專利名稱：：苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種具有抗腫瘤的活性化合物——苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物，及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。(二)
背景技術(shù)：
：惡性腫瘤是嚴重危害人類健康的常見病之一。據(jù)最新報道，全世界有4000多萬人患惡性腫瘤，其中每年新增患者900多萬、死亡700多萬，我國每年惡性腫瘤發(fā)病人數(shù)約160萬、死亡約130萬。目前惡性腫瘤發(fā)生與死亡還有日趨嚴重的趨勢，有些地區(qū)已經(jīng)成為人口死亡的首要原因。因此，開發(fā)新穎的抗腫瘤藥物具有重要的意義。苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物是一種含氟原子的化合物。由于氟原子半徑小、又具有最大的電負性，所形成的C-F鍵能要比C-H鍵能大得多，增加了含氟有機物的穩(wěn)定性；且由于氟原子的體積小，因而常認為是H原子的非經(jīng)典的電子等排體，易產(chǎn)生拮抗作用，即不干擾含氟藥物與相應細胞受體間的相互作用，能在分子水平代替正常代謝藥物，欺騙性地摻入生物大分子，導致致死合成。當藥物分子中引入氟原子時，其電效應和模擬效應不僅改變了分子內(nèi)部電子密度的分布，而且還能提高化合物的脂溶性和滲透性，在生物膜上的溶解性得到增強，促進其在生物體內(nèi)吸收與傳遞速度，使生理作用發(fā)生變化。所以，含氟藥物具有用量少、毒性低、藥效高、代謝能力強等特點。含氟藥物的研究開發(fā)，主要集中在含氟芳香、雜環(huán)化合物的研究開發(fā)上，如二氟尼柳(氟苯水楊酸)具有很好的抗炎活性。雖然二氟尼柳作為非甾體抗炎藥已經(jīng)應用于臨床中，但通過對二氟尼柳進行結(jié)構(gòu)修飾，制備具有抗腫瘤活性的含氟新藥，具有非常重大的意義，也必將引起越來越多的科學工作者的關(guān)注。發(fā)明人前期研究中，制備了結(jié)構(gòu)如式(I)所示的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物。式(I)中R,、R2各自獨立為H、C1C6的烷基或取代垸基、C3C6的環(huán)烷基、C6C10的芳基或取代芳基，所述取代烷基的取代基為苯基、鹵素、硝基或C1C3垸氧基，所述取代芳基的取代基為鹵素、硝基、C1C3烷氧基、C1C3的烷基；或者Rj、R2連接成環(huán)、與同R,、R2相連的N構(gòu)成C4C10的雜環(huán)基。式(I)所示的化合物已在中國專利公開號CN101318909A中公開，并公開了在制備抗炎藥物和鎮(zhèn)痛藥物中的應用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明公開了式(I)所示化合物的醫(yī)藥新用途，如式(1-1)式(1-12)所示之一的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(1-12)。本發(fā)明所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物優(yōu)選為式(1-1)式(1-11)所示之一的化合物，更優(yōu)選為式(1-2)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-5)、式(1-9)、式(1-10)或式(1-11)所示的化合物，最優(yōu)選為式(1-10)或式(1-11)所示的化合物。較為具體的，經(jīng)發(fā)明人實驗證實，所述的腫瘤為A549細胞株導致的肺癌時，式(1-10)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，式(1-2)所示的化合物具有較好的抗腫瘤活性，式(1-3)、或式(1-12)所示的化合物具有一定的抗腫瘤活性。所述的腫瘤為Ishikawa細胞導致的子宮內(nèi)膜癌時，式(1-10)或式(1-11)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤活性，式(1-3)、(1-4)、(1-5)或(1-9)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，式(1-1)、(1-6)、(1-7)或(1-8)具有較好的抗腫瘤活性，式(1-2)所示的化合物具有一定的抗腫瘤活性。本發(fā)明所涉及的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物的制備方法及性質(zhì)和特性參數(shù)，已在中國專利公開號CN101318909A和ChinChemLett,2008，19，1419-1422中所述。本發(fā)明所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物應用的有益效果主要體現(xiàn)在(1)、提供了一種新的有顯著抗腫瘤活性的抗腫瘤藥物，為新藥篩選提供了研究基礎(chǔ)；(2)、式(1-10)或式(1-11)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤作用，式(1-2)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-5)或式(1-9)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤作用，式(1-1)、(1-6)、(1-7)或(1-8)具有較好的抗腫瘤作用，式(I-12)所示的化合物具有一定的抗腫瘤作用。(3)所述的腫瘤為A549細胞株導致的肺癌時，式(1-10)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，式(1-2)所示的化合物具有較好的抗腫瘤活性。(4)所述的腫瘤為Ishikawa細胞導致的子宮內(nèi)膜癌時，式(1-10)或式(I-ll)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤活性，式(I-3)、(1-4)、(1-5)、(I-9)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，(1-1)、(1-6)、(I-7)或(I-8)所示的化合物具有較好的抗腫瘤活性。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步描述，但本發(fā)明的保護范圍并不僅限于此制備苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物按照中國專利公開號CN101318909A所述的制備方法制備式(1-1)式(1-12)所示的化合物1-1~1-12。實施例1~12:抗肺癌活性測試測試方法體外抗腫瘤活性測試方法A.原理細胞通過線粒體水解酶將噻唑蘭(MTT)分解為不溶于水的蘭紫色結(jié)晶并沉積在細胞中，結(jié)晶物能被二甲基亞砜溶解，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，間接反映細胞的增殖情況和數(shù)量變化。B.細胞A549,肺癌細胞株。C.實驗步驟(l)樣品的準備取化合物1-1~1-12，對于可溶樣品，每lmg用20jiLDMSO溶解，取2pL用1000pL培養(yǎng)液稀釋，使?jié)舛葹?00fig/mL，再用培養(yǎng)液連續(xù)稀釋至使用濃度。(2)細胞的培養(yǎng)培養(yǎng)基的配制每1000mL培養(yǎng)基中含80萬單位青霉素、1.0g鏈霉素、10%滅活小牛血清。細胞的培養(yǎng)將腫瘤細胞接種于培養(yǎng)基中，置37"C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，35d傳代。(3)測定樣品對腫瘤細胞生長的抑制作用將細胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培養(yǎng)基稀釋成lxl()S/mL，加到96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔100pL，置37。C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種24h后，傾去培養(yǎng)基，加入用培養(yǎng)基稀釋的樣品，每孔200pL，每個濃度加3孔，置37X:、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，72h后在細胞培養(yǎng)孔中加入5mg/mL的MTT，每孔10^L，置37。C孵育3h，加入DMSO，每孔150|iL，用振蕩器振蕩，使甲臢完全溶解，用酶標儀在490nm波長下比色。以同樣條件用不含樣品、含同樣濃度DMSO的培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞作為對照，計算樣品對腫瘤細胞生長的半數(shù)抑制濃度(IC50)。對比例1按照實施例112的體外抗腫瘤活性測試方法進行測試，所不同的是，使用的樣品是順鉑藥品。將制備的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物I-1I-12進行了抗八549活性測試，試驗結(jié)果如下表l:各化合物對A549的ICso(拜d/L)實施例化合物IC50jimol/L評價10<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>(l)樣品的準備取化合物1-11-12，對于可溶樣品，每lmg用20^LDMSO溶解，取2iiL用1000(iL培養(yǎng)液稀釋，使?jié)舛葹?00|ig/mL，再用培養(yǎng)液連續(xù)稀釋至使用濃度。(2)細胞的培養(yǎng)培養(yǎng)基的配制每1000mL培養(yǎng)基中含80萬單位青霉素、1.0g鏈霉素、10%滅活小牛血清。細胞的培養(yǎng)將腫瘤細胞接種于培養(yǎng)基中，置37°C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，35d傳代。(3)測定樣品對腫瘤細胞生長的抑制作用將細胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培養(yǎng)基稀釋成lxl06/mL，加到96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔100(iL，置37"C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種24h后，傾去培養(yǎng)基，加入用培養(yǎng)基稀釋的樣品，每孔200)iL，每個濃度加3孔，置37"C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，72h后在細胞培養(yǎng)孔中加入5mg/mL的MTT，每孔10piL，置37。C孵育3h，加入DMSO，每孔150)aL，用振蕩器振蕩，使甲臢完全溶解，用酶標儀在490nm波長下比色。以同樣條件用不含樣品、含同樣濃度DMSO的培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞作為對照，計算樣品對腫瘤細胞生長的半數(shù)抑制濃度(IC50)。對比例2按照實施例1324的體外抗腫瘤活性測試方法進行測試，所不同的是，使用的樣品是順鉑藥品?？鼓[瘤活性測試結(jié)果將制備的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物I-1I-12進行了抗Ishika窗活性測試，試驗結(jié)果如下表2:化合物對Ishikawa的IC5。(pmol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>按照抗腫瘤活性的評價標準，化合物I-io和I-ll具有非常顯著的抗Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細胞活性，化合物I-3、I-4、I-5和I-9具有顯著的抗Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細胞活性，化合物I-1、I-6、I-7和I-8具有較好的抗Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細胞活性，化合物I-2具有一定的抗Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細胞活性。權(quán)利要求1.如式(I-1)～式(I-12)所示之一的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用；2.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于，所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)式(1-11)所示之一的化合物。3.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于，所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-2)、式(1-3)、式(I隱4)、式(1-5)、式(1-9)、式(1-10)或式(1-11)所示的化合物。4.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于，所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-10)或式(1-11)所示的化合物。5.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-2)、式(1-3)、式(1-10)或式(1-12)所示的化合物，所述的腫瘤為A549細胞株導致的肺癌。6.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)式(1-11)所示之一的化合物，所述的腫瘤為Ishikawa細胞導致的子宮內(nèi)膜癌。7.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于式(1-10)所示的化合物在抗A549細胞株導致的肺癌藥物中的應用。8.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于，式(1-10)或式(1-11)所示的化合物在抗Ishikawa細胞導致的子宮內(nèi)膜癌藥物中的應用。全文摘要本發(fā)明公開了如式(I-1)～式(I-12)所示之一的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。本發(fā)明提供了一種新的有顯著抗腫瘤活性的抗腫瘤藥物，為新藥篩選提供了研究基礎(chǔ)；其中，式(I-10)或式(I-11)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤作用，式(I-2)、式(I-3)、式(I-4)、式(I-5)或式(I-9)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤作用，式(I-1)、(I-6)、(I-7)或(I-8)具有較好的抗腫瘤作用，式(I-12)所示的化合物具有一定的抗腫瘤作用。文檔編號A61P11/00GK101502523SQ20091009655公開日2009年8月12日申請日期2009年3月6日優(yōu)先權(quán)日2009年3月6日發(fā)明者蔣劍松,鐘光祥,陳路路申請人:浙江工業(yè)大學