專利名稱：15-氧代繡線菊內酯抑制Wnt信號途徑的新應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及 藥物領域，更具體的說，本發明涉及15-氧代繡線菊內酯作為新型Wnt 信號途徑抑制劑的應用。
背景技術：
Wnt信號途徑是在生物體進化過程中高度保守的信號轉導途徑，調節控制眾多生 命活動過程。動物體早期發育中，Wnt信號決定背腹軸的形成、胚層建立等一系列重要事件； 并直接控制增殖、分化、凋亡與抗凋亡等細胞的命運。Wnt信號分子是一類分泌型糖蛋白家族，它的十幾個成員通過與細胞膜上不同的 受體作用參與不同信號途徑。這些途徑主要分為依賴于聯蛋白/TCF轉錄復合物的經 典Wnt信號途徑(Wnt/β-聯蛋白)及不依賴于β-聯蛋白/TCF轉錄復合物的非經典Wnt 信號途徑(Wnt/JNK途徑)和Wnt/Ca2+信號途徑。經典Wnt信號研究較為透徹，它的異常 激活是Wnt信號途徑參與腫瘤，例如結腸癌、乳腺癌和肺癌，以及一些家族性遺傳病如阿爾 茨海默病或多囊腎病的產生、發展的主要方式。經典Wnt信號傳導途徑在調控骨發育中也 起著重要作用。在經典Wnt途徑中沒有Wnt信號時，APC、GSK3 β、CK I和軸蛋白(Axin)蛋白形成 一個降解復合物，APC和軸蛋白作為復合物中的支架蛋白使得CKI能夠特異地磷酸化胞漿 中β -聯蛋白的Ser-45然后GSK3 β再對其Thr-41、Ser_37和Ser-33進行磷酸化[1-3]。 磷酸化形式的β-聯蛋白被F-box蛋白β-TrCP所識別后經泛素化，最終通過蛋白酶體降 解途徑被降解[4-6]。聯蛋白的C端包含有一個轉錄激活結構域[7]，但是它本身并不 結合DNA而是結合到轉錄因子TCF/LEF上。其它蛋白質可以通過與這個轉錄復合物相互結 合來調節他們在特定啟動子上的轉錄活性。乙酰基轉移酶CBP可以乙酰化β-聯蛋白的 lys-49從而導致它們在出c-MYC位點上轉錄激活能力增加[8]。CBP被募集到特定的啟動 子并且乙酰化組蛋白使得染色質松散從而轉錄復合物能夠更好地結合啟動子序列[9]。核 內的 β-聯蛋白/TCF 的活性受到了 Iegless(Lgs) [10]和 pygopus (pygo) [10-13]調節。其 中legless作為連接β -聯蛋白和pygopus的橋梁，而pygopus則認為其NHD可能結合某 個調節蛋白來促進聯蛋白的激活作用。TCF必須結合聯蛋白才能發揮轉錄激活作 用[7，14]。沒有Wnt信號時，TCF/LEF上結合著廣泛表達的抑制蛋白Groucho [15，16]，它能 夠通過募集組蛋白去乙酰化酶導致染色質凝集從而抑制TCF的靶基因的轉錄[17]。當Wnt 蛋白同時結合到它的七次跨膜受體Frizzle和共受體LRP5、LRP6上時[18-24]，軸蛋白會 移動到細胞膜附近并與LRP5相互作用并隨之變得不穩定，同時Wnt結合到Frizzle上會導 致Dsh過度磷酸化從而抑制了 GSK3 β的活性而β-聯蛋白得以逃脫被降解的命運并積累 起來，隨后進入細胞核與TCF/LEF開啟下游靶基因的轉錄[25，26]。經典Wnt信號下游的靶基因如c-myc，細胞周期蛋白Dl，MMP-7等參與細胞生長、 增殖、血管生成等生理過程，Wnt/β-聯蛋白途徑的異常激活與癌癥有著重要的關系。現已 發現結腸癌，乳腺癌，肺癌等十幾種高發性癌癥都與Wnt/β-聯蛋白異常激活有關系。超過90%的結腸癌(CRC)病人體內細胞都含有一個能夠激活經典Wnt信號的突變，最終導致 β-聯蛋白在細胞核內穩定和積累。核內β-聯蛋白是經典Wnt信號被激活的標志，而且 Wnt信號分子突變造成的輕微異常也可以看到核內聯蛋白的明顯積累。由于經典Wnt 信號的突變經常出現在CRC上，所以CRC成為研究Wnt/β -聯蛋白信號異常激活與癌癥關 系較合適的模型。[27]Wnt異常激活可產生致癌作用，在動物模型和組織細胞系中，Wnt和致瘤性轉化有 直接關系。目前研究表明，Wnt基因及其調控因子異常與人類腫瘤的發生可能相關。例如， Wnt-2和Wnt-5a可能與結腸癌發生、發展有關[28]。DKK-I失活在結腸癌進展中也可能起 重要作用[29]。Wntll在胃癌細胞株MKN45和宮頸癌細胞株SKG-IIIa中表達都有上調，并 且在很多人類原發性 腫瘤如結腸腺瘤，腎細胞癌中mRNA的水平都有上調[30]。Wnt2在胃 癌中由于腫瘤和基質的相互作用其mRNA水平有上調，并且在結腸癌息肉，結腸癌A-C期以 及結腸癌向肝的轉移過程中也經常表達上調，其已成為胃癌和結腸癌的標記物[31]。APC基因與結腸癌發生的關系極為密切，其突變后可導致聯蛋白在細胞核內 穩定和積累，造成結腸上皮細胞過度增生，形成息肉，最終形成腫瘤。大約80%散發性結腸 癌中可檢測到APC基因缺失突變或失活，而APC基因的缺失或失活被公認為是結腸癌發生 的早期事件。軸蛋白是APC/軸蛋白/GSK降解復合體的重要成員，一些結腸和直腸癌細胞系中 沒有發生APC或β-聯蛋白突變，而是軸蛋白基因發生了突變。這些突變導致Dsh或者GSK 結合位點的消失，導致聯蛋白的核累積[32]。同樣在沒有CTNNBl突變的HCC (肝細胞 癌)中也發現有軸蛋白的突變。β-聯蛋白本身的基因(CTNNBl)突變也是導致其在胞質內異常蓄積的原因。在 70-84%的結腸和直腸癌中β -聯蛋白細胞膜的正常定位表達減少，而在66-79%結腸和直 腸癌組織中胞質和細胞核β-聯蛋白異常表達增高。Tcf 家族包含 4 個不同的蛋白 Tcf-1、Tcf-2、Tcf_3、Tcf-4/Lef。Tcf-4 基因在結 腸癌的發生中起重要作用[33]。各種原因過度激活Wnt信號途徑后均可致β-聯蛋白在胞 質內累積，游離的β-聯蛋白進入核內與Tcf-4結合形成復合物，啟動下游靶基因的異常轉 錄從而促進腫瘤發生及細胞周期進程。這些靶基囚多與細胞凋亡、細胞生長、血管生成及腫 瘤侵襲轉移有關，如c-myc、細胞周期蛋白Dl、MMP-7等。因為Wnt/β-聯蛋白信號途徑與眾多癌癥相關，所以近年來研究其在癌癥發生中 的作用和針對其的治療策略成為國內外的研究熱點。現有的治療策略包括多種利用非細胞 毒性藥物對該途徑進行調控，例如非留體類抗炎藥物，如消炎痛(indomethacin)和阿司匹 林[34，35]以及舒林酸(sulindac) [36]；植物類化合物，例如姜黃素(curcumin) [37]、綠花 椰菜(broccoli)的成分之一萊菔硫烷(sulforaphane) [38]和β -拉帕醌[39]；以及針對 該途徑重要信號分子的分子靶向性治療，例如抗體治療；小分子抑制劑，如，酪氨酸激酶抑 制劑格列衛(Glivec/Gleevec) [40]、血管內皮抑素(endostatin) [41,42]；和基因治療，例 如以聯蛋白為靶點的基因治療方法，以Tcf-4為靶點的基因治療方法[43，44]等。綜上所述，下調Wnt/β-聯蛋白信號途徑的調控靶點和手段主要有三種1.在細 胞外和細胞膜水平上通過Wnt抗體、sFRP和DKK過表達在細胞外阻斷Wnt信號通路；2.在 胞漿水平上是通過過表達APC、軸蛋白，siRNA阻斷β-聯蛋白水平來抑制Wnt信號通路；3.通過小分子化合物或是病毒在細胞核內阻斷下游聯蛋白/TCF轉錄復合物的活性或 是反義干擾等抑制Wnt下游目的基因的轉錄[45，46]。由于很多癌癥中β-聯蛋白都發生 了突變，所以對β-聯蛋白上游的信號進行抑制效果不大，而過表達APC等抑制因子又不具 有實際應用價值。因此最有可行性和廣泛應用性的是最后一種。針對該信號途徑的分子靶 向治療策略有望為腫瘤的治療提供新的有效途徑，非留體類抗炎藥物和植物類化合物等多 種非細胞毒性藥物也將為腫瘤的預防和綜合治療起到極其重要的作用。
發明內容
本發明第一方面涉及15-氧代繡線菊內酯在制備藥物中的應用，所述藥物用于預防或治療由評壯/^-聯蛋白信號途徑異常激活引起的或需要特異性抑制評壯/^-聯蛋白信 號途徑的疾病或失調。在一個優選實施方案中，所述疾病選自阿爾茨海默病、多囊腎病或癌 癥，更優選是結腸癌。本發明另一方面涉及一種用于預防或治療由Wnt/β-聯蛋白信號途徑異常激活 引起的或需要特異性抑制Wnt/β -聯蛋白信號途徑的疾病或失調的藥物組合物，其特征在 于，所述藥物組合物包含治療有效量的15-氧代繡線菊內酯，以及藥學上可接受的賦形劑。 在一個優選的實施方案中，所述疾病選自阿爾茨海默病、多囊腎病或癌癥。在更優選的實施 方案中，所述癌癥選自結腸癌。本發明還有一個方面涉及15-氧代繡線菊內酯在制備用于抑制Wnt/ β -聯蛋白信 號途徑報告基因Top-flash活性的物質中的應用。本發明還有一個方面涉及15-氧代繡線菊內酯在制備用于調控骨發育的物質中 的應用。本發明的其他優點和益處可以從下文的詳細說明和實施例獲知。
圖1. 15-氧代繡線菊內酯能夠抑制Wnt信號途徑報告基因Top-flash的活性并且 不影響β-聯蛋白的蛋白質水平和細胞核質分布。A.在ΗΕΚ293Τ細胞中轉染Top-flash報 告基因17小時后加入特定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照DMS0。1小時后加入Wnt 條件培養基或IOmM的LiCl。6小時后收細胞檢測報告基因活性。B. HEK293T加入特定濃度 的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照，1小時后加入對照化合物和Wnt化合物。6小時后分細 胞質和細胞核檢測β-聯蛋白蛋白質水平，β-微管蛋白作為細胞質標記物，SPl作為細胞 核標記物。圖2. 15-氧代繡線菊內酯能夠抑制Wnt途徑異常激活腫瘤細胞中的Top-flash 的活性并且不影響β-聯蛋白的蛋白質水平和細胞核質分布。Α.左圖為SW480細胞轉染 Top-flash/Fop-flash報告基因加入含血清DMEM終止轉染同時加入特定濃度15-氧代繡 線菊內酯和溶劑對照3小時的報告基因活性結果(以DMSO的Top-flash和Fop-flash的 比值為1)，右圖為Caco-2細胞終止轉染時加入特定濃度15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照 24小時的報告基因活性結果。B. SW480細胞加入特定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑 對照3小時后分細胞質和細胞核，檢測β-聯蛋白的蛋白質水平，β-微管蛋白作為細胞質 標記物，SPl作為細胞核標記物。1為DMS0，2為1.25yg/ml的15-氧代繡線菊內酯，3為2.5yg/ml的15-氧代繡線菊內酯，4為5 μ g/ml的15-氧代繡線菊內酯。圖3. 15-氧代繡線菊內酯特異性抑制Top-flash的活性并且劑量依賴性地抑制 Wnt靶基囚的蛋白質或mRNA水平。Α. HEK293T細胞轉染報告基囚17小時后，加入2. 5 μ g/ ml的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照1小時，然后加入對應的刺激Wnt化合物，伊屋諾霉素 (Ionomycin) 1 μ g/ml，福斯高林(Forskolin) 10 μ M 6小時后檢測報告基因活性。B. SW480 細胞加入特定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照3小時后，收細胞作RT-PCR檢測軸蛋 白2mRNA的水平。C. SW480細胞加入特定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照后培養指 定時間收樣，作Western印跡檢測。圖4. 15-氧代繡線菊內酯能夠影響β -聯蛋白和TCF4的相互作用。A. SW480細 胞加入特定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照，特定時間收細胞作內源免疫共沉淀實 驗(1 =DMSO, 2 1. 25 μ g/ml的15-氧代繡線菊內酯，3 :5 μ g/ml的15-氧代繡線菊內酯)。
B.SW480細胞加入指定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照2小時，然后進行ChIP實驗， 再用實時PCR的方法檢測其相對含量。圖5 :15_氧代繡線菊內酯能夠影響結腸癌細胞的生長能力。A、C 縱坐標表示細 胞的MTT讀數的相對值，以O小時為1，橫坐標為時間。B、D:縱坐標為不同濃度的生長抑制 率，由1減去其相對于DMSO點的讀數比值得來，橫坐標為不同的濃度。實驗為三次獨立實 驗平均值(平均值士 SE)。圖6 :15_氧代繡線菊內酯能夠抑制CdC2、Cdc25c的表達并導致腫瘤細胞細胞周期 阻滯在G2/M期。A. SW480細胞加入特定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照作用特定時 間后收細胞Western印跡檢測。B. SW480細胞加入特定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑 對照36小時后收細胞固定并PI染色，通過FACS檢測。C. B圖的統計圖。實驗為兩次獨立 實驗平均值。圖7. 15-氧代繡線菊內酯能夠抑制腫瘤細胞的非貼壁依賴性生長能力。A.軟瓊脂 實驗鋪盤的同時加入特定濃度的15-氧代繡線菊內酯和溶劑對照，18天后結晶紫染色計數 統計。B. A圖的統計圖(平均值士SE)。圖8. 15-氧代繡線菊內酯能夠抑制裸鼠中SW480移植瘤的生長。A.兩組腫瘤重量 的統計圖(平均值士 SE)P = 0. 03 < 0. 05。B.腫瘤體積-注射天數統計圖(平均值士 SE)。
C.裸鼠體重統計圖(平均值士SE)。D.處理組與對照組中代表性的腫瘤圖片。
具體實施例方式發明人經過深入研究，首次發現15-氧代繡線菊內酯能抑制經典Wnt信號途徑。由于經典Wnt信號途徑與多種疾病，例如腫瘤和以及一些家族性遺傳病，如阿爾茨海默病或 多囊腎病以及調控骨發育有關，因此發現15-氧代繡線菊內酯能抑制經典Wnt信號途徑為 開發新的藥物來治療這些疾病提供了新的思路。具體地說，發明人通過哺乳動物細胞報告基因篩選系統發現15-氧代繡線菊內酯 能夠抑制經典Wnt信號途徑報告基因Top-flash的活性，通過Western印跡發現其不影響 β-聯蛋白的蛋白質水平和細胞核質分布。發明人還發現15-氧代繡線菊內酯能夠抑制Wnt 途徑異常激活的腫瘤細胞中的Top-flash的活性并且不影響β -聯蛋白的蛋白表達水平及 其在細胞核質中的分布。15-氧代繡線菊內酯特異性抑制Wnt信號途徑報告基因Top-flash的活性并且劑量依賴性地抑制Wnt靶基因的蛋白或mRNA水平。另外，15-氧代繡線菊內酯 能夠影響聯蛋白和TCF4的相互作用。基于上述發現，發明人完成了本發明。本發明涉及15-氧代繡線菊內酯在制備藥物中的應用，所述藥物用于預防或治療 由^壯/^-聯蛋白信號途徑異常激活引起的或需要特異性抑制評壯/^-聯蛋白信號途徑的 疾病或失調。此處的“疾病或失調”包括任何可從本發明的處理獲益的病征。其包括但不局限 于各種慢性和急性失調或疾病。在一個較佳的實施方案中，所述疾病或失調是家族性遺傳 病如阿爾茨海默病或多囊腎病。在另一個較佳的實施方案中，所述疾病或失調是癌癥，如肺 癌、乳腺癌、結直腸癌、黑色素瘤、結腸癌、間皮瘤、卵巢癌、胃癌、腎癌、膀胱癌、前列腺癌、子 宮癌、甲狀腺癌、胰腺癌、宮頸癌、食道癌、頭頸癌、肝細胞癌、腦腫瘤、陰道癌、睪丸癌、肉瘤、 白血病、淋巴瘤、膠質瘤和成膠質細胞瘤。在更優選的方案中，所述癌癥是結腸癌。本發明還提供了一種用于預防或治療由Wnt/β-聯蛋白信號 途徑異常激活引起 的或需要特異性抑制Wnt/β-聯蛋白信號途徑的疾病或失調的藥物組合物，其特征在于， 所述藥物組合物包含治療有效量的15-氧代繡線菊內酯，以及藥學上可接受的賦形劑。術
語“包含”指“含有”和“由......構成”，例如“包含” X的組合物可以完全由X構成，或者
可以含有X之外的物質，例如Χ+Υ。本文所用的術語“治療有效量”指治療劑治療、緩解或預 防目標疾病或狀況的量，或是表現出可檢測的治療或預防效果的量。該效果例如可通過化 學標記或抗原水平來檢測。治療效果也包括生理性癥狀的減輕。對于某一對象的精確有效 量取決于該對象的體型和健康狀況、病癥的性質和程度、以及選擇給予的治療劑和/或治 療劑的組合。因此，預先指定準確的有效量是沒用的。然而，對于某給定的癥狀而言，可以 用常規實驗來確定該有效量，臨床醫師是能夠判斷出來的。所述藥學上可接受的賦形劑(或運載體)指用于治療劑給藥的賦形劑，其本身及 其用量不應誘導接受該組合物的個體產生有害的抗體，且給藥后沒有過分的毒性。藥學上 可接受的賦形劑通常包括無毒的固體、半固體或液體填充劑、稀釋劑、包裹材料或任何常規 類型的制劑輔助物。合適的賦形劑包括但不僅限于水、葡萄糖、甘油、鹽水、乙醇及其組合。 所述賦形劑還可含有其他試劑如濕潤劑或乳化劑、PH緩沖劑或增強制劑效力的佐劑。其他 材料如抗氧化劑、保濕劑、粘度穩定劑和類似試劑可根據需要添加。脂質體也包括在藥學上 可接受的賦形劑的定義中。在一個優選的實施方案中，本發明的藥物組合物還可包含其它一種或多種活性組 分，例如本領域已知的其它Wnt信號途徑抑制劑/拮抗劑，如分泌的Frizzled相關蛋白 (sFRP)家族、WNT-抑制因子-I(WIF-I)、Dickk0pf (DKK)家族等；非甾體類抗炎藥物，如消炎 痛(indomethacin)和阿司匹林[34，35]以及舒林酸(sulindac)；植物類化合物，例如姜黃 素(curcumin) [37]、綠花椰菜(broccoli)的成分之一萊菔硫烷(sulforaphane)和β-拉 帕醌；以及針對該途徑重要信號分子的分子靶向性治療，例如抗體治療；小分子抑制劑，如 酪氨酸激酶抑制劑格列衛(Glivec/Gleevec)、血管內皮抑素(endostatin)等。所述其它活 性組分的含量可由本領域技術人員根據具體情況和常規試驗來確定。通常，可將藥物組合物制成可注射劑，例如液體溶液或懸浮液；還可制成在注射前 適合配入溶液或懸液中、液體載體的固體形式。另外，本發明還涉及15-氧代繡線菊內酯在制備用于抑制Wnt/β-聯蛋白信號途徑報告基因Top-flash活 性的物質中的應用，以及15-氧代繡線菊內酯在制備用于調控骨 發育的物質中的應用。本發明還提供了一種篩選抑制經典Wnt信號途徑的抑制劑的方法，所述抑制劑阻 斷β-聯蛋白/TCF轉錄復合物的活性，但不影響聯蛋白的蛋白質水平以及細胞核質分 布，所述方法包括1).用報告基因Top-flash轉染細胞；2).用含LiCl的Wnt條件培養基溫育轉染后的細胞；3).測定報告基因活性，包括a).用指定濃度的待篩選化合物作用于細胞指定時間；b).收集細胞；C).裂解細胞；d).測定細胞裂解液中GFP蛋白的熒光，作為細胞表達量的內標；e).在此裂解液中加熒光素酶的底物；f).測定熒光素酶活性；g).用GFP強度使之標準化。4).對細胞進行內源免疫共沉淀以檢測β-聯蛋白的蛋白質水平；5).分離細胞的細胞質和細胞核，Western印跡檢測β -聯蛋白的核質分布情況；6).進行ChIP試驗以檢測內源性β-聯蛋白與TCF4的相互作用是否受到影響。檢測蛋白與蛋白之間相互作用可采用本領域技術人員熟知的技術。在本發明的具 體實施方式中，采用免疫沉淀技術。其原理是在保持蛋白-蛋白相互作用的條件下，收獲 和裂解細胞，從細胞提取液中特異性地免疫沉淀目的蛋白，然后通過電泳等方法分離免疫 沉淀物。具有已知特性的蛋白的共沉淀，可采用Western印跡來檢測。本發明采用ChIP實驗(染色質免疫沉淀分析)來研究DNA與蛋白質的相互作用， 它是基于體內分析發展起來的方法，能真實、完整地反映結合在DNA序列上的調控蛋白，是 目前確定與特定蛋白結合的基因組區域或確定與特定基因組區域結合的蛋白質的最好方 法。本發明首次闡明15-氧代繡線菊內酯抑制腫瘤的機理是能抑制經典Wnt信號途 徑，從而為進一步研究Wnt信號途徑提供了有利的工具，并為找尋能抑制該信號途徑進而 能治療經典Wnt信號途徑相關疾病的化合物提供了方向。下面結合具體實施例進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅是為了說明本發 明而非限制本發明的范圍。實施例所采用的具體實驗方法和實驗條件是本領域常規的方法 和條件，或制造廠商所建議的方法和條件。除非另有定義，文中所用的專業與科學用語與本 領域技術人員所知的相同。實施例1.實驗材料1. 1 試劑蛋白酶抑制劑(完全蛋白酶抑制劑混合片劑)和NP-40購自印第安納州印第安納 波利斯市的羅氏公司(Roche，Indianapolis, IN)，含Wnt-3a的條件化培養基用能夠分泌 Wnt-3a的細胞株(購自ATCC)制備，蛋白A/G瓊脂糖購自加利福尼亞州圣迭戈市的圣克魯茲生物技術有限公司(Santa Cruz Biotechnology, Inc, San Diego, CA) 15-氧代繡線菊 內酯獲自中科院昆明植物研究所郝小江研究員提供。1. 2 抗體β-微管蛋白單克隆抗體為實驗室自備，熒光二抗IRDye 800CW偶聯的親和純化 抗小鼠或家兔IgG購于賓夕法尼州吉爾伯特斯維爾市的羅克蘭德有限公司(Rockland， Inc，Gilbertsville，PA)。Cdc2、Cdc25C、細胞周期蛋白Dl、Bcl 2抗體購自圣克魯茲生物 技術公司。1. 3 質粒pTop-f lash、pFop-f lash、pNFAT-luc由耶魯大學的吳殿青教授提供。1.4 引物--
權利要求
1.15-氧代繡線菊內酯在制備藥物中的應用，所述藥物用于預防或治療由Wnt/β-聯 蛋白信號途徑異常激活引起的或需要特異性抑制Wnt/ β -聯蛋白信號途徑的疾病或失調。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述疾病選自阿爾茨海默病、多囊腎病或癌癥。
3.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述癌癥選自結腸癌。
4.一種用于預防或治療由Wnt/β-聯蛋白信號途徑異常激活引起的或需要特異性抑 制Wnt/ β -聯蛋白信號途徑的疾病或失調的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包 含治療有效量的15-氧代繡線菊內酯，以及藥學上可接受的賦形劑。
5.如權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，所述疾病選自阿爾茨海默病、多囊腎 病或癌癥。
6.如權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述癌癥選自結腸癌。
7.15-氧代繡線菊內酯在制備用于抑制Wnt/β-聯蛋白信號途徑報告基因Top-flash 活性的物質中的應用。
8.15-氧代繡線菊內酯在制備用于調控骨發育的物質中的應用。
全文摘要
本發明公開了15-氧代繡線菊內酯能抑制經典Wnt信號途徑，因此15-氧代繡線菊內酯可用于制備調節經典Wnt信號途徑的藥物并可用于研究經典Wnt信號途徑。本發明也為篩選調節Wnt信號轉導途徑的藥物、或預防和/或治療經典Wnt信號途徑相關疾病的藥物提供了新的思路。
文檔編號A61P19/08GK102058580SQ20091019866
公開日2011年5月18日 申請日期2009年11月12日 優先權日2009年11月12日
發明者劉海洋, 李林, 王偉, 郝小江 申請人:中國科學院上海生命科學研究院, 中國科學院昆明植物研究所