炎癥的治療方法

專利名稱：炎癥的治療方法
炎癥的治療方法交叉參考本申請案主張2008年3月20日申請的美國臨時申請案第61/038，381號；2008年 3月25日申請的美國臨時申請案第61/039，371號；2008年4月17日申請的美國臨時申請 案第61/045，807號；和2008年12月9日申請的美國臨時申請案第61/121，095號的權益， 所述申請案都以全文引用的方式并入本文中。
背景技術：
某些發炎性病狀部分以淋巴細胞遷移到受影響組織中為特征。淋巴細胞的遷移會 誘發組織損傷，并使發炎性病狀惡化。許多白細胞會跟隨MIF梯度到達受影響組織。一般 說來，MIF與白細胞上的CXCR2和CXCR4受體相互作用，由此觸發并維持白細胞遷移。

發明內容
在某些實施例中，本文公開一種利用治療有效量的活性劑治療有需要的個體的 MIF介導的病癥的方法，所述活性劑可抑制(i)MIF與CXCR2和/或CXCR4的結合；(ii)MIF 對CXCR2和/或CXCR4的活化；(iii)MIF形成同源多聚體的能力；(iv)MIF與CD74的結合； 或其組合。在一些實施例中，所述活性劑特異性結合于MIF中假ELR基元的全部或一部分， 或與MIF的假ELR基元競爭。在一些實施例中，所述活性劑特異性結合于MIF中N環基元 的全部或一部分，或與MIF的N環基元競爭。在一些實施例中，所述活性劑特異性結合于 MIF中假ELR基元和N環基元的全部或一部分。在一些實施例中，所述活性劑選自CXCR2拮 抗劑、CXCR4拮抗劑、MIF拮抗劑或其組合。在一些實施例中，所述活性劑選自CXCL8(3-74) K11R/G31P ；Sch527123 ；N-(3-(氨磺酰基)-4-氯-2-羥苯基)-N ‘ -(2，3-二氯苯基) 脲；IL-8(l-72) ； (R) IL-8 ； (R) IL—8，NMeLeu ； (AAR) IL-8 ；GRO α (1-73) ； (R) GRO α ； (ELR) PF4 ； (R)PF4 ；SB-265610 ；安瘤克(Antileukinate) ；SB-517785-M ；SB 265610 ；SB225002 ； SB455821 ；DF2162 ；熱帕瑞欣(Reparixin) ；ALX40-4C ；AMD-070 ；AMD3100 ；AMD3465 ； KRH-1636 ；KRH-2731 ；KRH-3955 ；KRH-3140 ；Τ134 ；Τ22 ；Τ140 ；TC14012 ；ΤΝ14003 ；RCP168 ； P0L3026 ；CTCE-0214 ；C0R100140 ；或其組合。在一些實施例中，活性劑是特異性結合于MIF 中假ELR基元的全部或一部分的肽；特異性結合于MIF中N環基元的全部或一部分的肽；特 異性結合于假ELR基元和N環基元的全部或一部分的肽；抑制MIF與CXCR2結合的肽；抑制 MIF與CXCR4結合的肽；抑制MIF與JAB-I結合的肽；抑制MIF與⑶74結合的肽；特異性結 合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少一 者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及 MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域的肽；特異性結合于以下肽序列的 全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特 征/結構域；模擬以下肽序列DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或MIF三聚體中至少一 者的相應特征/結構域的肽；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少一者的 相應特征/結構域；模擬以下肽序列PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少一者的相應特征/結構域的肽；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的 肽FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；模擬 以下肽序列FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構 域的肽；或其組合。在一些實施例中，在投予本文公開的活性劑后，巨噬細胞成為泡沫細胞 的轉化受到抑制。在一些實施例中，在投予本文公開的活性劑后，心肌細胞的凋亡受到抑 制。在一些實施例中，在投予本文公開的活性劑后，浸潤巨噬細胞的凋亡受到抑制。在一些 實施例中，在投予本文公開的活性劑后，腹部主動脈瘤的形成受到抑制。在一些實施例中， 在投予本文公開的活性劑后，腹部主動脈瘤的直徑減小。在一些實施例中，在投予本文公 開的活性劑后，動脈瘤中的結構蛋白得以再生。在一些實施例中，所述方法進一步包含共投 予第二活性劑。在一些實施例中，所述方法進一步包含共投予煙酸、貝特(fibrate)、他汀 (statin) ,Apo-Al 模擬肽(例如 DF-4，諾華公司(Novartis))、apoA_I 轉錄上調劑(apoA-I transcriptional up-regulator)、ACAT 抑制劑、CETP 調節劑、糖蛋白(GP) Ilb/IIIa 受體拮 抗劑、P2Y12受體拮抗劑、Lp-PLA2抑制劑、抗TNF劑、IL-I受體拮抗劑、IL-2受體拮抗劑、 細胞毒性劑、免疫調節劑、抗生素、T細胞共刺激阻斷劑、改良病癥的抗風濕劑(disorder-m odifyinganti-rheumatic agent)、B細胞消耗劑(B cell depleting agent)、免疫抑制劑、 抗淋巴細胞抗體、烷化劑、抗代謝物、植物堿、類萜、拓撲異構酶抑制劑、抗腫瘤抗生素、單克 隆抗體、激素療法或其組合。在一些實施例中，MIF介導的病癥是動脈粥樣硬化；腹部主動脈瘤；急性播散性腦 脊髓炎；煙霧病(Moyamoya disease)；高安氏病(Takayasu disease)；急性冠狀動脈綜合 癥；心臟同種異體移植物血管病變；肺炎；急性呼吸窘迫綜合癥；肺纖維化；急性播散性腦 脊髓炎；愛迪森氏病(Addison' s disease)；強直性脊柱炎；抗磷脂抗體綜合癥；自體免疫 性溶血性貧血；自體免疫性肝炎；自體免疫性內耳病；大皰性類天皰瘡；查格斯病(Chagas disease)；慢性阻塞性肺病；腹腔疾病；皮肌炎；1型糖尿病；2型糖尿病；子宮內膜異位癥； 古巴士德氏綜合癥(Goodpasture‘ s syndrome)；格雷夫斯氏病(Graves' disease)；格 林一巴禾U綜合癥(Gui 1 Iain-Barresyndrome)；橋本氏病(Hashimoto ‘ s disease)；特發 性血小板減少性紫癜；間質性膀胱炎；全身性紅斑狼瘡(SLE)；代謝綜合癥；多發性硬化 癥；重癥肌無力；心肌炎；發作性睡病；肥胖癥；尋常性天皰瘡；惡性貧血；多發性肌炎；原 發性膽汁性肝硬化；類風濕性關節炎；精神分裂癥；硬皮病；修格連氏綜合癥(Sjogren' s syndrome)；血管炎；白癜風；韋格納肉芽腫(Wegener' s granulomatosis)；過敏性鼻 炎；前列腺癌；非小細胞肺癌；卵巢癌；乳癌；黑色素瘤；胃癌；結腸直腸癌；腦癌；轉移性骨 病；胰腺癌；淋巴瘤；鼻息肉；胃腸癌；潰瘍性結腸炎；克隆恩氏病(Crohn' sdisorder)； 膠原性結腸炎；淋巴細胞性結腸炎；缺血性結腸炎；改道性結腸炎；貝塞特氏綜合癥 (Behcet' s syndrome)；感染性結腸炎；未定型結腸炎；發炎性肝病；內毒素休克；膿毒癥 休克；類風濕性脊柱炎；強直性脊柱炎；痛風性關節炎；類風濕性多肌痛；阿爾茨海默氏癥 (Alzheimer' s disorder)；帕金森氏癥(Parkinson' s disorder)；癲癇；艾滋病癡呆；哮 喘；成人呼吸窘迫綜合癥；支氣管炎；囊性纖維化；急性白細胞介導性肺損傷；遠端直腸炎；韋格納肉芽腫；纖維肌痛；支氣管炎；囊性纖維化；葡萄膜炎；結膜炎；牛皮癬；濕疹；皮膚 炎；平滑肌增殖病癥；腦膜炎；帶狀皰疹；腦炎；腎炎；結核病；視網膜炎；異位性皮炎；胰腺 炎；齒齦炎；凝固性壞死；液化性壞死；纖維蛋白樣壞死；血管內膜增生；心肌梗塞沖風； 器官移植排斥；或其組合。在某些實施例中，本文公開一種用于治療有需要的個體的MIF介導的病癥的醫藥 組合物，其至少包含一種活性劑，所述活性劑可抑制(i)MIF與CXCR2和CXCR4的結合；和/ 或(ii)MIF對CXCR2和CXCR4的活化；(iii)MIF形成同源多聚體的能力；或其組合。在一些 實施例中，所述活性劑特異性結合于MIF中假ELR基元的全部或一部分。在一些實施例中， 所述活性劑特異性結合于MIF中N環基元的全部或一部分。在一些實施例中，所述活性劑特 異性結合于MIF中假ELR基元和N環基元的全部或一部分。在一些實施例中，所述活性劑 選自CXCR2拮抗劑、CXCR4拮抗劑、MIF拮抗劑或其組合。在一些實施例中，所述活性劑選自 CXCL8(3-74)K11R/G31P ；Sch527123 ；N-(3-(氨磺酰基)-4-氯-2-羥苯基)-N' ，3- 二 氯苯基)脲；IL-8(l-72) ； (R)IL-8 ;(R)IL-8，匪 eLeu ;(AAR)IL-8 ;GR0a (1-73) ； (R) GRO α ； (ELR)PF4 ； (R)PF4 ；SB-265610 ；安瘤克；SB-517785-M ；SB 265610 ； SB225002 ；SB455821 ； DF2162 ；熱帕瑞欣；ALX40-4C ；AMD-070 ；AMD3100 ；AMD3465 ；KRH-1636 ；KRH-2731 ； KRH-3955 ；KRH-3140 ；T134 ；T22 ；T140 ；TC14012 ；TN14003 ；RCP168 ；P0L3026 ；CTCE-0214 ； C0R100140 ；或其組合。在一些實施例中，活性劑是特異性結合于MIF中假ELR基元的全部 或一部分的肽；特異性結合于MIF中N環基元的全部或一部分的肽；特異性結合于假ELR基 元和N環基元的全部或一部分的肽；抑制MIF與CXCR2結合的肽；抑制MIF與CXCR4結合的 肽；抑制MIF與JAB-I結合的肽；抑制MIF與CD74結合的肽；特異性結合于以下肽序列的 全部或一部分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少一 者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及 MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域的肽；特異性結合于以下肽序列的 全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特 征/結構域；模擬以下肽序列DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或MIF三聚體中至少一 者的相應特征/結構域的肽；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASVPDGFLS ELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少一者的 相應特征/結構域；模擬以下肽序列PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少一者的相應特征/結構域的肽；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的 肽FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；模擬 以下肽序列的肽FGGSSEPCALCSLHSI ；或其組合。在一些實施例中，所述組合物進一步包含 第二活性劑。在一些實施例中，所述組合物進一步包含煙酸、貝特、他汀、Apo-Al模擬肽(例 如DF-4，諾華公司)、apoA-I轉錄上調劑、ACAT抑制劑、CETP調節劑、糖蛋白(GP)nb/IIIa 受體拮抗劑、P2Y12受體拮抗劑、Lp-PLA2抑制劑、抗TNF劑、IL-I受體拮抗劑、IL-2受體 拮抗劑、細胞毒性劑、免疫調節劑、抗生素、T細胞共刺激阻斷劑、改良病癥的抗風濕劑、B細 胞消耗劑、免疫抑制劑、抗淋巴細胞抗體、烷化劑、抗代謝物、植物堿、類萜、拓撲異構酶抑制 劑、抗腫瘤抗生素、單克隆抗體、激素療法或其組合。


本發明的新穎特征將在隨附權利要求書中予以具體陳述。參照以下陳述利用本發 明原理的說明性實施例的詳細描述和其隨附圖式，將會對本發明的特征和優點獲得更好的 理解，在圖式中圖1說明MIF觸發的單核細胞阻滯是由CXCR2/CXCR4和⑶74介導的。如所示，在 存在或不存在MIF (以及抗MIF抗體、抗CXCLl和CXCL8抗體或同型對照)、CXCL8、CXCLlO或 CXCL12的情況下，預培育人類主動脈內皮細胞(Human aortic endothelialcell, HAoEC)、 穩定表達ICAM-I的CHO細胞(CH0/ICAM-1)和小鼠微血管內皮細胞(mouse microvascular endothelial cell, SVEC)2 小時。如所示，用抗 CXCRU CXCR2、β 2、CXCR4、CD74 的抗體或 同型對照預處理單核細胞30分鐘，或用百日咳毒素(pertussistoximPTX)預處理2小時。 (a)用原代人類單核細胞灌注HAoEC ;(b)使用抗MIF抗體進行的免疫熒光檢測顯示，預處 理2小時后，MIF (綠色)呈遞于HAoEC和CH0/ICAM-1細胞的表面，但預處理30分鐘后沒有 (圖中未示)；相比之下，在緩沖液處理的細胞中沒有MIF(對照)。比例條，ΙΟΟμπι。(c、d) 用MonoMac6細胞灌注CHO/1 CAM-1細胞；(e)用T細胞灌注HAoEC。(f、g)用Jurkat T細 胞(f)和用JurkatCXCR2轉染子或載體對照(g)灌注CH0/ICAM-1細胞。在c、d、f和g中， 減去結合于經載體轉染的CHO細胞的背景值。(h)在CXCR4拮抗劑AMD3465存在下，用穩定 表達CXCR1、CXCR2或CXCR3的Li. 2轉染子和用僅表達內源CXCR4的對照灌注小鼠SVEC。 細胞阻滯是以每平方毫米的細胞數或對照細胞粘附的百分比定量。a和c-g中的數據表示 3到8個獨立實驗的平均值士標準差；h中的數據是由四個實驗中的一個代表性實驗得到 的結果。圖2說明MIF觸發的單核細胞趨化性是由CXCR2/CXCR4和⑶74介導的。使原代人 類單核細胞(a-e)、CD3+T細胞(f)和嗜中性粒細胞(g、h)分別在存在或不存在MIF的情況 下進行反式遷移分析(transmigration analysis)。CCL2 (a)、C)(CL8 (a、g、h) ^P CXCL 12(f) 用作陽性對照，或用于測試由MIF (或CXCL8，h)引起的脫敏。MIF、CCL2和CXCL8對單核細 胞(a)或MIF對嗜中性粒細胞(g)的趨化作用遵循鐘形劑量-反應曲線。利用針對MIF的 活性劑、煮沸(b)或利用指定濃度的MIF(頂腔室中，c)可消除由MIF觸發的單核細胞趨化 性。(d)如通過用百日咳毒素組分A和B (PTXA+B)、單獨PTX組分B或者用LW94002處理 所證實，由MIF觸發的單核細胞趨化性是由Gd 乂磷酸肌醇-3-激酶信號傳導介導的。(e) 利用抗⑶74或抗CXCR1/CXCR2的抗體，可阻斷MIF介導的單核細胞趨化性。(f)利用抗MIF 和抗CXCR4的抗體，可阻斷由MIF誘導的T細胞趨化性。(g)嗜中性粒細胞趨化性是由MIF 誘導的。(h)MIF誘導的嗜中性粒細胞趨化性與CXCL8誘導的嗜中性粒細胞趨化性的比較、 抗CXCR2或抗CXCRl抗體的作用，以及MIF引起的CXCL8脫敏。a和f_h中的數據表示為趨 化性指數；c中的數據表示為對照組的百分比；而b、d和e中的數據表示為輸入的百分比。 數據都表示4到10個獨立實驗的平均值士標準差，但圖a、c和g ；b中煮沸的MIF ；以及b 和e中的單獨活性劑對照組除外，這些圖中數據為2個獨立實驗的平均值。圖3說明MIF觸發快速整合素(integrin)活化和鈣信號傳導。(a)用MIF或 TNF- α刺激人類主動脈內皮細胞2小時。利用實時PCR分析CXCLl和CXCL8mRNA，并相對 于對照組進行正規化。借助于ELISA評估來源于上清液的CXCL8 (n = 3個獨立實驗，一式兩份執行)。(b)用MIF或CXCL8直接刺激MonoMac6細胞1分鐘，并于CH0-ICAM-1細胞上 灌注5分鐘(8個獨立實驗的平均值士標準差)。(c)用MIF刺激MonoMace細胞指定時 間。利用FACSAria監測LFA-I的活化(用327C抗體檢測)，并表示為平均熒光強度(mean fluorescence intensity, MFI)的增加。(d)與c中相同，但針對原代單核細胞；數據是相 對于利用Mg2+/EGTA得到的最大活化表示。(e)用抗α 4整合素、⑶74或CXCR2的抗體預處 理M0n0MaC6細胞，用MIF刺激1分鐘，在VCAM-1. Fc上灌注5分鐘。細胞粘附表示為對照組 的百分比。c-e中的阻滯數據表示5個獨立實驗的平均值士標準差。(f)用MIF、CXCL8或 CXCL7刺激經Fluo-4 AM標記的嗜中性粒細胞發生鈣瞬變。利用FACSAria紀錄由鈣引起的 MFI，持續0-240秒。對于脫敏，在刺激之前120秒添加刺激物。所示跡線表示4個獨立實 驗。(g)Ll. 2-CXCR2轉染子中由指定濃度的CXCL8、CXCL7或MIF觸發的鈣內流的劑量-反 應曲線。數據表示為基線與峰值MFI (4-8個獨立實驗的平均值士標準差)之間的差異。圖4說明MIF與CXCR2/CXCR4的相互作用以及CXCR2/⑶74復合物的形成。使 HEK293-CXCR2轉染子(a)或帶有CXCR4的Jurkat T細胞(c)分別經歷受體結合分析，分 析MIF或冷同源配體對[I125]CXCL8(a)或[I125] CXCL12 (c)的競爭(平均值士標準差，η = 6-10)。(b)如所示，HEK293-C)(CR2 或7-CXCR2 轉染子中 MIF 和 CXCL8 誘導的 C)(CR2 內化(插圖顯示代表性柱形圖)；通過FACS分析表面CXCR2的表達來評估(緩沖劑(濃)百 分比，平均值士標準差，η = 5)。(d)與b中相同，JurkatT細胞中由MIF和CXCL12誘導的 CXCR4內化(平均值士標準差，η = 4-6)。(e)利用FACS分析熒光素-MIF與HEK293-CXCR2 轉染子或載體對照的結合。插圖顯示HEK293-CXCR2轉染子中與載體對照中生物素-MIF與 CXCR2的結合的比較，所述結合是利用蛋白免疫印跡法(western blot)，使用抗CXCR2抗體 在抗生蛋白鏈菌素(str印tavidin，SAv)離析后進行評估的。(f)針對CXCR2、CD74和核 (赫希斯特公司(Hoechst))進行染色的7-CXCR2轉染子中CXCR2與⑶74 (橙色-黃 色重疊)的共定位，其是利用熒光顯微鏡(上圖)或激光共聚焦掃描顯微鏡(下圖)進行 分析的。比例條，10 μ m。(g)在表達經His標記的CD74的HEK293-CXCR2轉染子的CHAPSO 提取物中CXCR2/CD74復合物的免疫共沉淀。相繼進行抗His免疫沉淀(IP)和抗CXCR2或 抗His-⑶74蛋白免疫印跡(WB ；上圖)，或相繼進行抗CXCR2免疫沉淀和抗His-⑶74或抗 CXCR2蛋白免疫印跡(下圖)。對照組不會發生免疫沉淀的溶解產物或單獨珠粒。(h)與 g中相同，但針對Li. 2-CXCR2轉染子。由Li. 2-CXCR2轉染子進行的抗CXCR2免疫沉淀之后 進行抗⑶74或抗CXCR2蛋白免疫印跡(上圖)。利用同型IgG或CXCR2陰性Li. 2細胞進 行的免疫沉淀(下圖)用作對照。數據表示3個獨立實驗(e-h)。圖5說明活體內MIF經由CXCR2誘發的致動脈粥樣硬化炎癥和微血管炎癥，以及 MIF阻斷對斑塊消退的影響。(a)在喂食飼料30周的Mifv+Ldlr〃和MifyLdlrv小鼠(n = 4)中測定活體內單核細胞的內腔粘附以及原生主動脈根中損傷巨噬細胞的含量。顯示代表 性影像。箭頭指示粘附于內腔表面的單核細胞。比例條，ΙΟΟμπι。(b、c)活體內暴露于MIF 誘導的CXCR2依賴性白細胞募集。陰囊內注射MIF后，利用活體顯微鏡觀察提睪肌微血管。 如與IgG對照組(n = 4)相比較，用阻斷CXCR2的抗體預處理可消除粘附和遷移。(d)在 用野生型而非IlSrb"骨髓重建的野生型小鼠(η = ； )中，腹膜內注射MIF或媒劑引起嗜中 性粒細胞募集。(e-h)阻斷MIF而非CXCLl或CXCL12，使動脈粥樣硬化晚期斑塊消退和穩 定。Apoe"小鼠接收高脂肪飲食12周，并隨后用抗MIF、CXCLl或CXCL12的抗體或者媒劑(對照組)再處理4周(n = 6到10只小鼠)。使用油紅O(Oil-Red-O)對主動脈根中的斑 塊染色。代表性影像顯示于e中(比例條，500 μ m)。F中的數據表示基線(12周)以及16 周后的斑塊面積。M0MA-2+巨噬細胞的相對含量顯示于g中，而每一切片中⑶3+T細胞的數 量顯示于h中。數據表示平均值士標準差。圖6說明在動脈粥樣化形成的情況下MIF的細胞機制。利用各種促動脈粥樣硬化 刺激物，例如氧化型LDL(oxLDL)或血管緊張素II (angiotensin II，ATII)，來誘導血管壁 細胞和內膜巨噬細胞中的MIF表達。隨后，MIF上調內皮細胞粘附分子(例如血管[VCAM-1] 和細胞內[ICAM-1]粘附分子)和趨化因子(例如CCL2)，并通過結合其七螺旋(趨化因子) 受體CXCR2和CXCR4并經由這些受體傳導信號，觸發各別整合素受體(例如LFA-I和VLA-4) 的直接活化。此舉要求單核細胞(單核細胞和T細胞)的募集和巨噬細胞轉化成為泡沫細 胞，由此抑制了 SMC的凋亡，并調控(例如減弱)SMC的遷移或增殖。通過誘導MMP和組織 蛋白酶，MIF促進彈性蛋白和膠原蛋白降解，最終導致發展成不穩定斑塊。ROS表示活性氧 物質(reactive oxygen species) ；PDGF-BB表示血小板源性生長因子BB。圖7說明經由功能性MIF受體復合物進行的信號傳導。糖皮質激素通過調控細胞 因子的產生覆蓋其功能來誘導MIF，并且在其內吞后，可與細胞內蛋白質(即JAB-1)相互 作用，由此下調MAPK信號，并調節細胞氧化還原內平衡。在一些實施例中，細胞外MIF結合 于細胞表面蛋白CD74(恒定鏈Ii)。CD74缺乏信號轉導細胞內結構域，但與蛋白聚糖CD44 相互作用，并經由CD44介導信號傳導，以誘導Src家族RTK和MAPK/細胞外信號調控激酶 (extracellular signal-regulated kinase, ERK)的活化、活化 PI3K/Akt 路徑或啟始 p53 依賴性細胞凋亡抑制。MIF也僅結合G蛋白偶聯趨化因子受體(CXCR2和CXCR4)，并經由所 述細胞因子受體進行信號傳導。CXCR2與CD74形成復合物，可啟動附屬結合(accessory binding)，從而促進GPCR的活化以及類GPCR-RTK信號傳導復合物的形成，由此觸發鈣內流 以及整合素的迅速活化。圖8說明MIF對于心肌病理學的影響。在缺血再灌注的情況下，膿毒病中的 缺氧、活性氧物質(R0Q和內毒素(例如脂多糖[LPS])誘導心肌細胞經由蛋白激酶 C(proteinkinase C, PKC)依賴性機制分泌出MIF，并引起細胞外信號調控激酶(ERK)活化， 這將引起心肌細胞凋亡。在一些實施例中，用存活心肌細胞或用于治療性注射的內皮祖細 胞(例如eEPC)表達的MIF經由其受體CXCR2和CXCR4促進血管生成，此過程需要MAPK和 PI3K的活化。圖9說明干擾CXCR4但不同時干擾CXCR2將使動脈粥樣硬化惡化。經由微型滲透 泵，用媒劑(對照組)或AMD3465處理接收高脂肪飲食的Apoe-/-小鼠12周(n =每組6 只)。用油紅0染色，隨后定量主動脈根(圖14a)和胸腹主動脈(圖14b)中的動脈粥樣硬 化斑塊。在指定時間點，利用流式細胞分析或標準細胞測量術測定末梢血液中嗜中性粒細 胞的相對數量(圖14C)。圖10說明MIF三聚體的晶體結構。假ELR結構域在所述三聚體中形成一個環，而 N環結構域從所述假ELR環向外延伸。圖11說明MIF的核苷酸序列，其中注解顯示對應于N環結構域和假ELR結構域的 序列。
具體實施例方式在某些實施例中，本文公開抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導的方法。 在一些實施例中，通過用活性劑占據CXCR2和CXCR4的MIF結合結構域，來抑制MIF經由 CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，通過占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF 上的結構域，來抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，通過用活 性劑占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF上的結構域，并由此破壞CXCR2和/或CXCR4與MIF 的結合，來抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，通過用活性劑 占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF上的結構域，并由此破壞MIF的三聚化，來抑制MIF經由 CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。盡管有許多方法能抑制MIF的相互作用或下調MIF的表達，但所屬領域中還未認 識到，對于白細胞相互作用，MIF中的某些部分比其它部分更重要。本文所解決的一個問題 是，鑒別和產生結合MIF中對于白細胞趨化性重要的選擇性部分的肽和小分子。此外，有許多肽和小分可抑制或下調CXCR2和CXCR4與其配體的相互作用。然而， 這些受體也涉及與其它配體(例如IL-8/CXCL8、GR0i3 /CXCL2和/或基質細胞源性因子 la (Stromal Cell-Derived Factor-la，SDF-la)/CXCL12)的相互作用。如果抑制后面所述 的這些相互作用，通常就會產生有害副作用。本文解決了所屬領域中沒能設計出選擇性抑 制CXCR2和CXCR4與MIF的相互作用的肽和小分子的問題。某些定義術語“個體”、“受檢者”或“患者，，可互換使用。本文使用的這些術語是指任何哺 乳動物(即，分類學分類動物界脊索動物門脊椎動物亞門哺乳綱內的任何目、科和屬 的物種)。在一些實施例中，哺乳動物是人類。在一些實施例中，哺乳動物是非人類。在一 些實施例中，哺乳動物是以下分類學目的成員靈長目(例如狐猴、懶猴(Iorid)、嬰猴、眼 鏡猴、猴子、猿和人類)；嚙齒目(例如小鼠、大鼠、松鼠、花鼠和地鼠)；復齒目(例如野兔、 家兔和鼠兔)；猬形目(例如猬和毛猬)；駒形目(例如駒鼠、鼴鼠和溝齒鼠)；翼手目(例 如蝙蝠)；鯨目(例如鯨、海豚和白鯨)；食肉目(例如貓、獅子和其它貓型亞目；狗、熊、鼬 屬和海豹)；奇蹄目(例如馬、斑馬、貘和犀牛)；偶蹄目(例如豬、駱駝、牛和鹿)；長鼻目 (例如象)；海牛目(例如海牛(manatee)、儒艮和海牛(sea cow))；有甲貧齒亞目(例如 犰狳)；披毛目(例如食蟻獸和樹懶)；負鼠目(例如美洲負鼠)；新袋目(例如袋鼠)；微 獸目(例如南猊(Monito del Monte))；袋鼴目(例如袋鼴)；袋鼬目(例如有袋類肉食獸 (marsupial carnivore))；袋貍目(例如袋貍和兔耳袋貍)；或雙門齒目(例如袋熊、樹袋 熊、負鼠、袋鼯、袋鼠、大袋鼠和小袋鼠)。在一些實施例中，所述動物是爬行動物(即，分類 學分類動物界；脊索動物門脊椎動物亞門爬行綱內的任何目、科和屬的物種)。在一些實 施例中，所述動物是鳥類(即動物界脊索動物門脊椎動物亞門鳥綱)。這些術語都不需 要或不局限于以護理人員(例如醫生、注冊護士、從業護士、醫師助手、男護理員或收容所 工作人員)管理(例如持久或間歇)為特征的情形。當提到結合分子(即活化劑；例如肽或肽模擬物)與蛋白質或多肽或抗原決定基 之間的相互作用時，短語“特異性結合”通常是指結合分子識別并以高親和力可檢測地特異 性結合相關目標。優選在指定條件或生理條件下，特定抗體或結合分子結合于特定多肽或 蛋白質或抗原決定基，但不以顯著或不合需要的量結合于樣品中存在的其它分子。換句話說，特定抗體或結合分子不會不合需要地與非目標抗原和/或抗原決定基交叉反應。可以 使用多種免疫分析型式來選擇與特定多肽發生免疫反應并具有所需特異性的抗體或其它 結合分子。例如，固相ELISA免疫分析、BIAcore、流式細胞術和放射免疫分析都可用于選 擇具有所需免疫反應性和特異性的單克隆抗體。有關適用于測定或評估免疫反應性和特 異性的免疫分析型式的描述，參見哈羅瓦(Harlow)，1988，抗體，實驗室手冊(ANTIBODIES， A LABORATORY MANUAL)，冷泉港出版社(Cold Spring HarborPublications)，紐約(New York)(下文中稱為“哈羅瓦”)。“選擇性結合”、“選擇性”等詞是指與一個分子相比較，活性劑優先與另一分子相 互作用。本文公開的活性劑與蛋白質之間的相互作用優選具有特異性和選擇性。應注意， 在一些實施例中，活性劑是設計成“特異性結合”和“選擇性結合”兩種不同但類似的目標， 而不結合其它不合需要的目標。術語“多肽”、“肽”和“蛋白質”在本文中可互換使用，用于指氨基酸殘基的聚合物。 所述術語適用于天然存在的氨基酸聚合物，以及一個或多個氨基酸殘基為非天然存在的氨 基酸(例如氨基酸類似物)的氨基酸聚合物。所述術語涵蓋任何長度的氨基酸鏈，包括全 長蛋白質(即抗原)，其中氨基酸殘基是通過共價肽鍵連接的。術語“抗原”是指能夠誘導抗體產生的物質。在一些實施例中，抗原是特異性結合 于抗體可變區的物質。術語“抗體”是指單克隆抗體、多克隆抗體、雙特異性抗體、多特異性抗體、移植 抗體、人類抗體、人類化抗體、合成抗體、嵌合抗體、駱駝化抗體(camelized antibody), 單鏈Fv(single-chain Fv，scFv)、單鏈抗體、Fab片段、F(ab ‘)片段、二硫鍵連接的 Fv(disulfide-linked Fv，sdFv)、胞內抗體(intrabody)和抗獨特型(anti-idiotypic，抗 Id)抗體，以及任一上述抗體的抗原結合片段。具體地說，抗體包括免疫球蛋白分子，以及免 疫球蛋白分子的免疫活性片段，即含有抗原結合位點的分子。視免疫球蛋白重鏈恒定結構 域的氨基酸序列而定，免疫球蛋白可歸為不同類別。對應于不同免疫球蛋白類別的重鏈恒 定結構域(Fe)分別稱為α、δ、ε、Y和μ。眾所周知不同類別免疫球蛋白的亞基結構和 三維構型。免疫球蛋白分子屬于任何類型(例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、類別(例 如Ig(^、IgG2, IgG3、IgG4, IgA1和IgA2)或亞類。術語“抗體”與“免疫球蛋白”在最廣泛的 意義上可互換使用。在一些實施例中，抗體是抗體與一個或多個其它蛋白質或肽共價或非 共價締合而形成的較大分子的一部分。對于抗體，術語“可變結構域”是指各特定抗體對其特定抗原的結合和特異性中所 使用的抗體的可變結構域。然而，可變性并不是均勻分布于整個抗體可變結構域。相反，其 實際上是集中于輕鏈和重鏈可變結構域中三個稱為高變區(也稱為CDR)的區段中。可變結 構域中保守性較高的部分稱為“框架區”或“FR”。未經過修飾的重鏈和輕鏈的可變結構域各 含有四個FR(FR1、FR2、FR3和FR4)，主要采用β -折疊構型，其間雜有三個⑶R，這些⑶R形 成環連接，并且在一些情況下，形成β -折疊結構的一部分。各鏈中的CDR通過FR緊接地固 持在一起，并與來自另一鏈的CDR—起幫助形成抗體的抗原結合位點(參見卡貝特(Kabat) 等人，免疫相關蛋白質的序列(Sequences ofProteins of Immunological Interest),第 5版，美國國立衛生研究院公共衛生部(PublicHealth Service, National Institutes of Health)，馬里蘭州貝塞斯達(Bethesda, Md.) (1991)，第 647-669 頁)。
術語“高變區”和“CDR”當用于本文中時，指抗體中負責抗原結合的氨基酸殘基。 ⑶R包含以互補方式結合于抗原的三個序列區的氨基酸殘基，而且這三個序列區稱為Vh 和\鏈各自的CDR1、CDR2和CDR3。根據卡貝特等人，免疫相關蛋白質的序列，第5版，美 國國立衛生研究院公共衛生部，馬里蘭州貝塞斯達(1991)，在輕鏈可變結構域中，⑶R通 常大致對應于殘基M-34 (CDRLl)、50-56(CDRL2)和89-97 (CDRL3)，而在重鏈可變結構域 中，CDR 通常大致對應于殘基 31-35 (CDRHl)、50-65(CDRH2)和 95-102 (CDRH3)。應了解， 不同抗體的CDR可含有插入序列，因此，氨基酸編號可能不同。卡貝特編號系統(Kabat numbering system)所用的編號方案利用附接于特定殘基的字母(例如輕鏈中⑶RLl的 27A、27B、27C、27D、27E和27F)來反映不同抗體之間任何插入序列的編號，由此說明所述插 入序列。或者，根據查希亞(Chothia)和勒斯克(Lesk)，分子生物學雜志(J. Mol. Biol.), 196 :901-917(1987),在輕鏈可變結構域中，CDR通常大致對應于殘基^_32(CDRL1)、 50-52 (⑶RL2)和91-96 (⑶RL3)，而在重鏈可變結構域中，⑶R通常大致對應于殘基 26-32 (CDRHl)、53-55(CDRH2)和 96-101(CDRH3)。抗體的恒定結構域(Fe)不直接涉及抗體與抗原的結合，而是展現各種效應功能， 例如抗體通過與例如Fc受體(FcR)相互作用來參與抗體依賴性細胞毒性。在將抗體投予 患者后，Fc結構域還可以增加循環中抗體的生物利用率。本文使用的術語“親和力(affinity)，，是指兩種試劑可逆結合的平衡常數，并 且以Kd表示。結合蛋白對配體的親和力，例如抗體對抗原決定基的親和力，可例如為約 IOOnM (納摩爾濃度)到約0. InM、約IOOnM到約IpM (皮摩爾濃度)，或約IOOnM到約IfM (飛 摩爾濃度(femtomolar))。本文使用的術語“親合力(avidity) ”是指稀釋后兩種或兩種以 上試劑的復合物的耐解離能力。術語“肽體(ρ印tibody) ”是指包含肽與抗體或者一個或多個抗體結構域(例如抗 體的Fc結構域)直接或間接融合的分子，其中所述肽部分特異性結合于所需目標。肽可與 Fc區融合，或可插入Fc環(一種經過修飾的Fc分子)中。術語“肽體”不包括Fc融合蛋 白(例如，全長蛋白質與Fc結構域融合)。術語“經分離的”和“經純化的”是指物質是在天然環境中實質上或基本上移出或 濃縮得到的。例如，經分離核酸是與樣品中至少一些通常側接于其的核酸或者其它核酸或 組分(蛋白質、脂質等)分離者。在另一實例中，如果多肽是在其天然環境中實質上移出或 濃縮得到的，那么多肽經過純化。純化和分離核酸和蛋白質的方法是已證明的方法。“實質 上”的實施例包括至少20%、至少40%、至少50%、至少75%、至少85%、至少90%、至少 95%或至少99%。本文使用的術語“治療”和其它語法等效形式包括緩解、抑制或減輕癥狀；減輕或 抑制疾病或病狀的嚴重程度；降低疾病或病狀的發生率；預防性治療疾病或病狀；減少或 抑制疾病或病狀的復發；預防、延緩疾病或病狀發作；延緩疾病或病狀的復發；緩和或改善 疾病或病狀癥狀；改善癥狀的潛在代謝成因；抑制疾病或病狀，例如停滯疾病或病狀的發 展、減輕疾病或病狀、使疾病或病狀消退、減輕由疾病或病狀引起的病狀，或停止疾病或病 狀的癥狀。所述術語還包括獲得治療益處。治療益處是指所治療的潛在病癥的根除或改善， 和/或由潛在病癥引起的一種或多種生理學癥狀的根除或改善，由此觀察到個體情況的改 良。
本文使用的術語“預防”和其它語法等效形式包括預防其它癥狀，預防癥狀的潛在 代謝成因，抑制疾病或病狀，例如停滯疾病或病狀的發展，并且打算包括防治。所述術語還 包括獲得防治益處。對于防治益處，任選將組合物投予有發展特定疾病的風險的個體、報導 有一種疾病的一種或多種生理學癥狀的個體或有疾病復發風險的個體。本文使用的術語“有效量”或“治療有效量”是指所投予的至少一種藥劑足以達成 預定結果的量，例如在某種程度上減輕所治療的疾病或病狀的一種或多種癥狀，在某些情 況下，所述結果是減輕和/或緩解疾病的病征、癥狀或成因，或者生物系統的任何其它所需 的變化。在特定情況下，所述結果是減少至少一種異常增殖細胞(例如癌癥干細胞)的生 長、殺死所述細胞或誘使所述細胞凋亡。在某些情況下，適于治療應用的“有效量”是在臨 床上明顯減輕疾病所需的包含本文所述藥劑的組合物的量。可使用例如劑量遞增研究等任 何適合的技術測定適宜任何個別情況的“有效”量。本文使用的術語“投予”、“投藥”等是指使藥劑或組合物能夠遞送到所需生物作用 位點而使用的方法。這些方法包括(但不限于)口服途徑、十二指腸內途徑、非經腸注射 (包括靜脈內、皮下、腹膜內、肌肉內、血管內或輸注)、局部和直腸投藥。任選用于投予本文 所述藥劑和方法的技術包括例如古德曼(Goodman)和奇爾曼(Gilman)，治療學的藥理基礎 (The Pharmacological Basis of Therapeutics)，現行版；貝力口蒙(Pergamon)；禾口雷明登 氏制藥科學(Remington' s, Pharmaceutical Sciences)(現行版)，默克出版公司(Mack Publishing Co.)，賓夕法尼亞州伊斯頓(Easton，Pa)中所論述的技術。在某些實施例中， 本文所述的藥劑和組合物是經口投予的。本文使用的術語“醫藥學上可接受的”是指物質不會消除本文所述藥劑的生物活 性或特性，而且相對無毒(即，所述物質的毒性明顯不能超過所述物質的益處)。在一些情 況下，將醫藥學上可接受的物質投予個體，不會引起顯著不合需要的生物作用，或不會以有 害方式與含有所述物質的組合物的任何組分顯著相互作用。巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物抑制(部分或完全)MIF的活性。 在某些情況下，MIF是促炎性細胞因子。在某些情況下，MIF是由活化的免疫細胞(例如淋巴 細胞(T細胞))回應于感染、炎癥或組織損傷所分泌。在某些情況下，MIF是在下丘腦-垂 體-腎上腺軸受到刺激后由垂體腺前葉所分泌。在某些情況下，MIF與胰島素一起由胰腺β 細胞分泌，并充當自分泌因子刺激胰島素的釋放。在某些情況下，MIF是受體CXCR2、CXCR4 和CD74的配體。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物抑制(部分或完全)CXCR2、 CXCR4和/或CD74的活性。在某些情況下，MIF誘導鄰近白細胞(例如淋巴細胞、粒細胞、單核細胞/巨噬細 胞以及ΤΗ-17細胞)沿MIF梯度的趨化性。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合 物阻止沿MIF梯度的趨化性，或降低沿MIF梯度的趨化性。在某些情況下，MIF誘導白細胞 (例如淋巴細胞、粒細胞、單核細胞/巨噬細胞以及ΤΗ-17細胞)向感染、炎癥或組織損傷 部位的趨化性。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物阻止或降低白細胞向感染、 炎癥或組織損傷部位的趨化性。在某些情況下，白細胞(例如淋巴細胞、粒細胞、單核細胞 /巨噬細胞以及ΤΗ-17細胞)沿MIF梯度的趨化性將在感染、炎癥或組織損傷部位引起炎 癥。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可治療感染、炎癥或組織損傷部位的炎癥。在某些情況下，單核細胞沿RANTES梯度的趨化性將在損傷或炎癥部位引起單核細胞阻 滯(即，單核細胞沉積于上皮上)。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物阻止或 減少損傷或炎癥部位處的單核細胞阻滯。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物 可抑制治療淋巴細胞介導的病癥。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可治療 粒細胞介導的病癥。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可治療巨噬細胞介導 的病癥。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可治療Th-17介導的病癥。在一 些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可治療胰腺β細胞介導的病癥。在某些情況下，MIF可由糖皮質激素誘導，這是一種會加速與許多需要糖皮質激素 療法的疾病相關的動脈粥樣硬化的機制。因此，在一些實施例中，本文公開的組合物和方法 可抑制糖皮質激素對MIF表達的誘導。在某些情況下，人類MIF多肽是由位于22號染色體上細胞發生帶型22q 11. 23的 核苷酸序列編碼的。在某些情況下，MIF蛋白是一種12. 3kDa蛋白質。在某些情況下，MIF 蛋白是包含三個具有115個氨基酸的多肽的同源三聚體。在某些情況下，MIF蛋白包含模 擬細胞因子中所見的ELR基元的假ELR基元。在某些情況下，所述假ELR基元包含兩個不 相鄰但適當間隔開的殘基(Argl2和Asp45，參見圖11)。在一些實施例中，假ELR基元包含 氨基酸12到氨基酸45的氨基酸序列(所述編號包括第一位的甲硫氨酸殘基)。這相當于 氨基酸11到氨基酸44的假ELR基元，其中第一位的甲硫氨酸殘基未計計算在內(在所述 情況下，假ELR基元包含Arg 11和Asp44)。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合 物通過抑制假ELR基元與CXCR2和/或CXCR4的結合來治療MIF介導的病癥。在某些情況下，MIF蛋白包含10個到20個殘基的N端環基元(N環)。在某些情 況下，MIF N環介導與CXCR2和/或CXCR4受體的結合。在某些情況下，MIF的N環基元包 含MIF 的連續殘基(47-56)(即 L47 M48 A49 F50 G51 G52 S53 S54 E55 P56 ；參見圖 11)。 在某些情況下，MIF的N環基元包含氨基酸45-60。在某些情況下，MIF的N環基元包含氨 基酸44-61。在某些情況下，MIF的N環基元包含氨基酸43-62。在某些情況下，MIF的N環 基元包含氨基酸42-63。在某些情況下，MIF的N環基元包含氨基酸41-64。在某些情況下， MIF的N環基元包含氨基酸40-65。在某些情況下，MIF的N環基元包含氨基酸46-59。在 某些情況下，MIF的N環基元包含氨基酸47-59。在某些情況下，MIF的N環基元包含氨基 酸48-59。在某些情況下，MIF的N環基元包含氨基酸50-59。在某些情況下，MIF的N環基 元包含氨基酸47-58。在某些情況下，MIF的N環基元包含氨基酸47-57。在某些情況下， MIF的N環基元包含氨基酸47-56。在某些情況下，MIF的N環基元包含氨基酸48-58。在 一些實施例中，N環基元包含氨基酸48-57。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合 物通過抑制N環基元與CXCR2和/或CXCR4的結合來治療MIF介導的病癥。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物通過抑制(1) N環基元與CXCR2和 /或CXCR4的結合；和/或(2)假ELR基元與CXCR2和/或CXCR4的結合，來治療MIF介導 的病癥。在某些情況下，⑶74活化G蛋白偶聯受體(GPCR)、活化CXCR2，和/或與這些分子 締合，以形成信號傳導復合物。因此，在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物通過 用⑶74抑制GPCR或CXCR2的活化，來治療MIF介導的病癥。在某些情況下，MIF是在動脈損傷后由內皮細胞、SMC、單核細胞和/或巨噬細胞表達的。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可抑制內皮細胞、SMC、單核細胞 和/或巨噬細胞在動脈損傷后表達MIF。在某些情況下，MIF是在暴露于氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)、⑶40配體、血管緊張素II或其組合后由內皮細胞、SMC、單核細胞、巨噬細胞表達 的。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可抑制內皮細胞、SMC、單核細胞和/或 巨噬細胞在暴露于氧化低密度脂蛋白、CD40配體、血管緊張素II或其組合后表達MIF。在某些情況下，MIF誘導內皮細胞中CCL2、TNF和/或ICAM-I的表達。在一些實施 例中，本文公開的方法和/或組合物可抑制內皮細胞中MIF誘導的CCL2、TNF和/或ICAM-I 的表達。在某些情況下，MIF誘導SMC中MMP和組織蛋白酶的表達。在一些實施例中，本文 公開的方法和/或組合物可抑制SMC中MIF誘導的MMP和組織蛋白酶的表達。在某些情況下，MIF通過CXCR2或CXCR4觸發鈣內流、誘導整合素的迅速活化、誘導 MAPK活化，并介導單核細胞和T細胞的G α i-和整合素依賴性阻滯和趨化性(圖2和3)。 因此，在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可抑制單核細胞和/或T細胞中的鈣 內流、抑制MAPK活化、抑制整合素活化、抑制單核細胞和T細胞的G α i-和整合素依賴性阻 滯，或其組合。在某些情況下，MIF誘導的單核細胞募集涉及MIF結合蛋白⑶74。在某些情況下， MIF結合蛋白⑶74可誘導鈣內流、有絲分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)活化或G α i依賴性 整合素活化(圖7)。在一些實施例中，本發明包含一種抑制有需要的個體體內MIF介導的 MAPK激酶活化的方法。在一些實施例中，本發明包含一種抑制有需要的個體體內MIF介導 WGai依賴性整合素活化的方法。在某些情況下，MIF經由⑶74誘導的信號傳導涉及⑶44和Src激酶。在一些實 施例中，本文公開的方法和/或組合物抑制CD74介導的Src激酶活化。在某些情況下，借助內吞作用吸收的MIF與JAB-I直接相互作用。在一些實施例 中，本文公開的方法和/或組合物抑制MIF的內吞。在某些情況下，抑制蛋白(arrestin)促進G蛋白偶聯受體募集至介導MIF內化的 披網格蛋白小泡(clathrin-coated vesicle) 0因此，在一些實施例中，本文公開的方法和 /或組合物還包含抑制蛋白拮抗劑。抑制抑制蛋白與GPCR的結合的試劑的實例包含卡維地 洛(carvedilol)、異丙去甲腎上腺素(isoprenaline)、異丙腎上腺素(isoproterenol)、福 莫特羅(formoterol)、西馬特羅(cimeterol)、克侖特羅(clenbuterol)、L_腎上腺素、脊親 和蛋白(spinophilin)和沙美特羅(salmeterol)。在某些情況下，MIF的泛素化引起(部分或完全)MIF的迅速內化和后續降解。因 此，在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物還包含抑制MIF的泛素化。抑制泛素化 的試劑的實例包括(但不限于)PYR-41和相關吡唑酮。在某些情況下，MIF使用網格蛋白介導的內吞作用進入細胞。因此，在一些實施例 中，本文公開的方法和/或組合物還包含抑制網格蛋白介導的MIF內吞。在某些情況下，MIF負面調控MAPK信號傳導，或通過經由JAB-I調控細胞氧化還 原內平衡來調節細胞功能。在某些情況下，MIF下調p53的表達。在某些情況下，MIF下調 P53的表達將引起巨噬細胞的凋亡受到抑制并延長其存活。因此，在一些實施例中，本文公 開的方法和/或組合物可抑制由MIF調節的巨噬細胞存活。
在某些情況下，MIF在易損斑塊中誘導MMP-I和MMP_9。在某些情況下，易損斑塊 中MMP-I和MMP-9的誘導將引起(部分或完全)膠原蛋白降解、纖維帽弱化以及斑塊去穩 定。在一些實施例中，本文公開的方法和/或組合物可抑制(部分或完全)膠原蛋白降解、 纖維帽弱化和斑塊去穩定。MIF經由CXCR2和CXCR4講行的信號傳導的抑制劑在某些實施例中，本文公開抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導的方法。 在一些實施例中，通過用小分子、肽和/或肽體占據CXCR2和CXCR4的MIF結合結構域(即 GPCR拮抗劑法)，來抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，通 過占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF上的結構域(即細胞因子抑制劑法)，來抑制MIF經由 CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，通過用小分子、肽和/或肽體占據、遮蔽 或以其它方式破壞MIF上的結構域，并由此破壞CXCR2和/或CXCR4與MIF的結合，來抑制 MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，通過用小分子、肽和/或肽體 占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF上的結構域，并由此破壞MIF的三聚化，來抑制MIF經由 CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在某些情況下，占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF上的結 構域不會影響由其它激動劑/配體(例如IL-8/CXCL8、GR0^/CXCL2和/或基質細胞源性 因子 la (SDF-Ia)/CXCL12)介導的 C)(CR2 和 C)(CR4 信號傳導。破壞MIF結構域的藥劑在一些實施例中，通過占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF上的結構域(例如N環和 /或假ELR基元)，來抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，通 過用小分子、肽和/或肽體占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF上的結構域，并由此破壞CXCR2 和/或CXCR4與MIF的結合，來抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實 施例中，小分子、肽和/或肽體可抑制(i)MIF與CXCR2和CXCR4的結合，和/或(ii)MIF對 CXCR2和CXCR4的活化；或(iii) (i)與(ii)的任何組合。在某些情況下，占據、遮蔽或以其 它方式破壞MIF上的結構域不會影響由其它激動劑/配體(例如IL-8/CXCL8、GROi3 /CXCL2 和/或基質細胞源性因子la(SDF-Ia)/CXCL12)介導的CXCR2和CXCR4信號傳導。在某些情況下，N端細胞外結構域以及第一和/或第二細胞外環是配體結合于MIF 的介體。在一些實施例中，小分子、肽和/或肽體通過結合于MIF的假ELR基元，來抑制MIF 與CXCR2和/或CXCR4的結合。在一些實施例中，小分子、肽和/或肽體通過結合于MIF的 N環基元，來抑制MIF與CXCR2和/或CXCR4的結合。在一些實施例中，小分子、肽和/或肽 體調節關鍵殘基，和/或引起MIF構象的改變，此舉將阻止受體或底物相互作用。在一些實 施例中，小分子、肽和/或肽體干擾與CXCR2和/或CXCR4結合和信號傳導相關的基元。在一些實施例中，活性劑是抑制MIF與CXCR2的結合的肽；抑制MIF與CXCR4的結 合的肽；抑制MIF與JAB-I的結合的肽；抑制MIF與⑶74的結合的肽；或其組合。在一些實施例中，活性劑是特異性結合于MIF中假ELR基元的全部或一部分的肽； 特異性結合于MIF中N環基元的全部或一部分的肽；特異性結合于假ELR基元和N環基元 的全部或一部分的肽；或其組合。在一些實施例中，活性劑是特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASV PDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/ 結構域；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；特異性結合于以下肽序列的全部或一部 分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQHAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少一者的相應特征/結構域；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的肽 FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；或其組合。用于鑒別破壞MIF結構域的藥劑的分析在一些實施例中，鑒別破壞MIF結構域的肽。在一些實施例中，破壞MIF結構域的 肽不會影響在CXCR2和CXCR4處發生的與MIF無關的信號傳導事件。在一些實施例中，產生涵蓋CXCR2和CXCR4的細胞外N端結構域和/或細胞外環的 肽的文庫。在一些實施例中，所述肽的尺寸范圍為約5個氨基酸到約20個氨基酸、約7個氨 基酸到約18個氨基酸、約10個氨基酸到約15個氨基酸。在一些實施例中，使用任何合適 方法(例如HTS GPCR篩選技術)，篩選肽文庫用于抑制MIF經由CXCR2和CXCR4介導的信 號傳導。在一些實施例中，還篩選肽文庫用于抑制CXCR2和CXCR4上由11-8和/或SDF-I 介導的信號傳導。在一些實施例中，如果一種肽抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號 傳導，但允許SDF-I和IL-8經由CXCR2和CXCR4而介導的信號傳導，那么將所述肽鑒別為 破壞MIF結構域的肽。在一些實施例中，將來自CXCR2和CXCR4的細胞外N端結構域和細胞外環的肽序 列在膜上排成陣列。在一些實施例中，將來自CXCR2和CXCR4的細胞外N端結構域和細胞 外環的肽序列在膜上排成陣列，并用全長MIF探測。在一些實施例中，MIF經過標記(例如 經同位素標記、放射性標記或熒光團標記)。在一些實施例中，分析經標記MIF所特異性結 合的肽序列對CXCR2和CXCR4的MIF介導的信號傳導的抑制。在一些實施例中，使用任何 合適方法(例如GPCR篩選分析)，來篩選抑制CXCR2和CXCR4的MIF介導的信號傳導的肽 序列。在一些實施例中，使用任何上述肽或多肽(例如來源于MIF的假ELR基元或MIF的 N環基元的肽)作為“模型”來進行結構-活性關系(structure-activity relationship, SAR)化學(如本文中所詳細提供的)。在一些實施例中，SAR化學得到較小肽。在一些實 施例中，較小肽產生破壞MIF結合于CXCR2和/或CXCR4的能力的小分子(例如，通過確定 破壞MIF結合于CXCR2和/或CXCR4的能力所涉及的氨基酸殘基)。破壞MIF三聚化的藥劑在某些實施例中，本文公開抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導的方法。 在一些實施例中，通過占據、遮蔽或以其它方式破壞MIF上的結構域，來抑制MIF經由CXCR2 和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，通過用小分子、肽和/或肽體占據、遮蔽或以 其它方式破壞MIF上的結構域，并由此破壞MIF的三聚化，來抑制MIF經由CXCR2和CXCR4 進行的信號傳導。在一些實施例中，削弱MIF肽形成同源三聚體的能力將破壞(部分或完 全)MIF結合于受體(例如CXCR2或CXCR4)的能力。在某些情況下，占據、遮蔽或以其它方 式破壞MIF上的結構域不會影響由其它激動劑/配體(例如IL-8/CXCL8、GR0i3 /CXCL2和 /或基質細胞源性因子la(SDF-la)/CXCL1)介導的CXCR2和CXCR4信號傳導。在某些情況下，MIF包含三個MIF多肽序列(即三聚體)。在某些情況下，三聚體 中各MIF多肽的假ELR基元形成環。在某些情況下，各MIF多肽的N環基元從假ELR環向外 延伸(參見圖10)。在某些情況下，破壞三聚體將破壞MIF與其目標受體的高親和力結合。在某些情況下，一個亞基的殘基38-44 ( β -2鏈)與另一亞基的殘基48-50 ( β _3鏈)相互 作用。在某些情況下，一個亞基的殘基96-102 (β-5鏈)與另一亞基的殘基107-109 (β-6 鏈)相互作用。在某些情況下，一個亞基上由N73R74S77K78C81形成的結構域與另一亞基 的mil Sl 12 Tl 13相互作用。在一些實施例中，MIF拮抗劑是來源于和/或并有MIF氨基酸殘基38_44 ( β _2鏈) 中的任何殘基或全部。在一些實施例中，MIF拮抗劑為來源于和/或并有MIF氨基酸殘基 48-50(β-3鏈)中的任何殘基或全部的肽。在一些實施例中，MIF拮抗劑為來源于和/或 并有MIF氨基酸殘基96-102 (β-5鏈)中的任何殘基或全部的肽。在一些實施例中，MIF拮 抗劑為來源于和/或并有MIF氨基酸殘基107-109 (β-6鏈)中的任何殘基或全部的肽。在 一些實施例中，MIF拮抗劑為來源于和/或并有MIF氨基酸殘基Ν73、R74、S77、Κ78和C81 中的任何殘基或全部的肽。在一些實施例中，MIF拮抗劑為來源于和/或并有MIF氨基酸 殘基Nlll、S112和Τ113中的任何殘基或全部的肽。用于鑒別破壞MIF三聚化的藥劑的分析在一些實施例中，鑒別破壞MIF結構域三聚化的肽。在一些實施例中，破壞MIF結 構域三聚化的肽不會影響在CXCR2和CXCR4處發生的與MIF無關的信號傳導事件。在一 些實施例中，使用任何適合的方法(例如HTS GPCR篩選技術)，針對抑制MIF經由CXCR2 和C)(CR4進行的信號傳導，篩選來源于任何上述氨基酸序列(例如MIF的氨基酸殘基 38-44 ( β -2鏈)、MIF的氨基酸殘基48-50 ( β _3鏈)、MIF的氨基酸殘基96-102 ( β _5鏈)、 MIF的氨基酸殘基107-109 (β-6鏈)、MIF的氨基酸殘基N73、R74、S77、K78和C81，和/或 MIF的氨基酸殘基Nlll、S112和T113)的肽和/或多肽。在一些實施例中，使用來源于任何上述氨基酸序列(例如MIF的氨基酸殘基 38-44 ( β -2鏈)、MIF的氨基酸殘基48-50 ( β _3鏈)、MIF的氨基酸殘基96-102 ( β _5鏈)、 MIF的氨基酸殘基107-109 (β-6鏈)、MIF的氨基酸殘基N73、R74、S77、K78和C81，和/或 MIF的氨基酸殘基Nlll、S112和Tl 13)的肽和/或多肽作為“模型”來進行結構_活性關 系(SAR)化學。在一些實施例中，SAR化學得到較小肽。在一些實施例中，較小肽得到可破 壞MIF形成同源三聚體的能力的小分子(例如，通過找出破壞MIF形成同源三聚體的能力 所涉及的氨基酸殘基)。在一些實施例中，MIF拮抗劑是SiRNA分子，和/或與MIF基因互補的反義分子， 和/或MIF RNA序列。在一些實施例中，siRNA和/或反義分子使MIF mRNA和/或蛋白質 的含量或半衰期減小至少約5 %、至少約10 %、至少約20 %、至少約30 %、至少約40 %、至少 約50%、至少約60%、至少約80%、至少約90%、至少約95%或實質上100%。結合CXCR2和CXCR4的拮抗劑在某些實施例中，本文公開抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導的方法。 在一些實施例中，通過用小分子或肽占據CXCR2和CXCR4的MIF結合結構域(即GPCR拮抗 劑法)，來抑制MIF經由CXCR2和CXCR4進行的信號傳導。在一些實施例中，MIF拮抗劑是羥基肉桂酸酯衍生物、基于希夫堿(Schiff)的色 氨酸類似物或對乙酰氨基酚(acetaminophen)的亞氨基-苯醌代謝物。在一些實施例中，MIF拮抗劑是磺酰脲(glyburide)、丙磺舒(probenicide)、 DIDS (4,4- 二異硫氰酸芪 _2，2- 二磺酸)、布美他尼(bumetanide)、呋塞米(furosemide)、磺溴酞(sulfobromophthalein)、二苯胺-2-甲酸、氟滅酸(flufenamic acid)或其組合。在一些實施例中，CXCR2拮抗劑是選自 Q(CL8(3_74)K11R/G31P ；IL_8(4_72) ；IL_8(6_72)； 重組IL-8 (rIL-8)；重組DL-8，^eLeu (在25位具有N-甲基化亮氨酸的rhIL_8)； (AAR) IL-8 (N 端 Ala4-Ala5 替換為 Glu4_Leu5 的 IL-8) ；GRO- α (1_73)(也稱為 CXCL1)； GRO-α (4_73) ； GRO- α (5_73) ；GRO- α (6_73)；重組 GRO(rGRO) ； (ELR) PF4 (N 端具有 ELR 序列的 PF4)；重組 PF4(rPF4)；安瘤克；Sch527123 (-羥基-N，N-二甲基-3-{2-[[ (R)-1-{5-甲 基-呋喃-2-基)_丙基]氨基]-3，4-二氧-環丁-1-烯基氨基}-苯甲酰胺)；N-(3-(氨 磺酰基)-4-氯-2-羥基苯基)-N ‘ -(2，3- 二氯苯基)脲；SB-517785-M(GSK) ；SB 265610 (N-(2-溴苯基)-N' - (7-氰基-IH-苯并三唑-4-基)脲)；SB225002 (N-(2-溴苯 基)-N' -(2-羥基-4-硝基苯基)脲)；SB455821 (GSK)、SB272844(GSK) ；DF2162(三氟甲 烷磺酸4-[(1 -2-氨基-1-甲基-2-氧乙基]苯酯)；熱帕瑞欣；或其組合。在一些實施例中，CXCR4拮抗劑是ALX40-4C(N_a-乙酰基-九-D-精氨酸 酰胺乙酸鹽)；AMD-070(AMD11070、AnorMED)；普樂沙福(Plerixafor) (AMD3100)； AMD3465 (AnorMED) ；AMD8664(1_ 吡啶-2-基-N-W-(1，4，7-三氮雜環十四烷-4-基甲 基)芐基]甲胺)；KRH-1636(吳羽化學工業株式會社(Kureha Chemical Industry Co. Limited)) ；KRH-2731 (吳羽化學工業株式會社)；KRH-3955 (吳羽化學工業株式 會社)；KRH-3140(吳羽化學工業株式會社)；T134(C端酰胺經羧酸取代的L-瓜氨酸 16-TW70) ；T22([Tyr5'12, Lys7]-鱟肽 II (polyphemusin II)) ；TW70 (脫-[Cys8，13，Tyr9, 12]-[D-LyslO, Proll]-T22) ；T140(H-Arg-Arg-Nal-Cys-Tyr-Arg-Lys-DLys-Pro-Tyr-Arg-Cit-Cys-Arg-OH) ；TC14012 (R-R-Nal-C-Y-(L) Cit-K-(D) Cit-P-Y-R-(L)瓜氨酸-C-R-NH2， 其中Nal = L-3-(2-萘基苯胺)，Cit =瓜氨酸，且所述肽與半胱氨酸成環)；TN14003; RCP168 (N 端添加有 D-氨基酸的 vMIP-11(11-71)) ；P0L3026 (Arg (*) -Arg-Nal (2) -Cys (Ix)-Tyr-Gln-Lys- (d-Pro) -Pro-Tyr-Arg-Cit-Cys (Ix) -Arg-Gly- (d-Pro) (*)) ；P0L2438 ；化合 物 3 (N- (1-甲基-1-苯乙基)-N-[ ((3S)-1-{2-[5- (4H-1，2，4-三唑-基-4-基)-IH-吲 哚-3-基]乙基}吡咯烷-3-基)甲基]胺)；異硫脲Ia-Iu(有關異硫脲Ia-Iu的形 成，參見吉伯哈德托馬(GelAard Thoma)等人，口服生物可用性異硫脲在體外和體內阻斷 趨化因子受體 CXCR4 的功能(Orally Bioavailable Isothioureas Block Function of theChemokine Receptor CXCR4 In Vitro and hi Vivo)，藥物化學雜志(J. Med. Chem.)，即 將發表的論文(2008)，所述文獻的公開內容以引用的方式并入本文中)；或其組合。 在一些實施例中，MIF拮抗劑可抑制(部分或完全)MIF結合于CXCR2和/或CXCR4 的能力。在一些實施例中，MIF拮抗劑是C0R100140(健生科技公司(Genzyme Corp)/卡提 克有限公司(Cortical Pty Ltd.)) ； IS0-1 ((S，R)-3-(4-羥基苯基)-4，5-二氫-5-異噁唑 乙酸甲酯)；4-IPP(4-碘-6-苯基嘧啶)；或其組合。在一些實施例中，MIF拮抗劑是來源 于CXCR2和/或CXCR4的肽。在一些實施例中，小分子、肽和/或抗體拮抗劑可抑制生物活性形式MIF的 釋放。在一些實施例中，小分子、肽和/或抗體拮抗劑可抑制類固醇誘導的、TNFa誘 導的、IFN-Y誘導的和內毒素誘導的MIF釋放(例如從巨噬細胞、肺、ATP結合序列盒 (ATP-bindingcassette, ABC)轉運體釋放)。MIF模擬物
在一些實施例中，本文公開的方法和組合物包含類MIF氧化還原活性肽，其模擬 MIF并抑制CXCR2和/或CXCR4的結合和信號傳導。在一些實施例中，本文公開的方法和組合物包含呈現與MIF的N環基元類似的 結構或功能特征的小分子、肽和/或抗體。在一些實施例中，所述肽和/或多肽包含殘基 L47M48A49F50G51G52S53S54E55和P56中的至少一者。在一些實施例中，小分子、肽和/或 抗體包含包括殘基L47 M48 A49 F50 G51 G52 S53 S54 E55和P56中全部或一部分的人類 MIF的5到16個連續氨基酸。在一些實施例中，所述呈現與MIF的N環基元類似的結構或 功能特征的肽和/或多肽包含一個或多個選自表1的肽。在一些實施例中，所述肽和/或 多肽包含用于改進ADME-PK的N端和/或C端化學修飾。在一些實施例中，所述肽和/或 多肽包含非天然氨基酸。在一些實施例中，所述肽和/或多肽包含環狀變體。
權利要求
1.一種利用治療有效量的活性劑治療有需要的個體的MIF介導的病癥的方法，所述活 性劑抑制(i)MIF與CXCR2和/或CXCR4的結合；(ii)MIF對CXCR2和/或CXCR4的活化； (iii)MIF形成同源多聚體的能力；(iv)MIF與⑶74的結合；或其組合。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述活性劑特異性結合于MIF的假ELR基元的全 部或一部分，或與MIF的假ELR基元競爭。
3.根據權利要求1所述的方法，其中所述活性劑特異性結合于MIF的N環基元的全部 或一部分，或與MIF的N環基元競爭。
4.根據權利要求1所述的方法，其中所述活性劑特異性結合于MIF的所述假ELR基元 和N環基元的全部或一部分。
5.根據權利要求1所述的方法，其中所述活性劑選自CXCR2拮抗劑、CXCR4拮抗劑、MIF 拮抗劑或其組合。
6.根據權利要求1所述的方法，其中所述活性劑選自C)(CL8(3-74) Kl 1R/G31P ； kh527123 ;N-(3-(氨磺酰基)-4-氯-2-羥苯基)-N' -(2，3-二氯苯基)脲；IL-8(1_72)； (R) IL-8 ； (R) IL-8, NMeLeu ； (AAR) IL-8 ；GRO α t(l-73) ； (R) GRO α ； (ELR) PF4 ； (R) PF4 ； SB-265610 ；安瘤克(Antileukinate) ；SB-517785-M ；SB 265610 ；SB225002 ；SB455821 ； DF2162 ；熱帕瑞欣(Reparixin) ；ALX40-4C ；AMD-070 ；AMD3100 ；AMD3465 ；KRH-1636 ； KRH-2731 ；KRH-3955 ；KRH-3140 ；Τ134 ；Τ22 ；Τ140 ；TC14012 ；ΤΝ14003 ；RCP168 ；P0L3026 ； CTCE-0214 ；C0R100140 ；或其組合。
7.根據權利要求1所述的方法，其中所述活性劑是特異性結合于MIF的所述假ELR基 元的全部或一部分的肽；特異性結合于MIF的所述N環基元的全部或一部分的肽；特異性 結合于所述假ELR基元和N環基元的全部或一部分的肽；抑制MIF與CXCR2結合的肽；抑 制MIF與CXCR4結合的肽；抑制MIF與JAB-I結合的肽；抑制MIF與⑶74結合的肽；特異性 結合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及 MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列的肽PRASVPDGF LSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構 域；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或 MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL 以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；特異性結合于以下肽序列的 全部或一部分的肽:PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列的肽PRASVPDGFLS ELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少一者 的相應特征/結構域；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的肽FGGSSEPCALCSLHSI 以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列的肽 FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；或其組合。
8.根據權利要求1所述的方法，其中在投予本文公開的活性劑后，巨噬細胞成為泡沫 細胞的轉化受到抑制。
9.根據權利要求1所述的方法，其中在投予本文公開的活性劑后，心肌細胞的凋亡受 到抑制。
10.根據權利要求1所述的方法，其中在投予本文公開的活性劑后，浸潤巨噬細胞的凋亡受到抑制。
11.根據權利要求1所述的方法，其中在投予本文公開的活性劑后，腹部主動脈瘤的形 成受到抑制。
12.根據權利要求1所述的方法，其中在投予本文公開的活性劑后，腹部主動脈瘤的直 徑減小。
13.根據權利要求1所述的方法，其中在投予本文公開的活性劑后，動脈瘤中的結構蛋 白得以再生。
14.根據權利要求1所述的方法，其進一步包含共投予第二活性劑。
15.根據權利要求1所述的方法，其進一步包含共投予煙酸、貝特(fibrate)、他汀 (statin) ,Apo-Al模擬肽(例如DF-4，諾華公司(Novartis))、apoA_I轉錄上調劑、ACAT抑 制劑、CETP調節劑、糖蛋白(GP) Ilb/IIIa受體拮抗劑、P2Y12受體拮抗劑、Lp_PLA2抑制劑、 抗TNF劑、IL-I受體拮抗劑、IL-2受體拮抗劑、細胞毒性劑、免疫調節劑、抗生素、T細胞共 刺激阻斷劑、改良病癥的抗風濕劑、B細胞消耗劑、免疫抑制劑、抗淋巴細胞抗體、烷化劑、抗 代謝物、植物堿、類萜、拓撲異構酶抑制劑、抗腫瘤抗生素、單克隆抗體、激素療法或其組合。
16.根據權利要求1所述的方法，其中所述MIF介導的病癥是動脈粥樣硬化；腹部主動 脈瘤；急性播散性腦脊髓炎；煙霧病(Moyamoya disease)；高安氏病(Takayasudisease)； 急性冠狀動脈綜合癥；心臟同種異體移植物血管病變；肺炎；急性呼吸窘迫綜合癥；肺纖 維化；急性播散性腦脊髓炎；愛迪森氏病(Addison' s disease)；強直性脊柱炎；抗磷 脂抗體綜合癥；自體免疫性溶血性貧血；自體免疫性肝炎；自體免疫性內耳病；大皰性類 天皰瘡；查格斯病(Chagas disease)；慢性阻塞性肺病；腹腔疾病；皮肌炎；1型糖尿病； 2型糖尿病；子宮內膜異位癥；古巴士德氏綜合癥(Goodpasture' s syndrome)；格雷夫 斯氏病(Graves，disease)；格林-巴利綜合癥(Gui 1 Iain-Barresyndrome)；橋本氏病 (Hashimoto' s disease)；特發性血小板減少性紫癜；間質性膀胱炎；全身性紅斑狼瘡 (SLE)；代謝綜合癥；多發性硬化癥；重癥肌無力；心肌炎；發作性睡病；肥胖癥；尋常性天 皰瘡；惡性貧血；多發性肌炎；原發性膽汁性肝硬化；類風濕性關節炎；精神分裂癥；硬皮 病；修格連氏綜合癥(Sjogren's syndrome)；血管炎；白癜風；韋格納肉芽腫(Wegener' s granulomatosis)；過敏性鼻炎；前列腺癌；非小細胞肺癌；卵巢癌；乳癌；黑色素瘤 ’胃癌； 結腸直腸癌；腦癌；轉移性骨病；胰腺癌；淋巴瘤；鼻息肉；胃腸癌；潰瘍性結腸炎；克隆恩 氏病(Crohn' s disorder)；膠原性結腸炎；淋巴細胞性結腸炎；缺血性結腸炎；改道性結 腸炎；貝塞特氏綜合癥(Behcet's syndrome)；感染性結腸炎；未定型結腸炎；發炎性肝病； 內毒素休克；膿毒癥休克；類風濕性脊柱炎；強直性脊柱炎；痛風性關節炎；類風濕性多肌 痛；阿爾茨海默氏癥(Alzheimer' s disorder)；帕金森氏癥(Parkinson' s disorder)； 癲癇；艾滋病癡呆；哮喘；成人呼吸窘迫綜合癥；支氣管炎；囊性纖維化；急性白細胞介導 性肺損傷；遠端直腸炎；韋格納肉芽腫；纖維肌痛；支氣管炎；葡萄膜炎；結膜炎；牛皮癬； 濕疹；皮膚炎；平滑肌增殖病癥；腦膜炎；帶狀皰疹；腦炎；腎炎；結核病；視網膜炎；異位性 皮炎；胰腺炎；齒齦炎；凝固性壞死；液化性壞死；纖維蛋白樣壞死；血管內膜增生；心肌梗 塞；中風；器官移植排斥；或其組合。
17.一種用于治療有需要的個體的MIF介導的病癥的醫藥組合物，其至少包含活性劑， 所述活性劑抑制(i)MIF與CXCR2和CXCR4的結合；和/或(ii)MIF對CXCR2和CXCR4的活化；(iii)MIF形成同源多聚體的能力；或其組合。
18.根據權利要求17所述的組合物，其中所述活性劑特異性結合于MIF的假ELR基元 的全部或一部分。
19.根據權利要求17所述的組合物，其中所述活性劑特異性結合于MIF的N環基元的 全部或一部分。
20.根據權利要求17所述的組合物，其中所述活性劑特異性結合于MIF的所述假ELR 基元和N環基元的全部或一部分。
21.根據權利要求17所述的組合物，其中所述活性劑選自CXCR2拮抗劑、CXCR4拮抗 劑、MIF拮抗劑或其組合。
22.根據權利要求17所述的組合物，其中所述活性劑選自CXCL8(3-74)K11R/G31P； kh527123 ;N-(3-(氨磺酰基)-4-氯-2-羥苯基)-N' -(2，3-二氯苯基)脲；IL-8(1_72)； (R)IL-8 ； (R)IL-8, NMeLeu ； (AAR)IL-8 ；GRO α (1-73) ； (R)GRO α ；(ELR) PF4； (R)PF4 ； SB-265610 ；安瘤克；SB-517785-M ;SB 265610 ；SB225002 ；SB455821 ；DF2162 ；熱帕瑞欣； ALX40-4C；AMD-070 ；AMD3100 ；AMD3465 ；KRH-1636 ；KRH-2731 ；KRH-3955 ；KRH-3140 ；T134 ； T22 ；T140 ；TC14012 ；TN14003 ；RCP168 ；P0L3026 ；CTCE-0214 ；C0R100140 ；或其組合。
23.根據權利要求17所述的組合物，其中所述活性劑是特異性結合于MIF的所述假 ELR基元的全部或一部分的肽；特異性結合于MIF的所述N環基元的全部或一部分的肽；特 異性結合于所述假ELR基元和N環基元的全部或一部分的肽；抑制MIF與CXCR2結合的肽； 抑制MIF與CXCR4結合的肽；抑制MIF與JAB-I結合的肽；特異性結合于以下肽序列的全 部或一部分的肽:PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及MIF單體或MIF三聚體中 至少一者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVH VVPDQ以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；特異性結合于以下肽 序列的全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的 相應特征/結構域；模擬以下肽序列的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或MIF三聚 體中至少一者的相應特征/結構域；特異性結合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASV PDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 單體或 MIF 三聚體中至少 一者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPD QLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF單體或MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；特異性 結合于以下肽序列的全部或一部分的肽FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF單體或MIF三聚體中 至少一者的相應特征/結構域；模擬以下肽序列的肽FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF單體或 MIF三聚體中至少一者的相應特征/結構域；或其組合。
24.根據權利要求17所述的組合物，其進一步包含第二活性劑。
25.根據權利要求17所述的組合物，其進一步包含煙酸、貝特、他汀、Apo-Al模擬肽 (例如DF-4，諾華公司)、apoA-I轉錄上調劑、ACAT抑制劑、CETP調節劑、糖蛋白(GP) IIb/ IIIa受體拮抗劑、P2Y12受體拮抗劑、Lp_PLA2抑制劑、抗TNF劑、IL-I受體拮抗劑、IL-2受 體拮抗劑、細胞毒性劑、免疫調節劑、抗生素、T細胞共刺激阻斷劑、改良病癥的抗風濕劑、B 細胞消耗劑、免疫抑制劑、抗淋巴細胞抗體、烷化劑、抗代謝物、植物堿、類萜、拓撲異構酶抑 制劑、抗腫瘤抗生素、單克隆抗體、激素療法或其組合。
全文摘要
在某些實施例中，本文公開一種治療MIF介導的病癥的方法。在一些實施例中，所述方法包含投予一種活性劑，所述活性劑可抑制(i)MIF與CXCR2和CXCR4的結合，和/或(ii)MIF對CXCR2和CXCR4的活化；(iii)MIF形成同源多聚體的能力；或其組合。
文檔編號A61P9/10GK102088993SQ200980109328
公開日2011年6月8日 申請日期2009年3月20日 優先權日2008年3月20日
發明者喬舒亞·羅伯特·舒爾茨, 于爾根·伯恩哈根, 克里斯蒂安·韋伯, 貝內迪克特·福爾拉特, 阿爾瑪·策內克 申請人:卡羅勒斯治療公司