專利名稱：免疫原性組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種疫苗佐劑組合物，并且涉及所述組合物在增強特異性免疫反應中 的應用，特別是但不僅限于該組合物在提高由樹突狀細胞調節的人類T細胞增殖。
背景技術：
開發具有顯著細胞反應誘導性的疫苗是一項重大的挑戰。T細胞是細胞免疫反應 的主要的效應細胞。這些細胞可識別在受病原體感染的細胞中合成的抗原，因此，成功的疫 苗接種要求在接種疫苗的個體的細胞中合成出免疫原性抗原。一個方法是使用減毒活疫 苗，然而該方法有明顯的局限性。例如，當被接種疫苗的個體受到免疫抑制時，或者當病原 體本身能夠誘導免疫抑制(例如艾滋病毒，HIV)時，都會有感染的風險。另外，一些病原體難 以或者不可能在細胞培養中生長(例如丙型肝炎病毒，HCV)。其他現有的疫苗，比如滅活的 全細胞疫苗、或者明礬輔佐的重組蛋白亞基疫苗，都明顯是較差的細胞免疫反應誘導劑。細 胞免疫反應的誘導與免疫反應中Thl偏移有關。相反，主要與抗體有關的反應被認為是Th2 偏移反應。包括明礬、油包水型佐劑和完全弗氏佐劑(complete Freund's adjuvant, CFA) 等在內的多種佐劑已經被試驗性地使用，各種佐劑具有不同的作用方式(Guy B (2007)#ai Rev Microbiol 5:505-5171 和 khijns VE (2000)0/rr Opin Immunol 12:456-463)。這 一在人用疫苗中最為常用的佐劑一明礬所放大的免疫反應趨向于相對較弱，并且是可能不 能賦予抗許多病原體的保護作用的Th2型。相反地，盡管CFA在實驗動物中會激發Thl型 免疫反應，但由于CFA會引起由過度炎癥反應導致的毒性效應，因此不適用于人類。
發明內容
因此，人們非常需要有效的疫苗佐劑配方，尤其需要一種可提高由樹突狀細胞調 節的人類T細胞增殖的配方。根據本發明的第一個方面，提供了一種免疫原性組合物，其包含可引起抗病原體 或腫瘤的免疫反應的抗原；以及選自CCR4拮抗劑的佐劑。優選免疫原性組合物是疫苗組合物。在一種實施方式中，該免疫原性組合物或疫苗組合物被用于人或動物。這樣的組 合物將有利于在人類疫苗接種和獸醫和/或實驗動物疫苗接種程序中使用。因此，根據本 發明的另一個方面，提供了一種人類免疫原性或疫苗佐劑性組合物，其包含可引起抗人類 病原體或腫瘤的免疫反應的抗原；以及選自CCR4拮抗劑的佐劑。在本發明的組合物內存在CCR4拮抗劑令人吃驚地導致增強了特異性免疫反應， 特別是受樹突狀細胞調節的人類T細胞增殖。這樣的組合物很可能會提供顯著的益處，有 利于在抗腫瘤疫苗接種中使用，比如用于基于樹突狀細胞的疫苗接種程序(例如，用于癌癥 比如黑素瘤)和傳染性疾病(例如，病毒性的、寄生蟲性的和細胞內細菌性的病原體)。因此，根據本發明的再一個方面，提供了一種免疫原性組合物、優選疫苗(佐劑)組 合物，其包含可引起抗人類病原體或腫瘤的免疫反應的抗原；以及選自CCR4拮抗劑的、受樹突狀細胞調節的人類T細胞增殖的佐劑。根據本發明的又一個方面，提供了 CCR4拮抗劑作為佐劑的用途，優選該佐劑可增 強受樹突狀細胞調節的人類T細胞增殖。CCR4 (亦稱趨化因子(C-C基元)受體4)是異鳥嘌呤核苷酸結合蛋白 (heterotrimeric guanine nucleotide-binding protein, G 蛋白)偶聯受體(GPCR)的視 紫紅質(rhodopsin)家族中的一個成員。GPCR共用一個保守結構由六個不同長度的環連 接的七個橫跨膜 α-螺旋(Baldwin JM et al. (1997)/ Mol Biol 272:144-164)。和所 有的GPCR情況一樣，CCR4的結構包含形成扁平的雙層結構的七個α-螺旋，這七個α-螺 旋被三個胞內環和胞外環連接。跨膜區域由七個含20-30個連續殘基的總體具有高疏水性 的片段構成。(0 4已知在0)4+0)25+調節性11細胞(1^688)上被表達(16116111八，et al. (2001) J Exp Med 194:847-853)。Tregs在下調性免疫反應中扮演著關鍵角色，這既有助于維持自 體耐受性，又有助于抑制對抗感染的過度反應(Miyara M, Sakaguchi S {2QQ1) Trends Mol Med 13:108-116)。CCR4是兩種趨化因子CCL17和CCL22的受體。這些趨化因子是樹突狀 細胞(DC)產生的，對于Tregs有趨向性，并且在促進DC與CCR4+ T細胞之間的接觸中很關鍵 (Iellem A, et al. (2001)，參見前述；Tang HL, Cyster JG( 1999)5bie/ ce 284:819-822 ； Katou F, et al. (2001 Μ J Pathol 158 1263-1270 ；以及Wu M, et al. (2001)/ Immunol 167:4791-4795)。已經有報告表明Tregs能夠通過抑制DC熟化和共同刺激性分子(co-stimulatory molecule)的表達以及它們由此活化T細胞的能力(Houot R，et al. (2006)/ Immunol 176:5293-5298 ；和 Bayry J, et al. (2007)/ Immunol 1784184-4193)從而抑制 DC 調 節的免疫反應(Tang Q, et al. (2006)Nat Immunol 7:83-92)。無需結合理論，能夠知道 拮抗CCR4的功能以及由此抑制在接種疫苗時Tregs與DCs的相互作用，可增強疫苗誘導的 免疫反應。本文提到的“CCR4拮抗劑”指的是一種分子，其能夠通過抑制或拮抗趨化因子與 CCR4受體之間的結合從而調節CCR4受體。在一種實施方式中，CCR4拮抗劑的分子量大于 500。在另一種實施方式中，CCR4拮抗劑具有至少2個以上(例如至少3個、4個或5個)單 環的芳香環和/或雙環的芳香環。在另一種實施方式中，至少一個單環芳香環和/或雙環芳 香環含有氮原子。含氮的單環芳香環的例子包括可被任意取代的噻唑基、吡咯啉基、噻二唑 基、三唑基、吡唑啉基和噁唑基。含氮的雙環芳香環的例子包括可被任意取代的喹唑啉基、 苯并噻唑基和喹喔啉基。在一種實施方式中，CCR4拮抗劑是化學式(A)所示的化合物或者其藥學可接受的Trrt.
權利要求
1.一種免疫原性組合物，其包含可引起抗病原體或腫瘤的免疫反應的抗原；以及選 自CCR4拮抗劑的佐劑。
2.一種用作疫苗的如權利要求1所述的組合物。
3.一種用于人類的如權利要求1或權利要求2所述的組合物，其特征在于，所述抗原可 引起抗人類病原體或腫瘤的免疫反應。
4.如前述權利要求中任何一項所述的組合物，其特征在于，所述佐劑是受樹突狀細胞 調節的人類T細胞增殖佐劑。
5.CCR4拮抗劑作為佐劑的用途。
6.如前述權利要求中任何一項所述的組合物或用途，其特征在于，所述CCR4拮抗劑是 化學式(A)所示的化合物或其藥學可接受的鹽
7.如前述權利要求中任何一項所述的組合物或用途，其特征在于，所述CCR4拮抗劑選 自化學式(I) - (XV)所示的化合物。
8.如前述權利要求中任何一項所述的組合物或用途，其特征在于，所述CCR4拮抗劑選 自化學式(III)、(V)、(VI)、(VIII)、(XI)和(XV)所示的化合物。
9.如前述權利要求中任何一項所述的組合物，其特征在于，所述可引起抗人類病原體 免疫反應的抗原源自于肝炎病毒比如乙型肝炎病毒(例如乙型肝炎病毒表面抗原或其衍生 物)、或者源自于甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和戊型肝炎病毒的抗原。
10.如權利要求1至8中任一項所述的組合物，其特征在于，所述可引起抗人類病原體 免疫反應的抗原源自于細菌性病原體比如分枝桿菌屬，包括結核分枝桿菌(例如ESAT6、抗 原85Α、抗原85Β或抗原85C)、牛分枝桿菌、麻風分枝桿菌、鳥分枝桿菌、副結核分枝桿菌、恥 垢分枝桿菌。
11.如前述權利要求中任何一項所述的組合物，其特征在于，每劑量所述組合物含有 500 pg·、更優選0. 1 - 100 ■■、最優選0. 1 - 50 pg·的抗原。
12.如前述權利要求中任何一項所述的組合物，其特征在于，所述CCR4拮抗劑在所述 組合物內是以0. 1 - 5 % (w/w)的含量存在的。
13.如權利要求12所述的組合物，其特征在于，所述CCR4拮抗劑在所述組合物內是以 0. 2 - 1 % (w/w)的含量存在的。
14.如前述權利要求中任何一項所述的組合物，其特征在于，還另外包含一種或一種以 上藥學可接受的賦形劑。
15.如權利要求14所述的組合物，其特征在于，所述藥學可接受的賦形劑包括載體、 稀釋劑、粘合劑、潤滑劑、防腐劑、穩定劑、著色劑、抗氧化劑、懸浮劑、涂層劑、增溶劑和增香 劑。
16.如前述權利要求中任何一項所述的組合物，其特征在于，還另外包含一種或一種以 上除所述CCR4拮抗劑之外的佐劑。
17.如權利要求16所述的組合物，其特征在于，所述一種或一種以上另外的佐劑選自 下組金屬鹽、水包油乳化液、Toll樣受體配體(尤其是Toll樣受體2配體、Toll樣受體3 配體、Toll樣受體4配體(比如單磷酸脂質A- —種烷基氨基葡糖苷磷酸鹽、或3脫乙酰化 單磷酸脂質A (3 D- MPL)), Toll樣受體7配體、Toll樣受體8配體和"Toll樣受體9配 體)、皂角苷(例如Qs21)、聚乙烯亞胺(PEI)或它們的組合。
18.一種用于治療用途的如前述權利要求中任何一項所述的組合物。
19.一種通過給藥如權利要求1至17中任一項所述的組合物來治療或預防人或動物個 體遭受疾病的方法。
20.如權利要求19所述的治療方法，其特征在于，所述疾病選自下組傳染性的細菌性 疾病和病毒性疾病；寄生蟲性疾病，特別是細胞內病原性疾病；增殖性疾病比如前列腺癌、 乳腺癌、結腸直腸癌、肺癌、胰腺癌、腎癌、卵巢癌或黑素瘤癌；非癌癥慢性紊亂，包括過敏 癥、哮喘及其他與高敏感性相關的紊亂。
21.如權利要求20所述的治療方法，其特征在于，所述疾病是病毒性疾病比如HIVJT 炎或流感，或者細菌性疾病比如肺結核或腦膜炎。
22.如權利要求1至17中任一項所述的組合物在藥物制造中的應用，其特征在于，所述 藥物用于治療病毒性疾病比如HIV、肝炎或流感，或者細菌性疾病比如肺結核或腦膜炎。
23.如權利要求1至17中任一項所述的組合物，其用于治療病毒性疾病比如HIV、肝炎 或流感，或者細菌性疾病比如肺結核或腦膜炎。
24.如權利要求1至17中任一項所述的藥物組合物，用于治療病毒性疾病比如HIVJf 炎或流感，或者細菌性疾病比如肺結核或腦膜炎。
25.一種在人體內誘導受樹突狀細胞調節的人類T細胞增殖的方法，其包括將如權利 要求1至17中任一項所述的組合物給藥于所述人。
26.一種用于制備如權利要求1至17中任一項所述組合物的方法，其包括將可引起 抗病原體或腫瘤的免疫反應的抗原與選自CCR4拮抗劑的佐劑相混合。
全文摘要
本發明涉及CCR4拮抗劑作為佐劑的用途，尤其是在免疫原性的組合物中，該組合物包含可引起抗病原體或腫瘤的免疫反應的抗原。
文檔編號A61K39/39GK102056623SQ200980121582
公開日2011年5月11日 申請日期2009年6月12日 優先權日2008年6月13日
發明者埃爾瑪·Z·切爾連, 大衛·F·圖赫, 杰格蒂施·貝瑞, 達倫·勞費爾, 馬修·N·戴維斯 申請人:Isis創新有限公司