專利名稱：一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥活性成分制備領(lǐng)域，涉及野馬追藥材有效活性成分的制備方法，
具體地，是利用現(xiàn)代中藥提取純化方法，從傳統(tǒng)中藥野馬追中提取有效成分-野馬追總黃 酮。
背景技術(shù)：
野馬追為菊科植物輪葉澤蘭的全草，分布于華北、華南、東北、臺灣等地，盛產(chǎn)于江 蘇、安徽等地山區(qū)。野馬追藥材苦、平，具有化痰、止咳、平喘的作用，常用于治療慢性支氣管 炎、支氣管炎、急性扁桃體炎、高血壓等疾病，是臨床治療咳嗽的良藥。 野馬追含有多種活性成分，主要有黃酮類、生物堿、揮發(fā)油、香豆精及萜類等化學(xué)
成分，其中黃酮類為主要活性成分。黃酮類化合物具有較強的藥理活性，它具有清除自由基
的作用，常用來治療和預(yù)防感染、炎癥、燒傷和輻射引起的傷害。此外黃酮類化合物對高血
壓、水腫、氣喘、心血管、胃腸潰瘍等都有治療作用。目前，尚無野馬追總黃酮制備方法的報
道，野馬追制劑大多采用水提醇沉后直接制備，所得制劑雜質(zhì)較多，服用量較大。 眾所周知，凹凸棒土因具有較大的比表面積而表現(xiàn)出良好的吸附性，可以用于多
種領(lǐng)域。改性作用能夠使凹凸棒土在水溶液中的結(jié)構(gòu)電荷和表面電荷發(fā)生改變，從而改變
凹凸棒土膠體的帶電性和吸附活性，從而能夠改善其比表面積甚至改變其結(jié)構(gòu)，提高凹凸
棒土的比表面積，從而吸附性能大大提高，適用于中藥提取液中活性成分的分離。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法，該 方法采用醇沉加凹凸棒土吸附法達到對野馬追藥材活性成分黃酮類化合物的富集，提高野 馬追活性成分總黃酮的純度，簡單易行，成本低，用于野馬追制劑的制備可以降低藥物服用 量，提高患者的服藥順應(yīng)性。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是該制備方法依次包括如下步驟 (1)精選江蘇盱眙縣花期野馬追全草，除去雜質(zhì)，并將全草粉碎成粗粉； (2)在容器中加野馬追粗粉重量的10倍量水煮沸煎煮3次，每次1 2小時，煎煮
液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ; (3)在濃縮液中邊攪拌邊緩慢加入無水乙醇至乙醇濃度為70%，沉淀，靜置24小 時，過濾，回收乙醇，濾液備用； (4)將上述濾液經(jīng)改性凹凸棒土吸附，洗脫劑洗脫，收集洗脫液；
(5)洗脫液回收溶劑，濃縮，干燥，得野馬追總黃酮提取物。 其中，第(4)步采用的改性凹凸棒土為有機改性凹凸棒土或殼聚糖復(fù)合凹凸棒 土。 其中，第(4)步采用的改性凹凸棒土與野馬追粗粉的重量比為1 : 2。 其中，所述的洗脫劑為純化水、10 30%乙醇、60 80%乙醇或體積比(3 : 1)的乙酸乙酯與正丁醇的混合液中的至少一種。 其中，所述的有機改性凹凸棒土的制備方法為將0.4mol/L的CTMAB(十六烷基三 甲基溴化銨)溶于10ml水中，超聲溶解，加入凹凸棒土 1. 0g，超聲15min，抽濾，水洗至無溴 離子，于105t:下干燥，研細(xì)，過120目篩，得到有機改性凹凸棒土。 其中，所述的殼聚糖改性凹凸棒土的制備方法為用體積分?jǐn)?shù)為0.7X的HAc溶液 100mL緩慢溶解1.9g殼聚糖，配成黏稠的殼聚糖膠體溶液，殼聚糖膠體溶液與32g凹凸棒土 混合，攪拌48h成殼聚糖復(fù)合凹凸棒土糊狀物，使之充分浸潤，再將此糊狀物置于烘箱中于 105t:下干燥，研細(xì)，過120目篩，得到殼聚糖復(fù)合凹凸棒土。 本發(fā)明的優(yōu)點是在傳統(tǒng)中藥純化方法-醇沉除雜的基礎(chǔ)上，根據(jù)改性凹凸棒土對 野馬追總黃酮選擇性吸附的特點，對野馬追提取液采用凹凸棒土吸附精制，野馬追提取物 總黃酮含量高，工藝簡單，適合工業(yè)化大生產(chǎn)，所得野馬追總黃酮可用于制備野馬追的多種 制劑，包括片劑、注射劑、顆粒劑、糖漿劑、滴丸劑等口服和/或非胃腸給藥制劑。
具體實施例方式
以下通過具體實施例對本發(fā)明方法的技術(shù)方案作進一步的說明，不能理解為這些 實施例是對技術(shù)方案的限制。 實施例1 :取野馬追干燥藥材500g，粉碎成粗粉；加5000g水煮沸煎煮3次，每次2 小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ;濃縮液邊攪拌邊緩慢加入無水乙醇至乙 醇濃度為70%，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；將上述濾液加入盛有250g有機改 性凹凸棒土的燒杯中，吸附8小時，過濾，濾液棄去，吸附有黃酮的有機改性凹凸棒土以體 積比(1 : 3)的正丁醇與乙酸乙酯的混合液洗脫，收集洗脫液；洗脫液回收溶劑，濃縮，干 燥，得野馬追提取物56g，總黃酮含量31 % 。 實施例2 :取野馬追干燥藥材1500g，粉碎成粗粉；加15000g水煮沸煎煮3次，每 次1. 5小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ;濃縮液邊攪拌邊緩慢加入無水乙 醇至乙醇濃度為70%，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；將上述濾液加入盛有750g 有機改性凹凸棒土的燒杯中，吸附8小時，過濾，濾液棄去，吸附有黃酮的有機改性凹凸棒 土先以純化水洗脫，然后以30%乙醇洗滌，最后以70%乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液回收 乙醇，濃縮，干燥，得野馬追提取物156g，總黃酮含量34% 。 實施例3 :取野馬追干燥藥材1500g，粉碎成粗粉；加15000g水煮沸煎煮3次，每 次1. 5小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ;濃縮液邊攪拌邊緩慢加入無水乙 醇至乙醇濃度為70%，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；將上述濾液加入盛有750g 殼聚糖改性凹凸棒土的燒杯中，吸附8小時，過濾，濾液棄去，以純化水洗脫，收集洗脫液； 洗脫液濃縮，干燥，得野馬追提取物150g，總黃酮含量32% 。 實施例4 :取野馬追干燥藥材1500g，粉碎成粗粉；加15000g水煮沸煎煮3次，每次 1. 5小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ;濃縮液邊攪拌邊緩慢加入無水乙醇 至乙醇濃度為70%，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；將上述濾液加入盛有750g殼 聚糖改性凹凸棒土的燒杯中，吸附8小時，過濾，濾液棄去，以20%乙醇洗脫，收集洗脫液； 洗脫液回收乙醇，濃縮，干燥，得野馬追提取物152g，總黃酮含量33X。
實施例5 :取野馬追干燥藥材1500g，粉碎成粗粉；加 水煮沸煎煮3次，每次1. 5小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ;濃縮液邊攪拌邊緩慢加入無水乙醇 至乙醇濃度為70%，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；將上述濾液加入盛有750g殼 聚糖改性凹凸棒土的燒杯中，吸附8小時，過濾，濾液棄去，以70%乙醇洗脫，收集洗脫液； 洗脫液回收乙醇，濃縮，干燥，得野馬追提取物154g，總黃酮含量35X。
實施例6 :取野馬追干燥藥材1000g，粉碎成粗粉；加10000g水煮沸煎煮3次，分別 為2小時、1小時、1小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ;濃縮液邊攪拌邊緩慢 加入無水乙醇至乙醇濃度為70%，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；將上述濾液加 入盛有500g殼聚糖改性凹凸棒土的燒杯中，吸附8小時，過濾，濾液棄去，殼聚糖改性凹凸 棒土先以20%乙醇洗滌，再以80%乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液回收乙醇，濃縮，干燥，得 野馬追提取物97g，總黃酮含量36 % 。 實施例7 :取野馬追干燥藥材500g，粉碎成粗粉；加5000g水煮沸煎煮3次，每次1 小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ;濃縮液邊攪拌邊緩慢加入無水乙醇至乙 醇濃度為70%，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；將上述濾液以2ml/min的流速流 過有機改性凹凸棒土層析柱(小3X50cm)，吸附8小時，過濾，濾液棄去，先以純化水洗脫至 無色，然后以10%乙醇洗滌至無色，再以60%乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液回收乙醇，濃 縮，干燥，得野馬追提取物52g，總黃酮含量36% 。 實施例8 :取野馬追干燥藥材1000g，粉碎成粗粉；加10000g水煮沸煎煮3次，提取 時間分別為2小時、1小時、1小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1. 10 ;濃縮液邊攪 拌邊緩慢加入無水乙醇至乙醇濃度為70%，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；將上 述濾液以1. 5ml/min的流速流過殼聚糖改性凹凸棒土層析柱(小3X50cm)，吸附8小時，過 濾，濾液棄去，先以純化水洗脫至無色，然后以30%乙醇洗滌至無色，再以80%乙醇洗脫， 收集洗脫液；洗脫液回收乙醇，濃縮，干燥，得野馬追提取物87g，總黃酮含量39%。
權(quán)利要求
一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法，其特征在于該制備方法依次包括如下步驟(1)精選江蘇盱眙縣花期野馬追全草，除去雜質(zhì)，并將全草粉碎成粗粉；(2)在容器中加野馬追粗粉重量的10倍量水煮沸煎煮3次，每次1～2小時，煎煮液合并、過濾、濃縮至相對密度為1.10；(3)在濃縮液中邊攪拌邊緩慢加入無水乙醇至乙醇濃度為70％，沉淀，靜置24小時，過濾，回收乙醇，濾液備用；(4)將上述濾液經(jīng)改性凹凸棒土吸附，洗脫劑洗脫，收集洗脫液；(5)洗脫液回收溶劑，濃縮，干燥，得野馬追總黃酮提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法，其特征在于第(4)步采用的改性凹凸棒土為有機改性凹凸棒土或殼聚糖復(fù)合凹凸棒土。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法，其特征在于第(4)步采用的改性凹凸棒土與野馬追粗粉的重量比為1 : 2。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法，其特征在于所述的洗脫劑為純化水、10 30%乙醇、60 80%乙醇或體積比(3 : 1)的乙酸乙酯與正丁醇的混合液中的至少一種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法，其特征在于所述的有機改性凹凸棒土的制備方法為將0. 4mol/L的CTMAB(十六烷基三甲基溴化銨)溶于10ml水中，超聲溶解，加入凹凸棒土 l.Og，超聲15min，抽濾，水洗至無溴離子，于105t:下干燥，研細(xì)，過120目篩，得到有機改性凹凸棒土。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法，其特征在于所述的殼聚糖改性凹凸棒土的制備方法為用體積分?jǐn)?shù)為0.7X的HAc溶液100mL緩慢溶解1. 9g殼聚糖，配成黏稠的殼聚糖膠體溶液，殼聚糖膠體溶液與32g凹凸棒土混合，攪拌48h成殼聚糖復(fù)合凹凸棒土糊狀物，使之充分浸潤，再將此糊狀物置于烘箱中于105t:下干燥，研細(xì)，過120目篩，得到殼聚糖復(fù)合凹凸棒土。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種應(yīng)用凹凸棒土吸附法制備野馬追總黃酮的方法，野馬追藥材粉碎，水煎煮提取3次，過濾濃縮，醇沉，回收乙醇，經(jīng)改性凹凸棒土吸附，洗脫劑洗脫，回收洗脫劑，可得到野馬追總黃酮含量達30％以上的產(chǎn)品。本發(fā)明工藝簡單，成本低廉，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61P11/06GK101721449SQ200910234450
公開日2010年6月9日 申請日期2009年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月19日
發(fā)明者尹秀蓮, 游慶紅 申請人:淮陰工學(xué)院