專利名稱：腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒及其制備方法
技術領域：
本發明涉及的是一種造影劑技術領域的制備方法，具體是一種腸壁識別性含釓納
米造影劑顆粒及其制備方法。
背景技術：
磁共振成像技術在腫瘤、炎癥等疾病的診斷中有著非常重要的作用，在臨床中應用越來越廣泛。其成像的效果很大一方面取決于其使用的造影劑，多胺多羧酸類釓(Gd)配合物及其衍生物是最常用的造影劑之一，為T1陽性造影劑，如Gd-DTPA， Gd-D0TA，Gd-DTPA-BMA， Gd-B0PTA等等。 腸壁的損傷是很多腸道疾病如腸炎腸癌的診斷依據之一，但目前臨床上的磁共振造影劑對粘膜損傷成像效果差，很難在腸粘膜局部損失的情況下實現清晰的造影成像。而殼聚糖作為一種天然高分子，其能很好地通過腸黏膜而吸附，如能利用殼聚糖制備成含釓納米顆粒，則有望實現對腸壁的強化識別成像，而殼聚糖具有生物安全性和降解性，且成本低廉，無生物毒性，有利于直接用于人體中。 目前殼聚糖微球的制備方法較多，但制備成納米顆粒的方法很少。經過對現有技術的檢索發現，中國專利文獻號CN10115308A記載了一種"殼聚糖納米顆粒的制備方法"，采用納米空洞技術制備了幾百個納米大小的納米顆粒，但這種方法采用機械攪拌，生成的顆粒均一性可能不好。 涉及包釓的殼聚糖納米顆粒的方法則更少，且制備方法復雜。如Tokumitsu等人在"藥物化學通報"(Chem. Pharm. Bull)雜志(1999年46期第838 842頁)的"載釓殼聚糖藥物微球用于癌癥中子俘獲治療"中報道了一種利用雙乳液微滴法制備載釓殼聚糖微球的方法，在這種方法中利用戊二醛作為連接劑，但戊二醛可能會影響殼聚糖上的自由氨基，會影響釓的包封和成像效果。Tokumitsu等人在"制藥研究"(Pharmaceutical Research)雜志(1999年12期第1830 1835頁)中發展了"釓噴酸葡胺復合納米顆粒用于腫瘤中子俘獲治療新型雙乳化微滴制備方法及表征"方法，利用NaOH作為交聯試劑制備殼聚糖納米顆粒，其利用雙乳液微滴法，因涉及兩個油相的制備，操作比較復雜，不利于批量生產。因此需要尋求一種簡便而不影響殼聚糖對腸壁識別性能的制備方法，用于制備含釓殼聚糖納米顆粒，且要粒徑均一，分散性要較好。
發明內容
本發明針對現有技術存在的上述不足，提供一種腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒及其制備方法，利用殼聚糖對腸壁良好的親和性和吸附性，以簡便的一步乳化中和法，制備成含釓殼聚糖納米顆粒。該方法制備的含釓納米顆粒可提高和增強釓類造影劑對大腸和小腸壁的造影成像作用，且生物親和性好、毒性較低。
本發明是通過以下技術方案實現的 本發明涉及腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒，其組分及其質量百分比含量為藥物釓噴酸葡胺10 90%，殼聚糖90 10%，該腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的平均粒徑在250 1700nm。 本發明涉及上述腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，包括如下步驟 第一步、將釓類試劑溶液與殼聚糖溶液以i : i i : 20的體積比混合并充分溶
解，作為水相； 所述的釓類試劑溶液是指濃度為1 50mmol/L的釓噴酸葡胺(Gd-DTPA)及其衍生物的水溶液； 所述的殼聚糖溶液是指濃度為5 50mg/mL的殼聚糖醋酸溶液，其中醋酸溶液的質量百分比濃度為0. 5 2%，殼聚糖的分子量為10000 300000，脫乙酰度為70 100% ; 第二步、以液體石蠟作為油相，將水相和油相以i : 5 i : 20的體積比混合后
置于冰浴中進行乳化處理，制成乳化液； 所述的液體石蠟中含有質量百分比為2 15%的乳化劑，改乳化劑包括司盤85(Span85)或司盤83 (Span83)中的一種或其組合； 第三步、向乳化液中加入5 20%的體積比的堿性溶液并繼續在冰浴中進行乳化處理，經攪拌離心分離去除上清液后進行混合清洗處理得到納米懸浮液，最后將納米懸浮液干燥處理后得到腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒； 所述的堿性溶液是指濃度為0. 5 5mol/L的氨水、NaOH水溶液或KOH水溶液；
所述的冰浴是指0 5°C的冰水溶液環境； 所述的乳化處理是指采用細胞粉碎儀或剪切乳化機以25000rpm 40000rpm進行攪拌乳化反應3 10分鐘； 所述的混合清洗處理是指以甲苯、乙醚、乙醇和去離子水依次各清洗離心2次，或以甲苯、丙酮、乙醇和去離子水依次各清洗離心2次，每次離心分離時間均為30分鐘；
所述的干燥處理包括冷凍干燥和真空干燥。 利用本發明制備的包釓殼聚糖納米造影劑方法簡單快速、成本較低、適合大批量生產，經冰浴下攪拌反應獲得的顆粒粒徑均一性和分散性都較好，腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒也具有較好的生物相容性和活性，無生物毒性，且能對腸壁產生識別吸附，可提高和增強腸壁的磁共振成像作用，從而有望在腸癌、腸粘膜炎癥等疾病的診斷方面得到應用。
具體實施例方式
下面對本發明的實施例作詳細說明，本實施例在以本發明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本發明的保護范圍不限于下述的實施例。 實施例1 取25mmol/L的Gd-DTPA溶液2. 5mL，與2. 5mL含1 %醋酸溶液的殼聚糖溶液相混合，作為水相，殼聚糖的分子量為25000，脫乙酰度為86%。然后將此水相溶液加入至80mL含有5%的司盤85乳化劑的液體石蠟溶液中，將整個容器放在冰水浴中，利用剪切乳化機以30000rpm的速度高速攪拌3分鐘，再加入7. 5mL3mol/L的NaOH溶液，以30000rpm的速度繼續攪拌10分鐘，以3000rpm的轉速離心30分鐘，倒掉上清后再以甲苯、丙酮、乙醇和去離子水各清洗離心2次，每次離心分離時間為30分鐘，最后再放置在冷凍干燥機中進行冷
凍干燥48小時，獲得干粉狀納米顆粒腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒。 本實施例制備所得含釓納米造影劑顆粒的組分為釓噴葡胺質量含量為77. 1 % ，殼
聚糖質量含量為22. 9X，經激光粒度儀測得的粒徑為452士38nm，多分散指數PDI小于O. 3，
溶液放置7天未見有沉淀，表明分散性較好。 實施例2 取25mmol/L的Gd-DTPA溶液0. 5mL，與0. 5mL含1 %醋酸溶液的殼聚糖溶液相混 合，作為水相，殼聚糖的分子量為180000，脫乙酰度為95% 。然后將此水相溶液加入至20mL 含有5%的司盤83乳化劑的液體石蠟溶液中，將整個容器放在冰水浴中，利用細胞粉碎儀 以25000rpm的速度高速攪拌5分鐘，再加入1. 5mL3mol/L的KOH溶液，以25000rpm的速度 繼續攪拌8分鐘，以3000rpm的轉速離心30分鐘，棄上清，然后以甲苯、乙醚、乙醇和去離子 水各清洗離心2次，每次離心分離時間為30分鐘，最后再放置在冷凍干燥機中進行冷凍干 燥48小時，獲得干粉狀納米顆粒腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒。 本實施例制備所得含釓納米造影劑顆粒的組分為釓噴葡胺質量含量為62. 4%，殼 聚糖質量含量為37. 6%，以激光粒度儀測得的粒徑為768士69nm，多分散指數PDI小于O. 3， 溶液放置7天未見有沉淀，分散性較好。
權利要求
一種腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒，其特征在于，其組分及其質量百分比含量為藥物釓噴酸葡胺10～90％，殼聚糖90～10％，該含釓納米造影劑顆粒的平均粒徑在250～1700nm，載藥率為10～90％。
2. 根據權利要求1所述的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，其特征在于， 包括如下步驟第一步、將釓類試劑溶液與殼聚糖溶液以1 : 1 1 : 20的體積比混合并充分溶解， 作為水相；第二步、以液體石蠟作為油相，將水相和油相以i : 5 i : 20的體積比混合后置于冰浴中進行乳化處理，制成乳化液；第三步、向乳化液中加入5 20%的體積比的堿性溶液并繼續在冰浴中進行乳化處 理，經攪拌離心分離去除上清液后進行混合清洗處理得到納米懸浮液，最后將納米懸浮液 干燥處理后得到腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒。
3. 根據權利要求2所述的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，其特征是，所 述的釓類試劑溶液是指濃度為1 50mmol/L的釓噴酸葡胺(Gd-DTPA)及其衍生物的水溶 液。
4. 根據權利要求2所述的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，其特征是，所 述的殼聚糖溶液是指濃度為5 50mg/mL的殼聚糖醋酸溶液，其中醋酸溶液的質量百分 比濃度為0. 5 2%，殼聚糖的分子量為10000 300000，脫乙酰度為70 100%。
5. 根據權利要求2所述的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，其特征是，所 述的液體石蠟中含有質量百分比為2 15%的乳化劑，乳化劑包括司盤85或司盤83中 的一種或其組合。
6. 根據權利要求2所述的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，其特征是，所 述的堿性溶液是指濃度為0. 5 5mol/L的氨水、NaOH水溶液或KOH水溶液。
7. 根據權利要求2所述的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，其特征是，所 述的冰浴是指0 5t:的冰水溶液環境。
8. 根據權利要求2所述的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，其特征是，所 述的乳化處理是指采用細胞粉碎儀或剪切乳化機以25000rpm 40000rpm進行攪拌乳化 反應3 IO分鐘。
9. 根據權利要求2所述的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒的制備方法，其特征是，所 述的混合清洗處理是指以甲苯、乙醚、乙醇和去離子水依次各清洗離心2次，或以甲苯、丙 酮、乙醇和去離子水依次各清洗離心2次，每次離心分離時間均為30分鐘。
全文摘要
一種造影劑技術領域的腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒及其制備方法，包括將釓類試劑溶液與殼聚糖溶液以1∶1～1∶20的體積比混合并充分溶解，作為水相；以液體石蠟作為油相，將水相和油相以1∶5～1∶20的體積比混合后置于冰浴中進行乳化處理，制成乳化液；向乳化液中加入5～20％的體積比的堿性溶液并繼續在冰浴中進行乳化處理，經攪拌離心分離去除上清液后進行混合清洗處理得到納米懸浮液，最后將納米懸浮液干燥處理后得到腸壁識別性含釓納米造影劑顆粒。本發明制備所得含釓納米造影劑顆粒的平均粒徑在250～1700nm，載藥率10～90％。
文檔編號A61K49/12GK101700402SQ20091019983
公開日2010年5月5日 申請日期2009年12月3日 優先權日2009年12月3日
發明者何丹農, 劉曉晟, 沈新程, 程杰軍, 許建榮, 金彩虹, 龍玲 申請人:上海納米技術及應用國家工程研究中心有限公司