的，因?yàn)镕A分子內(nèi)部的締合也許產(chǎn)生可能不會將其自身適當(dāng)定位進(jìn)FR的弱結(jié)合的軛合物。在任何情況下，當(dāng)FA將分子遞送至靶標(biāo)位點(diǎn)之后，F(xiàn)A便不再被使用了。因此，本文認(rèn)為利用在治療疾病狀態(tài)中可能具有第二功能的不同的分子進(jìn)行靶向?qū)⑹怯杏玫?。本文發(fā)現(xiàn)了抗葉酸劑也能夠靶向FR，并聯(lián)合可釋放連接體也能夠?qū)⒎肿影邢蜻f送到表達(dá)FR的細(xì)胞。然而，據(jù)報(bào)道在4°C測定時(shí)這種抗葉酸劑的相對親和力是有較大差異的， 這妨礙了使用抗葉酸劑作為靶向配體。本文還非預(yù)期地發(fā)現(xiàn)與葉酸相比，抗葉酸劑對葉酸受體的相對親和力是溫度依賴的。并且，已發(fā)現(xiàn)一些抗葉酸劑的相對親和力隨漸增的溫度而提高，而其他抗葉酸劑的相對親和力隨漸增的溫度而下降。并且，還有其他抗葉酸劑的相對親和力在漸增的溫度下相對無變化。本文描述了包括軛合物的化合物、組合物和方法，所述軛合物包含結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑、至少一個可釋放連接體和一種或多種藥物，其中與葉酸相比，在4°C以上的溫度時(shí)，比如在20°C以上的溫度時(shí)，在25°C以上的溫度時(shí)，在30°C以上的溫度時(shí)，和/或在諸如哺乳動物的生理溫度等生理相關(guān)的溫度時(shí)，抗葉酸劑對葉酸受體具有高的相對親和力。 本文還描述了包括軛合物的化合物、組合物和方法，所述軛合物包含結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑、至少一個可釋放連接體和一種或多種藥物，其中與葉酸相比，在4°C以上的溫度時(shí)，比如在20°C以上的溫度時(shí)，在25°C以上的溫度時(shí)，在30°C以上的溫度時(shí)，和/或在諸如哺乳動物的生理溫度等生理相關(guān)的溫度時(shí)，軛合物對葉酸受體具有高的相對親和力。通常，本文所描述的軛合物是共價(jià)的軛合物；然而，應(yīng)理解的是，形成本文所描述的軛合物的部分的藥物可以包括其他結(jié)合形式，所述其他結(jié)合形式包括但不限于復(fù)合物，比如金屬螯合物，及其類似物。在一個實(shí)施方案中，本文描述了包括軛合物的化合物、組合物和方法，所述軛合物包含與葉酸相比，在本文所描述的一個或多個溫度下，對葉酸受體具有為至少約0. 1，至少約0. 2，至少約0. 25，至少約0. 5的相對親和力的抗葉酸劑。在另一個實(shí)施方案中，本文所描述的化合物、組合物和方法包括軛合物，與葉酸相比，所述軛合物在本文所描述的一個或多個溫度下，對葉酸受體具有為至少約0. 05，至少約0. 1，至少約0. 2，至少約0. 25或至少約 0.5的相對親和力。在另一個實(shí)施方案中，本文描述了評估對于FR的葉酸受體結(jié)合配體親和力的方法。在一方面，結(jié)合親和力是相對的并與葉酸相比。應(yīng)理解的是，本文所描述的分析可用來通過與葉酸競爭葉酸受體結(jié)合配體和/或軛合物來評估與葉酸受體結(jié)合的相對選擇性和/ 或特異性。應(yīng)理解的是，這種相對親和力可以用來選擇能夠結(jié)合FR的分子和選擇包括FR 受體結(jié)合部分的軛合物。在另一個實(shí)施方案中，描述了包括下式的藥物遞送軛合物的本文所描述的化合物、組合物和方法AL(D)m其中A是結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑；L是單價(jià)的或多價(jià)的連接體，包括至少一個可釋放連接體；每個D是藥物；且m是從1至大約3的整數(shù)。應(yīng)理解的是，當(dāng)m大于1時(shí)，在每個情形中藥物每個D是獨(dú)立選擇的。換言之，在每個情形中D可能是相同的藥物或可能是不同的藥物。在另一個實(shí)施方案中，本文所描述的組合物和方法對于在患者中治療一種或多種病原性的細(xì)胞群是有用的。所述組合物包括治療有效量的本文所描述的一種或多種軛合物，該軛合物任選地與一種或多種載體、賦形劑和/或稀釋劑或它們的任何組合聯(lián)合。所述方法包括施用有效量的本文所描述的一種或多種軛合物和/或本文所描述的一種或多種組合物的步驟。在另一個實(shí)施方案中，該組合物和方法對于治療癌癥和其他疾病是有用的。在另一個實(shí)施方案中，本文描述了化合物和組合物在制造藥物中的應(yīng)用，其中所述藥物包括治療有效量的本文所描述的用于在患者中治療一種或多種病原性細(xì)胞群的一種或多種軛合物和/或本文所描述的一種或多種組合物。應(yīng)理解的是，所述藥物可以用于本文所描述的用于在患者中治療一種或多種病原性細(xì)胞群的任何方法中。附圖簡述
圖1.A圖，基于KB細(xì)胞的相對親和力分析。B圖，無細(xì)胞的相對親和力分析(分離的結(jié)合平板的葉酸受體)。兩種分析都在無血清的條件下進(jìn)行，平板置于冰床上。FA，( ·)。EC145, ( ■)。圖2. A圖，冰上的蝶酸。B圖，37°C下的Pte。C圖，冰上的LV。D圖，37°C下的LV。 每項(xiàng)分析的進(jìn)行都利用貼壁KB細(xì)胞作為FR來源，檢驗(yàn)培養(yǎng)基中無血清。FA = Pte-y Glu, (· ) ；LV,(〇)；Pte( ■)。圖3. A圖，冰上的EC72。B圖，37°C下的EC72。C圖，冰上的EC17。D圖，37°C下的EC17。每項(xiàng)分析的進(jìn)行都利用貼壁KB細(xì)胞作為FR來源，檢驗(yàn)培養(yǎng)基中無血清。FA或 Pte- y Glu, ( · ) ；EC72,(〇)；EC17 ( ■)。圖4. A圖，在漸增量的胎牛血清(FBS)存在下，F(xiàn)A與KB細(xì)胞的結(jié)合。B圖和C圖， 分別為 FA 和 EC145 的 RA(血清百分比0% ( · )，10% ( ■ )，25% ( ▲ )，50% ( □ )，75% (V ),100% (〇))。D圖，0%或10%血清對EC140的RA的影響。圖5.化合物抗皮下KB腫瘤的活性Ομπιο /kg TIW/兩周；垂直虛線代表給藥的最后一天):(a)對照；(b)EC(^82(CB3717)0/5 完全響應(yīng)；(c)EC1452/5 完全響應(yīng)；(d) EC02845/5完全響應(yīng)。圖6.每個檢驗(yàn)組中被處理的動物的重量改變百分比O μ mol/kg TIW/兩周；垂直虛線代表給藥的最后一天):(a)對照；(b)EC(^82(CB3717)0/5完全響應(yīng)；(c)EC1452/5完全響應(yīng)；(d)EC02845/5完全響應(yīng)。圖 7.相對親和力分析(10% 血清/FDRPMI) :FA ( · ) 1.000 ；EC284( ■ )0. 148 ； EC283(〇)0. 002。圖8.相對親和力分析(10 % 血清 /FDRPMI) :(a)FA( · ) 1. 000 ； (b) EC282( · )0. 148。圖9. EC282抗KB細(xì)胞的活性(72小時(shí)連續(xù)分析):A圖· IC505nM。B圖· IC5019nM。圖10. EC0284抗KB細(xì)胞的活性(2小時(shí)處理/72小時(shí)分析)(a)EC0284+過量葉酸；(b)EC0284o發(fā)明詳述在一個實(shí)施方案中，描述了式AL(D)m的藥物遞送軛合物，其中A是結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑；L是單價(jià)的或多價(jià)的連接體，包括至少一個可釋放連接體；每個D是藥物；且m是從1至大約3的整數(shù)。應(yīng)理解的是， 當(dāng)m大于1時(shí)，在每個情形中的每個D可能是相同的藥物或是彼此不同的藥物。在另一個實(shí)施方案中，單價(jià)的或多價(jià)的連接體L包括至少兩個可釋放連接體。在前述的每一種的一個變化形式中，單價(jià)的或多價(jià)的連接體包括至少一個非二硫化物的可釋放連接體。在另一個實(shí)施方案中，本文所描述的軛合物包括與葉酸相比，在本文所描述的一個或多個溫度下對葉酸受體具有為至少約0. 1，至少約0. 2，至少約0. 25或至少約0. 5的相對親和力的抗葉酸劑。在另一個實(shí)施方案中，與葉酸相比，本文所描述的軛合物在本文所描述的一個或多個溫度下對葉酸受體具有為至少約0. 05，至少約0. 1，至少約0. 2，至少約 0. 25或至少約0. 5的相對親和力。在另一個實(shí)施方案中，化合物、組合物和方法包括含有結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑、至少一個可釋放連接體和一種或多種藥物的軛合物，其中與葉酸相比，在4°C以上的溫度時(shí)，比如在20°C以上的溫度時(shí)，在25°C以上的溫度時(shí)，在30°C以上的溫度時(shí)，和/或在諸如哺乳動物的生理溫度等生理相關(guān)的溫度時(shí)，抗葉酸劑對葉酸受體具有高的相對親和力。本文還描述了包括軛合物的化合物、組合物和方法，所述軛合物包含結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑、至少一個可釋放連接體和一種或多種藥物，其中與葉酸相比， 在4°C以上的溫度時(shí)，比如在20°C以上的溫度時(shí)，在25°C以上的溫度時(shí)，在30°C以上的溫度時(shí)，和/或在諸如哺乳動物的生理溫度等生理相關(guān)的溫度時(shí)，軛合物對葉酸受體具有高的相對親和力。通常，本文所描述的軛合物是共價(jià)的軛合物；然而，應(yīng)理解的是，形成本文所描述的軛合物的部分的藥物可以包括其他的結(jié)合形式，包括但不限于復(fù)合物，比如金屬螯合物，及其類似物。應(yīng)理解的是，可通過任何常規(guī)方法，或可選地通過經(jīng)修改適合于測量相對親和力的本文所描述的方法，在4°C以上的溫度時(shí)，比如在20°C以上的溫度時(shí)，在25°C以上的溫度時(shí)，在30°C以上的溫度時(shí)，和/或在諸如哺乳動物的生理溫度等生理相關(guān)的溫度下對本文所描述的抗葉酸劑和/或軛合物的相對親和力進(jìn)行確定。如本文所用的，術(shù)語“抗葉酸劑”通常指為葉酸代謝的抑制物、拮抗物或其他調(diào)節(jié)物的任何化合物，比如二氫葉酸還原酶(DHFR)、甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲?；?GARTF)、葉酰聚谷氨酸合成酶(FPGQ和胸苷酸合成酶(化)或葉酸受體拮抗劑的抑制和/或拮抗。應(yīng)理解的是，抗葉酸劑可以與以上任何一種中的葉酸結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，或與影響葉酸或其他化合物與以上任何一種中的葉酸結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合的另外的位點(diǎn)結(jié)合。如本文所用的，術(shù)語“結(jié)合葉酸受體”通常指選擇性地或特異性地結(jié)合葉酸受體的化合物。在另一個實(shí)施方案中，結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑選自LV，L-亞葉酸(L-5-甲酰四氫葉酸)；5-CH3-THF,5-甲基四氫葉酸；FA，葉酸；PteGlu，蝶酰谷氨酸(FA) ；MTX，氨甲蝶呤；2-dMTX，2-脫氨-MTX ； 2-CH3-MTX，2-脫氨-2-甲基-MTX ；AMT,氨蝶呤；2-dAMT，2-脫氨-AMT ；2-CH3-AMT，2-脫氨-2-甲基-AMT ； 10-EdAM, 10-乙基-10-脫氮氨蝶呤；PT523， N α - (4-氨基-4-脫氧蝶?；?-N δ -(半鄰苯二甲酰基)-L-鳥氨酸；DDATHF，5，10- 二脫氮-5，6，7，8，-四氫葉酸；5-d (i) H4PteGlu，5-脫氮-5,6,7,8-四氫異葉酸；N9-CH3-5_d (i) H4PteGlu，N9-甲基 _5_ 脫氮-5，6，7，8-四氫異葉酸；5-dPteHCysA，Na-(5-脫氮蝶?；?-L-高半胱氨酸；5-dPteAPBA, N a - (5-脫氮蝶酰基)-DL-2-氨基_4_磷酸基丁酸； 5-dPte0rn ,Na -(5-脫氮蝶?；?_L_ 鳥氨酸；5_dH4PteHCy sA，Na -(5-脫氮-5,6,7,8- 0 氫蝶?；?-L-高半胱氨酸；5-dH4PteAPBA, N a - (5-脫氮-5，6，7，8-四氫蝶?；?-DL-2-氨基-4-磷酸基丁酸；5-dH4Pte0rn，N a -(5-脫氮-5，6，7，8-四氫蝶?；?-L-鳥氨酸； CB3717，NlO-炔丙基-5，8-二脫氮葉酸；ICI-198，583，2-脫氨基-2-甲基-NlO-炔丙基-5,8- 二脫氮葉酸；4-H-ICI-198, 583，4-脫氧-ICI-198，583 ；4-0CH3-ICI-198，583， 4-甲氧基-ICI-198, 583 ；Glu-to-Val-ICI-198, 583 ；纈氨酸-ICI-198 ；583 ； Glu-to-Sub-ICI-198, 583，2-氨基-辛二酸-ICI-198，583 ；7-CH3-ICI-198，583，7-甲基-ICI-198, 583 ；ZD1694，N_[5 (N-(3，4-二氫-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基-甲基)氨基)2-噻吩基)]-L-谷氨酸；2-NH2-ZD1694，2-氨基-ZD1694 ；BW1843U89, (S) -2 [5-(((1, 2-二氫-3-甲基-1-氧代苯并(f)喹唑啉-9-基)甲基)氨基)-1-氧代-2-異吲哚啉基]-戊二酸；LY231514，N- (4- (2-氨基-4，7- 二氫-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-D] 嘧啶-5-基)乙基)苯甲?；鵠-L-谷氨酸；IAHQ，5，8-二脫氮異葉酸；2-dIAHQ，2-脫氨基-IAHQ ； 2-CH3-dIAHQ，2-脫氨基 _2_ 甲基-IAHQ ；5_d ⑴ PteGlu，5-脫氮異葉酸； N9-CH3-5-d (i) PteGlu, N9-甲基 _5_ 脫氮異葉酸；N9-CH0-5_d (i) PteGlu，N9-甲?；?_5_ 脫氮異葉酸；AG337，3，4- 二氫-2-氨基-6-甲基-4-氧代-5- (4-吡啶基硫代)喹唑啉 (quanazoline)；和AG377，2，4_ 二氨基-6_[Ν_ (苯基磺?；?苯甲基)乙基)氨基]喹唑啉。在另一個實(shí)施方案中，結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑選自氨蝶呤、氨甲蝶呤、雷替曲塞(raltitrexed，也稱為 TOMUDEX，ZD 1694)、普來曲塞(plevitrexed，也稱為 BGC 9331 ； ZD9331)、培美曲塞(pemetrexed，也稱作 ALIMTA，LY231514)、洛美曲索(lometrexol， 5，10_ 二脫氮四氫葉酸)和相關(guān)的含二肽配體的環(huán)戊二烯并[g]喹唑啉、CB3717、 CB300945 (也稱作BGC 945)和其立體異構(gòu)體，比如6-R，S-BGC 945、CB300638 (也稱作BGC 638)，和BW1843U89。示例性的抗葉酸劑的制備在Bavetsias等人，2000 ；Bavetsias等人， 2002 ；Gibbs 等人，2005 ；Henderson 等人，2006 Jackman 等人，2004 ；和 Theti 等人，2003 中描述。以上的出版物、和本文所引用的其他每項(xiàng)出版物在此通過引用并入。在另一個實(shí)施方案中，結(jié)合葉酸受體的抗葉酸劑選自氨蝶呤、氨甲蝶呤、CB3717、普來曲塞、雷替曲塞、BGC 945、培美曲塞及其類似物。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑選自CB3717、普來曲塞、雷替曲塞和5-Me-THF。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑選自BGC 945, BGC 638和BGC 9331。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是在大約20°C或更高的溫度下對葉酸受體具有大約0. 1或更高的相對親和力的化合物。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑選自2-CH3-dIAHQ、 5-dPteAPBA、5-dPte0rn、N9-CH0-5_d⑴ PteGlu、2_dIAHQ、7-CH3-ICI-198583、 Glu-to-Val-ICI-198583、Glu-to-Sub-ICI-198583、4-Me0-ICI_198583、ICI-198583、 5-dH4PteHCysA、N9-CH3-5_d (i) H4PteGlu、5_d (i) H4PteGlu、5-CH3_THF、N9-CH3-5_d (i) PteGlu、5-d(i)PteGlu、IAHQ, LY231514、BW1843U89、2-NH2-ZD1694、ZD1694、CB3717、 5-dH4Pte0rn、5-dH4PteAPBA、5-dPteHCysA 和 DDATHF。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是在大約20°C或更高的溫度下對葉酸受體具有大約0. 2或更高的相對親和力的化合物。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑選自N9-CH0-5-d(i) PteGlu、2-dIAHQ、7-CH3-ICI-198583、Glu-to-Val-ICI-198583、Glu-to-Sub-ICI-198583、
4-Me0-ICI-198583,ICI-198583,5-dH4PteHCysA, N9_CH3_5_d (i)H4PteGlu、5_d(i) H4PteGlu、5-CH3-THF、N9-CH3-5_d (i) PteGlu、5_d (i) PteGlu、IAHQ、LY231514、BW1843U89、 2-NH2-ZD1694、ZD1694、CB3717、5-dH4Pte0rn、5-dH4PteAPBA、5_dPteHCysA 和 DDATHF。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是在大約20°C或更高的溫度下對葉酸受體具有大約0. 5或更高的相對親和力的化合物。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑選自N9-CH3-5-d(i) PteGlu、5-d(i)PteGlu、IAHQ、LY231514、BW1843U89、2-NH2_ZD1694、ZD1694、CB3717、
5-dH4Pte0rn、5-dH4PteAPBA、5-dPteHCysA和 DDATHF。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑選自5-dPteAPBA、5_dPte0rn和2-CH3-IAHQ。 在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑選自5-d(i)H4PteGlu、N9-CH3-5_d⑴H4PteGlu、 ICI-198583、4-Me0-ICI-198583、Glu-to-Val-ICI-198583, Glu-to-Sub-ICI-198583、 7-CH3-ICI-198583、N9-CH0-5_d(i)PteGlu 和 2d_IAHQ。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑選自5-d⑴PteGlu、N9-CH3-5_d⑴PteGlu、培美曲塞、CB3717、雷替曲塞、2-去甲基-2-NH2-雷替曲塞、BW1834U89、IAHQ、5-dH4PteHCysA、dH4PteAPBA、dH4Pte0rn 和 DDATHF。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是葉酸的脫氮或二脫氮類似物，包括其還原的衍生物。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是CB3717。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是5-Me-THF?？蛇x地，在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑不是甲酰四氫葉酸?？蛇x地，在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑不是蝶酸?？蛇x地，在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑不是培美曲塞?？蛇x地，在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑不是氨甲蝶呤。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是下式的化合物其中X = PO (OH) 2 (5-dPteAPBA)、CH2NH2 (5-dPte0rn)或 SO2OH (5-dPteHCysA)。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是下式的化合物其中χ = N、Y = NH2、R = H(5-d(i)PteGlu)，X = N、Y = NH2、R = CH3(N9-CH3-5_d(i) PteGlu)，X = N、Y = NH2、R = CHO (N9-CH0-5_d (i) PteGlu)，X = CH, Y = NH2、R = H(IAHQ)， X = CH、Y = H、R = H(2-dIAHQ)，或 X = CH、Y = CH3、R = H(2-CH3-dIAHQ)。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是下式的化合物其中X = OH、R = H、Y = Glu (ICI-198583)，X = OCH3、R = H、Y = Glu (4-Me0-ICI-198583), X = 0H、R = H、Y =纈氨酸(Glu-to-Val-ICI-198583)，X = OH、R =H、Y =辛二酸(Glu-Sub-ICI-198583)，或 X = 0H、R = CH3、Y = Glu (7-CH3-ICI_198583)。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是下式的化合物
9 CO2H其中X = PO (OH) 2 (5-dH4PteAPBA)、CH2NH2 (5_dH4Pte0rn)或 SO2OH (5-dH4PteHCysA)。在另一個實(shí)施方案中，抗葉酸劑是下式的化合物
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權(quán)利要求
1.一種式ALDm的靶向遞送軛合物，其中A是抗葉酸劑；L是含有至少一個可釋放連接體的連接體；m是1到大約3 ；且每個D是獨(dú)立選擇的藥物，其中所述軛合物在大約 200C /250C /300C /生理溫度以上的溫度與葉酸相比具有大約0. 05或更高的葉酸受體相對親和力。
2.如權(quán)利要求1所述的軛合物，其中所述軛合物與葉酸相比具有大約0.1或更高的葉酸受體相對親和力。
3.如權(quán)利要求1所述的軛合物，其中所述軛合物與葉酸相比具有大約0.2或更高的葉酸受體相對親和力。
4.如權(quán)利要求1所述的軛合物，其中所述軛合物與葉酸相比具有大約0.5或更高的葉酸受體相對親和力。
5.一種式ALDm的靶向遞送軛合物，其中A是抗葉酸劑；L是含有至少一個可釋放連接體的連接體；m是1到大約3 ；且每個D是獨(dú)立選擇的藥物，其中所述抗葉酸劑在大約 200C /250C /300C /生理溫度以上的溫度與葉酸相比具有大約0. 1或更高的葉酸受體相對親和力。
6.如權(quán)利要求5所述的軛合物，其中所述抗葉酸劑與葉酸相比具有大約0.2或更高的葉酸受體相對親和力。
7.如權(quán)利要求5所述的軛合物，其中所述抗葉酸劑與葉酸相比具有大約0.25或更高的葉酸受體相對親和力。
8.如權(quán)利要求5所述的軛合物，其中所述抗葉酸劑與葉酸相比具有大約0.5或更高的葉酸受體相對親和力。
9.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的軛合物，其中m是1或2。
10.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的軛合物，其中m是1。
11.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的軛合物，其中所述連接體還包括至少一個非二硫化物的可釋放連接體。
12.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的軛合物，其中所述連接體還包括至少兩個可釋放連接體。
13.如前述權(quán)利要求所述的軛合物，其中至少一個可釋放連接體不是二硫化物。
14.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的軛合物，其中所述抗葉酸劑具有
15.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的靶向遞送軛合物，其中所述抗葉酸劑具有下式其中 X = PO (OH) 2、CH2NH2 或 S020H。
16.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的靶向遞送軛合物，其中所述抗葉酸劑具有下式
17.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的靶向遞送軛合物，其中所述抗葉酸劑具有下式
18.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的靶向遞送軛合物，其中所述抗葉酸劑具有下式
19.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的靶向遞送軛合物，其中所述抗葉酸劑具有下式
20.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的靶向遞送軛合物，其中至少一個D選自由長春花生物堿、微管溶素、絲裂霉素和埃坡霉素組成的組。
21.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的靶向遞送軛合物、和一種或多種載體、賦形劑、稀釋劑和其組合。
22.—種治療患者中病原性細(xì)胞群的方法，所述方法包括向患者施用有效量的權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的靶向遞送軛合物或其組合物、或其包含一種或多種載體、賦形劑、稀釋劑和其組合的組合物的步驟。
23.如前述權(quán)利要求所述的方法，其中所述病原性細(xì)胞群是癌癥。
全文摘要
描述了抗葉酸劑、可釋放連接體與藥物的軛合物，和含有該軛合物的藥物組合物。該軛合物對于治療由病原性細(xì)胞群引起的疾病是有用的。還描述了治療這種疾病的方法。
文檔編號A61P11/06GK102215844SQ200980142532
公開日2011年10月12日 申請日期2009年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月17日
發(fā)明者C·P·利蒙, I·R·弗拉霍夫, 菲利普·斯圖爾特·羅 申請人:恩多塞特公司, 普渡研究基金會