專利名稱：：15種復(fù)合氨基酸液體制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種15種復(fù)合氨基酸液體制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：慢性肝病是一種慢性消耗性疾病，其又可引起患者營養(yǎng)代謝的紊亂，因此，營養(yǎng)不良在慢性肝病患者中十分常見。在所發(fā)生的營養(yǎng)不良中又以"蛋白質(zhì)-能量型營養(yǎng)不良"類型最為常見。由于營養(yǎng)不良在慢性肝病患者中十分常見，且又與肝功能不良、罹患率及死亡率密切相關(guān)。因此給予慢性肝病患者的營養(yǎng)治療就成為臨床必須，而專為肝病患者設(shè)計的氨基酸制劑能很好地糾正因蛋白質(zhì)攝入不當(dāng)而造成的各種代謝并發(fā)癥。向肝病患者提供氨基酸不能采用普通的平衡型氨基酸，必須按照肝病患者對氨基酸代謝的特點進(jìn)行設(shè)計。根據(jù)Fischer的假性神經(jīng)遞質(zhì)學(xué)說以及隨后發(fā)展出來的氨基酸平衡失調(diào)學(xué)說，富含支鏈氨基酸的溶液可以糾正患者體內(nèi)的氨基酸失衡狀況，更重要的是支鏈氨基酸可以更多的進(jìn)入腦中，從而減少芳香族氨基酸的進(jìn)入，起到預(yù)防和治療肝性腦病的作用。本發(fā)明的15種復(fù)合氨基酸注射劑的制備工藝中通常采用活性炭工藝去除藥液的熱原。但是由于活性炭帶有電荷，進(jìn)入液體后分散在注射用水中構(gòu)成膠體溶液，能透過濾棒及濾膜，從而使制劑污染了新的微粒雜質(zhì)，這種微粒不能在體內(nèi)代謝，故可能引發(fā)肉芽腫、肺水腫、靜脈炎、血栓、組織壞死、過敏、熱原、腫瘤樣反應(yīng)等多種反應(yīng)，存在嚴(yán)重影響輸液人群身體健康的潛在危害。所以設(shè)計完善的制備工藝對提高產(chǎn)品質(zhì)量和用藥安全性方面有著重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個目的是提供一種制備15種復(fù)合氨基酸液體制劑的方法。本發(fā)明所提供的制備15種復(fù)合氨基酸液體制劑的方法，包括如下步驟將15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑溶于注射用水中，混勻，得到溶液I，然后將溶液I進(jìn)行過濾，得到15種復(fù)合氨基酸液體制劑；所述15種復(fù)合氨基酸由L-精氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸、L-纈氨酸、L-賴氨酸醋酸鹽、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、甘氨酸、L-甲硫氨酸、L-組氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽和L-色氨酸組成。上述過程中，所述15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑的質(zhì)量份數(shù)可為L一脯氨酸6.4-9.6，L一絲氨酸4.0-6.0，L—丙氨酸6.16-9.24，L一精氨酸4.8_7.2，L—組氨酸1.92-2.88，L一色氨酸O.528-0.792，L一纈氨酸6.72-10.08，L一蘇氨酸3.6-5.4，L一亮氨酸8.8-13.2，L—甲硫氨酸0.8-1.2，L—異亮氨酸7.2-10.8，L—苯丙氨酸0.8-1.2，L一賴氨酸醋酸鹽6.88-10.32，L—半胱氨酸鹽酸鹽0-0.2，甘氨酸7.2-10.8，抗氧劑0.2-1.0。上述過程中，所述15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑的質(zhì)量份數(shù)具體可為L—脯氨酸7.2-8.8，L一絲氨酸4.5-5.5，L—丙氨酸6.93-8.47，L一精氨酸5.40-6.6，L一組氨酸2.16-2.64，L一色氨酸0.60-0.73，L—纈氨酸7.56-9.24，L一蘇氨酸4.05-4.95，L一亮氨酸9.9-12.1，L一甲硫氨酸0.9-1.1，L一異亮氨酸8.1-9.9，L一苯丙氨酸0.9-1.1，L—賴氨酸醋酸鹽7.74-9.46，L—半胱氨酸鹽酸鹽0.1-0.15，甘氨酸8.1-9.9，亞硫酸氫鈉0.45-0.6。上述過程中，所述15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑的質(zhì)量份數(shù)再具體可為L—脯氨酸7.2，L—絲氨酸4.5，L—丙氨酸6.93，L—精氨酸5.40，L一組氨酸2.16，L—色氨酸0.60，L—纈氨酸7.56，L一蘇氨酸4.05，L—亮氨酸9.9，L一甲硫氨酸0.9，L—異亮氨酸8.1，L—苯丙氨酸0.9，L—賴氨酸醋酸鹽7.74，L一半胱氨酸鹽酸鹽0.1，甘氨酸8.1，亞硫酸氫鈉0.45，或L—脯氨酸8.0，L一絲氨酸5.0，L一丙氨酸7.7，L一精氨酸6.0，L—組氨酸2.4，L一色氨酸0.66，L—纈氨酸8.4，L一蘇氨酸4.5，L一亮氨酸11.0，L一甲硫氨酸1.0，L—異亮氨酸9.0，L一苯丙氨酸1.0，L一賴氨酸醋酸鹽8.6，L—半胱氨酸鹽酸鹽0.1，甘氨酸9.0，亞硫酸氫鈉0.5，或L—脯氨酸8.8，L—絲氨酸5.5，L一丙氨酸8.47，L—精氨酸6.6，L—組氨酸2.64，L一色氨酸0.73，L—纈氨酸9.24，L—蘇氨酸4.95，L一亮氨酸12.1，L—甲硫氨酸1.1，L—異亮氨酸9.9，L一苯丙氨酸1.1，L一賴氨酸醋酸鹽9.46，L一半胱氨酸鹽酸鹽0.15，甘氨酸9.9，亞硫酸氫鈉0.6。上述過程中，所述將15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑溶于注射用水中的方法可為先將15種復(fù)合氨基酸溶于注射用水中，再向其中加入抗氧劑。上述過程中，所述將15種復(fù)合氨基酸溶于注射用水中的方法可為將第一組氨基酸溶于90-95。C的注射用水中，混勻，得到溶液l;將所述溶液l的溫度降至80-85°C，再向其中加入第二組氨基酸，混勻，得到溶液2;將所述溶液2的溫度降至60-65。C，再向其中加入第三組氨基酸，混勻，得到溶液3;將所述溶液3的溫度降至45-5(TC，再向其中加入第四組氨基酸，混勻，得到溶液4;此過程實際是將15種不同氨基酸分組、分溫度段進(jìn)行溶解的。所述第一組氨基酸由L-精氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸和L-纈氨酸組成；所述第二組氨基酸由L-賴氨酸醋酸鹽、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸組成；所述第三組氨基酸由L-甲硫氨酸、L-組氨酸和L-半胱氨酸鹽酸鹽組成；所述第四組氨基酸為L-色氨酸。上述過程所述方法中，在所述得到溶液I后、所述過濾前，包括先將所述溶液I的pH值調(diào)至5.5-6.5的步驟。所述溶液I的最適pH值范圍具體可為5.8-6.0。所述溶液I的pH值具體可以用磷酸和冰醋酸的混合溶液來調(diào)節(jié)。上述過程中，所述方法中，在所述過濾前，包括將所述溶液I的溫度降至大于等于4(TC小于等于45'C的步驟。所述降溫步驟可在調(diào)節(jié)溶液IpH值之前或之后進(jìn)行。上述過程中，所述過濾的方法可包括如下步驟將所述溶液I進(jìn)行0.22ym孔徑過濾，得到濾液a;再將濾液a進(jìn)行截留分子量為10000道爾頓的超濾，得到濾液b;將濾液b進(jìn)行0.22um孔徑過濾，得到濾液c;將濾液c進(jìn)行0.22nm孔徑過濾，得到高劑量鹽酸氨溴索液體制劑。上述過程中，先將溶液進(jìn)行降溫，然后進(jìn)行過濾，實際上是一個冷卻除雜精濾的過程。上述過程中，所述抗氧劑可為亞硫酸氫鈉或焦亞硫酸鈉。上述過程中，所述的所有步驟都是先用氮氣置換出工藝中可能引入的氧氣，然后在氮氣保護(hù)下進(jìn)行。所述氮氣含量為》99.99%，氮氣流量控制在0.lbar，并經(jīng)0.22um孔徑濾器過濾。上述過程中，所述方法中還可包括將所述15種復(fù)合氨基酸注射液進(jìn)行滅菌的步驟；所述滅菌的方法是在115X:-12rC的條件下，熱壓滅菌15-50分鐘。上述過程中，所述液體制劑具體可為注射劑。上述任一所述方法得到的15種復(fù)合氨基酸液體制劑也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明的15種復(fù)合氨基酸注射劑的制備方法中，所述15種氨基酸的稱量分裝均在潔凈百級層流保護(hù)下進(jìn)行，稱量分裝所用的塑料袋為藥用無菌袋，可降低分裝過程中引入細(xì)菌和微粒，分裝前后向無菌袋中通入氮氣置換出無菌袋中的氧氣，然后在氮氣保護(hù)下密封，使15種氨基酸原料在投料前處于無氧狀態(tài)，避免氨基酸原料在投料前被氧化分解。所述15種氨基酸的溶解水為注射用水，投料前需先將注射用水煮沸，去除水中殘留的氧，向注射用水中通入氮氣，置換出水中的殘留氧，然后向配制罐內(nèi)通入氮氣，置換出配制罐內(nèi)的氧氣，并始終保持配制罐內(nèi)充滿氮氣，避免氨基酸在氧的存在下分解變色。所述15種氨基酸是按照溶解度及熱穩(wěn)定性不同分組、分溫度段溶解，按照各種氨基酸的最適溶解溫度溶解各種氨基酸，該方法有利于每種氨基酸都能夠完全溶解，且在氨基酸的最適溫度溶解可以克服部分氨基酸在高溫容易氧化從而降解的缺陷；另外，還克服了成品低溫時易析出結(jié)晶的缺陷。采用磷酸與冰醋酸的混合溶液調(diào)節(jié)溶液的PH值能夠使氨基酸溶液更加穩(wěn)定，氨基酸溶液在滅菌前后的PH值變化很小，與單用冰醋酸調(diào)節(jié)PH值比較，能夠顯著穩(wěn)定藥液在滅菌前后的PH值，使氨基酸溶液能夠耐受高溫滅菌。將溶解后的溶液的pH值調(diào)節(jié)在5.8-6.0，能夠使氨基酸在水溶液中溶解后不易析出，使滅菌后的產(chǎn)品達(dá)到無色，且在其貯藏期內(nèi)藥液顏色不加深，從而提高制劑的穩(wěn)定性。上述溶液中加入抗氧劑，能夠防止氨基酸被氧化而降解，提高產(chǎn)品在貯藏期的穩(wěn)定性。將上述溶液，采用冷卻除雜精濾法，先將溶液的溫度調(diào)節(jié)在45。C以下，使氨基酸中的某些大分子物質(zhì)或雜質(zhì)通過溫度的降低而析出，使用0.22um濾器循環(huán)過濾，去除析出的大分子物質(zhì)、藥液中存在的細(xì)菌和顆粒以及不溶性雜質(zhì)，使藥液中的細(xì)菌的殘存量大大降低，提高了制劑的穩(wěn)定性。工藝中采用10000道爾頓分子量的超濾器超濾，去除了內(nèi)毒素和原料中可能存在的大分子物質(zhì)，提高了溶液的澄清度，進(jìn)一步降低了滅菌前藥液的微生物污染水平，提高了制劑的無菌保證水平，從而降低復(fù)合氨基酸注射液不良反應(yīng)的發(fā)生率，7提高了產(chǎn)品的安全性。采用這樣的配濾工藝，減少了雜質(zhì)的引入，防止細(xì)菌的產(chǎn)生，提高了氨基酸在溶液狀態(tài)下的穩(wěn)定性。上述過濾后的藥液采用二次充氮法封裝入輸液瓶或袋中，具體操作可為先向輸液瓶或袋中充入氮氣，置換出容器內(nèi)的氧氣，再灌入藥液，然后再向容器中通入氮氣，置換出容器內(nèi)剩余部分的氧氣，最后封口。上述步驟能夠保證容器內(nèi)沒有氧氣存在，防止氨基酸溶液因氧化分解而變色，提高了制劑的穩(wěn)定性。最后的滅菌步驟中，采用的工藝條件是115。C-12rC，熱壓滅菌15-50分鐘，使產(chǎn)品的無菌保證水平達(dá)到FO值為1030，提高產(chǎn)品的無菌保證水平，增加產(chǎn)品的安全性。本發(fā)明制備方法中沒有引入活性炭，避免了使用活性炭后造成將活性炭微粒弓I入制劑中從而對人體產(chǎn)生危害，同時保證了制劑中有效成分的穩(wěn)定性、成品的安全性。本發(fā)明的15種復(fù)合氨基酸注射液的制備方法，從氨基酸原料的稱量到溶液的封裝滅菌，所有的生產(chǎn)步驟都是用高純氮氣置換出氧氣，然后在氮氣保護(hù)下密封，使氨基酸避免氨基酸與氧氣發(fā)生反應(yīng)而分解變色；用磷酸與冰醋酸的混合溶液調(diào)節(jié)PH值在氨基酸的最適PH值5.8-6.0，能夠使氨基酸溶液更加穩(wěn)定，與單用冰醋酸調(diào)節(jié)PH值比較，能夠顯著穩(wěn)定藥液在滅菌前后的PH值，且使氨基酸溶液能夠耐受高溫滅菌；采用冷卻除雜精濾法，能夠使氨基酸中可能存在的大分子物質(zhì)和雜質(zhì)在低溫時析出從而通過精濾去除，增加氨基酸溶液的穩(wěn)定性和安全性；溶液中加入抗氧劑，能夠防止氨基酸被氧化而降解，提高產(chǎn)品在貯藏期的穩(wěn)定性；工藝中采用10000道爾頓分子量的超濾器超濾，去除了內(nèi)毒素和大分子物質(zhì)，提高溶液的澄清度，降低滅菌前藥液的微生物污染水平；采用115°C-12rC、熱壓滅菌15-50分鐘，使產(chǎn)品的無菌保證水平達(dá)到FO值為1030，提高產(chǎn)品的無菌保證水平，增加產(chǎn)品的安全性。實驗證明，本發(fā)明方法得到的制劑，其微粒及細(xì)菌的含量低，貯藏期內(nèi)產(chǎn)品透光率和溶液的顏色無變化，制劑透光率高、穩(wěn)定性好；而且本發(fā)明方法生產(chǎn)的各批樣品質(zhì)量均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，批間穩(wěn)定，質(zhì)量可靠；本發(fā)明方法工藝簡單，便于生產(chǎn)操作和控制，適合大規(guī)模生產(chǎn)。具體實施例方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。下述實施例中所使用的15種氨基酸均購自天津天安藥業(yè)股份有限公司。加速試驗是在加速條件下進(jìn)行，其目的是通過加速藥物的化學(xué)或物理變化，探討藥物的穩(wěn)定性，為制劑設(shè)計、包裝、運輸、貯存提供必要的資料。供試品有三批，在溫度4(TC土2。C、相對濕度75%±5%的條件下放置6個月，分別于1、2、3、6個月取樣進(jìn)行檢測。長期試驗是在接近藥物的實際貯存條件下進(jìn)行，其目的是為制定藥物的有效期提供依據(jù)。供試品三批，在溫度《2(TC、相對濕度60%±10%的條件下放置24個月，分別于0、3、6、9、12、18、24個月取樣進(jìn)行檢測。實施例l:15種復(fù)合氨基酸注射劑的制備(1000ml)一、15種復(fù)合氨基酸注射劑的制備按照下表1稱量各種氨基酸原料及輔料，分裝前后向藥用無菌袋內(nèi)充入氮氣置換出袋內(nèi)氧氣，并在氮氣保護(hù)下封口。表l、注射劑中各氨基酸的用量<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>在無菌操作室中，用注射用水淋洗所有生產(chǎn)設(shè)備。將各種氨基酸按照上述表中的量進(jìn)行配制。將注射用水煮沸5分鐘，向注射用水中通入氮氣5分鐘，置換出水中的氧，再向罐內(nèi)通入氮氣置換出罐內(nèi)的氧，并使配制過程始終在氮氣保護(hù)下進(jìn)行，將注射用水溫度降至95°C，加入第一組氨基酸(L-精氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸、L-纈氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液1;將溶液1邊攪拌邊降溫至85°C，加入第二組氨基酸(L-賴氨酸醋酸鹽、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、甘氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液2;將溶液2邊攪拌邊降溫至65X:，加入第三組氨基酸(L-甲硫氨酸、L-組氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽)，攪拌至完全溶解，得到溶液3;將得到溶液3邊攪拌邊降溫至50'C，加入第四組氨基酸(L-色氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液4;再向溶液4中加入亞硫酸氫鈉，得到溶液I;向溶液I中加入磷酸與冰醋酸的混合液，調(diào)節(jié)PH至6.0;將上述溶液I溫度降低至45'C;然后將溶液I用0.22um濾器進(jìn)行過濾，得到濾液a;將濾液a用截留分子量為10000道爾頓的超濾器超濾，得到濾液b;用注射用水將濾液b補(bǔ)加至1000ml，再用0.22ym濾器進(jìn)行過濾，得到濾液c;再將濾液c用0.22um濾器過濾，得到濾液d。對濾液d進(jìn)行如下指標(biāo)檢驗，色氨酸含量、藥液PH值、色澤、可見異物、細(xì)菌內(nèi)毒素；檢驗合格，先向輸液瓶或袋中通入氮氣置換出瓶或袋內(nèi)的氧氣，然后將濾液d封裝于輸液瓶或袋中，再向容器內(nèi)充入氮氣置換出氧氣，在氮氣的保護(hù)下封口，再經(jīng)115。C熱壓滅菌40分鐘，即得到15種復(fù)合氨基酸注射劑。二、15種復(fù)合氨基酸注射劑的檢測取按照步驟一所述方法制備的、不同批次的、保存不同時間的15種復(fù)合氨基酸注射劑進(jìn)行如下檢測。注射劑中色氨酸及其它各氨基酸的標(biāo)示量如表1所示。1、含量測定對注射劑中色氨酸的含量檢測，均按照如下方法進(jìn)行。精密量取注射劑，向其中加入0.lmol/L氫氧化鈉溶液稀釋制成每lml中約含15yg色氨基酸的溶液，混勻，照分光光度法在280nm的波長處測定吸收度(A)，L-色氨酸d孔美02的吸收系數(shù)(E^?！窞?69(質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn))，按下式計算。含色氨酸應(yīng)為標(biāo)示量的80.0%—120.0%。公式Em(供試品)供試品中色氨酸含量%=-xiooE、(標(biāo)準(zhǔn))AX稀釋倍數(shù)E:(供試品^-a式中A:供試品溶液測得的吸收度C:供試品溶液中色氨酸的百分比濃度(g/100ml)(即表l中相應(yīng)的色氨酸標(biāo)L:吸收池的光路長度(lcm)(2)供試品中各種氨基酸含量的測量按照下述步驟進(jìn)行檢測色譜條件色譜柱為氨基酸分析ODS柱，柱溫25'C，采用二元梯度分析，流速1.0ml/min，檢測波長360nm。梯度程序為:_時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)00.86112015153035558585706545<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>流動相A:乙腈-水(1:1)，使用同一容器量取，混合，用0.22um孔徑濾膜過濾，超聲脫氣10-15分鐘。流動相B:稱取流動相B的固體成分(購自大連依利特分析儀器有限公司)4.lg，加水約950ml，用冰醋酸調(diào)PH值至6.4-6.8，加N，N-二甲基甲酰胺10ml，加水至1000ml，搖勻后靜置片刻，用0.22pm孔徑濾膜過濾，超聲脫氣10-15分鐘。取實驗一中制備的液體制劑，用衍生緩沖液稀釋100倍(衍生緩沖液購自大連依利特分析儀器有限公司)，作為供試液；用高效液相色譜儀進(jìn)行分離測定；另取相應(yīng)的氨基酸對照品(購自大連依利特分析儀器有限公司)，制成相應(yīng)濃度的對照品溶液，同法測定。分別取上述供試液和對照品各10ul，注入液相色譜儀，按外標(biāo)法以峰面積計算各種氨基酸的含量。除L-鹽酸半胱氨酸外，其余各種氨基酸均應(yīng)為標(biāo)示量的80.0%—120.0%。對照品濃度為<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>計算公式如下:供試品中各種氨基酸的含量％=-X100%對照品峰面積平均值X標(biāo)示量檢測結(jié)果如表l-l、表l-2、表l-3所示，結(jié)果表明，在加速實驗和長期試驗中，色氨酸的含量符合標(biāo)準(zhǔn)，其它各種氨基酸含量均符合要求。2、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑中的透光度"透光度"的定義透光度是指給定波長的入射光未被反射和吸收，并穿過玻璃的那部分光。檢測方法取注射劑，用紫外分光光度計進(jìn)行檢測，在430nm的波長處測定透光率。按照標(biāo)準(zhǔn)，其透光率(即透光度)應(yīng)不低于97.0%。實驗設(shè)2次重復(fù)，結(jié)果取平均數(shù)。檢測結(jié)果如表l-l和表l-2所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"透光率"均大于99%，符合大于97.0%的要求。3、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"不溶性微粒"的含量"不溶性微粒"是指注射劑中的顆粒狀雜質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)要求為每lml15種復(fù)合氨基酸注射劑中含粒徑大于10um小于25um的微粒不得超過25粒，每lml15種復(fù)合氨基酸注射劑中含粒徑大于25ym小于50wm的微粒不得過3粒。檢測方法采用光阻法測定。取5ml注射劑作為供試液，用水將取樣杯外壁洗凈，將5ml供試液置于取樣杯中，超聲處理(80120W)30秒脫氣或靜置適當(dāng)時間脫氣后，將取樣杯置于取樣器上，開啟攪拌或手動緩緩轉(zhuǎn)動，使溶液均勻(避免氣泡產(chǎn)生)，然后進(jìn)行檢測。實驗設(shè)3次重復(fù)，第一次數(shù)據(jù)不計，取后續(xù)測定結(jié)果的平均值，計算每個取樣杯所含的微粒數(shù)；檢測結(jié)果如表卜l和表l-2所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"不溶性微粒"的含量符合標(biāo)準(zhǔn)要求。4、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"可見異物"的含量"可見異物"是指注射劑中，目視可以觀測到的、粒徑大于5(Him的不溶性物質(zhì)。檢測方法采用燈檢法檢查，取裝有本發(fā)明注射劑的瓶，擦凈外壁，輕輕旋轉(zhuǎn)和翻轉(zhuǎn)瓶，使瓶中的藥液中存在的可見異物懸浮(注意不使藥液產(chǎn)生氣泡)，將瓶置于燈檢儀黑色背景下，在100015001x光照強(qiáng)度下輕輕翻轉(zhuǎn)，目檢視。實驗設(shè)3次重復(fù)，檢測結(jié)果如表1-l和表l-2所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中未檢出可見異物。綜上分析各指標(biāo)表明，本發(fā)明得到的15種復(fù)合氨基酸注射劑中微粒、細(xì)菌及大分子物質(zhì)含量均非常低。表l-l15種復(fù)合氨基酸注射劑加速試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表1-215種復(fù)合氨基酸注射劑長期試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表1-315種復(fù)合氨基酸注射劑長期試驗氨基酸含量檢測結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>L一甲硫氨酸(C^HuNOzS)0.9克0.9L一異亮氨酸(CeH13N02)8.1克8.1L一苯丙氨酸(GHuNOJ0.9克0.9L—賴氨酸醋酸鹽(C6H14N202*C2H402)7.74克7.74L一半胱氨酸鹽酸鹽(C3H7N02S'HCl)0.1克0.1甘氨酸(GH具)8.1克8.1亞硫酸氫鈉0.45克0.45在無菌操作室中，用注射用水淋洗所有生產(chǎn)設(shè)備。將注射用水煮沸5分鐘，向注射用水中通入氮氣5分鐘，置換出水中的氧，再向罐內(nèi)通入氮氣置換出罐內(nèi)的氧，并使配制過程始終在氮氣保護(hù)下進(jìn)行，將注射用水溫度降至95°C，加入第一組氨基酸(L-精氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸、L-纈氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液1;將溶液1邊攪拌邊降溫至83°C，加入第二組氨基酸(L-賴氮酸醋酸鹽、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、甘氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液2;將溶液2邊攪拌邊降溫至63r，加入第三組氨基酸(L-甲硫氨酸、L-組氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽)，攪拌至完全溶解，得到溶液3;將溶液3邊攪拌邊降溫至48'C，加入第四組氨基酸(L-色氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液4;向溶液4中加入亞硫酸氫鈉，混勻得到溶液I;向溶液I中加入磷酸與冰醋酸的混合液，調(diào)節(jié)PH至5.8;將上述溶液I溫度降低至43"C;然后將溶液I用0.22um濾器進(jìn)行過濾，得到濾液a;將濾液a用截留分子量為10000道爾頓的超濾器超濾，得到濾液b;用注射用水將濾液b補(bǔ)足至1000ml，再用0.22ym濾器進(jìn)行過濾，得到濾液c;再將濾液c用0.22um濾器過濾，得到濾液d。對濾液d進(jìn)行如下指標(biāo)檢驗，色氨酸含量、藥液PH值、色澤、可見異物、細(xì)菌內(nèi)毒素；檢驗合格，先向輸液瓶或袋中通入氮氣置換出瓶或袋內(nèi)的氧氣，然后將濾液d封裝于輸液瓶或袋中，再向容器內(nèi)充入氮氣置換出氧氣，在氮氣的保護(hù)下封口，產(chǎn)品經(jīng)12rc熱壓滅菌20分鐘，即得到15種復(fù)合氨基酸注射劑。二、15種復(fù)合氨基酸注射劑的檢測取按照步驟一所述方法制備的、不同批次的、保存不同時間的15種復(fù)合氨基酸注射17劑進(jìn)行如下檢測。注射劑中色氨酸及其它各氨基酸的標(biāo)示量如表2所示。1、含量測定(1)色氨酸含量方法與實施例l中所述一致。實驗設(shè)2次重復(fù)，結(jié)果取平均數(shù)。結(jié)果如表2-l、2-2、2-3所示。(2)氨基酸含量方法與實施例1中所述一致。實驗設(shè)2次重復(fù)，結(jié)果取平均數(shù)。結(jié)果如表2-1、2-2、2-3所示，表明15種復(fù)合氨基酸注射劑的色氨酸含量及其它各種氨基酸含量在加速實驗和長期實驗中均未發(fā)生明顯變化，符合要求，說明本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑穩(wěn)定。2、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑的透光度方法與實施例l中所述一致。實驗設(shè)2次重復(fù)，結(jié)果取平均數(shù)。檢測結(jié)果如表2-l、2-2、2-3所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"透光率"均大于99%，符合要求。3、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"不溶性微粒"的含量方法與實施例l中所述一致。實驗設(shè)3次重復(fù)，第一次數(shù)據(jù)不計，取后續(xù)測定結(jié)果的平均值，計算每個取樣杯所含的微粒數(shù)；檢測結(jié)果如表2-l、2-2、2-3所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"不溶性微粒"含量少，符合要求。4、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"可見異物"的含量方法與實施例l中所述一致。實驗設(shè)3次重復(fù)，檢測結(jié)果如表2-1、2-2、2-3所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中未檢出可見異物。綜上分析各指標(biāo)表明，本發(fā)明得到的15種復(fù)合氨基酸注射劑中微粒、細(xì)菌及大分子物質(zhì)含量均非常低。表2-l15種復(fù)合氨基酸注射劑加速試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>實施例3:15種復(fù)合氨基酸注射劑的制備(1000ml)一、15種復(fù)合氨基酸注射劑的制備按照下表稱量各種氨基酸原料及輔料，分裝前后向藥用無菌袋內(nèi)充入氮氣置換出袋內(nèi)氧氣，并在氮氣保護(hù)下封口。表3、注射劑中各氨基酸的用量<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>在無菌操作室中，用注射用水淋洗所有生產(chǎn)設(shè)備。將注射用水煮沸5分鐘，向注射用水中通入氮氣5分鐘，置換出水中的氧，再向罐內(nèi)通入氮氣置換出罐內(nèi)的氧，并使配制過程始終在氮氣保護(hù)下進(jìn)行，將注射用水溫度降至95"C，加入第一組氨基酸(L-精氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸、L-纈氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液l;將溶液1邊攪拌邊降溫至8(TC，加入第二組氨基酸(L-賴氨酸醋酸鹽、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、甘氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液2;將溶液2邊攪拌邊降溫至6(TC，加入第三組氨基酸(L-甲硫氨酸、L-組氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽)，攪拌至完全溶解，得到溶液3;將溶液3邊攪拌邊降溫至45'C，加入第四組氨基酸(L-色氨酸)，攪拌至完全溶解，得到溶液4;向溶液4中加入亞硫酸氫鈉，混勻，得到溶液I;向溶液I中加入磷酸與冰醋酸的混合液，調(diào)節(jié)PH至5.9;將上述溶液I溫度降低至4crc;然后將溶液I用0.22um濾器進(jìn)行過濾，得到濾液a;將濾液a用截留分子量為10000道爾頓的超濾器超濾，得到濾液b;用注射用水將濾液b補(bǔ)足至1000ml，再用0.22um濾器進(jìn)行過濾，得到濾液c;再將濾液c用0.22um濾器過濾，得到濾液d。對濾液d進(jìn)行如下指標(biāo)檢驗，色氨酸含量、藥液PH值、色澤、可見異物、細(xì)菌內(nèi)毒素；檢驗合格，先向輸液瓶或袋中通入氮氣置換出瓶或袋內(nèi)的氧氣，然后將濾液d封裝于輸液瓶或袋中，再向容器內(nèi)充入氮氣置換出氧氣，在氮氣的保護(hù)下封口，再經(jīng)115'C熱壓滅菌50分鐘，即得到15種復(fù)合氨基酸注射劑。二、15種復(fù)合氨基酸注射劑的檢測取按照步驟一所述方法制備的、不同批次的、保存不同時間的15種復(fù)合氨基酸注射劑進(jìn)行如下檢測。注射劑中色氨酸及其它各氨基酸的標(biāo)示量如表3所示。1、含量測定(1)色氨酸含量方法與實施例1中所述一致。實驗設(shè)2次重復(fù)，結(jié)果取平均數(shù)。結(jié)果如表3-l、3-2、3-3所示。(2)氨基酸含量方法與實施例l中所述一致。實驗設(shè)2次重復(fù)，結(jié)果取平均數(shù)。結(jié)果如表3-l、3-2、3-3所示，表明15種復(fù)合氨基酸注射劑的色氨酸含量及其它各種氨基酸含量在長期實驗和加速實驗中均未發(fā)生明顯變化，符合要求，說明本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑穩(wěn)定。2、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑中的透光度方法與實施例l中所述一致。實驗設(shè)2次重復(fù)，結(jié)果取平均數(shù)。檢測結(jié)果如表3-1、3-2、3-3所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"透光率"均大于99%，符合要求。3、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"不溶性微粒"的含量方法與實施例1中所述一致。實驗設(shè)3次重復(fù)，第一次數(shù)據(jù)不計，取后續(xù)測定結(jié)果的平均值，計算每個取樣杯所含的微粒數(shù)；檢測結(jié)果如表3-l、3-2、3-3所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"不溶性微粒"含量少，符合要求。4、檢測15種復(fù)合氨基酸注射劑中的"可見異物"的含量方法與實施例l中所述一致。實驗設(shè)3次重復(fù)，檢測結(jié)果如表3-l、3-2、3-3所示。結(jié)果表明，本發(fā)明制得的15種復(fù)合氨基酸注射劑中未檢出可見異物。綜上分析各指標(biāo)表明，本發(fā)明得到的15種復(fù)合氨基酸注射劑中微粒、細(xì)菌及大分子物質(zhì)含量均非常低。表3-115種復(fù)合氨基酸注射劑加速試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>權(quán)利要求1、一種制備15種復(fù)合氨基酸液體制劑的方法，包括如下步驟將15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑溶于注射用水中，混勻，得到溶液I，然后將溶液I進(jìn)行過濾，得到15種復(fù)合氨基酸液體制劑；所述15種復(fù)合氨基酸由L-精氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸、L-纈氨酸、L-賴氨酸醋酸鹽、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、甘氨酸、L-甲硫氨酸、L-組氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽和L-色氨酸組成。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑的質(zhì)量份數(shù)為L—脯氨酸6.4-9.6，L一絲氨酸4.0-6.0，L—丙氨酸6.16-9.24，L一精氨酸4.8-7.2，L一組氨酸1.92-2.88，L一色氨酸0.528-0.792，L—纈氨酸6.72-10.08，L—蘇氨酸3.6-5.4，L一亮氨酸8.8-13.2，L一甲硫氨酸0.8-1.2，L—異亮氨酸7.2-10.8，L一苯丙氨酸0.8-1.2，L—賴氨酸醋酸鹽6.88-10.32，L—半胱氨酸鹽酸鹽0-0.2，甘氨酸7.2-10.8，抗氧劑0.2-1.0。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述將15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑溶于注射用水中的方法為先將15種復(fù)合氨基酸溶于注射用水中，再向其中加入抗氧劑。4、根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于所述將15種復(fù)合氨基酸溶于注射用水中的方法為將第一組氨基酸溶于90-95。C的注射用水中，混勻，得到溶液l;將所述溶液l的溫度降至80-85"C，再向其中加入第二組氨基酸，混勻，得到溶液2;將所述溶液2的溫度降至60-65'C，再向其中加入第三組氨基酸，混勻，得到溶液3;將所述溶液3的溫度降至45-50°C，再向其中加入第四組氨基酸，混勻，得到溶液4;所述第一組氨基酸由L-精氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸和L-纈氨酸組成；所述第二組氨基酸由L-賴氨酸醋酸鹽、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸組成；所述第三組氨基酸由L-甲硫氨酸、L-組氨酸和L-半胱氨酸鹽酸鹽組成；所述第四組氨基酸為L-色氨酸。5、根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于所述方法中，在所述得到溶液I后、所述過濾前，包括先將所述溶液I的pH值調(diào)至5.5-6.5的步驟；所述溶液I的pH值是用磷酸和冰醋酸的混合溶液來調(diào)節(jié)的。6、根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于所述方法中，在所述過濾前，包括將所述溶液I的溫度降至大于等于4(TC小于等于45r的步驟。7、根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于所述過濾的方法包括如下步驟將所述溶液I進(jìn)行0.22um孔徑過濾，得到濾液a;再將濾液a進(jìn)行截留分子量為10000道爾頓的超濾，得到濾液b;將濾液b進(jìn)行0.22ym孔徑過濾，得到濾液c;將濾液c進(jìn)行0.22nm孔徑過濾，得到15種復(fù)合氨基酸液體制劑。8、根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于所述抗氧劑為亞硫酸氫鈉或焦亞硫酸鈉。9、根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于所述方法中均是先用氮氣置換出引入的氧氣，然后在通入氮氣的條件下進(jìn)行。10、由權(quán)利要求1-9中任一所述方法得到的15種復(fù)合氨基酸液體制劑。全文摘要本發(fā)明公開了一種15種復(fù)合氨基酸液體制劑及其制備方法。該方法包括如下步驟將15種復(fù)合氨基酸和抗氧劑溶于注射用水中，混勻，得到溶液I，然后將溶液I進(jìn)行過濾，得到15種復(fù)合氨基酸液體制劑。本發(fā)明的15種復(fù)合氨基酸注射液的制備方法，采用分組、分溫度段溶解及采用高純氮氣置換氧氣等制備方法，克服了現(xiàn)有制劑中成品溶液顏色及透光率在貯藏期內(nèi)變化較大且不良反應(yīng)因素多的缺點。本發(fā)明方法工藝簡單，便于生產(chǎn)操作和控制，適合大規(guī)模生產(chǎn)。文檔編號A61K31/4164GK101627993SQ20091009024公開日2010年1月20日申請日期2009年8月3日優(yōu)先權(quán)日2009年8月3日發(fā)明者輝侯,劉偉強(qiáng),蘆莉娜申請人:上海華源藥業(yè)(寧夏)沙賽制藥有限公司