專利名稱：包含分離的四聚體a型原花色素的新組合物及使用和制備方法
技術領域：
本發明涉及來自肉桂的分離的原花色素的提取、純化和用途。
背景技術：
類黃酮化合物存在于植物的所有地上部分，在外皮、樹皮和種子中具有高濃度。此類化合物也存在于許多植物來源的飲料中，例如茶、可可和葡萄酒。類黃酮是被稱作多酚的更大的化合物家族的成員。換言之，這些化合物在一個或多個芳香環上含有多于一個的羥基(OH)。已對多酚特別是類黃酮的物理和化學性質、分析和生物學活性進行了多年的研究。花色苷是一類特殊的天然存在的類黃酮化合物，其是許多水果、蔬菜、谷物和花的紅色、紫色和藍色的原因。例如，水果諸如藍莓、歐洲越橘、草莓、覆盆子、博伊森莓 (boysenberries)、黑莓(marionberries)、越橘、接骨木果等的顏色是由許多不同的花色苷引起的。已在自然界中鑒定出超過300種結構不同的花色苷。由于花色苷是天然存在的， 所以它們作為食品和飲料的著色劑的用途吸引了人們的極大興趣。最近，由于花色苷色素作為飲食抗氧化劑的可能的健康益處使得人們對它們的興趣更濃。例如，歐洲越橘(Vaccinium myrtillus)的花色苷色素長期以來被用于改善視敏度和治療循環病癥。有實驗證據表明某些花色苷和其他類黃酮具有抗炎性質。另外，有報道稱口服施用的花色苷對于治療糖尿病和潰瘍是有利的，并且可能具有抗病毒活性和抗微生物活性。類黃酮的這些期望的性質的化學基礎被認為與它們的抗氧化劑能力相關。因此， 將與漿果和其它水果和蔬菜相關的抗氧化劑特征歸因于它們的花色苷含量。原花色素也被稱作“寡聚原花色素”、“0PC”或“前花青素(procyanidin) ”，是另一類天然存在的類黃酮化合物，其廣泛存在于水果、蔬菜、堅果、種子、花和樹皮中。原花色素屬于被稱作縮合鞣質的種類。它們是存在于水果和蔬菜中的最常見類型的鞣質，并大量存在于種子和外皮中。在自然界中，不同原花色素的混合物通常一起存在，從單一的單元到具有許多連接的單元的復雜分子(低聚物或聚合物)。聚合物原花色素的一般化學結構包含通過共用的以4)-C (6)和/或以4)-C(8)鍵連接在一起的類黃酮3-醇單元的直鏈。"C NMR已用于鑒定聚合物原花色素的結構，近期的研究已闡明了二聚體、三聚體和四聚體原花色素的化學。類黃酮3-醇單元的較大的低聚物在絕大多數植物中占優勢，并以大于2，000 道爾頓的平均分子量存在，包含6個或更多個單體單元(Newman等人，Mag. Res. Chem. ,25 118(1987))。大量最近進行的研究已開發了原花色素的治療應用，這些原花色素主要因它們的抗氧化活性而為人所知。還報導了這些化合物表現出抗菌、防癌、抗病毒、抗炎、抗過敏和血管舒張作用。還發現它們抑制脂質過氧化、血小板凝聚、毛細血管通透性和脆性，并影響包括磷脂酶A2、環加氧酶和脂氧合酶在內的酶系統。例如，原花色素單體(即花色苷)和二聚體已被用于治療與毛細血管脆性增加相關的疾病，還表現出在動物中具有抗炎作用 (Beladi, I.等人，Ann. N. Y. Acad. ki.，284 :358 (1977))。基于這些已報導的發現，低聚物原花色素可以作為多種病癥的治療中的有用組分(Fine, A.M.，Altern. Med. Rev. 5 (2) 144-151(2000))ο原花色素還可防御病毒。在體外研究中，來自榛樹(Hamamelis virginiana)的原花色素殺滅了單純皰疹病毒1型(HSV-I) (Erdelmeier, C. A.等人，Plant Med. June 62(3) :241-5(1996) ；DeBruyne 等人，J. Nat. Prod. Jul :62(7) :954-8 (1999)) 進行了另一項研究以測定各種鞣質的抗病毒活性的構效關系。結果發現化學結構越縮合，抗病毒效力越強(Takechi, M.等人，Phytochemistry, 24 =2245-50 (1985)) 在另一項研究中，原花色素表現出具有抗單純皰疹病毒的活性，其中減少單純皰疹病毒斑形成所需的50%有效劑量比50%的細胞毒性劑量低兩個至三個數量級(Fukuchi, K.等人，Antiviral Res. ,11 285-298(1989))。將環加氧酶(C0X-1、C0XD或前列腺素內過氧化物H合酶(PGHS-1、PGHSD用于測定植物產品的抗炎效力(Bayer, Τ.等人，Phytochemistry, 28 =2373-2378 (1989) ；Goda, Y.等人，Chem. Pharm. Bull. ,40 :2452-2457 (1992))。COX酶是非甾體抗炎藥的藥理學靶點 (Humes, J. L.等人，Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. Α.，78 :2053-2056 (1981)；和 Rome，L. H.等人，Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. Α.，72 :4863-4865 (1975))。參與前列腺素合成的環加氧酶的兩種同工酶是環加氧酶-I(COX-I)和環加氧酶-2(C0X-2) (Hemler,Μ.等人，J. Biol. Chem.， 25 :251,5575-5579(1976))。人們假設選擇性C0X-2抑制劑主要產生抗炎活性(Masferrer， J. L.等人，Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. Α.，91 :3228-3232 (1994))。正對類黃酮作為抗炎物質以及它們的環加氧酶(COX)抑制活性的結構特征進行研究。由于花色苷和原花色素的上述特征和益處，已進行了大量努力從水果、蔬菜和其他植物資源提取這些化合物。盡管特別是在提取包含與其他天然存在的材料(例如礦物鹽、普通的有機酸例如檸檬酸或酒石酸、碳水化合物、黃酮苷和兒茶素)分開的多種花色苷和/或原花色素的組合物方面已取得了很大進展，但是由于固有的困難還未分離和/或鑒定各種單一的花色苷和/或原花色素。實際上，即使是濃縮和提取花色苷和/或原花色素群都會得到被污染的提取物， 這些提取物對于攝入一般不是優選的并且一定不是制藥級的。例如，一種提取花色苷的方法采用加入硫酸氫鹽形成兩性離子物質。使提取物通過吸收兩性離子花色苷加合物的離子交換柱，然后用丙酮、堿或二甲基甲酰胺(DMF)從樹脂洗脫被吸附的花色苷。這一方法的缺點包括存在硫酸氫鹽，其影響花色苷的吸附，從而需要多次柱吸附。用堿洗脫會大量降解花色苷，而DMF不是被認可的食品添加劑，因此在將花色苷加入任何食品之前必須將其完全除去。為了獲得這些類黃酮化合物，使用了明確和精確的加工和分離技術。甚至當被分離時，一直以來很難(即使有可能)分離和鑒定組份異構體。然而，近來研究者已成功地從烏藥(Lindera aggregata)中分離了原花色素三聚體，如C. F. Zhang等人在One New Α-typeProanthocyanidin Trimer from Lindera aggregata, Chinese Chemcial Letter,14 No. 10，pp. 1033-36,2003中所述，其整體援引加入本文。肉桂(樟屬(Cirmamomum spp.))長期以來作為供人類食用的商品，參考古希臘語和拉丁文著述，其被用作調味品和治療胃腸道疾病的民間藥物。肉桂還是對糖尿病患者進行安慰劑對照臨床研究的受試物，該研究進行6周以于評價對葡萄糖和脂質代謝的作用 (Khan, Α.等人，Diabetes Care，2003，洸(12)，3215-3218)。在整個研究中，在所有三個劑量水平(1、3和6g/天)觀察到空腹葡萄糖水平(18- % )、甘油三酯03-30% )、LDL膽固醇(7-27% )和總膽固醇(1216% )的改善，表明較低的劑量也可表現出有利作用。據估算，人類平均每日從食物和調味品中攝入的多酚是1. 5-2. 5克(Rao，B. S. N.， Prabhavati, T.，J. Sci. FoodAg.，1982，33，89)，并且有許多常見的這些原花色素聚合物的飲食來源(Hammerstone，J. F.等人，J. Nutr.，2000，130，2086S-2092S)。從各種食物和調味品來源生產的成百上千種多酚系藥品和飲食補充劑產品遍布全球(歐洲越橘、葡萄籽、綠茶等)。這些產品中的許多已在美國、歐洲和亞洲上市了幾十年并且被普遍認可是安全的。肉桂包含原花色素和其他生物類黃酮，已經表明它們通過充當可在勞累時產生的過氧基的氫原子供體來抑制脂肪酸氧化(Torel J.等人，Phytochemistry 1986 ；25 383-385)。減少自由基對脂質、蛋白質和碳水化合物的損害還與降低產生慢性退行性疾病的風險有關。在被檢測的五十種植物提取物中，通過附睪脂肪細胞測定進行測量，確定肉桂在增加葡萄糖代謝方面效力最強(Broadhurst, C. L.等人，In Vitro. J. Agric. Food. Chem. 2000 ；48 :849-852)。然而，仍需要鑒定包含一種或多種酚類化合物例如原花色素的組合物，以用于具有增強的活性的營養制品和藥品中。發明概述本發明涉及包含分離的、新的四聚體A型原花色素異構體的組合物，所述異構體具有如下所示的式C6tlH48O24和隨本文提交的附圖
中顯示的質譜分析、13C和IH —維和二維匪R譜
權利要求
1 具有如下所示的化學式的扥里的原花色素化合物及其藥學可接受的鹽
2.權利要求1的組合物作為抗微生物劑的用途。
3.權利要求1的組合物作為抗氧化劑的用途。
4 權利要求1的組合物作為抗誘變劑的用途。
5.權利要求1的組合物作為胰島素致敏劑的用途。
6.權利要求1的組合物用于葡萄糖維持的用途。
7.權利要求1的組合物用于生物被膜預防的用途。
8.治療多囊卵巢綜合征的方法，其包括給藥治療有效劑量的權利要求1的化合物。
9.治療心血管疾病的方法，其包括給藥治療有效劑量的權利要求1的化合物。
10.藥物組合物，其包含與權利要求1的化合物混合的藥學可接受的載體。
11.權利要求10的組合物作為胰島素致敏劑的用途。
12.權利要求10的組合物用于葡萄糖維持的用途。
13.權利要求10的組合物作為抗微生物劑的用途。
14.飲食補充劑組合物，其包含與權利要求1的化合物混合的可食用的載體。
15.權利要求14的組合物作為抗氧化劑的用途。
16.權利要求14的組合物作為抗誘變劑的用途。
17.權利要求14的組合物用于生物被膜預防的用途。
18.從肉桂獲得權利要求1的化合物的方法，所述方法包括處理肉桂樹皮以獲得包含含有權利要求1的化合物的酚類的提取物，并從所述制備物中分離權利要求1的化合物。
全文摘要
本發明涉及包含具有式C60H48O24的分離的、新的四聚體A型原花色素異構體的組合物。該異構體最優選分離自肉桂(樟屬(Cinnamomum spp.))并且可作為抗炎劑、殺菌劑、抗微生物制劑用于藥物組合物中，或用作用于一般或具體用途的補充劑。
文檔編號A61K36/87GK102170893SQ200980138738
公開日2011年8月31日 申請日期2009年8月4日 優先權日2008年8月4日
發明者J·A·格林斯基, K·B·基勒戴, M·S·滕佩斯塔 申請人:酚醛塑料有限公司