專利名稱：：苦豆堿在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及醫藥領域，具體涉及苦豆堿在制藥中的新用途。
背景技術：
：潰瘍性結腸炎(Ulcerativecolitis,UC)發生于結腸部位，是一種原因不明的慢性非特異性自身免疫性疾病，與遺傳、免疫、感染、環境等多種因素有關，其主要癥狀為腹瀉、粘液膿血便、腹痛和里急后重等，主要病理特點為結腸粘膜慢性炎癥及潰瘍形成。流行病學表明，UC的年發病率為220/10萬，患病率為50~100/10力'，好發于1530歲人群。近年來隨著生活水平的提高、飲食結構及生活方式的改變，UC在我國的發病率有逐年上升的趨勢。由于UC病程長，病變范圍廣，嚴重影響患者生活質量，且長期患者中有510%發生癌變，臨床上至今尚無有效的治療措施，被世界衛生組織列為現代難治病之一。目前治療UC的西藥主要有柳氮磺胺類、糖皮質激素類藥物以及免疫抑制劑，這些藥物效果都不夠理想，且副作用較大。柳氮磺胺吡啶是目前臨床最常用的藥物，適用于輕、中度及慢性UC患者，一般用法為口服，4g/d，服后大部分在小腸不吸收，而被大腸菌群代謝成磺胺吡啶(SP)與5-氨基水楊酸(5-ASA)，后者可通過干擾炎癥遞質一前列腺素的合成而發揮對UC的治療作用。柳氮磺胺吡啶治療UC的有效率較低，服藥4g/d以內，有效率不及50%，但副作用可達37.5%，且復發率為33%。該藥療效及副作用與用量成王比，約有10-15%患者因皮疹、胃腸不適等副作用而停藥。苦豆堿(al叩erine)是從豆科植物苦豆草(SophoraalopecuroidesL)的種子及地上部分提取的有效單體成分，其化學結構如式(l)所示。該化合物為無色棱柱狀結晶，熔點7173°C，旋光度[a]D+86.59º，具有明顯的抗炎、抗變態反應、抗病毒、清熱、止痛、殺蟲、鎮痛、鎮靜、降溫、抗菌、抗癌及抗心律失常等作用。文獻研究表明苦豆堿對花生四烯酸(AA)誘導的兔血小板聚集有極強的抑制作用，對血小板PG代謝有抑制作用，并能明顯抑制TXA2，并將其降解為TXB2，此作用可能和其對血小板聚集的抑制有關，對AA誘導的血小扳聚集有較強的選擇性抑制作用，苦豆堿(aloperine)對多種致炎劑引起的急性炎癥和III、IV型變態反應及佐劑關節炎均有顯著的抑制作用，其抗炎、抗變態反應作用不依賴于垂體一腎上腺皮質系統，主要與其抑制WBC游走，穩定溶酶體膜，促進自由基清除，抑制PG、組胺、淋巴因子等炎癥介質的臺成或釋放及致炎活性有關。苦豆堿有抑制巨噬細胞產生白細胞介素-l的作用，并能直接抑制小鼠脾細胞增殖反應，同時也抑制脾細胞對刀豆蛋白A誘導的T細胞增殖反應，也明顯降低脾細胞產生白細胞介素-2的能力，同樣抑制細菌脂多糖誘導的B淋巴細胞增殖反應。目前尚無苦豆堿用于治療UC的報道。
發明內容本發明的目的是提供苦豆堿在制藥中的新用途。本發明的另一目的是一種苦豆堿的結腸耙向制劑。實現上述目的的具體方案是苦豆堿在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。本發明人發現苦豆堿具有治療潰瘍性結腸炎的作用，可用于制備治療潰瘍性結腸炎的藥物。為了使苦豆堿更好地發揮其治療潰瘍性結腸炎的作用，本發明還提供了一種苦豆堿的結腸靶向制劑，該制劑由片芯和包裹在片芯外的阻滯層構成，片芯和阻滯層的質量比為l:l1:0.4;所述片芯由分別占片芯總質量1070%的苦豆堿、1080°/。的瓜爾膠和5~30%的糊精組成，所述阻滯層為瓜爾膠。本發明所述制劑的制備方法，該方法由以下步驟組成取瓜爾膠和糊精，過80目篩；取苦豆堿溶于適量溶劑，加入片芯配方量的瓜爾膠和糊精混勻制成軟材，制粒，壓片，最后按阻滯層配方量取瓜爾膠包衣；所述的溶劑為水、濃度為520%(w/v)的可溶性淀粉溶液或濃度為1080%(v/v)的乙醇溶液。本發明所述制劑為水凝膠骨架雙層片，其阻滯層為可生物降解的瓜爾膠，可被結腸內特有的細菌所分泌的糖苷酶分解。所述制劑口服后其表面遇消化液濕潤而發生水化作用形成水凝膠層，由于凝膠的屏障效應，從而控制藥物釋放，減少苦豆堿在上消化道的吸收；到達結腸后，阻滯層被結腸內的特有的糖苷酶降解，在病變區直接釋放出苦豆堿，并使苦豆堿以較高濃度分散于整個結腸，有效提高苦豆堿治療潰瘍性結腸炎的效果。為了更好地理解本發明，下面將通過藥理實驗進一步闡明本發明所具有的技術效果。(一)苦豆堿治療潰瘍性結腸炎小鼠實驗材料與方法1.1材料1.11實驗動物清潔級雌性8-9周齡C57BL/6小鼠，16-18g，南方醫科大學實驗動物中心(動物合格證號SCXK-2006-0015)。動物購回后，22。C士rC恒溫飼養，自由進食和飲水。1.12藥物葡聚糖硫酸鈉(DSS)分子量5000，(批號LOT023k0632，AmershamBiosciencesPharmaciaBiotech,Sweden);苦豆堿(寧夏鹽池制藥廠，批號070506);陽性對照藥柳氮磺胺嘧啶(上海福達制藥有限公司，批號070404);EnzyineLinkedImmunosorbentAssaySIgA，haptoglobinKit，Hematoxylin,eosin(SigmaChemicalCo);其它試劑均為國產分析純1.2.2實驗用藥物劑量成人以70kg體重計算，按照"人和動物間體表面積折算的等效劑量比率表"可算出以下各藥小鼠的生物等效量。苦豆堿成人每日用量300mg小鼠的生物等效量300x0.0026x50-39mg/kg小鼠實驗用藥的大、中、小劑量分別設定為78、39、20mg/kgSASP成人每日用量4g小鼠的生物等效量4gx0.0026x50-0.52g/kg2.實驗方法和結果2.1觀察苦豆堿對小鼠潰瘍性結腸炎的作用方法C57BL/6小鼠48只，適應性喂養1周后，隨機分為5組，每組10只，即正常組，模型組，SASP組，苦豆堿高、低劑量組。正常組給予蒸餾水7天，然后予飲用水10天，如此循環4次，常規飼料喂養；其余各組給予3%DSS蒸餾水溶液飲用7天，然后予飲用水飲用10天(此為一個循環)，如此循環4次誘導潰瘍性結腸炎模型。于給DSS后第3天開始各治療組灌胃給藥，按0.1ml/10g體重灌服相應藥液；模型對照組給予和JF常組等量的蒸餾水，持續8周，于第4個循環末處死小鼠。實驗期間觀察每周觀察小鼠體重，計算攝食量、食物利用率，每籠飲水量，計算攝入的DSS，計算終體重與起始體重比值。觀察小鼠外觀，測定大便隱血，依據體重、糞便黏度、大便隱血計算疾病活動指數，評價其活動度，見表1。剖開腹腔，冰上分離全結腸，測定全結腸長度(回腸與結腸連接部至肛門)，稱重，拍照，計算每份重量mg/長度mm比值；計算脾臟重量。部分組織用PBS快速清洗干凈，-70'C保存，待用。去距肛門lcm處腸段制作標本，在10%中性福爾馬林中過夜固定，石蠟包埋，連續切片(厚度3um)，進行HE、AicianBlue二種染色組織觀察組織學變化。ScanningElectronMicroscopy(SEM)觀察腸粘膜超微結構，用改良的Cooper方法進行病理評分，見表2。表1DAI評分標準得分大便性狀隱血或血便0正常陰性1軟便陰性2軟便隱血陽性3腹瀉隱血陽性4腹瀉血便注DAI為兩項得分之和，總分為08分；正常糞使硬度適中、丸狀；軟便漿糊狀但肛口無糞跡；腹瀉稀薄便且粘于肛周。表2病理評分標準.(改良的Cooper方法)得分病損分級激淵器.鵬《0隱窩無損害01隱窩囊狀擴張1202喪失基底部1/3隱窩21403喪失基底部2/3隱窩41604喪失全部隱窩，上皮層仍完整61805喪失全部隱窩和上皮層81100注病理評分為兩項得分之和，總分為010分結果除正常組外，其余各組均有不同程度的攝食減少。第一周各組小鼠體重差異無顯著性(p〉0.05)，正常組小鼠各周體重逐漸增加，模型組小鼠體重略有下降，與正常組比較差異有顯著意義(pO.01);各用藥組小鼠體重均有不同程度的增加，各治療組體重增加率均小于正常組,但大于模型對照組，表明苦豆堿能抑制DSS致UC小鼠的體重下降。見表3-4。自由飲用DSS開始各組小鼠開始出現大便松軟，第5、6天多數小鼠出現大便隱血、腹瀉。1個循環之后，模型組全部小鼠體重均明顯下降，食欲減退，懶動，脫毛，大量血便，四個循環之后模型組仍腹瀉，各別血便，體重較前三個循環有所回升，炎癥呈現慢性化進程。治療各組較模型組程度輕，個別出現腹瀉、血便。正常組無上述異常變化。結果見表5-6。小鼠剖腹后，觀察模型組較正常組全結腸明顯縮短，腸壁變厚，腸腔狹窄。全結腸長度測量結果揭示模型組較對照組明顯縮短，脾臟系數較對照組增加，治療各組較模型組程度輕。表明苦豆堿能較好地降低DSS致潰瘍性結腸炎小鼠大腸重量長度比值，減少大腸腫脹、纖維化等，并能較好地抑制DSS致UC小鼠的脾臟系數，降低UC小鼠的免疫過度活化。結果見表7-8.光鏡下造模組小鼠結腸炎癥存在，表現為慢性炎癥。粘膜出現廣泛壞死、糜爛，腺體明顯萎縮，炎癥細胞浸潤全層，呈現以淋巴細胞為主的非特異性炎癥，并可見到淋巴濾泡，治療各組潰瘍面及病變程度明顯減輕。模型組的DAI評分和病理評分與治療各組有顯著差異(p<0.05)，苦豆堿高低劑量組與SASP組比較均無統計學差異(p>0.05)，提示苦豆堿在較低劑量時就可以達到與SASP治療潰瘍性結腸炎的同等效果，且未見明顯毒副作用，結果見表IO。表3苦豆堿對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠食量的影響(Mean±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注*尸<0.05*<0.05**尸<0.01模型組與正常組比較；a尸O.05AA尸O.01模型組與用藥組比較。從表3可知，除第一周、第二周、第五周外，模型組和用藥組小鼠食量與正常組相比差異無顯著性；模型組與用藥組在第五周、第六周小鼠食量比較，個別組有顯著性差異，其余個時間點模型組與用藥組小鼠食量比較無顯著性差異。上述結果表明苦豆堿對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠食量無明顯影響。表4苦豆堿對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠體重增長率的影響(MeaniSD)組<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注*/><0.05**尸<0.01模型組與正常組比較；VO.05"尸O.01模型組與用藥組比較。由表4可知，從第二周至第九周模型組小鼠體重增長率為負增長，與正常組小鼠相比有顯著性差異。各用藥組小鼠體重增長率均與模型組相比有顯著性差異，表明苦豆堿能較好地抑制DSS致UC小鼠的體重下降。表5苦豆堿對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠大便潛血的影響(Mean土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注*戶<0.05**尸<0.01模型組與正常組比較；^M).05"尸O.01模型組與用藥組比較由表5可知，從第二周至第九周模型組小鼠體重增長率為負增長，與正常組小鼠相比有顯著性差異。各用藥組小鼠體重增長率均與模型組相比有顯著性差異，表明苦丑堿能較好地抑制DSS致UC小鼠的體重下降。表6苦豆堿對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠大便粘度評分的影響(Mean土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注*尸<0.05**尸<0.01模型組與正常組比較；VO.05"尸O.01模型組與用藥組比較從第一周至第九周模型組小鼠大便粘度，與正常組小鼠相比有顯著性差異。各用藥組小鼠大便粘度均與模型組相比有顯著性差異，表明苦豆堿能有效降低DSS致UC小鼠的大便粘度。表7苦豆堿對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠大腸重量長度比的影響(Mean士SD)組別n重量長度比值(g/cm)正常組100.027±0.003模型組150.038±0扁**SASP組100.026±0.002"苦豆堿低劑量組100.023±0.002"苦豆堿高劑量組100週土0.003"*尸<0.05**尸<0.01模型組與止常組比較；"<0.05"尸<0.01模型組與用藥組比較.從上表可知，模型組與正常組小鼠相比，大腸重量長度比值有顯著性差異。各用藥組小鼠大腸重量長度比值與模型組相比有顯著性差異，表明苦豆堿能較好地降低DSS致潰瘍性結腸炎小鼠大腸重量長度比值，減少大腸腫脹、纖維化等。表8苦豆堿對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠脾臟系數影響(Mean土SD)組別n脾臟系數()正常組100.0023±0.00032模型組150.0089±0.0032**SASP組100.0038±0.0009苦豆堿低劑量組100.0029±0.0003"苦豆堿高劑量組100.0030士0扁2"*尸<0.05**尸<0.01模型組與正常組比較；^PO.05"尸O.01模型組與用藥組比較2.2苦豆堿對小鼠潰瘍性結腸炎中血漿結合珠蛋白、盲腸內容物sIgA的影響C57BL/6小鼠50只，適應性喂養1周后，隨機分為5組，每組10只，即正常組，模型組，SASP組、苦豆堿高、低劑量組。造模及給藥方法同前。實驗第8周末，取血和小鼠盲腸內容物，采用ELISA檢測血漿結合珠蛋白(haptoglobin,Hp)含量(南京建成生物科技)、盲腸內容物sIgA的含量(南京建成生物工程研究所)。具體步驟參照試劑盒操作說明。結果模型組小鼠血漿結合珠蛋白含量，與正常組小鼠相比有差異性(P<0.05)。各用藥組小鼠血漿結合珠蛋白含量與模型組相比有顯著性差異(PO.05,PO.Ol)，表明苦豆堿能較好地降低DSS致UC小鼠血漿結合珠蛋白含量。模型組小鼠盲腸內容物sIgA,與正常組小鼠相比有顯著性差異(P<0.05)。各用藥組小鼠小鼠盲腸內容物slgA與模型組相比有顯著性差異(PO.01),表明苦豆堿能較好地維持DSS致UC小鼠的盲腸內容物sIgA的含量。結果見表910。表9苦豆堿對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠血漿結合珠蛋白的影響(Mean土SD〉組另Un結合珠蛋A(od值)正常組70.45±0.03模型組80.65±0.12*柳氮磺吡啶組80.41±0.15A苦豆堿高劑量組70.39±0.02"苦豆堿低劑量組80息0.14"注*尸<0.05模型組與正常組比較；"<o.05AA<0.01模型組與用藥組比較。表10苦豆子對DSS致潰瘍性結腸炎小鼠盲腸內容物slgA的影響(Mean士SD)組另ijnslgA(od值)正常組71.43±0.40模型組80.67士0.13*柳氮磺吡啶組81.24土0.25"苦豆堿高劑量組61.00±0.13AA苦豆堿低劑量組80鄰土0.06"Note:*戶<0.05模型組與正常組比較；AA/M).01模型組與用藥組比較3.結論1.DSS可致小鼠慢性潰瘍性結腸炎形成。該模型組織學改變與人類相似，我們的實驗結果與文獻報道一致。2.給小鼠高、低劑量的苦豆堿，連續9周，可顯著改善DSS誘導的潰瘍性結腸炎的病理損害，其效果與SASP效果無顯著性差異(p〈0.05)苦豆堿高低劑量組與SASP組比較均無統計學差異(^X).05)，提示苦豆堿在較低劑量時就可以達到與SASP治療潰瘍性結腸炎的同等效果，且未明顯毒副作用發生。二、苦豆堿結腸定位釋放水凝膠骨架片的研制(一)苦豆堿投料方式的比較1、干燥工藝-設備烘箱，粉碎機方法取苦豆堿200g放入不銹鋼烘盤，溫度60'C，分別于干燥后48h、72h、96h、120h觀察苦豆堿變化。結果見表ll。表ll、苦豆堿不同時間干燥后性狀比較干燥時間(h)外觀水分(％)粉碎情況收率(％)48軟化25.2無法粉碎一72軟化20.6無法粉碎一96軟化16.4無法粉碎一120稍硬8.6可粉碎，易粘結52,62、溶解工藝分別取苦豆堿200g溶于lOOml、150m純化水、20%可溶性淀粉、50%乙醇中，超聲lmin，攪拌。結果苦豆堿在5min-8min內全部溶解，無沉淀。結論采用烘干法投料烘干時間長，損耗大，苦豆堿粉易粘結，不適合中試、大生產。將苦豆堿制備成溶液，溶解性好，無損耗，與瓜兒膠、糊精混合制粒，軟材粘性適中，成粒較好，容易干燥。(二)不同制備工藝引濕性試驗比較實驗材料苦豆堿微丸取苦豆堿llg，用純化水溶解。取瓜兒膠和糊精，過80目篩，混勻，加入到上述苦豆堿水溶液中制軟材，快速過22目篩，6(TC烘干，得顆粒制成微丸。苦豆堿骨架片顆粒:苦豆堿微丸加0.5X的硬脂酸鎂，壓片9mm淺凹沖壓片芯(片重0.2g)制成顆粒。苦豆堿骨架片顆粒再用llmm沖淺凹沖壓瓜爾膠衣(每片包衣量為0.08g)按實施例2制備。實驗分組1:包衣前的苦豆堿微丸；2:包衣后的苦豆堿微丸；3:苦豆堿骨架片顆粒；4:苦豆堿骨架片。吸濕率測定在已恒重的稱量瓶底部放入厚約2mm的顆粒，精密稱重后置于表2所列的分別裝有不同濃度硫酸或不同鹽的過飽和溶液干燥器內(稱量瓶打開)，于25'C恒溫培養箱中保持7天，即達平衡，再精密稱重，按下式計算吸濕百分率，結果見表12。吸濕曲線的繪制以上表中的吸濕率為縱坐標，相對濕度(RH%)為橫坐標作圖(圖1)，計算臨界相對濕度。_表12苦豆堿不同制劑的引濕性試驗比較_<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>結果表明，微丸包衣前后吸濕率無明顯改變，放置7天后最高吸濕率達33,25%，臨界相對濕度(CRH)為41%，吸濕性較強，因此微丸生產時對環境濕度要求高；采用本工藝制備的骨架片顆粒和片放置7天后最高吸濕率達23.54%，CRH為67M，吸濕性大大降低，有利于生產、儲存。(三)苦豆堿骨架片物理性狀的考察按實施例2工藝制備苦豆堿片070201和070202兩批，采用固定漏斗法測定休止角，片重差異、硬度和脆碎度依據中國藥典2005版附錄要求測定。結果表明，苦豆堿顆粒流動性好，可壓性好。所制得片片重、硬度、脆碎度符合規定。結果見表13。表13批號顆粒休止角片外觀片重差異硬度Kg脆碎度％07020128光滑有光澤，無裂片符合規定5.20.8107020225光滑有光澤，無裂片符合規定5.60.65(四)Y一閃爍掃描法確定苦豆堿水凝膠骨架片在人體內釋藥部位研究1材料苦豆堿，由寧夏鹽池制藥廠提供，批號20070212;光子發射計算機斷層照相機(SPECT)旋轉型的y照相機，廣州醫學院腫瘤醫院；高锝[<9901>化]酸鈉注射液，南方醫院核醫學科提供。2實驗方法2.1樣品制備按實施例5工藝制備苦豆堿顆粒，按"放射性物品管理和使用辦法要求"，將高锝["mTc]酸鈉注射液用食鹽吸收。稱好每片顆粒重量，先將50%顆粒放入單沖壓片機，然后再加入一定量的含高锝["""Tc]酸鈉注射液食鹽，最后加入剩余顆粒，壓片，在片芯外壓0.1g瓜兒膠，即得。每片含"m"Tcl.5MBq，試驗前1小時制備。2.2志愿者狀況男性健康志愿者2名,經體檢無任何疾病，胃腸道功能正常，無煙酒嗜好。受試前一周未服用任何藥物。試驗前,志愿者被明確告知該試驗可能發生的不良反應并自愿簽署知情同意書。2.3測定方法志愿者禁食12h后口服含""^cl.5MBq苦豆堿水凝膠骨架片l片，200mL溫水送下。服藥后立即進行監測，仰臥于SPECT機探頭前并于不同時間拍攝照片、記錄藥片在胃腸道轉運過程、崩解部位和時間。志愿者在藥片胃排空后統一進低脂肪餐。3結果實驗結果表明，苦豆堿水凝膠骨架片在2名志愿者體內的崩解部位均為升結腸，藥片崩解時間為78h(圖2所示)。志愿者l在約4h時，藥片到達回盲部；在約5h時，藥片到達升結腸；在約7h時，藥片開始崩解,崩解部位為升結腸。志愿者2在約5h時,藥片到達回盲部；在約7h時,藥片到達升結腸；在約8h時，藥片開始崩解,崩解部位為升結腸。采用放射同位素示蹤技術表明苦豆堿水凝膠骨架片能夠達到結腸定位釋放，靶向明確。(五)苦豆堿水凝膠骨架片制備工藝穩定性考察按上述實施例2方案制備三批自制苦豆堿水凝膠骨架片(070301，070302，070303)，測定苦豆堿在含有4%大鼠結腸液中的釋放，溶出介質和方法與實驗(四)第2.2節描述的溶出介質和方法相同。從表14可以看出，三批苦豆堿水凝膠骨架片批間差異較小，工藝穩定性較好。表14Release(0/0)Time2468121618247030108.510.613.641.272.684.698.67030209.611.614.840.974.985.996.77030309.211.815.342.871.583.898.8(六)苦豆堿水凝膠骨架片穩定性考察參照中國藥典2005版藥物穩定性試驗原則進行，取本發明苦豆堿水凝膠骨架片(070304，按實施例1方法制備)樣品在溫度40r、相對濕度為RH75M的條件下放置六個月，于6個月后檢測藥片物理性狀和溶出度(按前述方法、溶出介質進行)。結果見表15、16。表15批號時間(月)片外觀片重差異硬度Kg脆碎度％苦豆堿mg/片0703040光滑有光澤，無裂片符合規定5.40.7833.26光滑有光澤，無裂片符合規定5.80.6732.8表16Release(%)Time246812161824070304-008.811.614.642.273.682.696.6070304-609.212.613.842.972.983.997.7結果表明，由加速穩定性試驗結果可見，片物理性狀、苦豆堿含量、溶出度放置6個月與0個月比較沒有顯著性差異，表明該制劑較穩定。結論通過上述試驗表明，苦豆堿微丸靶向性差，供干工藝不合理，易吸濕，給生產、包裝、儲存帶來了較大難度；苦豆堿水凝膠骨架片制備方法簡便，投料合理，體內、外釋放表明苦豆堿水凝膠骨架片靶向性好，工藝重現性高，產品，象定性大大提高。(八)苦豆堿水凝膠骨架片不同輔料篩選試驗1材料(1)以瓜爾膠為骨架材料制備水凝膠骨架片(即本發明制劑)配方為苦豆堿8g，瓜爾膠10g和糊精2g，共制成100片。(2)以羥丙基甲基纖維素為骨架材料制備水凝膠骨架片配方為苦豆堿8g，羥丙基甲基纖維素10g和糊精2g，共制成100片。2片芯的溶脹和溶蝕測定以900mLph6.8的磷酸鈉緩沖液為介質，轉速為150rmin"，溫度(37±0.5)'C，分別于30、60、90、120、180、240min作上述實驗取樣。將已稱重的,品(購)置于溶出溶出杯中，分別于相應時間點將樣品取出，用濾紙吸去多余水分后稱重(w,)，置60'C電熱恒溫箱中至恒重，移至干燥器中降至室溫后稱重2)。每一時間點均采用新的樣品。按下列公式計算%Weightgain(持水量)-xioo%Remaining(剩余量)=100-ESES(溶蝕量)=『0、x卿結果如圖3和4所示。就在ph6.8磷酸鹽緩沖介質中的溶脹情況而言，以瓜爾膠為骨架材料的水凝膠片和以羥丙基甲基纖維素為骨架材料的水凝膠片相比無明顯差異；但溶蝕剩余量方面，前者明顯較高，表明瓜爾膠能在磷酸鹽緩沖液中形成粘性強度高的凝膠層，而相同含量的羥丙基甲基纖維素不能克服其ra"r凝膠強度低。由此可知，以羥丙基甲基纖維素為骨架材料在胃腸道蠕動等機械運動下不能形成高強度的凝膠而使藥物釋放。圖1是苦豆堿不同制劑的吸收率隨相對濕度變化的曲線圖，其中+表示苦豆堿微丸包衣前的吸濕率，+表示苦豆堿微丸包衣后的吸濕率，+表示苦豆堿骨架片顆粒的吸濕率，+表示苦豆堿骨架片的吸濕率。圖2是不同制劑中苦豆堿的釋放度曲線圖，其中+表示苦豆堿微丸，+表示本發明制劑。圖3是不同骨架材料的苦豆堿水凝膠骨架片的溶脹情況曲線圖。圖4是不同骨架材料的苦豆堿水凝膠骨架片的溶蝕剩余量曲線圖。具體實施方式例1制劑配方苦豆堿(12.5%)2.5g瓜兒膠(60%)12g糊精(27.5%)5.5g總計100片方法取苦豆堿2.5g，用5%的可溶性淀粉溶液溶解。取瓜兒膠和糊精，過80目篩混勻，加入到上述可溶性淀粉溶液中制軟材，快速過22目篩，60'C烘干，得顆粒。加0.5%的硬脂酸鎂，壓片9mtn淺凹沖壓片芯(片重0.2g)，再用llmm沖淺凹沖壓瓜爾膠衣(每片包衣量為0.1g)。軟材粘性適中，易過篩成粒。顆粒淺黃色，色澤均勻，干燥后顆粒較好，粗細顆粒適中。壓片外觀色澤均勻，無裂片，包衣完整。例2制劑配方-苦豆堿(55%)llg瓜兒膠(40%)8g糊精(5%)9.5g總計100片方法取苦豆堿llg，用純化水溶解。取瓜兒膠和糊精，過80目篩，混勻，加入到上述苦豆堿水溶液中制軟材，快速過22目篩，6(TC烘干，得顆粒。加0.5%的硬脂酸鎂，壓片9mm淺凹沖壓片芯(片重0.2g)，再用llmm沖淺凹沖壓瓜爾膠衣(每片包衣量為0.08g)。軟材粘性較大，易成粒。顆粒淺黃色，色澤均勻，干燥后顆粒較好。壓片外觀色澤均勻，無裂片，包衣完整。例3制劑配方\苦豆堿(70%)14g瓜兒膠(18%)3.6g糊精(12%)2.4g總計100片工藝制備取苦豆堿18g，用80%乙醇溶解。取瓜兒膠和糊精，過80目篩，混勻，加到上述苦豆堿80%乙醇溶液為中制軟材，快速過22目篩，60'C烘干，加0.5%的硬脂酸鎂，壓片9tnm淺凹沖壓片芯(片重0.2g),再用Umm沖淺凹沖壓瓜爾膠衣0.2g(每片包衣量為0.2g)。軟材較粘，軟材較硬，過篩較難、成粒好。顆粒深黃色，色澤均勻，干燥后顆粒較好。壓片外觀色澤均勻，無裂片，包衣完整。例4制劑配方苦豆堿(60%)12g瓜兒膠(30%)6g糊精(10%)2g總計100片方法取苦豆堿12g，用10%乙醇溶解。取瓜兒膠和糊精，過80目篩，混勻，加入到上述含苦豆堿的10%乙醇溶液中制軟材，快速過22目篩，60'C烘干，得顆粒。加0.5%的硬脂酸鎂，壓片9mm淺凹沖壓片芯，每片片重0.2g，再用llmm沖淺凹沖壓按每個片芯包衣0.18g瓜爾膠的比例包衣。軟材粘性大，軟材較硬，成粒好。顆粒黃色，色澤均勻，干燥后顆粒較好。壓片外觀色澤均勻，無裂片，包衣完整。權利要求1、苦豆堿在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。2、一種苦豆堿的結腸靶向制劑，該制劑由片芯和包裹在片芯外的阻滯層構成，片芯和阻滯層的質量比為i:ii:0.4;其中，所述片芯由分別占片芯總質量1070%的苦豆堿、io80%的瓜爾膠和530%的糊精組成，所述阻滯層為瓜爾膠。3、權利要求2所述制劑的制備方法，該方法由以下步驟組成取瓜爾膠和糊精，過80目篩；取苦豆堿溶于適量溶劑，加入片芯配方量的瓜爾膠和糊精混勻制成軟材，制粒，壓片，最后按阻滯層配方量取瓜爾膠包衣；所述的溶劑為水、濃度為520%(w/v)的可溶性淀粉溶液或濃度為1080%(v/v)的乙醇溶液。全文摘要本發明涉及苦豆堿在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。本發明人發現苦豆堿具有治療潰瘍性結腸炎的作用，可用于制備治療潰瘍性結腸炎的藥物。為了使苦豆堿更好地發揮其治療潰瘍性結腸炎的作用，本發明還提供了一種苦豆堿的結腸靶向制劑，該制劑由片芯和包裹在片芯外的阻滯層構成，片芯和阻滯層的質量比為1∶1～1∶0.4；其中，所述片芯由分別占片芯總質量10～70％的苦豆堿、10～80％的瓜爾膠和5～30％的糊精組成，所述阻滯層為瓜爾膠。本發明所述的靶向制劑可在結腸部位特異性溶解并釋放出苦豆堿，使苦豆堿以較高濃度分散于整個結腸，有效提高苦豆堿治療潰瘍性結腸炎的效果。文檔編號A61K9/34GK101669950SQ20091019277公開日2010年3月17日申請日期2009年9月28日優先權日2009年9月28日發明者王曉娟,趙文昌,鄧虹珠申請人:南方醫科大學